專利名稱：喹啉－2－羧酸衍生物及其作為興奮性氨基酸拮抗劑的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一個(gè)有效的特異性興奮性氨基酸拮抗劑(±)E 4-(4-乙酰氨基-苯基氨基甲?；鶃喖谆?-5，7-二氯-1，2，3，4-四氫喹啉2-羧酸的對(duì)映體、制備該物質(zhì)的方法、含有該物質(zhì)的藥用組合物、其在醫(yī)療上的用途。
WO 97/12870特別描述了(±)E 4-(4-乙酰氨基-苯基氨基甲?；鶃喖谆?-5，7-二氯-1，2，3，4-四氫喹啉-2-羧酸(A)及其鹽
其對(duì)定位在N-甲基-D-天門冬氨酸(NMDA)受體復(fù)合物上的馬錢子堿不敏感甘氨酸結(jié)合部位具有拮抗作用。
目前我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)化合物(A)的一個(gè)對(duì)映體(以后稱為(+)對(duì)映體)對(duì)作為在NMDA受體復(fù)合物上的馬錢子堿不敏感甘氨酸結(jié)合位點(diǎn)的選擇性拮抗劑顯示了特別有用地活性。
因此本發(fā)明提供了基本上不含相應(yīng)的(-)對(duì)映體的E 4-(4-乙酰氨基-苯基氨基甲?；鶃喖谆?-5，7-二氯-1，2，3，4-四氫喹啉2-羧酸(下文為化合物(I))的(+)對(duì)映體及其鹽。
在這里使用的術(shù)語基本上不含意指化合物(I)含有低于10％的(-)對(duì)映體并且最好低于5％。
在這里使用的術(shù)語(+)對(duì)映體指的是實(shí)施例2、4和5的產(chǎn)物特異性對(duì)映體。
為了在醫(yī)療中使用，化合物(I)的鹽將是生理上可接受的鹽。然而其它的鹽可用于制備化合物(I)或其生理上可接受的鹽。因此除非特別說明，否則所提及的鹽包括化合物(I)生理上可接受的鹽和非生理上可接受的鹽。
本發(fā)明化合物適宜的生理上可接受的鹽包括堿加成鹽。
化合物(I)適宜的生理上可接受的堿加成鹽包括堿金屬或堿土金屬鹽例如鈉、鉀、鈣和鎂鹽以及與氨基酸(例如賴氨酸和精氨酸)和有機(jī)堿(例如普魯卡因、苯基芐胺、乙醇胺、二乙醇胺和N-甲基葡糖胺)形成的銨鹽。
化合物(I)的優(yōu)選鹽為鈉鹽。
本發(fā)明化合物和/或其生理上可接受的鹽是興奮性氨基酸拮抗劑。更具體地講，它們都是與NMDA受體復(fù)合物有關(guān)的馬錢子堿不敏感甘氨酸結(jié)合位點(diǎn)的有效拮抗劑。因此它是NMDA受體復(fù)合物的有效拮抗劑。因此化合物(I)可用于治療或預(yù)防神經(jīng)毒性損傷或神經(jīng)退化性疾病。因而化合物(I)也用于治療伴有腦中風(fēng)、血栓栓塞中風(fēng)、腦溢血中風(fēng)、腦缺血、腦血管痙攣、低血糖、遺忘癥、缺氧、缺氧癥、圍生期窒息心動(dòng)停跳的神經(jīng)毒性損傷?；衔?I)還用于治療慢性神經(jīng)退化性疾病如亨廷頓舞蹈病、阿爾滋海默氏老年性癡呆、肌萎縮外側(cè)硬化癥、戊二酸血癥類型、多梗塞癡呆、癲癇持續(xù)狀態(tài)(statusepilecticus)、挫傷損傷(例如脊髓損傷和頭部損傷)、病毒感染誘導(dǎo)的神經(jīng)退化(例如AIDS、腦病(encephalopaty))、唐氏綜合征、癲癇、精神分裂癥、抑郁、焦慮、疼痛、神經(jīng)原性膀胱、刺激性膀胱紊亂、偏頭痛、頭疼包括急促性(cluster)頭疼、緊張性頭疼、藥物依賴性包括來自酒精、可卡因、阿片制劑、尼古丁、苯并二氮雜的戒除癥狀以及嘔吐。
本發(fā)明化合物對(duì)于存在于NMDA受體復(fù)合物上的馬錢子堿不敏感甘氨酸結(jié)合位點(diǎn)的有效的選擇性作用可使用常規(guī)實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行測(cè)定。因此結(jié)合于馬錢子堿不敏感甘氨酸結(jié)合位點(diǎn)的能力使用KishimotoH等在J Neurochem 1981，37 1015-1024中的方法進(jìn)行測(cè)定?；衔?I)對(duì)馬錢子堿不敏感甘氨酸位點(diǎn)的選擇性在其它的已知離子化作用興奮性氨基酸受體的研究中得到進(jìn)一步證實(shí)。因此發(fā)現(xiàn)化合物(I)對(duì)于紅藻氨酸(kainate)受體、α-氨基-3-羥基-5-甲基-4-異噁唑-proprionic酸(AMPA)受體或在NMDA結(jié)合位點(diǎn)上顯示很少或不顯示親和性。
使用Chiamulera C等在Psychopharmacology(1990)102，551-552中的方法也已經(jīng)發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物抑制NMDA誘導(dǎo)的小鼠驚厥。
使用Chiamulera C等在European Journal of Pharmacology，216(1992)第335-336頁中描述的方法，在由小鼠制備的大腦中動(dòng)脈阻塞標(biāo)本中證明本發(fā)明化合物的神經(jīng)保護(hù)活性。
