專利名稱：：鉑(ii)抗腫瘤劑的穩(wěn)定溶液的制作方法卡鉑，即1，1-環(huán)丁烷二羧基二胺鉑[1，1-cyclobutanedicarboxyldiammineplatinum(II)]是一種白色至灰白色的晶體粉末。它像順鉑一樣是一種細(xì)胞毒性的鉑配位化合物。它也像順鉑一樣具有細(xì)胞毒性，這使它可用于治療哺乳動物的各種惡性腫瘤，包括卵巢癌。Cleare等人的美國專利4,140,707和4,657,927公開了卡鉑及其它丙二酸類鉑化合物的制備方法及其在治療標(biāo)準(zhǔn)篩選瘤(standardscreeningtumor)，實體肉瘤180例的應(yīng)用。這一組化合物可冠以“丙二酸類”的名稱，因為在其結(jié)構(gòu)中有—(OOC)2-C＜鏈節(jié)結(jié)構(gòu)。與順鉑不同，卡鉑一般不產(chǎn)生嚴(yán)重的副作用，比如像腎毒性、耳毒性和神經(jīng)毒性?？ㄣK能耐受水合作用，因此這使其有較低的毒性。它已用以治療各種人類癌癥，包括小細(xì)胞肺癌、鱗狀細(xì)胞癌和睪丸癌等。參見U.S.Pharmacist，1989年9月，62-64頁?？ㄣK以冷凍干燥粉末的形式銷售，并一般在即將對病人進(jìn)行靜脈注射之前用水、鹽水溶液、葡萄糖溶液和/或其它稀釋劑稀釋。然而，由于它在水中的溶解度較低(在室溫下為14毫克/毫升)，這會造成比如在重組過程中的“回濁”(splashback)問題。如同所有的抗腫瘤劑一樣，當(dāng)它與正常的組織接觸時會有所不希望的影響。處于濃的即用(RTU)形態(tài)的卡鉑溶液是很理想的這樣易于處置和投藥。然而，簡單的水溶液形態(tài)，即只與水混合時，在長期儲存時這種化合物在物理上是不穩(wěn)定的。Nijkerk等人的美國專利5,104,896公開了一種解決此問題的嘗試。他們采用的卡鉑溶液含有最高達(dá)22毫克/毫升的卡鉑和0.01～0.1摩爾的無機(jī)緩沖劑，以保持溶液的pH值為2～6.5。在CancerChemotherPharmacol，23；197-207(1989)中，A.Bosonquet討論了卡鉑的不穩(wěn)定性，并且建議用水和氯化鈉來制造其穩(wěn)定的溶液。Levius等人在E.P.O出版物334，551(1989年9月21日出版)中建議不要在卡鉑溶液中使用氯化物離子(見第3頁第7行)。此外，他們還提出，如果卡鉑沒有經(jīng)冷凍干燥，且水是無鹽的，則含藥物10～15毫克/毫升的卡鉑水溶液是穩(wěn)定的(見第2頁22行)。本發(fā)明涉及穩(wěn)定的卡鉑組合物、它們的制備方法及基于這類組合物與方法的穩(wěn)定產(chǎn)物。申請人發(fā)現(xiàn)，用如下一種或多種穩(wěn)定劑，可制備穩(wěn)定的用1，1-環(huán)丁烷二羧酸(CBDCA)緩沖的卡鉑溶液(1)1，1-環(huán)丁烷二羧酸(至pH4-8)，(2)用空氣或氧吹洗該溶液，和(3)用空氣或氧氣復(fù)蓋小瓶或其它容器的上部空間。在甚優(yōu)選的實施方案中使用了(1)、(2)和(3)的全部3種。得到的溶液pH值為約4～約8，含有約1～約15毫克/毫升的卡鉑，包括有含水的載體并儲于上部空間占50％(體積)的小瓶中。在50℃和至少4個月時間內(nèi)，該溶液在化學(xué)和物理上都是穩(wěn)定的。與先有技術(shù)相比，本發(fā)明的組合物、產(chǎn)品和方法具有數(shù)種優(yōu)點。通過使用可即時注射配方的可稀釋溶液，消除了使用卡鉑冷凍干燥物或其它粉末狀卡鉑時的“回濁”和其它問題。即用配方的制造費用并不貴，在投藥前除了稀釋以外無需附加的制備或處置過程。在24℃下或室溫，最長達(dá)18個月中該新配方穩(wěn)定意味著它們不必像從前的配方那樣經(jīng)常檢驗失效期和報廢。由于對溫度和光敏感性只需給予極小的關(guān)注，在本說明書敘述的卡鉑溶液易于使用和保存?？戳巳缦抡f明和權(quán)利要求后，這些優(yōu)點和其它的優(yōu)點將會更加明顯。如無另外說明，則本文中所有百分比均為基于組合物總重量的重量百分比。所引用的全部文獻(xiàn)都并入本說明書作為參考。在全部表格中，“清澈”、“無沉淀”是同意義的?