專利名稱：Il－8受體拮抗劑的制作方法
技術領域：
本發(fā)明領域本發(fā)明涉及新的含胍的化合物、藥用組合物、制備它們的方法及其在治療IL-8、GROα、GROβ、GROγ、ENA-78和NAP-2介導的疾病中的用途。
本發(fā)明背景白介素-8(IL-8)有許多不同的名稱，例如中性白細胞誘引劑/活化的蛋白-1(NAP-1)、單核細胞衍生的中性白細胞起化因子(MDNCF)、中性白細胞活化因子(NAF)和T-細胞淋巴細胞趨化因子。白介素-8為中性白細胞、嗜堿性粒細胞和T-細胞亞群的化學誘引劑。它是由大多數(shù)有核細胞包括巨噬細胞、成纖維細胞、內(nèi)皮細胞和上皮細胞暴露于TNF、IL-1α、IL-1β或LPS而產(chǎn)生的，以及由中性白細胞本身暴露于LPS或趨化因子如FMLP時而產(chǎn)生[M.Baggiolini等，J.Clin.Invest.84,1045(1989)；J.Schroder等，J.Immunol.139,3474(1987)和J.Immunol.144,2223(1990)；Strieter等，Science243,1467(1989)和J.Biol.Chem.264,10621(1989)；Cassatella等，J.Immunol.148,3216(1992)]。
Groα、GROβ、GROγ和NAP-2也屬于趨化因子α家族。類似于IL-8，這些趨化因子也涉及不同的名稱。例如，GROα、β、γ分別稱作MGSAα、β和γ(Melanoma Growth Stimulating Activity)，參見Richmond等，J.Cell.Physiology129,375(1986)和Chang等J.Immunol.148,451(1992)。具有直接在CXC基序前的ELR基序的α-家族的所有趨化因子可結合在IL-8B受體上。
IL-8、Groα、GROβ、GROγ和NAP-2在體外激發(fā)許多功能。它們均顯示對中性白細胞的化學誘引劑特性，同時IL-8和GROα還顯示T-淋巴細胞和嗜堿性粒細胞趨化活性。此外，IL-8能誘導來自正常的和特應性個體的嗜堿性粒細胞釋放組胺，另外，GRO-α和IL-8能引起溶酶體(lysozomal)酶的釋放和來自中性白細胞的突發(fā)性呼吸。也表明IL-8可增加Mac-l(CD11b/CD18)在中性白細胞上的表面表達而無蛋白的從頭合成。這可能有助于增加中性白細胞對血管內(nèi)皮細胞的粘附。許多已知疾病以大量的中性白細胞浸潤為特征。因為IL-8、Groα、GROβ、GROγ和NAP-2促使中性白細胞的聚集和激活，這些趨化因子與廣泛的急性和慢性炎癥性疾病包括牛皮癬和類風濕性關節(jié)炎有關[Baggiolini等，F(xiàn)EBS Lett307,97(1992)；Miller等，Crit.Rev.Immunol.12,17(1992)；Oppenheim等，Annu.Rev.Immunol.9,617(1991)；Seitz等，J.Clin.Invest.87,463(1991)；Miller等，Am.Rev.Respir.Dis.146,427(1992)；Donnely等，Lancet341,643(1993)]。此外，ELR趨化因子(正在CXC基序前含有氨基酸ELR基序的趨化因子)還與angiostasis有關[Strieter等，Science258,1798(1992)]。
在體外，IL-8、Groα、GROβ、GROγ和NAP-2通過與七跨膜受體結合和激活七跨膜受體，G-蛋白偶聯(lián)家族，特別是與IL-8受體(尤其B-受體)結合可誘導中性白細胞形狀的改變、趨化性、顆粒釋放和突發(fā)性呼吸[Thomas等，J.Biol.Chem.266,14839(1991)；及Holmes等，Science253,1278(1991)]。對于該受體家族成員的非肽小分子拮抗劑的開發(fā)已有先例?？蓞⒖碦.Freidinger在“藥物研究進展”，Vol.40,pp.33-98(Birkhauser Verlag,Basel 1993)中的綜述。因此，IL-8受體代表新的抗炎藥物開發(fā)的最有前景的目標。
兩種高親和力的人IL-8受體(77％同源性)已被鑒定IL-8Rα僅與IL-8高親和地結合和IL-8Rβ對IL-8以及對GROα、GROβ、GROγ和NAP-2具有高親和力[見Holmes等，同上；Murphy等，Science253,1280(1991)；Lee等，J.Biol.Chem.267,16283(1992)；LaRosa等，J.Biol.Chem.267,25402(1992)及Gayle等，J.Biol.Chem.268,7283(1993)]。
在該領域仍有使用能與IL-8α或β受體結合的化合物進行治療的需求。因此，使用為IL-8受體結合抑制劑的化合物有利于治療與IL-8產(chǎn)生增加(這種增加引起中性白細胞和T-細胞亞群的趨化性而進入炎癥部位)有關的病癥。
本發(fā)明概述本發(fā)明提供治療趨化因子介導的疾病的方法，其中趨化因子是一種與IL-8α或β受體結合的因子，該方法包括給予有效量的式(Ⅰ)化合物或其藥學上可接受的鹽。尤其所述趨化因子為IL-8。
本發(fā)明也涉及在需要此治療的哺乳動物中抑制IL-8與其受體結合的方法，它包括給予所述哺乳動物有效量的式(Ⅰ)化合物。
用于本發(fā)明的式(Ⅰ)化合物或其藥學上可接受的鹽由下面的結構式表示
其中Z為氰基、OR11、C(O)NR15R16、R18、C(O)R11、C(O)OR11或S(O)2R17；R為具有可電離的氫和不大于10的pKa的任何官能部分；R1獨立選自氫、鹵素、硝基、氰基、鹵代C1-10烷基、C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C1-10烷氧基、鹵代C1-10烷氧基、疊氮基、(CR8R8)qS(O)tR4、羥基、羥基C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、芳氧基、芳基C1-4烷氧基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基、雜芳基C1-4烷氧基、芳基C2-10鏈烯基、雜芳基C2-10鏈烯基、雜環(huán)C2-10鏈烯基、(CR8R8)qNR4R5、C2-10鏈烯基C(O)NR4R5、(CR8R8)qC(O)NR4R5、(CR8R8)qC(O)NR4R10、S(O)3H、S(O)3R8、(CR8R8)qC(O)R11、C2-10鏈烯基C(O)R11、C2-10鏈烯基C(O)OR11、(CR8R8)qC(O)OR12、(CR8R8)qOC(O)R11、(CR8R8)qNR4C(O)R11、(CR8R8)qNHS(O)2R19、(CR8R8)qS(O)2NR4R5或兩個R1部分一起可形成O-(CH2)sO-或5至6元飽和或不飽和環(huán)；q是0或1-10的整數(shù)；t是0或1或2的整數(shù)；s是1-3的整數(shù)；v是0或1-4的整數(shù)；R4和R5獨立為氫、任選取代的C1-4烷基、任選取代的芳基、任選取代的芳基C1-4烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳基C1-4烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基，或R4和R5與它們所連接的氮原子一起形成5-7元環(huán)，該環(huán)可任選含有選自氧、氮或硫的另外的雜原子；Y獨立選自氫、鹵素、硝基、氰基、鹵代C1-10烷基、C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C1-10烷氧基、鹵代C1-10烷氧基、疊氮基、(CR8R8)qS(O)tR4、羥基、羥基C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、芳氧基、芳基C1-4烷氧基、雜芳基、雜芳基烷基、雜芳基C1-4烷氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基、芳基C2-10鏈烯基、雜芳基C2-10鏈烯基、雜環(huán)C2-10鏈烯基、(CR8R8)qNR4R5、C2-10鏈烯基C(O)NR4R5、(CR8R8)qC(O)NR4R5、(CR8R8)qC(O)NR4R10、S(O)3H、S(O)3R8、(CR8R8)qC(O)R11、C2-10鏈烯基C(O)R11、C2-10鏈烯基C(O)OR11、C(O)R11、(CR8R8)qC(O)OR12、(CR8R8)qOC(O)R11、(CR8R8)qNR4C(O)R11、(CR8R8)qNHS(O)2Rd、(CR8R8)qS(O)2NR4R5或兩個Y部分一起可形成O-(CH2)sO-或5至6元飽和或不飽和環(huán)；n是1-3的整數(shù)；m是1-3的整數(shù)；R6和R7獨立為氫或C1-4烷基，或R6和R7與它們所連接的氮原子一起形成5-7元環(huán)，該環(huán)可任選含有選自氧、氮或硫的另外的雜原子；R8獨立選自氫或C1-4烷基；R10為C1-10烷基C(O)2R8；
R11為氫、C1-4烷基、任選取代的芳基、任選取代的芳基C1-4烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳基C1-4烷基、任選取代的雜環(huán)基或任選取代的雜環(huán)C1-4烷基；R12為氫、C1-10烷基、任選取代的芳基或任選取代的芳基烷基；R13和R14獨立為氫、任選取代的C1-4烷基或R13和R14中的一個為任選取代的芳基；R15和R16獨立為氫、任選取代的C1-4烷基、任選取代的芳基、任選取代的芳基C1-4烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳基C1-4烷基、任選取代的雜環(huán)基、任選取代的雜環(huán)C1-4烷基，或R15和R16與它們所連接的氮原子一起形成5-7元環(huán)，該環(huán)可任選含有選自氧、氮或硫的另外的雜原子；R17為C1-4烷基、NR15R16、OR11、任選取代的芳基、任選取代的芳基C1-4烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳基C1-4烷基、任選取代的雜環(huán)基或任選取代的雜環(huán)C1-4烷基；R18為任選取代的C1-4烷基、任選取代的芳基、任選取代的芳基C1-4烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳基C1-4烷基、任選取代的雜環(huán)基或任選取代的雜環(huán)C1-4烷基；R19為C1-4烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基、雜環(huán)基或雜環(huán)C1-4烷基，其中所有這些部分均可任選被取代；Rd為NR6R7、烷基、芳基C1-4烷基、芳基C2-4鏈烯基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基、雜芳基C2-4鏈烯基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基，其中所述烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)和雜環(huán)烷基環(huán)均可任選被取代；
含有E’的環(huán)任選自下列基團
；星號*表示該環(huán)的連接點；
含有E的環(huán)任選自下列基團
本發(fā)明詳述除人類外，式(Ⅰ)化合物也可用于獸醫(yī)中，以治療IL-8或其它能與IL-8α和β受體結合的趨化因子需要抑制的哺乳動物。在動物中治療(治療或預防)趨化因子介導的疾病狀態(tài)，包括如本文的治療方法部分所提到的那些疾病狀態(tài)。
在式(Ⅰ)化合物中，W適合為
通過星號(*)連接點表示的含E’的環(huán)可以任選存在。如果它不存在，則該環(huán)為可由所示的R1基團取代的苯環(huán)部分。E環(huán)可以被任何環(huán)(飽和或不飽和)上的R1部分取代，并且如本發(fā)明所示，只能在不飽和環(huán)被取代。
R適合為可提供具有pKa不大于10(優(yōu)選約3-9，更優(yōu)選約3-7)的可電離氫的任何官能部分。這些官能基團包括(但不限于)羥基、羧基、硫羥、-SR2、-OR2、-NH-C(O)Ra、-C(O)NR6’R7’，式-NHS(O)2Rb、式-S(O)2NHRc的取代的磺酰胺，NHC(X2)NHRb或四唑基，其中X2為氧或硫，優(yōu)選氧。優(yōu)選所述官能基團不為磺酸，所述官能基團可直接或作為取代基連在所述芳基、雜芳基或雜環(huán)部分的環(huán)上，如在-SR2或-OR2上。更優(yōu)選R為OH、SH或NHS(O)2Rb。
R2適合為取代的芳基、雜芳基或雜環(huán)部分，所述環(huán)具有前提是所述可電離的氫具有不大于10的pKa的官能部分。
R6’和R7’適合為氫、C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、芳基C2-4鏈烯基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基、雜芳基C2-4鏈烯基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基、雜環(huán)C2-4鏈烯基部分，所有這些基團可以任選被下列基團獨立取代1-3次鹵素、硝基、鹵取代的C1-4烷基如CF3、C1-4烷基如甲基、C1-4烷氧基如甲氧基、NR9C(O)Ra、C(O)NR6R7、S(O)3H或C(O)OC1-4烷基，前提是R6’和R7’中只能一個為氫，不能兩者都為氫。
