一種抗肝癌的中藥有效部位組合物的制備方法
【技術領域】
[0001 ] 本發(fā)明涉及一種抗肝癌的中藥有效部位組合物的制備方法。
【背景技術】
[0002] 肝癌具有起病隱匿、進展迅速、預后較差、生存期較短的特點，統(tǒng)計資料表明，肝癌 發(fā)病率占所有腫瘤疾病的5 %，每年全球約有26萬新發(fā)病例，但5年生存率卻不足5 %。作 為肝癌高發(fā)國之一的中國，肝癌死亡率近20年來甚至呈上升趨勢，嚴重威脅我國人民的健 康。
[0003] 目前西醫(yī)治療肝癌除手術切除外，主要采用介入治療和化療，但即使根治性切除， 5年內(nèi)仍有60%?70%的復發(fā)率；另外由于肝癌的體積、病灶的部位、肝外轉移及肝炎、肝 硬化的肝功能限制等原因，使得可以外科手術切除的肝癌病人約占30%，而患有肝硬化的 病人可手術率僅為15%?30%。由于目前化療藥物選擇性不高，在殺傷腫瘤細胞的同時， 對機體的正常細胞也有殺傷作用；還有誘發(fā)繼發(fā)性腫瘤和多藥耐藥性的危險，這些因素嚴 重限制化療藥物的臨床使用。
[0004] 中醫(yī)藥作為肝癌綜合治療的重要手段之一，因其顯著的臨床療效，在肝癌等諸多 癌癥的治療中發(fā)揮著無可替代的作用。但中藥產(chǎn)品傳統(tǒng)分離提純工藝具有雜質(zhì)多、服用量 大、顏色深等缺點，嚴重阻礙了中藥其產(chǎn)品的應用和推廣。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所要解決得技術問題是提供一種抗肝癌的中藥有效部位組合物的制備方 法，本發(fā)明采用壓差式提取結合多級膜分離濃縮制備抗肝癌中藥提取組合物并利用吸附樹 脂柱分離精制有效部位，有效的去除了大部分雜質(zhì)并在保證療效的基礎上降低了患者的服 藥量，為中藥的發(fā)展及生產(chǎn)提供了新思路。該有效部位可清熱解毒，活血化瘀，疏肝解郁，健 脾補腎，抑制腫瘤生長。
[0006] 為了解決上述問題，本發(fā)明所采用的技術方案是：
[0007] 一種抗肝癌的中藥有效部位組合物的制備方法，包括如下步驟：
[0008] (1)原料藥配制：按如下重量百分比的組分進行配制：葉下珠5-30%，苦參 5-20 %，溪黃草5-30 %，三七4-10 %，丹參5-25 %，桃仁4-15 %，柴胡4-10 %，女貞子 5-25 %，旱連草5-25 %，太子參2-25 %，甘草2-10 % ;
[0009] (2)制備方法：采用壓差式提取與多級膜分離濃縮組合提取，最后用柱分離精制。 [0010] 在上述抗肝癌的中藥有效部位組合物的制備方法中，步驟（2)所述壓差式提取是 指使用壓差式提取器進行提取，所述壓差式提取器是指專利號為200420102481. 9的中國 實用新型專利所記載的壓差式提取器。
[0011] 在上述抗肝癌的中藥有效部位組合物的制備方法中，所述多級膜分離濃縮是指微 濾與反滲透的組合。
[0012] 在上述抗肝癌的中藥有效部位組合物的制備方法中，所述柱分離精制是指吸附樹 脂柱分咼。
[0013] 在上述抗肝癌的中藥有效部位組合物的制備方法中，包括如下步驟：
[0014] (1)將原料藥切段，粉碎，加入5?15倍重量的50%乙醇，勻衆(zhòng)，離心，得到離心液 和離心渣，離心渣再用5?15倍重量的50%的乙醇，攪拌，離心，得到離心液和離心渣，棄去 離心渣，合并兩次離心液；
[0015] (2)將步驟（1)制得的離心液依次經(jīng)500nm無機陶瓷膜微濾，然后先反滲透濃縮至 相當于每升濃縮液中含〇. 8?I. 2kg原料藥，再回收乙醇并真空濃縮成相當于每升浸膏中 含1. 5?2kg原料藥的濃縮液；
