用于誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性b細(xì)胞的致耐受性合成納米載體的制作方法
【專(zhuān)利說(shuō)明】用于誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的致耐受性合成納米載體
[0001] 本申請(qǐng)是申請(qǐng)?zhí)枮?01280020407.X、發(fā)明名稱(chēng)為"用于誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的致耐 受性合成納米載體"的申請(qǐng)的分案申請(qǐng)，該母案申請(qǐng)是2012年4月27日提交的PCT申請(qǐng) PCT/US2012/035431進(jìn)入中國(guó)國(guó)家階段的申請(qǐng)。
[0002] 相關(guān)申請(qǐng)
[0003] 本申請(qǐng)根據(jù)美國(guó)法典第35篇第119條要求2011年4月29日提交的美國(guó)臨時(shí)申 請(qǐng)61/480,946、2011年7月29日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)61/513,514、2011年9月6日提交的 美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)61/531，147、2011年9月6日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)61/531，153、2011年9月 6日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)61/531，164、2011年9月6日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)61/531，168、 2011年9月6日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)61/531，175、2011年9月6日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng) 61/531，180、2011年9月6日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)61/531，194、2011年9月6日提交的美 國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)61/531，204、2011年9月6日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)61/531，209、2011年9月6 日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)61/531，215的權(quán)益，這些臨時(shí)申請(qǐng)各自的全部?jī)?nèi)容通過(guò)引用結(jié)合 在此。 發(fā)明領(lǐng)域
[0004] 本發(fā)明涉及給予具有免疫抑制劑和一種抗原的B細(xì)胞表位和/或MHCII類(lèi)限制 性表位的合成納米載體組合物的方法，其中這些組合物可以產(chǎn)生調(diào)節(jié)性B細(xì)胞；以及有關(guān) 組合物。這些方法允許通過(guò)APC有效攝取來(lái)使免疫應(yīng)答向有利于對(duì)抗原特異的調(diào)節(jié)性B細(xì) 胞發(fā)展的方向轉(zhuǎn)變。
[0005] 發(fā)明背景
[0006] 用于產(chǎn)生與所不希望的免疫應(yīng)答相關(guān)聯(lián)的免疫抑制的常規(guī)策略是基于廣泛作用 的免疫抑制性藥物。另外，為了維持免疫抑制，免疫抑制劑藥物療法通常是一個(gè)終生的命 題。令人遺憾的是，使用廣泛作用的免疫抑制劑與嚴(yán)重副作用（如腫瘤、感染、腎毒性以及 代謝紊亂）的風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)聯(lián)。因此，新的免疫抑制劑療法將是有益的。
[0007] 發(fā)明概述