因此本發(fā)明提供了化合物(I)和/或其生理上可接受的鹽在治療上的用途，尤其是用作拮抗NMDA受體復(fù)合物上興奮性氨基酸作用的藥物的用途。
本發(fā)明也提供了化合物(I)和/或其生理上可接受的鹽的在拮抗NMDA受體復(fù)合物上興奮性氨基酸作用的藥物的生產(chǎn)中的用途。
更進(jìn)一步的方面，本發(fā)明也提供了拮抗NMDA受體復(fù)合物上興奮性氨基酸作用的方法，其包括給予需要治療的患者拮抗量的化合物(I)和/或生理上可接受的鹽。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將意識(shí)到這里提及的治療擴(kuò)展到預(yù)防以及治療已經(jīng)確診的疾病或癥狀。
更進(jìn)一步意識(shí)到治療所需的本發(fā)明化合物的量將隨著所要治療疾病的性質(zhì)、給藥途徑和患者的年齡及狀況變化，并將最終在于主治醫(yī)師的判斷。然而一般而言對(duì)于成人治療所使用的劑量一般為每天在2到800mg范圍內(nèi)，這取決于給藥途徑。
因此對(duì)于非腸道給藥，每日劑量一般為是在20-800mg范圍內(nèi)，優(yōu)選每天60-800mg。對(duì)于口服給藥，每日劑量一般是在200-800mg范圍內(nèi)，例如每天400-600mg。
所需的劑量可便利的以單一劑量提供或在適宜的時(shí)間間隔內(nèi)分開劑量給藥，例如每天分成2、3、4或更多個(gè)亞劑量。
盡管當(dāng)用于治療時(shí)，化合物(I)可作為原料化學(xué)品給藥是可能的，但是最好以藥用制劑來提供所述活性成分。
因此本發(fā)明進(jìn)一步提供了藥用制劑，其包括化合物(I)或其生理上可接受的鹽以及一種或多種藥學(xué)上可接受的載體，并任選其它治療的和/或預(yù)防成分。從與制劑中其它成分相配伍并對(duì)其接受者無害的意義上來講，所述載體必須是“可接受的”。
本發(fā)明組合物包括那些特別是配制以供口服、頰、非腸道、吸入或吹入、植入或直腸給藥形式的組合物。優(yōu)選非腸道給藥。
口服給藥的片劑和膠囊劑可包含常規(guī)賦形劑例如粘合劑像糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨醇、黃蓍膠、淀粉漿或聚乙烯吡咯烷酮；填充劑如乳糖、糖、微晶纖維素、玉米淀粉、磷酸鈣或山梨醇；潤(rùn)滑劑如硬脂酸鎂、硬脂酸、滑石粉、聚乙二醇或硅石；崩解劑如馬鈴薯淀粉或淀粉羥乙酸鈉，或濕潤(rùn)劑如十二烷基硫酸鈉。片劑可根據(jù)本領(lǐng)域熟知的方法包衣?？诜后w制劑可以例如水性或油性混懸液、溶液、乳劑、糖漿劑或酏劑的形式存在，或者以使用前用水或其它適宜的載體復(fù)制的干燥產(chǎn)物存在。這樣的液體制劑可含有常規(guī)的添加劑如懸浮劑例像山梨醇糖漿、甲基纖維素、葡萄糖/糖漿、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠或氫化食用脂肪；乳化劑如卵磷脂、脫水山梨糖醇單油酸酯或阿拉伯膠；非水載體(其可包括食用油)例如杏仁油、分餾椰子油、油脂、丙二醇或乙醇；助溶劑例如表面活性劑如聚山梨酸酯或其它試劑如環(huán)糊精；和防腐劑例如對(duì)-羥基苯甲酸甲酯或丙酯或抗壞血酸。該組合物也可配制為栓劑即含有常規(guī)的栓劑基質(zhì)如椰子油或其它甘油酯。
為了頰給藥，該組合物可采用以常規(guī)方法配制成片劑或錠劑。
可將本發(fā)明組合物配制供經(jīng)注射或持續(xù)輸注非腸道給藥。注射用制劑可以安瓿中的單位劑型或以加有防腐劑的多劑量容器形式提供。該組合物可采用混懸劑、溶液劑、或以油或水為載體的乳劑的形式，并且可含有配方用試劑例如混懸劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑?；蛘咚龌钚猿煞挚梢詾榉勰┬问?，使用前將其用適當(dāng)溶媒如無菌、無熱原水復(fù)制。
吸入給藥時(shí)，本發(fā)明化合物(I)可通過在加壓包裝中的氣溶膠噴霧劑形式便利地傳遞，使用適合的拋射劑如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它適宜的拋射劑，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它適宜的氣體，或者來自于噴霧器。在為壓力氣溶膠情況下，劑量單位可通過提供傳遞計(jì)量的閥來確定。
或者，當(dāng)通過吸入或吹入給藥時(shí)，本發(fā)明的化合物可采用干燥粉組合物的形式，例如該化合物與適合的載體如乳糖或淀粉的粉狀混合物。該粉末組合物可以單位劑型提供例如膠囊或明膠的藥筒或泡狀包裝，其中可借助吸入或吹入器給予該粉末。
本發(fā)明組合物也可配制成埋植制劑。這樣的長(zhǎng)效制劑可通過植入(例如皮下或肌肉內(nèi)植入)或肌內(nèi)注射給藥。因此本發(fā)明化合物例如可采用適合的聚合的或疏水性材料(例如在可接受的油中作成乳劑)或離子交換樹脂、或者作為略溶性衍生物例如略溶性的鹽進(jìn)行配制。
