專(zhuān)利名稱(chēng)：：氟化維生素d的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及維生素D3類(lèi)似物，特別是式I的維生素D3的16-烯-23-炔-三氟類(lèi)似物，其中R是氫，氟或羥基，X是＝CH2，或當(dāng)R是羥基時(shí)X是氫或＝CH2。式I化合物可以誘導(dǎo)分化作用并抑制各種皮膚和癌細(xì)胞系的增生。因此，式I化合物可用作增生過(guò)度的皮膚病如牛皮癬的治療劑。式I化合物還可以治療腫瘤病如白血病和皮脂腺疾病如皰疹或皮脂溢性皮炎。本發(fā)明還涉及含有式I化合物的藥物組合物以及使用式I化合物治療上述疾病的方法。在優(yōu)選實(shí)例中R是羥基。本發(fā)明一個(gè)實(shí)例是含有下式差向異構(gòu)體的混合物，其中R和X如上所述。式I化合物按下述流程I-II和實(shí)施例所述制備。流程圖I在上面流程圖I中，已知的式II化合物[3aS，[3(S*)，3aα，7α，7aβ]-[[3a，4，5，6，7，7a-六氫-3α-甲基-3-(1-甲基-3-丁炔基)-1H-茚-7-基]氧基]-三甲基硅烷通過(guò)與正丁基鋰和三氟丙酮在醚溶劑如四氫呋喃中反應(yīng)被轉(zhuǎn)化成式III化合物。反應(yīng)在-100-0℃，優(yōu)選-78℃進(jìn)行。式III化合物通過(guò)與氟化四丁基銨在醚溶劑如四氫呋喃中反應(yīng)被轉(zhuǎn)化成式IV化合物。反應(yīng)在0-50℃，優(yōu)選在室溫和氬氣中進(jìn)行。式IV化合物通過(guò)與重鉻酸吡啶鎓和對(duì)甲苯磺酸吡啶鎓在氯代烴溶劑如二氯甲烷中反應(yīng)轉(zhuǎn)化成式V化合物。式V化合物通過(guò)與三甲基甲硅烷基咪唑在氯代烴溶劑如二氯甲烷中反應(yīng)轉(zhuǎn)化成式VI化合物。優(yōu)選地，反應(yīng)在氬氣中進(jìn)行。流程圖II在上面流程圖II中，通過(guò)將式VI化合物與[3S，(1Z，3α，5β)]-[2-[3，5-雙[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-2-亞甲基亞環(huán)己基]乙基]二苯基氧化膦在四氫呋喃中，優(yōu)選在氬氣和作為堿的正丁基鋰存在下反應(yīng)，接著用氟化四丁基銨在四氫呋喃溶劑中除去保護(hù)基甲硅烷基，使式VI化合物轉(zhuǎn)化成式Ib化合物。或者，將式VI化合物與[3R，(3α，5β，Z)-[3，5-雙[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]亞環(huán)己基]乙基]二苯基氧化膦在四氫呋喃中，優(yōu)選在氬氣下反應(yīng)，接著除去保護(hù)基甲硅烷基，形成式Ic化合物?；蛘?，將式VI化合物與[3S，(3α，5β，Z)-2-[2-亞甲基-3-氟-5-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]亞環(huán)己基]乙基]二苯基氧化膦在四氫呋喃中，優(yōu)選在氬氣中反應(yīng)，接著除去保護(hù)基甲硅烷基，形成式Id化合物?；蛘撸瑢⑹絍I化合物與[5S，Z-2-[2-[2-亞甲基-5-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]亞環(huán)己基]乙基]二苯基氧化膦在四氫呋喃中，優(yōu)選在氬氣中反應(yīng)，接著除去保護(hù)基甲硅烷基，形成式Ie化合物。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的任何常用方法均可用于制備式I化合物的任何步驟，將差向異構(gòu)體混合物分離成(R)或(S)差向異構(gòu)體。因此，本發(fā)明涉及式I化合物代表的(25R)和(25S)差向異構(gòu)體的混合物，以及各(25R)及(25S)差向異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體。