專利名稱：：化妝料的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及化妝料。更具體地涉及不僅呈現(xiàn)優(yōu)良的美白效果、抗炎癥作用及保濕效果，有助于防止皮膚衰老，且刺激性低、穩(wěn)定性優(yōu)異，適合使用于基礎(chǔ)化妝以及彩妝化妝品、化妝制品、洗浴制品等的化妝料?，F(xiàn)有技術(shù)以往，隨著對呈現(xiàn)美白效果、抗炎癥作用、保濕效果等化妝材料的需求提高，而進行各種研究，且已提案各種化妝材料。然而，現(xiàn)有化妝料中所使用的有效性素材等刺激性高，且對皮膚等的安全性差，穩(wěn)定性不佳，加上特別無法同時充分滿足美白效果、抗炎癥作用及保濕效果，故具有防止皮膚衰老方面不夠充分的缺點。發(fā)明的目的鑒于前述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的目的在于提供一種化妝料，它不僅產(chǎn)生可令色素細(xì)胞的酪氨酸活性降低、阻礙酪氨酸酶酶蛋白合成并抑制黑色素生成、亦抑制因紫外線照射所產(chǎn)生的紅斑和色素沉著、并且降低環(huán)氧酶活性、抑制炎癥發(fā)生、并使肌膚滋潤、改善肌質(zhì)、并有助于防止皮膚衰老的優(yōu)異效果，再者其刺激性低，穩(wěn)定性亦優(yōu)異。技術(shù)方案本發(fā)明涉及通式(Ⅰ)所示2,5-二羥基苯甲酸衍生物所組成的化妝料，R1為氫原子、C1-20烷基、C7-9芳烷基、堿金屬原子或堿土金屬原子；R2及R3分別獨立表示為氫原子、通式-COR4所示基團，式中，R4為C1-5烷基、C1-3烯基、甲氧基、乙氧基、或磷?；?但，R2及R3不同時為氫原子)]。附圖的簡單說明圖1為試驗例2各試樣多巴值的示意圖。圖2為試驗例2各試樣的MTT值的示意圖。圖3為試驗例3各試樣的反應(yīng)時間一氧消耗量關(guān)系的示意圖。圖4為試驗例5試樣多巴值的示意圖。圖5為試驗例5試樣MTT值的示意圖。發(fā)明的實施形態(tài)本發(fā)明的化妝料，如前所述，為通式(Ⅰ)所示2,5-二羥基苯甲酸衍生物，R1為氫原子、C1-20烷基、C7-9芳烷基、堿金屬原子或堿土金屬原子；R2及R3分別獨立表示為氫原子、通式-COR4所示基團，式中，R4為C1-5烷基、C1-3烯基、甲氧基、乙氧基、或磷?；?但，R2及R3不同時為氫原子)]。本發(fā)明所用的上述通式(Ⅰ)所示2,5-二羥基苯甲酸衍生物為同時賦與化妝品優(yōu)異的美白效果、抗炎癥作用及保濕效果，而且剌激性少、穩(wěn)定性優(yōu)異的化合物。上述通式(Ⅰ)中，R1為烷基或芳烷基時，就合成容易而易于取得而言，此R1以碳原子數(shù)少的基團為較佳。因此，R1為氫原子、諸如鉀原子、鈉原子之類堿金屬原子、諸如鎂原子等堿土金屬原子、C1-6、特別是C1-3烷基或芐基為較佳。又，前述通式(Ⅰ)中，就合成容易于而易取得而言，R2及R3分別獨立為氫原子或通式-COR4所示基團(式中，R4為C1-3烷基、C1-3烯基、甲氧基或乙氧基為較佳。前述通式(Ⅰ)所示2,5-二羥基苯甲酸衍生物的代表例，可列舉例如等通式(Ⅱ)所示化合物(式中，R2及R3為同前述(但R2及R3不同時為氫原子)；例如等通式(Ⅲ)所示化合物(式中，R2及R3為同前述(但，R2及R3不同時為氫原子)，R5為C1-20烷基，例如等通式(Ⅳ)所示化合物(式中，R2及R3為同前述(但R2及R3不同時為氫原子)，R6為堿金屬或堿土金屬原子)，例如等通式(Ⅴ)所示化合物(式中，R2及R3為同前述(但R2及R3不同時為氫原子)，R7為通式(Ⅵ)所示基團(式中，R8為C1-3烷基)，它們可單獨使用或兩種以上混合使用。其中，從容易合成而易于取得、并且可于化妝料中表現(xiàn)更優(yōu)異的美白效果、抗炎癥效果及保濕效果、且剌激性少、經(jīng)過長期間仍穩(wěn)定等方面而言，以為特佳。本發(fā)明中，前述2,5-二羥基苯甲酸衍生物可就其原樣配合至化妝料中。該2,5-二羥基苯甲酸衍生物的配合料因目的化妝料種類等而異，無法一概而論，但通過配合該2,5-二羥基苯甲酸衍生物以充分表現(xiàn)美白效果、抗炎癥作用及保濕效果而言，則期望調(diào)整成相對于化妝料100份(重量份，以下同樣)，為0.01份以上，較佳為0.05份以上，再佳為0.1份以上。