依據(jù)本發(fā)明的組合物可含有0.1-99％的所述活性成分，最好片劑和膠囊為30-95％，液體制劑為3-50％。
再一方面，本發(fā)明提供了制備化合物1的方法。
因此在第一個(gè)方法(在下文為方法A)中，將化合物(1)((+)-E-4-(4-乙酰氨基-苯基氨基甲酰基亞甲基)-5，7-二氯-1，2，3，4-四氫喹啉-2-羧酸)可通過用適宜的手性醇酯化化合物A、通過常規(guī)方法如層析或結(jié)晶來分離生成的非對(duì)映的酯，隨后水解所需的單一非對(duì)映的酯進(jìn)行制備。
用于方法A的適宜的手性醇包括(+)S-1，2-二氫化茚醇(indanol)、(+)S-扁桃酸甲酯、手性乳酸(C1-4)烷基酯即(+)R或(-)S乳酸甲酯、(+)R乳酸叔丁酯、(+)R或(-)S乳酸乙酯、(-)S乳酸異丙酯、(-)S乳酸丁酯、(+)R乳酸異丁酯或手性乳酸芳烷基酯(即乳酸芐酯)、(-)S紫蘇子醇、(-)(R)-3-羥基-2-甲基丙酸甲酯、(-)(R)-2-丁醇、(-)(S)-2-甲基-1-丁醇。
包括基本上不含其它非對(duì)映體的單一非對(duì)映酯化合物A的非對(duì)映酯為新化合物并代表了本發(fā)明的更進(jìn)一步的方面。
化合物A的非對(duì)映酯可通過常規(guī)方法制備，例如在非質(zhì)子傳遞溶劑如醚像四氫呋喃中，使手性醇與化合物A的活化衍生物反應(yīng)。使用像那些便利用在肽合成上的制備羧酸基團(tuán)活化衍生物的常規(guī)方法，從化合物A可以制備化合物A的活化衍生物。
制備化合物A的非對(duì)映酯的特別便利方法為在手性醇的存在下制備化合物A的活化衍生物。
因此，例如在手性醇存在下，可用Mitsunobu試劑的組合，即偶氮二羧酸二烷基酯如偶氮二羧酸二乙酯同三芳基膦如三苯基膦或三烷基膦(即三丁基膦)處理化合物A。
在適宜的溶劑例如醚(像乙醚或四氫呋喃)、鹵代烴(像二氯甲烷)或腈(像乙腈)或它們的混合物存在下，于0-30°的范圍，該反應(yīng)可便利地發(fā)生。
通過常規(guī)的方法例如通過常規(guī)層析法像制備性HPLC的使用或分級(jí)結(jié)晶，所需的基本上不含其它非對(duì)映體的化合物A的單一非對(duì)映酯可從其混合物中獲得。
通過水解如堿水解，可將化合物(I)從相應(yīng)的化合物A單一的非對(duì)映酯制備。因此例如可在溶劑像醚如四氫呋喃和水中，使用堿金屬氫氧化物如氫氧化鈉或氫氧化鋰進(jìn)行該水解反應(yīng)。
化合物(I)可作為游離酸或其鹽分離得到。
化合物I也可使用手性HPLC方法從外消旋化合物A獲得。
化合物(A)可通過使羧酸(II)的活化衍生物
式中R1是羧酸保護(hù)基團(tuán)并且R3是氫或氮保護(hù)基團(tuán)，與胺(III)反應(yīng)制備
隨后如果必要的話，使用WO 97/12870描述的方法和實(shí)施例除去羧酸保護(hù)基團(tuán)R1和任何氮保護(hù)基團(tuán)R3。
本發(fā)明也提供了化合物(I)制備的另外的方法(在下文為方法B)，其包括使羧酸(IV)的活化衍生物與胺(III)反應(yīng)，式(IV)中R3是氫或氮保護(hù)基團(tuán)，R5是適宜的手性基團(tuán)
并且使所生成的化合物進(jìn)行以下反應(yīng)
i)如果必要的話，除去氮保護(hù)基團(tuán)R3
ii)分離生成的非對(duì)映酯
iii)水解所需的單一非對(duì)映酯并作為游離酸或其鹽分離該(+)對(duì)映體，并且如需要的話，隨后將(+)非對(duì)映體的游離酸轉(zhuǎn)化為其鹽。
用于方法B適宜的手性基團(tuán)(R5)是那些從手性醇衍化而來的，所述手性醇例如有(+)S-1，2-二氫化茚醇、(+)S-扁桃酸甲酯、手性乳酸(C1-4)烷基酯即(+)R或(-)S乳酸甲酯、(+)R乳酸叔丁酯、(+)R或(-)S乳酸乙酯、(-)S乳酸異丙酯、(-)S乳酸丁酯、(+)R乳酸異丁酯或手性乳酸芳烷基酯(即乳酸芐酯)、(-)S紫蘇子醇、(-)(R)-3-羥基-2-甲基丙酸甲酯、(-)(R)-2-丁醇、(-)(S)-2-甲基-1-丁醇。
R5優(yōu)選為從手性(C1-4)烷基醇乳酸酯衍化來的基團(tuán)。更優(yōu)選地R5為從(+)R叔丁醇乳酸酯(tert-butyl lactate alcohol)衍化來的基團(tuán)。
羧酸基團(tuán)適宜的活化衍生物包括相應(yīng)的酰鹵、混合酸酐、活化酯如有硫酯或者由羧酸基團(tuán)與偶合劑形成的衍生物，所述偶合試劑如在肽化學(xué)中使用的像羰基二咪唑或二酰亞胺像二環(huán)己基碳二亞胺。
該反應(yīng)最好在非質(zhì)子傳遞溶劑中進(jìn)行，如烴、鹵代烴像二氯甲烷或者醚如四氫呋喃。
當(dāng)R3是氮保護(hù)基團(tuán)時(shí)，適宜基團(tuán)的實(shí)例包括烷氧基羰基如叔丁氧基羰基、芳磺?；绫交酋；?-三甲基硅烷基乙氧基甲基。