[0016] (3)將步驟（2)所得濃縮液離心得到離心液和離心渣，離心渣加純水洗3遍并分別 離心，將所有離心清液合并濃縮即得到抗肝癌中藥有效部位組合物1號，實驗結束后所剩 下的離心渣置0?l〇°C下低溫避光保存；
[0017] (4)以步驟（3)所得的抗肝癌中藥有效部位組合物1號作為待純化材料，利用 AB-8大孔樹脂裝柱并對抗肝癌中藥有效部位組合物1號進行吸附，然后依次用的水、15 % 乙醇、30%乙醇、60%乙醇和95%乙醇進行洗脫并收集洗脫液；
[0018] (5)將15%醇洗脫和30%醇洗脫部分合并，得抗肝癌中藥有效部位組合物2號， 將60%醇洗脫、95%醇洗脫部分和步驟（3)低溫避光保存的離心渣合并，得抗肝癌中藥有 效部位組合物3號。
【附圖說明】
[0019] 圖1為實施例1的工藝流程圖。
【具體實施方式】
[0020] 本文列舉的說明發(fā)明原則的任何附加的應用，都涉及到相關領域的技術和對這些 公開材料的擁有權，都被認為是包括在本發(fā)明所涉及的權利要求的范圍內(nèi)的。
[0021] 為更好的理解本發(fā)明的基本原理，我們將通過以下實施案例對本發(fā)明的原理進行 具體闡述。下列各項描述，能使本技術領域的其他人在各種不同的情況下應用本發(fā)明，用各 種不同的修正去適應預期不同的應用。
[0022] 實施步驟（1)時，壓差提取的條件為控制壓差0. 1?15MPa，溫度室溫以下，最佳為 20 ?25?。
[0023] 實施步驟（2)時，一般是采用切向流過濾方式，濾材可選用無機陶瓷膜、聚砜膜或 聚偏二氟乙烯膜等，過濾精度SOOnm以下，最佳選200?500nm。膜濃縮溫度控制25°C以下， 最佳為20?25°C;濃縮程度一般為藥材量的50?300%，最好為80?120%。真空濃縮采 用真空條件下的加熱蒸發(fā)濃縮方式，真空度控制在0. 〇9MPa以上，料液溫度控制55°C以下。
[0024] 實施步驟⑷時，吸附柱填料可以選中等極性大孔樹脂，優(yōu)選AB-8大孔樹脂。洗 脫溶劑可選水、不同濃度的乙醇水溶液，濃度一般為5 %?95 %。大孔樹脂柱分離是本發(fā)明 制備抗肝癌中藥復方提取物有效部位的關鍵步驟之一。
[0025] 下述醇的百分數(shù)為體積百分數(shù)。
[0026] 實施例1 :
[0027] 原料（重量百分數(shù)）：
[0028] 葉下珠5%，苦參18%，溪黃草20%，三七10%，丹參25%，桃仁4%，柴胡4%，女 貞子5%，旱連草5%，太子參2%，甘草2% ;
[0029] 主要設備：
[0030] 粉碎機、壓差式提取器、無機膜過濾器、反滲透濃縮器、薄膜蒸發(fā)濃縮器、真空干燥 器。
[0031] 制備工藝流程：
[0032] 1.藥材預處理：各單味藥材粉碎成20目藥材粉并混合均勻。
[0033] 2.提取：取65千克50 %乙醇與復方藥材粉混合均勻，經(jīng)連續(xù)壓差提取30min，離 心得離心渣和離心液，離心渣再加60千克50%乙醇攪拌提取30min，離心并將離心清液與 壓差提取離心液混合。
[0034] 3.微濾：收集離心液，經(jīng)500nm無機陶瓷膜過濾澄清。
[0035] 4.濃縮：微濾澄清液經(jīng)100?200KDa反滲透膜濃縮至固形物含量3. 96%，收集濃 縮液，約24. 46kg.所得濃縮液離心得到離心液和離心渣，離心渣加純水洗3遍并分別離心， 將所有離心液合并，得抗肝癌中藥有效部位組合物1號，實驗結束后所剩下的離心渣在〇? 10 °C下低溫避光保存。
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