式I化合物可以口服，例如，采用片劑，包衣片劑，糖錠劑，硬或軟明膠膠囊劑，溶液，乳液或懸浮液，但也可以采用直腸給藥如使用栓劑，或非腸道給藥如使用注射液。本發(fā)明組合物是用藥用惰性無(wú)機(jī)或有機(jī)賦形劑制成片劑，包衣片劑，糖錠劑和硬明膠膠囊。乳糖，玉米淀粉或其衍生物，滑石，硬脂酸或其鹽等均可用作賦形劑，例如可適用于片劑，糖錠劑和硬明膠膠囊。適用于軟明膠膠囊的賦形劑有，例如，植物油，石蠟，脂肪，半固體和液體多元醇等；根據(jù)活性成分的性質(zhì)來(lái)選用。然而，軟明膠膠囊劑通常不需要任何賦形劑。適用于溶液和糖漿制劑的賦形劑有，例如，水，多元醇，蔗糖，轉(zhuǎn)化糖和葡萄糖。適用于注射液的賦形劑有，例如，水，醇類(lèi)，多元醇，甘油，植物油等。適用于栓劑的賦形劑有，例如，天然或硬化油，石蠟，脂肪，半液體和液體多元醇等。而且，該藥物制劑還可以包含防腐劑，增溶劑，穩(wěn)定劑，濕潤(rùn)劑，乳化劑，甜味劑，著色劑，調(diào)味劑，調(diào)節(jié)滲透壓的鹽類(lèi)，緩沖劑，掩蔽劑或抗氧化劑。對(duì)于治療腫瘤病如白血病，可以給需要這種治療的溫血?jiǎng)游锟诜蜃⑸渖鲜鍪絀化合物。更具體地，給需要治療腫瘤病如白血病的成年人以每天約0.25-50μg的劑量口服上述式I化合物。對(duì)于治療增生過(guò)度的皮膚病如牛皮癬，基底細(xì)胞癌，角質(zhì)化失常和角化病，可以給需要這種治療的溫血?jiǎng)游锟诜鲜鍪絀化合物。更具體地，給需要治療增生過(guò)度皮膚病如牛皮癬，基底細(xì)胞癌，角質(zhì)化失常和角化病的成年人以每天約0.25-50μg的劑量口服上述式I化合物。對(duì)于治療人體皰疹，可以每天約0.25-50μg，優(yōu)選0.5-5μg/天的劑量口服這些化合物。對(duì)于治療增生過(guò)度的皮膚病如牛皮癬，基底細(xì)胞癌，角質(zhì)化失常和角化病，也可以給需要這種治療的溫血?jiǎng)游镌谄つw表面施用上述式I化合物。更具體地，對(duì)于治療增生過(guò)度皮膚病如牛皮癬，基底細(xì)胞癌，角質(zhì)化失常和角化病，以每天每克表面制劑其中含有約0.5-100μg活性成分的劑量表面施用上述式I化合物。對(duì)于治療皮脂腺疾病如皰疹或皮脂溢性皮炎，也可以以每天每克表面制劑其中含有約0.5-100mg活性成分的劑量表面施用上述式I化合物。式I化合物作為治療腫瘤病藥劑的實(shí)用性可用下列實(shí)驗(yàn)說(shuō)明。HL-60細(xì)胞分化誘發(fā)HL-60細(xì)胞分化是通過(guò)在NBT(氮藍(lán)四唑)還原反應(yīng)中測(cè)量氧化突現(xiàn)電位(oxidativeburstpotential)測(cè)定的。將HL-60細(xì)胞保持于由下列物質(zhì)組成的RPMI1640培養(yǎng)基中10％FCS，2mML-谷氨酰胺，1mM丙酮酸鈉，1％非必需氨基酸，50U/ml青霉素和50μg/ml鏈霉素(＝RPMI/FCS)。將30,000細(xì)胞/90μlRPMI/FCS接種于平底微滴定孔中。同時(shí)加入用上述培養(yǎng)基稀釋過(guò)的10μl維生素D衍生物，使此時(shí)最終濃度達(dá)到10-11-10-6M(以10-2M的乙醇溶液形式于-20℃并避光保存)。3天后用一個(gè)多路吸移管移出培養(yǎng)基，并用100μlNBT溶液[在1mg/mlPBS中含有200mM佛波醇肉豆蔻酸酯乙酸鹽(PMA)]取而代之。在37℃培養(yǎng)1小時(shí)后除去NBT溶液，并加入100μl10％SDS溶于0.01NHCl中的溶液。還原的NBT量用自動(dòng)平板讀數(shù)儀在540nm處進(jìn)行分光法定量分析。計(jì)算3個(gè)孔的平均值。S.E.M.在5-10％之間。各值被表示為在相同實(shí)驗(yàn)條件下最大分化過(guò)程達(dá)到100-1000nMcalcitriol的百分?jǐn)?shù)。描繪出導(dǎo)致這個(gè)最大值的50％的濃度(nM)曲線，并在下面表I中用ED50表示。