專利名稱：治療神經(jīng)變性病藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含有唑尼沙胺或它的金屬鹽作為活性成分的治療神經(jīng)變性病的藥物。
背景技術(shù)：
唑尼沙胺[化學(xué)名稱3-氨磺酰甲基(sulfamoylmethyl)-1，2-苯并異噁唑或1，2-苯并異噁唑-3-甲基氨磺酰；參考，例如，MerckIndex，12th Ed_10323(1996)]已經(jīng)用作治療癲癇病的藥物或在日本，韓國等用來預(yù)防各種癲癇病的發(fā)作。JP-B-60-33114，JP-B-61-59288和USP 4，172，896公開了唑尼沙胺的制備方法和作為抗癲癇藥物的應(yīng)用。而且，JP-B-7-84384和USP5，128，354也公開了唑尼沙胺作為局部缺血性腦損傷藥物的用途。
隨著老齡化的發(fā)展，神經(jīng)變性病如帕金森病的病人數(shù)量逐漸增加。帕金森病是一種病人的協(xié)調(diào)運(yùn)動受到擾亂的漸進(jìn)性和悲劇性疾病，而且隨著時間流逝病人的運(yùn)動逐漸緩慢，并最終發(fā)展為手臂和大腿的僵化或震顫。上述疾病的病因已知是由于產(chǎn)生多巴胺的黑質(zhì)紋狀體神經(jīng)元的破裂和損傷引起紋狀體多巴胺減少。
另外，紋狀體多巴胺減少的動物，是通過給C57黑色小鼠以1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氫吡啶(下文，指“MPTP”)獲得，它已經(jīng)廣泛地應(yīng)用于帕金森病的動物樣本。Life Sci_54，245(1994)公開了抗癲癇藥物拉莫三嗪[化學(xué)名稱3，5-二氨基-6-(2，3-二氯苯基)-1，2，4-三嗪]和苯妥英，它們對MPTP誘導(dǎo)的多巴胺缺少表現(xiàn)出抑制效果，而卡馬西乎并沒有這種效果。然而，在上述文章的試驗中，黑色小鼠皮下注射15mg／kg劑量的鹽酸MPTP僅一次，因此上述的小鼠并不適合作為帕金森病的動物樣本。
目前對帕金森病的藥物療法是使用多巴胺再生劑(例如，左旋多巴，或左旋多巴與卡比多巴的組合藥物或結(jié)合治療)，多巴胺能激動劑(例如，溴隱亭或特麥角脲)，多巴胺釋放劑(例如，金剛烷胺)，抗膽堿能藥(例如，比哌立登或苯海索)，單胺氧化酶B抑制劑(MAO-B)(例如，司來吉蘭)等。然而，這些藥物從效果和副作用的角度來看都并不令人滿意，人們已經(jīng)在努力開發(fā)一種新的更有效的藥物。
本發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)唑尼沙胺和它的金屬鹽對MPTP誘導(dǎo)的多巴胺能神經(jīng)變性病具有特別強(qiáng)的抑制效果，并由此實現(xiàn)了本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一是提供一種用于治療神經(jīng)變性病的藥物，其含有唑尼沙胺或它的金屬鹽作為活性成分。
本發(fā)明的另一個目的是提供唑尼沙胺或它的金屬鹽在制備神經(jīng)變性病藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明的又一個目的是提供了一種預(yù)防和／或治療哺乳動物(包括人)神經(jīng)變性病的方法，其包括給需要這種預(yù)防和／或治療的哺乳動物以有效量的唑尼沙胺或它的金屬鹽。


圖1是表示在C57黑色小鼠最后一次給以MPTP后24小時，被切除的紋狀體中各種單胺神經(jīng)介質(zhì)和它的代謝產(chǎn)物的含量，鹽酸MPTP腹膜給藥，每天一次，劑量為30mg／kg，共8天。
