本發(fā)明屬于海洋微藻養(yǎng)殖領(lǐng)域，尤其涉及一種綠色巴夫藻培養(yǎng)基組合物。

背景技術(shù)：

綠色巴夫藻(Pavlova viridid)屬金藻門(Chrysophyta)、普林藻綱(Prymnesiophyceae)、巴夫藻目(Pavlovales)、巴夫藻科(Pavolovaceae)。該藻是一株海洋藻類，無細(xì)胞壁，個體微小(6.0×4.8×4.0μm)，繁殖快。綠色巴夫藻具有高蛋白和高脂肪酸含量，非常適于水產(chǎn)動物幼體攝食和消化，尤其富含水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)動物幼體生長和發(fā)育所必需的二十二碳六烯酸EPA，是一種優(yōu)質(zhì)單胞藻餌料，被廣泛應(yīng)用于蝦、蟹、貝類幼體及海水仔魚人工育苗。由于綠色巴夫藻富含特殊的巴夫甾醇、多糖等有效成分，在生物活性方面也具有重要的研究價值。

本申請的發(fā)明人在實際使用MAV培養(yǎng)液對綠色巴夫藻進(jìn)行養(yǎng)殖時發(fā)現(xiàn)，綠色巴夫藻的藻細(xì)胞生長速度慢且產(chǎn)量較低。如何通過改變綠色巴夫藻培養(yǎng)基組合物來提高綠色巴夫藻的生長速度和提高產(chǎn)量是申請人一致致力于研究的方向。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

為了解決現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本發(fā)明提供一種可以提高綠色巴夫藻的生長速度和產(chǎn)量的綠色巴夫藻培養(yǎng)基組合物。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：一種綠色巴夫藻培養(yǎng)基組合物，包括如下組分：KNO₃：300-400mg/L；KH₂PO₄：10mg/L；FeSO₄·7H₂O：2.5mg/L；MnSO₄：0.25g/L；MgSO₄：0.075g/L；EDTA-Na₂：10mg/L；VB₁:6mg/L；VB₁₂:50ug/L；植物生長調(diào)節(jié)劑：0.1-1mg/L；添加劑：0.5-3mg/L和滲透調(diào)節(jié)劑：0.1-1mg/L。

作為進(jìn)一步的改進(jìn)，所述植物生長調(diào)節(jié)劑為6-BA。

作為進(jìn)一步的改進(jìn)，所述添加劑為甘氨酸。

作為進(jìn)一步的改進(jìn)，所述滲透調(diào)節(jié)劑為脯氨酸。

采用上述技術(shù)方案后，將綠色巴夫藻培養(yǎng)基組合物用1000ML過濾之后的海水進(jìn)行稀釋后使用，通過增加培養(yǎng)基硝酸鹽濃度來提高培養(yǎng)基的N/P，進(jìn)而使得藻細(xì)胞的生長速度加快，現(xiàn)有的綠色巴夫藻培養(yǎng)基中是不加鎂鹽的，本方案中通過添加適量的MgSO4，有利于綠色巴夫藻的生長以及葉綠素的合成。在培養(yǎng)基中添加甘氨酸作為添加劑，使得綠色巴夫藻生長速度明顯增加，生物量增大，葉綠素及蛋白質(zhì)含量均呈現(xiàn)上升趨勢。植物生長調(diào)節(jié)劑采用6-BA和滲透調(diào)節(jié)劑采用脯氨酸后，一方面促進(jìn)了藻細(xì)胞的分裂增殖，另一方面，提高藻細(xì)胞的抗氧化能力，增加了對環(huán)境的適應(yīng)性。

本發(fā)明具有以下有益效果：本發(fā)明提供的綠色巴夫藻培養(yǎng)基利于藻細(xì)胞快速生長，培養(yǎng)出的綠色巴夫藻細(xì)胞密度大，合理改變藻細(xì)胞營養(yǎng)配方的配比，促進(jìn)藻細(xì)胞快速增殖，使得藻細(xì)胞濃度增大，適于大批量規(guī)模化培養(yǎng)生產(chǎn)。

附圖說明

圖1是本發(fā)明的實施例1、實施例2、實施例3與MAV培養(yǎng)基的對比試驗結(jié)果圖。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施例，對本發(fā)明提供的綠色巴夫藻培養(yǎng)基組合物進(jìn)行詳細(xì)的說明。