表I式I化合物作為治療增生過(guò)度的皮膚病藥劑的實(shí)用性描述如下。皮脂腺增生的抑制HaCaT細(xì)胞系-使用無(wú)限增殖化人體細(xì)胞系HaCaT。3H-胸苷結(jié)合性的測(cè)量在有試驗(yàn)化合物存在并在培養(yǎng)基中培養(yǎng)6天后細(xì)胞正在迅猛成長(zhǎng)時(shí)進(jìn)行。細(xì)胞培養(yǎng)-將HaCaT細(xì)胞在含有4.5h/l葡萄糖并補(bǔ)充10％胎牛血清(Gibco，F(xiàn)CS)，L-谷氨酰胺(Gibco，2mM)，青霉素(Gibco，50UI/ml)，鏈霉素(Gibco，50μg/ml)，EGF(10ng/ml)，氫化可的松(400ng/ml)，霍亂毒素(8.5ng/ml)和胰島素(5ng/ml)的DulbeccosModifiedEagleMedium(DMEM)和NutrientMixtureHamsF12(F12)[3∶1(v/v，ICN)]中培養(yǎng)。細(xì)胞保持在含有5％CO2和95％空氣的潮濕氣氛中，并且每3-4天通氣一次。3H-胸苷攝入的抑制-將HaCaT細(xì)胞(全部培養(yǎng)基中有250個(gè)細(xì)胞)接種于96孔培養(yǎng)盤(pán)中，并在37℃的5％CO2和95％空氣的氣氛中培養(yǎng)6天。將抑制劑溶解于1％乙醇稀釋10倍，并在測(cè)定開(kāi)始時(shí)加入。以1μCi/孔的濃度加入3H-胸苷(5Ci/mol，Amersham)，記錄生長(zhǎng)期最后6小時(shí)細(xì)胞放出的脈沖個(gè)數(shù)。將細(xì)胞在37℃和劇烈攪拌的情況下胰蛋白酶化，然后用MicroMate196細(xì)胞收集器(Packard)收集到96孔GF/C過(guò)濾板(UniFilter，Packard)上。在40℃真空干燥20-30分鐘后加入2μlMicroScint0閃爍劑(Packard)，過(guò)濾板上的放射性在TOPCOUNT(Packard)上進(jìn)行計(jì)數(shù)測(cè)量。用IC50表示的測(cè)量結(jié)果列于下面表II。表II化合物IC50(nM)1，25(R，S)-二羥基-16-烯-23-炔-26-三氟-膽鈣化甾醇10.01，25(R，S)-二羥基-16-烯-23-炔-26-三氟-19-降膽鈣化甾醇5.11α-氟-25(R，S)-羥基-16-烯-23-炔-26-三氟-膽鈣化甾醇11.025(R，S)-羥基-16-烯-23-炔-26-三氟-膽鈣化甾醇650.00</table>式I化合物作為治療皮脂腺疾病藥劑的實(shí)用性描述如下。體外人體皮脂(sebocyte)增生的抑制結(jié)合酶的和機(jī)械的方法(Doran等人，CharacterizationofHumanCellsInVitro，皮膚研究雜志(J.Invest.Dermatol.)9634-8(1991))從成年人皮脂腺分離出皮脂細(xì)胞。將這些細(xì)胞在含有10％胎牛血清和4μg/ml地塞米松的Iscove培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)是在生長(zhǎng)停滯的3T3鼠成纖維細(xì)胞層上進(jìn)行的。將這些細(xì)胞平放在沒(méi)有試驗(yàn)化合物的培養(yǎng)基中，然后每48小時(shí)向含有試驗(yàn)化合物的新培養(yǎng)基中放入細(xì)胞。在收獲當(dāng)天，用含有0.03％EDTA的PBS漂洗培養(yǎng)物，目的只是為了除去3T3成纖維細(xì)胞，然后在0.05％胰蛋白酶/0.03％EDTA中培養(yǎng)。細(xì)胞呈懸浮狀，劇烈混合制成單個(gè)細(xì)胞懸浮液并用血球計(jì)計(jì)數(shù)?；衔锏膬?chǔ)藏溶液是制成在脫氣的100％乙醇中的10-2M溶液，并于-20℃黑暗中保存。實(shí)驗(yàn)中所用溶液已經(jīng)被等分，并被升至室溫，并直接在上述培養(yǎng)基中稀釋成適當(dāng)濃度后使用。