；钚越M分在本專利中使用的活性組分是一種或幾種丙二酸類鉑(II)化合物。在整個說明書中使用“卡鉑”一詞時，申請人的意思是，這個術(shù)語包括了含有兩個單齒配位體氨或胺配位體和帶一個1，1-環(huán)烷基二羧酸殘基的二齒配位體丙二酸類配位體的全部配位化合物。合適的化合物符合式(I)式中R和R1各自獨立地選自H、C1～C6烷基、C1～C6羥基烷基、C5～C12芳基、C5～C12烷基芳基、C5～C12芳烷基、C1～C6烷氧基烷基和C5～C12的氨基酸殘基；n為2或3；以及X是環(huán)狀的C3～C6烷基或烯基殘基。優(yōu)選R＝R1＝H、n＝3以及X是環(huán)烷基。甚優(yōu)選使用下述結(jié)構(gòu)式(II)的卡鉑，以及它們的異構(gòu)體和普通的衍生物申請人:用“普通的衍生物”，指的是溶劑化物、配合物、水合物、幾何異構(gòu)體、以及具有被取代核的類似化合物等。美國專利4,140,707和4,657,927中敘述的方法可在此用于制備順鉑和其它有用的療效化合物。通用的反應(yīng)路線是其中A是二個二齒胺配位體或兩個單齒胺配位體，X如前面定義。卡鉑作為抗癌劑的用途是公知的。穩(wěn)定系統(tǒng)(1)1，1-環(huán)丁烷二羧酸(CBDCA)及鹽在卡鉑的優(yōu)選制造方法中酸CBDCA是反應(yīng)物。它是未穩(wěn)定化卡鉑溶液的一種水溶性組分?？捎玫腃BDCA鹽包括其堿金屬鹽。優(yōu)選鈉鹽，特別是當(dāng)載體為水或一種或幾種聚亞烷基二醇時。因為CBDCA及其鈉鹽與卡鉑有很好的混溶性，以前曾研究過把它們作為該藥品的緩沖劑。但是，以前沒有公開過用此酸及其鹽作為鉑(II)化合物的穩(wěn)定劑。在一些優(yōu)選的實施方案中，此穩(wěn)定劑體系包括在用CBDCA的鈉鹽作為pH調(diào)節(jié)劑的同時，用該酸作為穩(wěn)定劑。在卡鉑或其它丙二酸類鉑(II)化合物溶液中加入足夠數(shù)量的該酸或一種或幾種鹽，結(jié)果使得pH值為約4～約8，最終CBDCA濃度為約0.25～約4毫克/毫升。優(yōu)選的量為約1～約2毫克/毫升。(2)空氣或氧氣吹洗考慮使用空氣(即在室溫下由約78％的氮和約21％的氧構(gòu)成的氣體混合物)或純氧氣(O2)。氧是優(yōu)選的吹洗劑?？梢允褂醚鹾涂諝獾幕旌衔?。這種混合物的含氧量優(yōu)選在約25％～約95％之間。也可以使用非氮氣體，比如氬氣。應(yīng)避免使用氮含量高于78％的吹洗氣體。申請人用“吹洗”一詞意味著在大氣壓下用鼓泡或其它方式使適當(dāng)?shù)臍怏w通過該溶液，使該液體和上部空間被最佳量的氧飽和。吹洗階段的時間長短并不關(guān)鍵。但一般希望吹洗含藥液體約1～約5小時。一般是2小時。一般采用約25～30℃的室溫或環(huán)境溫度。當(dāng)使用吹洗技術(shù)時，優(yōu)選(但不是必須)液體在容器中裝填量不超過總體積的一半(半滿)，這就是說，未充滿的空氣、氧氣的體積(即頂部空間)是該容器總體積(液體＋氣體)的50％或更多。(3)用空氣或氧氣覆蓋頂部空間用空氣或氧氣充滿容器中液體體積上方的空間(即頂部空間)是另一種穩(wěn)定化方法?！案采w”這個詞表示此技術(shù)包括從小瓶、瓶子或其它密閉容器中的被空氣或氧氣飽和的液體上方空間中驅(qū)出所有環(huán)境或大氣氣體。在此之后立即將該容器密封。覆蓋頂部空間的時間一般為約1～約5小時。優(yōu)選約2～約3小時的時間。如同在上面的吹洗步驟中所述，必須避免使用含氮量超過78％的氣體。這三種技術(shù)中的每一種都可以單獨用來使含有卡鉑或其它具有丙二酸鏈節(jié)的類似鉑(II)藥物溶液穩(wěn)定化。不過，優(yōu)選技術(shù)(1)與技術(shù)(2)一起使用，或技術(shù)(2)與(3)一起使用。十分優(yōu)選所有三種技術(shù)一起使用。載體用作鉑(II)化合物溶劑的載體一般是含有水的某種載體。優(yōu)選用純水(即注射用無菌水)?？梢允褂盟鸵环N或多種助載體(如某些聚亞烷基二醇和糖溶液)的混合物。在本發(fā)明溶液中，基于總的載體含量，最終水含量一般為約0.5～約99.5％，而助載體(如二醇類)為約10～約90％。