[0008] 在一方面，提供了一種包括向受試者給予一種組合物的方法，該組合物包含：（i) 第一群體的合成納米載體和（ii)第二群體的合成納米載體，這些第一群體的合成納米載 體與免疫抑制劑偶聯(lián)，這些第二群體的合成納米載體與一種抗原的B細(xì)胞表位和/或MHC II類(lèi)限制性表位偶聯(lián)。在另一方面，提供了一種包括通過(guò)給予一種組合物而在受試者中產(chǎn) 生抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的方法，該組合物包含：（i)第一群體的合成納米載體和（ii) 第二群體的合成納米載體，這些第一群體的合成納米載體與免疫抑制劑偶聯(lián)，這些第二群 體的合成納米載體與一種抗原的B細(xì)胞表位和/或MHCII類(lèi)限制性表位偶聯(lián)。在另一方 面，提供了一種包括根據(jù)一個(gè)治療方案向受試者給予一種組合物的方法，該治療方案先前 已經(jīng)顯示在一個(gè)或多個(gè)測(cè)試受試者中產(chǎn)生抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞；其中該組合物包含： (i)第一群體的合成納米載體和（ii)第二群體的合成納米載體，這些第一群體的合成納米 載體與免疫抑制劑偶聯(lián)，這些第二群體的合成納米載體與一種抗原的B細(xì)胞表位和/或MHC II類(lèi)限制性表位偶聯(lián)。在一個(gè)實(shí)施例中，該組合物處于在受試者中有效產(chǎn)生抗原特異性調(diào) 節(jié)性B細(xì)胞的量。在另一個(gè)實(shí)施例中，該組合物處于在受試者中有效產(chǎn)生抗原特異性調(diào)節(jié) 性B細(xì)胞的量。
[0009] 在一個(gè)實(shí)施例中，該第一群體和該第二群體是相同的群體。在另一個(gè)實(shí)施例中，該 第一群體和第二群體是不同的群體。
[0010] 在另一個(gè)實(shí)施例中，該方法進(jìn)一步包括提供或鑒定受試者。
[0011] 在另一個(gè)實(shí)施例中，該抗原是一種治療性蛋白、一種自身抗原或一種過(guò)敏原，或與 一種炎性疾病、一種自身免疫性疾病、器官或組織排斥、或移植物抗宿主病相關(guān)聯(lián)。
[0012] 在另一個(gè)實(shí)施例中，該方法進(jìn)一步包括在給予該組合物之前和/或之后評(píng)定受試 者中的抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的產(chǎn)生。
[0013] 在另一個(gè)實(shí)施例中，該受試者具有或正處于具有一種炎性疾病、一種自身免疫性 疾病、一種過(guò)敏癥、器官或組織排斥、或移植物抗宿主病的風(fēng)險(xiǎn)中。在另一個(gè)實(shí)施例中，該受 試者已經(jīng)歷或?qū)⒁?jīng)歷移植。在另一個(gè)實(shí)施例中，該受試者具有或正處于具有針對(duì)一種治 療性蛋白的所不希望的免疫應(yīng)答的風(fēng)險(xiǎn)中，該治療性蛋白是正被給予或?qū)⒁唤o予該受試 者的。
[0014] 在另一個(gè)實(shí)施例中，向該受試者給予一個(gè)或多個(gè)維持劑量的包含該第一群體和第 二群體的合成納米載體的組合物。
[0015] 在另一個(gè)實(shí)施例中，該給予是通過(guò)靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、透粘膜、經(jīng)口、皮下、肺部、鼻 內(nèi)、皮內(nèi)或肌肉內(nèi)給予而進(jìn)行的。在另一個(gè)實(shí)施例中，該給予是通過(guò)吸入或靜脈內(nèi)、皮下或 透粘膜給予而進(jìn)行的。
[0016] 在另一個(gè)實(shí)施例中，該方法進(jìn)一步包括給予一種可移植的移植物或治療性蛋白。 在另一個(gè)實(shí)施例中，當(dāng)該治療性蛋白作為一個(gè)或多個(gè)單元被提供時(shí)，該可移植的移植物或 治療性蛋白的給予是通過(guò)腸胃外、動(dòng)脈內(nèi)、鼻內(nèi)或靜脈內(nèi)給予或通過(guò)注射至淋巴結(jié)或眼前 房或通過(guò)局部給予至感興趣的器官或組織而進(jìn)行的。