圖2表示在C57黑色雄性小鼠最后一次給以MPTP后的14天，唑尼沙胺和卡馬西平對MPTP誘導(dǎo)的多巴胺能神經(jīng)變性病的抑制作用。
實現(xiàn)本發(fā)明的最佳方式唑尼沙胺金屬鹽的實例包括鈉鹽，鉀鹽和鋰鹽。唑尼沙胺例如，可以通過JP-B-60-33114，JP-B-61-59288和USP 4，172，896中公開的方法制備。
唑尼沙胺和已知的抗癲癇藥物的藥理學(xué)實驗結(jié)果如下所示，其解釋了唑尼沙胺作為神經(jīng)變性病藥物的應(yīng)用。
在藥理學(xué)實驗中使用的對照抗癲癇藥物列于下。
卡馬西平(參見，例如Merck Index，12th Ed_1826(1996))；苯妥英(參見，例如Merck Index，12th Ed_7475(1996))；拉莫三嗪(參見，例如Merck Index，12th Ed_5367(1996))；苯巴比妥(參見，例如Merck Index，12th Ed_7386(1996))；乙琥胺(參見，例如Merck Index，12th Ed_3794(1996))；丙戊酸鈉(參見，例如Merck Index，12th Ed_10049(1996))；
地西泮(參見，例如Merck Index，12th Ed_3042(1996))；和乙酰唑胺(參見，例如Merck Index，12th Ed_50(1996))。
每個實驗中，通過高壓液相色譜(HPLC)方法測定紋狀體中單胺神經(jīng)介質(zhì)和它的代謝產(chǎn)物的含量。HPLC使用的系統(tǒng)包括泵(L-6000，日本Hitachi有限公司生產(chǎn))，自動注射器，樣品柱(Cosmosil 5C18-A，日本Nacalai Tesque，Inc_生產(chǎn)；4．6φ×250mm)，以及電化學(xué)檢測器(ECD-100，日本Eicom公司生產(chǎn))，實驗條件如下。
流動相0．05M檸檬酸，含有0．075M高氯酸鈉乙腈緩沖液(92．5∶7．5，pH4．3)上述緩沖液含有0．022％辛基磺酸鈉和0．0015％EDTA·2鈉鹽。
流速0．9ml／min。
檢測條件工作電極石墨電極參比電極銀／氯化銀使用電壓750mV另外使用Dunnett的多重比較實驗進(jìn)行統(tǒng)計分析。
實驗1帕金森病動物樣本的獲得實驗使用C57黑色雄性小鼠(11周)。將鹽酸MPTP溶解在生理鹽水中，濃度3mg／ml，并將所得溶液腹膜內(nèi)注射到小鼠，每10g體重注射0．1ml，即劑量為30mg／kg，每天一次，共8天。MPTP最后一次給藥后24小時，對小鼠的頭部進(jìn)行微波照射，并切下紋狀體。
將切下的紋狀體用含有內(nèi)標(biāo)物(5-羥基triptophol；20ng／ml)的50倍體積的0．1N甲酸丙酮(15∶85)勻漿，并將混合物冷卻條件下離心。收集一定量的上清液并在氮?dú)饬髦姓舭l(fā)干燥。然后，所得產(chǎn)物溶解在0．01N乙酸中并離心，然后通過裝有電化學(xué)檢測器的HPLC測定上清液中各種單胺神經(jīng)介質(zhì)和它的代謝產(chǎn)物的含量。
在MPTP最后一次給藥后24小時內(nèi)各種單胺神經(jīng)介質(zhì)和它的代謝產(chǎn)物的含量變化顯示在圖1中。每組有8只動物，圖中的垂直線代表標(biāo)準(zhǔn)誤差，以及符號**表示與對照組(生理鹽水處理組)的數(shù)值有顯著差別，p＜0．01。
從圖1中可以清楚地看出，MPTP顯著降低了多巴胺(DA)和它的代謝產(chǎn)物，高香草酸(HVA)和3，4-二羥基苯乙酸(DOPAC)的含量，但并不影響去甲腎上腺素(NA)，5-羥色胺(5HT)和它們的代謝產(chǎn)物，3-甲氧基-4-羥基苯基亞乙基二醇(MOPEG)和5-羥基吲哚-乙酸(5HIAA)的含量，因此可以肯定MPTP表現(xiàn)了對多巴胺能神經(jīng)元的選擇性。
