交酯、丙交酯-乙交酯共聚物、聚己酸內(nèi)酯、多羥基酸（例如聚（e-羥基烷酸酯）、聚 (原酸酯）、聚氰基丙烯酸酯、聚乙烯醇、聚氨酯、聚磷腈、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯、聚 脲、聚苯乙烯、以及聚胺、聚賴氨酸、聚賴氨酸-PEG共聚物、以及聚（乙烯亞胺）、聚（乙烯亞 胺）-PEG共聚物。
[0156]在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的聚合物包括在21C.F.R. § 177. 2600下已經(jīng)由美 國食品與藥品管理局（FDA)批準(zhǔn)用于人的聚合物，包括但并不局限于聚酯（例如聚乳酸、聚 (乳酸乙醇酸共聚物）、聚己內(nèi)酯、聚戊內(nèi)酯、聚（1，3_二噁烷-2酮））；聚酐（例如聚（癸 二酸酐））；聚醚（例如聚乙二醇）；聚氨酯；聚甲基丙烯酸酯；聚丙烯酸酯；以及聚氰基丙烯 酸酯。
[0157]在一些實施例中，聚合物可以是親水性的。例如，聚合物可以包含陰離子基團(tuán)（例 如磷酸根、硫酸根、羧酸根）；陽離子基團(tuán)（例如，季胺基團(tuán)）；或極性基團(tuán)（例如，羥基基團(tuán)、 硫醇基團(tuán)、胺基團(tuán)）。在一些實施例中，包含一種親水性聚合物基質(zhì)的合成納米載體在該合 成納米載體內(nèi)產(chǎn)生親水環(huán)境。在一些實施例中，聚合物可以是疏水性的。在一些實施例中， 包含疏水性聚合物基質(zhì)的合成納米載體在該合成納米載體內(nèi)產(chǎn)生疏水環(huán)境。聚合物親水性 或疏水性的選擇可以影響被結(jié)合（例如偶聯(lián)）在合成納米載體之內(nèi)的材料的性質(zhì)。
[0158]在一些實施例中，聚合物可以用一個或多個部分和/或官能團(tuán)修飾。根據(jù)本發(fā)明， 可以使用各種各樣的部分或官能團(tuán)。在一些實施例中，可以用聚乙二醇（PEG)、用碳水化合 物、和/或用衍生自多糖類的非環(huán)狀聚縮醛來修飾聚合物（Papisov(巴比索夫），2001，ACS SymposiumSeries，786 :301)?？梢允褂肎ref(格里夫）等人的美國專利號5543158、或Von Andrian(馮安德里安）等人的WO公開WO2009/051837中的全部傳授內(nèi)容進(jìn)行某些實施 例。
[0159]在一些實施例中，可以用脂質(zhì)或脂肪酸基團(tuán)修飾聚合物。在一些實施例中，脂肪 酸基團(tuán)可以是丁酸、己酸、辛酸、癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、花生酸、山崳酸、 或廿四烷酸中的一種或多種。在一些實施例中，脂肪酸基團(tuán)可以是棕櫚烯酸、油酸、異油 酸、亞麻酸、a-亞麻酸、Y-亞麻酸、花生四烯酸、二十碳烯酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、 二十二碳六烯酸、或芥酸中的一種或多種。
[0160]在一些實施例中，聚合物可以是聚酯，包括共聚物，這些共聚物包括乳酸和乙醇酸 單元（例如聚（乳酸乙醇酸共聚物）和聚（丙交酯乙交酯共聚物）），在此統(tǒng)稱為"PLGA"； 以及包括乙醇酸單元的均聚物，在此稱為"PGA"，以及乳酸單元（例如聚-L-乳酸、聚-D-乳 酸、聚-D，L-乳酸、聚-L-丙交醋、聚-D-丙交醋、以及聚-D，L-丙交酯），在此統(tǒng)稱為"PLA"。 在一些實施例中，示例性的聚酯包括，例如多羥基酸；PEG共聚物和丙交酯與乙交酯的共聚 物（例如PLA-PEG共聚物、PGA-PEG共聚物、PLGA-PEG共聚物），以及它們的衍生物）。在一 些實施例中，聚酯包括例如聚（己內(nèi)酯）、聚（己內(nèi)酯）-PEG共聚物、聚（L-丙交酯-L-賴氨 酸共聚物）、聚（絲氨酸酯）、聚（4-羥基-L-脯氨酸酯）、聚[a-(4-氨基丁基）-L-乙醇 酸]、以及它們的衍生物。
