專利名稱:(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺的制備方法
本發(fā)明涉及新化合物(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺及其制備方法。本發(fā)明還涉及含有該化合物的藥物組合物。
英國第1，309，692號(hào)專利(Britsh Patent No.1，309，692)介紹了化合物α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺(熔點(diǎn)122℃)并說明這類化合物可以用于治療目的，例如，用于治療運(yùn)動(dòng)病、運(yùn)動(dòng)過度、引力亢進(jìn)和癲癇。
而且，該專利還提到，這些化合物能夠應(yīng)用于正常的或疾病引起的記憶障礙的治療領(lǐng)域。
α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺具有抗缺氧和大腦局部缺血等等對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)造成損害的保護(hù)作用，這也是公眾已經(jīng)知道的〔《制藥學(xué)》(Pharmazie，37/11，(1982)，753-765)〕。
我們?cè)谶@一領(lǐng)域的繼續(xù)研究中，制備和分離了一種α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺的左旋對(duì)映體，并且發(fā)現(xiàn)，該化合物在以下兩個(gè)方面不同于其已知的外消旋體，這完全是預(yù)料不到的(1)它的抗缺氧(antihypoxia)保護(hù)作用(比外消旋體)大10倍;以及(2)它的抗局部缺血(antiischema)保護(hù)作用(比外消旋體)大4倍。
由于α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺具有這種意外的綜合性能，它更適宜于治療和預(yù)防中樞神經(jīng)系統(tǒng)的缺氧和局部缺血型損害。中樞神經(jīng)系統(tǒng)由某些疾病引起的缺氧現(xiàn)象的一個(gè)重要作用說明，這個(gè)化合物對(duì)醫(yī)治下列病癥是有療效的由大腦血管意外事故和頭部外傷引起的病癥、衰老過程中的后發(fā)癥或由發(fā)生在-例如-出生時(shí)的大腦局部缺血或缺氧所引起的中樞神經(jīng)系統(tǒng)循環(huán)機(jī)能不全。此化合物也可用于其它器官或組織-如心臟和腎臟-的缺氧型疾病。
從而，本發(fā)明涉及具有S絕對(duì)構(gòu)型的α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺的左旋對(duì)映體，該化合物中實(shí)際上沒有具有R絕對(duì)構(gòu)型的右旋對(duì)映體。
本發(fā)明的(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺不能通過分離兩種對(duì)映體而直接從外消旋體中獲得。此化合物可按下列方法之一進(jìn)行制備(a)將(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酸依次同(1)一種式為HalCOOZ的鹵代甲酸烷基酯，其中Hal代表鹵原子，而Z代表具有1到4個(gè)碳原子的烷基，和(2)氨進(jìn)行反應(yīng)。鹵代甲酸烷基酯最好是氯代甲酸乙酯。
反應(yīng)通常是在-10℃和-60℃的溫度之間并且在二氯甲烷中進(jìn)行。
此反應(yīng)中所用的(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酸，可按原來已知的下述方法將外消旋的(±)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酸進(jìn)行化學(xué)拆分而得例如，使該酸與一種旋光堿形成鹽，然后在一種合適的溶劑(例如苯)中進(jìn)行連續(xù)的結(jié)晶操作，而分離與(S)-1α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酸所生成的鹽?？捎糜诓痖_方法的旋光堿的例子有如二甲氧基馬錢子堿、金雞鈉堿、馬錢子堿、奎尼定和辛可尼定這一類的生物堿;以及如α-甲基芐胺和脫氫樅酸胺這一類的胺〔參閱S·H·WILEN等人，《四面體》(S·H·WILENetal，Tetrahedron，33，(1977)，2725-2736)〕。使用α-甲基-芐胺和脫氫樅酸胺可得到特別有利的效果。