用于體外皮脂細(xì)胞生長(zhǎng)增生抑制試驗(yàn)的化合物濃度為10-6，10-7和10-8M。匯總于下面表III的結(jié)果為抑制皮脂細(xì)胞增生所需的化合物數(shù)量，用相對(duì)于處理的載體培養(yǎng)物的50％(ED50)nM表示。表III</tables>對(duì)鈣的作用(鼠的耐受試驗(yàn))鈣的體內(nèi)平衡方面的巨大變化會(huì)極大地影響動(dòng)物體重的增長(zhǎng)。該參數(shù)被用作耐受性的主要參數(shù)。使小鼠(體重25-30g)每日接受維生素D衍生物皮下給藥連續(xù)4天。在治療期的第5天結(jié)束前和結(jié)束時(shí)登記鼠的體重?！白罡吣褪軇┝?HTD)”是在此治療期間體重增加為零的劑量。其結(jié)果列于下面表IV。表IV下列實(shí)施例用以進(jìn)一步描述本發(fā)明而非在任何方面限制本發(fā)明。實(shí)施例1[3aS-[3(1S*)，3aa，7a，7ab]]-1，1，1-三氟-6-[3a，4，5，6，7，7a-六氫-3a-甲基-7-(三甲基甲硅烷基)氧基-1H-茚-3-基]-2-甲基-3-庚炔-2-醇(表異構(gòu)體)在-78℃攪拌下向1.1g(3.80mmol)[3aS，[3(S*)，3aa，7a，7ab]]-[[3a，4，5，6，7，7a-六氫-3a-甲基-3-(1-甲基-3-丁炔基)-1H-茚-7-基]氧基]-三乙基甲硅烷的20ml無(wú)水四氫呋喃溶液中加入2.61ml(4.18mmol)1.6M正丁基鋰。攪拌1小時(shí)后加入0.68ml(7.6mmol)1，1，1-三氟丙酮，然后將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌1小時(shí)。用飽和鹽水終止反應(yīng)，并升至室溫。用水稀釋后用乙酸乙酯萃取。合并的萃取液用水洗滌，硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠柱上用FLASH色譜純化，己烷∶乙酸乙酯＝20∶1洗脫，得到1.47g(96.5％)非晶形標(biāo)題化合物。實(shí)施例2[3aS-[3(1S*)，3aa，7a，7ab]]-3a，4，5，6，7，7a-六氫-3a-甲基-3-(6，6，6-三氟-5-羥基-1，5-二甲基-3-己炔基)-1H-茚-7-醇(表異構(gòu)體)在室溫和氬氣氛中向攪拌的1.47g(3.65mmol)[3aS-[3(1S*)，3aa，7a，7ab]]-1，1，1-三氟-6-[3a，4，5，6，7，7a-六氫-3a-甲基-7-(三甲基甲硅烷基)氧基-1H-茚-3-基]-2-甲基-3-庚炔-2-醇(表異構(gòu)體)的15ml無(wú)水四氫呋喃溶液中加入8ml(8.0mmol)1M氟化四丁基銨。將反應(yīng)混合物攪拌1.5小時(shí)，然后加冰終止反應(yīng)。用水稀釋后用乙酸乙酯萃取。合并的萃取液用2N碳酸氫鉀洗滌，加水使混合物pH呈中性，加鹽水，硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠柱上用FLASH色譜純化，己烷∶乙酸乙酯＝2∶1洗脫，得到1.2g(100％)結(jié)晶狀標(biāo)題化合物。m.p.78-80℃，[a]+20.4°(c0.5，乙醇(“EtOH“)；1H-NMR(CDCl3)d1.07(s，3H，CH3)，1.09(d，3H，J+6.5Hz，CH3)，1.40(dt，1H，Jvic＝3and12.5Hz，Jgem＝12.5Hz，CHofCH2)，1.58(s，3H，CH3)，1.71-1.98(m，5H)，2.00(m，1H，Jvic＝3and7Hz，Jgem＝14.5Hz，CHofCH2)，2.23-2.45(m，5H)；4.19(brs，1H，CH)，5.40(brm，1H，CH)；元素分析C18H25F3O2計(jì)算值C，65.49；H，7.63；實(shí)測(cè)值C，65.59；H，7.77；實(shí)施例3[3aR-[1(R*)，3aa，7ab]]-3a，4，