[0017] 在另一個(gè)實(shí)施例中，該方法進(jìn)一步包括收集所產(chǎn)生的這些抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì) 胞。
[0018] 在另一個(gè)實(shí)施例中，這些免疫抑制劑包括一種抑制素、一種mTOR抑制劑、一種 TGF-0信號(hào)劑、一種皮質(zhì)類(lèi)固醇、一種線粒體功能抑制劑、一種P38抑制劑、一種NF-K0抑 制劑、一種腺苷受體激動(dòng)劑、一種前列腺素E2激動(dòng)劑、一種磷酸二酯酶4抑制劑、一種HDAC 抑制劑或一種蛋白酶體抑制劑。在另一個(gè)實(shí)施例中，該mTOR抑制劑是雷帕霉素或一種雷帕 霉素類(lèi)似物。
[0019] 在另一個(gè)實(shí)施例中，平均在這些第一和/或第二群體的合成納米載體上的免疫抑 制劑和/或抗原的負(fù)載是在〇. 0001 %與50%之間（重量/重量）。在另一個(gè)實(shí)施例中，平均 在這些第一和/或第二群體的合成納米載體上的免疫抑制劑和/或抗原的負(fù)載是在0. 1% 與10%之間（重量/重量）。
[0020] 在另一個(gè)實(shí)施例中，該第一群體和/或第二群體的合成納米載體包括脂質(zhì)納米 顆粒、聚合物納米顆粒、金屬納米顆粒、基于表面活性劑的乳液、樹(shù)枝狀化合物、巴基球 (buckyball)、納米線、病毒樣顆?；螂幕虻鞍踪|(zhì)顆粒。在另一個(gè)實(shí)施例中，該第一群體和/ 或第二群體的合成納米載體包括脂質(zhì)納米顆粒。在另一個(gè)實(shí)施例中，該第一群體和/或第 二群體的合成納米載體包括脂質(zhì)體。在另一個(gè)實(shí)施例中，該第一群體和/或第二群體的合 成納米載體包括金屬納米顆粒。在另一個(gè)實(shí)施例中，這些金屬納米顆粒包括金納米顆粒。在 另一個(gè)實(shí)施例中，該第一群體和/或第二群體的合成納米載體包括聚合物納米顆粒。在另 一個(gè)實(shí)施例中，該聚合物納米顆粒包含聚合物，該聚合物是一種非甲氧基封端的普朗尼克 聚合物。在另一個(gè)實(shí)施例中，這些聚合物納米顆粒包含聚酯、與一種聚醚偶聯(lián)的聚酯、聚氨 基酸、聚碳酸酯、聚縮醛、聚縮酮、多糖、聚乙基噁唑啉、或聚乙烯亞胺。在另一個(gè)實(shí)施例中， 聚酯包括聚（乳酸）、聚（乙醇酸）、聚（乳酸-乙醇酸）共聚物或聚己酸內(nèi)酯。在另一個(gè) 實(shí)施例中，這些聚合物納米顆粒包含聚酯和與聚醚偶聯(lián)的聚酯。在另一個(gè)實(shí)施例中，該聚醚 包括聚乙二醇或聚丙二醇。
[0021] 在另一個(gè)實(shí)施例中，使用對(duì)該第一和/或第二群體的合成納米載體進(jìn)行的動(dòng)態(tài)光 散射而獲得的粒度分布的平均值是大于IOOnm的直徑。在另一個(gè)實(shí)施例中，該直徑大于 150nm。在另一個(gè)實(shí)施例中，該直徑大于200nm。在另一個(gè)實(shí)施例中，該直徑大于250nm。在 另一個(gè)實(shí)施例中，該直徑大于300nm。在另一個(gè)實(shí)施例中，該第一群體和/或第二群體的合 成納米載體的長(zhǎng)寬比大于1 : 1、1 : 1.2、1 : 1.5、1 : 2、1 : 3、1 : 5、1 : 7或1 : 10。
[0022] 在另一個(gè)實(shí)施例中，該方法進(jìn)一步包括制造一種劑型，該劑型包含收集的這些抗 原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞。在另一個(gè)實(shí)施例中，該方法進(jìn)一步包括制造可供受試者給予的這 些收集的抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞或劑型。
[0023] 在另一個(gè)實(shí)施例中，這些第二群體的合成納米載體還與包含MHCI限制性表位的 抗原偶聯(lián)。
[0024] 在另一方面，提供了一種組合物，該組合物包含根據(jù)在此提供的任何方法產(chǎn)生的 分離的抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞。
[0025] 在另一個(gè)實(shí)施例中，該組合物進(jìn)一步包含一種藥學(xué)上可接受的賦形劑。