用作原料的外消旋的(±)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酸可通過將相應(yīng)的烷基酯皂化而得，該酯的合成方法在英國專利1，309，692中已有描述。
(b)環(huán)化一種(S)-2-氨基-丁酰胺，其式為其中X代表一種ZOOC-或HalCH2-基團(tuán)，Z是具有1到4個(gè)碳原子的烷基，Hal是鹵原子，最好是氯或溴原子，而Y代表-CH2-或-CO-基團(tuán)。
條件是，當(dāng)X代表ZOOC-基團(tuán)時(shí)，Y是-CH2-基團(tuán)，而當(dāng)X代表HalCH2-基團(tuán)時(shí)，則Y是-CO-基團(tuán)。
式A的(S)-2-氨基-丁酰胺的環(huán)化反應(yīng)是在一種惰性溶劑如甲苯或二氯甲烷中進(jìn)行的，而反應(yīng)溫度可在0℃到溶劑的沸點(diǎn)之間。此環(huán)化反應(yīng)在有作為催化劑的堿性物質(zhì)存在的條件下進(jìn)行比較有利。當(dāng)式A的化合物是酯(X＝ZOOC-)時(shí)，此催化劑最好是2-羥基吡啶;當(dāng)式A的化合物是鹵代物(X＝HalCH2-)時(shí)，此催化劑最好是溴化四丁基銨。
當(dāng)X是ZOOC-基團(tuán)而Y是-CH2-基團(tuán)時(shí)，式A的化合物是式為ZOOCH2CH2CH2NHCH(C2H5)CONH2(其中Z具有上述意義)的(S)-4-〔〔1-(氨基羰基)丙基〕氨基〕丁酸烷基酯。前者可由(S)-2-氨基-丁酰胺與式為ZOOCH2CH2CH2Hal的4-鹵代丁酸烷基酯縮合來制備(其中Z具有上述意義，Hal是鹵原子)。
當(dāng)X是HalCH2-基團(tuán)從而Y是-CO-基團(tuán)時(shí)，式A的化合物是式為HalCH2CH2CH2CONHCH(C2H5)CONH2(其中Hal具有上述意義)的(S)-N-〔1-(氨基羰基)丙基〕-4-鹵代丁酰胺。前者可由(S)-2-氨基-丁酰胺與式為HalCH2CH2CH2COHal(其中Hal是鹵原子)的4-鹵代丁酰鹵縮合來制備。
(S)-2-氨基-丁酰胺和4-鹵代丁酸烷基酯或4-鹵代丁酰鹵之間的反應(yīng)通常是在一種惰性溶劑如苯、甲苯、二氯甲烷或乙腈中、溫度范圍在-5～100℃之間并且在一種如有機(jī)叔堿(例如三乙胺)或無機(jī)堿(例如碳酸鉀或氫氧化鉀或碳酸鈉或氫氧化鈉)的酸接受劑存在下進(jìn)行的。
當(dāng)X代表HalCH2-基團(tuán)而Y代表-CO-基團(tuán)時(shí)，則分離由上述原料制得的式A的化合物不是絕對(duì)必要的。事實(shí)上，按照本發(fā)明(參見下述實(shí)施例4)，可將就地制得的式A的化合物直接環(huán)化為(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺。
用作原料的(S)-2-氨基-丁酰胺，可按照K·FOLKERS等人在《醫(yī)藥化學(xué)雜志》1971年第14卷(6)第484～487頁(K·FOLKERS et al·J·Med·CHem·14，(6)，(1971)484～487)敘述的方法，以(S)-2-氨基-丁酸為原料，氨解其相應(yīng)的甲基酯而制得。
下面的實(shí)施例僅僅是為了說明本發(fā)明。
在這些例子中，所得化合物的旋光純度是由熱量法測(cè)定其微分焓(differential enthapies)的方法鑒定的〔C·FOUQUEY和J·JACQUES，《四面體》，1967年第23卷，第4009～19頁(C·FOUQUEY and J·JACQUES，Tetrahedron，23，(1967)，4009～19)〕。
實(shí)施例1 a)(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酸的(R)-α-甲基-芐胺鹽的制備在50升的反應(yīng)器中將8.7公斤(50.8摩爾)外消旋的(±)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酸懸浮于21.5升無水苯中。于此懸浮液中逐漸加入3.08公斤(25.45摩爾)(R)-(+)-α-甲基-芐胺和2.575公斤(25.49摩爾)三乙胺溶于2.4升無水苯中所得的溶液。然后回流加熱直到混合物溶解完全。然后冷卻并放置使之結(jié)晶數(shù)小時(shí)。得到5.73公斤(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酸的(R)-α-甲基-芐胺的鹽。
