專利名稱：由生育酚穩(wěn)定的用于吸入的前體脂質(zhì)體粉的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及前體脂質(zhì)體粉(proliposome powder)，更具體的說，涉及用于吸入的前體脂質(zhì)體粉，涉及生產(chǎn)前體脂質(zhì)體粉的方法、含有前體脂質(zhì)體粉的組合物和使用它們的方法。
背景技術(shù)：
脂質(zhì)體(liposome)是由一系列同心的(concentric)、并與親水的腔室交替排列(alternating with hydrophylic compartments)的類脂雙層(lipid bilayers)構(gòu)成的象膜一樣的囊(vesicles)。它們可以由多種天然的和合成的類脂，如磷酸甘油類脂(phosphoglycerolipids)、鞘類脂和二半乳糖甘油類脂(digalactosylglycerolipids)制成。脂質(zhì)體的主要用途之一是作為不同種類藥物活性成分的載體，以便改善藥的遞送并使某些治療的副作用降到最低。藥物活性成分既可以通過包囊于脂質(zhì)體親水腔室(當(dāng)活性成分是水溶性的時候)，也可以通過包囊于脂雙層中(當(dāng)活性成分是親脂性的時候)而加到脂質(zhì)體中。
與藥用脂質(zhì)體制劑相關(guān)的主要問題之一是長時間穩(wěn)定性。含水的脂質(zhì)體分散體穩(wěn)定性有限，這是由于聚集作用、被囊包裹的活性成分進(jìn)入外相的損失、活性成分或類脂材料的化學(xué)分解等。
如果使用固體組合物，可以在很大程度上解決這些問題。這樣的固體組合物可以含有脂質(zhì)體粉，即一種干燥過的脂質(zhì)體分散體或前體脂質(zhì)體粉。
WO96/19199討論了多種的脂質(zhì)體和前體脂質(zhì)體文獻(xiàn)，并描述了一種前體脂質(zhì)體粉。這種粉呈單相地含有含生物活性成分和相變溫度(Tc)低于37℃的一種類脂或多種類脂的混合物的分散顆粒。
現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，WO96/19199描述的前體脂質(zhì)體粉的穩(wěn)定性可以增高到相當(dāng)?shù)某潭取?br> 發(fā)明的公開本發(fā)明提供一種前體脂質(zhì)體粉，所述的粉含有分散的顆粒，每個顆粒呈單相地含有(1)一種生物活性成分，(2)促穩(wěn)定化比例的生育酚，和(3)相變溫度低于37℃的一種類脂或多種類脂的混合物。
優(yōu)選的生育酚是α-生育酚，更優(yōu)選外消旋α-生育酚。
這種粉尤其適合通過吸入施藥。
這種單相粉可以換用另一種方式描述為含有生物活性成分、相變溫度低于37℃的一種類脂或多種類脂混合物和生育酚的均質(zhì)分子混合物。
從術(shù)語“單相”和“均質(zhì)分子混合物”可以看出，本發(fā)明的粉中沒有活性成分、類脂或生育酚的單獨的晶相。
這種單相粉可以直接吸入，并且也可就地形成，例如在上和/或下呼吸系統(tǒng)中形成加入了生物活性成分的脂質(zhì)體。
一般說來，本發(fā)明可以使用已知的適合采用現(xiàn)有的方法制備脂質(zhì)體的任何倆親的類脂或類脂的混合物。為了使生成的前體脂質(zhì)體粉能夠在生理條件下進(jìn)行水合作用(即為了能夠在呼吸系統(tǒng)中形成脂質(zhì)體)，這種類脂或類脂混合物必須有低于體溫(37℃)的相變溫度。不同的類脂混合物的相變溫度使用公認(rèn)的方法，例如DSC法-見例如J.Suurkuusk等人，生物化學(xué)(Biochemistry)，vol15，no.7，p.1393(1976)，可以容易地確定。一般說來，具有低于37℃相變溫度的任何天然或合成類脂或類脂混合物在本發(fā)明中都是可用的。
