專利名稱：Crf受體拮抗劑以及與其有關(guān)的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明一般涉及CRF受體拮抗劑以及通過向有需要的溫血動物施用所述拮抗劑來治療疾病的方法。
背景技術(shù)：
第一個(gè)促腎上腺皮質(zhì)激素-釋放因子(CRF)從羊下丘腦分離得到并證實(shí)它是一種41個(gè)氨基酸的肽(Vale等，《科學(xué)》(Science)2131394-1397，1981)。隨后，分離出了人和大鼠CRF的序列并證實(shí)了它們是相同的，但它們與羊的CRF在41個(gè)氨基酸殘基中有7個(gè)不同(Rivier等，《美國國家科學(xué)院院報(bào)》(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)804851，1983；Shibahara等，EMBO J.2775，1983)。
已發(fā)現(xiàn)CRF可以引起內(nèi)分泌、神經(jīng)和免疫系統(tǒng)功能的顯著改變。據(jù)信CRF是促腎上腺皮質(zhì)激素(“ACTH”)、β-內(nèi)啡肽和其它鴉片-促黑素細(xì)胞-促腎上腺皮質(zhì)激素原(“POMC”)衍生的肽從垂體前葉的基礎(chǔ)釋放和應(yīng)激釋放的主要生理調(diào)節(jié)劑(Vale等，《科學(xué)》(Science)2131394-1397，1981)。簡言之，據(jù)信CRF是通過與遍布于腦(DeSouza等，《科學(xué)》(Science)2241449-1451，1984)、垂體(DeSouza等，《酶學(xué)方法》(Methods Enzymol.)124560，1986；Wynn等，《生物化學(xué)生物物理研究通訊》(Biochem.Biophys.Res.Comm.)110602-608，1983)、腎上腺(Udelsman等，《自然》(Nature)319147-150，1986)和脾(Webster，E.L.和E.B.DeSouza，《內(nèi)分泌學(xué)》(Endocrinology)122609-617，1988)的質(zhì)膜受體結(jié)合而產(chǎn)生其生物學(xué)作用。CRF受體與GTP-結(jié)合蛋白偶聯(lián)(Perrin等，《內(nèi)分泌學(xué)》(Endocrinology)1181171-1179，1986)，后者介導(dǎo)CRF-刺激的細(xì)胞內(nèi)cAMP生產(chǎn)的增加(Bilezikjian，L.M.和W.W.Vale，《內(nèi)分泌學(xué)》(Endocrinology)113657-662，1983)?，F(xiàn)已從大鼠(Perrin等，Endo 133(6)3058-3061，1993)和人的大腦(Chen等，PNAS 90(19)8967-8971，1993；Vita等，F(xiàn)EBS 335(1)1-5，1993)中克隆出了CRF的受體。該受體是一種415個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)，含有7個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域。大鼠和人序列同一性的比較顯示出在氨基酸水平的高度同源性(97％)。
除了其刺激ACTH和POMC生產(chǎn)的作用外，據(jù)信CRF還協(xié)調(diào)多種對應(yīng)激的內(nèi)分泌、自主和行為應(yīng)答，并且還可能與情感障礙的病理生理學(xué)有關(guān)。此外，據(jù)信CRF還是免疫、中樞神經(jīng)、內(nèi)分泌和心血管系統(tǒng)之間通訊的關(guān)鍵媒介物(Crofford等，《臨床研究雜志》(J.Clin.Invest.)902555-2564，1992；Sapolsky等，《科學(xué)》(Science)238522-524，1987；Tilders等，《調(diào)節(jié)肽》(Regul.Peptides)577-84，1982)?？傊?，CRF似乎是重要的中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)遞質(zhì)之一并在綜合身體對應(yīng)激的全面反應(yīng)中起重要作用。
直接向腦給藥CRF可以引起與在暴露于應(yīng)激環(huán)境的動物中所觀察到的相同的行為、生理和內(nèi)分泌反應(yīng)。例如，腦室內(nèi)注射CRF可以引起行為激活(Sutton等，《自然》(Nature)297331，1982)、腦電圖的持續(xù)激活(Elilers等，《大腦研究》(Brain Res.)278332，1983)、交感神經(jīng)腎上腺髓質(zhì)激素(sympathoadrenomedullary)途徑的刺激(Brown等，《內(nèi)分泌學(xué)》(Endocrinology)110928，1982)、心率和血壓的升高(Fisher等，《內(nèi)分泌學(xué)》(Endocrinology)1102222，1982)、耗氧量的增加(Brown等，《生命科學(xué)》(LifeSciences)30207，1982)、胃腸活動的改變(Williams等，《美國生理學(xué)雜志》(Am.J.Physiol.)253G582，1987)、食物消耗量的抑制(Levine等，《神經(jīng)藥理學(xué)》(Neuropharmacology)22337，1983)、性行為的改變(Sirinathsinghji等，《自然》(Nature)305232，1983)和免疫功能的減弱(Irwin等，《美國生理學(xué)雜志》(Am.J.Physiol.)255R744，1988)。此外，臨床數(shù)據(jù)表明，CRF可能在抑郁、與焦慮有關(guān)的障礙、神經(jīng)性食欲缺乏的大腦中分泌過多(DeSouza，《藥物化學(xué)年報(bào)》(Ann.Reports in Med.Chem.)25215-223，1990)。因此，臨床數(shù)據(jù)表明CRF受體拮抗劑可能代表新的抗抑郁和/或抗焦慮藥物，可用于治療表現(xiàn)出CRF分泌過多的神經(jīng)精神病。
最早的CRF受體拮抗劑是肽(參見，例如Rivier等，美國專利4,605,642；Rivier等，《科學(xué)》(Science)224889，1984)。盡管這些肽證實(shí)了CRF受體拮抗劑可以減弱對CRF的藥理學(xué)應(yīng)答，但肽CRF受體拮抗劑存在肽療法的常見缺點(diǎn)，包括缺乏穩(wěn)定性和口服活性有限。最近報(bào)道了小分子的CRF受體拮抗劑。例如，已報(bào)道了用作CRF受體拮抗劑的取代的4-硫代-5-氧代-3-吡唑啉衍生物(Abreu等，美國專利5,063,245)和取代的2-氨基噻唑衍生物(Courtemanche等，澳大利亞專利AU-A-41399/93)。這些衍生物可以分別在1-10μM和0.1-10μM的范圍內(nèi)有效地抑制CRF與其受體的結(jié)合。
最近，提出了許多小分子的CRF受體拮抗劑，包括如下專利文獻(xiàn)中所公開的化合物WO94/13643、WO94/13644、WO94/13661、WO94/13676、WO94/13677、WO95/10506、WO95/33750、WO96/35689、WO97/00868、WO97/35539、WO97/35580、WO97/35846、WO97/44038、WO98/03510、WO98/05661、WO98/08846、WO98/08847、WO98/11075、WO98/15543、WO98/21200和WO98/29413。
由于CRF的生理學(xué)重要性，開發(fā)具有顯著的CRF受體結(jié)合活性并且可以拮抗CRF受體的生物學(xué)活性的小分子仍是令人想望的目標(biāo)。這些CRF受體拮抗劑將可以用于治療內(nèi)分泌、精神病學(xué)和神經(jīng)病學(xué)的病癥或疾病，包括廣義的與應(yīng)激有關(guān)的疾病。
雖然通過施用CRF受體拮抗劑來調(diào)節(jié)CRF已取得了很大的進(jìn)展，但仍需要有效的小分子CRF受體拮抗劑。此外還需要含有所述CRF受體拮抗劑的藥物組合物以及涉及使用該拮抗劑治療例如與應(yīng)激有關(guān)之病癥的方法。本發(fā)明滿足了這些需要，并且具有其它相關(guān)的優(yōu)點(diǎn)。
發(fā)明概述簡言之，本發(fā)明涉及CRF受體拮抗劑，尤其涉及具有如下結(jié)構(gòu)通式(I)的CRF受體拮抗劑 包括其立體異構(gòu)體、前藥和可藥用鹽，其中n、m、A、B、C、X、R、R1、 R2和Ar如下所定義。
本發(fā)明的CRF受體拮抗劑具有廣泛的治療用途，可用于治療各種病癥或疾病，包括與應(yīng)激有關(guān)的病癥。該方法包括，向有需要的動物給藥有效量的本發(fā)明CRF受體拮抗劑，優(yōu)選以藥物組合物的形式給藥。因此，在另一個(gè)實(shí)施方案中，公開了含有一種或多種本發(fā)明的CRF受體拮抗劑和可藥用載體和/或稀釋劑的藥物組合物。
通過以下詳細(xì)描述，本發(fā)明的各個(gè)方面將是顯而易見的。為此，在文中列出了許多詳細(xì)描述某些方法、化合物和/或組合物的參考文獻(xiàn)，并將這些文獻(xiàn)全文引入本文作為參考。發(fā)明詳述總的來說，本發(fā)明涉及可用作促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)受體拮抗劑的化合物。
在第一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的CRF受體拮抗劑具有如下結(jié)構(gòu)(I) 包括其立體異構(gòu)體、前藥和可藥用鹽，其中n是1或2；A和C彼此獨(dú)立地是氮、碳或CH；B是氮或CR3；條件是，A、B和C中至少有一個(gè)是氮；A、B和C不全是氮；并且A-B和B-C之一是雙鍵；X是氮或CH；Ar是芳基、取代的芳基、雜芳基或取代的雜芳基；R是任選的取代基，其在每次出現(xiàn)時(shí)彼此獨(dú)立地是烷基、亞烷基、芳基烷基或雜芳基烷基，其中m是0、1、2或3并且表示R取代基的數(shù)目；R1是-C(H)0，1(R4)(R5)或-SO2R5；R2是氫或烷基；R3是氫、烷基或鹵代烷基；R4是氫、酮基、烷基、亞烷基或鹵素；和R5是式-Y-Z-R6的基團(tuán)，其中Y是二價(jià)烷基、取代的二價(jià)烷基(alkanediyl)或直接鍵(direct bond)，Z是NH、-N(R7)、O、S、SO2、C(＝O)、C(＝O)O、OC(＝O)、NHC(＝O)、C(＝O)NH、NH(SO2)、(SO2)NH、NR8C(＝O)O或直接鍵(directbond)；R6是氫、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、雜環(huán)、取代的雜環(huán)、雜環(huán)烷基或取代的雜環(huán)烷基；或者R7和R8相同或不同并且彼此獨(dú)立地是烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、雜環(huán)、取代的雜環(huán)、雜環(huán)烷基或取代的雜環(huán)烷基；或者R6和R7與它們所連接的氮原子合在一起形成雜環(huán)或取代的雜環(huán)；
或者R4和R5合在一起形成環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、環(huán)烷基環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基環(huán)烷基、環(huán)烷基芳基、取代的環(huán)烷基芳基、環(huán)烷基雜環(huán)或取代的環(huán)烷基雜環(huán)。
本文中所用的上述術(shù)語具有如下含義“烷基”是指含有1至10個(gè)碳原子的直鏈或支鏈、無環(huán)或環(huán)狀的、飽和或不飽和的脂肪烴，術(shù)語“低級烷基”具有與烷基相同的含義但只含1至6個(gè)碳原子。代表性的飽和直鏈烷基包括甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基等；飽和的支鏈烷基包括異丙基、仲丁基、異丁基、叔丁基、異戊基等。代表性的飽和環(huán)烷基包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、-CH2環(huán)丙基、-CH2環(huán)丁基、-CH2環(huán)戊基、-CH2環(huán)己基等；不飽和的環(huán)烷基包括環(huán)戊烯基和環(huán)己烯基等。環(huán)烷基也稱為“碳環(huán)”，包括二和多環(huán)碳環(huán)，例如十氫萘和金剛烷基。不飽和的烷基含有至少一個(gè)相鄰碳原子之間的雙鍵或叁鍵(分別稱為“鏈烯基”或“鏈炔基”)。代表性的直鏈和支鏈鏈烯基包括乙烯基、丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、異丁烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-甲基-1-丁烯基、2-甲基-2-丁烯基、2，3-二甲基-2-丁烯基等；代表性的直鏈和支鏈鏈炔基包括乙炔基、丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、1-戊炔基、2-戊炔基、3-甲基-1-丁炔基等。
