蜂蜜在炎癥部位動(dòng)態(tài)長(zhǎng)時(shí)程近紅外靶向成像試劑中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及蜂蜜在炎癥部位動(dòng)態(tài)長(zhǎng)時(shí)程近紅外靶向成像試劑中的應(yīng)用，這些試劑由生物相容性優(yōu)良的蜂蜜、蜂膠和蜂王漿組成，其中的任意一種或任意兩種以任意比例組成的混合物，通過(guò)原位生物定點(diǎn)作用對(duì)炎癥相關(guān)病灶部位精準(zhǔn)靶向快速標(biāo)記的近紅外成像及其相關(guān)的多模態(tài)成像，可以實(shí)現(xiàn)非侵入式的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)長(zhǎng)時(shí)程的高靈敏快速示蹤和監(jiān)測(cè)，且無(wú)生物毒副作用，檢測(cè)方法簡(jiǎn)便易行。
【背景技術(shù)】
[0002]炎癥是指具有血管系統(tǒng)的活體組織對(duì)損傷因子所發(fā)生的防御反應(yīng)。就是平時(shí)人們所說(shuō)的“發(fā)炎”，它是一種極為常見(jiàn)而又重要的病理過(guò)程，是機(jī)體對(duì)于刺激的一種防御反應(yīng)，表現(xiàn)為紅、腫、熱、痛。血管反應(yīng)是炎癥過(guò)程的中心環(huán)節(jié)。一般情況下，炎癥是有益的，是人體自動(dòng)的防御反應(yīng)。但某些情況下，炎癥也是有害的，因?yàn)樗斐闪藢?duì)人體自身組織的攻擊。常見(jiàn)的炎癥相關(guān)疾病種類繁多，主要包括:心腦血管疾病、眼部疾病、肝部疾病、肺部疾病、胃病、十二指腸潰瘍、腎炎、糖尿病、關(guān)節(jié)炎及類風(fēng)濕疾病、外傷感染及其它各種傳染性疾病等，它們具有炎癥病變的共同規(guī)律，由于疾病發(fā)生在不同器官，有不同病因引起，而又因此表現(xiàn)出各自特殊的規(guī)律。
[0003]任何能夠引起組織損傷的因素都可成為炎癥的原因，即致炎因子。可歸納為以下幾類:(一)生物性因子細(xì)菌、病毒、立克次體、支原體、真菌、螺旋體和寄生蟲等為炎癥最常見(jiàn)的原因。(二)物理性因子高溫、低溫、放射性物質(zhì)及紫外線等和機(jī)械損傷。(三)化學(xué)性因子外源性化學(xué)物質(zhì)如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿及松節(jié)油、芥子氣等。內(nèi)源性毒性物質(zhì)如壞死組織的分解產(chǎn)物及在某些病理?xiàng)l件下堆積于體內(nèi)的代謝產(chǎn)物如尿素等。(四)異物通過(guò)各種途徑進(jìn)入人體的異物，如各種金屬、木材碎肩、塵埃顆粒、及手術(shù)縫線等，由于其抗原性不同，可引起不同程度的炎癥反應(yīng)。(五)壞死組織缺血或缺氧等原因可引起組織壞死，組織壞死是潛在的致炎因子。(六)變態(tài)反應(yīng)當(dāng)機(jī)體免疫反應(yīng)狀態(tài)異常時(shí)，可引起不適當(dāng)或過(guò)度的免疫反應(yīng)，造成組織和細(xì)胞損傷而導(dǎo)致炎癥。免疫反應(yīng)所造成的組織損傷最常見(jiàn)于各種類型的超敏反應(yīng)。
[0004]上述常見(jiàn)的各種炎癥相關(guān)疾病無(wú)不給個(gè)人帶來(lái)了極大的痛苦，給家庭帶來(lái)很重的負(fù)擔(dān)，給人們的日常生活和工作帶來(lái)了很大的影響，而且對(duì)整個(gè)社會(huì)都帶來(lái)了很大的壓力。隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，已經(jīng)有多種影像學(xué)方法及生物標(biāo)志物應(yīng)用于臨床診斷，現(xiàn)有的常用于診斷炎癥相關(guān)疾病的影像學(xué)方法主要包括MRI (核磁共振成像)，SPE-CT (單光子發(fā)射斷層成像)，PET(正電子發(fā)射斷層成像)、X線、心電圖、常規(guī)CT(計(jì)算機(jī)X線斷層掃描)等多種，然而，上述這些常用診斷炎癥疾病的方法均有一定的局限性，例如:MRI (核磁共振成像)和SPE-CT(單光子發(fā)射斷層成像)均缺乏特異性，PET(正電子發(fā)射斷層成像)價(jià)格昂貴，限制了它的應(yīng)用。因此，尋找一種能對(duì)炎癥相關(guān)疾病進(jìn)行實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)、長(zhǎng)時(shí)程、近紅外成像的診療試劑尤為重要。然而，到目前為止，仍未見(jiàn)能對(duì)炎癥相關(guān)疾病進(jìn)行實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)、長(zhǎng)時(shí)程、近紅外成像試劑的報(bào)道。