又為了將該2,5-二羥基苯甲酸衍生物技術(shù)性地穩(wěn)定配合于化妝料中，此類2,5-二羥基苯甲酸衍生物的配合量，期望調(diào)整成相對于化妝料量100份，為25份以下、較佳為10份以下，再佳為5份以下。本發(fā)明的化妝料，如前述，為配合通式(Ⅰ)所示2,5-二羥基苯甲酸衍生物，但在本發(fā)明中，此類2,5-二羥基苯甲酸衍生物以外亦可適當(dāng)配合例如一般化妝料所用的美白劑和抗炎癥劑等。前述美白劑可列舉例如麴酸、熊果苷、胎盤萃取物、抗壞血酸、磷酸L-抗壞血酸鎂等抗壞血酸磷酸鹽、抗壞血酸衍生物、桑白皮萃取物、苷草萃取物、泛酰硫氫乙胺-S-磺酸鈣等，它們可單獨使用或兩種以上混合使用。前述美白劑的配合量，為了充分表面美白效果，且穩(wěn)定配合于化妝料中，則較佳調(diào)整成相對于化妝料100份，為0.01～10份左右，特別是0.1～3份左右。尚，在此類美白劑含有固形成分的情形下，其配合量，以固形成分換算，調(diào)整至前述范圍內(nèi)即可。此類美白劑與2,5-二羥基苯甲酸衍生物并用時，所得化妝料表現(xiàn)出更為優(yōu)異的美白效果。前述抗炎癥劑可列舉如甘草酸、甘草酸二鉀等甘草酸鹽、甘草酸衍生物、尿囊素、消炎痛等，它們可單獨或兩種以上混合使用。為了充分表現(xiàn)抗炎癥作用，且穩(wěn)定配合于此化妝料中，前述抗炎癥劑的配合量較佳調(diào)整成相對于化妝料100份，為0.01～10份左右，特別是0.1-3份左右。此類抗炎癥劑與2,5-二羥基苯甲酸衍生物并用時，所得化妝料表現(xiàn)出更為優(yōu)異的抗炎癥效果。再者，除了前述物質(zhì)以外，本發(fā)明中亦可將賦形劑、香料等、及油脂類、表面活性劑、保濕劑、pH調(diào)節(jié)劑、增稠劑、防腐劑、抗氧化劑、紫外線吸收劑、顏料、乳化劑、來自動植物之成分、維生素類、氨基酸類等各種化妝料成分適當(dāng)配合至化妝料中。前述油脂類可為一般化妝料所廣泛使用者，可列舉如液體石蠟、石蠟、鯨蠟醇、鱷梨油、橄欖油、荷荷巴油、椰子油等植物性油脂；牛脂、豬脂、馬脂、海龜油、貂油、鱸魚油、角鯊?fù)榈葎游镄杂椭?；甲基聚硅氧烷、山萮醇、甘油三癸酰癸酸酯、甘油三辛酸酯、甘油三異棕櫚酸酯，硅酮油等合成油脂等。前述表面活性劑可列舉如月桂基硫酸鈉、月桂基硫酸三乙醇胺、月硅酸二乙醇酰胺等陽離子型表面活性劑；氯化硬脂酰三甲基銨、氯化鯨蠟基三甲基銨、氯芐烷胺等陽離子型表面活性劑；甘油單硬脂酸酯，山梨糖醇酐單硬脂酸酯、取聚乙烯(20)山梨糖醇酐單硬脂酸酯、聚氧乙烯硬化蓖麻油、蔗糖酯、脂肪酸酰胺等非離子型表面活性劑等。前述保濕劑可列舉如甘油、丙二醇、1,3-丁二醇、吡咯烷酮羧酸蘇打、泛酰硫氫乙胺-S-磺酸鹽等合成保濕劑；玻璃糖醛酸、膠原蛋白、彈性蛋白、胎盤萃取物、蜂王漿、微生物發(fā)酵液、例如幾丁質(zhì)、殼聚糖、果膠等和其它來自植物和動物的萃取液等天然保濕液等。前述pH調(diào)節(jié)劑列舉如檸檬酸、檸檬酸鈉等有機酸及其鹽類等。前述增稠劑可列舉如羧甲基纖維素、羥甲基纖維素、羥乙基纖維素、羧乙烯聚合物、聚乙烯醇、西黃蓍膠、藻酸鈉、角叉菜膠等。前述防腐劑可列舉如對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯等對羥基苯甲酸酯、苯氧基乙醇、乙醇、脫氫醋酸等。前述抗氧化劑可列舉如維生素E、丁基化羥基甲苯(BHT)、丁基化羥基茴香醚(BHA)等。前述顏料可列舉如氧化鐵紅、氧化鐵黃、氧化鐵黑、氧化鈦、耐龍粉末、絹云母、云母、滑石等。前述乳化劑可列舉如大豆卵磷脂等。前述賦形劑可列舉如甘露糖醇、硫酸鈉等。各化妝料成分之配合量因目的化妝料的用途等而異，無法一概而論，且根據(jù)用途而適宜調(diào)整為較佳。本發(fā)明化妝料的形態(tài)為任意的，并無特別限定，但本發(fā)明的化妝料由于除了可防止肌膚發(fā)暗和褐斑、雀斑的出現(xiàn)以外，并具有抑制炎癥發(fā)生、以年輕健康并具滋潤改善之肌質(zhì)而維持于白晰美麗的肌膚狀態(tài)等優(yōu)異性質(zhì)。故例如可用作為乳霜、乳液、化妝水、精華露、洗臉材料、潤膚膏等基礎(chǔ)化妝品、品紅、粉底、粉底液、粉餅等彩妝化妝品、洗發(fā)精、潤絲精、沐浴皂、肥皂等化妝室制品等。