“亞烷基(alkylidenyl)”表示從同一個(gè)碳原子上取走了兩個(gè)氫原子的二價(jià)烷基，例如＝CH2、＝CHCH3、＝CHCH2CH3、＝C(CH3)CH2CH3等。
“二價(jià)烷基(alkanediyl)”是指從同一個(gè)碳原子或不同的碳原子上取走了兩個(gè)氫原子的二價(jià)烷基，例如-CH2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、-CH(CH3)CH2-等。
“芳基”是指芳香族碳環(huán)部分，例如苯基或萘基。
“芳基烷基”是指有至少一個(gè)烷基氫原子被芳基部分代替了的烷基，例如芐基、-CH2-(1或2-萘基)、-(CH2)2苯基、-(CH2)3苯基、-CH(苯基)2等。
“雜芳基”是指含有至少一個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子并且含有至少一個(gè)碳原子的5至10元芳香族雜環(huán)，包括單環(huán)和二環(huán)環(huán)系。代表性的雜芳基包括(單不僅限于)呋喃基、苯并呋喃基、噻吩基、苯并噻吩基、吡咯基、吲哚基、異吲哚基、氮雜吲哚基、吡啶基、喹啉基、異喹啉基、噁唑基、異噁唑基、苯并噁唑基、吡唑基、咪唑基、苯并咪唑基、噻唑基、苯并噻唑基、異噻唑基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、噌啉基、二氮雜萘基和喹唑啉基。
“雜芳基烷基”是指有至少一個(gè)烷基氫原子被雜芳基部分代替了的烷基，例如-CH2吡啶基、-CH2嘧啶基等。
“雜環(huán)”是指5至7元單環(huán)或7至14元多環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)可以是飽和的、不飽和的或芳香性的，并且含有1至4個(gè)彼此獨(dú)立地選自氮、氧和硫的雜原子，并且其中的氮和硫雜原子可以任選地被氧化，氮雜原子可以任選地被季銨化，包括上述的任意雜環(huán)與苯環(huán)稠合形成的二環(huán)以及三環(huán)(和更高級的)雜環(huán)。雜環(huán)可以通過任何雜原子或碳原子進(jìn)行連接。雜環(huán)包括以上定義的雜芳基。因此，除了以上所列的芳香族雜芳基外，雜環(huán)還包括(但不僅限于)嗎啉基、吡咯烷酮基(pyrrolidinonyl)、吡咯烷基、哌啶基、乙內(nèi)酰脲基、戊內(nèi)酰胺基、氧雜環(huán)丙烷基、氧雜環(huán)丁烷基、四氫呋喃基、四氫吡喃基、四氫吡啶基、四氫嘧啶基、四氫噻吩基、四氫噻喃基等。
“雜環(huán)烷基”是指有至少一個(gè)烷基氫原子被雜環(huán)代替了的烷基，例如-CH2嗎啉基等。
“環(huán)烷基”是指飽和或不飽和的(但不是芳香性的)含有3-8個(gè)碳原子的碳環(huán)，例如環(huán)戊烷、環(huán)己烷、環(huán)庚烷、環(huán)己烯等。
“環(huán)烷基環(huán)烷基”是指與環(huán)烷基環(huán)稠合的環(huán)烷基環(huán)，例如十氫萘。
“環(huán)烷基芳基”是指與芳基稠合的環(huán)烷基，例如四氫萘。
“環(huán)烷基雜環(huán)”是指與雜環(huán)稠合的環(huán)烷基環(huán)。
本文所用術(shù)語“取代的”是指有至少一個(gè)氫原子被取代基代替了的上述基團(tuán)(例如烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)、雜環(huán)烷基等)。在酮基取代基(“-C(＝O)-”)的情況下，有兩個(gè)氫原子被替換。當(dāng)被取代時(shí)，本文中所用的“取代基”包括鹵素、羥基、氰基、硝基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、烷基、烷氧基、烷硫基、鹵代烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、雜芳基、取代的雜芳基、雜芳基烷基、取代的雜芳基烷基、雜環(huán)、取代的雜環(huán)、雜環(huán)烷基、取代的雜環(huán)烷基、-NRaRb、-NRaC(＝O)Rb、-NRaC(＝O)NRaNRb、-NRaC(＝O)ORb、-NRaSO2Rb、-ORa、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORa、-C(＝O)NRaRb、-OC(＝O)NRaRb、-SH、-SRa、-SORa、-S(＝O)2Ra、-OS(＝O)2Ra、-S(＝O)2ORa，其中Ra和Rb相同或不同并且彼此獨(dú)立地是氫、烷基、鹵代烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、雜芳基、取代的雜芳基、雜芳基烷基、取代的雜芳基烷基、雜環(huán)、取代的雜環(huán)、雜環(huán)烷基或取代的雜環(huán)烷基。
“鹵素”是指氟、氯、溴和碘。
“鹵代烷基”是指有至少一個(gè)氫原子被鹵素代替了的烷基，例如三氟甲基等。
“烷氧基”是指通過氧橋連接的烷基部分(即，-O-烷基)，例如甲氧基、乙氧基等。
“烷硫基”是指通過硫橋連接的烷基部分(即，-S-烷基)，例如甲硫基、乙硫基等。
“烷基磺?；笔侵竿ㄟ^磺?；鶚蜻B接的烷基部分(即，-SO2-烷基)，例如甲基磺?；?、乙基磺?；?。
“烷基氨基”和“二烷基氨基”是指通過氮橋連接的一個(gè)或兩個(gè)烷基部分(即，-N-烷基)，例如甲基氨基、乙基氨基、二甲基氨基、二乙基氨基等。
“羥基烷基”是指被至少一個(gè)羥基取代的烷基。
“單或二(環(huán)烷基)甲基”表示被一個(gè)或兩個(gè)環(huán)烷基取代的甲基，例如環(huán)丙基甲基、二環(huán)丙基甲基等。
“烷基羰基烷基”表示被-C(＝O)烷基取代的烷基。
“烷基羰基氧基烷基”表示被-C(＝O)O烷基或-OC(＝O)烷基取代的烷基。
“烷氧基烷基”表示被-O-烷基取代的烷基。
“烷硫基烷基”表示并-S-烷基取代的烷基.
“單或二(烷基)氨基”分別表示被一個(gè)或兩個(gè)烷基取代的氨基。
“單或二(烷基)氨基烷基”表示被單或二(烷基)氨基取代的烷基。
本文中，結(jié)構(gòu)式(I)的 表示任選地被1或2個(gè)R取代基取代的-CH2CH2-或-CH＝CH-(即，當(dāng)n＝1并且m＝1或2時(shí))，或任選地被1、2或3個(gè)R取代基取代的-CH2CH2CH2-(即，當(dāng)n＝2并且m＝1、2或3時(shí))。在這方面，該部分是-CH2CH(R)-、-CH(R)CH2-、-CH(R)CH(R)-、-CH＝C(R)-、-C(R)＝CH-、-C(R)＝C(R)-、-CH2CH2CH(R)-、-CH2CH(R)CH2-、-CH(R)CH2CH2-、-CH(R)CH2CH(R)、-CH(R)CH(R)CH2和-CH2CH(R)CH(R)-，其中的R在每次出現(xiàn)時(shí)可以相同或不同并且彼此獨(dú)立地選自以上所列的R基團(tuán)。
本發(fā)明的代表性的化合物包括如下結(jié)構(gòu)式(Ia)至(In)的化合物
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，n是1，m是0并且本發(fā)明的CRF受體拮抗劑具有式(Ia)的結(jié)構(gòu)。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，n是1，m是1并且本發(fā)明的CRF受體拮抗劑具有式(Ib)或(Ic)的結(jié)構(gòu)。
根據(jù)對A、B和C部分的選擇，本發(fā)明的CRF受體拮抗劑包括具有如下結(jié)構(gòu)式(I-1)、(I-2)、(I-3)和(I-4)的化合物 當(dāng)化合物(I-1)、(I-2)、(I-3)和(I-4)的X是CH時(shí)，本發(fā)明的代表性化合物包括如下化合物(I-1a)、(I-2a)、(I-3a)和(I-4a)；當(dāng)化合物(I-1)、(I-2)、(I-3)和(I-4)的X是氮時(shí)，本發(fā)明的代表性化合物包括如下化合物(I-1b)、(I-2b)、(I-3b)和(I-4b) 在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R1是如下結(jié)構(gòu)式所示的-SO2R5 在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是-C(H)0，1(R4)(R5)，其同時(shí)表示-CH(R4)(R5)和-C(R4)(R5)。在這一方面，其代表性的實(shí)施方案包括如下R1部分(ⅰ)、(ⅱ)和(ⅲ) 本發(fā)明代表性的R4部分包括但不僅限于氫、酮基(即，＝O)、鹵素(氟、氯、溴和碘)、甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、＝CH2、＝CHCH3和＝CHCH2CH3。因此，代表性的R1部分包括但不僅限于 在R1的R4和R5基團(tuán)合在一起形成環(huán)烷基的實(shí)施方案中，形成的R1基團(tuán)具有如下結(jié)構(gòu) 環(huán)烷基包括環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基等。類似地，取代的環(huán)烷基是帶有一個(gè)或多個(gè)以上定義的取代基的環(huán)烷基。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，環(huán)烷基被一個(gè)或多個(gè)烷基取代，而代表性的R1部分包括 其中R’和R″相同或不同并且彼此獨(dú)立地選自，例如，烷基，例如甲基或乙基。
在其中R1的R4和R5基團(tuán)合在一起形成環(huán)烷基芳基的實(shí)施方案中，形成的R1基團(tuán)包括具有如下結(jié)構(gòu)的化合物 或 包括其以上所定義的任選取代的類似物。
在又一個(gè)實(shí)施方案中，R4和R5合在一起形成環(huán)烷基環(huán)烷基或環(huán)烷基雜環(huán)，所形成的R1基團(tuán)包括，例如具有如下結(jié)構(gòu)的化合物 包括其以上所定義的任選取代的類似物。
如上所述，在一個(gè)實(shí)施方案中，R5是式-Y-Z-R6的基團(tuán)，其中Y是二價(jià)烷基、取代的二價(jià)烷基或直接鍵，Z是NH、-N(R7)、O、S、SO2、C(＝O)、C(＝O)O、OC(＝O)、NHC(＝O)、C(＝O)NH、NH(SO2)、(SO2)NH、NR8C(＝O)O或直接鍵；R6是氫、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、雜環(huán)、取代的雜環(huán)、雜環(huán)烷基或取代的雜環(huán)烷基；或者R7和R8相同或不同并且彼此獨(dú)立地是烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、雜環(huán)、取代的雜環(huán)、雜環(huán)烷基或取代的雜環(huán)烷基；或者R6和R7與它們所連接的氮原子合在一起形成雜環(huán)或取代的雜環(huán)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，R5部分中的Y是二價(jià)烷基，Z是直接鍵，R6是氫。該R5部分包括烷基、飽和烷基、不飽和烷基、低級烷基、低級飽和烷基、低級不飽和烷基、飽和的直鏈烷基、飽和的支鏈烷基、飽和的環(huán)烷基、不飽和的環(huán)烷基、鏈烯基、直鏈鏈烯基、支鏈鏈烯基、炔基、直鏈炔基和支鏈炔基。代表性的例子是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、異丁基、1-乙基丙基(即，-CH(Et)2)、正戊基、正己基、異己基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基和乙炔基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R5部分中的Y和Z是直接鍵，R6包括芳香族環(huán)，例如芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基。代表性的例子是苯基和氯苯基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R5部分中的Y是直接鍵，Z是NH并且R5如上所定義。因此，R6可以是氫，從而R5是氨基?；蛘?，R6可以是烷基，從而R5是烷基取代的氨基，例如異丙基氨基和乙基氨基?；蛘?，R6可以是芳基或取代的芳基，從而R5是芳基氨基或取代的芳基氨基，例如，(甲氧基苯基)氨基、((三氟甲氧基)苯基)氨基、(苯基取代的苯基)氨基(也稱為(二苯基)氨基)和(二(三氟甲基)苯基)氨基?；蛘?，R6可以是芳基烷基或取代的芳基烷基，從而R5是(芳基烷基)氨基或(取代的芳基烷基)氨基，例如(芐基)氨基(也稱為(苯基甲基)氨基)、(環(huán)丙基苯基)氨基和(苯基乙基)氨基。根據(jù)該實(shí)施方案，優(yōu)選R4是羰基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R5部分中的Y是二價(jià)烷基，Z是N(R7)并且R6如上所定義，其中R7也如上所定義。因此，R5是-Y-N(R7)(R6)，即，包括二取代的氨基部分。在一個(gè)實(shí)施方案中，Y是亞甲基，即，-CH2-，從而R5是-CH2-N(R7)(R6)。正如以上所定義的，R6和R7各自選自烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、雜環(huán)、取代的雜環(huán)、雜環(huán)烷基或取代的雜環(huán)烷基，其中R6還可以是氫。在一個(gè)實(shí)施方案中，R6是氫。