[0005]蜂蜜的主要成份為糖類，糖類占蜂蜜總質(zhì)量的65%?80%，其次為蛋白質(zhì)、維生素、酸類、酶、無(wú)機(jī)鹽等。糖類主要有葡萄糖、果糖、蔗糖、少量麥芽糖，維生素主要有B2、B12、B6、胡蘿卜素等，酸類有乳酸、草酸、蘋果酸、檸檬酸等，酶類主要有淀粉酶、葡萄糖氧化酶、過(guò)氧化物酶等，無(wú)機(jī)鹽主要有鈣、磷、氯、鎂、鉀、鐵、鋅、砸等20多種，并有少量脂肪、生長(zhǎng)素等。蜂蜜所含物質(zhì)種類繁多，決定了蜂蜜具有獨(dú)特的物化性能和生物功能。
[0006]蜂蜜中兩類主要的活性物質(zhì)是黃酮類和酚酸類化合物。很多研宄表明，黃酮類和酚酸類化合物的保健功能主要表現(xiàn)在:清除體內(nèi)自由基、舒張血管、抗癌、抗病毒、抗菌消炎、抗過(guò)敏、產(chǎn)生癌細(xì)胞血管阻斷素、刺激免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體、抑制磷脂酶、脂肪氧化酶、環(huán)加氧酶、黃嘌呤氧化酶等酶的活性。因此，近年來(lái)蜂蜜的研宄越來(lái)越受到人們的關(guān)注。
[0007]蜂膠和蜂王漿化學(xué)成分主要是有機(jī)酸、黃酮類、烷、烯、酯、醇、醛、萜類化合物以及30多種微量元素和礦物質(zhì)等。蜂膠和蜂王漿中含有大量具有保健作用的成分，研宄顯示蜂膠和蜂王漿均具有抗病毒、抗氧化、抗菌、抗腫瘤(如蜂膠對(duì)卵巢癌細(xì)胞、結(jié)腸癌細(xì)胞、骨髓癌細(xì)胞、白血病細(xì)胞、乳腺癌細(xì)胞、淋巴瘤細(xì)胞等生長(zhǎng)均有抑制作用)、防腐保鮮和消炎鎮(zhèn)痛等多種作用，而且二者的抗氧化能力比蜂蜜更強(qiáng)。
[0008]正常情況下，人體內(nèi)自由基的生成和清除處于動(dòng)態(tài)平衡中，當(dāng)機(jī)體被某些疾病或外源性物質(zhì)(如各種放射線等)入侵后，自由基代謝就會(huì)發(fā)生異常，可導(dǎo)致細(xì)胞和組織器官損傷，誘發(fā)各種不同炎癥相關(guān)疾病，加速機(jī)體衰老。很多研宄已表明，攝取富含抗氧化劑的膳食可以有效預(yù)防與自由基相關(guān)的多種疾病。食物中的抗氧化劑具有安全性高、無(wú)副作用等優(yōu)點(diǎn)，因此富含抗氧化劑的食物蜂蜜、蜂膠、蜂王漿一直深受人們的青睞。
[0009]本發(fā)明所述試劑蜂蜜、蜂膠、蜂王漿生物相容性好，無(wú)毒副作用，可以通過(guò)在炎癥相關(guān)病變部位的特異性富集，實(shí)現(xiàn)對(duì)炎癥相關(guān)疾病進(jìn)行實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)、長(zhǎng)時(shí)程、近紅外成像及多模態(tài)成像，具有廣闊的醫(yī)學(xué)應(yīng)用前景。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010]技術(shù)問(wèn)題:針對(duì)目前現(xiàn)有檢測(cè)技術(shù)的缺陷，本發(fā)明公開(kāi)了蜂蜜在炎癥部位動(dòng)態(tài)長(zhǎng)時(shí)程近紅外靶向成像試劑中的應(yīng)用，這些試劑由生物相容性優(yōu)良的蜂蜜、蜂膠和蜂王漿組成，其中的任意一種或任意兩種以任意比例組成的混合物，通過(guò)原位生物定點(diǎn)作用實(shí)現(xiàn)對(duì)相關(guān)病灶部位精準(zhǔn)靶向快速標(biāo)記的近紅外成像檢測(cè)，可以實(shí)現(xiàn)相關(guān)病灶的多模態(tài)成像及非侵入式的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)的高靈敏快速示蹤和監(jiān)測(cè)，且無(wú)生物毒副作用，檢測(cè)方法簡(jiǎn)便易行。