[0161]在一些實施例中，聚合物可以是PLGA。PLGA是一種生物相容的并且生物可降解的 乳酸和乙醇酸的共聚物，并且多種形式的PLGA特征在于乳酸：乙醇酸的比率。乳酸可以是 L-乳酸、D-乳酸、或D，L-乳酸。可以通過改變?nèi)樗幔阂掖妓岬谋嚷收{(diào)整PLGA的降解速率。 在一些實施例中，根據(jù)本發(fā)明的將使用的PLGA特征在于大約85 : 15、大約75 : 25、大約 60 : 40、大約50 : 50、大約40 : 60、大約25 : 75、或者大約15 : 85的乳酸：乙醇酸比 率。
[0162] 在一些實施例中，聚合物可以是一種或多種丙烯酸聚合物。在某些實施例中，丙烯 酸聚合物包括，例如丙烯酸和甲基丙烯酸的共聚物、甲基丙烯酸甲酯共聚物、甲基丙烯酸乙 氧基乙酯、甲基丙烯酸氰基乙基酯、甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物、聚（丙烯酸）、聚（甲基 丙烯酸）、甲基丙烯酸烷基酰胺共聚物、聚（甲基丙烯酸甲酯）、聚（甲基丙烯酸酸酐）、甲基 丙烯酸甲酯、聚甲基丙烯酸酯、聚（甲基丙烯酸甲酯）共聚物、聚丙烯酰胺、甲基丙烯酸氨基 烷基酯共聚物、甲基丙烯酸縮水甘油酯共聚物、聚腈基丙烯酸酯、以及包括一種或多種以上 聚合物的組合。該丙烯酸聚合物可以包含具有低含量的季銨基團(tuán)的丙烯酸酯和甲基丙烯酸 酯的完全聚合的共聚物。
[0163] 在一些實施例中，聚合物可以是陽離子型聚合物。通常，陽離子型聚合物能夠縮 合和/或保護(hù)核酸（例如DNA、或它的衍生物）的帶負(fù)電的鏈。含有胺的聚合物（例如 聚（賴氨酸）（Zauner(澤納）等人，1998,先進(jìn)藥物遞送綜述，30 :97 ;以及Kabanov(卡巴 諾夫）等人，1995,生物共軛化學(xué)，6 :7)、聚（亞乙基亞胺）（PEI;BouSSif(波希夫）等人， 1995,美國科學(xué)院院刊，1995,92:7297)、以及聚（酰胺胺）樹枝狀聚合物（Kukowska(庫科 斯卡）-Latallo(拉塔羅）等人，1996,美國科學(xué)院院刊，93 :4897 ;Tang(唐）等人，1996,生 物共軛化學(xué)，7 :703 ;以及Haensler(亨斯勒）等人，1993,生物共軛化學(xué)，4 :372)在生理pH 下是帶正電的，在多種細(xì)胞系中與核酸形成離子對，并且介導(dǎo)轉(zhuǎn)染。在多個實施例中，這些 發(fā)明的合成納米載體可以不包含（或可以排除）陽離子型聚合物。
[0164] 在一些實施例中，聚合物可以是帶有陽離子側(cè)鏈的可降解聚酯（Putnam(普特南） 等人，1999,大分子，32 :3658 ;Barrera(巴雷拉）等人，1993,美國化學(xué)會志，115 :11010 ; Kwon(權(quán)）等人，1989,大分子，22 :3250 ;Lim(林）等人，1999,美國化學(xué)會志，121 :5633 ; 以及Zhou(周）等人，1990,大分子，23 :3399)。這些聚酯的實例包括聚（L-丙交酯L-賴 氨酸共聚物）（Barrera(巴雷拉）等人，1993,美國化學(xué)會志，115 :11010)、聚（絲氨酸酯） (Zhou(周）等人，1990,大分子，23 :3399)、聚（4-羥基-L-脯氨酸醋）（Putnam(普特南） 等人，1999,大分子，32 :3658 ;以及Lim(林）等人，1999,美國化學(xué)會志，121 :5633)、以及聚 (4-羥基-L-脯氨酸酯）（Putnam(普特南）等人，1999,大分子，32 :3658 ;以及Lim(林）等 人，1999,美國化學(xué)會志，121 :5633)。