R6和R7適合獨立為氫或C1-4烷基，或R6和R7與它們所連接的氮原子一起形成5-7元環(huán)，該環(huán)可任選含有選自氧、氮或硫的另外的雜原子。該雜環(huán)可如本文定義任選被取代。
Ra適合為芳基、芳基C1-4烷基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基、雜環(huán)基或雜環(huán)C1-4烷基部分，所有這些基團和部分可如下文所定義任選被取代。
Rb適合為NR6R7、烷基、芳基、芳基C1-4烷基、芳基C2-4鏈烯基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基，雜芳基C2-4鏈烯基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基、雜環(huán)C2-4鏈烯基部分或樟腦，所有這些基團和部分可任選獨立由下述取代基取代1-3次鹵素、硝基、鹵代C1-4烷基如CF3、C1-4烷基如甲基、C1-4烷氧基如甲氧基、NR9C(O)Ra、C(O)NR6R7、S(O)3H或C(O)OC1-4烷基。Rb優(yōu)選為任選取代的苯基、芐基或苯乙烯基。當Rb為雜芳基時，優(yōu)選為任選取代的噻唑、任選取代的噻吩基或任選取代的喹啉環(huán)。
R9適合為氫或C1-4烷基，優(yōu)選R9為氫。優(yōu)選，當取代基為NR9C(O)Ra時，則Ra優(yōu)選為烷基如甲基。
Rc適合為氫、烷基、芳基、芳基C1-4烷基、芳基C1-4鏈烯基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基，雜芳基C1-4鏈烯基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基或雜環(huán)C1-4鏈烯基部分，所有這些基團和部分可獨立由下述取代基任選取代1-3次鹵素、硝基、鹵代C1-4烷基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、NR9C(O)Ra、C(O)NR6R7、S(O)3H或C(O)OC1-4烷基，其中R9為氫或C1-4烷基。優(yōu)選Rc為任選取代的苯基。
當R為OR2或SR2部分時，本領域技術人員應認識到所述芳環(huán)必須含有所需的可電離的氫。該芳環(huán)也可以獨立由另外的1-3個基團取代，所述基團也可含有其它的可電離的基團，這些基團包括(但不限于)鹵素、硝基、鹵代C1-4烷基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、羥基、SH、-C(O)NR6R7、-NH-C(O)Ra、-NHS(O)2Rb、S(O)2NR6R7、C(O)OR8或四唑環(huán)。
在式(Ⅰ)化合物中，R1適合獨立選自氫、鹵素、硝基、氰基、鹵代C1-10烷基如CF3、C1-10烷基(如甲基、乙基、異丙基或正-丙基)、C2-10鏈烯基、C1-10烷氧基如甲氧基或乙氧基、鹵代C1-10烷氧基如三氟甲氧基、疊氮基、(CR8R8)qS(O)tR4(其中t是0、1或2)、羥基、羥基C1-4烷基如甲醇或乙醇、芳基如苯基或萘基、芳基C1-4烷基如芐基、芳氧基如苯氧基、芳基C1-4烷氧基如芐氧基、雜芳基、雜芳基烷基、雜芳基C1-4烷氧基、芳基C2-10鏈烯基、雜芳基C2-10鏈烯基、雜環(huán)C2-10鏈烯基、(CR8R8)qNR4R5、C2-10鏈烯基C(O)NR4R5、(CR8R8)qC(O)NR4R5、(CR8R8)qC(O)NR4R10、S(O)3H、S(O)3R8、(CR8R8)qC(O)R11、C2-10鏈烯基C(O)R11、C2-10鏈烯基C(O)OR11、C(O)R11、(CR8R8)qC(O)OR12、(CR8R8)qOC(O)R11、(CR8R8)qNR4C(O)R11、(CR8R8)qNHS(O)2R19、(CR8R8)qS(O)2NR4R5或兩個R1部分一起可形成O-(CH2)sO-或5至6元飽和或不飽和環(huán)；及S為1-3的整數(shù)。所述芳基、雜芳基和含有雜環(huán)的部分均可如下文所定義被任選取代。
q適合為0或1-10的整數(shù)。
當R1形成二氧橋時，s優(yōu)選為1。當R1形成另外的飽和或不飽和5-6元環(huán)時，優(yōu)選形成不飽和6元的亞萘基環(huán)系。這些環(huán)可獨立由如上定義的其它R1部分取代1-3次。
適宜地，R4和R5獨立為氫、任選取代的C1-4烷基、任選取代的芳基、任選取代的芳基C1-4烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳基C1-4烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)的C1-4烷基，或R4和R5與它們所連接的氮原子一起形成5-7元環(huán)，該環(huán)可任選含有選自O/N/S的另外的雜原子。
R8適合獨立選自氫或C1-4烷基。
R10適合為C1-10烷基C(O)2R8如CH2C(O)2H或CH2C(O)2CH3。
R11適合為氫、C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基、雜環(huán)基或雜環(huán)C1-4烷基。
R12適合為氫、C1-10烷基、任選取代的芳基或任選取代的芳基烷基。
R19為C1-4烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基、雜環(huán)基或雜環(huán)C1-4烷基，其中所有這些部分均可任選被取代。
優(yōu)選R1為鹵素、氰基、硝基、CF3、C(O)NR4R5、鏈烯基C(O)NR4R5、C(O)R4R10、鏈烯基C(O)OR12、雜芳基、雜芳基烷基、雜芳基鏈烯基或S(O)NR4R5，優(yōu)選R4和R5兩者為氫或其中一個為苯基。對于R1來說，優(yōu)選的環(huán)取代在所述苯環(huán)的4-位上。
當R為OH、SH或NSO2Rb時，則R1優(yōu)選在3-位、4-位被取代或在3,4-位被雙取代。所述取代基適合為吸電子部分。優(yōu)選當R為OH、SH或NSO2Rb時，則R1為硝基、鹵素、氰基、三氟甲基、C(O)NR4R5。
當R為羧酸時，則R1優(yōu)選為氫或R1優(yōu)選在4-位被取代，更優(yōu)選被三氟甲基或氯取代。
在式(Ⅰ)化合物中，R13和R14適合獨立為氫、如本文所定義的任選取代的直鏈或支鏈C1-4烷基，或者R13和R14中的一個為任選取代的芳基；v是0或1-4的整數(shù)。
當R13或R14為任選取代的烷基時，則所述烷基部分可以獨立被選自下列的基團取代1-3次鹵素、鹵代C1-4烷基如三氟甲基、羥基、羥基C1-4烷基、C1-4烷氧基如甲氧基或乙氧基、鹵代C1-10烷氧基、S(O)tR4、芳基、NR4R5、NHC(O)R4、C(O)NR4R5或C(O)OR8。
在式(Ⅰ)化合物中，W適合為
通過星號(*)連接點表示的含E的環(huán)可以任選存在。如果它不存在，則該環(huán)為可由所示的Y基團取代的苯環(huán)部分。E環(huán)可以被任何環(huán)(飽和或不飽和)上的Y部分取代，并且如本發(fā)明所示，只能在不飽和環(huán)被取代。
適宜地，Y獨立選自氫、鹵素、硝基、氰基、鹵代C1-10烷基、C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C1-10烷氧基、鹵代C1-10烷氧基、疊氮基、(CR8R8)qS(O)yR4、羥基、羥基C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、芳氧基、芳基C1-4烷氧基、雜芳基、雜芳基烷基、雜芳基C1-4烷氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基、芳基C2-10鏈烯基、雜芳基C2-10鏈烯基、雜環(huán)C2-10鏈烯基、(CR8R8)qNR4R5、C2-10鏈烯基C(O)NR4R5、(CR8R8)qC(O)NR4R5、(CR8R8)qC(O)NR4R10、S(O)3H、S(O)3R8、(CR8R8)qC(O)R11、C2-10鏈烯基C(O)R11、C2-10鏈烯基C(O)OR11、(CR8R8)qC(O)OR12、(CR8R8)qOC(O)R11、(CR8R8)qNR4C(O)R11、(CR8R8)qNHS(O)2Rd、(CR8R8)qS(O)2NR4R5或兩個Y部分一起可形成O-(CH2)sO-或5至6元飽和或不飽和環(huán)，其中所述芳基、雜芳基和含有雜環(huán)的部分均可如本文所定義被任選取代。
當Y形成二氧橋時，s優(yōu)選為1。當Y形成另外的飽和或飽和環(huán)時，優(yōu)選形成6元的亞萘基環(huán)系統(tǒng)。該亞萘基環(huán)可由如上定義的其它Y部分取代1-3次。上述芳基、芳烷基、芳基鏈烯基、雜芳基、雜芳基烷基、雜芳基鏈烯基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基和雜環(huán)基鏈烯基部分均可如本文定義任選被取代。
Rd適合為NR6R7、烷基、芳基C1-4烷基、芳基C2-4鏈烯基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基，雜芳基C2-4鏈烯基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基或雜環(huán)C2-4鏈烯基部分，其中上述芳基、芳烷基、芳基鏈烯基、雜芳基、雜芳基烷基、雜芳基鏈烯基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基和雜環(huán)烯基部分均可如本文定義任選被取代。
Y優(yōu)選為鹵素、C1-4烷氧基，任選取代的芳基、任選取代的芳氧基或芳基烷氧基、亞甲二氧基、NR4R5、硫代C1-4烷基、硫代芳基、鹵代烷氧基、任選取代的C1-4烷基或羥基烷基。更優(yōu)選Y為一取代的鹵素、二取代的鹵素、一取代的烷氧基、二取代的烷氧基、亞甲二氧基、芳基或烷基，更優(yōu)選這些基團是在2’-位或2’-,3’-位上一取代或二取代。
盡管Y可在環(huán)上的五個位置任意被取代，優(yōu)選Y在2’-位或3-’位被一取代，優(yōu)選4’-位未被取代，更優(yōu)選R為OH、SH或NSO2Rb。如果該環(huán)被二取代，優(yōu)選當R為OH、SH或NSO2Rb時，則取代基優(yōu)選在單環(huán)的2’或3’位。當R1和Y都可以為氫時，優(yōu)選至少在一個環(huán)上被取代，優(yōu)選該兩個環(huán)均被取代。
優(yōu)選當Z是氰基，W是苯基，R是OH,v是O和W1是苯基時，則(Y)n(其中n是1或2)不能由下列基團在所述苯環(huán)的3’位上單取代或在3’-5’位上雙取代鹵素、三氟甲基、OCF3、C(O)2H、C(O)2烷基、C(O)2芳基、C(O)氨基、CN、烷基、烷氧基、羥基、硝基、羥甲基、氨磺?；?、氨基、芳氧基、烷基羰基、芳基羰基、烷基羰基氧基或芳基羰基氧基。
而且，優(yōu)選當Z是氰基，v是O,W是苯基，R是OH,W1是苯基時，則(Y)n(其中n是1)不是2-取代的芳基烷基或芳基鏈烯基部分(任選由烷基取代)。
在式(Ⅰ)化合物中，Z適合為氰基、OR11、C(O)NR15R16、R18、C(O)R11、C(O)OR11或S(O)2R17。
R15和R16適合獨立為氫、任選取代的C1-4烷基、任選取代的芳基、任選取代的芳基C1-4烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳基C1-4烷基、任選取代的雜環(huán)基、任選取代的雜環(huán)C1-4烷基或R15和R16與它們所連接的氮原子一起形成5-7元環(huán)，該環(huán)可任選含有選自氧、氮或硫的另外的雜原子；適合地，R17為C1-4烷基、NR15R16、OR11、任選取代的芳基、任選取代的芳基C1-4烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳基C1-4烷基、任選取代的雜環(huán)基或任選取代的雜環(huán)C1-4烷基；R18為任選取代的C1-4烷基、任選取代的芳基、任選取代的芳基C1-4烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳基C1-4烷基、任選取代的雜環(huán)基或任選取代的雜環(huán)C1-4烷基。
如本文所使用的“任選被取代”(除非特別指明)應指這類基團，例如鹵素(如氟、氯、溴或碘)、羥基、羥基取代的C1-10烷基、C1-10烷氧基如甲氧基或乙氧基、S(O)m’C1-10烷基(其中m’是0、1或2)(如甲硫基、甲基亞磺?；蚣谆酋；?、氨基、一和二取代的氨基如NR4R5基團、NHC(O)R4、C(O)NR4R5、C(O)OH、S(O)2NR4R5、NHS(O)2R21、C1-10烷基(如甲基、乙基、丙基、異丙基或叔-丁基)、鹵代C1-10烷基如CF3、任選取代的芳基如苯基或任選取代的芳基烷基如芐基或苯乙基、任選取代的雜環(huán)基、任選取代的雜環(huán)烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳基烷基，其中這些芳基、雜芳基或雜環(huán)部分可由下列基團取代1-2次鹵素、羥基、羥基取代的烷基、C1-10烷氧基、S(O)m’C1-10烷基、氨基、一和二取代的氨基如NR4R5基團、C1-10烷基或鹵代C1-10烷基如CF3。