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-(6，6，6-三氟-5-羥基-1，5-二甲基-3-己炔基)-4H-茚-4-酮(表異構(gòu)體)向攪拌的300mg(0.91mmol)[3aS-[3(1S*)，3aa，7a，7ab]]-3a，4，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-(6，6，6-三氟-5-羥基-1，5-二甲基-3-己炔基)-1H-茚-7-醇(表異構(gòu)體)的8ml無(wú)水二氯甲烷溶液中加入1.402g(3.73mmol)重鉻酸吡啶鎓和70mg對(duì)甲苯磺酸吡啶鎓。將反應(yīng)混合物攪拌4小時(shí)，加入20ml乙醚，攪拌20分鐘，然后用硅藻土(Celite)過(guò)濾。Celite塞用3×50ml乙醚洗滌。合并的濾液依次用20ml冰冷的1NHCl，水，2NKHCO3(40ml)和水及鹽水洗滌。水相用2×100ml乙醚-乙酸乙酯(1∶1)萃取，有機(jī)相用硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠柱上用FLASH色譜純化，己烷∶乙酸乙酯＝3∶1洗脫，得到272mg(91.2％)非晶形標(biāo)題化合物。實(shí)施例4[3aR-[1(1R*)，3aa，7ab]]-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-[6，6，6-三氟-1，5-二甲基-5-[(三甲基甲硅烷基)氧基]-3-己炔基]-4H-茚-4-酮(表異構(gòu)體)氬氣氛中向攪拌的272mg(0.828mmol)[3aR-[1(R*)，3aa，7ab]]-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-(6，6，6-三氟-5-羥基-1，5-二甲基-3-己炔基)-4H-茚-4-酮(表異構(gòu)體)的6ml無(wú)水二氯甲烷溶液中加入0.79g(5.38mmol)三甲基甲硅烷基-咪唑。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?.5小時(shí)，然后用7ml水終止反應(yīng)。持續(xù)攪拌30分鐘后用3×120ml乙酸乙酯萃取。有機(jī)相用水和鹽水混合物洗滌5次，硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠柱上用FLASH色譜純化，己烷∶乙酸乙酯＝10∶1洗脫，得到314mg(94.6％)標(biāo)題化合物。實(shí)施例51，25(R，S)-二羥基-16-烯-23-炔-26-三氟-膽鈣化甾醇在-78℃的氬氣氛中向攪拌的730mg(1.25mmol)[3S-(1Z，3a，5b)]-[2-[3，5-雙[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-2-亞甲基亞環(huán)己基]乙基]二苯基氧化膦的7ml無(wú)水四氫呋喃溶液中滴加0.758ml(1.21mmol)1.6M正丁基鋰的己烷溶液。攪拌5分鐘后用10分鐘向產(chǎn)生的紅色溶液中滴加314mg(0.784mmol)[3aR-[1(1R*)，3aa，7ab]]-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-[6，6，6-三氟-1，5-二甲基-5-[(三甲基甲硅烷基)氧基]-3-己炔基]-4H-茚-4-酮(表異構(gòu)體)的5ml無(wú)水四氫呋喃溶液。將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌1.5小時(shí)，然后用10ml1∶1的2N羅謝爾鹽和2N碳酸氫鉀的混合物終止反應(yīng)。暖至室溫后再加入30ml羅謝爾鹽-碳酸氫鉀，并用3×130ml乙酸乙酯萃取。有機(jī)相用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠柱上用FLASH色譜純化，己烷∶乙酸乙酯＝40∶1洗脫，得到475mg三甲硅烷基化的標(biāo)題化合物。