當(dāng)用作取代基或取代基基團(tuán)的一部分時(shí)，烷基意味著該基團(tuán)可為直鏈或者支鏈。因此C1-4烷基包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基或叔丁基。
羧酸(IV)的活化衍生物可通過常規(guī)方法制備。用在這個(gè)反應(yīng)中一個(gè)特別適宜的活化衍生物是如從吡啶-2-硫醇衍化而來的硫酯。在適宜的非質(zhì)子傳遞溶劑像醚如四氫呋喃、鹵代烴如二氯甲烷、酰胺如N，N-二甲基甲酰胺或乙腈中，通過用2，2’-二硫吡啶和三苯基膦處理羧酸(II)可便利地進(jìn)行制備這些酯。
適宜的非對(duì)映衍生物可通過常規(guī)方法如層析法或結(jié)晶法分離。
在適合的溶劑像醚如四氫呋喃、水或其混合物中，使用堿金屬氫氧化物如氫氧化鈉或者氫氧化鋰或堿性三烷基甲基硅烷酸鹽(silanolate)(三甲基硅烷酸鹽)可便利地發(fā)生水解步驟，隨后如果期望或者必要的話，通過加入適宜的酸如鹽酸就得到相應(yīng)的游離羧酸。
式(IV)或式(II)化合物可通過環(huán)合式(V)化合物制備
其中R2代表溴或碘原子，R3代表氫或氮保護(hù)基團(tuán)，R4代表氫原子或適宜的羧酸保護(hù)基團(tuán)如叔丁基，并且R6代表分別在式(II)或式(IV)中限定的R1或R5，隨后使用常規(guī)方法除去羧酸保護(hù)基團(tuán)R4。
在該方法的一個(gè)實(shí)施方案中，使用催化量的鈀(O)復(fù)合物例如四(三苯膦)鈀和適宜的有機(jī)堿像三烷基胺如三乙胺或無機(jī)堿如碳酸鉀可進(jìn)行該反應(yīng)。
在溫度20至150℃范圍內(nèi)，在非質(zhì)子傳遞溶劑中如乙腈或二甲基甲酰胺中，該反應(yīng)可便利地發(fā)生，隨后如果必要或者期望的話，除去羧酸保護(hù)基團(tuán)R4和任何保護(hù)基團(tuán)R3。
在該方法的另一個(gè)實(shí)施方案中，在適宜的有機(jī)堿像三烷基胺如三乙胺和三芳基膦如三苯基膦的存在下，使用催化量的鈀(II)鹽例如乙酸鈀可進(jìn)行該反應(yīng)。
在加熱下，在非質(zhì)子傳遞溶劑如乙腈或二甲基甲酰胺中，進(jìn)行該反應(yīng)，隨后如果必要或者期望的話，除去羧酸保護(hù)基團(tuán)R4和氮保護(hù)基團(tuán)R3。
式(V)化合物可通過使其中R2和R6具有以上限定的含義的式(VI)的亞氨基酯與式(VII)化合物反應(yīng)制備，式(VII)中R7代表C1-4烷基基團(tuán)、R4為烴基甲硅烷基像三烷基硅烷基如三甲基硅烷基或者叔丁基二甲基硅烷基或適宜的羧酸保護(hù)基團(tuán)如叔丁基基團(tuán)，隨后如果期望的話，將基團(tuán)NH轉(zhuǎn)化為氮保護(hù)基團(tuán)NR3。
在路易斯酸如溴化鋅和氯化鋅存在下，于低溫如-78℃，在非質(zhì)子傳遞溶劑中像鹵代烴如二氯甲烷、氯苯或乙腈中，可進(jìn)行該反應(yīng)。
使用引入這樣的氮保護(hù)基團(tuán)的常規(guī)方法如使其與R3X(其中X是如鹵素或甲磺酸酯的離去基團(tuán))反應(yīng)，可以將基團(tuán)NH轉(zhuǎn)化為氮保護(hù)的基團(tuán)NR3。
當(dāng)從中間體(VI)和(VII)制備時(shí)，使用中間體(V)制備式(II)或(IV)化合物的方法是新穎的，并且形成了本發(fā)明的另一個(gè)特征。
該制備式(V)化合物的新穎方法的一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案是使用了中間體酯(VI)，其中R6基團(tuán)從(+)R叔丁醇乳酸酯衍化而來。這就產(chǎn)生了非對(duì)映酯混合物，其中以非對(duì)映過量獲得所需的非對(duì)映酯。
更進(jìn)一步，使用上面描述的方法條件使如此獲得的化合物(V)環(huán)合得到所需的化合物(IV)，為非對(duì)映酯混合物，其中也以非對(duì)映過量獲得所需的非對(duì)映酯。
式(VI)化合物可通過使胺(IX)與式(VIII)化合物反應(yīng)制備，其中R2、R6具有式(V)化合物限定的含義
該反應(yīng)最好在從室溫到反應(yīng)混合物的回流溫度范圍內(nèi)、在溶劑如芳香烴(例如苯、甲苯或者二甲苯)中進(jìn)行。
式(III)、(VII)、(VIII)和(IX)化合物或者是已知的化合物，或者用那些已知的化合物使用的類似方法進(jìn)行制備。
因此式(VII)化合物可依據(jù)在Tetrahedron Letters，第22卷，第29期第2833-2836頁，1981年中描述的方法制備。式(VIII)化合物可根據(jù)在Helvetica Chimica Acta，1981年第64卷，第2808頁中描述的方法制備。
在上面任何反應(yīng)中，羧酸保護(hù)基團(tuán)可通過除去這樣的基團(tuán)的熟知的常規(guī)方法除去。因此對(duì)于R1為芐基基團(tuán)的化合物，可在適宜的溶劑如乙醇或異丙醇、水或其混合物中使用堿金屬氫氧化物如氫氧化鋰或氫氧化鈉水解除去，隨后如果期望或者必要的話，加入適宜的酸如鹽酸得到相應(yīng)的游離羧酸。