適用的二醇包括分子量為約300～約900的，基于C1～C6烷基的聚亞烷基二醇。因此聚醚多元醇，如聚乙二醇、聚丙二醇、聚丁二醇等及其混合物也可使用。優(yōu)選聚丙二醇和聚乙二醇(PEG-400)。十分優(yōu)選15％(體積)的水和85％(體積)的PEG-400或85％(體積)的丙二醇的混合物?！疤侨芤骸卑ㄔ谒幚砩峡山邮艿钠咸烟恰⒄崽恰⒏事短腔蚱渌鳛闈B透性調(diào)節(jié)劑的糖溶液。5％的葡萄糖水溶液(“D5W”)是一種十分優(yōu)選的助載體。本發(fā)明的溶液可以以水溶液或非水溶液的濃縮即用型供應(yīng)。因此，任選使用適量的助載體?？梢允褂脤︺K化合物或穩(wěn)定劑的效用沒有不良影響的其它載體來代替全部或部分上述載體。緩沖劑由于使用了(1)、(2)或(3)技術(shù)中的一種或幾種，本發(fā)明使用的鉑(II)化合物不大受到還原性降解。但其中若存在有一種或幾種pH值調(diào)節(jié)劑將能進(jìn)一步增加這些化合物溶液的穩(wěn)定性，它們使溶液pH值保持在一最佳范圍內(nèi)，因此起緩沖劑的作用。一般希望溶液的pH值在約4～約7之間?？ㄣK自身的環(huán)境pH值為約6.5。加入CBDCA之后使pH低到不能接受的4以下。因此，需要使用堿性緩沖劑或pH調(diào)節(jié)劑來提高pH值。緩沖劑一般是其陽離子部分在藥理上是可接受的簡單的無機(jī)堿。因此，鈉、鉀或鈣的氧化物及氫氧化物都是可用的。優(yōu)選氫氧化鈉。通過對CBDCA/鉑(II)化合物混合物進(jìn)行滴定，直至達(dá)到約4～約8；優(yōu)選約5～約7；最優(yōu)選為約5.5～約6.5的穩(wěn)定pH值，借此找到氫氧化鈉或其它緩沖劑的最佳用量。因為既需要有堿性添加劑，也需要有CBDCA來達(dá)到所需的溶液pH值，故CBDCA也可以被看作是一種緩沖劑。不過在申請人的體系中，CBDCA的首要作用是卡鉑或其它鉑(II)化合物的穩(wěn)定劑。給藥本發(fā)明的配方使用的劑量水平一般由正常的醫(yī)學(xué)判斷和其它指導(dǎo)原則來支配，這些原則如Physician’sDeskReference中所述。一般將此溶液對動物給藥，優(yōu)選對人類給藥治療癌癥。劑量一般為約1～約200毫克/千克·次，定期地給藥約1至約3次。此溶液適于通過靜脈注射給藥。它們以即用(RTU)濃溶液形式提供。此濃溶液需要用1～60體積的水或其它適用稀釋劑稀釋，然后進(jìn)行注射。雖然注射是優(yōu)選的給藥途徑，但也可考慮其它途徑如口服。儲存鉑(II)抗癌劑的長期穩(wěn)定性是本發(fā)明的一個主要目的。因此，應(yīng)該避免那些已知的會促進(jìn)這類化合物降解的條件。過亮的光線、過低的pH值(低于4)和過高的溫度就是三個這樣的條件。本文討論在最高約60℃的加速溫度下速溶組合物的穩(wěn)定性。對試樣進(jìn)行了測試，發(fā)現(xiàn)在25℃下穩(wěn)定期可達(dá)數(shù)周直至最高一年。在一些高應(yīng)力下的溶液中發(fā)生的輕微變色一般不表明藥物的潛在安全性或藥效有大的下降。不過建議不要使用發(fā)渾或含有沉淀顆粒的溶液。這樣的顆粒會妨礙靜脈給藥。實施例如下各實施例用來說明本發(fā)明實施例11，1-環(huán)丁烷二羧酸(CBDCA)的濃度對水溶液穩(wěn)定性的影響在50℃和60℃評價了CBDCA濃度對卡鉑穩(wěn)定性的影響。用濃度為8、4、2、1、0.5、0.25和0毫克/毫升的CBDCA制備約10毫克/毫升濃度的卡鉑水溶液。用NaOH將每份含有CBDCA的溶液的pH值調(diào)節(jié)到6.0。對每份不含CBDCA的溶液的pH值不進(jìn)行調(diào)節(jié)?？ㄣK的環(huán)境pH值約為6.1，并且在5.5～7.0之間變化。然后通過鼓泡用空氣吹洗該溶液，用10毫升一次性注射器和Gelman4192#無菌0.2微米過濾器將該溶液過濾加入到洗凈的04515#/00Wheaton6毫升小瓶中。每個小瓶裝有3毫升溶液，留下約50％的空氣頂部空間。所有的測試小瓶都用涂有Daikyo759#氟樹脂的塞子塞住并用Wheaton20毫米鋁封口密封。