專利名稱：以枯草芽孢桿菌活培養(yǎng)物為基的生物藥制劑,治療細(xì)菌、病毒感染和免疫缺陷癥的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，特別涉及提供具有抗菌和抗病毒活性，且也能治療免疫缺陷癥的制劑。
使用重組人干擾素制劑是當(dāng)前治療多種疾病的主要途徑之一。這種基因工程制劑，如Reaferonum、Roferon、Berofor、Intron-A等在醫(yī)學(xué)實(shí)踐中得到了廣泛的應(yīng)用。積累了大量的臨床資料來(lái)證實(shí)注射形式干擾素的治療效果。然而這種類型的制劑仍具有一系列的缺點(diǎn)它們的作用結(jié)果取決于感染形式、機(jī)體的狀態(tài)、制劑的獨(dú)特耐受性；注射干擾素經(jīng)常引起不希望的付反應(yīng)(體溫過(guò)高、頭和肌肉疼痛、惡心、嘔吐)；在某些情況下生成中和干擾素的抗體，這就嚴(yán)重下降了治療效果并可能引發(fā)過(guò)敏反應(yīng)；使用注射形式伴隨著增高傳染肝炎和艾滋病的危險(xiǎn)；注射形式干涉素相對(duì)較貴，因此在真正的臨床實(shí)踐中這些制劑只具有有限的應(yīng)用。
除此之外，任何一種干擾素制劑都不具有治療同時(shí)發(fā)生的細(xì)菌感染(腸結(jié)腸炎、雙細(xì)菌病、肺炎)的抗菌作用。
另一種向靶器官提供干擾素的可能性是由腐生細(xì)菌菌株(RU № 2084233)在胃腸系統(tǒng)(GIT)內(nèi)產(chǎn)生干擾素產(chǎn)物。這些干擾素生產(chǎn)性菌株可成為口服藥用制劑的基礎(chǔ)。我們的觀點(diǎn)是，在最有前途的細(xì)菌性載體中，最值得注意的是芽孢桿菌(Bacillus)，特別是枯草芽孢桿菌(B.Substilis)(SmimovV.V.等，作為生物活性物質(zhì)生產(chǎn)者的形成孢子的需氧菌，基輔，《科學(xué)思維》，1982年第280頁(yè))。這種微生物廣泛地分布在周圍環(huán)境中，具有一系列有價(jià)值的性質(zhì)是病原性和限制性病原菌叢的(葡萄球菌、鏈球菌、沙門氏菌、變形桿菌、酵母菌)拮抗物；產(chǎn)生消除腸道內(nèi)腐敗物的酶；合成一系列的氨基酸、維他命和免疫調(diào)節(jié)物；促進(jìn)上皮再生；枯草芽孢桿菌的孢子對(duì)酶促蛋白水解作用和胃中的酸性介質(zhì)是穩(wěn)定的，并可以完整地進(jìn)入腸道，在腸道中成為營(yíng)養(yǎng)體型。
由于完全無(wú)毒且具有廣譜生物活性，枯草芽孢桿菌活培養(yǎng)物可以在醫(yī)藥領(lǐng)域用作治療和預(yù)防性藥物的基礎(chǔ)。注冊(cè)并成功地應(yīng)用了一系列這樣的制劑Bactisubtil(克羅地亞)，F(xiàn)lonivin-BS(南斯拉夫)，Biosporinum(烏克蘭)，SL-Bacterinum(烏克蘭)，Sporobacterinum(俄羅斯)。這些制劑用于治療雙細(xì)菌病、腹瀉、腸炎、結(jié)腸炎、化膿性創(chuàng)傷、扁桃體炎、素質(zhì)病、濕疹、過(guò)敏疾病。在不耐受抗生素和磺胺的情況下，攝生學(xué)治療仍然有效。
最接近本發(fā)明的是制劑Subalin。該制劑包含以能產(chǎn)生α-2-干擾素的重組枯草孢桿菌活培養(yǎng)物(RU № 2035185，92年5月20日公布)為基礎(chǔ)的組合物。已知的生物制劑優(yōu)選以1克制劑中枯草芽孢桿菌的生物量為1×109CFU施用，且用于獸醫(yī)領(lǐng)域。
本發(fā)明的目的是提供一種以枯草芽孢桿菌活培養(yǎng)物為基的生物藥制劑，該制劑同時(shí)具有抗菌和抗病毒活性，也可用于對(duì)抗免疫缺陷癥。此目的是這樣達(dá)到的在含有產(chǎn)生人α-2-干擾素的枯草芽孢桿菌的重組菌株的生物制劑中還含有地衣形芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)活培養(yǎng)物，各組分比例如下枯草芽孢桿菌1×106-1×107CFU/g地衣形芽孢桿菌1×105-1×106CFU/g填充劑——補(bǔ)足至1g。