實施方式一

一種綠色巴夫藻培養(yǎng)基組合物，包括如下組分：KNO₃：300mg/L；KH₂PO₄：10mg/L；FeSO₄·7H₂O：2.5mg/L；MnSO₄：0.25g/L；MgSO₄：0.075g/L；EDTA-Na₂：10mg/L；VB₁:6mg/L；VB₁₂:50ug/L；促進(jìn)植物生長調(diào)節(jié)的6-BA：0.1mg/L；作為添加劑的甘氨酸：0.5mg/L和作為滲透調(diào)節(jié)的脯氨酸：0.1mg/L。

將上述方案配比制成的綠色巴夫藻培養(yǎng)基組合物與1000ml過濾之后的海水進(jìn)行配置。然后取對數(shù)生長期的綠色巴夫藻接種到該培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，每天光照12小時，光照強度約為50μmol/(m2·s)，培箱溫度控制在25℃，每隔一段時間記錄培養(yǎng)基中綠色巴夫藻的細(xì)胞濃度。

實施方式二

一種綠色巴夫藻培養(yǎng)基組合物，包括如下組分：KNO₃：400mg/L；KH₂PO₄：10mg/L；FeSO₄·7H₂O：2.5mg/L；MnSO₄：0.25g/L；MgSO₄：0.075g/L；EDTA-Na₂：10mg/L；VB₁:6mg/L；VB₁₂:50ug/L；促進(jìn)植物生長調(diào)節(jié)劑6-BA：1mg/L；作為添加劑的甘氨酸：3mg/L和作為滲透調(diào)節(jié)的脯氨酸：1mg/L。

將上述方案配比制成的綠色巴夫藻培養(yǎng)基組合物與1000ml過濾之后的海水進(jìn)行配置。然后取對數(shù)生長期的綠色巴夫藻接種到該培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，每天光照12小時，光照強度約為50μmol/(m2·s)，培箱溫度控制在25℃，每隔一段時間記錄培養(yǎng)基中綠色巴夫藻的細(xì)胞濃度。

實施方式三

一種綠色巴夫藻培養(yǎng)基組合物，包括如下組分：KNO₃：300mg/L；KH₂PO₄：10mg/L；FeSO₄·7H₂O：2.5mg/L；MnSO₄：0.25g/L；MgSO₄：0.075g/L；EDTA-Na₂：10mg/L；VB₁:6mg/L；VB₁₂:50ug/L；植物生長調(diào)節(jié)劑6-BA：0.5mg/L；添加劑甘氨酸：1.75mg/L和滲透調(diào)節(jié)劑脯氨酸：0.5mg/L。

將上述方案配比制成的綠色巴夫藻培養(yǎng)基組合物與1000ml過濾之后的海水進(jìn)行配置。然后取對數(shù)生長期的綠色巴夫藻接種到該培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，每天光照12小時，光照強度約為50μmol/(m2·s)，培箱溫度控制在25℃，每隔一段時間記錄培養(yǎng)基中綠色巴夫藻的細(xì)胞濃度。

為了更好地體現(xiàn)本技術(shù)方案相對于傳統(tǒng)的MAV培養(yǎng)基足有生長速度快和產(chǎn)量高的優(yōu)點，將海水MAV培養(yǎng)基作為對照培養(yǎng)基，取對數(shù)生長期的綠色巴夫藻接種到該培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，每天光照12小時，光照強度約為50μmol/(m2·s)，培箱溫度控制在25℃，每隔一段時間記錄培養(yǎng)基中綠色巴夫藻的細(xì)胞濃度。

下表為：不同培養(yǎng)基培養(yǎng)的綠色巴夫藻的細(xì)胞濃度對比表

通過上表的實驗數(shù)據(jù)可以看出，使用本技術(shù)方案所提供的培養(yǎng)基比使用傳統(tǒng)的MAV培養(yǎng)基可以更快速地使綠色巴夫藻細(xì)胞增殖，優(yōu)化后的綠色巴夫藻最高細(xì)胞濃度也遠(yuǎn)高于對照培養(yǎng)基，由此說明本發(fā)明提供的綠色巴夫藻培養(yǎng)基具有明顯的培養(yǎng)優(yōu)勢，更利于本藻細(xì)胞的快速生長。

以上所述僅為本發(fā)明示意性的具體實施方式，并非用以限定本發(fā)明的范圍。任何本領(lǐng)域的技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明的構(gòu)思和原則的前提下所作出的等同變化與修改，均應(yīng)屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。