作為可以使用的類脂的例子，可以指出天然或合成的類脂，如天然或合成磷酸甘油類脂、鞘類脂和二半乳糖甘油類脂。在天然類脂中可以指出鞘類脂(SL)，如鞘磷脂(SM)、神經(jīng)酰胺和腦苷脂類；半乳糖甘油脂類，如二半乳糖二?；视?IDGa1DG)；磷酸甘油類脂，如蛋黃磷脂酰膽堿(e-PC)和大豆磷脂酰膽堿(s-PC)；和卵磷脂類，如蛋黃卵磷脂(e-lecithin)和大豆卵磷脂(s-lecithin)。在合成類脂中可以指出二肉豆蔻?；字Ｄ憠A(DMPC)、二棕櫚?；字Ｄ憠A(DPPC)、二硬脂酰基磷脂酰膽堿(DSPC)、二月桂酰磷脂酰膽堿(DLPC)、1-肉豆蔻酰基-2-棕櫚?；字Ｄ憠A(MPPC)、1-棕櫚?；?2-肉豆蔻酰基磷脂酰膽堿(PMPC)，和二油?；字Ｄ憠A(POPC)。在類脂混合物中可以指出有SM/PC、SM/膽甾醇(Cholesterol)、ePC/膽甾醇、sPC/膽甾醇、PC/PS/膽甾醇、DMPC/DPPC、DMPC/DPPC/CH、DMPC/CH、DPPC/DOPC、DPPC/DOPC/CH、DLPC/DPPC、DLPC/DPPC/CH、DLPC/DMPC、DLPC/DMPC/CH、DOPC/DSPC、DPSM/DMSM、e-卵磷脂/膽甾醇和s-卵磷脂/膽甾醇。除了上述的之外，還可以包括帶電荷的(charged)類脂，如二肉豆蔻?；字８视?DMPG)、二磷酰棕櫚酰(diphospalmitoyl)磷脂酰甘油(DPPG)、二肉豆蔻酰磷脂酸(DMPA)、二棕櫚?；字?DPPA)或硬脂酰胺(SA)。本發(fā)明特別感興趣的類脂是DPPC和/或DMPC。優(yōu)選含有至少10％(w/w)DMPC，例如10-50％DMPC的DPPC和DMPC混合物。特別優(yōu)選含有另外至少一種帶電的類脂如例如含量高達(dá)5％(w/w)的DMPG、DPPG、DMPA或SA的DPPC和DMPC混合物。其它優(yōu)選的混合物包括，可任選地含有至少一種帶電的類脂的DPSM和DMSM混合物，以及膽甾醇與e-卵磷脂或s-卵磷脂的混合物，該混合物可任選地含有至少一種帶電的類脂并且具有低于37℃的Tc。本領(lǐng)域的技術(shù)人員參考例如Gregor Cevc，Phospholids Handbook，Marcel Dekker，New Yowk (1993)，pp427-435，可以容易地選擇其它混合物。
優(yōu)選的生育酚含量為0.05-1.0％，更優(yōu)選0.1--0.6％，以含有一種或多種類脂以及生物活性成分的單相總重量計。
活性成分最好具有能夠加到脂雙層中的分子結(jié)構(gòu)，以幫助在水合期間脂質(zhì)體的囊化作用。這種分子結(jié)構(gòu)的一個例子是具有足以作為疏水結(jié)合地(hydrophobicanchor)的長烴鏈的脂肪酸酯。
本領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠容易地確定適用的活性成分，它們可以包括例如抗炎藥和支氣管松弛藥、抗組胺藥類、環(huán)氧合酶抑制劑、白三烯合成抑制劑、白三烯拮抗劑、磷酯酶-A2(PLA2)抑制劑、血小板凝聚因子(PAF)拮抗劑和哮喘預(yù)防藥?？剐穆墒СＫ?、安定藥、強(qiáng)心苷、激素、抗高血壓藥、抗糖尿病藥、抗寄生蟲藥和抗癌藥、鎮(zhèn)靜藥、止疼藥、抗生素、抗風(fēng)濕藥、免疫治療劑、抗真菌藥、抗低血壓藥、疫苗、抗病毒藥、蛋白質(zhì)、肽和維生素也是令人感興趣的。