[0026] 在另一方面，提供了一種包含在此提供的任何這些組合物的劑型。
[0027] 在另一方面，提供了一種組合物，該組合物包含供在治療或預(yù)防中使用的分離的 抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞，所述分離的抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞通過(guò)一種工藝可獲得，該工 藝包括以下步驟：(a)通過(guò)給予一種組合物而在受試者中產(chǎn)生抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞，該 組合物包含（i)第一群體的合成納米載體和（ii)第二群體的合成納米載體，這些第一種群 體的合成納米載體與免疫抑制劑偶聯(lián)，這些第二群體的合成納米載體與一種抗原的B細(xì)胞 表位和/或MHCII類(lèi)限制性表位偶聯(lián)；并且（b)收集所產(chǎn)生的這些抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì) 胞。在一個(gè)實(shí)施例中，該組合物是在此提供的或所提供的任何這些方法中使用的任何組合 物。
[0028] 在另一方面，提供了一種供在治療或預(yù)防中使用的組合物，該組合物包含：（i)第 一群體的合成納米載體和（ii)第二群體的合成納米載體，這些第一群體的合成納米載體 與免疫抑制劑偶聯(lián)，這些第二群體的合成納米載體與一種抗原的B細(xì)胞表位和/或MHCII 類(lèi)限制性表位偶聯(lián)。在一個(gè)實(shí)施例中，該組合物是在此提供的或所提供的任何方法中使用 的任何組合物。
[0029] 在另一方面，所提供的任何組合物都可以供在治療或預(yù)防中使用。
[0030] 在另一方面，所提供的任何組合物可以用于在受試者中促進(jìn)一種致耐受性免疫應(yīng) 答或產(chǎn)生抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞中使用。
[0031] 在另一方面，提供了一種所提供的任何組合物或劑型用于制造一種藥劑的用途， 該藥劑用于在受試者中促進(jìn)一種致耐受性免疫應(yīng)答或產(chǎn)生抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞中使 用。
[0032] 在另一個(gè)實(shí)施例中，該組合物進(jìn)一步包含一種可移植的移植物或治療性蛋白。
[0033] 在另一方面，提供了一種包含所提供的任何組合物的劑型。
[0034] 在另一方面，提供了一種方法，該方法包括：（i)產(chǎn)生第一群體的合成納米載體和 (ii)產(chǎn)生第二群體的合成納米載體，這些第一群體的合成納米載體與免疫抑制劑偶聯(lián)，這 些第二群體的合成納米載體與一種抗原的B細(xì)胞表位和/或MHCII類(lèi)限制性表位偶聯(lián)。在 一個(gè)實(shí)施例中，該組合物處于在受試者中有效產(chǎn)生抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的量。在另一 個(gè)實(shí)施例中，該第一群體和第二群體是相同的群體。在另一個(gè)實(shí)施例中，該第一群體和第二 群體是不同的群體。
[0035] 在另一個(gè)實(shí)施例中，該方法進(jìn)一步包括制造一種包含該第一群體和第二群體的合 成納米載體的劑型。
[0036] 在另一個(gè)實(shí)施例中，該方法進(jìn)一步包括制造一種包含該第一群體和第二群體的合 成納米載體的組合物、或可供受試者給予的劑型。
[0037] 在另一個(gè)實(shí)施例中，該方法進(jìn)一步包括對(duì)使用一種包含該第一群體和第二群體的 合成納米載體的組合物的抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的產(chǎn)生進(jìn)行評(píng)定。
[0038] 在另一個(gè)實(shí)施例中，產(chǎn)生的該第一群體和第二群體的合成納米載體是如在此提供 的任何這些組合物和方法中所定義的。