-N(R6)(R7)基團(tuán)中的R6和R7基團(tuán)之一或二者同時(shí)可以是烷基或取代的烷基，包括飽和的烷基、不飽和的烷基、低級烷基、低級飽和烷基、低級不飽和烷基、飽和直鏈烷基、飽和支鏈烷基、飽和環(huán)烷基、不飽和環(huán)烷基、鏈烯基、直鏈鏈烯基、支鏈鏈烯基、炔基、直鏈鏈炔基和支鏈鏈炔基。代表性的例子是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、異丁基、1-乙基丙基(即，-CH(Et)2)、正戊基、正己基、異己基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基和乙炔基。
-N(R6)(R7)基團(tuán)中的R6和R7基團(tuán)之一或二者同時(shí)可以含有芳香族環(huán)，例如芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基。代表性的例子是苯基和氯苯基。
因此，-N(R6)(R7)可以是，例如(丙基)(環(huán)丙基甲基)氨基、(2-氰基乙基)(甲基)氨基、(2-氰基乙基)(芐基)氨基、(乙基)((2-(二甲基氨基)乙基))氨基、(2-羥基乙基)(芐基)氨基、二(2-羥基乙基)氨基、(丙基)(2-羥基乙基)氨基、(環(huán)己基)(乙基)氨基、(羧甲基)(甲基)氨基、二(芐基)氨基和((2-羥基)(2-苯基)乙基))(甲基)氨基。
如上所述，R6和R7與它們共同連接的氮原子合在一起可以形成雜環(huán)或取代的雜環(huán)。因此，-N(R6)(R7)可以表示雜環(huán)，例如吖丙啶基、甲基取代的吖丙啶基、 或取代的雜環(huán)，例如 以上所定義的雜環(huán)可以含有多個(gè)除-N(R6)(R7)的氮之外的雜原子(即非碳原子)。例如，該雜環(huán)還可以含有第二個(gè)氮，或含有氧或硫。當(dāng)存在第二個(gè)氮時(shí)，雜環(huán)將有兩個(gè)氮，例如哌嗪基。當(dāng)存在氧時(shí)，雜環(huán)將同時(shí)含有氧和氮，例如嗎啉基。當(dāng)存在硫時(shí)，雜環(huán)將同時(shí)含有硫和氮，例如硫代嗎啉基。這些含有兩個(gè)或多個(gè)雜原子的雜環(huán)可以是取代或未取代的。例如，嗎啉基可以被兩個(gè)烷基取代，例如，在嗎啉基氧原子的兩側(cè)各有一個(gè)甲基。當(dāng)雜環(huán)是哌嗪基時(shí)，未在式-N(R6)(R7)中明確顯示出的氮原子可以被取代，其取代基的例子是，例如烷基(例如甲基)、取代的烷基(例如2-羥基乙基)或芳基烷基(例如芐基)。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，Y是取代的二價(jià)烷基，Z是雜原子或直接鍵，R6如上所定義。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R4是氫。因此，Y是帶有取代基的二價(jià)烷基，其中的取代基可以是，例如羥基。二價(jià)烷基可以是，例如，亞乙基(即，-CH2-CH2-)或亞正丙基(即，-CH2CH2CH2-)，從而取代的二價(jià)烷基可以是，例如-CH(OH)-CH2-或-CH2-CH(OH)-CH2-。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，Y是二價(jià)烷基例如亞甲基(-CH2-)，Z是酰氨基，即，-NHC(＝O)-或-C(＝O)NH-，R6如上所定義。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R4是氫。因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，R5是-CH2-NHC(＝O)-R6。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，Y是二價(jià)烷基例如亞甲基(-CH2-)，Z是磺酰氨基，即，-NHSO2-或-SO2NH-，R6如上所定義。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R4是氫。因此，在該實(shí)施方案中，R5是-CH2-NHSO2-R6。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，Y和Z是直接鍵，R6如上所定義。因此，在該實(shí)施方案中，R5是-R6。在一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)R5是-R6時(shí)R4是烷基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)R5是-R6時(shí)R4是羰基。R6部分可以是烷基、飽和烷基、不飽和烷基、低級烷基、低級飽和烷基、低級不飽和烷基、飽和直鏈烷基、飽和支鏈烷基、飽和環(huán)烷基、不飽和環(huán)烷基、鏈烯基、直鏈鏈烯基、支鏈鏈烯基、炔基、直鏈炔基和支鏈炔基。代表性的例子是甲基、三氟甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、異丁基、1-乙基丙基(即，-CH(Et)2)、正戊基、正己基、異己基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基和乙炔基。R6可以是取代的烷基，其中取代的烷基可以帶有一個(gè)、兩個(gè)或多個(gè)取代基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，Y和Z是直接鍵并且R6如上所定義。因此，在該實(shí)施方案中，R5是-R6。在一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)R5是-R6時(shí)R4是氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)R5是-R6時(shí)R4是烷基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，Y是直接鍵，Z是酯基，即-C(＝O)O-或-OC(＝O)-，R6如上所定義。在該實(shí)施方案中，R5是-酯-R6，優(yōu)選R5是-C(＝O)-O-R6。在一個(gè)實(shí)施方案中，R4是氫。R6部分可以是烷基，優(yōu)選低級飽和烷基，例如甲基、乙基、丙基等。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，Y是取代的二價(jià)烷基，Z是直接鍵或氧，R6如上所定義。在該實(shí)施方案中，R4優(yōu)選是H。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R4優(yōu)選是烷基。二價(jià)烷基可以是C1-C6二價(jià)烷基，例如亞甲基、亞乙基、亞丙基等，二價(jià)烷基上所取代基可以是，例如羥基、鹵素、氨基、烷基等。因此，Y可以是-CH(OH)-或-CH(OH)-CH2-等。在一個(gè)實(shí)施方案中，R6是芳基或取代的芳基，例如苯基或氯苯基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R6是烷基或取代的烷基，例如甲基或氟甲基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是SO2R5，其中Y是直接鍵，Z是直接鍵，R6如上所定義。因此，在該實(shí)施方案中，R1是-SO2-R6。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，Y是二價(jià)烷基，Z是O或S，R6如上所定義。例如，R5可以是-CH2-O-CH3，其中Y是亞甲基、Z是O、R6是烷基、特別是甲基。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R4是羰基。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R4是氫。在又一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R4是烷基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，Y是直接鍵，Z是直接鍵，R6是式＝CH2、＝CH-CH3、＝CH-CH2-CH3、＝CH-CH(CH3)-CH3的烷基或取代的烷基及其同系物。取代的烷基上的取代基可以是，例如羥基或鹵素(例如氟)。
R6部分可以是烷基、飽和烷基、不飽和烷基、低級烷基、低級飽和烷基、低級不飽和烷基、飽和直鏈烷基、飽和支鏈烷基、飽和環(huán)烷基、不飽和環(huán)烷基、鏈烯基、直鏈鏈烯基、支鏈鏈烯基、鏈炔基、直鏈鏈炔基和支鏈鏈炔基。代表性的例子是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、異丁基、1-乙基丙基(即，-CH(Et)2)、正戊基、正己基、異己基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基和乙炔基。
R6部分可以是取代的烷基，其中取代的烷基可以帶有一個(gè)或多個(gè)取代基。適宜的取代基包括三氟甲基、羥基和鹵素(即，氟、氯、溴、碘)。
R6部分可以包括芳香族環(huán)，例如芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基。代表性的例子是苯基、甲氧基苯基和氯苯基。
R6部分可以是雜環(huán)、雜環(huán)烷基、取代的雜環(huán)、取代的雜環(huán)烷基，例如呋喃基、呋喃基甲基和噻吩基、噻吩基甲基。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)R5是-R6并且R6是以上所列的烷基時(shí)，R4是氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)R5是-R6并且R6是以上所列的烷基時(shí)，R4是烷基。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)R5是-R6并且R6包括以上所列的芳香族環(huán)時(shí)，R4是氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)R5是-R6并且R6包括以上所列的芳香族環(huán)時(shí)，R4是烷基。
本發(fā)明代表性的R1基團(tuán)具體包括實(shí)施例中公開的各R1基團(tuán)，以及甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、異戊基、新戊基、-CH(乙基)2、-CH(正丙基)2、-CH(正丁基)2、-CH2CH2OCH3、-CH(甲基)(CH2OCH3)、-CH(乙基)(CH2OCH3)、-CH(正丙基)(CH2OCH3)、-CH(正丁基)(CH2OCH3)、-CHC≡CH、-CH(甲基)(乙基)、-CH(甲基)(正丙基)、-CH(甲基)(正丁基)、-CH(甲基)(正戊基)、-CH(甲基)(CH2CH2CH2CH(CH3)2)、-CH(乙基)(正丙基)、-CH(乙基)(正丁基)、-CH(乙基)(正戊基)、-CH(正丙基)(正丁基)、-CH(正丙基)(正戊基)、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)己基、2-甲基環(huán)己基、3-甲基環(huán)己基、1，2，3，4-四氫萘基(1和2)、芐基、2-氯芐基、CH(甲基)(芐基)、-CH(乙基)(芐基)、-CH(正丙基)(芐基)、-CH(正丁基)(芐基)、-CH2(環(huán)丙基)、-CH2(環(huán)丁基)、-CH2CH(甲基)CH2CH3、-CH2CH(乙基)CH2CH3、-CH2C(CH3)3、-CH2C≡CH、-CH2C(＝O)CH2CH3、-C(＝O)環(huán)丙基、-C(＝O)NH芐基。
本發(fā)明代表性的任選的R基團(tuán)包括，當(dāng)存在時(shí)，甲基、乙基、正丙基、異丙基、異丁基、＝CH2和＝CHCH3。