具體說，糖皮質(zhì)類固醇類(glucocorticosteroid)，如布地奈德、丙酸氟替卡松、環(huán)索奈德、rofleponide，例如以其棕櫚酸酯(鹽)，莫米松，如以其糠酸酯/鹽，替潑尼旦，RPR 106541，地塞米松、倍他米松、氟輕松，氟米松，曲安奈德，氟尼縮松，倍氯米松以及孕烷衍生物的16，17-乙縮醛類和由它們衍生的化合物，及β-2激動劑如特布他林、沙美特羅，沙丁胺醇，福莫特羅，非諾特羅，克侖特羅，丙卡特羅，比托特羅，和溴沙特羅，在本發(fā)明中可以使用?；钚猿煞忠部梢允撬幬锘钚晕镔|(zhì)的混合物；例如可以使用糖皮質(zhì)類固醇與支氣管擴(kuò)張藥如福莫特羅，沙美特羅，特布他林或沙丁胺醇的混合物。為了避免產(chǎn)生疑問，本文中所涉及的任何活性成分均包括其藥物學(xué)可接受的酯、鹽和水合物。
在活性成分是類固醇的情況下，優(yōu)選的是類固醇酯。
活性成分優(yōu)選是一種類固醇，最好是在21-位與飽和的或不飽和的至少8個碳原子(例如至少10個碳原子或至少12個碳原子)的脂肪酸酯化的類固醇。這種脂肪酸可以含有例如最高達(dá)24個碳原子，如最高達(dá)20個碳原子或最高達(dá)18個碳原子。更優(yōu)選使活性成分是類固醇-21-棕櫚酸酯、肉豆蔻酸酯、月桂酸酯、癸酸酯、辛酸酯或硬脂酸酯。最優(yōu)選的本發(fā)明的活性成分是化合物(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-21-棕櫚酰氧孕-4-烯-3，20-二酮，即rofleponide棕櫚酸酯。
在活性成分是一種酯的情況下，這種酯必須能夠水解成活性成分。令人驚異的是，本發(fā)明單相前體脂質(zhì)體粉便于必須的就地水解反應(yīng)，而這些酯在呈結(jié)晶態(tài)時通常不會被水解。
在需要通過吸入施藥的場合，本發(fā)明的前體脂質(zhì)體粉應(yīng)該盡可能由直徑小于10微米的顆粒構(gòu)成，例如0.01-10微米或0.1-6微米，如0.1-5微米或由上述顆粒的附聚物(agglomerate)構(gòu)成。優(yōu)選至少50％的粉由在所希望的尺寸范圍內(nèi)的顆粒構(gòu)成。例如，這種粉的至少60％，優(yōu)選至少70％，更優(yōu)選至少80％而最優(yōu)選至少90％由在所希望尺寸范圍內(nèi)的顆粒構(gòu)成，或者由上述顆粒附聚物構(gòu)成。
本發(fā)明前體脂質(zhì)體粉不需要含有其它成分。但是含有本發(fā)明的粉的藥用組合物也可以含有其它藥物學(xué)可接受的添加劑，如藥物學(xué)可接受的輔助劑、稀釋劑或載體。只要溶劑已經(jīng)完全除去，這些添加劑可以在微?；螅蛘咴谖⒘；埃拥角绑w脂質(zhì)體粉組合物中。優(yōu)選的載體是結(jié)晶的親水性物質(zhì)。一種優(yōu)選的載體是結(jié)晶乳糖一水合物。其它適用的載體包括葡糖糖、果糖、半乳糖、海藻糖、蔗糖、麥芽糖、棉子糖、麥芽糖醇、松三糖、水蘇糖，乳糖醇，palatinite，淀粉、木糖醇、甘露醇、肌醇等，和它們的水合物，以及氨基酸，如丙氨酸，以及甜菜堿(betaine)。
制劑中添加劑的含量可以在很寬的范圍內(nèi)變化。在一些情形中可能需要很少的添加劑或不需要添加劑，但經(jīng)常是例如希望用添加劑來稀釋粉料，以便改善在吸入器中使用的粉的特性。對于后一種情形，可以使例如至少50％，例如至少70％或至少80％的制劑由添加劑構(gòu)成，其余的是前體脂質(zhì)體粉。添加劑的百分比亦可以取決于生物活性化合物的效力和粉的吸入最佳量。