[0011]技術(shù)方案:為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明的一種蜂蜜在炎癥部位動(dòng)態(tài)長(zhǎng)時(shí)程近紅外靶向成像試劑中的應(yīng)用中，所述試劑由生物相容性優(yōu)良的蜂蜜、蜂膠和蜂王漿組成，其中的任意一種或任意兩種以任意比例組成的混合物，通過(guò)原位生物定點(diǎn)作用對(duì)炎癥相關(guān)病灶部位精準(zhǔn)靶向快速成像標(biāo)記。
[0012]所述炎癥是指:心腦血管疾病、眼部疾病、肝部疾病、肺部疾病、腎炎、胃病、十二指腸潰瘍、糖尿病、關(guān)節(jié)炎及類風(fēng)濕疾病、外傷感染及其它各種傳染性疾病。
[0013]所述的成像是指實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)、長(zhǎng)時(shí)程、近紅外成像。
[0014]該應(yīng)用包括以下步驟:將該試劑用于炎癥疾病部位成像和治療時(shí)，將蜂蜜、蜂膠或蜂王漿通過(guò)尾靜脈注射或局部注射以及微注射到創(chuàng)傷誘導(dǎo)的動(dòng)物模型上，蜂蜜、蜂膠或蜂王漿試劑能快速在病灶部位富集，使用小動(dòng)物活體熒光成像儀和宏觀變倍熒光顯微鏡成像儀對(duì)模型動(dòng)物實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)成像。
[0015]該方法的具體步驟是:
[0016]I)構(gòu)建創(chuàng)傷誘導(dǎo)炎癥的果蠅模型，分為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M和對(duì)照模型組，同時(shí)設(shè)立正常對(duì)照組和空白對(duì)照組；
[0017]2)構(gòu)建創(chuàng)傷誘導(dǎo)炎癥的模型鼠，分為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M和對(duì)照模型組，同時(shí)設(shè)立正常對(duì)照組和空白對(duì)照組；
[0018]3)將0.01?0.5mL無(wú)菌的濃度為I?50g/L的蜂蜜、蜂膠和蜂王漿，注射到實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M和對(duì)照模型組上，正常對(duì)照組和空白對(duì)照組不做處理。經(jīng)過(guò)I小時(shí)至一周以上的非侵入式的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)的高靈敏快速示蹤和監(jiān)測(cè)，觀測(cè)體內(nèi)循環(huán)在具有炎癥的動(dòng)物模型上實(shí)現(xiàn)試劑在病變部位的特異性富集與相關(guān)病灶部位的精準(zhǔn)靶向快速標(biāo)記成像；
[0019]4)采用宏觀變倍熒光顯微鏡成像、活體熒光成像、超聲成像、計(jì)算機(jī)X線斷層掃描CT及核磁共振成像MRI的手段對(duì)炎癥相關(guān)病灶部位進(jìn)行活體成像并對(duì)其進(jìn)行定性及定量分析；
[0020]5)解剖模型組、對(duì)照組和空白組動(dòng)物，取全血和血清，測(cè)試血常規(guī)和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、乳糖脫氫酶、肌酸激酶和尿素氮的指標(biāo)；取器官肝、脾、腎和創(chuàng)傷周圍組織，制備病理切片，分析試劑對(duì)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響。
[0021]所述的注射方法為尾靜脈注射、局部注射或微注射。
[0022]有益效果:本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)方法相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)和效果:
[0023]本研宄采用的試劑由生物相容性優(yōu)良的蜂蜜、蜂膠和蜂王漿試劑組成，通過(guò)與靶向生物活性分子定點(diǎn)作用和靶向體內(nèi)缺血缺氧等特異性微環(huán)境實(shí)現(xiàn)相關(guān)病灶部位的精準(zhǔn)靶向標(biāo)記與快速成像檢測(cè)，可進(jìn)行活體非侵入式的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)的高靈敏快速示蹤和監(jiān)測(cè)，且無(wú)生物毒副作用，活體靶向成像檢測(cè)分析方法簡(jiǎn)便易行