氬氣氛中向475mg三甲硅烷基化的中間體的7ml無(wú)水四氫呋喃溶液中加入4ml(4mmol)1M氟化四丁基銨的四氫呋喃溶液。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?7小時(shí)，然后加入2ml1M四丁基氟化銨并繼續(xù)攪拌5小時(shí)。用5ml水終止反應(yīng)，攪拌20分鐘后蒸餾除去四氫呋喃。剩余物用3×120ml乙酸乙酯萃取。有機(jī)相用水和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠柱上用FLASH色譜純化，己烷∶乙酸乙酯＝1∶35洗脫，得到270mg(74.1％)標(biāo)題化合物，為白色泡沫。+26°(c0.2，EtOH)；UV(EtOH)；lmax203nm(e17500)，263(14120)；1H-NMR(CDCl3)d0.72(s，3H，CH3)，1.13(d，3H，J＝6.5Hz，CH3)，1.58(s，3H，CH3)，1.92(ddd，1H，Jvic＝3.5and8.5Hz，Jgem＝13Hz，CHofCH2)，2.21(dd，1H，Jvic＝12Hz，Jgem＝14Hz，CHofCH2)，2.61(dd，1H，Jvic＝3Hz，Jgem＝13.5Hz，CHofCH2)，2.82(brm，1H，CHofCH2)，4.24(brm，1H，CH)，4.45(brm，1H，CH)，5.02，5.34(2s，2H，CH2)，5.39(brs，1H，CH)，6.11，6.38(AB，2H，J＝11.2Hz，2CH)。實(shí)施例61，25(R，S)-二羥基-16-烯-23-炔-26-三氟-19-降膽鈣化甾醇在-78℃的氬氣氛中向攪拌的630mg(1.1mmol)[3R-(3a，5b，Z)-[3，5-雙[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]亞環(huán)己基]乙基]二苯基氧化膦的7ml無(wú)水四氫呋喃溶液中滴加0.685ml(1.1mmol)1.6M正丁基鋰的己烷溶液。攪拌5分鐘后用5分鐘向產(chǎn)生的紅色溶液中滴加232mg(0.579mmol)[3aR-[1(1R*)，3aa，7ab]]-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-[6，6，6-三氟-1，5-二甲基-5-[(三甲基甲硅烷基)氧基]-3-己炔基]-4H-茚-4-酮(表異構(gòu)體)的2ml無(wú)水四氫呋喃溶液。將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌1.75小時(shí)，然后用10ml1∶1的2N碳酸氫鉀和2N羅謝爾鹽的混合物終止反應(yīng)。升至室溫后再加入30ml碳酸氫鉀-羅謝爾鹽，并用3×100ml乙酸乙酯萃取。合并的萃取液用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠柱上用FLASH色譜純化，己烷∶乙酸乙酯洗脫，得到145mg三甲硅烷基化的標(biāo)題化合物。氬氣氛中向145mg(0.19mmol)三甲硅烷基化的中間體的2.5ml無(wú)水四氫呋喃溶液中加入3ml(3mmol)1M氟化四丁基銨的四氫呋喃溶液。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?5小時(shí)，然后用5ml水終止反應(yīng)，攪拌15分鐘，再加入20ml鹽水，并用3×90ml乙酸乙酯萃取。合并的萃取液用水和鹽水混合物洗滌，硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠柱上用FLASH色譜純化，得到89mg(33.9％)標(biāo)題化合物，為白色泡沫。