在存在添加劑(例如一種載體)的場合，全部組合物可以呈顆粒尺寸在可吸入顆粒尺寸范圍內(nèi)的狀態(tài)。另一種可供選擇的方式是，載體可以含有例如質(zhì)均粒徑(mass median diameter)大于20微米的較粗顆粒，或可以含有較小顆粒的附聚體，附聚體的質(zhì)均粒徑例如大于20微米，這樣在二種情形中都形成前體脂質(zhì)體和載體的有序的混合物。
本發(fā)明的另一個目的是提供本發(fā)明的前體脂質(zhì)體粉的制備方法，即生產(chǎn)呈單相的前體脂質(zhì)體粉的方法。
因此，本發(fā)明也提供吸入用的前體脂質(zhì)體粉的制備方法，包括在一種溶劑里溶解一種類脂或幾種類脂的混合物、生育酚和親脂生物活性成分，上述類脂或類脂混合物具有低于37℃的相變溫度；通過冷凍溶液制取結(jié)晶溶劑基質(zhì)和呈玻璃態(tài)的單一類脂相，上述冷凍在低于類脂相的相變溫度的溫度下進(jìn)行；并在低于類脂相的相變溫度的溫度下蒸發(fā)冷凍的溶劑。
溶液的冷凍和溶劑的蒸發(fā)可以采用傳統(tǒng)的方法進(jìn)行，例如在傳統(tǒng)的冷凍-干燥器中進(jìn)行。例如，一種或幾種類脂、生育酚和生物活性成分的溶液可以倒到冷凍-干燥器的料盤中并將溫度降低以冷凍溶液。然后例如通過降低冷凍-干燥室中的壓力可以進(jìn)行溶劑蒸發(fā)；生成的粉可以從干燥室的料盤上刮下來，并可任選地過篩。
冷凍-干燥過的粉如果必要的話可以再進(jìn)一步處理以便獲得在可吸入顆粒尺寸的范圍內(nèi)的顆粒；例如，冷凍干燥后的粉末可以，例如用氣流噴射磨(air jet mill)進(jìn)進(jìn)微粉化，以獲得可吸入顆粒。
生物活性成分、生育酚和一種類脂或幾種類脂的溶液的冷凍以在冷凍溶液基質(zhì)里生成單一類脂相的方式進(jìn)行。單一類脂相的生產(chǎn)通過溶液的最終溫度和冷凍速度來控制；任一具體溶液的最佳冷凍速度在該溶液結(jié)晶所需的時間與一種類脂或幾種類脂、生育酚和活性成分結(jié)晶所需的時間之間，并且可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員簡單地通過逐次逼近法測定。最佳的最終溫度應(yīng)該低于類脂相的玻璃態(tài)轉(zhuǎn)化溫度10-20℃。例如，可以使用粉料X-射線法監(jiān)視結(jié)晶度，可以使用差示掃描熱量計監(jiān)視水合反應(yīng)后生物活性成分摻入脂質(zhì)體的程度。
溶劑必須具有完全溶解一種類脂或幾種類脂、生育酚和生物活性成分的能力，因為在冷凍之前，全部成分都存在溶液里是至關(guān)重要的，以避免引起粉料產(chǎn)生一個以上的相的沉淀作用和相分離。此外，這種溶劑應(yīng)該是在毒理學(xué)上可接受的，具有合適的冰點，并最好有高的蒸汽壓。這種溶劑可以是例如一種有機(jī)溶劑，如醇，或水與有機(jī)溶劑的混合物。用于本發(fā)明的優(yōu)選的溶劑是叔丁醇。
這種粉可任選地附聚(agglomerate)成小球形，以便控制這種粉的粘聚性。這些球的直徑優(yōu)選不大于1mm，大于這一尺寸的球可以例如通過篩分除去。任何的附聚物都應(yīng)該是易碎的，以便它們可以容易地例如在粉吸入器產(chǎn)生的空氣流里被解附聚(deagglomerate)。
本發(fā)明的前體脂質(zhì)體粉對于疾病的局部或系統(tǒng)治療是有用的，并且可以例如經(jīng)上或下呼吸道，包括經(jīng)鼻途徑施藥。因此，本發(fā)明也提供用于治療的上述前體脂質(zhì)體粉；這種前體脂質(zhì)體粉在用于經(jīng)呼吸道治療疾病的藥物的制備中的應(yīng)用；以及用于需要治療的病人的治療方法，包括給上述病人施用治療有效量的本發(fā)明的前體脂質(zhì)體粉。