在更具體的本發(fā)明的實(shí)施方案中，本發(fā)明代表性的Ar基團(tuán)包括(但不僅限于)實(shí)施例中公開的Ar基團(tuán)，以及2，4-二氯苯基、2，4-二甲基苯基、2-氯-4-甲基苯基、2-甲基-4-氯苯基、2，4，6-三甲基苯基、2-氯-4-甲氧基苯基、2-甲基-4-甲氧基苯基、2，4-二甲氧基苯基、2-三氟甲基-4-氯苯基、3-甲氧基-4-氯苯基、2，5-二甲氧基-4-氯苯基、2-甲氧基-4-三氯甲基苯基、2-甲氧基-4-異丙基苯基、2-甲氧基-4-三氟甲基苯基、2-甲氧基-4-異丙基苯基、2-甲氧基-4-甲基苯基、4-甲基-6-二甲基氨基吡啶-3-基、4-二甲基氨基-6-甲基-吡啶-3-基、6-二甲基氨基-吡啶-3-基和4-二甲基氨基-吡啶-3-基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物具有以上式(I)的結(jié)構(gòu)，其中R4是氫、酮基、C1-6烷基、單或二(C3-6環(huán)烷基)甲基、C3-6環(huán)烷基、C3-6鏈烯基、羥基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氧基C1-6烷基或C1-6烷氧基C1-6烷基；R5是氫、Ar、C1-6烷基Ar、OAr、C1-8烷基、C3-6環(huán)烷基、O(C1-8烷基)、單或二(C3-6環(huán)烷基)甲基、C3-6鏈烯基、C3-6炔基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基Ar、羥基C1-6烷基、噻吩基C1-6烷基、呋喃基C1-6烷基、C1-6烷硫基C1-6烷基、嗎啉基、單或二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、氨基、(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、(C1-6烷基Ar)氨基、(C1-6烷基)(Ar)氨基、C1-6烷基羰基C1-6烷基、磺?；?C1-8烷基)、-C(＝O)C1-6烷基、被咪唑基取代的C1-6烷基或式-(C1-6二價(jià)烷基)-O-(CO)0，1-Ar的基團(tuán)；或R4和R5合在一起形成與任選地被一個(gè)或多個(gè)彼此獨(dú)立地選自C1-6烷基的取代基取代的Ar稠合的C5-8環(huán)烷基或C3-8環(huán)烷基；Ar在每次出現(xiàn)時(shí)彼此獨(dú)立地是苯基或萘基，所述苯基和萘基任選地被1、2或3個(gè)彼此獨(dú)立地選自鹵素、C1-6烷基、三氟甲基、氰基、C1-6烷氧基、芐氧基、C1-2烷硫基、硝基、氨基和單或二(C1-6烷基)氨基的取代基所取代；或任選地被1、2或3個(gè)彼此獨(dú)立地選自鹵素、C1-6烷基、三氟甲基、羥基、氰基、C1-6烷氧基、芐氧基、C1-6烷硫基、硝基、氨基、單或二(C1-6烷基)氨基和哌啶基的取代基取代的芳香族C3-12雜環(huán)。
本發(fā)明的化合物可以通過已知的有機(jī)合成方法制備，包括在實(shí)施例中詳細(xì)描述的方法，并且通常以游離堿的形式使用?；蛘?，可將本發(fā)明的化合物以酸加成鹽的形式使用。本發(fā)明的游離堿氨基化合物的酸加成鹽可以通過本領(lǐng)域熟知的方法制備，并可以從有機(jī)酸和無機(jī)酸形成。適宜的有機(jī)酸包括馬來酸、富馬酸、苯甲酸、抗壞血酸、琥珀酸、甲磺酸、乙酸、草酸、丙酸、酒石酸、水楊酸、檸檬酸、葡糖酸、乳酸、扁桃酸、肉桂酸、天冬氨酸、硬脂酸、棕櫚酸、乙醇酸、谷氨酸和苯磺酸。適宜的無機(jī)酸包括鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸和硝酸。術(shù)語結(jié)構(gòu)式(I)的“可藥用鹽”包括任何和所有可接受的鹽形式。
通常，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的有機(jī)合成方法以及實(shí)施例中所描述的代表性的方法進(jìn)行制備。例如，結(jié)構(gòu)式(I)的合成通常通過合成如下所示的所需亞結(jié)構(gòu)(I-1)、(I-2)、(I-3)或(I-4)來進(jìn)行。各個(gè)這些亞結(jié)構(gòu)的合成又在實(shí)施例中進(jìn)行了舉例說明。 結(jié)構(gòu)式(I-1)的一般合成方法 結(jié)構(gòu)式(I-2)的一般合成方法 結(jié)構(gòu)式(I-3)的一般合成方法 結(jié)構(gòu)式(I-4)的一般合成方法 此外，結(jié)構(gòu)式(I-1)和(I-4)的化合物還可以通過如下反應(yīng)方案A通過合成中間體4，然后將中間體4轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的結(jié)構(gòu)式(I-1)“結(jié)構(gòu)式10”或(I-4)“結(jié)構(gòu)式8”進(jìn)行制備反應(yīng)方案A 結(jié)構(gòu)式(I-1)和(I-4)的化合物還可以按照如下反應(yīng)方案B和C進(jìn)行制備反應(yīng)方案B 反應(yīng)方案C 化合物作為CRF受體拮抗劑的效力可以通過各種試驗(yàn)方法進(jìn)行測定。本發(fā)明的適宜的CRF拮抗劑可以抑制CRF與其受體的特異性結(jié)合并拮抗與CRF有關(guān)的活性。結(jié)構(gòu)式(I)的化合物可以通過一種或多種被廣泛接受的為此目的的試驗(yàn)來檢測其作為CRF拮抗劑的活性，包括(但不僅限于)DeSouza等(《神經(jīng)科學(xué)雜志》(J.Neuroscience)788，1987)和Battaglia等(《突觸》Synapse 1572，1987)所公開的方法。如上所述，適宜的CRF拮抗劑包括顯示CRF受體親和性的化合物。CRF受體親和性可以通過測定化合物抑制放射標(biāo)記的CRF(例如[125I]酪氨酸-CFR)與其受體(例如從大鼠大腦皮質(zhì)膜制備的受體)結(jié)合之能力的結(jié)合研究來測定。DeSouza等(文獻(xiàn)出處同上，1987)所描述的放射配體結(jié)合試驗(yàn)提供了測定化合物對CRF受體的親和性的試驗(yàn)方法。該活性通常從IC50值(從受體上置換50％放射標(biāo)記的配體所需的化合物濃度)來計(jì)算，并用“Ki”值來表示，其通過如下方程式來計(jì)算Ki=IC501+L/KD]]>其中L＝放射配體，KD＝放射性配體對受體的親和性(Cheng和Prusoff，《生化藥理學(xué)》(Biochem.Pharmacol.)223099，1973)。
除了抑制CRF受體結(jié)合外，化合物的CRF受體拮抗劑活性可以通過化合物拮抗與CRF有關(guān)之活性的能力來確定。例如，已知CRF可以刺激各種生物化學(xué)過程，包括腺苷酸環(huán)化酶活性。因此，可以通過測定cAMP水平來評估化合物作為CRF拮抗劑拮抗CRF刺激的腺苷酸環(huán)化酶活性的能力。Battaglia等描述的CRF刺激的腺苷酸環(huán)化酶活性試驗(yàn)(文獻(xiàn)出處同上，1987)提供了測定化合物拮抗CRF活性之能力的試驗(yàn)。因此，CRF受體拮抗劑的活性可以通過通常包括開始的結(jié)合試驗(yàn)(例如由DeSouza所描述的(文獻(xiàn)出處同上，1987))和隨后的cAMP篩選過程(例如由Battaglia所描述的(文獻(xiàn)出處同上，1987))的試驗(yàn)方法來測定。
就CRF受體結(jié)合親和性而言，本發(fā)明的CRF受體拮抗劑具有小于10μM的Ki值。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，CRF受體拮抗劑具有小于1μM的Ki值，更優(yōu)選小于0.25μM(即250nM)。正如以下將要詳細(xì)描述的，本發(fā)明的代表性化合物通過實(shí)施例9所述的方法進(jìn)行了檢測。Ki值小于1μM的優(yōu)選化合物是化合物I-2a-1至I-2a-6、I-2a-8、I-2a-9、I-2a-12至I-2a-25、I-2a-27至I-2a-44、I-2a-46至I-2a-76、I-4b-1和I-4b-2。Ki值小于250nM的更優(yōu)選的化合物是化合物I-2a-1至I-2a-4、I-2a-6、I-2a-8、I-2a-9、I-2a-12至I-2a-18、I-2a-20至I-2a-25、I-2a-28至I-2a-36、I-2a-38至I-2a-43、I-2a-46至I-2a-73、I-2a-76、I-4b-1和I-4b-2。
本發(fā)明的CRF受體拮抗劑在CRF受體位點(diǎn)顯示活性，并可用作治療劑來治療各種病癥或疾病，包括內(nèi)分泌、精神病學(xué)和神經(jīng)病學(xué)的病癥或疾病。更具體地講，本發(fā)明的CRF受體拮抗劑可用于治療由于CRF分泌過多所引起的病癥或疾病。由于確信CRF是激活和協(xié)調(diào)對應(yīng)激的內(nèi)分泌、行為和自主應(yīng)答的關(guān)鍵神經(jīng)遞質(zhì)，因此本發(fā)明的CRF受體拮抗劑可用于治療神經(jīng)精神病?？梢杂帽景l(fā)明的CRF受體拮抗劑治療的神經(jīng)精神病包括情感障礙例如抑郁；與焦慮有關(guān)的病癥，例如廣義的焦慮癥、恐慌癥、強(qiáng)迫癥、異常的攻擊行為；心血管異常例如不穩(wěn)定心絞痛和反應(yīng)性高血壓；飲食障礙，例如神經(jīng)性食欲缺乏、食欲過盛和過敏性腸綜合征。CRF拮抗劑還可用于治療由應(yīng)激引起的與各種疾病狀態(tài)有關(guān)的免疫抑制，以及中風(fēng)。本發(fā)明CRF拮抗劑的其它用途包括治療炎癥(例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、眼色素層炎、哮喘、炎性腸疾病和胃腸動力)、庫興氏病(Cushing’sdisease)、嬰幼兒抽搐、嬰兒和成人癲癇癥和其它癲癇發(fā)作，以及各種物質(zhì)濫用和脫癮(包括酒精)。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，公開了含有一種或多種CRF受體拮抗劑的藥物組合物。為了進(jìn)行給藥，可將本發(fā)明的化合物配制成藥物組合物。本發(fā)明的藥物組合物含有本發(fā)明的CRF受體拮抗劑(即結(jié)構(gòu)式(I)的化合物)和可藥用載體和/或稀釋劑。CRF受體拮抗劑以可以有效治療具體病癥的量、即足以產(chǎn)生CRF受體拮抗劑活性的量存在于組合物中，并優(yōu)選具有患者可接受的毒性。根據(jù)給藥途徑的不同，優(yōu)選本發(fā)明的藥物組合物含有0.1mg-250mg/劑的CRF受體拮抗劑，更優(yōu)選1mg-60mg。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以很容易地確定適宜的濃度和劑量。
可藥用的載體和/或稀釋劑是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的。對于以溶液形式配制的組合物，可接受的載體和/或稀釋劑包括鹽水和無菌水，并可選擇性地含有抗氧劑、緩沖劑、抑菌劑和其它常用添加劑。組合物還可以配制成丸劑、膠囊、顆粒劑或片劑，它們除了含有CRF受體拮抗劑外，還含有稀釋劑、分散劑和表面活性劑、粘合劑和潤滑劑。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)公認(rèn)的方法，例如《Remington’s藥物科學(xué)》(Remington’s Pharmaceutical Sciences)，Gennaro編，Mack Publishing Co.，Easton，PA 1990中公開的方法，以適宜的方式配制CRF受體拮抗劑制劑。
此外，本發(fā)明還包括前藥。前藥是指當(dāng)向患者給藥時(shí)可以在體內(nèi)釋放出結(jié)構(gòu)式(I)化合物的任何共價(jià)結(jié)合的載體。前藥通常通過將功能基以可以通過常規(guī)處理或在體內(nèi)裂解生成母體化合物的方式修飾制得。前藥包括，例如，其中的羥基、氨基或巰基與任何在向患者給藥時(shí)可以裂解形成羥基、氨基或巰基的基團(tuán)結(jié)合的本發(fā)明化合物。因此，代表性的前藥的例子包括(但不僅限于)結(jié)構(gòu)式(I)化合物的醇和胺官能基的乙酸酯、甲酸酯和苯甲酸酯衍生物。此外，在羧酸(-COOH)的情況下，還可以采用酯，例如甲酯、乙酯等。
就立體異構(gòu)體而言，結(jié)構(gòu)式(I)的化合物可以帶有手性中心并可以以外消旋體、外消旋混合物和單個(gè)對映體或非對映體的形式存在。所有這些異構(gòu)體形式均包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)，包括其混合物。此外，結(jié)構(gòu)式(I)化合物的某些結(jié)晶形式可以以多晶型存在，所述多晶型也包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。另外，某些結(jié)構(gòu)式(I)的化合物還可以和水或其它有機(jī)溶劑形成溶劑化物。所述溶劑化物同樣包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了治療各種病癥或疾病，包括內(nèi)分泌、精神病學(xué)和神經(jīng)病學(xué)的病癥或疾病的方法。所述方法包括，向溫血動物施用足以治療所述病癥或疾病量的本發(fā)明化合物。所述方法包括全身性給藥本發(fā)明的CRF受體拮抗劑，優(yōu)選以藥物組合物的形式給藥。本文所用的全身性給藥包括口服和胃腸外給藥方法。對于口服給藥，適宜的CRF受體拮抗劑的藥物組合物包括散劑、顆粒劑、丸劑、片劑和膠囊，以及液體制劑、糖漿、混懸劑和乳劑。這些組合物還可含有矯味劑、防腐劑、助懸劑、增稠劑和乳化劑以及其它可藥用添加劑。對于胃腸外給藥，可將本發(fā)明的化合物配制成含水注射溶液，該溶液除了CRF受體拮抗劑外，還可含有緩沖劑、抗氧劑、抑菌劑和常用于所述溶液的其它添加劑。