在25℃和40℃進(jìn)行了長期穩(wěn)定性(8.5月和9個月)的取樣測試。這些試樣的數(shù)據(jù)是表1在25℃和40℃卡鉑的物理穩(wěn)定性表1A不同的CBDCA含量和頂部空間氣體對pH值為6的10毫克/毫升的卡鉑水溶液化學(xué)及物理穩(wěn)定性的影響CBDCA實驗第I組；25℃8個月16天50％的空氣充滿的頂部空間CBDCA濃度(毫克/毫升)溶液顏色溶液清澈度8無色無沉淀4無色無沉淀2無色無沉淀1無色無沉淀0.5無色無沉淀0.25無色無沉淀0稻草黃色無沉淀第II組25℃/8個月，16天不同頂部空間氣體上部空間氣體CBDCA(毫克/毫升)溶液顏色溶液清澈度N21稻草黃色無沉淀Air1無色無沉淀O21無色無沉淀N20琥珀色無沉淀Air0稻草黃色無沉淀O20無色無沉淀表1B小瓶的裝填體積對pH值為6、CBDCA為1毫克/毫升用空氣充滿頂部空間的10毫克/毫升卡鉑水溶液在25℃的化學(xué)及物理穩(wěn)定性的影響(溶液被空氣吹洗過)第III組，25℃9個月3天不同充填體積裝滿瓶體積(毫升)CBDCA(毫克/毫升)溶液顏色溶液清澈度21無色無沉淀41無色無沉淀61無色無沉淀82無色無沉淀101無色無沉淀121無色無沉淀20無色無沉淀40無色無沉淀60無色無沉淀80無色無沉淀100稻草黃色無沉淀120稻草黃色無沉淀表1CpH值對含有1毫克/毫升CBDCA*并用空氣充滿頂部空間的10毫克/毫升卡鉑水溶液的化學(xué)及物理穩(wěn)定性的影響第IV組，25℃9個月27天不同pH值pH溶液顏色溶液清澈度4無色無沉淀5無色無沉淀6無色無沉淀7無色無沉淀8無色無沉淀表1DCBDCA濃度對40℃6個月及8周穩(wěn)定性的影響使用具有不同CBDCA濃度的新鮮卡鉑。用NaOH調(diào)節(jié)試樣的pH值并用空氣吹洗。每個6毫升I型玻璃試樣小瓶中裝有3.3毫升卡鉑溶液。小瓶頂部空間充填空氣。CBDCA外觀pH濃度剩余卡鉑(毫克/毫升)(毫克/毫升)(％)第I組6個月8清澈6.0010.071104.44清澈6.019.88799.42清澈6.039.97100.61清澈6.049.94497.40.5稻草黃色6.099.999104.30.25稻草黃色6.039.91598.90黃色5.859.94699.0第二組8周8清澈6.139.921102.84清澈6.0910.014100.72清澈6.0810.004100.91清澈6.0710.04498.40.5清澈6.1810.136105.70.25清澈6.1610.077100.50清澈6.1310.08100.4表1E裝直體積對40℃6個月穩(wěn)定性的影響液體填充體積外觀CBDCA(mL)(毫克/毫升)pH卡鉑濃度(mg/mL)％剩余第I組(見注I)12稻草黃色無沉淀15.999.27395.8％10稻草黃色無沉淀16.099.34296.5％8稻草黃色無沉淀16.109.18394.9％6稻草黃色無沉淀16.119.27695.9％4稻草黃色無沉淀16.119.32296.3％2稻草黃色無沉淀16.189.42197.4％第II組(見注II)12琥珀色無沉淀05.689.60297.2％10琥珀色無沉淀05.609.53396.5％8琥珀色無沉淀05.639.49696.1％6琥珀色無沉淀05.589.32194.4％4琥珀色無沉淀05.619.45795.7％2琥珀色無沉淀05.659.80699.3％注I含有1毫克/毫升CBDCA的新鮮10毫克/毫升溶液用NaOH調(diào)節(jié)pH值至6.2。所有的試樣都用空氣吹洗并裝填到指定的體積。注II新鮮的10毫克/毫升卡鉑溶液(不含CBDCA)的pH值為環(huán)境值(不調(diào))，所有試樣都用空氣吹洗并裝填到指定的體積。表1FpH值對40℃6個月溶液穩(wěn)定性的影響制備含有1毫克/毫升CBDCA的新鮮10毫克/毫升卡鉑溶液。每個試樣pH不同，用NaOH調(diào)節(jié)，所有試樣都用空氣吹洗，并在6毫升I型小瓶中裝3.3毫升。小瓶頂部空間充上空氣。試樣號數(shù)表示開始的pH值。所有試樣中使用的CBDCA都是1毫克/毫升。