例如，本發(fā)明的前體脂質(zhì)體粉可以用于呼吸道炎癥疾病的治療，如哮喘、鼻炎、肺泡炎、毛細(xì)支氣管炎和支氣管炎。
對呼吸道的施藥可以例如使用干粉吸入器或有壓力的氣霧劑吸入器。
適用的干粉吸入器包括劑量式吸入器，例如以Monohaler為注冊商標(biāo)的單一劑量吸入器，和多劑量吸入器，例如呼吸致動的干粉吸入器，如以Turbuhaler為注冊商標(biāo)的干粉吸入器。
雖然本發(fā)明的前體脂質(zhì)體粉特別適合通過吸入施藥，但也可以包含于適合其它方形式施藥的制劑。例如也可以制成口服的、局部的和注射的制劑，用于例如發(fā)炎關(guān)節(jié)疾病如關(guān)節(jié)炎、皮膚病和腸炎癥疾病的治療。
以下的實施例旨在具體說明本發(fā)明，但不限定本發(fā)明的范圍。份數(shù)以重量計。實施例1將rofleponide棕櫚酸酯(10份)，DPPC(63份)，DMPC(24份)，NaDPPG(3份)和外消旋α-生育酚(0.1份)溶于80℃的叔丁醇(1300份)中。將溶液倒到冷卻至-35℃的冷凍-干燥器的料盤上。溶液在大約30分鐘后達(dá)到這個溫度；然后將冷凍-干燥器里的壓力降低以便引起溶劑升華。盡管升華的速度可以通過降低壓力和增加溫度進(jìn)行調(diào)節(jié)，但在整個過程中溫度不允許超過-10℃。冷凍-干燥一直進(jìn)行到溶劑已經(jīng)去除完了時為止。將得到的粉從冷凍-干燥器的料盤上刮下來并過篩。
將這種粉末在氣流噴射磨中微?；练鄣牧叫∮?微米。微粉化后的粉經(jīng)篩分處理與乳糖一水合物混合(20份粉80份乳糖一水合物)，混合物通過在噴射磨(jet mill)中低壓微粒化進(jìn)行進(jìn)一步均化。
使用標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)，將粉的混合物附聚成不大于1毫米的球。通過篩分將較大的球除去。將附聚的粉裝進(jìn)Turbuhaler干粉吸入器里。
在另外的實驗中，上述配方中α-生育酚的量分別改變?yōu)?.06份和0.6份。
令人驚異的是，實施例1的前體脂質(zhì)體粉制劑比含有其它抗氧化劑的等效制劑更穩(wěn)定。
粉的分析對實施例1的這種粉混合物進(jìn)行的X-射線衍射表明在粉中不存在結(jié)晶態(tài)。
將活性成分摻入到各種脂質(zhì)體中將實施例1的前體脂質(zhì)體粉進(jìn)行水合反應(yīng)，并使用差示掃描熱量法測量活性成分的摻入程度。DSC表明活性成分完全摻入到脂質(zhì)體中。
權(quán)利要求
1.一種前體脂質(zhì)體粉，所述粉含有分散顆粒，每個顆粒呈單相地含有(1)一種生物活性成分，(2)促穩(wěn)定化比例的生育酚，和(3)相變溫度低于37℃的一種類脂或多種類脂的混合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的粉，其中生育酚是α-生育酚。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的粉，其中生育酚是外消旋α-生育酚。
4.根據(jù)上述權(quán)利要求中任一項的粉，其中生育酚存在的比例為0.05-1.0％，以單相的重量計。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的粉，其中生育酚存在的比例為0.1-0.6重量％。
6.根據(jù)上述權(quán)利要求中任一項的粉，含有一種和多種選自天然或合成磷酸甘油脂類、鞘類脂和二半乳糖甘油類脂。