[0039] 在另一方面，提供了一種用于生產(chǎn)組合物或劑型的工藝，該工藝包括以下步驟： (i)將第一群體的合成納米載體與免疫抑制劑偶聯(lián)，并且（ii)將第二群體的合成納米載體 與一種抗原的B細(xì)胞表位和/或MHCII類(lèi)限制性表位偶聯(lián)。在一個(gè)實(shí)施例中，該組合物或 劑型處于在受試者中有效產(chǎn)生調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的量。在一個(gè)實(shí)施例中，這些步驟如在此提供 的任何方法中所定義。
[0040] 在另一方面，提供了一種通過(guò)在此提供的任何這些方法或工藝可獲得的組合物或 劑型。
[0041] 在另一個(gè)實(shí)施例中，該方法進(jìn)一步包括使一種可移植的移植物或治療性蛋白包括 有這些收集的抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞或劑型。
[0042] 在另一個(gè)實(shí)施例中，所提供的任何這些組合物或方法的該第一和/或第二群體的 合成納米載體還與MHCI類(lèi)限制性表位偶聯(lián)。在此提供的任何這些組合物和方法的一個(gè)實(shí) 施例中，這些抗原基本上不包含MHCI類(lèi)限制性表位。
[0043] 在此提供的任何這些組合物和方法的一個(gè)實(shí)施例中，作為包含以上提到的這些表 位的蛋白質(zhì)的抗原可以與這些合成納米載體偶聯(lián)。在另一個(gè)實(shí)施例中，包含以上提到的這 些表位、但包含位于這一個(gè)或多個(gè)表位的一端或兩端側(cè)面的另外氨基酸的多肽或肽可以與 這些合成納米載體偶聯(lián)。在另一個(gè)實(shí)施例中，這些表位本身與這些合成納米載體偶聯(lián)。
[0044] 附圖簡(jiǎn)要說(shuō)明
[0045] 圖1提供了Treg細(xì)胞的流式細(xì)胞檢測(cè)分析的一個(gè)代表性實(shí)例。
[0046] 圖2證明了本發(fā)明的合成納米載體產(chǎn)生更高比例的抗原特異性Bregs。
[0047] 圖3顯示了使用本發(fā)明的合成納米載體使得IgE產(chǎn)生減少。
[0048] 發(fā)明詳細(xì)說(shuō)明
[0049] 在詳細(xì)描述本發(fā)明之前，應(yīng)當(dāng)理解本發(fā)明不局限于具體舉例說(shuō)明的材料或工藝參 數(shù)，因?yàn)檫@些當(dāng)然可以變化。還應(yīng)當(dāng)理解在此使用的術(shù)語(yǔ)只是為了描述本發(fā)明的具體實(shí)施 例的目的，并不旨在限制使用可替代的術(shù)語(yǔ)來(lái)描述本發(fā)明。
[0050] 無(wú)論在前或在后，在此引用的所有公開(kāi)物、專(zhuān)利以及專(zhuān)利申請(qǐng)，出于所有目的特此 通過(guò)引用以其全文結(jié)合在此。
[0051] 如在本說(shuō)明書(shū)和所附權(quán)利要求中所使用，單數(shù)形式"一個(gè)（種）（a，an)"和"該 (the)"包括復(fù)數(shù)指代物，除非內(nèi)容另外明確表明。例如，提及的"一種聚合物"包括兩種或 更多種此類(lèi)分子的混合物或不同分子量的單個(gè)聚合物種類(lèi)的混合物；提及的"一種合成納 米載體"包括兩種或更多種此類(lèi)合成載體的混合物或多個(gè)此類(lèi)合成納米載體；提及的"一種 DNA分子"包括兩種或更多種此類(lèi)DNA分子的混合物或多個(gè)此類(lèi)DNA分子；提及的"一種免 疫抑制劑"包括兩種或更多種此類(lèi)物質(zhì)的混合物或多個(gè)免疫抑制劑分子；諸如此類(lèi)。
[0052] 如在此所使用，術(shù)語(yǔ)"包括（comprise) "或其變體，如"包括（comprises) "或"包 括（comprising) "意在表明包括任何列舉的整體（例如，一個(gè)特點(diǎn)、要素、特征、特性、方法/ 工藝步驟或限制）或整體的組（例如，多個(gè)特點(diǎn)、多個(gè)要素、多個(gè)特征、多個(gè)特性、多種方法 /多個(gè)工藝步驟或多個(gè)限制），但是不排除任何其他整體或整體的組。因此，如在此所使用， 術(shù)語(yǔ)"包括"是包含性的但是不排除另外的、未列舉的整體或方法/工藝步驟。