再者，前述2,5-二羥基苯甲酸衍生物投入熱水時，由于經(jīng)皮吸收而使肌膚滋潤，并具有改善其狀態(tài)之效果，故本發(fā)明化妝料亦可使用作為沐浴用劑等洗浴制品。在將本發(fā)明的化妝料用作洗浴制品的情況下，若考慮此類2,5-二羥基苯甲酸衍生物有效地使肌膚滋潤，且改善其狀態(tài)的效果，則前述2,5-二羥基苯甲酸衍生物相對于化妝料100份以0.01-10份、特別以0.1-1份為較佳。使用前述沐浴用劑時，該沐浴用劑的使用量通常調(diào)整至每200公斤5～50克左右沐浴用劑為較佳。本發(fā)明所用的2,5-二羥基苯甲酸衍生物可同時產(chǎn)生使色素細(xì)胞的酪氨酸酶活性降低、通過抑制酪氨酸酶酶蛋白合成而產(chǎn)成抑制黑色素生成的效果、通過環(huán)氧酶活性降低所產(chǎn)生的抑制紅斑效果及保持皮膚水分的能力正常化所產(chǎn)生的保濕效果，且刺激性少，為穩(wěn)定的物質(zhì)。因此，配合此類2,5-二羥基苯甲酸衍生物的本發(fā)明化妝料除了可抑制黑色素生成亢進所造成的褐斑、雀斑等的出現(xiàn)，并可抑制炎癥的發(fā)生，同時改善肌膚，維持并滋潤白晰美麗肌膚，有助于防止衰老的效果之外，還有刺激性低的特征。實施例以下，以實施例更加詳細(xì)說明本發(fā)明的化妝料，但本發(fā)明并非僅限定于這些實施例。制造例12-(2′,5′-二乙酰氧基-苯甲酰氧基)苯甲酸甲酯的制造將二乙?；?,5-二羥基苯甲酸0.96克(4亳摩爾)溶解于氯仿10毫升中，加入硫酰氧1.46毫升(20亳摩爾)并于70℃下加熱回流一晚，冷卻后，減壓蒸去溶劑得到二乙酰基2,5-二羥基苯甲酰氯。然后，將水楊酸甲酯0.45毫升(4毫摩爾)溶解于氯仿10毫升中，加入三乙胺0.67毫升(4.8摩爾)，于室溫下攪拌30分鐘。將先前合成的?；仍?毫升氯仿中的溶液滴加在此溶液中后，于室溫下攪拌2小時。減壓蒸去反應(yīng)液，并將殘渣經(jīng)硅膠柱層析，以氯仿/乙醚(10/1)洗脫，得到目的物。(產(chǎn)率7.05％，熔點110-111℃)制造例25-(2′-乙酰氧基-苯甲?；?2,5-二羥基苯甲酸甲酯的制造將乙酰水楊酸1.622克(9毫摩爾)溶解于氯仿15毫升并加入硫酰氯3.28毫升(45毫摩爾)，于70℃下加熱回流一晚，冷卻后，減壓蒸去溶劑，得到乙酰水楊酰氯。然后，將2,5-二羥基苯甲酸甲酯0.757克(4.5毫摩爾)溶解于氯仿15毫升，并加入三乙胺0.75毫升(5.4毫摩爾)，并于室溫下攪拌30分鐘。在此溶液中，滴加先前合成的?；仍?毫升氯仿中的溶液，然后室溫攪拌2小時。減壓蒸去反應(yīng)液，將殘渣經(jīng)硅膠柱層析，以氯仿洗脫，得到目的物。(產(chǎn)率17.8％，熔點82～84℃)試驗例1～4將下式所示2,5-二乙酰氧基苯甲酸作為2,5-二羥基苯甲酸衍生物及試驗例2使用制造例1的2-(2′,5′-二乙酰氧基-苯甲?；?苯甲酸甲酯，進行以下所示試驗。試驗例1抑制酪氨酸酶酶蛋白合成的作用將培養(yǎng)的B16鼠黑色素瘤6×104個接種于燒瓶中，在含有5體積％胎牛血清(FBS)的Eagle′s最少需求培養(yǎng)基(MEM)中于37℃、5％CO2條件下預(yù)培養(yǎng)1天后，添加0.1％D-葡萄糖膠，并于同條件下培養(yǎng)4天。然后，將培養(yǎng)基更換成添加50mM二丁基-環(huán)腺苷3,5-磷酸(cAMP)及作為試樣的5mM2,5-乙酰氧基苯甲酸，并于37℃、5％CO2條件下培養(yǎng)3天，得到培養(yǎng)試樣。為了比較，使用未添加2,5-二乙酰氧基苯甲酸的培養(yǎng)基，與前述同樣處理進行培養(yǎng)并取得培養(yǎng)試樣(對照組)。將各培養(yǎng)試樣添加培養(yǎng)后，剝離細(xì)胞，并離心制作成丸狀物，以目視觀察時可確認(rèn)添加2,5-二乙醛氧基苯甲酸并經(jīng)過培養(yǎng)的B16鼠黑色素瘤細(xì)胞的離心沉淀丸狀物，與未添加任何物質(zhì)者(對照組)比較，有顯著的白色傾向。其次，對前述各培養(yǎng)試樣，使用聚丙烯酰胺膠(T=7.5w/v％、c=3w/v％)作為凝膠、以含有0.1體積％的十二烷基硫酸鈉(SDS)的0.025MTris-0.192M甘氨酸緩沖液(pH8.3)作為電泳緩沖液。