7.根據(jù)上述權(quán)利要求中任一項的粉，含有選自下面的類脂混合物SM/PC、SM/膽甾醇、ePC/膽甾醇、sPC/膽甾醇、PC/PS/膽甾醇、DMPC/DPPC、DMPC/DPPC/CH、DMPC/CH、DPPC/DOPC、DPPC/DOPC/CH、DLPC/DPPC、DLPC/DPPC/CH、DLPC/DMPC、DLPC/DMPC/CH、DOPC/DSPC、DPSM/DMSM、e-卵磷脂/膽甾醇和s-卵磷脂/膽甾醇。
8.根據(jù)上述權(quán)利要求中任一項的粉，含有DPPC或DMPC，或DPPC與DMPC的混合物。
9.根據(jù)權(quán)利要求中8的前體脂質(zhì)體粉，其中的混合物含有至少10％DMPC。
10.根據(jù)上述權(quán)利要求中任一項的粉，另外含有帶電的類脂。
11.根據(jù)權(quán)利要求中10的粉，其中帶電的類脂選自二肉豆蔻酰磷脂酰甘油(DMPG)、二磷酰棕櫚酰磷脂酰甘油(DPPG)、二肉豆蔻酰磷脂酸(DPPA)和硬脂酰胺(SA)。
12.根據(jù)上述權(quán)利要求中任一項的粉，其中活性成分包括糖皮質(zhì)類固醇。
13.根據(jù)權(quán)利要求中12的粉，其中活性成分包括在21-位與至少8個碳原子的脂肪酸酯化的糖皮質(zhì)類固醇。
14.根據(jù)權(quán)利要求中13的粉，其中活性成分包括在21-位與至少10個碳原子的脂肪酸酯化的糖皮質(zhì)類固醇。
15.根據(jù)權(quán)利要求中14的粉，其中活性成分包括糖皮質(zhì)類固醇-21-棕櫚酸酯。
16.根據(jù)權(quán)利要求中15的粉，其中活性成分包括rofleponide palmitate。
17.根據(jù)上述權(quán)利要求中任一項的粉，其中這種粉的至少50％由直徑小于10微米的顆粒構(gòu)成。
18.根據(jù)權(quán)利要求中17的粉，其中這種粉的至少50％由直徑0.01-10微米的顆粒構(gòu)成。
19.根據(jù)權(quán)利要求中18的粉，其中這種粉的至少50％由直徑0.1-6微米的顆粒構(gòu)成。
20.根據(jù)權(quán)利要求17-19之一的粉，含有附聚的顆粒。
21.一種藥物組合物，含有根據(jù)上述權(quán)利要求中任一項的粉和藥物學(xué)可接受的載體。
22.根據(jù)權(quán)利要求中21的藥物組合物，其中的載體是結(jié)晶乳糖一水合物。
23.根據(jù)權(quán)利要求中21或22的藥物組合物，其中的載體含有質(zhì)均粒徑小于10微米的顆粒，或上述顆粒的附聚物。
24.一種干粉吸入器裝置，含有根據(jù)上述權(quán)利要求中任一項的前體脂質(zhì)體粉。
25.根據(jù)權(quán)利要求24的干粉吸入器裝置，其中吸入器是單一劑量式的吸入器。
26.治療需要用給定的生物活性化合物治療的病人的方法，包括給所述病人施用有效治療劑量的權(quán)利要求中1-20中任一項的粉或權(quán)利要求中21-23中任一項的組合物。
27.權(quán)利要求中1-20中任一項的粉在制備治療用制劑中的應(yīng)用。
全文摘要
描述了一種前體脂質(zhì)體粉,上述粉含有分散的顆粒,每個顆粒呈單相地含有(1)一種生物活性成分,(2)促穩(wěn)定化比例的生育酚,和(3)相變溫度低于37℃的一種類脂或多種類脂的混合物。還描述了制備這種粉的方法和這種粉的藥物應(yīng)用。
文檔編號A61K9/127GK1260713SQ9880637
公開日2000年7月19日 申請日期1998年6月8日 優(yōu)先權(quán)日1997年6月27日
發(fā)明者K·拜斯特倫, P·-G·尼爾松 申請人:阿斯特拉公司