[0053] 在此處提供的任何這些組合物和方法的多個(gè)實(shí)施例中，"包括"可用"基本上 由......組成（consistingessentiallyof) " 或"由......組成（consistingof) " 來(lái) 替代。短語(yǔ)"基本上由......組成"在此用來(lái)要求限定的一個(gè)或多個(gè)整體或步驟以及不實(shí) 質(zhì)上影響所要求的發(fā)明的特征或功能的那些。如在此所使用，術(shù)語(yǔ)"組成（consisting)"用 來(lái)表明僅存在所列舉的整體（例如，一個(gè)特點(diǎn)、要素、特征、特性、方法/工藝步驟或限制） 或整體的組（例如，多個(gè)特點(diǎn)、多個(gè)要素、多個(gè)特征、多個(gè)特性、多種方法/多個(gè)工藝步驟或 多個(gè)限制）。
[0054] A?前言
[0055] 經(jīng)由包含B細(xì)胞表位和/或MHCII類(lèi)限制性表位的合成納米載體組合物將免疫 抑制劑和抗原更直接地遞送在感興趣的細(xì)胞（特別是APC)中的作用位點(diǎn)處可以刺激調(diào)節(jié) 性B細(xì)胞并且產(chǎn)生對(duì)這些抗原特異的有益的致耐受性免疫應(yīng)答。如實(shí)例中所示，已發(fā)現(xiàn)合 成納米載體組合物有效產(chǎn)生⑶24+B細(xì)胞，這些B細(xì)胞產(chǎn)生IL-10和TGF- 0并且還識(shí)別提 及該應(yīng)答的抗原特異性的抗原。另外，已發(fā)現(xiàn)相同的合成納米載體組合物減少I(mǎi)gE產(chǎn)生，這 提示是調(diào)節(jié)性B細(xì)胞產(chǎn)生的一種下游結(jié)果。不受任何具體理論束縛，所提供的組合物可以 提供直接由表位的識(shí)別所造成的致耐受性免疫效應(yīng)，這可以導(dǎo)致調(diào)節(jié)性細(xì)胞的產(chǎn)生、B細(xì)胞 向調(diào)節(jié)性表型轉(zhuǎn)換等等。致耐受性免疫應(yīng)答還可以是細(xì)胞因子的產(chǎn)生和/或由此類(lèi)細(xì)胞因 子刺激的其他調(diào)節(jié)性免疫細(xì)胞的產(chǎn)生的結(jié)果。調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的產(chǎn)生還可以導(dǎo)致下游致耐受 性效應(yīng)。例如，調(diào)節(jié)性B細(xì)胞可以降低效應(yīng)T細(xì)胞（如CD4+T細(xì)胞）的增殖能力、和/或增 加FoxP3和CTLA-4在調(diào)節(jié)性T細(xì)胞中的表達(dá)。調(diào)節(jié)性B細(xì)胞還可以產(chǎn)生調(diào)節(jié)性細(xì)胞因子 IL-10。在多個(gè)實(shí)施例中，在此提供的抗原特異性itDC可以例如對(duì)受試者具有這些效應(yīng)。
[0056] 此類(lèi)調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的產(chǎn)生證明了本發(fā)明的組合物產(chǎn)生抗原特異性致耐受性免疫 應(yīng)答的能力，這些抗原特異性致耐受性免疫應(yīng)答可以在多種疾病、紊亂或病癥的治療或預(yù) 防中具有效用。因此，本發(fā)明對(duì)例如促進(jìn)具有或正處于具有過(guò)敏癥、自身免疫性疾病、炎性 疾病、器官或組織排斥、或移植物抗宿主病的風(fēng)險(xiǎn)中的受試者中的致耐受性免疫應(yīng)答是有 用的。本發(fā)明還對(duì)促進(jìn)已經(jīng)經(jīng)歷或?qū)⒁?jīng)歷移植的受試者中的致耐受性免疫應(yīng)答是有用 的。本發(fā)明還對(duì)促進(jìn)以下受試者中的致耐受性免疫應(yīng)答是有用的，這些受試者已經(jīng)接受、正 在接受或?qū)⒁邮芤环N治療性蛋白，針對(duì)該治療性蛋白，會(huì)產(chǎn)生或預(yù)期會(huì)產(chǎn)生所不希望的 免疫應(yīng)答。在一些實(shí)施例中，本發(fā)明防止或抑制了所不希望的免疫應(yīng)答，這些所不希望的免 疫應(yīng)答可以中和某些治療性處理的有益作用。
