。結(jié)果表明:通過CT(計(jì)算機(jī)X線斷層掃描)、超聲、熒光以及MRI (核磁共振成像)等成像檢測，該試劑能精準(zhǔn)引導(dǎo)、快速識別靶向病灶部位并富集在該區(qū)域，實(shí)驗(yàn)對模型組動(dòng)物的發(fā)病部位實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)、長時(shí)程、近紅外成像及其相關(guān)病灶的多模態(tài)成像。以上結(jié)果說明該類試劑可以實(shí)現(xiàn)對心腦血管疾病、眼部疾病、肝部疾病、肺部疾病、胃病、十二指腸潰瘍、腎炎、糖尿病、關(guān)節(jié)炎及類風(fēng)濕疾病、外傷感染及其它各種傳染性疾病等實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)、長時(shí)程、近紅外成像，并可實(shí)現(xiàn)多模態(tài)CT (計(jì)算機(jī)X線斷層掃描)、超聲、熒光以及MRI (核磁共振成像)成像。該發(fā)明可實(shí)現(xiàn)無損傷、原位、實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)靶向炎癥疾病的近紅外成像，進(jìn)行多形態(tài)與多模態(tài)的同步診斷及準(zhǔn)確靶向定位與治療，具有廣闊的醫(yī)學(xué)應(yīng)用前景。
【具體實(shí)施方式】
[0024]以下的說明本質(zhì)上僅僅是示例性的而并不是為了限制本公開、應(yīng)用或用途。
[0025]實(shí)施例1
[0026]蜂蜜在炎癥部位動(dòng)態(tài)長時(shí)程近紅外靶向成像試劑中的應(yīng)用，其步驟是:
[0027]I)在果蠅的下腹部構(gòu)造創(chuàng)口，誘發(fā)炎癥模型，設(shè)為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M；同時(shí)設(shè)立正常對照組和空白組。
[0028]2)將0.05ml無菌的濃度為30g/L的蜂蜜、蜂膠或蜂王漿，通過微注射儀注射進(jìn)入實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M和正常對照組體內(nèi)；空白組不做處理。
[0029]3)在I?6小時(shí)期間，通過非侵入式的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)高靈敏快速熒光示蹤和檢測，觀察成像試劑在果蠅體內(nèi)運(yùn)輸并富集在炎癥病灶部位；具體操作為:
[0030]利用宏觀變倍熒光顯微鏡等成像，分別選取I小時(shí)、2小時(shí)、6小時(shí)等不同時(shí)間點(diǎn)，將果蠅用CO2麻醉，置于顯微鏡操作平臺上，選擇480nm等波長激發(fā)采集熒光圖像。
[0031]4)步驟2)所述試劑是蜂蜜、蜂膠或蜂王漿中的一種或任意兩種的混合物。
[0032]結(jié)果顯示，成像試劑在實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M的果蠅的病灶區(qū)域，熒光強(qiáng)度隨時(shí)間呈現(xiàn)先增加后減弱的變化，而且成像時(shí)間可以長達(dá)72小時(shí)以上，且是在近紅外區(qū)成像。說明相關(guān)試劑如蜂蜜、蜂膠或蜂王漿等可以通過自身的生物靶向作用來精準(zhǔn)引導(dǎo)富集在炎癥病變區(qū)域，進(jìn)行特異性的原位生物反應(yīng)，最后又逐漸代謝；對照組和空白組熒光較弱且無明顯變化。
[0033]實(shí)施例2
[0034]I)在C57小鼠頸部或頭部造成創(chuàng)口，或誘導(dǎo)腦卒中等炎癥模型，分為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M和對照模型組；同時(shí)設(shè)立正常對照組和空白組對照組。
[0035]2)將0.3ml無菌的濃度為30g/L的蜂蜜、蜂膠或蜂王漿中的一種或任意兩種的混合物試劑溶液，注射進(jìn)入正常對照組和實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M小鼠體內(nèi)；對照模型組和空白組不做處理。
[0036]3)在I?72小時(shí)期間，通過非侵入式的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)高靈敏快速熒光示蹤和監(jiān)測，觀察靶向試劑在小鼠體內(nèi)循環(huán)并富集在炎癥病灶部位；具體步驟為:
[0037]利用活體熒光成像儀成像，分別選取I小時(shí)、4小時(shí)、8小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)等不同時(shí)間點(diǎn)，然后將小鼠用5%異氟烷進(jìn)行氣體麻醉，將其置于小動(dòng)物活體成像儀操作平臺上，選擇520nm和480nm等波長激發(fā)采集炎癥病變區(qū)域的圖像。
[0038]4)解剖模型組、對照組和空白組小鼠，取全血和血清，測試血常規(guī)和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、乳糖脫氫酶、肌酸激酶和尿素氮的指標(biāo)；取器官肝、脾、腎和創(chuàng)傷周圍組織，制備病理切片，分析靶向試劑的多模態(tài)治療對于C57小鼠的影響。
[0039]5)步驟2)所述的注射方法為尾靜脈或局部注射；所述蜂蜜、蜂膠或蜂王漿中的一種或任意兩種的混合物。
[0040]結(jié)果顯示，成像試劑在炎癥模型鼠的病灶區(qū)域的熒光強(qiáng)度隨時(shí)間呈現(xiàn)先增加后減弱的變化，說明蜂蜜、蜂膠或蜂王漿試劑可以通過自身的精準(zhǔn)引導(dǎo)富集在炎癥病變區(qū)域，進(jìn)行特異性的原位合成，而后又逐漸代謝；對照組和空白組熒光較弱且無明顯變化。血液和病理分析，實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M小鼠的頸后部創(chuàng)口治療效果較于對照模型組小鼠有明顯的改善，同時(shí)正常對照組和空白組的結(jié)果之間沒有明顯不同。
[0041]富集在病灶部位的診療試劑蜂蜜、蜂膠或蜂王漿中含有大量的糖類、黃酮類和酚酸類化合物以及微量元素等，它們可以快速精準(zhǔn)地富集在炎癥病灶部位，實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)、長時(shí)程、近紅外成像，同時(shí)可進(jìn)行多模態(tài)CT (計(jì)算機(jī)X線斷層掃描)、超聲、熒光以及MRI (核磁共振成像)等多尺度成像。