[0165] 這些和其他聚合物的特性以及用于制備它們的方法在本領(lǐng)域中是熟知的（參 見，例如美國專利 6, 123,727 ;5, 804, 178 ;5, 770, 417 ;5, 736, 372 ;5, 716, 404 ;6, 095, 148 ; 5, 837, 752 ；5, 902, 599 ；5, 696, 175 ；5, 514, 378 ；5, 512, 600 ；5, 399, 665 ；5, 019, 379 ； 5,010, 167 ;4, 806, 621 ;4, 638, 045 ;以及 4, 946, 929;Wang(王）等人，2001，美國化學(xué)會志， 123 :9480 ;Lim(林）等人，2001，美國化學(xué)會志，123 :2460 ;Langer(朗格爾），2000,化學(xué) 研宄評述，33 :94ganger(朗格爾），1999,控釋雜志，62 :7 ;以及Uhrich(烏利希）等人， 1999,化學(xué)評論，99 :3181)。更一般地，在ConciseEncyclopediaofPolymerScienceand PolymericAminesandAmmoniumSalts，Goethals(戈薩爾斯）編輯，培格曼出版社，1980 中；在PrinciplesofPolymerizationbyOdian，約翰?威利父子出版公司，第四版，2004 中；在Allcock(阿爾庫克）等人的ContemporaryPolymerChemistry，Prentice-Hall， 1981中；在Deming(德明）等人，1997,自然，390 :386中；以及在美國專利6, 506, 577、 6, 632, 922、6, 686, 446、以及6, 818, 732中說明了用于合成某些適合的聚合物的多種方法。
[0166] 在一些實施例中，聚合物可以是線型聚合物或分支聚合物。在一些實施例中，聚合 物可以是樹枝狀化合物。在一些實施例中，聚合物可以是基本上彼此交聯(lián)的。在一些實施 例中，聚合物可以基本上不交聯(lián)。在一些實施例中，聚合物可以根據(jù)本發(fā)明進(jìn)行使用而不經(jīng) 歷交聯(lián)步驟。進(jìn)一步理解的是，本發(fā)明的合成納米載體可以包含嵌段共聚物、接枝共聚物、 共混物、混合物、和/或任何上述及其他聚合物的加合物。本領(lǐng)域的那些技術(shù)人員將認(rèn)識 到，在此列出的這些聚合物代表根據(jù)本發(fā)明可以使用的聚合物的示例性的、而不是全面的 清單。
[0167] 根據(jù)本發(fā)明的多種組合物包含與藥學(xué)上可接受的賦形劑（如防腐劑、緩沖劑、鹽 水或磷酸鹽緩沖鹽水）組合的合成納米載體?？梢允褂贸Ｒ?guī)藥物制造和配制技術(shù)制造這些 組合物，以實現(xiàn)有用的劑型。在一個實施例中，將發(fā)明的合成納米載體與防腐劑一起懸浮在 注射用無菌鹽水溶液中。
[0168] 在多個實施例中，當(dāng)制備合成納米載體作為載體時，用于將組分與合成納米載體 偶聯(lián)的方法可以是有用的。如果該組分是小分子，那么在組裝這些合成納米載體之前將該 組分附接至聚合物上可能是有利的。在多個實施例中，制備具有用于將該組分與合成納米 載體偶聯(lián)的表面基團(tuán)的合成納米載體也可能是有利的，該偶聯(lián)是通過使用這些表面基團(tuán)而 不是將該組分附接至聚合物上且隨后在合成納米載體的構(gòu)建中使用這種聚合物共軛物來 進(jìn)行。
[0169] 在某些實施例中，該偶聯(lián)可以是共價連接物。在多個實施例中，根據(jù)本發(fā)明的多肽 可以經(jīng)由1，2,3_三唑連接物共價偶聯(lián)至外表面上，該連接物通過納米載體表面上的疊氮 基團(tuán)與含有炔基的抗原或免疫抑制劑進(jìn)行1，3-偶極環(huán)加成反應(yīng)、或通過納米載體表面上 的炔與含有疊氮基團(tuán)的組分進(jìn)行1，3-偶極環(huán)加成反應(yīng)而形成。此類環(huán)加成反應(yīng)優(yōu)選地是 在銅（I)催化劑以及適合的Cu(I)-配體和將Cu(II)化合物還原成催化活性的Cu(I)化合 物的還原劑存在下進(jìn)行的。此類Cu(I)催化的疊氮-炔環(huán)加成反應(yīng)（CuAAC)也可以稱為點(diǎn) 擊反應(yīng)。
[0170] 另外，共價偶聯(lián)可以包含共價連接物，該共價連接物包含酰胺連接物、二硫化物連 接物、硫醚連接物、腙連接物、酰肼連接物、亞胺或肟連接物、脲或硫脲連接物、脒連接物、胺 連接物、以及磺酰胺連接物。