通過SDS電泳法進行B16鼠黑色素瘤細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶同功酶的檢測。注入量為20μl/穴(緩沖液A(0.125MTris-HCl緩沖液38毫升、甘油10毫升、SDS2克及溴酚藍3毫克)培養(yǎng)試樣溶液(容量比)=1∶1)。培養(yǎng)試樣溶液使用前調(diào)整至1600μg/ml。前述檢測結(jié)果，可確認(rèn)添加2.5-二乙酰氧基苯甲酸并經(jīng)培養(yǎng)時，與未添加任何物質(zhì)者(對照組)比較，B16鼠黑色素瘤細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶的同功酶T1-酪氨酸酶的區(qū)帶顯著減少，且伴有T3-酪氨酸酶區(qū)帶亦消失的傾向。如此，先阻斷由T1-酪氨酸酶至T3-酪氨酸酶的轉(zhuǎn)送，而T1-酪氨酸酶本身顯著減少，故認(rèn)為經(jīng)由2,5-二乙酰氧基苯甲酸所造成主要的黑色素生成抑制作用的機制系對酪氨酸酶酶蛋白合成的抑制作用。試驗例2細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性抑制作用將培養(yǎng)的B16鼠黑色素瘤細(xì)胞，以8000個/孔接種至96孔微平板(CORNING公司)的孔中，以含有5體積％胎牛血清(FBS)的Eagle最少需求培養(yǎng)基(MEM)，于37℃、5％CO2條件下預(yù)培養(yǎng)1天。其后，將此培養(yǎng)液換成添加2.5mM或5mM2,5-二乙酰氧基苯甲酸或2.5毫摩爾2-(2′,5′-二乙酰氧基-苯甲酰氧基)苯甲酸的含有5體積％FBS的EagleMEM，再于37℃、5％CO2條件下培養(yǎng)2天。其次，除去培養(yǎng)后的培養(yǎng)液，并在添加表面活性劑(TritonX-100)的細(xì)胞處理液中，添加5mML-多巴(Dopa)或0.2％MTT并于37℃下進行酪氨酸酶反應(yīng)后，使用微平板讀數(shù)器(Model450,BIORAD公司制)，分別于波長490nm下測定多巴值及波長570-630nm下測定MTT值。分別準(zhǔn)備添加2.5mM或5mM2,5-二羥基苯甲酸代替本發(fā)明化合物或未添加任何物質(zhì)的培養(yǎng)試樣(對照組)作為比較對照試樣。各試樣的多巴值見圖1，各試樣的MTT值見圖2。圖1和圖2中，DABA表示2,5-二乙酰氧基苯甲酸、DAPECSAM表示2-(2′,5′-二乙酰氧基-苯甲?；?苯甲酸甲酯、DHBA表示2,5-二羥基苯甲酸。隨著前述多巴值變大，而細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性增大，且隨著前述MTT值變小，而培養(yǎng)的B16鼠黑色素瘤細(xì)胞的細(xì)胞活性降低。由圖1，可知，添加2,5-二乙酰氧基苯甲酸或2-(2′,5′-二乙酰氧基-苯甲酰氧基)苯甲酸甲酯時，當(dāng)然比無添加物質(zhì)者(對照組)且比添加同濃度2,5-二羥基苯甲酸時其多巴值較小，可知本發(fā)明化合物充分抑制細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性。又，由圖2可知，添加2,5-二乙酰氧基苯甲酸或2-(2′,5′-二乙酰氧基-苯甲酰氧基)苯甲酸甲酯時，與添加2,5-二羥基苯甲酸及無添加物質(zhì)者(對照組)同樣地，不使MTT值變小，可知對培養(yǎng)的B16鼠黑色素瘤細(xì)胞的細(xì)胞活性幾乎無抑制。由以上結(jié)果，可知2,5-二乙酰氧基苯甲酸及2-(2′,5′-二乙酰氧基-苯甲酰氧基)苯甲酸甲酯對培養(yǎng)的B16鼠黑色素瘤細(xì)胞的細(xì)胞活性幾乎無抑制，但可抑制細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶的活性。為了比較，對于以往所一般使用的美白劑麴酸與熊果甘實施與前述同樣的試驗。