當(dāng)R4為叔丁基基團(tuán)時(shí)，可通過使用有機(jī)酸例如甲酸水解除去。
在上面任何反應(yīng)中，所述氮保護(hù)基團(tuán)可通過除去這樣基團(tuán)的熟知的常規(guī)方法除去，例如通過酸或堿水解。因此當(dāng)R3為烷氧基羰基例如叔丁氧基羰基或苯磺?；鶗r(shí)，其可通過在適宜的溶劑如四氫呋喃或烷基醇如異丙醇中，使用例如氫氧化鋰堿水解除去?；蛘?，所述烷氧基羰基基團(tuán)可通過酸水解除去。
化合物I的生理上可接受的鹽可通過在適宜的溶劑中采用適宜的堿處理相應(yīng)的酸制備。例如堿或堿金屬鹽可從堿和堿金屬氫氧化物或者相應(yīng)的碳酸鹽、碳酸氫鹽或三烷基硅烷酸鹽如三甲基硅烷酸鹽進(jìn)行制備。
或者，堿或堿土鹽可通過使用適宜的堿或堿金屬氫氧化物直接水解化合物I的羧酸保護(hù)衍生物制備得到。
為了使得本發(fā)明得到充分理解，通過僅僅例證說明的方式給出下列實(shí)施例。
在中間體和實(shí)施例中除非另外指出，否則
熔點(diǎn)(m.p.)采用Gallenkamp熔點(diǎn)儀測(cè)定且未經(jīng)校正。所有溫度指的是℃。紅外光譜在FT-IR儀器上測(cè)定。質(zhì)子共振氫譜(1H-NMR)在400MHz處記錄，化學(xué)位移用Me4Si作為內(nèi)標(biāo)物向低場(chǎng)偏移的ppm記錄，并且表示為單峰(s)、雙重峰(d)、雙雙重峰(dd)、三重峰(t)、四重峰(q)或多重峰(m)。柱層析法在硅膠(Merck AG Darmstaadt，德國)上進(jìn)行。文中所使用的下列縮略語為EA＝乙酸乙酯、CH＝環(huán)己烷、DCM＝二氯甲烷、THF＝四氫呋喃、TFA＝三氟乙酸、TEA＝三乙胺、DMSO＝二甲基亞砜、Tlc指的是硅膠板上的薄層層析法。溶液以無水硫酸鈉干燥；r.t.(RT)指的是室溫。
中間體1
(R)-丙烯酰氧基-2-甲基乙酸-1-叔丁酯
在0℃下，向(R)叔丁醇乳酸酯(4.5g)、三乙胺(9.5ml)和二甲基氨基吡啶(0.73g)的無水二氯甲烷(200ml)溶液中加入丙烯酰氯(5.5ml)的二氯甲烷(100ml)溶液，然后在0℃下將所得到的混合物攪拌1小時(shí)，室溫下再攪拌1小時(shí)。然后加入1M的HCl溶液接著加入乙酸乙酯(600ml)。有機(jī)相用水和鹽水洗滌。最后以柱層析法(環(huán)己烷/乙酸乙酯85/15)純化，得到為無色油狀物的標(biāo)題化合物(4.6g)。
1H NMR(DMSO)(ppm)6.36(dd，1H)，6.22(dd，1H)，5.99(dd.1H)，4.89(q，1H)，1.40(d，3H)，1.39(s，9H)
IR(CDCl3)(cm-1)1727
中間體2
(R)-2(氧代乙酰氧基)-2-甲基乙酸-1-叔丁基酯
室溫下，使中間體1(4.6g)的THF/H2O(3/1)(28ml)的溶液與四氧化鋨(水中4％(重量)，5ml)和過碘酸鈉(12.3g)反應(yīng)隔夜。該混合物用乙醚(500ml)處理，分離水相，干燥并濃縮有機(jī)相。最后以柱層析法(環(huán)己烷/乙酸乙酯60/40)純化，得到為無色油狀物的標(biāo)題化合物(4.1g)。
1H NMR(DMSO)6.75(d，1H)；6.70(d，1H)；5.05(t，1H)；NMR-4.85m(1H)；1.40m(12H).
中間體3
(3，5-二氯-碘苯基亞氨基)乙酸1-(R)-(1-叔丁氧基羰基)乙酯
將中間體2(0.784g)的甲苯(20ml)溶液在迪安-斯達(dá)克裝置中回流1小時(shí)。然后，加入3，5-二氯-2-碘苯胺(0.75g)和MgSO4(5g)，并且將該混合物回流1小時(shí)。然后冷卻混合物，通過硅藻土過濾除去MgSO4，濃縮后得到為淡黃色油狀物的標(biāo)題化合物(1.2g)。
1H NMR(DMSO)(ppm)7.95(s，1H)；7.67(d，1H)；7.30(d，1H)；5.09(q，1H)；1.49(d，3H)；1.43(s，9H).
IR(薄膜)(cm-1)1743
中間體4
(E)-5-(3，5-二氯-碘苯基亞氨基)己-2-烯二酸6-[1-(R)-(1-叔丁氧基羰基)]-乙酯
向已冷卻至-78℃的ZnCl2(0.36g)的無水二氯甲烷(10ml)懸浮液中加入中間體3(1.2g)的無水二氯甲烷(20ml)溶液。然后再加入1，1三甲基甲硅烷氧基1，3丁二烯(1.14g)，在-30℃下將所得到的混合物攪拌2小時(shí)。然后先后加入飽和的NH4Cl溶液(20ml)和乙酸乙酯(30ml)。有機(jī)相用鹽水(20ml)洗滌并干燥。以柱層析法(環(huán)己烷/乙酸乙酯50/50)純化，得到為無色油狀物的標(biāo)題化合物(1.13g)(非對(duì)映體過量50％)。
1H NMR(DMSO)d(ppm)12.3(bs，1H)；7.01(d，1H)；6.79(m，1H)；6.66(d.1H)；5.90(d，1H)；5.29(d，1H)；4.97(q，1H)；4.72(m，1H)；2.83(m，2H)；1.39(m，12H).