[0171] 酰胺連接物經(jīng)由一種組分上的胺與第二組分（如納米載體）的羧酸基團(tuán)之間的酰 胺鍵形成。該連接物中的酰胺鍵可以用被適當(dāng)保護(hù)的氨基酸或組分與被活化的羧酸（如被 N-羥基丁二酰亞胺活化的酯）、使用任何常規(guī)酰胺鍵形成反應(yīng)制成。
[0172] 二硫化物連接物經(jīng)由在例如R1-S-S-R2的形式的兩個硫原子之間形成二硫（S-S) 鍵制成。二硫鍵可以通過含有硫醇基/巰基（-SH)的組分與
【主權(quán)項】
1. 一種包含分離的抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的組合物，所述分離的抗原特異性調(diào)節(jié)性 B細(xì)胞由下述方法產(chǎn)生： 所述方法，包括： 向受試者給予一種組合物，該組合物包含： (i) 第一群體的合成納米載體，這些第一群體的合成納米載體與免疫抑制劑偶聯(lián)，和 (ii) 第二群體的合成納米載體，這些第二群體的合成納米載體被偶聯(lián)以包含一種抗原 的B細(xì)胞表位和/或MHC II類限制性表位， 其中該組合物處于在受試者中有效產(chǎn)生抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的量；或者 所述方法，包括： 通過給予一種組合物而在受試者中產(chǎn)生抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞，該組合物包含： (i) 第一群體的合成納米載體，這些第一群體的合成納米載體與免疫抑制劑偶聯(lián)，和 (ii) 第二群體的合成納米載體，這些第二群體的合成納米載體與一種抗原的B細(xì)胞表 位和/或MHC II類限制性表位偶聯(lián)；或者 所述方法，包括： 根據(jù)一種治療方案向受試者給予一種組合物，該治療方案先前已經(jīng)顯示在一個或多個 測試受試者中產(chǎn)生抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞； 其中，該組合物包含： (i) 第一群體的合成納米載體，這些第一群體的合成納米載體與免疫抑制劑偶聯(lián)，和 (ii) 第二群體的合成納米載體，這些第二群體的合成納米載體與一種抗原的B細(xì)胞表 位和/或MHC II類限制性表位偶聯(lián)。
2. -種組合物，包含根據(jù)下述方法產(chǎn)生的組合物， 所述方法，包括： 向受試者給予一種組合物，該組合物包含： (i) 第一群體的合成納米載體，這些第一群體的合成納米載體與免疫抑制劑偶聯(lián)，和 (ii) 第二群體的合成納米載體，這些第二群體的合成納米載體被偶聯(lián)以包含一種抗原 的B細(xì)胞表位和/或MHC II類限制性表位， 其中該組合物處于在受試者中有效產(chǎn)生抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的量；或者 所述方法，包括： 通過給予一種組合物而在受試者中產(chǎn)生抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞，該組合物包含： (i) 第一群體的合成納米載體，這些第一群體的合成納米載體與免疫抑制劑偶聯(lián)，和 (ii) 第二群體的合成納米載體，這些第二群體的合成納米載體與一種抗原的B細(xì)胞表 位和/或MHC II類限制性表位偶聯(lián)；或者 所述方法，包括： 根據(jù)一種治療方案向受試者給予一種組合物，該治療方案先前已經(jīng)顯示在一個或多個 測試受試者中產(chǎn)生抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞； 其中，該組合物包含： (i) 第一群體的合成納米載體，這些第一群體的合成納米載體與免疫抑制劑偶聯(lián)，和 (ii) 第二群體的合成納米載體，這些第二群體的合成納米載體與一種抗原的B細(xì)胞表 位和/或MHC II類限制性表位偶聯(lián)。