其結(jié)果，可得知本發(fā)明所使用的2,5-二乙酰氧基苯甲酸在不抑制培養(yǎng)的B16鼠黑色素瘤細(xì)胞的細(xì)胞活性之濃度范圍下，產(chǎn)生與現(xiàn)有技術(shù)美白劑同等或以上的細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性抑制效果。試驗例3環(huán)氧酶活性抑制作用將含有20mML-色氨酸的0.2MTris-HCl緩沖液3.57毫升、40mM血紅蛋白溶液0.03毫升、400單位/毫升的環(huán)氧酶溶液0.20毫升及作為試樣的5mM或10mM2,5-二乙酰氧基苯甲酸水溶液1.00毫升混合配制成混合溶液。另外，準(zhǔn)備添加純水(對照組)1.00毫升代替2,5-二乙酰氧基苯甲酸水溶液1.00毫升的比較對照試樣。前述的混合溶液于37℃下培養(yǎng)5分鐘后，在其中添加含有2mM花生四烯酸的0.2MTris-HCl緩沖液0.20毫升，進行環(huán)氧酶反應(yīng)，立即以生物氧偵測器(MeridianInstrumentuFarEast公司制YSIModel5300)開始反應(yīng)溶液中溶存氧量的測定。由溶存氧量的測定結(jié)果可算出氧消耗量隨著反應(yīng)時間的變化。其結(jié)果見圖3。圖3中，A和B為分別使用5mM及10mM2,5-二乙酰氧基苯甲酸的反應(yīng)溶液的結(jié)果，C為使用純水的反應(yīng)溶液(對照組)的結(jié)果。此時，氧消耗量少者則顯示出抑制環(huán)氧酶活性。由圖3可知，添加2,5-二乙酰氧基苯甲酸的情形若與添加純水的情形(對照組)相比較，則隨著時間的變化而氧消耗量的增加特別少，可知2,5-二乙酰氧基苯甲酸具有顯著的環(huán)氧酶活性抑制作用。試驗例4刺激性將培養(yǎng)的兔角膜細(xì)胞(STRC-C)以5000個/孔接種至96孔微平板(CORNING公司制)，以含有5體積％胎牛血清(FBS)的Eagle最少需求培養(yǎng)基(MEM)于37℃、5％CO2條件下預(yù)培養(yǎng)1天后，添加含有0.05％中性紅的Eagle最少需求培養(yǎng)基(MEM)0.2毫升，并于同條件下培養(yǎng)2天。再添加作為試樣的0.025w/v％(10.5mM)、0.05w/v％(21mM)、0.1w/v％(42mM)或0.2w/v％(84mM)2,5-二乙酰氧基苯甲酸，并于37℃、5％CO2條件下培養(yǎng)2天，取得培養(yǎng)試樣。分別準(zhǔn)備添加30μg/ml、60μg/ml或90μg/ml十二烷基硫酸鈉代替2,5-二乙酰氧基苯甲酸或無添加任何物質(zhì)的培養(yǎng)試樣(對照組)作為比較對照試樣。將所得的各培養(yǎng)試樣以眼粘膜剌激性試驗的代替法-測定SIRC-C中性紅吸收量的方法，從中性紅吸收率算出NR50值并評價刺激性。各培養(yǎng)試樣的中性紅吸收率見表1。表1中，DABA表示2,5-二乙酰氧基苯甲酸。SDS表示十二基硫酸鈉。又，由于中性紅的吸收量隨著試樣對STRC-C的刺激性變大而減少，故該吸收量為對照組的一半，即吸收率為0.5時隨著試樣濃度(NR50)升高，顯示出對細(xì)胞的刺激性降低。表1</tables>如表1所示，十二烷基硫酸鈉的濃度為30μg/ml時，中性紅的吸收率為0.943,60μg/ml時為0.389，故十二烷基硫酸鈉對SIRC-C的NR50值約為60μg/ml，在同樣條件下，如表1所示，2,5-二乙酰氧基苯甲酸濃度為0.025w/v％時，其吸收率為0.993，0.1～0.2w/v％時的吸收率為0.708～0.145，故NR50值為0.1～0.2w/v％時(42～84mM)，即1000-2000μg/ml。因此可知，與十二烷基硫酸鈉相比較，2,5-二乙酰氧基苯甲酸對細(xì)胞的刺激性極低。試驗例5使用下式所示化合物作為2,5-二羥基苯甲酸衍生物同與試驗例2同樣地處理并檢測該化合物的細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性抑制作用。但，試樣的評價濃度為2.5mM，且試樣添加到溶解于二甲基亞砜的培養(yǎng)基中。又，使用添加二甲基亞砜者作為對照組。試驗結(jié)果見圖4(多巴值)及圖5(MTT值)。由圖4和圖5，可判定上述化合物抑制細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性有統(tǒng)計學(xué)意義，另一方面，對細(xì)胞活性則無抑制。