pH外觀pH卡鉑濃度(mg/mL)％殘留值4草黃色無沉淀4.1310.06096.45清澈無沉淀5.0610.14197.16清澈無沉淀6.079.98696.47清澈無沉淀6.759.71389.68稻草黃色無沉淀6.999.01592.6所有試樣都經(jīng)高效液相色譜(HPLC)檢測，測定出初始卡鉑濃度。經(jīng)過確定的時間間隔，記錄下每個穩(wěn)定試樣的外觀(即目視清澈度、是否有沉淀、顏色)和pH值。然后測試各試樣的卡鉑。以初始值為基礎(chǔ)計算出每個試樣殘留卡鉑的百分值。表2定量測量卡鉑的HPLC方法柱子Alltech10微米NH2，4.6×250毫米檢測波長230納米注射量20微升試樣濃度約1毫克/毫升稀釋劑Milli-Q水外標(biāo)約1毫克/毫升卡鉑溫度30℃移動相85％乙腈/15％Milli-Q水流速2.0毫升/分運行時間15-18分典型保留時間卡鉑10分鐘在60℃儲存試樣1、2、4和8周，在50℃儲存2、4、8和16周。這些試樣的數(shù)據(jù)列在表3和表4。表3不同CBDCA*含量對含有50％的頂部空間，pH為6的10毫克/毫升卡鉑水溶液的化學(xué)和物理穩(wěn)定性的影響表3(續(xù))*1，1-環(huán)丁烷二羧酸；6毫升1型玻璃瓶裝3.3毫升溶液；并用20毫米涂聚四氟乙烯的塞子；用NaOH調(diào)節(jié)pH值到6。表4不同CBDCA*濃度對含有50％頂部空間、pH值為6的10毫克/毫升卡鉑水溶液化學(xué)及物理穩(wěn)定性的影響表4(續(xù))<*1，1-環(huán)丁烷二羧酸；6毫升1型玻璃瓶裝3.3毫升溶液；并用20毫米涂聚四氟乙烯的塞子；用NaOH調(diào)節(jié)pH值到6。即便在10毫克/毫升的卡鉑溶液中加入很少量的CBDCA，也表現(xiàn)出對高溫下溶液(pH值大約6，有約50％的空氣頂部空間)的物理穩(wěn)定性有積極的影響。如同在前面幾個表中所示，在60℃4～8周或50℃16周之后，不加CBDCA的溶液是琥珀色至棕色。觀察到了棕色無定形沉淀。相反，經(jīng)過60℃8周或50℃16周，加入CBDCA的卡鉑溶液顏色要淺得多，并不出現(xiàn)沉淀。在60℃儲存8周或在50℃下儲存16周時，加入最低量(0.25毫克/毫升)的CBDCA就成功地抑制了可見沉淀的生成。正如從表3中60℃4周和8周的數(shù)據(jù)和表4中50℃8周和16周的數(shù)據(jù)中所看到的，增加CBDCA的含量導(dǎo)致了形式顏色深度的逐漸降低。在這兩個溫度下，CBDCA的含量對卡鉑的化學(xué)穩(wěn)定性不顯示出影響。如同表1中所示，在研究過程中不加入CBDCA的卡鉑溶液的pH值有下降的趨勢。然而，含有CBDCA溶液的pH值仍然很穩(wěn)定。這啟示我們加入的CBDCA的存在(連同用NaOH調(diào)節(jié)pH值)似乎有緩沖效果。實施例2頂部空間氣體的性質(zhì)對溶液(用指定氣體吹洗過的溶液)穩(wěn)定性的影響在50℃和60℃測試了氧氣、氮氣和空氣對卡鉑水溶液穩(wěn)定性的影響。制備含1毫克/毫升CBDCA的10毫克/毫升濃度的卡鉑溶液。用10N和1N的NaOH調(diào)節(jié)pH值至6，以10毫克/毫升濃度(不加CBDCA，環(huán)境pH值～6.4)制備對照組溶液。然后對等分試樣溶液用氧氣、空氣或氮氣鼓泡1小時使該溶液飽和。用Gelmen#4192滅菌0.2微升過濾器將吹洗過的溶液過濾到一個洗凈的#04515/00Wheaton6毫升小瓶(每瓶3毫升，裝填體積50％)中，裝完之后，用相應(yīng)的吹洗氣體充滿余下的頂部空間。用經(jīng)Daikyo#759氟樹脂涂布的瓶塞立即塞上瓶子，以防止頂部空間氣體散失或受污染。然后用Wheaton20毫米鋁封頭密封所有小瓶。試樣在60℃儲存1、2、4和8周；在50℃儲存2、4、8和16周。這些試樣的數(shù)據(jù)列在表5和表6中。表5頂部空間氣體對pH值為6，加入1毫克/毫升的CBDCA*的10毫克/毫升卡鉑水溶液在60℃下化學(xué)及物理穩(wěn)定性的影響。<<p>表5(續(xù))*1，1-環(huán)丁烷二羧酸；在帶有20毫米#759涂布聚四氟乙烯的塞子的6毫升1型(#4515)玻璃瓶中的3.3毫升溶液；用NaOH調(diào)節(jié)溶液pH值為6表6頂部空間氣體對pH值為6，加入1毫克/毫升的CBDCA*的10毫克/毫升卡鉑水溶液在50℃下化學(xué)及物理穩(wěn)定性的影響。