而且，從圖2所顯示的實驗2的結(jié)果，可以清楚地看出即使在MPTP最后一次給藥后14天也可以觀察到MPTP誘導(dǎo)的紋狀體內(nèi)的多巴胺和它的代謝產(chǎn)物的含量降低，這種含量的降低是不可逆的，并且表明這種缺少多巴胺的小鼠特別適合作為帕金森病的實驗動物。
實驗2對MPTP誘導(dǎo)的多巴胺能神經(jīng)變性病的抑制作用與實驗1相同的方式用鹽酸MPTP腹膜內(nèi)注射C57黑色雄性小鼠(11周)，劑量為30mg／kg，每天一次，共8天。將測試藥物，即抗癲癇藥物懸浮在0．5％黃蓍膠水溶液中，并在MPTP給藥8天時，提前30分鐘將所得溶液口服給藥，每10g體重小鼠0．1ml。在唑尼沙胺和卡馬西平實驗中，MPTP最后一次給藥后24小時以及14天，小鼠的頭接受微波照射并切除紋狀體。使用實驗1中的同樣方法測定紋狀體中的多巴胺和它的代謝產(chǎn)物的含量。在各種抗癲癇藥物實驗中，分別在不同時間對唑尼沙胺(ZNS)，卡馬西平(CBZ)，以及苯妥英(PHT)，拉莫三嗪(LTG)，苯巴比妥(PB)，乙琥胺(ESM)，丙戊酸鈉(VPA)，地西泮(DZP)和乙酰唑胺(AZA)的一組藥物進(jìn)行了測定。各種抗癲癇藥物的給藥劑量列在下面。此外，劑量后面的圓括號中的數(shù)值表示與小鼠產(chǎn)生抗驚厥效果的劑量之比。產(chǎn)生抗驚厥效果的劑量，拉莫三嗪和地西泮在Epilepsia，27，483(1986)中有描述，其它抗驚厥藥物則分別記載在Arzneim。Forsch．(Drug Res．)，30，477(1980)中。
唑尼沙胺(ZNS)10，30，100mg／kg(分別約0．5倍，約1．5倍，約5．1倍)卡馬西平(CBZ)20，60mg／kg(分別約1．5倍，約4．5倍)苯妥英(PHT)30mg／kg(約3．8倍)拉莫三嗪(LTG)30mg／kg(約11．5倍)苯巴比妥(PB)40mg／kg(約3．4倍)
乙琥胺(ESM)600mg／kg(約2．2倍)丙戊酸鈉(VPA)800mg／kg(約2．5倍)地西泮(DZP)5mg／kg(約4．2倍)以及乙酰唑胺(AZA)100mg／kg(約3．8倍)MPTP最后一次給藥后24小時，各種抗癲癇藥物對多巴胺能神經(jīng)變性病的抑制效果列于表1中，根據(jù)紋狀體中多巴胺和它的代謝產(chǎn)物，3，4-二羥基苯乙酸(DOPAC)的含量確定抑制率。根據(jù)正常動物組、賦形劑處理組以及測試藥物處理組的數(shù)值評估抑制作用。表中的數(shù)值代表平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差，以及星號*和**表示與賦形劑處理組的顯著差別分別是p＜0．05和p＜0．01。
而且，MPTP最后一次給藥(每組5-6只動物)后14天唑尼沙胺和卡馬西平對多巴胺能神經(jīng)變性病的抑制效果列于圖2中。圖中的垂直線代表標(biāo)準(zhǔn)誤差，以及星號*和**表示與賦形劑處理組的顯著差別分別是p＜0．05和p＜0．01。
表1對MPTP誘導(dǎo)的多巴胺能神經(jīng)變性病的抑制作用


從表1和圖2中清楚地看出，本發(fā)明的唑尼沙胺(ZNS)抑制MPTP誘導(dǎo)的24小時組和14天組紋狀體中多巴胺和它的代謝產(chǎn)物，3，4-二羥基苯乙酸(DOPAC)的含量降低作用呈劑量依賴抑制效應(yīng)，劑量是10mg／kg，約是小鼠產(chǎn)生抗驚厥效果劑量的0．5倍。特別地，30mg／kg(約是小鼠產(chǎn)生抗驚厥效果劑量的1．5倍)劑量的唑尼沙胺對多巴胺和DOPAC含量降低表現(xiàn)出特別強(qiáng)的抑制效果，劑量為100mg／kg(約是小鼠產(chǎn)生抗驚厥效果劑量的5．1倍)時，抑制率幾乎為100％。