如上所述，可以通過施用本發(fā)明的化合物來治療多種病癥或疾病。具體地講，可將本發(fā)明的化合物對溫血動物給藥以治療抑郁、焦慮癥、恐慌癥、強(qiáng)迫癥、異常的攻擊行為、不穩(wěn)定心絞痛、反應(yīng)性高血壓、神經(jīng)性食欲缺乏、食欲過盛、過敏性腸綜合征、應(yīng)激引起的免疫抑制、中風(fēng)、炎癥、庫興氏病、嬰幼兒抽搐、癲癇和物質(zhì)濫用和脫癮。
提供以下實(shí)施例是用來進(jìn)行說明的，而非限定性的。
實(shí)施例本發(fā)明的CRF受體拮抗劑可以通過實(shí)施例1-12中公開的方法進(jìn)行制備。實(shí)施例13提供了測定受體結(jié)合活性(Ki)的方法，實(shí)施例14公開了用于篩選本發(fā)明化合物對CRF-刺激的腺苷酸環(huán)化酶活性的試驗(yàn)。
實(shí)施例1結(jié)構(gòu)式(I-1)的代表性化合物的合成結(jié)構(gòu)式(I-1a) 化合物(2)將2，4-二氯-6-甲基-3-乙酯吡啶(1)(5.0g 21.36mmol)、4-庚基胺(21.36mmol)和三乙胺(2.97ml，21.36mmol)的乙醇溶液加熱回流過夜。蒸除乙醇并將殘余物溶于乙酸乙酯，用飽和碳酸氫鈉(bicarbonate)溶液和鹽水洗滌。將有機(jī)層用碳酸鈉干燥然后真空濃縮。通過硅膠柱用乙酸乙酯-己烷洗脫將化合物(2)與(1)和(3)分離。化合物(4)將化合物(2)(20.0mmol)和肼(25.0mmol)的乙醇溶液回流過夜。蒸除乙醇并將殘余物溶于乙酸乙酯，用水洗滌，用硫酸鈉干燥然后真空濃縮得到化合物(4)，該化合物不經(jīng)純化直接用于隨后的步驟?；衔?5)將化合物(4)(15.0mmol)和三氯氧磷(15ml)的混合物回流3小時(shí)，冷卻，倒在冰上并用1N NaOH中和。將水層用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥然后濃縮得到所需的化合物(5)。化合物(6)向化合物(5)(15.0mmol)的THF溶液中加入三-正丁基(1-乙氧基)乙烯基錫(10.0mmol)和二(三苯膦)氯化鈀(II)(10％mol)。將混合物回流24小時(shí)。將溶液在乙酸乙酯和水之間進(jìn)行分配。將有機(jī)相用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥然后真空濃縮。將殘余物溶于四氯化碳并在冰浴溫度下加入到吡啶高溴酸鹽(75.0mmol)的四氯化碳懸浮液中。將溫度升至室溫并攪拌4小時(shí)。將混合物用氯仿稀釋并依次用鹽水、鹽酸(10％)、飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，用碳酸鈉干燥然后真空濃縮。將化合物(6)通過硅膠柱純化。化合物(7)向化合物(6)(10.0mmol)的THF溶液中加入1M六甲基乙硅氮烷基鋰(lithium hexamethyldisilizane)的THF溶液(11.0mmol)并將混合物室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物通過用乙酸乙酯稀釋的1N鹽酸中和。將有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥然后真空濃縮。將殘余物溶于THF并加入BH3-THF(1M)，然后將反應(yīng)液回流8小時(shí)。將混合物用1N鹽酸水解并用乙酸乙酯稀釋，將有機(jī)層用飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌，然后真空濃縮得到化合物(7)?；衔?8)向化合物(7)(0.5mmol)的DMF溶液中依次加入NaH(0.6mmol)和2，3-二氯-5-三氟甲基-吡啶(0.6mmol)。將混合物于90℃加熱過夜。將反應(yīng)混合物用1N鹽酸中和，然后在水和乙酸乙酯之間進(jìn)行分配。將有機(jī)層用飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌然后真空濃縮。將混合物通過硅膠柱純化，用乙酸乙酯-己烷洗脫。
結(jié)構(gòu)式(I-1b)的化合物可以以相同的方式制得，但用2，4-二氯-6-甲基-3-乙酯嘧啶(1’)代替相應(yīng)的吡啶(1)，如以下反應(yīng)方案所示。
結(jié)構(gòu)式(I-1b) 化合物(4’)將化合物(2’)(20.0mmol)和2，4-二氯苯肼(25.0mmol)的乙醇溶液回流過夜。蒸除乙醇并將殘余物溶于乙酸乙酯，用水洗滌，用硫酸鈉干燥然后真空濃縮得到化合物(4’)，該化合物不經(jīng)純化直接用于隨后的步驟。化合物(5’)將化合物(4’)(15.0mmol)和三氯氧磷(15ml)的混合物回流3小時(shí)，冷卻，倒在冰上并用1N NaOH中和。將水層用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥然后濃縮得到所需產(chǎn)物(5’)?；衔?6’)向化合物(5’)(15.0mmol)的THF溶液中加入三-正丁基(1-乙氧基)乙烯基錫(10.0mmol)和二(三苯膦)氯化鈀(II)(10％mol)。將混合物回流24小時(shí)。將溶液在乙酸乙酯和水之間進(jìn)行分配。將有機(jī)相用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥然后真空濃縮。將殘余物溶于四氯化碳并在冰浴溫度下加入到吡啶高溴酸鹽(75.0mmol)的四氯化碳懸浮液中。將溫度升至室溫并攪拌4小時(shí)。將混合物用氯仿稀釋并依次用鹽水、鹽酸(10％)、飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，用碳酸鈉干燥然后真空濃縮。將化合物(6’)通過硅膠柱純化?；衔?7’)向化合物(6’)(10.0mmol)的THF溶液中加入氫化鈉(11.0mmol)并將混合物室溫?cái)嚢柽^夜。將混合物通過用乙酸乙酯稀釋的1N鹽酸中和。將有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥然后真空濃縮。將殘余物溶于THF并加入BH3-THF(1M)，然后將反應(yīng)液回流8小時(shí)。將混合物用1N鹽酸水解并用乙酸乙酯稀釋，將有機(jī)層用飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌，然后真空濃縮得到化合物(7’)。
實(shí)施例2結(jié)構(gòu)式(I-2)的代表性化合物的合成結(jié)構(gòu)式(I-2a) α-鄰苯二甲酰亞胺-2，4-三氯苯乙酮(1)將α-2，4-三氯苯乙酮(15g，67mmol)在攪拌下于5℃下加入到鄰苯二甲酰亞胺鉀(16g，86mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(70ml)懸浮液中。5分鐘后，將形成的溶液升溫至室溫，然后于50℃加熱0.5小時(shí)。加熱后，將溶液用泵濃縮并將得到的固體在乙酸乙酯/碳酸氫鈉溶液之間進(jìn)行分配，然后將得到的有機(jī)層合并。將有機(jī)層干燥然后蒸除所有溶劑得到固體。將該固體用二氯甲烷和乙醚重結(jié)晶得到化合物(1)，9.6g?；衔?2)將α-鄰苯二甲酰亞胺-2，4-三氯苯乙酮(1)(9.6g)的二甲基甲酰胺二甲縮醛(30ml)溶液回流1小時(shí)?；亓骱?，TLC顯示反應(yīng)完全，高真空蒸除溶液溶劑得到黃褐色固體(2)。2-(2’，4’-二氯苯基)-3-氨基吡唑(3)向化合物(2)(14g，36mmol)的無水乙醇(300mL)懸浮液中加入無水肼(1.2g，36mmol)。黃褐色的懸浮液緩慢變成透明的深棕色溶液。將溶液室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后補(bǔ)加無水肼(1.2g，36mmol)。將溶液加熱回流2小時(shí)，形成白色固體。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并濾出固體。將濾液濃縮然后在飽和碳酸氫鈉水溶液和乙酸乙酯之間進(jìn)行分配。將乙酸乙酯層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾然后濃縮。將殘余物通過快速硅膠色譜純化得到棕色粘稠固體狀所需產(chǎn)物(3)(7.7g，33.8mmol，94％)，將其通過GC/MS進(jìn)行鑒定。2-甲基-4-羥基-7-(2’，4’-二氯苯基)-吡唑并吡啶(4)將化合物(3)(7.7g，33.8mmol)、乙酰乙酸乙酯(8.4g，65mmol)和120mg對甲苯磺酸一水合物的200mL苯溶液回流2小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮然后溶于20mL二苯基醚。將二苯基醚于240℃加熱10分鐘，冷卻然后過濾收集固體，用乙醚沖洗。得到棕色固體狀產(chǎn)物(4)(2.5g，8.4mmol，25％)，將其通過1HNMR進(jìn)行鑒定。2-甲基-4-氯-7-(2’，4’-二氯苯基)-吡唑并吡啶(5)將化合物(4)(2.0g，6.8mmol)和三氯氧磷(10mL)的混合物回流2小時(shí)，冷卻，倒在碎冰上，用1N NaOH中和。將水層用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，濃縮得到黃色固體，將其在乙醚中研制。得到淺黃色固體狀所需產(chǎn)物(5)(1.1g，3.2mmol，47％)，將其通過GC/MS、元素分析和1HNMR進(jìn)行鑒定。2-甲基-4-(N-4-庚基)-7-(2’，4’-二氯苯基)-吡唑并吡啶(6)將(5)(0.3g，0.96mmol)和對甲苯磺酸一水合物(250mg)在0.8mL 4-庚胺中的混合物在5ml反應(yīng)瓶中于180℃回流6小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻，在乙酸乙酯和水之間進(jìn)行分配。將有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，濃縮，通過快速硅膠色譜純化(己烷/乙酸乙酯，1∶1)得到黃色油狀所需產(chǎn)物(6)(140mg，0.36mmol，37％)，將其通過GC/MS和1H NMR進(jìn)行鑒定?；衔?7)(I-2a-1)將2-甲基-4-(N-4-庚基)-7-(2’，4’-二氯苯基)-吡唑并吡啶(6)(43.9mg，0.11mmol)、碳酸鉀(31.0mg，0.22mmol)和1，2-二溴乙烷在丁酮(2ml)中的混合物于85℃加熱過夜。真空蒸除溶劑并將殘余物在乙酸乙酯和水之間進(jìn)行分配，將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾然后真空濃縮。將化合物(7)通過硅膠柱純化，用二氯甲烷-甲醇(10-1)洗脫，然后通過LC/MS進(jìn)行鑒定。1H NMR(CDCl3，TMS)0.93(t，6H)；137(m，4H)；1.61(m，4H)；2.58(5，3H)；3.67(t，24)；3.82(m，1H)；4.45(t，2H)；6.22(s，1H)；7.35(d，1H)；7.53(s，1H)；7.86(d，1H).化合物(8)將化合物(7)(43mg，0.1mmol)的甲苯(2ml)溶液用活化的二氧化錳催化劑(100mg)在回流下處理16小時(shí)。用硅藻土墊濾除催化劑并將濾液蒸發(fā)至干，然后通過制備TLC(硅膠)用乙酸乙酯∶己烷(1∶1)純化得到化合物(8)。
或者，結(jié)構(gòu)式(I-2a)的化合物可以通過如下方法制備。
結(jié)構(gòu)式(I-2a) 4-硝基吡唑(9)將吡唑(Lancaster)(30.0g，441mmol)分批加入到冰浴冷卻的220ml 97％硫酸中。將混合物于55℃加熱并緩慢加入30ml 70％硝酸(0.5mol，1.1當(dāng)量)。然后將反應(yīng)混合物于55℃攪拌3小時(shí)(通過TLC乙酸乙酯/己烷1/1檢測反應(yīng)，吡唑Rf＝0.4，I2顯色，硝基吡唑Rf＝0.6，UV下觀察)，冷卻，倒入600ml冰水中并用6N NaOH溶液中和(pH7)。然后將產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取(5×150ml)。將有機(jī)相合并，用水(100ml)、鹽水(100ml)洗滌然后用硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮得到白色固體狀所需產(chǎn)物(9)(37.0g，326mmol，74％)。GC/MSm/z＝113(100％)。4-氨基吡唑(10)將4-硝基吡唑(9)(15.0g，133mmol)加入到10％鈀碳(7.0g，6.65mmol，5％mmol)的乙醇(100ml)懸浮液中。將混合物在氫氣壓力(40psi)下室溫?cái)嚢?小時(shí)。通過TLC(乙酸乙酯/己烷1/1，4-硝基吡唑Rf＝0.6，UV下觀察，4-氨基吡唑Rf0.1，UV下觀察)檢測反應(yīng)終點(diǎn)。用硅藻土墊濾除催化劑然后蒸除溶劑。得到布爾戈尼紅色的油狀產(chǎn)物(10)(10.5g，126mmol，95％)，該產(chǎn)物不經(jīng)純化直接用于隨后的步驟。GC/MSm/z＝83(100％)。亞胺(11)。