R21適合為C1-4烷基，芳基、芳基C1-4烷基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基，雜環(huán)基或雜環(huán)C1-4烷基。
適合的藥學上可接受的鹽為本領域技術人員所熟知，其包括無機酸和有機酸，例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、乙酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、乳酸、草酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、苯甲酸、水楊酸、苯乙酸和扁桃酸的堿性鹽。此外，式(Ⅰ)化合物的藥學上可接受的鹽也可以用藥學上可接受的陽離子(例如，如果取代基含有羧基部分)來形成。適合的藥學上可接受的陽離子為本領域技術人員所熟知，其包括堿金屬、堿土金屬、銨和季銨陽離子。
本文使用的下列術語指“鹵素”指所有的鹵素，即氯、氟、溴和碘。
“C1-10烷基”或“烷基”指1-10個碳原子的直鏈和支鏈基(除非鏈長另有限制)，包括(但不限于)甲基、乙基、正-丙基、異-丙基、正-丁基、仲-丁基、異-丁基、叔-丁基、正-戊基等。
本文所用的術語“環(huán)烷基”指環(huán)基，優(yōu)選3-8個碳原子，包括(但不限于)環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基等。
本文所用的術語“鏈烯基”在所有情況下指2-10個碳原子的直鏈或支鏈基(除非鏈長另有限制)，包括(但不限于)乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基等。
“芳基”指苯基和萘基。
“雜芳基”(指其本身或任何組合，如“雜芳氧基”或“雜芳基烷基”)指5-10元芳環(huán)體系，其中一個或多個環(huán)含有一個或多個選自氮、氧或硫的雜原子，例如(但不限于)吡咯、吡唑、呋喃、噻吩、喹啉、異喹啉、喹唑啉基、吡啶、嘧啶、噁唑、噻唑、噻二唑、三唑、咪唑或苯并咪唑。
“雜環(huán)基”(指其本身或任何組合，如“雜環(huán)烷基”)指飽和或部分不飽和的4-10元環(huán)系，其中一個或多個環(huán)含有一個或多個選自氮、氧或硫的雜原子，例如(但不限于)吡咯烷、哌啶、哌嗪、嗎啉、四氫吡喃或咪唑烷。
本文所用的術語“芳烷基”或“雜芳烷基”或“雜環(huán)烷基”指如上定義的C1-10烷基連接在也如本文定義的芳基、雜芳基或雜環(huán)部分上，除非另有所指。
“亞磺?；敝赶鄳蚧锏难趸颯(O)，術語“硫代”指硫化物，而術語“磺酰基”指完全氧化的S(O)2部分。
本文所用的術語“其中兩個R1部分(或兩個Y部分)可以一起形成5或6元飽和或不飽和環(huán)”指形成亞萘環(huán)系或連接一個6元部分不飽和環(huán)例如C6環(huán)烯基如環(huán)己烯，或C5環(huán)烯基部分如環(huán)戊烯的苯基部分。
式(Ⅰ)的示例性化合物包括N-(2-羥基-4-硝基苯基)-N’-(2-氯代苯基)-N”-氰基胍N-(2-羥基-4-硝基苯基)N’-(2-氯代苯基)-N”-氰基胍N-(4-氰基-2-羥基苯基)-N’-(苯基)氰基胍N-(2-溴代苯基)N’-(4-氰基-2-羥基苯基)N”-氰基胍N-(4-氰基-2-羥基苯基)-N’-(2,3-二氯代苯基)-N”-氰基胍N-(2-溴代苯基)-N’-(4-氰基-2-羥基-3-丙基苯基)-N”-氰基胍N-(2-溴代苯基)-N’-(4-氰基-2-羥基-3-異丁基苯基)-N”-氰基胍N-(2-溴代苯基)-N’-(3-溴代-4-氰基-2-羥基苯基)-N”-氰基胍N-(4-氰基-2-羥基-3-丙基苯基)-N’-(2,3-二氯代苯基)-N”-氰基胍N-(3-溴代-4-氰基-2-羥基苯基)-N’-(2,3-亞甲基二氧基苯基)-N”-氰基胍
N-(2-氯代苯基)-N’-(4-氰基-2-羥基-3-丙基苯基)-N”-氰基胍N-(2-溴代苯基)-N’-(4-氰基-2-羥基-3-甲氧基羰基苯基)-N”-氰基胍。
應認識到本發(fā)明化合物可以作為立體異構體、區(qū)域異構體(regioisomers)或非對映異構體存在。這些化合物可以含有一個或多個不對稱碳原子并可以以外消旋和旋光形式存在。所有這些化合物都包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。
式(Ⅰ)化合物可運用合成方法獲得，其中一些方法在下文的流程中有說明。這些流程所提供的合成方法可用于制備具有不同R、R1和芳基的式(Ⅰ)化合物，利用適當被保護的任選的取代基可使所述基團進行的反應與本文概括的反應相符。在那些情況下，接著去保護，以獲得性質(zhì)已普遍公開的化合物。一旦建立脲核，采用本領域已知的官能基團互變的標準技術可制備這些結構式的其它化合物。盡管該流程只用式(Ⅰ)化合物來表示，這僅僅是為了說明的目的。
制備方法從硫脲鎓(thiouronium)鹽(2，流程1)可以合成標題化合物。R’代表如式(Ⅰ)化合物所定義的-(R13R14)v-W1鍵。為了說明本發(fā)明，所述流程中的W基團由取代的苯基表示。
流程1
a)Na,EtOH，氨基氰b)EDC.HCl通過使氰氨基鈉與市售獲得的異硫氰酸酯1(如果該異硫氰酸酯不能由市售獲得，則可在堿如碳酸氫鈉存在下，使所需的胺與硫光氣反應而合成)反應可以合成硫脲鎓鹽(2，流程1)。然后在偶合劑如EDC.HCl存在下，使硫脲鎓鹽(2)與適當?shù)娜〈桨房s合或酸化形成氰基硫脲，然后使之反應。
另外，通過使市售(Aldrich Chem.Co)獲得的氰基碳亞胺酸二苯酯(diphenyl cyanocarboimidate)(5，流程2)與來自中間體鄰-苯基異脲6的胺反應，然后在三甲基鋁存在下，通過Arwal(Arwal,K.S.,Tetrahedron Lett,35,8085(1994))的方法，使其再與適當取代的苯胺反應可以合成4。通過與適當取代的烷基胺一起加熱(但無催化劑存在)可以制備其中R’為烷基的化合物。
流程2
a)乙腈，加熱b)三甲基鋁另外，使用保護的鄰-取代的苯胺(8，流程3，見美國臨時申請USSN60/020655,1996年6月27日遞交，代理人檔案號P50467P；WO96/25157,1996年8月22日遞交，Widdowson等(代理人檔案號P50324-1)；及USSN08/701299,1996年8月21日遞交(代理人檔案號P50324-2)中所述合成方法，這些公開的內(nèi)容全部結合在此作為參考)可以合成標題化合物。通過在適當?shù)膲A(如碳酸銫、碳酸鉀或咪唑)存在下，使鄰-取代的苯胺在非質(zhì)子傳遞溶劑中與適當?shù)耐榛u或甲硅烷基鹵反應首先保護鄰-取代苯胺(7，流程3)(即叔-丁基二甲基硅烷基、烯丙基、芐基、mom或其它適當?shù)谋Ｗo基團)。也可以在本領域眾所周知的條件下，通過使鄰-取代的硝基苯與保護基團反應(見Greene,T Protecting Groups in Organic Synthesis,Wiley&Sons,New York,1981)，然后使用在EtOH中的SnCl2或H2/Pd或在非質(zhì)子傳遞溶劑中的氫化鋁鋰使該保護的鄰-取代的硝基化合物還原為相應的苯胺，由鄰-取代的硝基苯(9)合成保護的鄰-取代的苯胺。
流程3
a)烷基或甲硅烷基鹵，堿b)還原劑然后使用硫光氣可將該保護的鄰-取代的苯胺(8)轉化為異硫氰酸酯，接著再與陰離子ZNH-(由ZNH2與堿如氫化鈉反應而形成)反應。Z如式(Ⅰ)化合物中所定義。然后使用烷基化劑如甲基碘使生成的硫代陰離子烷基化形成如10(流程4)的硫代亞胺酸酯(thioimidate)。
流程4
a)ClCSCl,NaHCO3b)ZNH-c)MeI通過與胺R’NH2反應使硫代亞胺酸酯(10，流程5)轉化成標題化合物4。通過加入對硫具有高親和力的金屬鹽如氧化汞或醋酸銀或通過用二甲基環(huán)氧乙烷氧化該硫而形成更好的離去基團可加速該反應。最后通過標準方法除去酚保護形成標題化合物4。
流程5
a)R′NH2b)去保護此外，在存在大大過量的親核試劑并通過仔細監(jiān)測反應的完成使反應時間盡可能縮短，然后去保護的條件下，使保護的碳二亞胺(11,流程6)與陰離子NH-Z(使NH2Z與堿如氫化鈉反應而形成)或中性物質(zhì)NH2Z(Z=CN)和叔胺堿如Hunig氏堿(二異丙基乙胺)、三乙胺、三異丙基乙胺、N,N-二甲基芐胺或N,N-二甲基異丙胺反應可以合成標題化合物。用于此處的其它適合的堿包括仲胺如吡啶及氨基取代的吡啶衍生物。當Z是氰基時，用于此處的適合的溶劑包括各種非質(zhì)子傳遞溶劑如乙腈、鹵代溶劑如氯仿和二氯甲烷、乙二醇-二甲基醚(單GLYME)、二噁烷、DMF、DMSO或它們的混合物，優(yōu)選乙腈。技術人員應該認識到，此處使用的溶劑的限制特征為所述氰基衍生物的溶解度。對于其中Z不是氰基的化合物來說，盡管優(yōu)選非質(zhì)子傳遞溶劑，技術人員應認識到，可以使用其它適合的溶劑如質(zhì)子溶劑像醇類。
優(yōu)選反應(當Z是氰基時)溫度在約-10℃-約100℃，較優(yōu)選約10℃-約50℃，更優(yōu)選在大致室溫下，即20℃-30℃。
采用已知的技術可以使保護的R”的部分適當?shù)厝ケＷo。當保護基團為烯丙基衍生物時，優(yōu)選所述去保護為經(jīng)鈀(O)催化的去烯丙基化。
流程6
a)ZNH-(ZNH2+NaH)對于Z=OR,COOEt,CHO,RNHSO2,ArNHSO2；b)ZNH2.HCl對于Z=OH c)ZNH2和NR3對于Z=CN d)去保護通過用光氣和叔胺堿處理由硫脲(12a，流程7)或通過與三苯膦、四氯化碳和三乙胺反應由硫脲(12a)或脲(12b)制備碳二亞胺11。
通過使硫脲(12b)與過量(如不少于2當量)的甲磺酰氯和叔胺堿如Hunig氏堿(二異丙基乙胺)、三乙胺、三異丙基乙胺、N,N-二甲基芐基胺或N,N-二甲基異丙胺(優(yōu)選三乙胺)反應也可以制備該碳二亞胺。所述反應可以使用任何鹵代溶劑如二氯甲烷、氯仿或四氯乙烯等，適宜的反應溫度在約-30℃-約80℃，優(yōu)選約-10℃-約50℃，更優(yōu)選約0℃至約室溫下。見Fell和Coppola(Fell,J.B.,Coppola,J.B.,Syn Communications25,43,(1995))。
流程7
a)光氣，Et3N,b)Ph3P,CCl4,Et3N；c)MsCl,Et3N按照美國臨時申請USSN60/020655,1996年6月27日遞交，代理人檔案號P50467P和代理人檔案號P50324-2(其公開的內(nèi)容結合在此作為參考)所述合成所述硫脲或脲。通過使所述保護的鄰取代的苯胺和兩當量適合的堿如氫化鈉、氫化鉀、氫化鈣反應，并使該陰離子與市售獲得的異硫氰酸酯(W1-NCS，其中W1如式(Ⅰ)化合物所定義)反應也可以制備該硫脲(12a，流程8)。該反應可在任何適合的非質(zhì)子傳遞溶劑或鹵代溶劑(優(yōu)選二甲基甲酰胺)中發(fā)生。該反應的適宜反應溫度為約-10℃-50℃。
如果所需的異硫氰酸酯不能由市售獲得，可以通過由相應的苯胺與硫光氣和適當?shù)膲A如碳酸氫鈉反應來制備。
流程8
a)堿b)R’NCS本發(fā)明的另一個方面為新的式(Ⅱ)化合物
W1-N=C=N-W(Ⅱ)其中W和W1如式(Ⅰ)所定義，且W含有保護的或未保護的如式(Ⅰ)化合物所定義的R基團(R”)。
本發(fā)明的另一個方面為新的式(Ⅲ)化合物W1-NH-C(S)-NH-W(Ⅲ)其中W和W1如式(Ⅰ)所定義，且W含有保護的或未保護的如式(Ⅰ)化合物所定義的R基團(R”)。
式(Ⅰ)化合物的保護(R”)變量也被認為在本發(fā)明范圍內(nèi)。
應該認識到，所述胍官能度可以具有許多不同的互變異構體，例如W1-N-C(=NZ)-NW、ZN=C(NW1)-NW、W1-N-C(=NW)-NZ，所有這些互變異構體均在本發(fā)明范圍內(nèi)。
在適當?shù)娜軇┐嬖谙拢靡阎椒ㄈ缤ㄟ^適當量的酸或堿處理式(Ⅰ)化合物可以獲得其藥學上可接受的鹽。
在所述實施例中，所有的溫度均采用攝氏度(℃)。除非另有說明，質(zhì)譜使用快速原子轟擊在VG Zab質(zhì)譜僅上進行。1H-NMR(此后稱為“NMR”)譜分別用Bruker AM250或Am400分光儀于250MHz或400MHz處記錄。峰裂數(shù)表示為s=單峰、d=雙峰、t=三峰、q=四峰、m=多峰以及br表示寬的信號。Sat表示飽和溶液，equiv.表示試劑的摩爾量相對于主要反應物的比例。
快速層析在Merck Silica gel60(230-400目)上進行。
合成實施例通過參考下列實施例將描述本發(fā)明，這些實施例僅僅為了說明，并不構成對本發(fā)明范圍的限制。所有的溫度均采用攝氏度，在此所用的全部溶劑均具有可獲得的最高純度且所有的反應均在氬氣下在無水條件下進行，除非另有說明。
實施例1N-(2-羥基-4-硝基苯基)-N’-(2-氯代苯基)-N”-氰基胍的制備a)N-(2-氯代苯基)-N”-氰基硫脲的鈉鹽將鈉(1.64g,71.3mmol)溶于乙醇中直至所有的氣體釋放停止。然后加入氨基氰(1.685g,40mmol)。攪拌反應混合物15分鐘，加入2-氯代苯基異硫氰酸酯(7.21g,42.66)并使該混合物保持在回流下6小時。冷卻該反應物，用二氯甲烷稀釋。過濾白色的固體沉淀并干燥得到N-(2-氯代苯基)-N”-氰基硫脲的鈉鹽(8.26g,87.5％)。MS(ES+)m/e 210,212(M+H)+b)N-(2-羥基-3-硝基苯基)-N’-(2-氯代苯基)-N”-氰基胍在氬氣下，向N-(2-氯代苯基)-N”-氰基硫脲的鈉鹽(234mg,1mmol)和2-羥基-3-硝基苯胺(156mg,1mmol)在2ml干燥DMF中的攪拌溶液中加入EDC鹽酸鹽(384mg,2mmol)，于室溫下攪拌該反應物4天。在乙酸乙酯和1N鹽酸間分配反應混合物，用水和鹽水洗滌有機提取物。干燥(硫酸鈉)后，減壓下蒸發(fā)溶劑，分離到紅色油狀物。層析(硅膠，3％丙酮/CHCl3)提供亮黃色固體(30mg,9％)，經(jīng)從叔-丁基甲基醚中重結晶得到標題化合物。1H NMR(400MHz CDCl3):δ10.93(s,1H),8.53(s,1H),7.92(d,J=7.8Hz,1H),7.61(d,J=7.8Hz,2H),7.38-7.50(m,2H),7.22(s,1H),7.08(t,1H)；IR(KBr)2181cm-1；MS(ES-)m/e 330(M-H)-；mp.163-164℃。