為制成制劑可以使用能產(chǎn)生人α-2-干擾素的各種枯草芽孢桿菌重組菌株，包括保藏在俄羅斯國(guó)立工業(yè)微生物保藏中心的菌株VKPM B-7289。
填充劑可以使用通常用于形成片劑的組分，例如葡萄糖、淀粉、氫氧化鋁、硬脂酸鈣等，并用一般可以接受的比例(為口服給藥)。瓊脂及其它凝膠用于外用。
以特定的枯草芽孢桿菌菌株(營(yíng)養(yǎng)體型和孢子型)為基的生物制劑被用作在實(shí)際臨床條件下具有抗病毒和抗菌活性的物質(zhì)，該制劑被暫時(shí)命名為Deprecan-A。
在治療各種感染的非感染疾病時(shí)，該制劑都表現(xiàn)出高的臨床效果·甲、乙、丙型病毒性肝炎；·帶狀皰疹和單純性皰疹感染；·病毒性腦炎；·人乳頭瘤病毒引起的感染；·急性呼吸病毒感染；·漿液性腦膜炎；
·慢性病毒感染(包括彌漫性硬化癥)；·腸炎，結(jié)腸炎；·急性腸道感染，包括較小年齡的兒童的；·衣原體病；·細(xì)菌性陰道炎；·干擾素缺乏綜合癥。
Deprecan-A是新一代攝生學(xué)制劑，以含有人α-2-干擾素基因的枯草芽孢桿菌活培養(yǎng)物為基?？诜﨑eprecan-A保證了細(xì)菌進(jìn)入腸內(nèi)，在那里細(xì)菌直接進(jìn)行繁殖并產(chǎn)生干擾素。經(jīng)上皮，淋巴集結(jié)、門靜脈，干擾素到達(dá)受肝病病毒損傷的肝實(shí)質(zhì)。這樣實(shí)現(xiàn)了全新的非注射途徑將活性藥物制劑送到靶器官。
在甲、乙、丙型病毒性肝炎的病人身上進(jìn)行的臨床試驗(yàn)顯示如下1、觀察到總的血膽紅素水平下降3-5倍；2、病毒抗原從血清中消失并觀察到血清轉(zhuǎn)化；3、病人的臨床癥狀顯著改善，病毒性肝炎特征的一般癥狀消失。
于任何一種情況均未出現(xiàn)毒性、過(guò)敏或其它副作用(體溫升高，頭疼，肌肉、腹部疼，嘔吐，腹瀉等等)。
為了治療急性肝炎建議下述使用Deprecan-A的方案五天期間一日四次，每次2.5g在進(jìn)食之間的間隔內(nèi)服用。間隔一周后可重復(fù)療程(在指示下)。
用下述實(shí)施例說(shuō)明本發(fā)明。
實(shí)施例1.制劑Deprecan-A的試驗(yàn)是在傳染病醫(yī)院在8個(gè)志愿的患者身上進(jìn)行，他們患有不同程度的丙型病毒性肝炎。使用制劑5天后得到的結(jié)果列于表1。根據(jù)生化數(shù)據(jù)(膽紅素，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AAT)等)從表中可以看出Deprecan-A治療肝炎的有效過(guò)程。
實(shí)施例2.腎夠植接受者K，在移植后患乙型肝炎。使用Deprecan-A同樣得到有效結(jié)果。血中所含物指標(biāo)和主要生化數(shù)據(jù)的動(dòng)態(tài)情況列于表2。
實(shí)施例3.腎移植接受者L，在移植后患乙型和丙型肝炎，在口服給藥Deprecan-A情況下得到有效的結(jié)果。血中所含物指標(biāo)和主要生化數(shù)據(jù)的動(dòng)態(tài)情況列于表3。
實(shí)施例4.腎移植接受者M(jìn)，患乙型和丙型肝炎，從一系列生化指標(biāo)看，也表現(xiàn)出有效的結(jié)果。
血中所含物指標(biāo)和主要生化數(shù)據(jù)的動(dòng)態(tài)情況列于表4。在抗病毒性肝炎的同時(shí)，Deprecan-A可有效地用于治療由病毒引發(fā)的下述感染單純性皰疹和帶狀皰疹，病毒性腦炎，人乳頭瘤病毒，以及急性呼吸病毒感染，慢性病毒感染(包括彌漫性硬化癥)，漿液性腦膜炎。
值得提及的是所用的枯草芽孢桿菌具有下述特點(diǎn)對(duì)腸胃道內(nèi)消化性酶有高穩(wěn)定性并有在腸道內(nèi)迅速繁殖的能力，口服時(shí)細(xì)菌于2晝夜期間在腸胃道內(nèi)擴(kuò)增。