將4-氨基吡唑(10)(10.5g，126mmol)、乙酰乙酸乙酯(18.0g，140mmol，1.05當(dāng)量)和催化量的對甲苯磺酸一水合物(1.3g，6.65mmol，5％)的100mL苯溶液用迪安斯達(dá)克分水器回流約1小時(shí)。通過TLC(乙酸乙酯/己烷1/1，4-氨基吡唑Rf＝0.1，亞胺Rf＝0.5，UV下觀察，放置過夜后變?yōu)樽厣?檢測反應(yīng)終點(diǎn)。真空蒸除溶劑并將亞胺通過短的硅膠色譜柱純化得到黃褐色固體狀所需產(chǎn)物(11)(22.4g，125mmol，91％)。GC/MSm/z＝195(100％)。5-甲基-7-羥基-吡唑并[4，3-b]吡啶(12)將亞胺(11)(7.03g，35.9mmol)加入到沸騰的二氧六環(huán)(30mL)和二苯基醚(30mL)的溶液中。將混合物加熱至有固體形成(5分鐘)。將反應(yīng)混合物繼續(xù)加熱2分鐘。停止加熱。通過LC/MS(196峰的消失)檢測環(huán)化反應(yīng)的結(jié)束。冷卻至室溫后，加入300ml乙醚并將反應(yīng)混合物攪拌15分鐘。將固體用乙醚沖洗。得到黃褐色結(jié)晶固體狀所需產(chǎn)物(12)(5.09g，34.1mmol，95％)。LC/MS[M＋H]’＝150。5-甲基-7-氯-吡唑并[4.3-b]吡啶(13)將環(huán)化的化合物(12)(4.58g，30.7mmol)的三氯氧磷(30mL)溶液于110℃加熱30分鐘。通過LC/MS(150的峰消失，出現(xiàn)168的峰)檢測反應(yīng)終點(diǎn)。冷卻至室溫后，將反應(yīng)混合物倒在冰上并用6NNaOH溶液將pH調(diào)至5。過濾收集固體并將母液的水層用乙酸乙酯萃取(3×250ml)。將上述固體溶于合并的有機(jī)相中，用鹽水洗滌(1×250ml)然后用硫酸鈉干燥，過濾然后濃縮。將粗產(chǎn)物通過短的硅膠色譜柱進(jìn)行純化得到淺黃色固體狀所需產(chǎn)物(13)(4.50g，26.8mmol，87％)。GC/MSm/z＝167(100％)；LC/MS[M＋H]’＝168。3-溴-5-甲基-7-氯-吡唑并[4，3-b]吡啶(14)將氯化合物(13)(600mg，3.58mmol)在冰浴冷卻下溶于水/甲醇(12mL/12mL)混合物中。向冷卻的混合物中滴加(629mg，3.94mmol，1.1當(dāng)量)的H2O/MeOH(1mL/1mL)溶液。10分鐘后，溶液變?yōu)橥该鱈C/MS顯示不再含有氯化合物。將反應(yīng)混合物濃縮除去甲醇。將粗品反應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取(3×50ml)。將有機(jī)相合并，用鹽水洗滌(1×100ml)并用硫酸鈉干燥，過濾然后真空濃縮。得到淺黃色固體狀所需產(chǎn)物(14)。GC/MSm/z＝245，247(100％)；LC/MS[M＋H]’＝246，248。3-溴-5-甲基-7-(5-氨基壬烷)-吡唑并[4，3-b]吡啶(15)將化合物(14)(1.0g，0.4mmol)和5-氨基壬烷(1.7g，12mmol)以及對甲苯磺酸(1.5g，8mmol)在反應(yīng)瓶中于160℃加熱過夜。將殘余物溶于乙酸乙酯，用飽和碳酸氫鈉溶液、鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥然后真空濃縮。將殘余物用甲苯研制，分離出形成的固體然后真空干燥得到912mg白色固體狀產(chǎn)物(15)。LCMS(M＋H)＝353，354。3-(2，4-二氯苯基)-5-甲基-7-(5-氨基壬烷)-吡唑并[4，3-b]吡啶(16)將化合物(15)(100mg，0.27mmol)、2，4-二氯苯基硼酸(63.7mg)、乙醇(0.6ml)、2M碳酸鈉溶液(0.6ml)、Pd(PPh3)4(10mg)和甲苯(1.6ml)的混合物于160℃加熱過夜。將溶液在乙酸乙酯和水之間進(jìn)行分配。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥然后真空濃縮。將殘余物通過硅膠色譜純化得到34mg產(chǎn)物(16)。LCMS(M＋H)419，420。化合物(17)(I-2a-2)向化合物(16)(34mg，0.08mmol)的2-丁酮(3ml)溶液中加入碳酸鉀(67.18mg，0.48mmol)和二溴乙烷(30.48mg，0.16mmol)并將混合物加熱回流過夜。將混合物在乙酸乙酯和水之間進(jìn)行分配。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥然后真空濃縮。將粗產(chǎn)物通過硅膠色譜純化，用乙酸乙酯-己烷(1-1)洗脫得到10mg產(chǎn)物(17)(在下表2中稱為“化合物(I-2a-1)”)。LC/MS(M＋H)＝445，446。
本發(fā)明的其它代表性化合物通過以上實(shí)施例中所描述的方法制備，其分析數(shù)據(jù)如下表1中所示。
表1代表性化合物的分析數(shù)據(jù) 或者，結(jié)構(gòu)式(I-2b)的化合物可以通過如下反應(yīng)方案制備結(jié)構(gòu)式(I-2b) 化合物(2’)將(1’)(4.50g，30mmol)(T.Huynh-Dinh等，《有機(jī)化學(xué)雜志》(J.Org.Chem.)402825-2830，1975)和三氯氧磷(15mL)的混合物回流3小時(shí)，冷卻，倒在碎冰上，用1N NaOH中和。將水層用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，濃縮得到所需產(chǎn)物(2’)。化合物(3’)向(2’)(3.37g，20mmol)在甲醇(20mL)和水(20mL)的溶液中加入溴(3.84g，24mmol)在甲醇(10mL)和水(10mL)中的溶液。將反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)。將反應(yīng)混合物用硫代硫酸鈉溶液洗滌，用乙酸乙酯萃取。將殘余物通過快速硅膠色譜純化得到所需產(chǎn)物(3’)?；衔?4’)將(3’)(2.50g，10mmol)和對甲苯磺酸-水合物(100mg)在3mL4-庚胺中的混合物于120℃回流5小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻，在乙酸乙酯和碳酸氫鈉水溶液之間進(jìn)行分配。將有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，通過快速硅膠色譜純化得到所需產(chǎn)物(4’)?；衔?5’)向攪拌的(4’)(1.63g，5mmol)的10mL甲苯溶液中加入四(三苯膦)鈀(O)(578mg，0.5mmol，10％mol)和2.0M碳酸鈉水溶液(8mL)，然后加入2，4-二氯-苯硼酸(1.14g，6mmol)的乙醇溶液(8mL)。將形成的混合物在氮?dú)夥障禄亓鬟^夜。將反應(yīng)混合物冷卻，用乙酸乙酯稀釋并用飽和氯化銨溶液洗滌一次。將有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾，濃縮。將殘余物通過快速硅膠色譜純化得到所需產(chǎn)物(5’)?；衔?6’)將(5’)(390mg，1mmol)、1，2-二溴乙烷(1mL)和碳酸鉀(276mg，2mmol)在10mL 2-丁醇中的混合物回流4小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻，在乙酸乙酯和碳酸氫鈉水溶液之間進(jìn)行分配。將有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，濃縮，通過快速硅膠色譜純化得到所需產(chǎn)物(6’)。
實(shí)施例3結(jié)構(gòu)式(I-3)的代表性化合物的合成 N-氧化物(4)將通過Clayton和Kenyon公開的方法(《化學(xué)會志》(J.Chem.Soc.)，2952-57，1950)制備的化合物(3)(7.31g，50mmol)、mCPBA(9.49g，55mmol)在二氯甲烷(200mL)中的混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)。將反應(yīng)混合物在二氯甲烷和水之間進(jìn)行分配。將二氯甲烷用硫酸鈉干燥，過濾然后濃縮得到所需產(chǎn)物N-氧化物(4)?；衔?5)將N-氧化物(4)(4.87g，30mmol)和三氯氧磷(15mL)的混合物回流3小時(shí)，冷卻，倒在碎冰上，然后用1N NaOH中和。將水層用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥然后濃縮得到化合物(5)?；衔?6)向化合物(5)(3.61g，20mmol)在甲醇(20mL)和水(20mL)中的混合物中加入溴(3.84g，24mmol)的甲醇(10mL)和水(10mL)溶液。將反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)。將反應(yīng)混合物用硫代硫酸鈉水溶液洗滌，然后用乙酸乙酯萃取。將乙酸乙酯層合并，用硫酸鈉干燥，過濾然后濃縮。將殘余物通過快速硅膠色譜純化得到化合物(6)?；衔?7)將(6)(2.60g，10mmol)和對甲苯磺酸一水合物(100mg)在3mL4-氨基-庚烷中的混合物于120℃回流5小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻，在乙酸乙酯和碳酸氫鈉水溶液之間進(jìn)行分配。將有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，濃縮，通過快速硅膠色譜純化得到化合物(7)?；衔?8)向攪拌的化合物(7)(1.69g，5mmol)的10mL甲苯溶液中加入四(三苯膦)-鈀(O)(Lancaster)(578mg，0.5mmol，10％mol)和2.0M碳酸鈉水溶液(8mL)，然后加入2，4-二氯-苯硼酸(1.14g，6mmol)的乙醇(8mL)溶液。將形成的黃褐色混合物回流過夜。將反應(yīng)混合物冷卻，用乙酸乙酯稀釋并用飽和氯化銨溶液洗滌一次。將有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾，濃縮。將殘余物通過快速硅膠色譜純化得到化合物(8)。化合物(9)將化合物(8)(404mg，1mmol)、1，2-二溴乙烷(1mL)和碳酸鉀(276mg，2mmol)在10mL 2-丁醇中的混合物回流4小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻，在乙酸乙酯和碳酸氫鈉水溶液之間進(jìn)行分配。將有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，濃縮，通過快速硅膠色譜純化得到化合物(9)。
或者，結(jié)構(gòu)式(I-3b)的化合物可以通過如下反應(yīng)方案制得。
結(jié)構(gòu)式(I-3b) 化合物(2’)向(1’)(Imai，《化學(xué)藥物通報(bào)》(Chem Pharm.Bull.)121030-1039，1964)(3.34g，20mmol)在甲醇(20mL)和水(20mL)中的混合物中加入溴(3.84g，24mmol)的甲醇(10mL)和水(10mL)溶液。將反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)。將反應(yīng)混合物用硫代硫酸鈉水溶液洗滌，然后用乙酸乙酯萃取。將乙酸乙酯層合并，用硫酸鈉干燥，過濾然后濃縮。將殘余物通過快速硅膠色譜純化得到所需產(chǎn)物(2’)。化合物(3’)將(2’)(2.48g，10mmol)和對甲苯磺酸一水合物(100mg)在3mL4-庚胺中的混合物于120℃回流5小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻，在乙酸乙酯和碳酸氫鈉水溶液之間進(jìn)行分配。將有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，濃縮，通過快速硅膠色譜純化得到所需產(chǎn)物(3’)?；衔?4’)向攪拌的(3’)(1.63g，5mmol)的10mL甲苯溶液中加入四(三苯膦)-鈀(O)(578mg，0.5mmol，10％mol)和2.0M碳酸鈉水溶液(8mL)，然后加入2，4-二氯-苯硼酸(1.14g，6mmol)的乙醇(8mL)溶液。將形成的混合物在氮?dú)夥障禄亓鬟^夜。將反應(yīng)混合物冷卻，用乙酸乙酯稀釋并用飽和氯化銨溶液洗滌一次。將有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾，濃縮。將殘余物通過快速硅膠色譜純化得到所需產(chǎn)物(4’)。化合物(5’)將(4’)(390mg，1mmol)、1，2-二溴乙烷(1mL)和碳酸鉀(276mg，2mmol)在10mL 2-丁醇中的混合物回流4小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻，在乙酸乙酯和碳酸氫鈉水溶液之間進(jìn)行分配。將有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，濃縮，通過快速硅膠色譜純化得到所需產(chǎn)物(5’)。