另一方面，從表1和圖2中清楚地看出，卡馬西平(CZB)對MPTP誘導(dǎo)的24小時和14天紋狀體中多巴胺和DOPAC的含量降低的抑制作用并不明顯。此外，在其它抗癲癇藥物中，除拉莫三嗪和苯妥英外，即使劑量是小鼠產(chǎn)生抗驚厥效果劑量的2倍或多倍時，它們對紋狀體中多巴胺和DOPAC含量降低沒有抑制作用。雖然苯妥英在30mg／kg(約是小鼠產(chǎn)生抗驚厥效果劑量的3．8倍)劑量時對多巴胺和DOPAC含量降低有抑制作用，但抑制率僅分別為37．4％和30．2％。在30mg／kg(約是小鼠產(chǎn)生抗驚厥效果劑量11．5倍)劑量時，拉莫三嗪對多巴胺和DOPAC含量降低的抑制作用強(qiáng)于苯妥英，但抑制率僅分別為51．6％和34．1％，比唑尼沙胺在30mg／kg(約是小鼠產(chǎn)生抗驚厥效果劑量1．5倍)劑量時的抑制率80．3％和82．1％還要差。
從上述實驗結(jié)果可以清楚地看出，唑尼沙胺和它的金屬鹽在小鼠產(chǎn)生抗驚厥效果劑量時對MPTP誘導(dǎo)的多巴胺能神經(jīng)變性病有相當(dāng)強(qiáng)的抑制效果，具有低毒性，因此它們可以作為在預(yù)防和治療哺乳動物(包括人)的各種神經(jīng)變性病如原發(fā)或繼發(fā)帕金森病，亨廷頓舞蹈病，舞蹈病樣綜合征和肌張力障礙綜合征中的神經(jīng)變性病藥物。本發(fā)明藥物可以通過口服，非腸道以及直腸方式中的任一種方式給藥。根據(jù)給藥方式，需治療的疾病類型，癥狀嚴(yán)重程度，病人年齡等情況確定唑尼沙胺和它的金屬鹽的劑量，但通常是1-50mg／kg／天，優(yōu)選2-20mg／kg／天，并可以一次或分幾次給藥。
唑尼沙胺和它的金屬鹽可以單獨(dú)用作神經(jīng)變性病藥物或以藥物組合物的形式使用，其可以通過與藥物可接受載體或稀釋劑混合制備。藥物組合物的劑型可以有片劑，膠囊，顆粒，粉劑，糖漿，注射劑以及栓劑，并可以通過常規(guī)方法制備。此外，市場上可以買到的抗癲癇藥物唑尼沙胺片劑和粉劑可以作為本發(fā)明神經(jīng)變性病藥物。
藥物可接受載體或稀釋劑可以是任意通常使用在藥物領(lǐng)域中并且不與唑尼沙胺或它的金屬鹽反應(yīng)的常規(guī)材料。用于制備片劑，膠囊，顆粒和粉劑的藥物可接受載體或稀釋劑的合適的例子包括賦形劑(例如，乳糖，玉米淀粉，蔗糖，甘露糖醇，硫酸鈣或微晶纖維素)，崩解劑(例如，carmellose鈉，改性淀粉，或carmellose鈣)，粘合劑(例如，甲基纖維素，明膠，阿拉伯樹膠，乙基纖維素，羥丙基纖維素，或聚乙烯吡咯烷酮)，以及潤滑劑(例如，近于無水的硅酸，硬脂酸鎂，滑石，或氫化油)?？梢酝ㄟ^常規(guī)方法對片劑進(jìn)行包衣，常規(guī)包衣劑如巴西棕櫚蠟，羥丙基甲基纖維素，大粒凝膠，羥丙基甲基鄰苯二甲酸鹽，乙酸鄰苯二甲酸纖維素，蔗糖，二氧化鈦，脂肪酸脫水山梨醇酯，以及磷酸鈣。
用于制備糖漿的藥物可接受載體或稀釋劑的合適的例子包括甜味劑(例如，蔗糖，葡萄糖，或果糖)，懸浮劑(例如，阿拉伯樹膠，黃蓍膠，carmellose鈉，甲基纖維素，藻酸鈉，微晶纖維素或veegum)，以及分散劑(例如，脂肪酸脫水山梨醇酯，十二烷基硫酸鈉，或多乙氧基醚80)。在制備糖漿時，可以任選加入調(diào)味劑，香味劑或防腐劑。而且，這種糖漿可以干糖漿形式存在，使用時溶解或懸浮。
栓劑的基質(zhì)的合適例子包括可可脂，飽和的脂肪酸甘油酯，甘油基明膠，以及大粒凝膠。在制備栓劑時，可以任選加入表面活性劑或防腐劑。
注射制劑通常是將唑尼沙胺的金屬鹽溶解在蒸餾水中注射使用，并在其中任意加入加溶劑，緩沖劑，pH調(diào)節(jié)劑，等滲劑，緩解疼痛劑或防腐劑。
根據(jù)組合物的總重量，這些藥物組合物中含有的活性成分唑尼沙胺或它的金屬鹽的量是至少0．5％(％重量，下文同此)，優(yōu)選10-70％。這些藥物組合物中可以任選含有其它有治療作用的下述化合物。