中間體5
(E)-4-羧基亞甲基-5，7-二氯-1，2，3，4-四氫喹啉-2-羧酸[1-(R)-(1-叔丁氧基羰基)]乙酯
向中間體4(1.2g)的無水二甲基甲酰胺(10ml)溶液中加入TEA(0.7ml)和Pd(PPh3)4(0.248g)。將該反應(yīng)混合物加熱至100℃ 1小時(shí)，然后先后加入乙酸乙酯(20ml)和1M的HCl溶液(10ml)。有機(jī)相用鹽水(20ml)洗滌，干燥并濃縮。最后以柱層析法(環(huán)己烷/乙酸乙酯40/60)純化，得到為無色油狀物的標(biāo)題化合物(0.5g)(非對(duì)映體過量50％)。
1H NMR(DMSO)12.3(s，1H)；7.27(bs，1H)；6.73(d.1H)；6.45(d.1H)；6.40(s，1H)；4.79(q，1H)；4.29(m，1H)；3.61(m，1H)；3.13(m，1H)；1.35(m，10H).
中間體6
(E)-4-[(2-吡啶基)硫羰基亞甲基]-5，7-二氯-1，2，3，4-四氫喹啉-2-羧酸[1-(R)-(1-叔丁氧基羰基)]乙酯
向中間體5(0.5g)的無水THF(30ml)溶液中加入PySSPy(0.66g)和PPh3(0.81g)。將該反應(yīng)混合物室溫下攪拌1小時(shí)，然后蒸發(fā)溶劑并且粗品以柱層析法(環(huán)己烷/乙酸乙酯80/20)純化，得到黃色泡沫狀的標(biāo)題化合物(0.170g)(非對(duì)映體過量60％)。
1H NMR(DMSO)p.p.m 8.61(m，1H)；7.91(m，1H)；7.71(m，1H)；7.46(bs，1H)；7.45(m，1H)；6.88(s，1H)；6.78(d，1H)；6.76(d，1H)；4.81(q，1H)；4.36(m，1H)；3.73(dd，1H)；3.05(m，1H)；1.4(m，3H)；1.34(s，9H)。
實(shí)施例1
(+/-)(E)-4-乙酰氨基-苯基氨基甲?；鶃喖谆?-5，7-二氯-1，2，3，4-四氫喹啉-2-羧酸(非對(duì)映體1a和1b)
在氮?dú)夥罩校瑢⑴嫉人岫阴?0.136ml；)的無水四氫呋喃(10ml)溶液在5分鐘內(nèi)滴加入(±)(E)-4-(4-乙酰氨基-苯基氨基甲?；鶃喖谆?-5，7-二氯-1，2，3，4-四氫喹啉-2-羧酸(270mg)、三苯基膦(228mg)和(R)-(+)-乳酸叔丁酯(127mg)的無水四氫呋喃(20ml)懸浮液內(nèi)。
在23℃下將該黃色溶液攪拌30分鐘，然后真空濃縮，通過快速層析法純化，用環(huán)己烷/乙酸乙酯4∶6洗脫，得到240mg標(biāo)題化合物(兩個(gè)非對(duì)映體1a和1b的混合物)。該非對(duì)映體通過制備性HPLC(柱Supelcosil LC-CN；流動(dòng)相己烷-四氫呋喃65∶35并且14分鐘后60∶40；流速10ml/分鐘；λ＝260nm)分離，然后進(jìn)一步在二氧化硅上純化，用環(huán)己烷/乙酸乙酯首先8∶2然后1∶1洗脫，得到為稍帶白色固體的非對(duì)映體1a91mg和為黃色固體的非對(duì)映體1b76mg。
實(shí)施例1m.p.175-177℃。IR(液體石蠟)3200(NH)，1738(C＝O)cm-1。1H-NMR(DMSO)10.09-10.05(2s，1H)；9.86-9.84(2s，1H)；7.64-7.44(m，4H)；7.34-7.19(2d，1H)；6.73-6.66(d，2H)；6.71-6.64(2s，1H)；4.76-4.56(2q，1H)；4.39-4.26和3.73(分別為m和dd，2H)；3.30-2.68(dd，1H)；2.00(s，3H)；1.34-1.31(2s，9H)；1.29-1.15(2d，3H)。MSm/z＝562[M+H]+
非對(duì)映體1a m.p.206-8℃。T.l.c.乙酸乙酯-環(huán)己烷7∶3，Rf＝047。IR(液體石蠟)3314(NH)，1730，1666，1656(C＝O)cm-1。1H-NMR(DMSO)10.09(s，1H)；9.86(s，1H)；7.57(d，2H)；7.49(d，2H)；7.33(d，1H)；6.71(d，2H)；6.67(d，1H)；6.65(m，1H)；4.57(q，1H)；4.37(m，1H)；4.29(m，1H)；2.69(m，1H)；2.00(s，3H)；1.35(s，9H)；1.16(d，3H)。MSm/z＝561[M]+，562[M+H]+。HPLC保留時(shí)間12.56分鐘(柱Supelcosil LC-CN；流動(dòng)相己烷-四氫呋喃70∶30；流速0.8ml/分鐘；λ＝260nm)
非對(duì)映體1bm.p.105-7℃。T.l.c.乙酸乙酯-環(huán)己烷7∶3，Rf＝040IR(液體石蠟)3310(NH)，1738和1659(C＝O)cm-1。1H-NMR(DMSO)10.05(s，1H)；9.85(s，1H)；7.55(d，2H)；7.47(d，2H)；7.19(d，1H)；6.74(d，1H)；6.73(d，1H)；6.72(s，1H)；4.77(q，1H)；4.29(m，1H)；3.74(dd，1H)；3.29(m，1H)；2.00(s，3H)；1.32(s，9H)；1.29(d，3H)。MSm/z＝561[M]+，562[M+H]+。HPLC保留時(shí)間15.60分鐘(柱Supelcosil LC-CN；流動(dòng)相己烷-四氫呋喃70∶30；流速0.8ml/分鐘；λ＝260nm)