實(shí)施例4結(jié)構(gòu)式(I-4)的代表性化合物的合成結(jié)構(gòu)式(I-4b) 2-氨基-5-甲基-1-(2，4，6-三甲基苯基)-1H-吡咯-3-甲腈(3)將丙酮醇(1)(20.0mL，0.260mol)、2，4，6-三甲基苯胺(2)(36.5mL，0.260mol)和4-甲苯磺酸一水合物(0.20g)的溶液在苯(115mL)中用迪安斯達(dá)克分水器回流以除去水。2小時(shí)后，加入丙二腈(16.4ml，0.260mol)并繼續(xù)加熱14小時(shí)。將混合物冷卻至室溫，濃縮，將殘余物進(jìn)行色譜分離(用15％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)得到27.0g(43％)棕色油狀的化合物(3)。N-[3-氰基-5-甲基-1-(2，4，6-三甲基苯基)-1H-吡咯-2-基]乙酰胺(4)將化合物(3)(25.3g，0.106mol)和乙酸酐(11.0ml，0.117mol)的混合物在乙酸(25mL)中回流45分鐘，冷卻至室溫，倒在碎冰上然后用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層用碳酸氫鈉水溶液洗滌，干燥然后濃縮得到33.6g(100％)黃色泡沫狀化合物(4)。2，6-二甲基-7-(2，4，6-三甲基苯基)-3，7-二氫-吡咯并[2.3-d]嘧啶-4-酮(5)將化合物(4)(32.1g，0.144mol)和85％磷酸(30mL)的混合物于130℃加熱30分鐘。將形成的混合物冷卻至室溫，在劇烈攪拌下倒入冰水中，然后濾出形成的沉淀并真空干燥得到21.6g(67％)粉色固體狀化合物(5)。4-氯-2，6-二甲基-7-(2，4，6-三甲基苯基)-3，7-二氫-吡咯并[2，3-d]嘧啶(6)將化合物(5)(18.3g，65.0mmol)在POCl3(30mL)中的混合物回流3小時(shí)，冷卻至室溫，倒入冰水中，然后用乙酸乙酯萃取。將合并的有機(jī)萃取液用碳酸氫鈉水溶液洗滌，干燥然后真空濃縮。將殘余物進(jìn)行色譜分離(用10％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)得到16.3g(84％)褐色粉末狀化合物(6)。4-氯-2，6-二甲基-7-(2，4，6-三甲基苯基)-5-(2-氯乙?；?-3，7-二氫吡咯并[2，3-d]嘧啶(7)將化合物(6)(11.2g，37.4mmol)加入到20當(dāng)量氯化鋁和25當(dāng)量氯乙酰氯的氯仿溶液(150mL)中。將溶液加熱回流16小時(shí)。分出有機(jī)層并將水層用二氯甲烷萃取。將合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥然真空蒸發(fā)得到化合物(7)。4-(4-庚基氨基)-2，6-二甲基-7-(2，4，6-三甲基苯基)-5-(2-氯乙?；?-3，7-二氫吡咯并[2，3-d]嘧啶(8)將化合物(7)(730mg，2mmol)、4-氨基庚烷(250mg，2.2mmol)和三乙胺(250mg，2.5mmol)的混合物室溫?cái)嚢?6小時(shí)。將溶液用乙酸乙酯稀釋并用鹽水洗滌。將有機(jī)層用硫酸鈉干燥然后蒸發(fā)至干得到化合物(8)?；衔?9)將(8)(440mg，1mmol)的THF(10mL)溶液冷卻至0℃，然后緩慢加入1M六甲基乙硅氮烷基鋰的THF(1mL)溶液。將反應(yīng)液加熱回流16小時(shí)，蒸發(fā)至干，用乙酸乙酯和己烷通過快速色譜純化得到化合物(9)。
或者，結(jié)構(gòu)式(I-4a)的化合物可以通過如下反應(yīng)方案制備。
結(jié)構(gòu)式(I-4a) 2-氨基-5-甲基-1-(2，4，6-三甲基苯基)-1H-吡咯-3-甲酸乙酯(11)將丙酮醇(1)(20mL，0.26mol)、2，4，6-三甲基苯胺(2)(36.5mL，0.260mol)和4-甲苯磺酸-水合物(0.21g)的溶液在苯(115mL)中用迪安斯達(dá)克分水器回流以除去水。2小時(shí)后，加入氰基乙酸乙酯(27.7ml，0.26mol)并繼續(xù)加熱14小時(shí)。將混合物冷卻至室溫，濃縮，將殘余物進(jìn)行色譜分離(用15％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)得到21.4g(29％)黃色油狀的化合物(11)。3-乙氧羰基-4-羥基-2，6-二甲基-7-(2，4，6-三甲基苯基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(12)將化合物(11)(12.3g，43.0mmol)、3-乙氧基巴豆酸乙酯(6.79g，43.0mmol)和4-甲苯磺酸一水合物(0.50g)的二甲苯(100mL)溶液回流30分鐘。再用30分鐘的時(shí)間蒸除溶劑，然后將化合物冷卻至室溫。加入叔丁醇鉀(4.82g，43.0mmol)的無水乙醇(50mL)溶液并將混合物于80℃加熱3小時(shí)，冷卻至室溫，用乙酸(2.50mL)處理然后真空濃縮。將殘余物加入乙酸乙酯中，用乙醚處理析出6.91g(46％)白色粉末狀的化合物(12)。4-羥基-2，6-二甲基-7-(2，4，6-三甲基苯基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡噻(13)將化合物(12)(4.11g，11.7mmol)在1.0M氫氧化鋰(25mL)和乙醇(15mL)中的溶液加熱回流17小時(shí)。將混合物冷卻至室溫，用稀鹽酸中和并用乙酸乙酯萃取。將合并的有機(jī)萃取液用氯化鈉水溶液洗滌，干燥，然后真空濃縮。將殘余物在二苯基醚(2.5mL)中于200℃加熱2小時(shí)，冷卻至室溫，然后用甲醇-乙酸乙酯結(jié)晶得到1.41g(43％)白色粉末狀的化合物(13)。4-氯-2，6-二甲基-7-(2.4.6-三甲基苯基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(14)化合物(14)按照以上制備化合物(6)時(shí)所用的相同方法從化合物(13)制備。4-氯-2，6-二甲基-7-(2，4，6-三甲基苯基)-5-(2-氯乙?；?-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(15)化合物(15)按照以上制備化合物(7)時(shí)所用的相同方法從化合物(14)制備。4-(4-庚基氨基)-2，6-二甲基-7-(2，4，6-三甲基苯基)-5-(2-氯乙酰基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(16)化合物(16)按照以上制備化合物(8)時(shí)所用的相同方法從化合物(15)制備?；衔?7化合物(17)按照以上制備化合物(9)時(shí)所用的相同方法從化合物(16)制備。
結(jié)構(gòu)式(I-4b)的化合物可以按照如下反應(yīng)制備。
結(jié)構(gòu)式(I-4b) 5-烯丙基-4，6-二氯-2-甲基嘧啶(18)將乙脒鹽酸鹽(11.2g，119mmol)加入到攪拌的甲醇鈉(6.41g，119mmol)的甲醇(180mL)溶液中。5分鐘后，加入烯丙基丙二酸二乙酯(18ml，91mmol)并將混合物加熱回流15小時(shí)，冷卻至室溫，然后真空濃縮得到20g白色固體狀的粗品吡啶。將其在三氯氧磷(100mL)中加熱回流5小時(shí)。將混合物冷卻至室溫，倒在碎冰(200mL)上，用NaHCO3粉末中和然后用乙酸乙酯萃取。將合并的萃取液干燥(硫酸鎂)，真空濃縮，然后將殘余物進(jìn)行色譜分離(用10％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)得到7.32g(30％)淺黃色油狀的嘧啶(18)。5-烯丙基-4-氯-6-(2，4-二氯苯胺基)-2-甲基嘧啶(19)將氫化鈉的礦物油分散液(60％，1.38g，34.5mmol)加入到攪拌的嘧啶(18)(3.50g，17.2mmol)和2，4-二氯苯胺(3.07g，18.9mmol)的DMF(40mL)溶液中。25分鐘后，將混合物倒入水(100mL)中并用二氯甲烷萃取。將合并的萃取液干燥(MgSO4)，真空濃縮，將殘余物進(jìn)行色譜分離(用二氯甲烷洗脫)得到2.09g(37％)白色粉末狀的嘧啶(19)。4-氯-1-(2，4-二氯苯基)-6-甲基-5，7-二氮雜吲哚(20)將高碘酸鈉(3.83g，17.9mmol)加入到攪拌的(19)(1.94g，5.90mmol)的3∶1丙酮-水(55mL)溶液中。將混合物短時(shí)間加熱以形成均相，然后加入2.5％四氧化鋨的叔丁醇溶液(0.4mL)。20小時(shí)后，將混合物用水(50mL)和飽和硫代硫酸鈉(50mL)稀釋并用乙酸乙酯萃取。將合并的萃取液真空濃縮，將殘余物在二氯甲烷(40mL)和4N HCl(5mL)中攪拌4小時(shí)。將混合物倒入飽和NaHCO3中，用二氯甲烷萃取，干燥(MgSO4)然后真空濃縮。將殘余物進(jìn)行色譜分離(用二氯甲烷洗脫)得到0.929g(50％)白色固體狀的二氮雜吲哚(20)。3-溴-1-(2，4-二氯苯基)-4-(4-庚基氨基)-6-甲基-5，7-二氮雜吲哚(21)將溴(0.077mL，1.5mmol)加入到攪拌的(20)(214mg，0.685mmol)的二氧六環(huán)(21mL)溶液中。4小時(shí)后，將混合物用氯化鈉水溶液稀釋并用乙酸乙酯萃取。將合并的萃取液干燥(MgSO4)然后真空濃縮得到溴化物粗品。將其加入4-庚胺(3mL)中并于90℃加熱45分鐘。將形成的混合物冷卻至室溫，真空濃縮，將殘余物通過制備TLC純化(用15％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)得到227mg(70％)黃色油狀的(21)，其在放置中固化。N-烯丙基-3-溴-1-(2，4-二氯苯基)-4-(4-庚基)氨基-6-甲基-5，7-二氮雜吲哚(22)將氫化鈉的礦物油分散液(60％，80mg，2.0mmol)加入到攪拌的(21)(186mg，0.396mmol)的DMF(5mL)溶液中。10分鐘后，加入烯丙基碘(0.15mL，1.6mmol)并繼續(xù)攪拌90分鐘。將混合物用水和氯化鈉水溶液稀釋并用乙酸乙酯萃取。將合并的萃取液干燥(MgSO4)，真空濃縮，然后將殘余物通過制備TLC純化(用5％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)得到117mg(58％)白色固體狀的(22)?；衔?23)(I-4b-1)將四(三苯膦)鈀(O)(22mg，0.019mmol)加入到攪拌的5(83mg，0.16mmol)和醋酸鉀(85mg，0.87mmol)的DMF(3mL)溶液中，然后將形成的混合物于83℃加熱45分鐘。將混合物冷卻至室溫，倒入氯化鈉水溶液中并用乙酸乙酯萃取。將合并的萃取液真空濃縮，將殘余物通過制備TLC純化(用15％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)得到59mg(86％)無色油狀的(23)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ7.57(d，J＝2.4Hz，1H)，7.49(d，J＝8.4Hz，1H)，7.38(dd，J＝8.6，2.3Hz，1H)，6.98(s，1H)，5.38(br s，1H)，5.12(br s，1H)，4.93(h，J＝5.0Hz，1H)，4.03(br s，2H)，2.54(s，3H)，1.71-1.48(m，4H)，1.38-1.26(m，4H)，0.92(t，J＝7.4Hz，6H)；LCMS(MH+，429).化合物24(I-4b-2)將烯烴(23)(9.4mg，0.022mmol)和10％吸附在活性炭上的鈀(3mg)在乙酸乙酯(2mL)中在氫氣氣囊下攪拌5小時(shí)。將混合物用硅藻土墊過濾，真空濃縮，將殘余物通過制備TLC純化(用15％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)得到4.9mg(52％)元色油狀的(24)1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ7.55(d，J＝2.7Hz，1H)，7.48(d，J＝8.4Hz，1H)，7.36(dd，J＝8.7，2.7Hz，1H)，6.63(br s，1H)，4.85(h，J＝4.9Hz，1H)，3.43(dd，J＝12.3，4.8Hz，1H)，3.23-3.19(m，1H)，3.22(dd，J＝12.0，9.6Hz，1H)，2.54(s，3H)，1.68-1.43(m，4H)，1.39-1.25(m，7H)，0.95-0.89(m，6H)；LCMS(MH+，431).