3. 如權(quán)利要求1或2所述的組合物，其中該組合物進(jìn)一步包含一種藥學(xué)上可接受的賦 形劑。
4. 一種包含如權(quán)利要求1-3中任一項所述的組合物的劑型。
5. -種供在治療或預(yù)防中使用的包含分離的抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的組合物，所述 分離的抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞通過一種工藝可獲得，該工藝包括以下步驟：(a)通過給予 一種組合物而在受試者中產(chǎn)生抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞，該組合物包含：（i)第一群體的合 成納米載體，這些第一群體的合成納米載體與免疫抑制劑偶聯(lián)，和（ii)第二群體的合成納 米載體，這些第二群體的合成納米載體與一種抗原的B細(xì)胞表位和/或MHC II類限制性表 位偶聯(lián)；并且（b)收集所產(chǎn)生的這些抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞。
6. 如權(quán)利要求5所述的組合物，該組合物是如在權(quán)利要求1-3中任一項所定義的。
7. -種供在治療或預(yù)防中使用的組合物，包含：（i)第一群體的合成納米載體和（ii) 第二群體的合成納米載體，這些第一群體的合成納米載體與免疫抑制劑偶聯(lián)，這些第二群 體的合成納米載體與一種抗原的B細(xì)胞表位和/或MHC II類限制性表位偶聯(lián)。
8. 如權(quán)利要求7所述的組合物，其中該組合物是如在權(quán)利要求1-3中任一項所定義的。
9. 如權(quán)利要求1-3和5中任一項所述的組合物或如權(quán)利要求4所述的劑型，供在治療 或預(yù)防中使用。
10. 如權(quán)利要求1-3和5中任一項所述的組合物、或如權(quán)利要求4所述的劑型用于在受 試者中促進(jìn)一種致耐受性免疫應(yīng)答或產(chǎn)生抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞中使用。
11. 如權(quán)利要求1-3和5中任一項所述的組合物、或如權(quán)利要求4所述的劑型用于制造 一種藥劑的用途，該藥劑用于在受試者中促進(jìn)一種致耐受性免疫應(yīng)答或產(chǎn)生抗原特異性調(diào) 節(jié)性B細(xì)胞中使用。
12. -種包含如權(quán)利要求5-10中任一項所述的組合物的劑型。
13. -種方法，包括： (i) 產(chǎn)生第一群體的合成納米載體，這些第一群體的合成納米載體與免疫抑制劑偶聯(lián)， 并且 (ii) 產(chǎn)生第二群體的合成納米載體，這些第二群體的合成納米載體與一種抗原的B細(xì) 胞表位和/或MHC II類限制性表位偶聯(lián)，其中該組合物處于在受試者中有效產(chǎn)生抗原特異 性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的量。
14. 如權(quán)利要求13所述的方法，其中該第一群體和第二群體是相同的群體。
15. 如權(quán)利要求13或14所述的方法，其中該方法進(jìn)一步包括制造一種包含這些第一群 體和第二群體的合成納米載體的劑型。
16. 如權(quán)利要求13-15中任一項所述的方法，其中該方法進(jìn)一步包括制造一種包含這 些第一群體和第二群體的合成納米載體的組合物、或可供受試者給予的劑型。
17. 如權(quán)利要求13-16中任一項所述的方法，其中該方法進(jìn)一步包括評定使用一種包 含這些第一群體和第二群體的合成納米載體的組合物的抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的產(chǎn)生。