熔點(diǎn)148～151℃。產(chǎn)率77.1%。
此鹽可通過在48.3升苯中加熱回流4小時(shí)，然后將混合物冷卻并過濾進(jìn)行純制，得到5.040公斤需要的鹽。
熔點(diǎn)152～153.5℃。產(chǎn)率67.85%。
b)(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酸的制備將在上述a)中所得到的5.04公斤的鹽溶于9升水。慢慢加入710克30%的氫氧化鈉溶液，以使溶液的PH值達(dá)到12.6而溫度不超過25℃。繼續(xù)攪拌溶液20分鐘，用總量為18升的苯反復(fù)提取游離出來的α-甲基-芐胺。
然后，加入3.2升6N鹽酸使水相酸化到PH1.1。將形成的沉淀物過濾出來，用水洗滌并干燥。
濾液用總量為50升的二氯甲烷反復(fù)提取。有機(jī)相用硫酸鈉干燥，過濾并在減壓下蒸發(fā)至干。
將蒸發(fā)后得到的殘余物和先前分離出的沉淀物一起溶于14升熱的二氯甲烷。蒸餾二氯甲烷并以蒸餾速率用14升甲苯代替二氯甲烷，產(chǎn)品可以從甲苯中結(jié)晶折出。
把混合物冷卻到室溫，濾出結(jié)晶，得到2.78公斤(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酸。熔點(diǎn)125～9℃?！拨痢?0D＝-26.4°(c＝1，丙酮)產(chǎn)率94.5%。
c)(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺的制備將34.2克(0.2摩爾)(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酸懸浮于225毫升冷卻到-30℃的二氯甲烷中。在15分鐘內(nèi)滴加24.3克(0.24摩爾)三乙胺。然后將反應(yīng)混合物冷卻到-40℃，再于12分鐘內(nèi)滴加24.3克(0.224摩爾)氯甲酸乙酯。此后，在混合物中通入氨氣流4 1/2 小時(shí)。然后使反應(yīng)混合物的溫度恢復(fù)至室溫，濾出形成的銨鹽，用二氯甲烷洗滌。在減壓下蒸去溶劑。將所得固體殘余物分散于55毫升甲苯中，攪拌分散液30分鐘，然后過濾。
產(chǎn)品用280毫升乙酸乙酯 在9克0.4毫微米的粉狀分子篩存在下進(jìn)行重結(jié)晶。
得到24.6克(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺。熔點(diǎn)115～118℃。〔α〕25D＝-89.7°(C＝1，丙酮)產(chǎn)率72.3%對(duì)C8H14N2O2的分析，按%計(jì)計(jì)算值C56.45 H8.29 N16.46實(shí)驗(yàn)值56.71 8.22 16.48用于上述合成的外消旋的(±)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酸是由下述方法制備的。
將788克(19.7摩爾)氫氧化鈉溶于4.35升水所得的溶液在2小時(shí)內(nèi)，并在溫度不超過60℃的情況下注入盛有3.65公斤(18.34摩爾)(±)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酸乙酯的20升的燒瓶中。添加完畢后，把混合物的溫度提高到80℃，蒸餾出所生成的醇直到反應(yīng)混合物的溫度達(dá)到100℃。
然后將反應(yīng)混合物冷卻到0℃，在兩個(gè)半小時(shí)內(nèi)加入1.66升(19.8摩爾)12N鹽酸。過濾所形成的沉淀物，用2升甲苯洗滌，再用異丙醇重結(jié)晶。這樣得到在155～156℃熔化的2.447公斤外消旋的(±)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酸。產(chǎn)率78%。
對(duì)C3H12NO3的分析，按%計(jì)計(jì)算值C56.12 H7.65 N8.18實(shí)驗(yàn)值55.82 8.10 7.97實(shí)施例2 a)(S)-4-〔〔1-(氨基羰基)丙基〕氨基〕丁酸乙酯的制備在47.75克(0.345摩爾)(S)-2-氨基-丁酰胺鹽酸鹽(〔α〕25D+26.1°;C＝1，甲醇)的400毫升甲苯的懸浮液中加入143.6毫升(1.035摩爾)三乙胺。將混合物加熱到80℃，再滴入67.2克(0.345摩爾)4-溴丁酸乙酯。