[0057] 本發(fā)明的諸位發(fā)明人已經(jīng)意外地并且令人驚訝地發(fā)現(xiàn)，通過(guò)實(shí)踐在此披露的本發(fā) 明，可以克服以上指出的問(wèn)題和限制。具體地說(shuō)，諸位發(fā)明人已經(jīng)意外地發(fā)現(xiàn)，提供通過(guò)增 加調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的數(shù)目和/或活性來(lái)誘導(dǎo)一種致耐受性免疫應(yīng)答的合成納米載體組合物和 有關(guān)方法是有可能的。在此描述的方法包括向受試者給予一種組合物，該組合物包含：（i) 第一群體的合成納米載體和（ii)第二群體的合成納米載體，這些第一群體的合成納米載 體與免疫抑制劑偶聯(lián)，這些第二群體的合成納米載體與一種抗原的B細(xì)胞表位和/或MHC II類(lèi)限制性表位偶聯(lián)。優(yōu)選地，該組合物處于在受試者中有效實(shí)現(xiàn)抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì) 胞增殖和/或活性的量。在另一方面，提供了一種包括通過(guò)給予一種組合物而在受試者中 產(chǎn)生抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的方法，該組合物包含：（i)第一群體的合成納米載體和（ii) 第二群體的合成納米載體，這些第一群體的合成納米載體與免疫抑制劑偶聯(lián)，這些第二群 體的合成納米載體與一種抗原的B細(xì)胞表位和/或MHCII類(lèi)限制性表位偶聯(lián)。在另一方 面，提供了一種包括根據(jù)一種治療方案向受試者給予一種組合物的方法，該治療方案先前 已經(jīng)顯示在一個(gè)或多個(gè)測(cè)試受試者中產(chǎn)生抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞，其中該組合物包含： (i)第一群體的合成納米載體和（ii)第二群體的合成納米載體，這些第一群體的合成納米 載體與免疫抑制劑偶聯(lián)，這些第二群體的合成納米載體與一種抗原的B細(xì)胞表位和/或MHC II類(lèi)限制性表位偶聯(lián)。
[0058] 還可以向在此所提供的這些受試者給予可移植的移植物、治療性蛋白等等?？梢?在給予這些第一和第二群體的合成納米載體之前、與此同時(shí)或在此之后向受試者給予此類(lèi) 組合物。這類(lèi)另外的藥劑可以與或可以不與這些第一或第二群體的合成納米載體或另一群 體的合成納米載體偶聯(lián)。在多個(gè)實(shí)施例中，提供的這些組合物還可以作為一個(gè)或多個(gè)維持 劑量向受試者給予。在此類(lèi)實(shí)施例中，給予所提供的這些組合物，使得維持所希望的免疫應(yīng) 答的產(chǎn)生或降低所不希望的免疫應(yīng)答的產(chǎn)生持續(xù)一定長(zhǎng)度的時(shí)間。在此在其他地方提供了 此類(lèi)長(zhǎng)度的時(shí)間的例子。
[0059] 在另一方面，提供了一種組合物，該組合物包含根據(jù)所提供的任何方法產(chǎn)生的分 離的抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞。在又另一個(gè)方面，還提供了包含這些第一群體和第二群體 的合成納米載體的這些組合物。在多個(gè)實(shí)施例中，這些組合物進(jìn)一步包含一種可移植的移 植物或一種治療性蛋白，這些可移植的移植物或治療性蛋白可以與或可以不與這些第一或 第二群體的合成納米載體或另一群體的合成納米載體偶聯(lián)。
[0060] 在另一方面，提供了在此的任何這些組合物的多種劑型。可以將此類(lèi)劑型給予受 試者，例如對(duì)抗原特異性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞產(chǎn)生有需要的受試者。
[0061] 在又另一方面，提供了一種方法，該方法包括：（i)產(chǎn)生第一群體的合成納米載體 并且（ii)產(chǎn)生第二群體的合成納米載體，這些第一群體的合成納米載體與免疫抑制劑偶 聯(lián)，這些第二群體的合成納米載體與一種抗原的B細(xì)胞表位和/或MHCII類(lèi)限制性表位偶 聯(lián)。在一個(gè)實(shí)施例中，該方法進(jìn)一步包括生產(chǎn)一種包含這些第一和第二群體