在催化系統(tǒng)中使用親核體/親電體處理生物假體組織的方法
【專利說明】在催化系統(tǒng)中使用親核體/親電體處理生物假體組織的方 法
[0001] 相關申請的交叉引用
[0002] 該申請根據35U.S.C. § 119(e)要求2012年11月8日提交的美國臨時專利申請 序列號61/723,958的優(yōu)先權權益，其全部內容通過引用被并入，如同在本文完全陳述。 發(fā)明領域
[0003] 本發(fā)明涉及處理用于植入患者的生物假體組織的方法，并且更具體地，涉及在催 化系統(tǒng)中使用親核體和/或親電體加帽和/或交聯(lián)生物假體組織的方法。
[0004] 背景
[0005] 在生物假體植入物中使用非自體組織提出重大的挑戰(zhàn)。挑戰(zhàn)之中的主要部分是避 免宿主免疫性排斥生物假體植入物和組織的鈣化，這些導致組織不期望的硬化和退化。對 于生物假體心臟瓣膜，免疫性排斥和鈣化是特別存在問題的，因為在植入之后瓣膜小葉的 鈣化將不利地影響其保持血液單向流動和避免血液不期望的泄漏和回流的能力。
[0006] 戊二醛一直以來是用于固定和消毒準備用于生物假體植入物的組織的選擇的試 劑。然而，使用戊二醛固定生物假體組織具有很多顯著的缺點。因為戊二醛在溶液中趨向 于聚合，所以具有與固定的組織相關聯(lián)的殘余醛基通常是戊二醛-固定的組織的特點。
[0007] 此外，戊二醛與組織中的游離胺反應生成不穩(wěn)定的席夫堿。戊二醛-固定的組織 中殘余醛和席夫堿兩者都代表潛在的鈣結合位點，其可導致在活體內的鈣化。而且，因為 戊二醛是細胞毒性的，所以它抑制植入的和戊二醛處理的生物假體組織的期望細胞內生長 (in-growth)和結合。
[0008] 因此，需要的是可以用于代替戊二醛固定或與戊二醛固定結合以減輕植入的生物 假體組織與宿主之間的一些不期望的相互作用的方案。
[0009] 簡要概述
[0010] 本文描述的是改變生物組織上代表實際存在的和潛在的鈣結合位點的官能團的 方法，還有交聯(lián)生物假體組織的方法。這兩種方法都可以與已知的固定技術--諸如戊二 醛固定一一結合使用，或可用于替代已知的固定技術。
[0011] 在一個實施方式中，提供處理生物假體組織的方法。該方法包括在存在催化系統(tǒng) 的情況下使生物假體組織與親核體或親電體中的一種接觸。催化系統(tǒng)包括基于氟化物的 鹽、基于銫的鹽、基于鉀的鹽、基于銣的鹽和基于碳酸鹽的鹽中的至少一種或組合。
[0012] 根據第一方面，執(zhí)行與親核體的接觸。親核體包括選自胺、羥基和巰基的一種或多 種官能團。
[0013] 根據第二方面，親核體為2-巰基乙醇、乙醇胺或其組合。
[0014] 根據第三方面，親核體包括多胺、多元醇和多元硫醇中的一種或組合。
[0015] 根據第四方面，多胺包括選自胱胺、乙二胺、1，3-二氨基丙烷、腐胺、尸胺和六亞甲 基二胺中的一種或多種。
[0016] 根據第五方面，多元醇包括選自乙二醇、1，3-丙二醇、1，4- 丁二醇、1，5-戊二醇、 和辛烷-1，8-二醇的一種或多種。
[0017] 根據第六方面，執(zhí)行與親電體的接觸。親電體包括一種或多種羰基官能團。
[0018] 根據第七方面，親電體包括多元醛和多元羧酸中的一種或兩種。多元醛選自：戊二 醛、乙二醛、丙二醛和丁二醛。多元羧酸選自：乙二酸、丙二酸、丁二酸、戊二酸、己二酸、庚二 酸、辛二酸、壬二酸、癸二酸、丙烯三甲酸、丙烷-1，2, 3-三羧酸和5-氧代戊酸。
[0019] 根據第八方面，催化系統(tǒng)進一步包括至少一種吡啶鹽。
[0020] 根據第九方面，吡啶鹽包括選自對-甲苯磺酸2-氟-1-甲基吡啶镥（FMPTS)、 對-甲苯磺酸2-氟-1-乙基吡啶鏞（FEPTS)、對-甲苯磺酸2-氯-1-甲基吡啶鏞（CEPTS)、 和碘化2-氯-1-甲基吡啶镎（CMPI)中的一種或多種。