實施例2N-(2-羥基-4-氰基苯基)-N’-(2-溴代苯基)-N”-氰基胍的制備a)1-烯丙氧基-5-氰基-2-硝基苯于室溫和氬氣下，攪拌5-氰基-2-硝基-苯酚(3.0g,18.9mmol)、烯丙基溴(1.82ml,21.0mmol)和碳酸銫(7.39g,22.7mmol)在DMF(20ml)中的混合物18小時。使反應混合物在叔-丁基甲醚和水間分配。分離各層并進一步提取(x3)水層。用水，然后用鹽水洗滌合并的有機提取物兩次，經(jīng)硫酸鎂干燥并過濾。減壓除去溶劑提供標題化合物(3.89g,100％)。1H NMR(400MHz CDCl3):δ7.87(d,J=8.5Hz,1H),7.35(dd,J=8.4Hz J=1.2Hz 1H),7.35(d,J=1.5Hz,1H),6.02(m,1H),5.52(d,1H),5.43(d,1H),4.73(dd,J=3.6Hz J=1.2Hz 2H)。
b)2-烯丙氧基-4-氰基苯胺于室溫下攪拌1-烯丙氧基-5-氰基-2-硝基苯(3.6g,17.46mmol)和氯化錫(Ⅱ)(19.7g,87.3mmol)在乙醇(100ml)中的混合液過夜。減壓除去溶劑。在5％碳酸氫鈉和乙酸乙酯間分配反應混合物。過濾該混合物以除去錫鹽，用乙酸乙酯(x4)進一步提取水層。用水和鹽水洗滌合并的有機相，經(jīng)硫酸鎂干燥。減壓除去溶劑得到棕色固體(2.82g)，經(jīng)從叔-丁基甲基醚/己烷中重結晶得到標題化合物，為淡棕色固體(2.63g,93％)。MS(ES+)m/e 175(M+H)+；MS(ES-)m/e 173(M-H)-；c)N-(2-烯丙氧基-4-氰基苯基)-N’-(2-溴代苯基)-硫脲于0℃將在DMF(1.5ml)中的2-烯丙氧基-4-氰基苯胺(522mg,3mmol)加入預先用己烷洗過的氫化鈉(60％油分散體，240mg,6.0mmol)的DMF(10ml)溶液中。于0℃和氬氣下攪拌15分鐘后，于0℃滴加2-溴代苯基異硫氰酸酯，于室溫下攪拌該反應物1小時。加入0.5M磷酸二氫鈉使該反應驟冷。用乙酸乙酯提取該混合物，用水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。從甲醇中重結晶粗制固體得到標題化合物，為白色固體(911mg,78％)MS(ES+)m/e 388,390(M+H)+。
d)N-(2-烯丙氧基-4-氰基苯基)-N’-(2-溴代苯基)-碳二亞胺于0℃和氬氣下，將甲磺酰氯(360μl,4.64mmol)加入N-(2-烯丙氧基-4-氰基苯基)-N’-(2-溴代苯基)-硫脲(900mg,2.32mmol)和三乙胺(1ml,6.95mmol)的二氯甲烷的攪拌溶液中。于0℃攪拌該反應物15分鐘，tlc表明沒有原料存在。硅膠層析純化該反應混合物，用二氯甲烷洗脫提供標題化合物，為黃色固體(1.2g,＞100％)。該物質(zhì)可不經(jīng)進一步純化而用于下一步反應。
e)N-(2-烯丙氧基-4-氰基苯基)-N’-(2-溴代苯基)-N”-氰基胍將N-(2-烯丙氧基-4-氰基苯基)-N’-(2-溴代苯基)-碳二亞胺(600mg,1.69mmol)的乙腈(30ml)溶液滴加到氨基氰(560mg,13.33mmol)和Huinig氏堿(2.6ml)在乙腈中的攪拌混合物中。于室溫下攪拌該反應物15分鐘，然后減壓除去溶劑，用0.5M磷酸二氫鈉水解殘留物。用0.5M磷酸二氫鈉和鹽水洗滌含水混合物的乙酸乙酯提取物。干燥(硫酸鎂)后，過濾并減壓蒸發(fā)得到粗制褐色固體(500mg)。經(jīng)硅膠(50/50乙酸乙酯/己烷)層析得到標題化合物(455mg,95％)。MS(ES-)m/e 394,396(M-H)-。
f)N-(4-氰基-2-羥基苯基)N’-(2-溴代苯基)-N”-氰基胍于室溫下，向N-(2-烯丙氧基-4-氰基苯基)-N’-(2-溴代苯基)-N”-氰基胍(100mg,0.25mmol)和硼氫化鈉(20mg,0.52mmol)的THF(3ml)的混合物中加入四(三苯膦)合鈀
(21mg,7％(摩爾))。于室溫下攪拌該反應物直至tlc表明沒有原料存在為止。在乙酸乙酯和0.5M磷酸二酸氫鈉間分配該混合物。經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發(fā)得到粗制褐色固體(100mg)。經(jīng)硅膠柱層析，用5％甲醇/氯仿洗脫得到標題化合物，為淡黃色固體(64mg)，該物質(zhì)從氯仿中重結晶(42mg,47％)。1H NMR(400MHz DMSO):δ10.93(s,1H),9.57(s,1H),8.74(s,1H),7.84(d,J=8.3Hz,1H),7.71(d,J=7.8Hz,2H),7.50-7.42(m,2H),7.30-7.26(m,2H),7.17(s,1H),7.08(t,1H)；IR(KBr)2224,2193cm-1；MS(ES-)m/e 354,356(M-H)-；MS(ES+)m/e 356,358(M+H)+；mp.175-176℃。
實施例3N-(4-氰基-2-羥基苯基)-N’-(苯基)-N”-氰基胍的制備a)5-氰基-1-甲氧基甲氧基-2-硝基苯于室溫下，將在THF(10ml)中的5-氰基-2-硝基苯酚(978mg,5.96mmol)滴加到預先用己烷洗過的氫化鈉(60％油分散體，260mg,6.5mmol)的THF(5ml)溶液中。該溶液轉變?yōu)轷r艷的橙色并形成大量沉淀。于室溫下攪拌15分鐘后，向該攪拌的淤漿中滴加溴代甲基甲基醚，于室溫下攪拌該反應物18小時。然后使黃色混合物在叔-丁基-0-甲基醚間水中分配，提取(x3)含水部分并用5％碳酸氫鈉溶液(X4)和鹽水洗滌，經(jīng)干燥(硫酸鈉)，過濾并減壓蒸發(fā)得到標題化合物，為淡黃色固體(1.05g,85％)。1H NMR(400MHz CDCl3):δ7.84(d,J=8.4Hz,1H),7.66(d,J=1.4Hz,1H),7.35(dd,J=8.4Hz J=1.5Hz,1H),5.34(s,2H),3.55(s,3H)。
b)4-氰基-2-甲氧基甲氧基苯胺于室溫和1大氣壓氫氣下，將5-氰基-1-甲氧基甲氧基-2-硝基苯(0.5g,2.4mmol)和10％鈀炭(.05g)的乙酸乙酯(50nl)中的混合物攪拌72小時。使該混合物通過硅藻土過濾除去鈀，殘留物經(jīng)硅膠(用25％乙酸乙酯/己烷洗脫)層析獲得標題化合物(250mg,58％)。MS(ES+)m/e179(M+H)+c)N-(4-氰基-2-甲氧基甲氧基苯基)-N’-(2-苯基)-N”-氰基胍根據(jù)實施例1(c)-1(e)的方法，但用苯基異硫氰酸酯代替2-溴代苯基異硫氰酸酯及用2-甲氧基甲氧基-4-氰基苯胺代替2-烯丙氧基-4-氰基苯胺制備標題化合物(24％總收率)。IR(KBr)2226,2198 cm- 1；MS(ES-)m/z 320[M-H]-。
d)N-(4-氰基-2-羥基苯基)-N’-(苯基)-N”-氰基胍將實施例2(b)化合物(47mg,0.146mmol)溶于乙酸乙酯(20ml)中，用6N鹽酸(10ml)處理并于室溫下攪拌3小時。然后加入6N鹽酸(5ml)并繼續(xù)攪拌2小時以上。用乙酸乙酯和鹽水稀釋該混合物，再用乙酸乙酯(x5)提取含水部分。用硫酸鈉干燥合并的有機部分，真空蒸發(fā)得到標題化合物(64mg)，經(jīng)從叔-丁基-0-甲基醚中重結晶得到標題化合物，為白色固體(2mg,5％)。1H NMR(400MHz DMSO d6):δ9.70(s,1H),9.12(s,1H),7.62(d,J=8.3Hz,1H),7.55(d,J=1.2Hz,1H),7.49(dd,J=1.2Hz,J=8.1Hz,1H),7.36(m,4H),7.18(m,1H)；IR(KBr)2233,2192cm-1；MS(ES+)m/e 278(M+H)+；MS(ES-)m/e 276(M-H)-；mp270-271℃。
實施例4N-(4-氰基-2-羥基苯基)-N’-(2,3-二氯代苯基)-N”-氰基胍的制備根據(jù)實施例1(a)-1(e)的方法，但用2,3-二氯苯基異硫氰酸酯代替2-溴代苯基異硫氰酸酯制備標題化合物(17％總收率)。IR(KBr)2231,2197cm-1；MS(ES+)m/e 346,348,350[M+H]+；MS(ES-)m/z 344,346,347,348(M-H)-；mp155-156℃。
實施例5N-(2-溴代苯基)-N’-(4-氰基-2-羥基-3-丙基苯基)-N”-氰基胍的制備a)2-氨基-5-氰基-6-丙-1-烯-3-基-苯酚在氬氣下，用N,N-二甲基苯胺(20ml)處理實施例2(b)制備的化合物(1.88g,1.29mmol)并保持于175℃(油浴溫度)下3.5小時。真空蒸發(fā)溶劑，殘留物經(jīng)從含有各10-20％的二氯甲烷和己烷的甲基-叔-丁基醚中重結晶獲得標題化合物，為純的固體(1.67g,89％)。MS(ES+)m/e175[M+H]+；MS(ES-)m/z 173[M-H]-。
b)2-氨基-5-氰基-6-丙基苯酚于室溫和1大氣壓氫氣下，將2-氨基-5-氰基-6-丙-1-烯-3-基-苯酚(0.5g,2.4mmol)和10％鈀炭(.05g)的乙酸乙酯(50ml)中的混合物攪拌2小時。使該混合物通過硅藻土過濾除去鈀，減壓濃縮濾液獲得標題化合物，為粉白色固體(1.2g,78％)。MS(ES+)m/e 177(M+H)+；MS(ES-)m/z 175[M-H]-。
c)N-(2-溴代苯基)-N’-(4-氰基-2-羥基-3-丙基苯基)-N”-氰基胍根據(jù)實施例2(a)-1(e)的方法，但用2-氨基-5-氰基-6-丙基苯酚代替5-氰基-2-硝基-苯酚制備標題化合物(37％總收率)。1H NMR(400MHz DMSO d6)；δ9.72(s,1H),9.45(s,1H),8.66(s,1H),7.71(d,J=7.0Hz,1H),7.56(d,J=8.4Hz,1H),7.45(m,2H),7.28(d,J=8.4Hz,1H),7.26(t,1H),2.76(t,J=7.5,2H)1.55(六峰，J=7.6,2H),0.93(t,J=7.3,3H)；IR(KBr)2224,2184cm-1；MS(ES+)m/e 398,400[M+H]+；MS(ES-)m/e 396,398[M-H]-。
實施例6N-(4-氰基-2-羥基-3-丙基苯基)-N’-(2,3-二氯代苯基)-N”-氰基胍的制備根據(jù)實施例1(b)-1(e)的方法，但用2,3-二氯苯基異硫氰酸酯代替2-溴代苯基異硫氰酸酯及用2-烯丙氧基-4-氰基-3-丙基苯胺代替2-烯丙氧基-4-氰基苯胺制備標題化合物(7％總收率)。IR(KBr)2236,2182cm-1；MS(ES+)m/e 388,390,391[M+H]+；MS(ES-)m/e 386,388,390[M-H]-,mp143-147℃。
實施例7N-(2-氯代苯基)-N’-(4-氰基-2-羥基-3-丙基苯基)-N”-氰基胍的制備根據(jù)實施例1(b)-1(e)的方法，但用2-氯代苯基異硫氰酸酯代替2-溴代苯基異硫氰酸酯及用2-烯丙氧基-4-氰基-3-丙基苯胺代替2-烯丙氧基-4-氰基苯胺制備標題化合物(26％總收率)。IR(KBr)2225,2187cm-1；MS(ES+)m/e 354,356[M+H]+；MS(ES-)m/e 352,354[M-H]-；mp159-160℃。
實施例8N-(2-溴代苯基)-N’-(4-氰基-2-羥基-3-異丁基苯基)-N”-氰基胍的制備根據(jù)實施例4(a)-1(c)的方法，但用3-溴代-2-甲基-1-丙烯代替烯丙基溴制備標題化合物(16％總收率)。IR(KBr)2231,2189cm-1；MS(ES+)m/e 412,414[M+H]+；MS(ES-)m/e 410,412[M-H]-。
實施例9N-(2-溴代苯基)-N’-(3-溴代-4-氰基-2-羥基苯基)-N”-氰基胍的制備a)2-溴代-3-羥基-4-硝基芐腈將含有三溴化氫(hydrogen tribromide)的六亞甲基四胺(1∶1)(9.91g,26.0mmol)化合物加入3-羥基-4-硝基芐腈(3.03g,18.4mmol)的二氯甲烷(660ml)溶液中。使生成的溶液于室溫下攪拌1周。用1N鹽酸酸化該反應混合物，然后用EtOAc/己烷1/1的混合物提取。合并有機層，經(jīng)硫酸鎂干燥并過濾。蒸發(fā)溶劑，使生成的固體經(jīng)硅膠(50/50己烷/EtOAc)層析得到所需產(chǎn)物(1.47g,35.0％)。MS(ES-)m/e 241,243[M-H]-。
b)N-(2-溴代苯基)-N’-(3-溴代-4-氰基-2-羥基苯基)-N”-氰基胍根據(jù)實施例2(a)-1(e)的方法，但用2-溴代-3-羥基-4-硝基芐腈代替5-氰基-2-硝基-苯酚，制備標題化合物，為灰白色固體(經(jīng)層析總收率為44％，重結晶后為15％)。1H NMR(400MHz,DMSO d6):δ10.66(s,1H),9.56(s,1H),8.92(s,1H),7.71(d,J=8.0Hz,1H),7.68(d,J=8.5Hz,1H),7.48-7.41(m,3H),7.26(t,1H)；IR(KBr)2228,2186cm-1；MS(ES+)m/e 434,436,438[M+H]+；MS(ES-)m/e 432,434,436[M-H]-.142℃。