實(shí)施例2
(+)-E-4-(4-乙酰氨基-苯基氨基甲?；鶃喖谆?-5，7-二氯-1，2，3，4-四氫喹啉-2-羧酸
將氫氧化鋰單水合物(12.84mg)加入到非對(duì)映體1a(來自實(shí)施例1，86mg)的四氫呋喃(5ml)和水(2.5ml)的溶液中。將該溶液在23℃下攪拌30分鐘，然后真空濃縮。殘余物用水(10ml)稀釋并用乙酸乙酯(2×15ml)提取。水層用5％鹽酸酸化至pH＝1，再用乙酸乙酯(3×15ml)提取。干燥合并的有機(jī)提取物，并真空濃縮，得到為稍帶白色固體的標(biāo)題化合物(56mg)。m.p.224-6°。IR(液體石蠟)3356-3302(NH)，3350-2600(OH)；1724和1663-1650(C＝O)cm-1 。1H-NMR(DMSO)12.71(s，1H)；10.10(s，1H)；9.87(s，1H)；7.56(d，2H)；7.50(d，2H)；7.10(d，1H)；6.70(d，2H)；6.68(m，1H)；4.11(m，1H)；3.87(m，1H)；3.08(dd，1H)；2.01(s，3H)。
MSm/z＝434[M+H]+.
HPLC保留時(shí)間15.2分鐘(柱cyclobond I 2000 SN；相β-環(huán)糊精S萘基乙基氨基甲酸酯，流動(dòng)相乙酸銨甲醇緩沖液(pH＝3)；流速1ml/分鐘；λ＝260nm)D＝[+16]20。λ＝598nm，溶劑二甲基亞砜
濃度＝0.26％ w/v
實(shí)施例3
(E)-4-(4-乙酰氨基-苯基氨基甲酰基亞甲基)-5，7-二氯-1，2，3，4-四氫喹啉-2-羧酸[1-(R)-(1-叔丁氧基羰基)]乙酯
將4-氨基乙酰苯胺(acetanalide)(0.05g)加入到中間體6(0.155g)的無水甲苯(20ml)溶液中。將所生成的混合物在100℃下加熱3小時(shí)，然后蒸發(fā)溶劑，并且粗品用柱層析法純化(環(huán)己烷/乙酸乙酯50∶50)得到為黃色固體的標(biāo)題化合物(0.05g)。
1H-NMR(DMSO)d 10.05(bs，1H)；9.85(bs，1H)；7.55(d，2H)；7.47(d，2H)；7.19(dd，1H)；6.74(d，1H)；6.73(d，1H)；6.72(s，1H)；4.77(q，1H)；4.29(m，1H)；3.74(dd，1H)；3.29(m，1H)；2.00(s，3H)；1.32(s，9H)；1.29(d，3H)。
IR(液體石蠟)(cm-1)3310，1738，1659。
實(shí)施例4
(+)(E)-4-(4-乙酰氨基-苯基氨基甲?；鶃喖谆?-5，7-二氯-1，2，3，4-四氫喹啉-2-羧酸
將LiOH(0.005g)加入到實(shí)施例3(0.021g)的THF/H2O(3/1)溶液中。15分鐘后，蒸發(fā)THF并加入水(2ml)。該溶液以乙酸乙酯(2×5ml)洗滌，然后加入1M的HCl溶液，所生成的溶液用乙酸乙酯(2×5ml)提取，并蒸發(fā)，得到為淡黃色固體的標(biāo)題化合物(0.01g)。
1H-NMR(DMSO)d 12.71(s，1H)；10.10(s，1H)；9.87(s，1H)；7.56(d，2H)；7.50(d，2H)；7.10(d，1H)；6.70(d，2H)；6.68(m，1H)；4.11(m，1H)；3.87(m，1H)；3.08(dd，1H)；2.01(s，3H)。
IR(液體石蠟)(cm-1)3356-3302，1724，1663-1650。
HPLC保留時(shí)間9.7分鐘(柱cyclobond SN；相β-環(huán)糊精S萘基氨基甲酸酯，流動(dòng)相乙酸銨甲醇緩沖液(pH＝5)；流速1ml/分鐘；λ＝260nm)
實(shí)施例5
(+)4-(4-乙酰氨基-苯基氨基甲酰基亞甲基)-5，7-二氯-1，2，3，4-四氫喹啉-2-羧酸鈉鹽
在氮?dú)夥罩?，將三甲基硅烷酸鈉(7.74mg)加入到(+)4-(4-乙酰氨基-苯基氨基甲酰基亞甲基)-5，7-二氯-1，2，3，4-四氫喹啉-2-羧酸(30mg)的無水四氫呋喃(3ml)的懸浮液中。將該黃色懸浮液在23℃下攪拌1小時(shí)，然后真空濃縮，殘余物以乙醚(5ml)研磨。過濾后獲得為黃色固體的標(biāo)題化合物(27mg)。
M.p.202-5℃(分解)。
IR(液體石蠟)3400-3000(NH)，1650(C＝O)cm-1。1H-NMR(DMSO)11.71(bs，1H)；9.26(bs，1H)；7.65(d，2H)；7.49(d，2H)；6.74(d，1H)；6.71(bs，1H)；6.52(s，1H)；6.50(d，1H)；3.51(m，1H)；3.29(m，1H)；2.64(m，1H)；2.01(s，3H)。MSm/z＝456[M+H]+，478[M+H]+。HPLC保留時(shí)間14.28分鐘。(柱cyclobond I 2000SN；相b-環(huán)糊精氨基S萘基乙基甲酸酯，流動(dòng)相甲醇-乙酸銨緩沖液，流速1ml/分鐘；λ＝260nm)