+76°(c0.2，EtOH)；UV(EtOH)；lmax242-243nm(e27,100)，250-251(31,800)，260(21,300)；1H-NMR(CDCl3)d0.72(s，3H，CH3)，1.13(d，3H，J＝6.3Hz，CH3)，1.59(s，3H，CH3)，1.97(m，1H)，2.07(m，1H，CHofCH2)，2.15-2.55(m，8H)，2.72-2.84(m，2H，2CHofCH2)，4.06(brm，1H，CH)，4.13(brm，1H，CH)，5.42(brs，1H，CH)，5.96，6.31(AB，2H，J＝11.1Hz，CHCH)。實(shí)施例71α-氟-25(R，S)-羥基-16-烯-23-炔-26-三氟-膽鈣化甾醇在-78℃的氬氣氛中向536mg(1.14mmol)[3S-(3a，5b，Z)-2-[2-亞甲基-3-氟-5-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]亞環(huán)己基]乙基]二苯基氧化膦的6ml無(wú)水四氫呋喃溶液中滴加0.71ml(1.14mmol)1.6M正丁基鋰的己烷溶液。攪拌5分鐘后用10分鐘向所得紅色溶液中滴加282mg(0.704mmol)[3aR-[1(1R*)，3aa，7ab]]-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-[6，6，6-三氟-1，5-二甲基-5-[(三甲基甲硅烷基)氧基]-3-庚炔基]-4H-茚-4-酮(表異構(gòu)體)的4.5ml無(wú)水四氫呋喃溶液。將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌2.5小時(shí)，然后用10ml2N羅謝爾鹽終止反應(yīng)，并暖至室溫。再用25ml2N羅謝爾鹽稀釋?zhuān)缓笥?×100ml乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠柱上用FLASH色譜純化，先用30∶1再用1∶4的己烷∶乙酸乙酯洗脫，得到380mg二甲硅烷基化的標(biāo)題化合物。氬氣氛中向380mg(0.582mmol)二甲硅烷基化的中間體的4ml無(wú)水四氫呋喃溶液中加入4ml(4mmol)1M氟化四丁基銨的四氫呋喃溶液。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?7小時(shí)，然后加入5ml水終止反應(yīng)，并攪拌15分鐘，加入20ml鹽水，并用3×90ml乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠柱上用FLASH色譜純化，己烷∶乙酸乙酯＝2∶1洗脫，然后在YMC-50mm×50cm硅膠柱上進(jìn)行HPLC，己烷∶乙酸乙酯＝3∶2洗脫，得到233mg(70.9％)標(biāo)題化合物為白色泡沫。+22.5°(c0.2，EtOH)；UV(EtOH)lmax242-243nm(e11,400)，268-269(11,050)；1H-NMR(CDCl3)d0.71(s，3H，CH3)，1.16(d，3H，J＝6.5Hz，CH3)，1.43-1.58(m，2H)，1.60(s，3H，CH3)，1.60-1.88(m，4H)，2.02(m，2H，CH2)，2.14-2.47(m，8H)，2.64(dd，Jvic＝3.8Hz，Jgem＝13.5Hz，CHofCH2)，2.82(m，1H，CHofCH2)，4.24(m，1H，CH)，5.12(s，1H，CHofCH2)，5.15(ddd，1H，J＝3.9，6.6Hz，JHF＝49.5Hz，CH)，5.41(s，2H，CHandCHofCH2)，6.12，6.40(AB，2H，J＝11.3Hz，CHCH)實(shí)施例825(R，S)-羥基-16-烯-23-炔-26-三氟-膽鈣化甾醇在-78℃的氬氣氛中向520mg(1.15mmol)[5S，Z-2-[2-[2-亞甲基-5-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]亞環(huán)己基]乙基]二苯基氧化膦的6ml無(wú)水四氫呋喃溶液中滴加0.715ml(1.14mmol)1.6M正丁基鋰的己烷溶液。