實施例10N-(3-溴代-4-氰基-2-羥基苯基)-N’-(2,3-亞甲二氧基苯基)-N”-氰基胍的制備根據(jù)實施例8(a)-1(b)的方法，但用亞甲二氧基苯基異硫氰酸酯代替2-溴代苯基異硫氰酸酯制備標題化合物(14％總收率)。IR(KBr)2230,2196cm-1；MS(ES+)m/e 400,402[M+H]+；MS(ES-)m/e 398,400[M-H]-；mp164-165℃。
實施例11N-(2-溴代苯基)-N’-(4-氰基-2-羥基-3-甲氧基羰基苯基)-N”-氰基胍的制備a)2,6-二羥基苯甲酸甲酯在氬氣下，將80％氫化鈉(10.00g,333.3mmol)的DMF(45ml)溶液冷卻至0℃。用45分鐘緩慢將2,6-二羥基苯甲酸(48.88g,317.1mmol)的DMF(50ml)溶液加入到該混合物中。攪拌該溶液45分鐘，然后用20分鐘加入MeⅠ(21.0ml,337mmol)。于室溫下攪拌生成的溶液70小時。用二氯甲烷稀釋該混合物，通過硅膠墊過濾，用二氯甲烷作為洗脫劑。蒸發(fā)溶劑得到所需產(chǎn)物(35.22g,66.1％)。1H NMR(250MHz,DMSO d6):δ9.91(s,2H),7.09(t,J=1.2Hz,J=2.5Hz,1H),6.37(d,J=1.1Hz,2H),3.78(s,3H)。
b)2-芐氧基-6-羥基苯甲酸甲酯在氬氣下，向2.6-二羥基苯甲酸甲酯(20.00g,118.9mmol)的DMF(100ml)的混合物中加入80％氫化鈉(3.9144g,130.5mmol)，接著加入芐基溴(25.5ml,214.5mmol)。于70℃加熱該溶液20小時。冷卻該混合物，再加入飽和的碳酸氫鈉，用EtOAc提取，硫酸鎂干燥并過濾。蒸發(fā)溶劑并使生成的固體經(jīng)硅膠層析(95/5己烷/EtOAc)得到所需產(chǎn)物(16.71g,54.4％)。MS(ES-)m/e 257[M-H]-。
c)2-芐氧基-6-腈基苯甲酸甲酯在0℃和氬氣下，用N-苯基三氟甲磺酰亞胺(4.5424g,12.7mmol)和三乙胺(1.62ml,11.6mmol)處理2-芐氧基-6-氰基苯甲酸甲酯(2.730g,10.6mmol)的二氯甲烷(28.5ml)溶液。使反應混合物溫熱至室溫并攪拌14小時。用乙醚稀釋該溶液，用水、5％氫氧化鈉及鹽水洗滌。用硫酸鎂干燥有機層，過濾并蒸發(fā)得到粗品三氟甲磺酸酯(4.476g,108％)。1H NMR(250MHz,CDCl3):δ7.35(m,6H),6.95(m,2H),5.16(s,2H),3.94(s,3H)。使該粗品三氟甲磺酸酯溶于DMF(23ml)中并用四(三苯膦)合鈀
(0.3036g,0.260mmol)和Zn(CN)2(1.1027g,9.39mmol)處理。于80℃加熱該混合物10小時。冷卻該反應混合物至室溫并傾入飽和碳酸氫鈉溶液中。用EtOAc提取該混合物，經(jīng)硫酸鎂干燥并過濾。蒸發(fā)溶劑并使生成的固體經(jīng)硅膠層析(80/20己烷/EtOAc)得到所需產(chǎn)物(2.20g，兩步驟78％)。1H NMR(250MHz,CDCl3):δ7.5-7.2(m,8H),5.19(s,2H),4.00(s,3H)d)6-氰基-2-羥基苯甲酸甲酯的制備在氬氣下，將10％鈀炭(4.72g)加入2-芐氧基-6-氰基苯甲酸甲酯(10.0g,37.4mmol)的EtOAc(330ml)的溶液中。用氫氣沖洗該反應容器，在氫氣囊壓力下，于室溫攪拌該反應混合物。3小時后，用氬氣沖洗該反應物，通過硅藻土過濾該溶液。蒸發(fā)溶劑產(chǎn)生所需產(chǎn)物(6.12g,92.2％)。C9H7NO3的分析計算值C,61.02；H,3.98；N,7.91。實測值C,60.74；H,3.99；N,7.65。
e)6-氰基-2-羥基-3-硝基苯甲酸甲酯的制備于0℃，用濃硝酸(0.41ml,6.44mmol)滴加處理6-氰基-2-羥基苯甲酸甲酯(1.1428g,6.45mmol)在乙酸酐(21ml)中的懸浮液。在所有原料溶解期間，使該混合物溫熱至室溫。攪拌該溶液36小時，然后傾入水中并用EtOAc提取。用硫酸鎂干燥合并的有機層并過濾。蒸發(fā)溶劑并使生成的固體經(jīng)硅膠層析(70/30/1己烷/EtOAc/HOAc)得到所需產(chǎn)物(0.50g,35.7％)。MS(ES-)m/e 221[M-H]-。
f)3-氨基-6-氰基-2-羥基苯甲酸甲酯在氬氣下，將10％鈀炭(0.23g)加入6-氰基-2-羥基-3-硝基苯甲酸甲酯(402mg,1.81mmol)的EtOAc(40ml)的溶液中。用氫氣沖洗該反應容器，在氫氣囊壓力下，于室溫攪拌該反應混合物。2小時后，用氬氣沖中洗該反應物，通過硅藻土過濾該溶液。蒸發(fā)溶劑產(chǎn)生所需產(chǎn)物(334mg,96.0％)。MS(ES-)m/e 192[M-H]-。
g)N-(2-溴代苯基)-N’-(4-氰基-2-羥基-3-甲氧基羰基苯基)-N”-氰基胍根據(jù)實施例2(a)-1(e)的方法，但用3-氨基-6-氰基-2-羥基硝基苯甲酸甲酯代替5-氰基-2-硝基-苯酚制備標題化合物(19％總收率)。1H NMR(400MHz,DMSO d6):δ11.08(s,1H),9.69(s,1H),8.89(s,1H),7.99(d,J=8.40Hz,1H),7.73(d,J=7.9Hz,1H),7.50-7.42(m,3H),7.28(t,1H)；IR(KBr)2228,2186cm-1IR(KBr)2225,2177cm-1；MS(ES-)m/e 412,414[M-H]-；mp210-211℃。
治療方法式(Ⅰ)化合物或其藥學上可接受的鹽可用于生產(chǎn)預防或治療人類或其它哺乳動物因IL-8細胞因子生長過度或失調(diào)引起或加重的任何疾病狀態(tài)的藥物，IL-8細胞因子的生長是由這些可與IL-8α或β受體(也稱作Ⅰ型或Ⅱ型受體)結合的哺乳動物細胞例如(但不限于)單核細胞和/或巨噬細胞，或其它趨化因子引起的。
因此，本發(fā)明提供治療趨化因子介導的疾病的方法，其中所述趨化因子是一種與IL-8α或β受體結合的因子，該方法包括給予有效量的式(Ⅰ)化合物或其藥學上可接受的鹽。所述趨化因子尤其為IL-8、GROα、GROβ、GROγ、ENA-78和NAP-2 。
給予足以抑制細胞因子功能(尤其IL-8、GROα、GROβ、GROγ、ENA-78或NAP-2功能)的量的式(Ⅰ)化合物，以使這些因子在生物學方面下行調(diào)節(jié)至正常的生理功能水平，或在某些情況下調(diào)至正常水平以下，以改善疾病狀況。例如在本發(fā)明中所涉及的異常水平的IL-8、GROα、GROβ、GROγ、ENA-78或NAP-2包括(ⅰ)游離IL-8的水平不低于每毫升1皮克；(ⅱ)正常生理水平以上的與IL-8、GROα、GROβ、GROγ、ENA-78或NAP-2有關的任何細胞；或(ⅲ)在與IL-8、GROα、GROβ、GROγ、ENA-78或NAP-2有關的細胞或組織中分別產(chǎn)生基礎水平以上的IL-8、GROα、GROβ、GROγ、ENA-78或NAP-2。
有許多疾病狀態(tài)，其發(fā)病和/或加重與IL-8產(chǎn)生過度或失調(diào)有關。趨化因子介導的疾病包括牛皮癬、特應性皮炎、關節(jié)炎、哮喘、慢性阻塞性肺炎、成人呼吸窘迫綜合征、炎性腸病、Crohn氏病、潰瘍性結腸炎、中風、膿毒性休克、內(nèi)毒素性休克、革蘭氏陰性膿毒癥、中毒性休克綜合征、心和腎再灌注損傷、腎小球性腎炎、血栓形成、移植對宿主反應、alzheimers病、同種異體移植排斥反應、瘧疾、restinosis、血管生成或不需要的造血干細胞的釋放。
這些疾病主要以大量的中性白細胞浸潤，T-細胞浸潤或新血管生長為特征，并與IL-8、GROα、GROβ、GROγ或NAP-2產(chǎn)生增加有關，這種增加引起中性白細胞的趨化性進入炎癥部位或內(nèi)皮細胞的定向生長。與其它炎癥細胞因子(IL-1、TNF和IL-6)相比，IL-8、GROα、GROβ、GROγ或NAP-2具有促進中性白細胞的趨化性、酶的釋放，包括(但不限于)彈性蛋白酶的釋放以及超氧化物的產(chǎn)生和活化的特性。能通過IL-8Ⅰ型或Ⅱ型受體起作用的α-趨化因子(尤其GROα、GROβ、GROγ或NAP-2)可通過促進內(nèi)皮細胞的定向生長而促進腫瘤的新血管生成。因此，抑制IL-8誘導的趨化性或活化作用將導致中性白細胞浸潤的直接減少。
最近的證據(jù)也提示趨化因子在治療HIV感染中的作用，Littleman等，Nature381,pp661(1996)和Koup等，Nature381,pp.667(1996)。
本發(fā)明也提供用趨化因子受體拮抗劑式(Ⅰ)化合物治療CNS損傷(急性發(fā)作時(acute setting))以及預防(似乎容易受損的個體)CNS損傷的方法。
本文定義的CNS損傷包括開放性或穿透性頭部損傷如手術，或閉合性頭部損傷如對頭部區(qū)域造成的損害。缺血性中風，尤其是腦部，也包括在本定義范圍內(nèi)。
缺血性中風可定義為由特定腦區(qū)域供血不足所致病灶性神經(jīng)紊亂，通常為栓子、血栓或血管局部動脈粥樣化閉塞的后果。在該區(qū)域顯示出炎性細胞因子的作用，本發(fā)明提供有效治療這些損傷的方法。對于目前已有的這些急性損傷，幾乎沒有有效的治療方法。
TNF-α為具有促炎作用，包括內(nèi)皮白細胞粘附分子表達的細胞因子。白細胞浸潤到缺血性腦損傷部位，因而，可抑制或降低TNF水平的化合物將用于治療缺血性腦損傷。見Liu等，Stoke,Vol.25,No.7,pp.1481-88(1994)，該公開的內(nèi)容結合在此作為參考。
閉合性頭部損傷的模型和使用混合的5-LO/CO藥物進行的治療在Shohami等的J of Vaisc & Clinical Physiology and Pharmacology,Vol.3 No.2 pp.99-107(1992)中進行討論，該公開的內(nèi)容結合在此作為參考。已發(fā)現(xiàn)減輕水腫形成的治療可改善接受治療動物的功能結果。
給予足量的式(Ⅰ)化合物以抑制IL-8(可與IL-8α或β受體結合)與IL-8α或β受體結合，這點可通過降低中性白細胞的趨化性和激活程度予以證實。式(Ⅰ)化合物為IL-8結合的抑制劑這一發(fā)現(xiàn)是以本文所述的體外受體結合分析中式(Ⅰ)化合物的作用為基礎的。已表明式(Ⅰ)化合物在某些情況下為重組體的Ⅰ型和Ⅱ型IL-8受體的雙重抑制劑。優(yōu)選該化合物僅為一種受體的抑制劑，更優(yōu)選為Ⅱ型受體的抑制劑。
本文所用的術語“IL-8介導的疾病或疾病狀態(tài)”指其中IL-8、GROα、GROβ、GROγ、ENA-78或NAP-2起作用的任何和所有疾病狀態(tài)，這種作用或者起于IL-8、GROα、GROβ、GROγ、ENA-78或NAP-2本身的產(chǎn)生，或者通過IL-8、GROα、GROβ、GROγ、ENA-78或NAP-2引起其它單核因子如(但不限于)IL-1、IL-6或TNF的釋放所致。在一種疾病狀態(tài)中，例如，IL-1是一種主要成分，其產(chǎn)生或作用作為對IL-8的反應而加重或分泌，則該疾病狀態(tài)將認為是IL-8介導的疾病狀態(tài)。
本文所用的術語“趨化因子介導的疾病或疾病狀態(tài)”指其中可與IL-8α或β受體結合的趨化因子起作用的任何和所有疾病狀態(tài)，所述趨化因子包括(但不限于)IL-8、GROα、GROβ、GROγ、ENA-78或NAP-2。這包括其中IL-8起作用的疾病狀態(tài)，這種作用或者起于IL-8本身的產(chǎn)生，或者通過IL-8引起其它單核因子如(但不限于)IL-1、IL-6或TNF的釋放所致。在一種疾病狀態(tài)中，例如，IL-1是一種主要成分，其產(chǎn)生或作用作為對IL-8的反應而加重或分泌，則該疾病狀態(tài)將被認為是IL-8介導的疾病狀態(tài)。
本文所用的術語“細胞因子”指影響細胞功能的任何分泌的多肽，其為調(diào)節(jié)細胞之間在免疫、炎癥或造血應答方面的相互作用的分子。細胞因子包括(但不限于)單核因子和淋巴因子，而不管它們是由哪種細胞產(chǎn)生的。例如，單核因子一般是指由單核的細胞如巨噬細胞和/或單核細胞產(chǎn)生和分泌的。然而許多其它細胞也產(chǎn)生單核因子，如天然殺傷細胞、成纖維細胞、嗜堿性粒細胞、中性白細胞、內(nèi)皮細胞、腦星形膠質(zhì)細胞、骨髓基質(zhì)細胞、上皮角質(zhì)細胞和B-淋巴細胞。淋巴因子通常由淋巴細胞產(chǎn)生的。細胞因子的實例包括(但不限于)白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和腫瘤壞死因子-β(TNF-β)。
本文所用的術語“趨化因子”指影響細胞功能的任何分泌的多肽，其為調(diào)節(jié)細胞之間在免疫、炎癥或造血應答方面的相互作用的分子，類似于上述術語“細胞因子”。趨化因子主要是通過細胞跨膜分泌的，并引起特異的白細胞、中性白細胞、單核細胞、巨噬細胞、T-細胞、B-細胞、內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞的趨化性和激活。趨化因子的實例包括(但不限于)IL-8、GRO-α、GRO-β、GRO-γ、ENA-78、NAP-2、IP-10、MIP-1α、MIP-1δ、PF4和MCP1、2和3。