表6(續(xù))*1，1-環(huán)丁烷二羧酸；在帶有20毫米#759涂布聚四氟乙烯的塞子的6毫升1型(#4515)玻璃瓶中的3.3毫升溶液；用NaOH調(diào)節(jié)溶液pH值為6表5和表6十分明確地表明，小瓶頂部氣體對卡鉑水溶液的物理和化學(xué)穩(wěn)定性有很大影響。用氮氣吹洗試樣使氧/卡鉑比下降，這導(dǎo)致在60℃下1～2周之內(nèi)(表5)和在50℃下4～16周(表6)內(nèi)出現(xiàn)沉淀(不溶降解物/轉(zhuǎn)化產(chǎn)物)。對于用氮氣吹洗并儲存在高溫下的含有CBDCA的溶液，一般會有嚴(yán)重的卡鉑效能損失，而上層液仍保持無色(由于產(chǎn)生沉淀)。它們含有深黑色的沉淀，從性質(zhì)上表明為氧化鉑。不加CBDCA并類似地用氮(無氧)吹洗的溶液顯示出細(xì)的、棕色無定形沉淀，在形態(tài)上它們與在較低溫度下(即4～30℃)儲存18個月以上的溶液中觀察到的、被確定為低聚混合物的物質(zhì)很相似。如表4中所示，在50℃儲存16周的用氮氣(無氧)吹洗的不加CBDCA的溶液顯示出黑色和銀色沉淀，從性質(zhì)上表明為氧化鉑和金屬鉑。在50℃和60℃下含有空氣作頂部空間氣體(裝瓶體積約50％，加或不加CBDCA)的卡鉑溶液明顯顯示出生成沉淀較少，卡鉑效能保持率要比用氮氣(無氧)吹洗的情況高得多。此外，帶有空氣頂部空間氣體并含有1毫克/毫升CBDCA的卡鉑溶液，如同在評價CBDCA濃度影響的實驗中所觀察到的，同樣表現(xiàn)出顏色變淺并防止了沉淀。無論是否添加CBDCA，用氧吹洗10毫克/毫升卡鉑水溶液對其物理穩(wěn)定性都有有利的影響。在60℃下儲存8周和在50℃下儲存16周只稍微產(chǎn)生一點顏色(即“稻草黃色”)并抑制生成沉淀的表3和表4的數(shù)據(jù)表明了這一點。在加或不加1毫克/毫升CBDCA時，用空氣和用氧氣吹洗的溶液都顯示出相近的卡鉑效能保持率。實施例3小瓶填充體積對溶液穩(wěn)定性的影響還在50℃和60℃測試小瓶填充體積(亦即未填充的頂部空間)對卡鉑水溶液穩(wěn)定性的影響。制備10毫克/毫升的卡鉑水溶液(各自有1毫克/毫升的CBDCA)。用10N和1NNAOH調(diào)節(jié)pH值到6.0。制備10毫克/毫升的對照溶液(不加CBDCA，環(huán)境pH值～5.7)。用空氣吹洗(鼓泡)1小時使所有溶液為空氣所飽和。在吹洗之后，用Ge1man#4192滅菌0.2微升過濾器將該溶液濾入洗凈的#04514/00Wheaton10毫升小瓶(總?cè)萘?4毫升)中。小瓶的填充體積(即液體總體積)為2，4，6，8，10和12毫升。用空氣填充剩余的小瓶頂部空間。用涂有Daikyo#759氟樹脂的塞子塞住小瓶，并用Wheaton20毫米鋁封口密封。在60℃1、2、4和8周后及在50℃、2、4、8和16周后測試試樣。數(shù)據(jù)列在表7和表8中，長期穩(wěn)定性試樣放在較低溫度下(4、25、40℃)。用化學(xué)方法和物理方法分析初始試樣和穩(wěn)定性試樣。表7小瓶填充體積對60℃下，pH為6、含1mg/mlCBDCA*并有空氣頂部空間的10mg/ml卡鉑水溶液的化學(xué)和物理穩(wěn)定性的影響(空氣吹洗的溶液)。<p>表7(續(xù))<tablesid="table11"num="011"><tablewidth="706">儲存時間(周)CBDCA充液體積(mL)pH卡鉑mg/mL％殘留率溶液顏色溶液清澈度1無125.779.7398.5黃色清澈2有26.229.3196.2稻草黃色清澈2有46.209.2395.4稻草黃色清澈2有66.209.2195.2稻草黃色清澈2有86.209.2295.3稻草黃色清澈2有106.199.1394.4稻草黃色清澈2有126.209.1194.1稻草黃色清澈2無25.759.5496.6黃色清澈2無45.719.5797.4黃色清澈2無65.599.4896.0黃色清澈2無85.659.4195.2黃色清澈2無105.589.3794.8琥珀色模糊狀沉淀2無125