實(shí)施例5結(jié)構(gòu)式(I-2A)的其它代表性化合物的合成本發(fā)明其它的代表性化合物通過如下反應(yīng)方案制備。 化合物(2)
將化合物(1)(270mg，0.86mmol)、對甲苯磺酸一水合物(225mg，1.18mmol)和DL-2-氨基-1-戊醇(1mL)于160℃加熱3小時(shí)。將混合物冷卻至室溫，用二氯甲烷稀釋，然后在硅膠柱上純化(用10％甲醇的二氯甲烷溶液洗脫)得到408mg(100％)黃色固體狀的化合物(2)1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.76(d，J＝4.8Hz，1H)，7.53(br s，1H)，7.24-7.12(m，2H)，7.20(d，J＝7.8Hz，1H)，6.12(s，1H)，3.76-3.67(m，3H)，2.49(s，3H)，1.63-1.56(m，2H)，1.45-1.32(m，3H)，0.89(t，J＝7.1Hz，3H)；LC/MS(MH+，379).化合物(3)將化合物(2)(478mg，0.86mmol)溶于48％HBr(5mL)并于110℃加熱4天。將混合物冷卻至室溫，小心地用固體NaOH堿化，然后用乙酸乙酯萃取。將合并的萃取液干燥(MgSO4)然后真空濃縮得到159mg(51％)黃色泡沫狀的化合物(3)1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.86(d，J＝8.4Hz.1H)，7.52(d，J＝2.1Hz，1H)，7.34(dd，J＝8.1，2.1Hz，1H)，6.30(s，1H)，4.69(br s，1H)，4.60(dd，J＝12.0，3.6Hz，1H)，4.10(dd，J＝12.2，8.6Hz，1H)，3.88-3.85(m，1H)，2.58(s，3H)，1.78-1.55(m，4H)，1.05(t，J＝7.4Hz，3H)；LC/MS(MH+，361).化合物(4)將氫化鈉的礦物油分散液(60％，10mg，0.25mmol)加入到攪拌的化合物(3)(16mg，0.044mmol)的DMF(0.5mL)溶液中。5分鐘后，加入1-溴丙烷(0.050mL，0.55mmol)并繼續(xù)攪拌10分鐘。將混合物小心地用飽和碳酸氫鈉溶液稀釋并用乙酸乙酯萃取。將合并的萃取液真空濃縮，然后將殘余物通過制備TLC純化(用10％甲醇的二氯甲烷溶液洗脫)得到7mg(40％)黃色油狀的化合物(4)，其中R1是正丙基。該方法是合成表2中所列化合物的代表性方法。
表2代表性化合物的分析數(shù)據(jù) 實(shí)施例6結(jié)構(gòu)式(I-2A)的其它代表性化合物表3的代表性化合物通過以上實(shí)施例5中所描述的方法制備。
表3代表性化合物的分析數(shù)據(jù) 實(shí)施例7結(jié)構(gòu)式(I-2A)的其它代表性化合物的合成表4的代表性化合物通過如下方法制備(R＝乙基或氫)
表4代表性化合物的分析數(shù)據(jù) 實(shí)施例8結(jié)構(gòu)式(I-2A)的其它代表性化合物的合成表5的代表性化合物通過如下方法制備 表5代表性化合物的分析數(shù)據(jù) 實(shí)施例9結(jié)構(gòu)式(I-2A)的其它代表性化合物的合成表6的代表性化合物通過如下方法制備 表6代表性化合物的分析數(shù)據(jù) 實(shí)施例10結(jié)構(gòu)式(I-2A)的其它代表性化合物的合成表7的代表性化合物通過如下方法制備
表7代表性化合物的分析數(shù)據(jù) 實(shí)施例11結(jié)構(gòu)式(I-2A)的其它代表性化合物的合成表8的代表性化合物通過如下方法制備
表8代表性化合物的分析數(shù)據(jù) 實(shí)施例12結(jié)構(gòu)式(I-2A)的其它代表性化合物的合成表9的代表性化合物通過如下方法制備
表9代表性化合物的分析數(shù)據(jù)
實(shí)施例13具有CRF受體結(jié)合活性的代表性化合物可以通過DeSouza等(《神經(jīng)科學(xué)雜志》(J.Neurosci.)788-100，1987)描述的常規(guī)放射性配體結(jié)合試驗(yàn)來評估本發(fā)明化合物對CRF受體的結(jié)合活性。通過使用各種放射性標(biāo)記的CRF配體，可用該試驗(yàn)來評估本發(fā)明化合物對任何CRF受體亞型的結(jié)合活性。簡言之，結(jié)合試驗(yàn)涉及從CRF受體上置換放射性標(biāo)記的CRF配體。
更具體地講，結(jié)合試驗(yàn)用約1×106穩(wěn)定轉(zhuǎn)染人CRF受體的細(xì)胞/管在1.5ml Eppendorf管中進(jìn)行。向各試管中加入約0.1ml含或不含未標(biāo)記的蛙皮降壓肽、硬骨魚緊張肽I或CRF(最終濃度為1μM)的試驗(yàn)緩沖液(例如，Dulbecco’s磷酸鹽緩沖鹽水，10mM氯化鎂，20μM桿菌肽)(用來測定非特異性結(jié)合)、0.1ml[125I]酪氨酸-羊CRF(最終濃度約200pM或接近于通過Scatchard分析測得的KD)和0.1ml含CRF受體之細(xì)胞的膜懸浮液。將混合物于22℃保溫2小時(shí)，然后通過離心將結(jié)合的和游離的放射性配體分離。將沉積物洗滌兩次后，在緊靠沉積物的上方對試管進(jìn)行切割并以大約80％的效率在γ計(jì)數(shù)器中監(jiān)測放射性。所有放射性配體的結(jié)合數(shù)據(jù)均用Munson和Rodbard(《分析生物化學(xué)》(Anal.Biochem.)107220，1990)的非線性最小二乘法曲線擬合程序LIGAND進(jìn)行分析。
實(shí)施例14CRF-刺激的腺苷酸環(huán)化酶活性還可以通過各種功能性試驗(yàn)對本發(fā)明的化合物進(jìn)行評估。例如，可以將本發(fā)明的化合物進(jìn)行CRF-刺激的腺苷酸環(huán)化酶活性的篩選。測定CRF-刺激的腺苷酸環(huán)化酶活性的試驗(yàn)可以按照Battaglia等的描述(《突觸》(Synapse)1572，1987)進(jìn)行，并對其進(jìn)行改良以使該試驗(yàn)適用于完整的細(xì)胞制品。
更具體地講，常規(guī)的試驗(yàn)混合物在0.5mL的最終體積中含有如下物質(zhì)2mML-谷氨酰胺、20mM HEPES和1mM IMBX的DMEM緩沖液溶液。在刺激研究中，將帶有轉(zhuǎn)染的CRF-受體的完整細(xì)胞置于24孔板中并與各種濃度的CRF相關(guān)肽和不相關(guān)肽一起在37℃下保溫1小時(shí)以確定特定受體亞型的藥理學(xué)排列順序圖型。保溫后，吸出培養(yǎng)液，將各孔輕柔地用新鮮的培養(yǎng)液洗滌一次，然后吸出培養(yǎng)液。為了測定細(xì)胞內(nèi)cAMP的量，將300μl 95％乙醇和20mM鹽酸的溶液加入到各孔中并將形成的懸浮液于-20℃保溫16-18小時(shí)。將溶液轉(zhuǎn)移至1.5mL Eppendorf管內(nèi)并將各孔用另外200μl乙醇/鹽酸洗滌并與第一部分合并。將樣品冷凍干燥然后用500μl乙酸鈉緩沖液重新懸浮。用來自Biomedical Technologies Inc.(Stoughton，MA)的單抗體試劑盒測定樣品中的cAMP。為了對化合物進(jìn)行功能性評估，將引起cAMP生產(chǎn)80％刺激的CRF或相關(guān)肽的單一濃度與各種濃度的競爭性化合物(10-12至10-6M)一起保溫。
可以理解，盡管為了說明的目的在文中對本發(fā)明的具體實(shí)施方案進(jìn)行了描述，但可以進(jìn)行各種修改而不背離本發(fā)明的實(shí)質(zhì)和范圍。因此，本發(fā)明僅受所附權(quán)利要求的限定。
權(quán)利要求
1.具有如下結(jié)構(gòu)(I)的化合物 包括其立體異構(gòu)體、前藥和可藥用鹽，其中n是1或2；A和C各自獨(dú)立地是氮、碳或CH；B是氮或CR3；條件是，A、B和C中至少有一個(gè)是氮；A、B和C不全是氮；并且A-B和B-C之一是雙鍵；X是氮或CH；Ar是芳基、取代的芳基、雜芳基或取代的雜芳基；R是任選的取代基，其在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地是烷基、亞烷基、芳基烷基或雜芳基烷基，其中m是0、1、2或3并且表示R取代基的數(shù)目；R1是-C(H)0，1(R4)(R5)或-SO2R5；R2是氫或烷基；R3是氫、烷基或鹵代烷基；R4是氫、酮基、烷基、亞烷基或鹵素；和R5是式-Y-Z-R6的基團(tuán)，其中Y是二價(jià)烷基、取代的二價(jià)烷基或直接鍵，Z是NH、-N(R7)、O、S、SO2、C(＝O)、C(＝O)O、OC(＝O)、NHC(＝O)、C(＝O)NH、NH(SO2)、(SO2)NH、NR8C(＝O)O或直接鍵；R6是氫、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、雜環(huán)、取代的雜環(huán)、雜環(huán)烷基或取代的雜環(huán)烷基；或者R7和R8相同或不同并且獨(dú)立地是烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、雜環(huán)、取代的雜環(huán)、雜環(huán)烷基或取代的雜環(huán)烷基；或者R6和R7與它們所連接的氮原子合在一起形成雜環(huán)或取代的雜環(huán)；或者R4和R5合在一起形成環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、環(huán)烷基環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基環(huán)烷基、環(huán)烷基芳基、取代的環(huán)烷基芳基、環(huán)烷基雜環(huán)或取代的環(huán)烷基雜環(huán)。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中n是1并且具有如下結(jié)構(gòu)之一
3.權(quán)利要求1的化合物，其中n是2并且具有如下結(jié)構(gòu)之一
4.權(quán)利要求1的化合物，具有如下結(jié)構(gòu)之一
5.權(quán)利要求4的化合物，其中X是CH并且具有如下結(jié)構(gòu)之一
6.權(quán)利要求4的化合物，其中X是N并且具有如下結(jié)構(gòu)之一
7.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar是苯基或取代的苯基。
8.權(quán)利要求7的化合物，其中，取代的苯基是2，4-二氯苯基、2-氯-4-甲基-苯基、2-甲基-4-氯-苯基、2，4，6-三甲基-苯基、2-氯-4-甲氧基-苯基、2-甲基-4-甲氧基-苯基或2，4-二甲氧基-苯基。
9.權(quán)利要求1的方法，其中Ar是雜芳基或取代的雜芳基。
10.權(quán)利要求9的化合物，其中的雜芳基是吡啶基。
11.權(quán)利要求9的化合物，其中取代的雜芳基是4-甲基-6-二甲基氨基-吡啶-3-基、4-二甲基氨基-6-甲基-吡啶-3-基或6-二甲基氨基-吡啶-3-基。
12.權(quán)利要求1的化合物，其中R是氫。
13.權(quán)利要求1的化合物，其中R是烷基。
14.權(quán)利要求1的化合物，其中R是芳基烷基。
15.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是-CH(正丙基)2、-CH(正丙基)(CH2OCH3)、-CH(苯基)(CH2OCH3)、-CH(CH2OR’)21、-CH(CR2OR’)(乙基)、-CH(CH2OR’)(正丁基)、-CH(CH2OR’)(叔丁基)、-CH(CH2OR’)(4-氯-苯基)、-CH(CH2OR)(CH2CH2SCH3)、-CH(CH2CH3)(CH2O苯基)，其中，R’在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地選自C1-6烷基。
16.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是-SO2R5。
17.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是-C(H)0，1(R4)(R5)。
18.權(quán)利要求17的化合物，其中R1是-CH2R5。
19.權(quán)利要求17的化合物，其中R1是-C(＝O)R5。
20.權(quán)利要求17的化合物，其中R1是-CH(R4)(R5)。
21.權(quán)利要求1的化合物，其中R4是氫。
22.權(quán)利要求1的化合物，其中R4是烷基。
23.權(quán)利要求1的化合物，其中R4是酮基。
24.權(quán)利要求1的化合物，其中Y是二價(jià)烷基或取代的二價(jià)烷基。
25.權(quán)利要求1的化合物，其中Y是直接鍵。
26.權(quán)利要求1的化合物，其中Z是NH、-N(R7)、O、S、SO2、C(＝O)、C(＝O)O、OC(＝O)、NHC(＝O)、C(＝O)NH、NH(SO2)、(SO2)NH或NR8C(＝O)O。
27.權(quán)利要求1的化合物，其中Z是直接鍵。
28.權(quán)利要求1的化合物，其中R6是氫、烷基或取代的烷基。
29.權(quán)利要求1的化合物，其中R6是芳基、取代的芳基、芳基烷基或取代的芳基烷基。
30.權(quán)利要求1的化合物，其中R6是雜環(huán)、取代的雜環(huán)、雜環(huán)烷基或取代的雜環(huán)烷基。
31.權(quán)利要求1的化合物，其中R2是甲基。
32.權(quán)利要求1的化合物，其中R2是乙基。
33.權(quán)利要求1的化合物，具有如下結(jié)構(gòu)
34.權(quán)利要求33的化合物，其中Ar是2，4-二氯苯基、2-氯-4-甲基苯基、2-三氟甲基-4-氯苯基或2-甲氧基-4-三氟甲基。
35.權(quán)利要求33的化合物，其中m是0。
36.權(quán)利要求33的化合物，其中R1是CH(烷基)(烷基)。
37.權(quán)利要求36的化合物，其中R1是CH(正丙基)2。
38.權(quán)利要求36的化合物，其中R1是CH(正丁基)2。
39.權(quán)利要求33的化合物，其中m是1并且R是烷基。
40.權(quán)利要求39的化合物，其中R是甲基、乙基或正丙基。
41.權(quán)利要求40的化合物，其中R1是-CH2(環(huán)烷基)。
42.權(quán)利要求41的化合物，其中R1是-CH2(環(huán)丙基)。
43.權(quán)利要求40的化合物，其中R1是CH(烷基)(烷基)。
44.權(quán)利要求43的化合物，其中R1是CH(正丙基)2或CH(正丁基)2。
45.含有權(quán)利要求1的化合物和可藥用載體或稀釋劑的藥物組合物。
46.在溫血動物中治療表現(xiàn)出CRF分泌過多之病癥的方法，該方法包括，向所述動物施用有效量的權(quán)利要求45的藥物組合物。
47.權(quán)利要求46的方法，其中的病癥是中風(fēng)。
48.權(quán)利要求46的方法，其中的病癥是抑郁。
49.權(quán)利要求46的方法，其中的病癥是焦慮。
全文摘要
本發(fā)明公開了可用于在溫血動物中治療多種病癥、包括表現(xiàn)出CRF分泌過多的病癥例如中風(fēng)的CRF受體拮抗劑。本發(fā)明的CRF受體拮抗劑具有式(Ⅰ)的結(jié)構(gòu),包括其立體異構(gòu)體和可藥用鹽,其中n、m、A、B、C、R、R
文檔編號A61P25/18GK1328559SQ99813171
公開日2001年12月26日 申請日期1999年11月12日 優(yōu)先權(quán)日1998年11月12日
發(fā)明者M·哈達(dá)徹, J·耐爾森, B·P·迪克, 郭志強(qiáng), 黃青, J·R·穆卡賽 申請人:紐羅克里恩生物科學(xué)有限公司