配方例1～23及比較配方例1下面給出配合2,5-二羥基苯甲酸衍生物的各種化妝料的配方例及作為配方例1～9的對照的比較配方例1。配方例1～23中所用的2,5-二羥基苯甲酸衍生物為如下所示?；衔?化合物2化合物3化合物4化合物5化合物6化合物7配方例1(乳霜)[(A)成分](份)液體石蠟5.0Hexalan(Tecnobul公司制、甘油三辛酸酯)4.0石蠟5.0鯨蠟醇2.0單硬脂酸甘油酯2.0聚氧乙烯(20)山梨糖醇酐單硬脂酸酯6.0對羥基苯甲酸丁酯0.1[(B)成分]化合物15.0甘油5.0羧甲基纖維素鈉0.1對羥基苯甲酸甲酯0.1Moiston·C(商品名、Tecnobul公司制、NMF成分)1.0純水使全量為100.0份的量[(C)成分]香料適量將前述(A)成分及(B)成分各于80℃以上加溫后，將(A)成分及(B)成分混合攪拌。冷卻至50℃后，加入前述(C)成分并再攪拌混合配制成均勻的乳霜。配方例2(乳霜)在配方例1中，除了使用1.0份化合物2代替5.0份化合物1以外，與配方例1同樣處理，配制成均勻的乳霜。配方例3(乳霜)在配方例1中，除了使用0.5份化合物2及0.5份化合物3代替5.0份化合物1以外，與配方例1同樣處理，配制成均勻的乳霜。配方例4(乳霜)在配方例1中，除了使用1.0份化合物4及1.0份化合物5代替5.0份化合物1以外，與配方例1同樣處理，配制成均勻的乳霜。配方例5(乳霜)在配方例1中，除了使用0.1份化合物6代替5.0份化合物1以外，與配方例1同樣處理，配制成均勻的乳霜。配方例6(乳霜)在配方例2中，除了再使用磷酸L-抗壞血酸鎂1.0份作為(B)成分以外，與配方例2同樣處理，配制成均勻的乳霜。配方例7(乳霜)在配方例2中，除了再使用甘草酸二鉀1.0份作為(B)成分以外，與配方例2同樣處理，配制成均勻的乳霜。配方例8(乳霜)在配方例2中，除了再使用麴酸0.5份及甘草酸二鉀0.5份作為(B)成分以外，與配方例2同樣處理，配制成均勻的乳霜。配方例9(乳霜)在配方例1中，除了使用1.0份化合物7代替5.0份化合物1以外，與配方例同樣處理，配制成均勻的乳霜。比較配方例1(乳霜)在配方例1中，除了使用純水代替化合物1以外，與配方例1同樣處理，配制成乳霜。配方例10(乳液)[(A)成分](份)液體石蠟6.00Hexalan(Tecnobul公司制、甘油三辛酸酯)4.00荷荷巴油1.00聚氧乙烯(20)山梨糖醇酐單硬脂酸酯2.00大豆卵磷酯2.50對羥基苯甲酸甲酯0.15對羥基苯甲酸乙酯0.03[(B)成分]化合物22.00甘油3.001,3-丁二醇2.00羧甲基纖維素鈉0.30玻璃糖醛酸鈉0.01純水使全量為100.00份的量[(C)成分]香料適量將前述(A)成分及(B)成分各于80℃以上加溫后，將(A)成分及(B)成分混合攪拌。冷卻至50后，加入前述(C)成分并再攪拌混合配制成均勻的乳液。配方例11(乳液)在配方例10中，除了使用0.50份化合物2及0.20份化合物5代替2.00份化合物2以外，與配方例9同樣處理，配制成均勻的乳液。配方例12(乳液)在配方例10中，除了使用0.50份化合物7代替2.00份化合物2以外，與配方例10同樣處理，配制成均勻的乳液。配方例13(化妝水)[成分](份)乙醇10.0甘油3.01,3-丁二醇2.0對羥基苯甲酸甲酯0.2檸檬酸0.1檸檬酸鈉0.3羧乙烯基聚合物0.1化合物21.0香料微量純水使全量為100.00份的量將前述成分混合配制成均勻的化妝水。配方例14(化妝水)在配方例13中，除了再使用磷酸L-抗壞血酸鎂0.5份以外，與配方例13同樣處理，配制成均勻的化妝水。配方例15(潤膚膏)[成分](份)聚乙烯醇15.0羥甲基纖維素5.0丙二醇5.0乙醇10.0對羥基苯甲酸甲酯0.1化合物20.5香料適量純水使全量為100.00份的量將前述成分混合配制成均勻的潤膚膏。配方例16(潤膚膏)在配方例15中，除了再使用消炎痛0.5份以外，與配方例15同樣處理，配制成均勻的潤膚膏。配方例17(洗面皂)[成分](份)硬脂酸15.0月桂酸5.0肉豆蔻酸15.0單硬脂酸甘油酯4.0氫氧化鉀7.0甘油8.0化合物10.2化合物21.0對羥基苯甲酸甲酯0.2純水使全量為100.00份的量將前述成分于85℃加溫混合，配制成均勻的洗面皂。