過(guò)了兩晝夜它們?nèi)繌臋C(jī)體中排出，甚至再投藥也不會(huì)引起不良后果。因此，Deprecan-A成功地用于不僅是治療基本的細(xì)菌感染，而且也用于治療繼發(fā)性細(xì)菌腸道感染。
口服Deprecan-A以治療和預(yù)防雙細(xì)菌病、腸炎、腸結(jié)腸炎、痢疾、食物和酒精中毒、肝炎、膽囊炎、流感、皰疹、蜱傳播的腦炎、咽峽炎、感冒、葡萄球菌感染，同時(shí)也預(yù)防免疫缺陷癥，控制過(guò)敏和素質(zhì)病。
建議完全康復(fù)前每晝夜服用2至4次每次1片，最好不要空腹吃藥，時(shí)間間隔4-12小時(shí)。為了讓孢子更有效地布滿喉部和口腔，不要送服制劑，應(yīng)含在口中至完全溶解。
為預(yù)防免疫缺陷癥，在5天內(nèi)每天服用制劑1-2次每次1片。
建議不要將制劑與抗菌素和磺胺同時(shí)口服，后者降低所用細(xì)菌的活性。當(dāng)必須時(shí)，Deprecan-A可以和注射形式的抗菌素聯(lián)合施用。
因此，Deprecan-A是以非侵入方式治療細(xì)菌、病毒感染和免疫缺陷癥的新一代制劑。
表1
表2
<p>表3<
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表權(quán)利要求
1.以枯草芽孢桿菌活培養(yǎng)物為基的生物藥制劑，含有產(chǎn)生人α-2-干擾素的重組枯草芽孢桿菌菌株和填充劑，其特征在于還含有地衣形芽孢桿菌活培養(yǎng)物，各組分比例如下枯草芽孢桿菌 1×106-1×107CFU/g地衣形芽孢桿菌 1×105-1×106CFU/g填充劑 補(bǔ)足至1g其具有抗菌、抗病毒和免疫調(diào)節(jié)活性。
2.權(quán)利要求1的制劑，其特征在于含有枯草芽孢桿菌重組菌株VKPM B-7289。
3.通過(guò)向機(jī)體內(nèi)施用抗菌劑治療細(xì)菌感染的方法，其特征在于向機(jī)體施用有效量的權(quán)利要求1的制劑。
4.按照權(quán)利要求3的方法，其特征在于細(xì)菌感染選自腸炎、結(jié)腸炎、急性腸道感染(其中包括小齡兒童的)、衣原體病、細(xì)菌性陰道炎。
5.通過(guò)向機(jī)體內(nèi)施用抗病毒劑治療病毒感染的方法，其特征在于向機(jī)體施用有效量的權(quán)利要求1的制劑。
6.按照權(quán)利要求5的方法，其特征在于病毒感染選自甲、乙、丙型病毒性肝炎；帶狀皰疹或單純性皰疹感染、病毒性腦炎；人乳頭瘤病毒感染、急性呼吸病毒感染、慢性病毒感染(其中包括彌漫性硬化癥)、漿液性腦膜炎。
7.施用免疫調(diào)節(jié)劑治療免疫缺陷癥的方法，其特征在于施用有效量的權(quán)利要求1的制劑。
8.按照權(quán)利要求7的方法，其特征在于治療的是干擾素缺乏綜合癥。
全文摘要
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域。其實(shí)質(zhì)在于提供以芽孢桿菌活培養(yǎng)物為基的制劑,它含有產(chǎn)生人α－2－干擾素的重組枯草芽孢桿菌菌株,和地衣形芽孢桿菌活培養(yǎng)物,含有一定量的新的或普通的填充劑。制劑可以治療病毒感染,這些如肝炎、皰疹、腦炎及其它;可以治療細(xì)菌感染,這些如腸炎、結(jié)腸炎、衣原體病、陰道炎等,也可以治療免疫缺陷癥。本發(fā)明增加了大量的物質(zhì),用非注射的方法對(duì)抗細(xì)菌、病毒感染和免疫缺陷癥。
文檔編號(hào)A61K48/00GK1259873SQ98804473
公開(kāi)日2000年7月12日 申請(qǐng)日期1998年7月6日 優(yōu)先權(quán)日1998年5月12日
發(fā)明者V·G·科斯特洛維斯奇, V·I·斯?fàn)柶娑骺? A·V·瓦倫德, S·N·格尼多伊, V·V·普斯多瓦伊 申請(qǐng)人:賽托基因股份有限公司