18. 如權(quán)利要求13-17中任一項所述的方法，其中產(chǎn)生的這些第一群體和第二群體的 合成納米載體是如在權(quán)利要求1-3中任一項所定義的。
19. 一種用于生產(chǎn)一種組合物或劑型的工藝，該工藝包括以下步驟： (i)將第一群體的合成納米載體與免疫抑制劑偶聯(lián)，并且 (ii)將第二群體的合成納米載體與一種抗原的B細(xì)胞表位和/或MHC II類限制性表 位偶聯(lián)，其中該組合物或劑型處于在受試者中有效產(chǎn)生調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的量。
20. 如權(quán)利要求19所述的工藝，該工藝包括如在權(quán)利要求13-18中任一項所述的方法 中所定義的步驟。
21. -種通過如權(quán)利要求13-20中任一項所述的方法或工藝可獲得的組合物或劑型。
【專利摘要】在此披露了合成納米載體方法、以及有關(guān)組合物，這些組合物包含B細(xì)胞表位和/或MHC II類限制性表位以及免疫抑制劑，以便產(chǎn)生致耐受性免疫應(yīng)答，如產(chǎn)生抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞。
【IPC分類】A61P37-06, A61K9-14, A61K39-385, A61K47-48, A61K45-00
【公開號】CN104623666
【申請?zhí)枴緾N201410795620
【發(fā)明人】羅伯托·A·馬爾多納多
【申請人】西萊克塔生物科技公司
【公開日】2015年5月20日
【申請日】2012年4月27日
【公告號】CA2834514A1, CA2834519A1, CA2834527A1, CA2834532A1, CA2834533A1, CA2834534A1, CA2834571A1, CA2834599A1, CA2834619A1, CN103491957A, CN103501786A, CN103501787A, CN103501812A, CN103501813A, CN103501820A, CN103517707A, CN103517716A, CN103533935A, EP2701705A2, EP2701705A4, EP2701706A2, EP2701706A4, EP2701737A1, EP2701737A4, EP2701738A2, EP2701738A4, EP2701739A1, EP2701739A4, EP2704693A1, EP2704693A4, EP2704714A2, EP2704714A4, EP2704715A2, EP2704715A4, EP2704750A2, EP2704750A4, US8652487, US20120276109, US20120276133, US20120276134, US20120276155, US20120276156, US20120276157, US20120276158, US20120276159, US20120276160, US20120294888, US20120301498, US20120301510, US20140199340, WO2012149247A2, WO2012149247A3, WO2012149252A2, WO2012149252A3, WO2012149255A2, WO2012149255A3, WO2012149259A1, WO2012149265A2, WO2012149265A3, WO2012149268A1, WO2012149268A8, WO2012149282A2, WO2012149282A3, WO2012149301A2, WO2012149301A3, WO2012149393A2, WO2012149393A3, WO2012149393A9, WO2012149405A2, WO2012149405A3, WO2012149411A1, WO2012149454A2, WO2012149454A3