攪拌5分鐘后用10分鐘向所得紅色溶液中滴加287mg(0.716mmol)[3aR-[1(1R*)，3aa，7ab]]-3，3a，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-1-[6，6，6-三氟-1，5-二甲基-5-[(三甲基甲硅烷基)氧基]-3-己炔基]-4H-茚-4-酮(表異構(gòu)體)的4ml無(wú)水四氫呋喃溶液。將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌2小時(shí)，然后用10ml2N羅謝爾鹽終止反應(yīng)，并暖至室溫。再用25ml2N羅謝爾鹽稀釋所得混合物，然后用3×100ml乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠柱上用FLASH色譜純化，30∶1的己烷∶乙酸乙酯洗脫，得到364mg二甲硅烷基化的標(biāo)題化合物。氬氣氛中向364mg(0.573mmol)二甲硅烷基化的中間體的4ml無(wú)水四氫呋喃溶液中加入4ml(4mmol)1M氟化四丁基銨的四氫呋喃溶液。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?8小時(shí)，然后用10ml水終止反應(yīng)，并攪拌10分鐘，加入20ml鹽水，并用3×90ml乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)至干。粗產(chǎn)物在硅膠柱上用FLASH色譜純化，己烷∶乙酸乙酯＝2∶1洗脫，然后在YMC-50mm×50cm硅膠柱上進(jìn)行HPLC，己烷∶乙酸乙酯＝3∶2洗脫，得到238mg(74％)標(biāo)題化合物，為白色泡沫。+47°(c0.2，EtOH)；UV(EtOH)lmax206nm(e16,000)，263(15,500)；1H-NMR(CDCl3)d0.71(s，3H，CH3)，1.13(d，3H，J＝6.4Hz，CH3)，1.58(s，3H，CH3)，1.93(m，1H)，2.03(ddd，1H，Jvic＝3and6Hz，Jgem＝14Hz，CHofCH2)，2.12-2.52(m，9H)，2.58(dd，1H，Jvic＝3.5Hz，Jgem＝13Hz，CHofCH2)，2.82(m，1H，CHofCH2)，3.96(brm，1H，CH)，4.83(d，1H，J＝1.7Hz，CHofCH2)，5.06(s，1H，CHofCH2)，5.39(brs，1H，CH)，6.12，6.23(AB，2H，J＝11.3Hz，CHCH)。下列藥物組合物可用公知的方法制備實(shí)施例A軟明膠膠囊</tables>實(shí)施例B軟明膠膠囊</tables>實(shí)施例C表面油膏權(quán)利要求1.式I化合物其中R是氫，氟或羥基，X是＝CH2，或當(dāng)R是羥基時(shí)X是氫或＝CH2。2.權(quán)利要求1的化合物，其中R是羥基。3.式Ia的表異構(gòu)體組成的混合物，其中R是氫，氟或羥基，X是＝CH2，或當(dāng)R是羥基時(shí)X是氫或＝CH2。4.1，25-(R，S)二羥基-16-烯-23-炔-26-三氟-膽鈣化甾醇。5.1，25(R，S)-二羥基-16-烯-23-炔-26-三氟-19-降膽鈣化甾醇。6.1α-氟-25(R，S)-羥基-16-烯-23-炔-26-三氟-膽鈣化甾醇。7.25(R，S)-羥基-16-烯-23-炔-26-三氟-膽鈣化甾醇。8.一種藥物組合物，含有有效量的權(quán)利要求1的式I化合物和惰性載體。9.權(quán)利要求1的式I化合物的用途，用于制備治療增生過(guò)度疾病，腫瘤疾病和皮脂腺疾病的藥物組合物。全文摘要式Ⅰ化合物,其中R是氫,氟或羥基,X是=CH文檔編號(hào)A61K31/59GK1169425SQ97111050公開(kāi)日1998年1月7日申請(qǐng)日期1997年5月23日優(yōu)先權(quán)日1996年5月23日發(fā)明者B·M·亨尼西,M·R·尤斯科克維克申請(qǐng)人:弗·哈夫曼-拉羅切有限公司