[0021] 根據第十方面，催化系統(tǒng)包括FMPTS和CsF。
[0022] 根據第^^一方面，催化系統(tǒng)包括基于氟化物的鹽和基于碳酸鹽的鹽中的一種或兩 種。
[0023] 根據第十二方面，基于氟化物的鹽為CsF、RbF和KF中的一種或組合。
[0024] 根據第十三方面，基于銫的鹽為CsF和Cs2CO3中的一種或組合。
[0025] 根據第十四方面，基于鉀的鹽為KF和K2CO3中的一種或組合。
[0026] 根據第十五方面，基于銣的鹽為RbF和Rb2CO3中的一種或組合。
[0027] 根據第十六方面，在溶劑系統(tǒng)中執(zhí)行接觸。溶劑系統(tǒng)包括選自醇、腈、酮、酯、酰胺、 亞砜、醚、環(huán)醚、內酯、和內酰胺中的一種或多種。
[0028] 根據第十七方面，溶劑系統(tǒng)包括選自乙腈、乙酸丁酯、乙酸乙酯、N，N-二甲基甲酰 胺（DMF)、二甲基亞砜（DMSO)、1，4-二躔烷、甘油、3-甲基-1- 丁醇、1-甲基-2-吡咯烷酮、 吡啶、四氫呋喃（THF)、和二甘醇二甲醚中的一種或多種。
[0029] 根據第十八方面，在包括甘油和乙醇的溶劑系統(tǒng)中執(zhí)行接觸。
[0030] 根據第十九方面，在這樣的溶劑系統(tǒng)中執(zhí)行接觸，該溶劑系統(tǒng)包括選自水、鹽水、 磷酸鹽緩沖鹽水（PBS)、具有1-13的pH的緩沖劑、和有機溶劑與水或具有1-13的pH的緩 沖劑的混合物的一種或多種。
[0031] 根據第二十方面，在存在溶劑系統(tǒng)的情況下執(zhí)行與親核體的接觸，其中親核體為 胱胺，其中催化系統(tǒng)包括CsF和FMPTS，并且其中溶劑系統(tǒng)包括DMSO或甘油和乙醇。
[0032] 根據第二^^一方面，在存在溶劑系統(tǒng)的情況下執(zhí)行與親核體的接觸，其中親核體 為胱胺，其中催化系統(tǒng)包括CsF和FMPTS，并且其中溶劑系統(tǒng)包括緩沖水溶液。
[0033] 從下面的詳細描述，描述的優(yōu)選實施方式的其他目標、特征和優(yōu)點對本領域技術 人員將變得清楚。然而，應當理解的是，給出的詳細的描述和具體的實例，雖然表示優(yōu)選的 實施方式，但是意在說明而非限制?？梢赃M行本公開內容的范圍內的很多變化和修改，而不 背離其精神，并且公開內容包括所有這樣的修改。
[0034] 附圖簡述
[0035] 參看附圖，本文描述本公開內容的說明性實施方式，其中：
[0036] 圖1為在無水或非水性溶劑系統(tǒng)中交聯(lián)和加帽生物假體組織的示例性方法的流 程圖。
[0037] 圖2為在水性溶劑系統(tǒng)中交聯(lián)和加帽生物假體組織的示例性方法的流程圖。
[0038] 優(yōu)選實施方式詳述
[0039] 參看附圖，現在將描述交聯(lián)生物假體組織的方法的具體的、非限制性的實施方式。 應當理解的是，這樣的實施方式意在僅當作實例，并且僅僅說明本公開內容的范圍內的只 少數實施方式。對本公開內容所屬領域技術人員顯而易見的各種變化和修改視為在如所附 權利要求中進一步限定的本公開內容的精神、范圍和設想內。
[0040] 本文描述的優(yōu)選實施方式涉及處理用于與可植入的生物假體結合的生物組織的 方法。因為用于可植入的生物假體的生物組織來源于非自體來源，所以在植入之前生物組 織必須被處理以保持足夠程度的機械強度和尺寸穩(wěn)定性。同時，生物組織還必須被處理以 減少在患者中它的抗原性和減少實際存在的和潛在的鈣結合位點。生物組織可以衍生自動 物來源，諸如來自心包組織，以及具體地來自牛心包組織。
[0041] 遐定過程。在一個優(yōu)選實施方式中，生物組織可以經歷固定過程，由此使生物組織 為較少抗原的并且被至少部分或完全