本發(fā)明神經(jīng)變性病藥物可以與其它藥物一起使用，如多巴胺再生劑(例如，左旋多巴，或左旋多巴與卡比多巴的組合藥物或結(jié)合治療)，多巴胺能激動劑(例如，溴隱亭或特麥角脲)，多巴胺釋放劑(例如，金剛烷胺)，抗膽堿能藥(例如，比哌立登或苯海索)，單胺氧化酶B抑制劑(MAO-B)(例如，司來吉蘭)等。
本發(fā)明的神經(jīng)變性病藥物組合物舉例如下。
制劑1片劑唑尼沙胺100g乳糖35g玉米淀粉17g微晶纖維素 40g羥丙基纖維素6g幾乎無水的硅酸 1g硬脂酸鎂1g總共200g在上述組分中，將唑尼沙胺，乳糖，玉米淀粉和微晶纖維素混合，并向其中加入已溶于水的羥丙基纖維素，并將混合物捏合，干燥和造粒。向這些顆粒中加入硬脂酸鎂和幾乎無水的硅酸，并將混合物壓縮得到1000個片芯，每個重200mg。然后，通過常規(guī)方法使用羥丙基甲基纖維素，大粒凝膠，二氧化鈦，滑石和幾乎無水的硅酸將上述片芯包衣形成包膜藥片。
制劑220％粉劑唑尼沙胺200g乳糖719g羥丙基纖維素20g幾乎無水的硅酸 1g總共940g使用高切力的造粒機(jī)，將上述所有組分混合，用含有乙基纖維素(40g)和羥丙基纖維素(20g)的乙醇溶液(200g)噴霧造粒，并做成顆粒。然后干燥并調(diào)整粒徑得到20％粉劑。
工業(yè)實用性如上所述，唑尼沙胺和它的金屬鹽在小鼠產(chǎn)生抗驚厥效果劑量條件下對多巴胺能神經(jīng)變性病有相當(dāng)強(qiáng)的抑制效果，因此它們可以作為在預(yù)防和治療哺乳動物(包括人)的各種神經(jīng)變性病如帕金森病，亨廷頓舞蹈病，舞蹈病樣綜合征和肌張力障礙綜合征中的神經(jīng)變性病藥物。
權(quán)利要求
1．一種含有唑尼沙胺或它的金屬鹽作為活性成分的治療神經(jīng)變性病藥物。
2．根據(jù)權(quán)利要求1的藥物，其中活性成分是唑尼沙胺。
3．根據(jù)權(quán)利要求1或2的藥物，其中神經(jīng)變性病是帕金森病。
4．唑尼沙胺或它的金屬鹽在制備神經(jīng)變性病藥物中的應(yīng)用。
5．唑尼沙胺在制備神經(jīng)變性病藥物中的應(yīng)用。
6．根據(jù)權(quán)利要求4或5的用途，其中神經(jīng)變性病是帕金森病。
7．一種預(yù)防和／或治療哺乳動物神經(jīng)變性病的方法，其包括給需要這種預(yù)防和／或治療的哺乳動物以有效量的唑尼沙胺或它的金屬鹽。
8．一種預(yù)防和／或治療哺乳動物神經(jīng)變性病的方法，其包括給需要這種預(yù)防和／或治療的哺乳動物以有效量的唑尼沙胺。
9．根據(jù)權(quán)利要求7或8的預(yù)防和／或治療方法，其中神經(jīng)變性病是帕金森病。
10．根據(jù)權(quán)利要求7-9中的任一項的預(yù)防和／或治療方法，其中每日劑量是1-50mg／kg體重哺乳動物。
11．根據(jù)權(quán)利要求10的預(yù)防和／或治療方法，其中每日劑量是2-20mg／kg體重哺乳動物。
12．根據(jù)權(quán)利要求7-11中的任一項的預(yù)防和／或治療方法，其中哺乳動物是人。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種用于治療神經(jīng)變性病的藥物,其含有唑尼沙胺或它的金屬鹽作為活性成分。本發(fā)明藥物可以用于預(yù)防和治療哺乳動物(包括人)的各種神經(jīng)變性病如帕金森病,亨廷頓舞蹈病,舞蹈病樣綜合征和肌張力障礙綜合征。
文檔編號A61K31/423GK1283113SQ98812680
公開日2001年2月7日 申請日期1998年12月21日 優(yōu)先權(quán)日1997年12月26日
發(fā)明者增田義信, 越智喜昭 申請人:大日本制藥株式會社