配方例18(口紅)[(A)成分](份)蓖麻油50.0辛基十二烷醇5.0含水羊毛酯5.0液狀含水羊毛脂5.0蜜蠟4.0地蠟7.0小燭樹蠟2.0巴西樹蠟1.0[(B)成分]化合物20.3氧化鈦1.0色素(紅色201號等)合計4.0[(C)成分]香料適量將前述(A)成分及(B)成分各加溫后，將(A)成分及(B)成分混合攪拌。將其再加溫，添加前述(C)成分并流入模型中，急冷，配制成口紅。配方例19(粉底液)[(A)成分](份)硬脂酸2.4單硬脂酸丙二醇2.0鯨蠟硬脂醇0.2液狀含水羊毛脂2.0液體石蠟3.0肉豆蔻酸異丙酯8.5對羥基苯甲酸丙酯適量[(B)成分]羧甲基纖維素鈉0.2膨潤土0.5丙二醇4.0三乙醇胺1.1對羥甲基苯甲酸甲酯適量化合物21.0純水使全量為100.00份的量[(C)成分]氧化鈦8.0滑石4.0著色顏料適量將前述(A)成分及(B)成分各加溫后，將(A)成份及(B)成分混合攪拌。將其再加溫。添加前述(C)成分并流入模型中，并令其冷至室溫為止，攪拌混合，配制成均勻的粉底液。配方例20(粉底液)在配方例19中，除了使用化合物5代替化合物2、再以熊果苷0.5份及麴酸0.5份作為(B)成分以外，與配方例19同樣處理，配制成均勻的粉底液。配方例21(沐浴用劑)[成分](份)硫酸鈉37.0碳酸氫鈉55.0硼砂2.0羧甲基纖維素鈉1.0色素201號微量香料微量化合物25.0將前述成分混合，配制成均勻的沐浴用劑。配方例22(肥皂)[成分](份)牛脂/椰子油肥皂(重量比80/20)66.0二月桂基磷酸鈉2.0單月桂基磷酸鈉17.0椰子酰胺丙基甜菜堿10.0化合物22.0化合物43.0將前述成分混合，配制成均勻的肥皂。配方例23(肥皂)在配方例22中，除了將化合物4的使用量改成1.5份、再使用尿囊素1.5份以外，與配方例22同樣處理，配制成均勻的肥皂。其次，對于配方例及比較配方例所得的化妝料，進行以下各實施例。實施例1使用配方例1、2、3、7及9所得的乳霜及比較配方例1所得的乳霜，調(diào)查其對日常生活中皮膚色素沉著的抑制作用。隨機抽取20～60歲的健康成年男女20名作為受試者，將各乳霜0.05克以1天1次分別在腋下部位涂布1個月左右，目視觀察各受驗者腋下部位的色素沉著狀態(tài)，并依據(jù)以下評價標(biāo)準(zhǔn)進行評價。其結(jié)果示于表2。(評價標(biāo)準(zhǔn))A無色素沉著。B色素沉著明顯變少。C比使用乳霜前色素沉著還少。D與使用乳霜前幾乎無變化。E反而比使用乳霜前色素沉著還多。表2如表2所示，未配合本發(fā)明所用的2,5-二羥基苯甲酸衍生物的比較配方例1所得乳霜，幾乎無法抑制色素沉著，相反地在使用配方例1、2、3及7所得乳霜的情形下，色素沉著變無或變少。因此，可知配方例1、2、3及7所得乳霜產(chǎn)生優(yōu)異的色素沉著抑制效果。而且，實施例1中，在涂布配方例1、2、3、7及9所得乳霜時，受試者無一產(chǎn)生皮膚異常。實施例2使用配方例1、2、3、7及9所得乳霜及比較配方例1所得乳霜，調(diào)查其對于紫外線照射所引起的紅斑產(chǎn)生及色素沉著的抑制效果。隨機抽取20～60歲健康成年男女20名作為受試者，在其前腕內(nèi)側(cè)部設(shè)定2處1公分×1公分的紫外線照射部。使用UV-B燈((株)東芝制，F(xiàn)L20-SE)，將相當(dāng)于事先所測定的各受試者最小紅斑量(MED)的紫外線量以1天1次(早)，連續(xù)照射3天。從紫外線照射開始日起連續(xù)進行1個月試驗，紫外線照射期間(最初3天)在紫外線照射后立即及傍晚(1天2次)、紫外線照射期間過后(4天之后)為在早及傍晚(1天2次)，于各紫外線照射部將配方例1、2、3、7及9所得的乳霜及比較配方例1所得的乳霜各涂布約0.025克。經(jīng)過1個月后，肉眼觀察各受試者紫外線照射部紅斑發(fā)生狀態(tài)及色素沉著狀態(tài)，且對于紅斑的發(fā)生和色素沉著的抑制效果按以下評價標(biāo)準(zhǔn)進行評價。其結(jié)果示于表3。(評價標(biāo)準(zhǔn))A無紅斑發(fā)生及色素沉著。B紅斑發(fā)生及色素沉淀明顯變少。C比使用乳霜前紅斑發(fā)生及色素沉淀還少。D與使用乳霜前幾乎無變化。E反而比使用乳霜前的紅斑發(fā)生及色素沉淀還多。