.579.3594.6琥珀色模糊狀沉淀4有26.198.8591.5稻草黃色清澈4有46.208.7990稻草黃色清澈4有66.228.8191稻草黃色清澈4有86.178.7390.3黃色清澈4有106.178.6989.8黃色清澈4有126.198.5588.4黃色清澈4無25.729.1692.8黃色清澈4無45.719.0692.2黃色模糊狀水＋淺色沉淀4無65.639.1392.4琥珀色模糊狀水＋淺色沉淀4無85.619.0590.4棕色中度沉淀4無105.668.8789.8棕色中度沉淀</table></tables>表7(續(xù))CBDCA＝1.1-環(huán)丁烷二羧酸*10毫升溶液。1型玻璃瓶加20毫米涂聚四氟乙烯塞子。用NaOH將溶液pH值調(diào)至6。表8小瓶填充體積對50℃，pH為6，加有1毫克/毫升CBDCA*并具有空氣頂部空間的10毫克/毫升卡鉑水溶液化學(xué)及物理穩(wěn)定性的影響<p>表8(續(xù))*1.1-環(huán)丁烷二羧酸*10毫升溶液，帶有20毫米涂聚四氟乙烯塞子的1型玻璃瓶，用NaOH將溶液pH值調(diào)至6在50℃和60℃的10毫克/毫升卡鉑水溶液(不加CBDCA，初始環(huán)境pH值～5.7)中形成的沉淀數(shù)量直接與填充到10毫升小瓶(實際最大填充容量～14毫升)中溶液的體積有關(guān)。隨著填充體積增加(相應(yīng)地氧與卡鉑的比值減少)，無論顏色深度還是沉淀的數(shù)量都增加。這表明，卡鉑的穩(wěn)定性與氧的存在量(比值)有關(guān)，顯示出頂部空間氣體對穩(wěn)定性的影響。表6中的數(shù)據(jù)表明，高達(dá)10～12毫升的小瓶溶液(不加CBDCA)填充體積(減小了氧的供應(yīng))導(dǎo)致在60℃儲存8周后有大的效能損失，同時生成黑色和銀色沉淀(意味著氧化鉑和金屬鉑)。在50℃和60℃下儲存的不加CBDCA的卡鉑溶液，在各種填充體積時都顯現(xiàn)出沉淀(出現(xiàn)沉淀的時間隨著溫度升高和填充體積增加越來越早，數(shù)量也越來越多)。除了很高填充體積(10～12毫升)的小瓶以外，在50℃和60℃形成的沉淀主要是棕色、無定形的典型類的低聚混合物。在許多降解的試樣中也觀察到圓形的、“十字輪”型的晶體。實施例4pH值對溶液(空氣吹洗的溶液)穩(wěn)定性的影響在50℃和60℃研究pH值對10毫克/毫升的卡鉑水溶液穩(wěn)定性的影響。在每份溶液中都加入1毫克/毫升的CBDCA。用1N和10NNaOH調(diào)節(jié)溶液的pH值到4、5、6、7和8。由于不加CBDCA的溶液在調(diào)節(jié)pH時卡鉑容易轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌衔?例如加入鹽酸能轉(zhuǎn)變?yōu)轫樸K)所以不測試pH值對其的影響。每種溶液用空氣鼓泡吹洗1小時，然后用Gelman#41920.2微升滅菌過濾器將溶液濾入洗凈的#04515/00Wheaton6毫升小瓶中。每個小瓶裝入3毫升(裝滿50％體積)卡鉑溶液。剩下的小瓶頂部空間是空氣。用Daikyo#759涂聚四氟乙烯的塞子塞住小瓶，并用20毫米鋁封口密封。試樣在60℃儲存1、2、4和8周；在50℃儲存2、4、8和16周。這些試樣的數(shù)據(jù)列在表9中。表9pH值對含有1毫克/毫升的CBDCA并用空氣填充頂部空間的10毫克/毫升卡鉑水溶液化學(xué)及物理穩(wěn)定性的影響表9(續(xù))表9(續(xù))<在每個6毫升、蓋有20毫米涂聚四氟乙烯塞子的I型玻璃瓶中裝有3.3毫升溶液，用NaOH將溶液調(diào)成各種pH值。在表7中的是pH值對含有1毫克/毫升添加CBDCA的10毫克/毫升卡鉑水溶液(有～50％的小瓶體積為空氣頂部空間)化學(xué)及物理穩(wěn)定性的影響。在60℃8周和50℃16周之后，無論開始pH值為何值(即在pH為4～8時)，所有溶液仍然清澈無沉淀，這證明加入CBDCA對物理穩(wěn)定性有積極影響。在所研究的初始pH值(pH為4)最低，儲存在高溫下的溶液顏色最深。初始pH為6-7的試樣生成的顏色最淺。