[0042]以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理和主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實(shí)施例的限制，上述實(shí)施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下，本發(fā)明還會(huì)有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護(hù)范圍由所附的權(quán)利要求書及其等效物界定。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種蜂蜜在炎癥部位動(dòng)態(tài)長時(shí)程近紅外靶向成像試劑中的應(yīng)用，其特征在于，所述近紅外靶向成像試劑由生物相容性優(yōu)良的蜂蜜、蜂膠和蜂王漿組成，其中的任意一種或任意兩種以任意比例組成的混合物，通過原位生物定點(diǎn)作用對炎癥相關(guān)病灶部位精準(zhǔn)靶向快速成像標(biāo)記。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蜂蜜在炎癥部位動(dòng)態(tài)長時(shí)程近紅外靶向成像試劑中的應(yīng)用，其特征在于，所述炎癥是指:心腦血管疾病、眼部疾病、肝部疾病、肺部疾病、腎炎、胃病、十二指腸潰瘍、糖尿病、關(guān)節(jié)炎及類風(fēng)濕疾病、外傷感染及其它各種傳染性疾病。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蜂蜜在炎癥部位動(dòng)態(tài)長時(shí)程近紅外靶向成像試劑中的應(yīng)用，其特征在于，所述的成像是指實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)、長時(shí)程、近紅外成像。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蜂蜜在炎癥部位動(dòng)態(tài)長時(shí)程近紅外靶向成像試劑中的應(yīng)用，其特征在于該應(yīng)用包括以下步驟:將該試劑用于炎癥疾病部位成像和治療時(shí)，將蜂蜜、蜂膠或蜂王漿通過尾靜脈注射或局部注射以及微注射到創(chuàng)傷誘導(dǎo)的動(dòng)物模型上，蜂蜜、蜂膠或蜂王漿試劑能快速在病灶部位富集，使用小動(dòng)物活體熒光成像儀和宏觀變倍熒光顯微鏡成像儀對模型動(dòng)物實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)成像。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的蜂蜜在炎癥部位動(dòng)態(tài)長時(shí)程近紅外靶向成像試劑中的應(yīng)用，其特征在于該方法的具體步驟是: 1)構(gòu)建創(chuàng)傷誘導(dǎo)炎癥的果蠅模型，分為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M和對照模型組，同時(shí)設(shè)立正常對照組和空白對照組； 2)構(gòu)建創(chuàng)傷誘導(dǎo)炎癥的模型鼠，分為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M和對照模型組，同時(shí)設(shè)立正常對照組和空白對照組； 3)將0.0l?0.5mL無菌的濃度為I?50g/L的蜂蜜、蜂膠和蜂王漿，注射到實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M和對照模型組上，正常對照組和空白對照組不做處理。經(jīng)過I小時(shí)至一周以上的非侵入式的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)的高靈敏快速示蹤和監(jiān)測，觀測體內(nèi)循環(huán)在具有炎癥的動(dòng)物模型上實(shí)現(xiàn)試劑在病變部位的特異性富集與相關(guān)病灶部位的精準(zhǔn)靶向快速標(biāo)記成像； 4)采用宏觀變倍熒光顯微鏡成像、活體熒光成像、超聲成像、計(jì)算機(jī)X線斷層掃描CT及核磁共振成像MRI的手段對炎癥相關(guān)病灶部位進(jìn)行活體成像并對其進(jìn)行定性及定量分析； 5)解剖模型組、對照組和空白組動(dòng)物，取全血和血清，測試血常規(guī)和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、乳糖脫氫酶、肌酸激酶和尿素氮的指標(biāo)；取器官肝、脾、腎和創(chuàng)傷周圍組織，制備病理切片，分析試劑對于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的蜂蜜在炎癥部位動(dòng)態(tài)長時(shí)程近紅外靶向成像試劑中的 應(yīng)用，其特征在于，所述的注射方法為尾靜脈注射、局部注射或微注射。
【專利摘要】本發(fā)明公開了蜂蜜在炎癥部位動(dòng)態(tài)長時(shí)程近紅外靶向成像試劑中的應(yīng)用，所述試劑由生物相容性優(yōu)良的蜂蜜、蜂膠和蜂王漿組成，其中的任意一種或任意兩種以任意比例組成的混合物，并通過原位生物定點(diǎn)作用對炎癥相關(guān)病灶部位精準(zhǔn)靶向快速成像標(biāo)記；能實(shí)現(xiàn)非侵入式的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)長時(shí)程的高靈敏快速示蹤和監(jiān)測，且無生物毒副作用，檢測方法簡便易行。該類試劑可以實(shí)現(xiàn)對炎癥部位的實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)、長時(shí)程、近紅外靶向成像及相關(guān)多模態(tài)成像，具有廣闊的醫(yī)學(xué)應(yīng)用前景。
【IPC分類】A61K49-00, A61K49-04, A61K49-22, A61K49-06
【公開號】CN104721842
【申請?zhí)枴緾N201510140770
【發(fā)明人】王雪梅, 來蘭梅, 陳蕓, 趙春秋, 李曉琦, 姜暉
【申請人】東南大學(xué)
【公開日】2015年6月24日
【申請日】2015年3月27日