為了在治療中使用式(Ⅰ)化合物或其藥學上可接受的鹽，通常根據(jù)常規(guī)制藥實踐配制成藥用組合物。因此，本發(fā)明也涉及含有有效、非毒性量的式(Ⅰ)化合物和其藥學上可接受的載體或稀釋劑的藥用組合物。
式(Ⅰ)化合物、其藥學上可接受的鹽和包含它們的藥用組合物可以以任何常規(guī)使用的給藥途徑例如口服、局部、胃腸外或吸入方便地給予。式(Ⅰ)化合物可以以常規(guī)劑型給予，這些劑型可根據(jù)常規(guī)方法將式(Ⅰ)化合物與標準藥用載體混合來制備。式(Ⅰ)化合物也可以以常規(guī)劑型與另一種已知的治療性的活性化合物聯(lián)合給藥。這些方法可包括混合、制粒和壓片，或適當?shù)厥够钚猿煞秩苡谒柚苿┲?。應該理解，藥學上可接受的載體或稀釋劑的形式和特性應根據(jù)活性成分的量、與之混合的成分、給藥途徑和其它公知的變量而決定。載體必須是“可接收的”，其意指與制劑中的其它成分相容并對其接受者無害。
使用的藥用載體可以是，例如固體或液體。固體載體的示范性實例為乳糖、石膏粉、蔗糖、滑石粉、明膠、瓊脂、果膠、阿拉伯膠、硬脂酸鎂、硬脂酸等。液體載體的示范性實例為糖漿、花生油、橄欖油、水等。類似地，所述載體或稀釋劑可以包括本領域已知的時間延遲物質(zhì)，如一硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯，它們可單獨或與蠟一起使用。
可以采用各種藥用劑型。因此，如果使用固體載體，制劑可以制成片劑，以粉末或丸粒形式裝于硬明膠膠囊中或以錠劑或糖錠形式。固體載體的量可以在較寬的范圍內(nèi)變化，但優(yōu)選為約25mg-約1g。當使用液體載體時，所述制劑應為糖漿、乳劑、軟明膠膠囊、無菌注射液如安瓿或不含水的液體懸浮液。
式(Ⅰ)化合物可以局部給予，即通過非全身性給予。這包括將式(Ⅰ)化合物施用于表皮或口腔，以及將該化合物滴注于耳、眼和鼻內(nèi)，以使該混合物不大量進入血流。作為對照，全身給藥指口服、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)和肌內(nèi)給藥。
適于局部給藥的制劑包括適于透過皮膚進入炎癥部位的液體或半液體制劑，例如搽劑、洗劑、霜劑、軟膏劑或糊劑，以及適用于眼、耳或鼻內(nèi)給藥的滴劑。對于局部給藥而言，活性成分可以為制劑重量的0.001％-10％(w/w)，例如1％-2％(w/w)。然而，活性成分也可以為制劑重量的高達10％(w/w)，但優(yōu)選低于5％(w/w)，更優(yōu)選0.1％-1％(w/w)。
根據(jù)本發(fā)明的洗劑包括適合用于皮膚或眼睛的洗劑。眼用洗劑可以包括任選含有殺細菌劑的無菌水溶液，并可通過與制備滴劑相似的方法制備。適用于皮膚的洗劑或搽劑也可以包括促進干燥和冷卻皮膚的物質(zhì)，例如乙醇或丙酮，和/或增濕劑如甘油或油像蓖麻油或花生油。
根據(jù)本發(fā)明的霜劑、軟膏劑或糊劑為供外用的活性成分的半固體制劑。它們可以通過將粉碎的即粉末形式的活性成分單獨或在溶液或在含水或非含水液體的懸浮液中，借助于適用的機器，與潤滑脂或非潤滑脂的基質(zhì)混合來制備。所述基質(zhì)可包括烴如硬、軟或液體石蠟、甘油、蜂蠟、金屬皂、粘質(zhì)，天然來源的油如杏仁油、玉米油、花生油、蓖麻油或橄欖油，羊毛脂或其衍生物或脂肪酸如steric acid或油酸以及醇如丙二醇或大粒凝膠。所述制劑還可摻入任何適合的表面活性劑如陰離子、陽離子或非離子表面活性劑如脫水山梨醇酯或其聚氧乙烯衍生物。也可以包括懸浮劑如天然樹膠、纖維素衍生物或無機物質(zhì)如二氧化硅(silicaceous silicas)和其它成分如羊毛脂。
根據(jù)本發(fā)明的滴劑可以包括無菌含水的或含油的溶液或懸浮液并可通過將活性成分溶于殺細菌劑和/或殺真菌劑和/或任何其它適當?shù)姆栏瘎┑倪m當?shù)乃芤褐衼碇苽?，并?yōu)選包括表面活性劑。然后使生成的溶液經(jīng)過濾澄清后，轉移到適當?shù)娜萜髦校缓竺芊獠⒔?jīng)高壓釜處理或維持于98-100℃半小時滅菌。另外，所述溶液也可通過過濾滅菌并通過無菌技術轉移至容器中。適合用于滴劑中的殺細菌劑和殺真菌劑的實例為硝酸苯基汞或乙酸苯基汞(0.002％)、潔爾滅(O.01％)和醋酸洗必泰(0.01％)。制備油性溶液的適合的溶劑包括甘油、稀釋的乙醇和丙二醇。
可以胃腸外給予式(Ⅰ)化合物，即通過靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、鼻內(nèi)、直腸內(nèi)、陰道內(nèi)或腹膜內(nèi)給藥。胃腸外給藥通常優(yōu)選皮下和肌內(nèi)形式。用于此種給藥的適宜的劑型可以通過常規(guī)技術制備。式(Ⅰ)化合物也可以通過吸入給藥，即通過鼻內(nèi)和口吸入給藥。此種給藥的適宜的劑型如氣溶膠制劑或計量劑量吸入劑可用常規(guī)技術制備。
對于本文公開的式(Ⅰ)化合物的所有使用方法而言，優(yōu)選口服日劑量給藥方案為約0.01-約80mg/kg體重。胃腸外的日劑量給藥方案為約0.001-約80mg/kg體重。局部的日劑量給藥方案優(yōu)選為0.1mg-150mg，每日給藥1-4次，優(yōu)選2-3次。吸入的日劑量給藥方案優(yōu)選為每日約0.01mg/kg-約1mg/kg。本領域技術人員也應認識到，式(Ⅰ)化合物或其藥學上可接受的鹽的各單次劑量的最佳量和給藥間隔應根據(jù)接受治療的疾病性質(zhì)和嚴重程度、給藥的劑型、途徑和部位、接受治療的具體病人而確定，最佳方案可通過常規(guī)技術來確定。本領域技術人員也應認識到最佳療程，即在確定的天數(shù)內(nèi)每日給予式(Ⅰ)化合物或其藥學上可接受的鹽的劑量次數(shù)可由本領域技術人員采用常規(guī)的療程決定試驗予以確定。
通過參考以下生物學實施例來描述本發(fā)明，這些實施例僅為說明性的，并不構成對本發(fā)明范圍的一種限制。
生物學實施例通過下列體外測定確定本發(fā)明化合物的IL-8和Gro-α趨化因子的抑制作用受體結合測定由Amersham Corp.,Arlington Heights,IL，獲得具有2000Ci/mmol特異活性的[125I]IL-8(人重組體)。由NEN-New EnglandNuclear獲得Gro-α。所有的其它化學品均為分析級的。高水平的重組人IL-8α和β型受體按前述方法(Holmes等，Science,1991,253,1278)單獨表達在中國倉鼠卵巢細胞中。根據(jù)前述的方案(Haour等，J.Biol.Chem.,249 pp2195-2205(1974))將中國倉鼠卵巢膜勻化。除了勻化外，勻化緩沖液換成10mM Tris-HCl、1mM硫酸鎂、0.5mMEDTA(乙二胺四乙酸)、1mM PMSF(α-甲苯磺酰氟)、0.5mg/L亮抑蛋白酶肽，pH7.5。膜蛋白濃度使用微量測定試劑盒(Pierce Co.)測定，牛血清清蛋白用作標準品。所有測定均在96孔微量滴定格式板(microplate format)上進行。每種反應混合物含有在20mM Bis-Trispropane和0.4mM TrisHCl緩沖液(pH8.0，含有1.2mM硫酸鎂、0.1mM EDTA、25mM氯化鈉和0.03％CHAPS)中的125I IL-8(0.25nM)或125I Groα和0.5μg/ml的IL-8Rα或1.0μg/ml的IL-8Rβ膜。此外，加入預先溶于DMSO中的所研究藥物或化合物以達到0.01nM-100μM的終濃度。加入125I-IL-8開始測定。于室溫下1小時后，用Tomtec96-孔收獲器將所述板收集到用1％聚乙烯亞胺/0.5％BSA阻斷并用25mM氯化鈉、10mMTrisHCl、1mM硫酸鎂、0.5mM EDTA、0.03％CHAPS,pH7.4洗滌3次的玻璃纖維濾膜(filtermat)中。然后干燥濾膜并在Betaplate液體閃爍計數(shù)器上計數(shù)。重組IL-8Rα(Ⅰ型)受體在此也稱作非許可受體(non-permissive receptor)，而重組IL-8Rβ(Ⅱ型)受體在此也稱作許可受體(permissive receptor)。
本文合成化學部分實施例1-11中所述的示范性式(Ⅰ)化合物在許可模型(IL-8b)中均顯示IL-8受體抑制的IC50在約5-約100nM。已發(fā)現(xiàn)一種在2-位無可電離的質(zhì)子的化合物，N-(2-烯丙氧基-4-氰基苯基)-N’-(2-溴代苯基)-N”-氰基胍在該測定中沒有活性。
趨化性測定這些化合物的體外抑制特性按照Current Protocols inImmunology,Vol I,Suppl 1,Unit 6.12.3.中所述在中性白細胞趨化性測定中確定，其公開的內(nèi)容全部結合在此作為參考。如CurrentProtocols in Immunology,Vol I,Suppl 1,Unit7.23.1.中所述從人血中分離中性白細胞，其公開的內(nèi)容全部結合在此作為參考。將化學誘引劑IL-8、GROα、GROβ、GROγ和NAP-2以0.1-100nM的濃度置于48多孔室(multiwell chamber)(Neuro Probe,Cabin John,MD)的下室中。兩室用一5um聚碳酸酯濾膜隔開。測試本發(fā)明化合物時，先將它們與所述細胞(0.001-1000nM)混合，再將所述細胞加入到上室中。允許在潤濕的孵化箱(5％二氧化碳)中于約37℃孵化約45-90分鐘。孵化期結束后，除去聚碳酸酯膜并洗滌頂部，然后采用Diff Quick染色規(guī)定的方法(Baxter Products,McGaw Park IL,USA)對膜染色。對趨化因子趨化的細胞用顯微鏡目測計數(shù)。一般對每個樣品計數(shù)4個視野，將這些數(shù)平均以得出遷移的細胞平均數(shù)。每個樣品按一式三份進行測試，每種化合物至少重復4次。某些細胞(陽性對照細胞)沒有加入化合物，這些細胞代表該細胞最大的趨化應答。在需要陰性對照(未刺激)的情況下，不向下室加入趨化因子。陽性對照和陰性對照的差別代表所述細胞的趨化活性。
彈性蛋白酶釋放測定對本發(fā)明化合物測定其阻止彈性蛋白酶從人中性白細胞內(nèi)釋放的能力。如Current Protocols in Immunology,Vol I,Suppl 1,Unit7.23.1.中所述從人血中分離中性白細胞。使PMNs0.88×106細胞懸浮于Ringer氏溶液(氯化鈉118，氯化鉀4.56，碳酸氫鈉25，磷酸二氫鉀1.03，葡萄糖11.1,HEPES 5mM,pH7.4)中并以50μl體積置于96孔板的每一孔中。向該板加入50μl體積的試驗化合物(0.001-1000nM),50μl體積的細胞松弛素B(20μg/ml)和50μl體積Ringers緩沖液。使這些細胞溫熱(37℃,5％二氧化碳，95％RH)5分鐘，再按終濃度0.01-1000nM加入IL-8、GROα、GROβ、GROγ或NAP-2。允許反應進行45分鐘，然后離心(800xg 5分鐘)96孔板并移出100μl上清液。將該上清液加入第二塊96孔板中，接著將終濃度為6μg/ml的人工彈性蛋白酶底物(MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC,Nova Biochem,La Jolla,CA)溶于磷酸緩沖鹽水中。立即將該板置于熒光96孔板讀出器(Cytofluor2350,Millipore,Bedford,MA)中，根據(jù)Nakajima等，J.Biol Chem2544027(1979)的方法每隔3分鐘收集數(shù)據(jù)。通過測定MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC降解的速率計算彈性蛋白酶由PMNs釋放的量。
外傷性腦損傷的THF-α測定本測定提供在大鼠中經(jīng)試驗誘導的側液體叩擊(fluid-percussion)外傷性腦損傷(TBI)后檢查特定腦部位腫瘤壞死因子mRNA的表達。用戊巴比妥鈉(60mg/kg,i.p.)麻醉Sprague-Dawley成鼠(n=42)，并集中在左顳頂皮質(zhì)(n=18)使之經(jīng)受中等程度(2.4大氣壓.)的側液體叩擊腦損傷，或進行“假(sham)”治療(麻醉和無損傷的手術，n=18)。在損傷1、6和24小時后用斷頭術處死動物，取出腦，制備左壁(受損)皮質(zhì)(LC)、對側右壁皮質(zhì)(RC)對應的區(qū)域、受損壁皮質(zhì)鄰近的皮質(zhì)(LA)、右側皮質(zhì)對應的鄰近區(qū)域(RA)、左海馬(LH)和右海馬(RH)的組織樣品。分離總RNA，進行Northern印跡雜交并相對于TNF-α陽性對照RNA(巨噬細胞=100％)進行定量。在受損1小時后，在受傷半球的LH(陽性對照的104±17％，與假手術組比較p＜0.05)、LC(105±21％,p＜0.05)和LA(69±8％,p＜0.01)均觀察到TNF-αmRNA表達的明顯增加。在受損6小時后，在受傷半球的LH(46±8％,p＜0.05)、LC(30±3％,p＜0.01)和LA(32±3％,p＜0.01)也觀察到TNF-αmRNA表達的增加，但在受損24小時，這種增加出現(xiàn)消退。在對側半球，在受損1小時后，在RH(46±2％,p＜0.01)、RC(4±3％)和RA(22±8％)以及在受損6小時后，在RH(28±11％)、RC(7±5％)和RA(26±6％,p＜0.05)有TNF-αmRNA表達的增加，但在受損24小時后未觀察到這種增加。在假手術(無損傷的手術)或幼稚動物中，在任何時候，在兩半球的6個腦部區(qū)域中的任何一個均未觀測到TNF-αmRNA表達的一致的改變。這些結果表明下列parasagittal液體叩擊腦損傷中，TNF-αmRNA的短暫表達在特定的腦區(qū)域有改變，包括非外傷的半球的那些變化。因為TNF-α能誘導神經(jīng)生長因子(NGF)并刺激其它的細胞因子從激活的星形膠質(zhì)細胞中釋放。這種外傷后TNF-α的基因表達的改變在對CNS創(chuàng)傷的急性和再生應答中起重要作用。