隨著pH值由4向8增加，化學(xué)穩(wěn)定性(卡鉑效能保持率)稍有下降(最明顯的是50℃8周和16周，以及60℃8周的數(shù)據(jù))。對初始pH值為4～7的溶液，已降解試樣的pH值仍變化不大(即變化小于0.5個pH單位)?；谟蛇@些初步研究得到的物化數(shù)據(jù)，pH4～7的配方對總的化學(xué)及物理穩(wěn)定性表現(xiàn)出最優(yōu)結(jié)果?？偟慕Y(jié)果本文的數(shù)據(jù)表明，加入CBDCA并用空氣或氧吹洗、在瓶頂部空間保持大量的(即從10～50％的體積或更多)空氣或氧得到具有滿意的化學(xué)及物理穩(wěn)定性的可儲存卡鉑溶液。這些溶液的穩(wěn)定性表現(xiàn)為溶液形式最少量的顏色(一般為清澈、琥珀色、黃色或綠色)以及不產(chǎn)生或產(chǎn)生極少量固體沉淀的事實。用NaOH以及任選用CBDCA來緩沖或者維持pH值是有益的。為卡鉑濃度5～40％的CBDCA濃度抑制生色和產(chǎn)生沉淀。在本發(fā)明中，只要不超出本發(fā)明的范圍，可以做出例如專業(yè)人員所能想到的任何合理的改變。權(quán)利要求1.穩(wěn)定的可注射的丙二酸類鉑(II)化合物(卡鉑或丙二酸類同類物)的組合物，包括(a)有抗腫瘤效果量的鉑(II)化合物，(b)穩(wěn)定化量的1，1—環(huán)丁烷二羧酸(或相應(yīng)的丙二酸類同類物)或其堿金屬鹽，(c)足夠量的pH值調(diào)節(jié)劑，以維持pH值約4～約7，以及(d)在藥學(xué)上可接受的載體。2.按權(quán)利要求1的組合物，其中所述pH調(diào)節(jié)劑是1，1—環(huán)丁烷二羧酸鈉鹽。3.按權(quán)利要求2的組合物，其中(a)的量為約1～約20毫克/毫升。4.按權(quán)利要求2的組合物，其中(b)的量為約0.25～約4毫克/毫升。5.按權(quán)利要求3的組合物，其中(d)選自水、含有C1—C6烷基的聚亞烷基二醇、葡萄糖水溶液及它們的混合物。6.按權(quán)利要求2的組合物，其中(d)是水。7.按權(quán)利要求5的組合物，其中(a)是卡鉑。8.按權(quán)利要求1的組合物，其中所述溶液在混合后用空氣或氧氣吹洗。9.穩(wěn)定丙二酸類鉑(II)化合物(卡鉑或丙二酸類同類物)溶液的方法，包括(1)向所述溶液中加入穩(wěn)定化量的1，1—環(huán)丁烷二羧酸(或相應(yīng)的丙二酸類同類物)或其堿金屬鹽，以及(2)調(diào)節(jié)pH值并將其維持在約4～約7。10.按權(quán)利要求9的方法，其中使用的1，1—環(huán)丁烷二羧酸或鹽的量為約0.25～約20毫克/毫升。11.按權(quán)利要求9的方法，其中酸或鹽的存在量為約1～約20毫克/毫升。12.按權(quán)利要求10的方法，其中所述溶液在混合后用空氣或氧氣吹洗。13.按權(quán)利要求11的方法，其中所述最終溶液儲存在頂部空間體積不少于50％的密封容器中。14.按權(quán)利要求13的方法，其中在所述容器被密封之前，用空氣或氧氣覆蓋所述頂部空間。15.按權(quán)利要求11的方法，其中作為后續(xù)步驟(3)，用空氣或氧氣吹洗所述溶液。16.穩(wěn)定丙二酸類鉑(II)化合物溶液的方法，包括如下步驟(1)將所述鉑化合物溶于載體中，并將pH值調(diào)至約4～約7，(2)用空氣或氧氣中的至少一種吹洗步驟(1)中的所述產(chǎn)品，以及(3)將吹洗過的溶液置入一個容器，使得有至少50％的體積不填充液體，而用空氣或氧氣飽和。全文摘要制備含有穩(wěn)定作用量的1，1-環(huán)丁烷二羧酸或鹽、pH值為4～8的卡鉑和其它丙二酸類鉑(II)抗腫瘤劑的溶液；此穩(wěn)定劑抑制了不可接受的變色和沉淀；用空氣或氧氣吹洗及任選用氧氣或空氣覆蓋頂部空間也可使該溶液穩(wěn)定化。文檔編號A61K31/555GK1118252SQ94109528公開日1996年3月13日申請日期1994年8月8日優(yōu)先權(quán)日1993年8月11日發(fā)明者M(jìn)·A·卡普蘭,L·傅桑蒂,R·K·佩龍,S·R·施滕堡,S·阿哈卡,J·B·波加達(dá)斯申請人:布里斯托爾-邁爾斯斯奎布公司