藥劑學(xué)實(shí)施例
靜脈輸注劑 ％ w/v
化合物(I) 0.3-0.5
聚山梨酸酯801
三(羥甲基)氨基甲烷 0.54
右旋糖溶液5％ w/v 適量至所需體積
將化合物(I)和聚山梨酸酯加入到三(羥甲基)氨基甲烷的適于注射的5％右旋糖水溶液中。該溶液通過無菌的0.2微米除菌濾膜過濾，并且在經(jīng)過壓熱處理器滅菌前將其充入容器中。
使用Kishimoto H等在J.Neurochem 1981，37，1015-1024中的方法，測(cè)定本發(fā)明化合物對(duì)于定位在NMDA受體復(fù)合物上的馬錢子堿不敏感甘氨酸結(jié)合位點(diǎn)的親和力。所獲得的pKi值為8.8。
權(quán)利要求
1.基本上不含(-)對(duì)映體的(+)E 4-(4-乙酰氨基-苯基氨基甲?；鶃喖谆?-5，7-二氯-1，2，3，4-四氫喹啉2-羧酸及其鹽。
2.基本上不含(-)對(duì)映體的(+)E 4-(4-乙酰氨基-苯基氨基甲?；鶃喖谆?-5，7-二氯-1，2，3，4-四氫喹啉2-羧酸及其生理上可接受的鹽。
3.基本上不含(-)對(duì)映體的(+)E 4-(4-乙酰氨基-苯基氨基甲?；鶃喖谆?-5，7-二氯-1，2，3，4-四氫喹啉2-羧酸的鈉鹽。
4.如權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)的化合物的制備方法，其包括
a)用適宜的手性醇使化合物A酯化，
隨后
i)分離所生成的非對(duì)映體酯
ii)水解所要求的單一非對(duì)映體酯和分離該(+)對(duì)映體的游離酸或者其鹽；并且如果要求的話，隨后使該(+)對(duì)映體的游離酸轉(zhuǎn)化為其鹽，
b)在路易斯酸的存在下，使其中R3為氫或氮保護(hù)基團(tuán)和R5為適宜的手性基團(tuán)的式(IV)化合物與胺(III)反應(yīng)，
并且使生成的化合物進(jìn)行下列反應(yīng)
i)必要的話除去氮保護(hù)基團(tuán)R3，
ii)分離所生成的非對(duì)映體酯，
iii)水解所要求的單一非對(duì)映體酯，并分離該(+)對(duì)映體的游離酸或者其鹽；并且如果要求的話，隨后使該游離酸轉(zhuǎn)化為其鹽。
5.如權(quán)利要求4的方法，其中所述手性醇為(+)R叔丁醇乳酸酯，或者R5是從(+)R叔丁醇乳酸酯衍化而來的基團(tuán)。
6.權(quán)利要求4或5定義的式(IV)中間體或式(II)中間體的制備方法
其包括下列步驟
i)使其中R2代表溴或碘原子、R6是如以上限定的適宜的手性基團(tuán)R5或如在式(II)中描述的羧酸保護(hù)基團(tuán)R1的式(VI)的亞氨基酯與其中R7代表C1-4烷基基團(tuán)、并且R4為烴基甲硅烷基團(tuán)或適宜的羧酸保護(hù)基團(tuán)的式(VII)化合物反應(yīng)，接著，如果要求的話，將生成的其中R3為氫的式(V)化合物轉(zhuǎn)化為其中R3為氮保護(hù)基團(tuán)的式(V)化合物，
和
ii)使所生成的化合物(V)環(huán)合
其中R2為溴或碘原子，R3代表氫或氮保護(hù)基團(tuán)，R4為氫或適宜的羧酸保護(hù)基團(tuán)并且R6代表適宜的手性基團(tuán)R5或者羧酸保護(hù)基團(tuán)R1，此后，如果必要的話，除去羧酸保護(hù)基團(tuán)R4和任何氮保護(hù)基團(tuán)R3。
7.如權(quán)利要求4或5的方法，其中所述中間體(IV)根據(jù)權(quán)利要求6的方法制備。
8.藥用組合物，它包括將權(quán)利要求2或權(quán)利要求3的化合物與一種或多種生理上可接受的載體或賦形劑混合。
9.如權(quán)利要求2或3的化合物在用于拮抗NMDA受體復(fù)合物上興奮性氨基酸作用的藥物生產(chǎn)中的用途。
10.如在權(quán)利要求2或3中的化合物在治療中的用途。
11.對(duì)于包括人的哺乳動(dòng)物的疾病的治療方法，在所述疾病中拮抗NMDA受體復(fù)合物上的興奮性氨基酸的作用具有治療益處，該方法包括給予有效量的權(quán)利要求2或3中的化合物。
全文摘要
E4－(4－乙酰氨基－苯基氨基甲?；鶃喖谆?－5,7－二氯－1,2,3,4－四氫喹啉2－羧酸的(+)對(duì)映體和其鹽,其為興奮性氨基酸拮抗劑,關(guān)于它們的制備方法、含有它們的藥用組合物和它們?cè)卺t(yī)療上的用途。
文檔編號(hào)A61P25/28GK1257482SQ9880530
公開日2000年6月21日 申請(qǐng)日期1998年3月24日 優(yōu)先權(quán)日1997年3月26日
發(fā)明者R·迪法比奧, B·伯塔尼, G·阿爾瓦羅 申請(qǐng)人:意大利葛蘭素惠爾康股份公司