對于IL-βmRNA的CNS損傷模型本測定對大鼠經(jīng)試驗性側壁液體叩擊外傷性腦損傷(TBI)后的特定腦部區(qū)域的白介素-1β(IL-1β)mRNA的局部表達進行了鑒定。用戊巴比要鈉(60mg/kg,i.p.)麻醉Sprague-Dawley成鼠(n=42)，并集中在左顳頂皮質(zhì)(n=18)使之經(jīng)受中等程度(2.4大氣壓.)的側液體叩擊腦損傷，或進行“假”治療(麻醉和無損傷的手術)。在損傷1、6和24小時后處死動物，取出腦，制備左壁(受損)皮質(zhì)(LC)、對側右壁皮質(zhì)(RC)對應的區(qū)域、受損壁皮質(zhì)鄰近的皮質(zhì)(LA)、右側皮質(zhì)對應的鄰近區(qū)域(RA)、左海馬(LH)和右海馬(RH)的組織樣品。分離總RNA，進行Northern印跡雜交，腦組織IL-1βmRNA的量用IL-1β陽性巨噬細胞RNA(裝載于相同的凝膠上)的相對放射活性(％)來表示。在腦受損1小時后，在受傷半球的LC(陽性對照的20.0±0.7％,n=6，與假手術動物比較，p＜0.05)、LH(24.5±0.9％,p＜0.05)和LA(21.5±3.1％,p＜0.05)均觀察到IL-1βmRNA表達的明顯增加。在受損6小時后，在LC(4.0±0.4％,n=6,p＜0.05)，和LH(5.0±1.3％,p＜0.05)也維持IL-1βmRNA表達的升高。在假手術或幼稚動物中，在任何腦部單獨區(qū)域均未觀測到IL-1βmRNA的表達。這些結果表明下列TBI中，即在特定的腦部區(qū)域內(nèi)，IL-1βmRNA的短皙表達被局部激發(fā)。細胞因子如IL-1β的這些局部改變在創(chuàng)傷后起作用。
以上描述全面公開了本發(fā)明，包括其優(yōu)選的實施方案。對在此特別公開的實施方案的修改和改進都在下面的權利要求書的范圍內(nèi)。無需過多考慮，相信本領域技術人員使用上面的描述可充分利用本發(fā)明。因此，本文的實施例僅僅作為一種說明，并不以任何方式構成對本發(fā)明范圍的一種限制。本發(fā)明的實施方案定義如下，其中如下所述對獨占性或特權已提出權利要求。
權利要求
1．治療趨化因子介導的疾病狀態(tài)的方法，其中所述趨化因子結合在哺乳動物的IL-8α或β受體上，該方法包括給予所述哺乳動物以有效量的下式化合物或其藥學上可接受的鹽
其中Z為氰基、OR11、C(O)NR15R16、R18、C(O)R11、C(O)OR11或S(O)2R17；R為具有可電離的氫和不大于10的pKa的任何官能部分；R1獨立選自氫、鹵素、硝基、氰基、鹵代C1-10烷基、C1-10烷基、C2- 10鏈烯基、C1-10烷氧基、鹵代C1-10烷氧基、疊氮基、(CR8R8)qS(O)tR4、羥基、羥基C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、芳氧基、芳基C1-4烷氧基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基、雜芳基C1-4烷氧基、芳基C2-10鏈烯基、雜芳基C2-10鏈烯基、雜環(huán)C2-10鏈烯基、(CR8R8)qNR4R5、C2-10鏈烯基C(O)NR4R5、(CR8R8)qC(O)NR4R5、(CR8R8)qC(O)NR4R10、S(O)3H、S(O)3R8、(CR8R8)qC(O)R11、C2-10鏈烯基C(O)R11、C2-10鏈烯基C(O)OR11、(CR8R8)qC(O)OR12、(CR8R8)qOC(O)R11、(CR8R8)qNR4C(O)R11、(CR8R8)qNHS(O)2R19、(CR8R8)qS(O)2NR4R5或兩個R1部分一起可形成O-(CH2)sO-或5至6元飽和或不飽和環(huán)；且其中所述芳基、雜芳基和雜環(huán)部分可以任選被取代；q是0或1-10的整數(shù)；t是0或1或2的整數(shù)；s是1-3的整數(shù)；v是0或1-4的整數(shù)；R4和R5獨立為氫、任選取代的C1-4烷基、任選取代的芳基、任選取代的芳基C1-4烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳基C1-4烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基，或R4和R5與它們所連接的氮原子一起形成5-7元環(huán)，該環(huán)可任選含有選自氧、氮或硫的另外的雜原子；Y獨立選白氫、鹵素、硝基、氰基、鹵代C1-10烷基、C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C1-10烷氧基、鹵代C1-10烷氧基、疊氮基、(CR8R8)qS(O)tR4、羥基、羥基C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、芳氧基、芳基C1-4烷氧基、雜芳基、雜芳基烷基、雜芳基C1-4烷氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基、芳基C2-10鏈烯基、雜芳基C2-10鏈烯基、雜環(huán)C2-10鏈烯基、(CR8R8)qNR4R5、C2-10鏈烯基C(O)NR4R5、(CR8R8)qC(O)NR4R5、(CR8R8)qC(O)NR4R10、S(O)3H、S(O)3R8、(CR8R8)qC(O)R11、C2-10鏈烯基C(O)R11、C2-10鏈烯基C(O)OR11、C(O)R11、(CR8R8)qC(O)OR12、(CR8R8)qOC(O)R11、(CR8R8)qNR4C(O)R11、(CR8R8)qNHS(O)2Rd、(CR8R8)qS(O)2NR4R5或兩個Y部分一起可形成O-(CH2)sO-或5至6元飽和或不飽和環(huán)；且其中所述芳基、雜芳基和雜環(huán)部分可以任選被取代；n是1-3的整數(shù)；m是1-3的整數(shù)；R6和R7獨立為氫或C1-4烷基，或R6和R7與它們所連接的氮原子一起形成5-7元環(huán)，該環(huán)可任選含有選自氧、氮或硫的另外的雜原子；R8獨立選自氫或C1-4烷基；R10為C1-10烷基C(O)2R8；R11為氫、C1-4烷基、任選取代的芳基、任選取代的芳基C1-4烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳基C1-4烷基、任選取代的雜環(huán)基或任選取代的雜環(huán)C1-4烷基；R12為氫、C1-10烷基、任選取代的芳基或任選取代的芳基烷基；R13和R14獨立為氫、任選取代的C1-4烷基或R13和R14中的一個為任選取代的芳基；R15和R16獨立為氫、任選取代的C1-4烷基、任選取代的芳基、任選取代的芳基C1-4烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳基C1-4烷基、任選取代的雜環(huán)基、任選取代的雜環(huán)C1-4烷基，或R15和R16與它們所連接的氮原子一起形成5-7元環(huán)，該環(huán)可任選含有選自氧、氮或硫的另外的雜原子；R17為C1-4烷基、NR15R16、OR11、任選取代的芳基、任選取代的芳基C1-4烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳基C1-4烷基、任選取代的雜環(huán)基或任選取代的雜環(huán)C1-4烷基；R18為任選取代的C1-4烷基、任選取代的芳基、任選取代的芳基C1-4烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳基C1-4烷基、任選取代的雜環(huán)基或任選取代的雜環(huán)C1-4烷基；R19為C1-4烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基、雜環(huán)基或雜環(huán)C1-4烷基，其中所有這些部分均可任選被取代；Rd為NR6R7、烷基、芳基C1-4烷基、芳基C2-4鏈烯基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基、雜芳基C2-4鏈烯基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基，其中所述烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)和雜環(huán)烷基環(huán)均可任選被取代；
含有E’的環(huán)任選自下列基團
；星號*表示該環(huán)的連接點；
含有E的環(huán)任選自下列基團
2．權利要求1的方法，其中所述可電離的氫具有3-10的pKa。
3．權利要求2的方法，其中R為羥基、羧基、硫羥、-SR2、-OR2、-NH-C(O)Ra、-C(O)NR6’R7’、-NHS(O)2Rb、-S(O)2NHRc、NHC(X2)NHRb或四唑基；其中R2為取代的芳基、雜芳基或雜環(huán)部分，所述環(huán)具有前提是所述可電離的氫具有不大于10的pKa的官能部分；R6’和R7’為氫、C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、芳基C2-4鏈烯基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基，雜芳基C2-4鏈烯基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基、雜環(huán)C2-4鏈烯基部分，所有這些基團和部分可任選獨立由下述取代基取代1-3次；鹵素、硝基、鹵代C1-4烷基如CF3、C1-4烷基如甲基、C1- 4烷氧基如甲氧基、NR9C(O)Ra、C(O)NR6R7、S(O)3H或C(O)OC1-4烷基，前提是R6’和R7’中之一為氫，但不能兩者均為氫；Ra為芳基、芳基C1-4烷基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基、雜環(huán)基或雜環(huán)C1-4烷基部分，所有這些基團和部分可以任選被取代；Rb為NR6R7、烷基、芳基、芳基C1-4烷基、芳基C2-4鏈烯基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基，雜芳基C2-4鏈烯基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基、雜環(huán)C2-4鏈烯基部分、樟腦，所有這些基團和部分可任選獨立由下述取代基取代1-3次鹵素、硝基、鹵代C1-4烷基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、NR9C(O)Ra、C(O)NR6R7、S(O)3H或C(O)OC1-4烷基；R9為氫或C1-4烷基；Rc為烷基、芳基、芳基C1-4烷基、芳基C2-4鏈烯基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基，雜芳基C2-4鏈烯基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基或雜環(huán)C2-4鏈烯基部分，所有這些基團和部分可獨立由下述取代基任選取代1-3次鹵素、硝基、鹵代C1-4烷基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、NR9C(O)Ra、C(O)NR6R7、S(O)3H或C(O)OC1-4烷基；和X2為氧或硫。
4．權利要求3的方法，其中R2可任選由鹵素、硝基、鹵代C1-10烷基、C1-10烷基、C1-10烷氧基、羥基、SH、C(O)NR6’R7’、-NH-C(O)Ra、-NHS(O)Rb、-S(O)NR6R7、C(O)OR8或四唑基環(huán)基取代1-3次。
5．權利要求3的方法，其中R為羥基、-NHS(O)2Rb或C(O)OH。
6．權利要求1的方法，其中R1為鹵素、氰基、硝基、CF3、C(O)NR4R5、鏈烯基C(O)NR4R5、C(O)R4R10、鏈烯基C(O)OR12、雜芳基、雜芳基烷基、雜芳基鏈烯基或S(O)NR4R5。
7．權利要求1的方法，其中Y為鹵素、C1-4烷氧基、任選取代的芳基、任選取代的芳烷氧基、亞甲二氧基、NR4R5、硫代C1-4烷基，硫代芳基、鹵代烷氧基、任選取代的C1-4烷基、羥基烷基。
8．權利要求1的方法，其中R為OH、SH或NHS(O)sRb，而R1在3-位、4-位被吸電子基團取代或在3,4-位被吸電子基團雙取代。
9．權利要求1-8中任一項的方法，其中所述哺乳動物患有選自下列的趨化因子介導的疾病牛皮癬或特應性皮炎、哮喘、慢性阻塞性肺炎、成人呼吸窘迫綜合征、關節(jié)炎、炎性腸病、Crohn氏病、漬瘍性結腸炎、膿毒性休克、內(nèi)毒素性休克、革蘭氏陰性敗血癥、中毒性休克綜合征、中風、心和腎再灌注損傷、腎小球性腎炎或血栓形成、alzheimers病、移植對宿主反應或同種移植排斥反應。
10．具有下式的化合物或其藥學上可接受的鹽