表3如表3所示，未配合本發(fā)明所用的2,5-二羥基苯甲酸衍生物的比較配方例1所得乳霜，幾乎無法抑制紅斑發(fā)生和色素沉淀，相反地在使用配方例1、2、3、7和9所得乳霜的情形下，則紅斑發(fā)生及色素沉淀變無或變少。由此，可知配方例1、2、3、7及9所得乳霜產(chǎn)生優(yōu)異的紅斑發(fā)生及色素沉淀抑制效果。而且，實施例2中，在涂布配方例1、2、3、7及9所得乳霜時，受試者無一產(chǎn)生皮膚異常。實施例3使用配方例1、2、3、7及9所得乳霜及比較配方例1所得乳霜，調(diào)查保濕效果。隨機抽取20～60歲健康成年男女20名作為受試者，將各乳霜0.05克以1天2次分別涂布于前腕內(nèi)側(cè)部1個月左右后，使用阻抗計(SKICON200,IBS公司制)測定各受試者前腕內(nèi)側(cè)部的皮膚水分量，并按以下評價標(biāo)準(zhǔn)進行評價。其結(jié)果見表4。(評價標(biāo)準(zhǔn))A比涂布乳霜前，水分量增多至50重量％以上。B比涂布乳霜前，水分量增多至20重量％以上，未滿50重量％。C比涂布乳霜前，水分量增多至10重量％以上，未滿20重量％。D比涂布乳霜前，水分量僅增多至未滿10重量％或者幾乎無變化。E反而比涂布乳霜前水分量減少。表4>如表4所示，未配合本發(fā)明所用2,5-二羥基苯甲酸衍生物的比較配方例1所得乳霜，幾乎無法表現(xiàn)保濕效果。相反，使用配方例1、2、3、7及9所得乳霜的情形中，則皮膚水分量增高至10-25重量％。由此，可知配方例1、2、3、7及9所得乳霜滋潤肌膚并產(chǎn)生優(yōu)異的保濕效果。而且，實施例3中，涂布配方例1、2、3、7及9所得乳霜時，受試者無一產(chǎn)生皮膚異常。又，配方例1、2、3、7及9所得乳霜于1個月期間，其狀態(tài)未發(fā)生變化。發(fā)明的效果通式(Ⅰ)所示2.5-二羥基苯甲酸衍生物幾乎不抑制細(xì)胞活性，而使作為美白效果指標(biāo)的色素細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性降低，且阻礙酪氨酸酶酶蛋白合成并抑制黑色素生成，抑制因紫外線照射所產(chǎn)生的紅斑及色素沉著，此外還同時呈現(xiàn)出作為抗炎癥作用指標(biāo)的環(huán)氧酶活性降低，使皮膚水分量增加并提高保濕性的優(yōu)異作用。因此，配合前述2，5-二羥基苯甲酸衍生物的本發(fā)明化妝料抑制因黑色素蓄積所造成的褐斑、雀斑的出現(xiàn)、抑制炎癥的發(fā)生并改善肌膚狀態(tài)、滋潤肌膚并改善肌質(zhì)、且維持白晰美麗的肌膚，從而有肋于產(chǎn)生防止衰老的效果。又，本發(fā)明的化妝料除了產(chǎn)生如前述的優(yōu)異的美白效果、抗炎癥作用及保濕效果、及以其為基礎(chǔ)的優(yōu)異的防止衰老效果外，并且刺激性低、對皮膚等安全性優(yōu)異，而且穩(wěn)定性也好。權(quán)利要求1．一種化妝料，其為配合通式(Ⅰ)所示2,5-二羥基苯甲酸衍生物式中R1為氫原子、C1-20為烷基、C7-9芳烷基、堿金屬原子或堿土金屬原子R2及R3分別獨立表示為氫原子，通式-COR4所示基團，其中，R4為C1-5烷基、C1-3烯基、甲氧基、乙氧基、但，R6為氫原子或C1-3烷基，或磷?；?，但R2及R3不同時為氫原子。2．如權(quán)利要求1所述的化妝料，其中2,5-二羥基苯甲酸衍生物選自2-乙酰氧基-5-羥基苯甲酸、2,5-二乙酰氧基苯甲酸、2-羥基-5-丙酰氧基苯甲酸、2,5-二乙酰氧基苯甲酸、2-丙酰氧基-5-羥基苯甲酸、2-羥基-5-乙酰氧基苯甲酸甲酯，或2-(2′,5′-二乙酰氧基苯甲酰氧基)苯甲酸甲酯。全文摘要提供通過抑制黑色素生成和紅斑發(fā)生、并抑制炎癥發(fā)生、提高保濕性,而有助于肌質(zhì)改善及防止衰老,且刺激性低,穩(wěn)定性亦優(yōu)異的化妝料。此化妝料為含有通式(Ⅰ)所示2,5－二羥基苯甲酸衍生物:[式中,R文檔編號A61K8/30GK1219118SQ97194319公開日1999年6月9日申請日期1997年4月30日優(yōu)先權(quán)日1996年5月2日發(fā)明者澤木茂,山田勝久,內(nèi)藤和文申請人:株式會社德庫諾布耳