其中Z為氰基、OR11、C(O)NR15R16、R18、C(O)R11、C(O)OR11或S(O)2R17；R為具有可電離的氫和不大于10的pKa的任何官能部分；R1獨立選自氫、鹵素、硝基、氰基、鹵代C1-10烷基、C1-10烷基、C2- 10鏈烯基、C1-10烷氧基、鹵代C1-10烷氧基、疊氮基、(CR8R8)qS(O)tR4、羥基、羥基C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、芳氧基、芳基C1-4烷氧基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基、雜芳基C1-4烷氧基、芳基C2-10鏈烯基、雜芳基C2-10鏈烯基、雜環(huán)C2-10鏈烯基、(CR8R8)qNR4R5、C2-10鏈烯基C(O)NR4R5、(CR8R8)qC(O)NR4R5、(CR8R8)qC(O)NR4R10、S(O)3H、S(O)3R8、(CR8R8)qC(O)R11、C2-10鏈烯基C(O)R11、C2-10鏈烯基C(O)OR11(CR8R8)qC(O)OR12、(CR8R8)qOC(O)R11、(CR8R8)qNR4C(O)R11、(CR8R8)qNHS(O)2R19、(CR8R8)qS(O)2NR4R5或兩個R1部分一起可形成O-(CH2)sO-或5至6元飽和或不飽和環(huán)，且其中所述芳基、雜芳基和雜環(huán)部分可以任選被取代；q是0或1-10的整數(shù)；t是0或1或2的整數(shù)；s是1-3的整數(shù)；v是0或1-4的整數(shù)；R4和R5獨立為氫、任選取代的C1-4烷基、任選取代的芳基、任選取代的芳基C1-4烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳基C1-4烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基，或R4和R5與它們所連接的氮原子一起形成5-7元環(huán)，該環(huán)可任選含有選自氧、氮或硫的另外的雜原子；Y獨立選自氫、鹵素、硝基、氰基、鹵代C1-10烷基、C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C1-10烷氧基、鹵代C1-10烷氧基、疊氮基、(CR8R8)qS(O)tR4、羥基、羥基C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、芳氧基、芳基C1-4烷氧基、雜芳基、雜芳基烷基、雜芳基C1-4烷氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基、芳基C2-10鏈烯基、雜芳基C2-10鏈烯基、雜環(huán)C2-10鏈烯基、(CR8R8)qNR4R5、C2-10鏈烯基C(O)NR4R5、(CR8R8)qC(O)NR4R5、(CR8R8)qC(O)NR4R10、S(O)3H、S(O)3R8、(CR8R8)qC(O)R11、C2-10鏈烯基C(O)R11、C2-10鏈烯基C(O)OR11、C(O)R11、(CR8R8)qC(O)OR12、(CR8R8)qOC(O)R11、(CR8R8)qNR4C(O)R11、(CR8R8)qNHS(O)2Rd、(CR8R8)qS(O)2NR4R5或兩個Y部分一起可形成O-(CH2)sO-或5至6元飽和或不飽和環(huán)，且其中所述芳基、雜芳基和雜環(huán)部分可以任選被取代；n是1-3的整數(shù)；m是1-3的整數(shù)；R6和R7獨立為氫或C1-4烷基、或R6和R7與它們所連接的氮原子一起形成5-7元環(huán)，該環(huán)可任選含有選自氧、氮或硫的另外的雜原子；R8獨立選自氫或C1-4烷基；R10為C1-10烷基C(O)2R8；R11為氫、C1-4烷基、任選取代的芳基、任選取代的芳基C1-4烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳基C1-4烷基、任選取代的雜環(huán)基或任選取代的雜環(huán)C1-4烷基；R12為氫、C1-10烷基、任選取代的芳基或任選取代的芳基烷基；R13和R14獨立為氫、任選取代的C1-4烷基或R13和R14中的一個為任選取代的芳基；R15和R16獨立為氫、任選取代的C1-4烷基、任選取代的芳基、任選取代的芳基C1-4烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳基C1-4烷基、任選取代的雜環(huán)基、任選取代的雜環(huán)C1-4烷基，或R15和R16可與它們所連接的氮原子一起形成5-7元環(huán)，該環(huán)可任選含有選自氧、氮或硫的另外的雜原子；R17為C1-4烷基、NR15R16、OR11、任選取代的芳基、任選取代的芳基C1-4烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳基C1-4烷基、任選取代的雜環(huán)基或任選取代的雜環(huán)C1-4烷基；R18為任選取代的C1-4烷基、任選取代的芳基、任選取代的芳基C1-4烷基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜芳基C1-4烷基、任選取代的雜環(huán)基或任選取代的雜環(huán)C1-4烷基；R19為C1-4烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基、雜環(huán)基或雜環(huán)C1-4烷基，其中所有這些部分均可任選被取代。Rd為NR6R7、烷基、芳基C1-4烷基、芳基C2-4鏈烯基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基、雜芳基C2-4鏈烯基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基，其中所述烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)和雜環(huán)烷基環(huán)均可任選被取代；
含有E’的環(huán)任選自下列基團
；星號*表示該環(huán)的連接點；
含有E的環(huán)任選自下列基團
11．權利要求10的化合物，其中所述可電離的氫具有3-10的pKa。
12．權利要求10的化合物，其中R為羥基、羧基、硫羥、-SR2、-OR2、-NH-C(O)Ra、-C(O)NR6’R7’、-NHS(O)2Rb、-S(O)2NHRc、NHC(X2)NHRb或四唑基；其中R2為取代的芳基、雜芳基或雜環(huán)部分，所述環(huán)具有前提是所述可電離的氫具有不大于10的pKa的官能部分；R6’和R7’為氫、C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、芳基C2-4鏈烯基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基，雜芳基C2-4鏈烯基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基、雜環(huán)C2-4鏈烯基部分，所有這些基團和部分可任選獨立由下述取代基取代1-3次鹵素、硝基、鹵代C1-4烷基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、NR9C(O)Ra、C(O)NR6R7、S(O)3H或C(O)OC1-4烷基，前提是R6’和R7’中之一為氫，但不能兩者均為氫；Ra為芳基、芳基C1-4烷基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基、雜環(huán)基或雜環(huán)的C1-4烷基部分，所有這些基團和部分可以任選被取代；Rb為NR6R7、烷基、芳基、芳基C1-4烷基、芳基C2-4鏈烯基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基，雜芳基C2-4鏈烯基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基、雜環(huán)C2-4鏈烯基部分或樟腦，所有這些基團和部分可任選獨立由下述取代基取代1-3次鹵素、硝基、鹵代C1-4烷基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、NR9C(O)Ra、C(O)NR6R7、S(O)3H或C(O)OC1-4烷基；R9為氫或C1-4烷基；Rc為烷基、芳基、芳基C1-4烷基、芳基C2-4鏈烯基、雜芳基、雜芳基C1-4烷基、雜芳基C2-4鏈烯基、雜環(huán)基、雜環(huán)C1-4烷基或雜環(huán)C2-4鏈烯基部分，所有這些基團和部分可獨立由下述取代基任選取代1-3次鹵素、硝基、鹵代C1-4烷基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、NR9C(O)Ra、C(O)NR6R7、S(O)3H或C(O)OC1-4烷基；和X2為氧或硫。
13．權利要求12的化合物，其中R2可由下述取代基任選取代1-3次鹵素、硝基、鹵代C1-10烷基，C1-10烷基，C1-10烷氧基，羥基、SH、C(O)NR6’R7’、-NH-C(O)Ra、-NHS(O)2Rb，-S(O)NR6R7、C(O)OR8或四唑基環(huán)。
14．權利要求12的化合物，其中R為OH、-NHS(O)2Rb或C(O)OH。
15．權利要求10的化合物，其中R1為鹵素、氰基、硝基、CF3、C(O)NR4R5、鏈烯基C(O)NR4R5、C(O)R4R10、鏈烯基C(O)OR12、雜芳基、雜芳基烷基、雜芳基鏈烯基或S(O)NR4R5。
16．權利要求10的化合物，其中Y為鹵素、C1-4烷氧基，任選取代的芳基、任選取代的芳烷氧基、亞甲二氧基、NR4R5、硫代C1-4烷基、硫代芳基、鹵代烷氧基、任選取代的C1-4烷基、羥基烷基。
17．權利要求10的化合物，其中R為OH、SH或NHS(O)2Rb，而R1在3-位、4-位被吸電子基團取代或在3,4-位被吸電子基團雙取代。
18．權利要求10的化合物為N-(2-羥基-4-硝基苯基)-N’-(2-氯代苯基)-N”-氰基胍N-(2-羥基-4-硝基苯基)N’-(2-氯代苯基)-N”-氰基胍N-(4-氰基-2-羥基苯基)-N’-(苯基)氰基胍N-(2-溴代苯基)N’-(4-氰基-2-羥基苯基)N”-氰基胍N-(4-氰基-2-羥基苯基)-N’-(2,3-二氯代苯基)-N”-氰基胍N-(2-溴代苯基)-N’-(4-氰基-2-羥基-3-丙基苯基)-N”-氰基胍N-(2-溴代苯基)-N’-(4-氰基-2-羥基-3-異丁基苯基)-N”-氰基胍N-(2-溴代苯基)-N’-(3-溴代-4-氰基-2-羥基苯基)-N”-氰基胍N-(4-氰基-2-羥基-3-丙基苯基)-N’-(2,3-二氯代苯基)-N”-氰基胍N-(3-溴代-4-氰基-2-羥基苯基)-N’-(2,3-亞甲二氧基苯基)-N”-氰基胍N-(2-氯代苯基)-N’-(4-氰基-2-羥基-3-丙基苯基)-N”-氰基胍N-(2-溴代苯基)-N’-(4-氰基-2-羥基-3-甲氧基羰基苯基)-N”-氰基胍或其藥學上可接受的鹽。
19．含有權利要求10-18中任一項的化合物和藥學上可接受的載體或稀釋劑的藥用組合物。
20．制備根據(jù)權利要求10的式(Ⅰ)化合物的方法，該方法包括a)使下式化合物W1-N=C=N-W(Ⅱ)其中W和W1如式(Ⅰ)所定義，且W含有保護的如式(Ⅰ)化合物所定義的R基團(R”)，與ZNH2或其陰離子或鹽反應，Z如式(Ⅰ)化合物所定義，與堿反應得到式(Ⅰ)化合物，如果需要可以對其進行保護。
21．權利要求20的方法，其中所述堿為叔胺堿。
22．權利要求21的方法，其中所述堿為Humig氏堿或三乙胺。
23．權利要求20的方法，其中所述溶劑為非質(zhì)子傳遞溶劑。
24．權利要求23的方法，其中所述溶劑為乙腈。
25．權利要求20的方法，其中所述反應溫度為約-10℃-約50℃。
26．權利要求20的方法，其中Z為氰基，所述堿為在乙腈中的二異丙基乙胺且所述氨基腈大大過量。
27．權利要求20的方法，其中所述R基團通過鈀(O)催化的去烯丙基化去保護。
28．制備根據(jù)權利要求20的式(Ⅱ)化合物的方法，W1-N=C=N-W(Ⅱ)其中W和W1如式(Ⅰ)所定義，且W含有保護的如式(Ⅰ)化合物所定義的R基團(R”)，該方法包括使下式化合物W1-NH-C(S)-NH-W(Ⅲ)其中W和W1如式(Ⅰ)化合物所定義，且W含有保護的如式(Ⅰ)化合物所定義的R基團(R”)，在叔胺堿存在下與過量的甲磺酰氯反應。
29．權利要求28的方法，其中所述堿為三乙胺。
30．權利要求28的方法，其中所述溶劑為二氯甲烷。
31．權利要求28的方法，其中所述反應溫度為約-10℃-約50℃。
32．制備下式化合物的方法W1-NH-C(S)-NH-W(ⅡⅡ)其中R’、W和W1如式(Ⅰ)所定義，且W含有保護的如式(Ⅰ)化合物所定義的R基團(R”)，該方法包括使式(Ⅳ)化合物W-NH2(Ⅳ)其中W如式(Ⅰ)所定義，在適當?shù)漠惲蚯杷狨?W1-NCS)存在下，在非質(zhì)子傳遞溶劑或鹵代溶劑中與不少于2當量的堿反應。
33．權利要求32的方法，其中所述堿為氫化鈉、氫化鉀或氫化鈣。
34．權利要求32的方法，其中所述溶劑為非質(zhì)子傳遞溶劑。
35．權利要求34的方法，其中所述非質(zhì)子傳遞溶劑為二甲基甲酰胺、二噁烷或甲苯。
36．權利要求32的方法，其中所述反應溫度為約-10℃-約50℃。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的式(Ⅰ)化合物、藥用組合物及其在治療由趨化因子白介素－8(ⅠL－8)介導的疾病狀態(tài)中的用途。
文檔編號A61K31/19GK1232398SQ97198603
公開日1999年10月20日 申請日期1997年8月15日 優(yōu)先權日1996年8月15日
發(fā)明者D·L·布賴安, J·G·格利森, K·L·威多森 申請人:史密絲克萊恩比徹姆公司