使反應(yīng)混合物在80℃保溫10小時(shí)，然后趁熱過濾以除去三乙胺鹽。再于減壓下蒸發(fā)濾液，得到59克主要含有單烷基化的產(chǎn)品但也含有少量雙烷基衍生物的油狀殘余物。
在環(huán)化制備(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺時(shí)，可直接使用上面得到的粗產(chǎn)品而無須另外純制。
b)(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺的制備在2克2-羥基吡啶的存在下將在上述a)中制得的粗產(chǎn)品54克溶于125毫升甲苯?；旌衔镌?10℃加熱12小時(shí)。
趁熱過濾，除去不溶物，然后在減壓下蒸發(fā)濾液。
用裝有1.1公斤硅膠的色譜柱對(duì)殘余物進(jìn)行色譜法純制〔柱徑5厘米;洗脫劑乙酸乙酯、甲醇和濃氨水的混合液，其體積比為85∶12∶3〕。
分離所得的產(chǎn)品，在50毫升乙酸乙酯中進(jìn)行重結(jié)晶，得到17.5克(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺。
熔點(diǎn)117℃。〔α〕25D-90.0°(C＝1，丙酮)產(chǎn)率41%。
實(shí)施例3 a)(S)-N-〔1-(氨基羰基)丙基〕-4-氯代丁酰胺的制備將345.6克(2.5摩爾)碳酸鉀粉末與138.5克(1摩爾)(S)-2-氨基-丁酰胺鹽酸鹽在2.5升乙腈中混合。冷卻反應(yīng)混合物至0℃，并滴加129.2克(1.2摩爾)4-氯丁酰氯溶于500毫升乙腈所得的溶液。然后，使反應(yīng)混合物的溫度恢復(fù)到室溫，濾去不溶物，在減壓下蒸發(fā)濾液。在5℃到10℃之間的溫度下將所得到的粗殘余物與1.2升無水乙醚一起攪拌30分鐘。濾出沉淀物，用225毫升乙醚洗滌兩次，真空干燥，得到162.7克(S)-N-〔1-氨基羰基)丙基〕-4-氯代丁酰胺。
熔點(diǎn)118～123℃?！拨痢?5D-18°(C＝1，甲醇)產(chǎn)率78.7%。
這樣得到的粗產(chǎn)品非常適合于下一步的環(huán)化。不過，也可以將其在無水乙酸乙酯中攪拌1小時(shí)進(jìn)行純制。
熔點(diǎn)120～122℃?！拨痢?5D-22.2°(c＝1，甲醇)。
b)(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺的制備在0℃及氮?dú)夥罩袑?.2克(0.03摩爾)(S)-N-〔1-(氨基羰基)丙基〕-4-氯丁酰胺和0.484克(0.0015摩爾)溴化四丁基銨在45毫升二氯甲烷中混合。在30分鐘時(shí)間內(nèi)以不使反應(yīng)混合物的溫度超過+2°的速度加入2.02克(0.036摩爾)氫氧化鉀粉末，混合物攪拌1小時(shí)，然后再加入0.1克(0.0018摩爾)粉末氫氧化鉀，在0℃繼續(xù)攪拌30分鐘。放置使混合物溫度恢復(fù)至室溫。過濾除去不溶物質(zhì)，濾液在減壓下進(jìn)行濃縮。在1.9克0.4毫微米分子篩存在下用40毫升乙酸乙酯對(duì)所得殘余物物進(jìn)行重結(jié)晶。趁熱過濾除去分子篩，得到3.10克(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺。
熔點(diǎn)116.7℃?！拨痢?5D-90.1°(C＝1，丙酮)。
產(chǎn)率60.7%。
實(shí)施例4 (S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺的制備本實(shí)施例介紹一種與實(shí)施例3不同的方法，在本方法中，就地制得的中間產(chǎn)物4-氯丁酰胺不用分離出來。在室溫下于69.25克(0.5摩爾)(S)-2-氨基-丁酰胺鹽酸鹽的600毫升二氯甲烷的懸浮液內(nèi)加入84克無水硫酸鈉。冷卻混合物至0℃，加入115克粉末氫氧化鉀，接著再加入溶于100毫升二氯甲烷的8.1克(0.025摩爾)溴化四丁基銨。在激烈攪拌下于0℃滴加77.5克4-氯丁酰氯溶于100毫升二氯甲烷所得的溶液。反應(yīng)5小時(shí)后，再加入29克粉末氫氧化鉀。兩小時(shí)后，用硅藻土(Hyflo-cel)過濾反應(yīng)混合物，減壓蒸發(fā)濾液。使殘余物(93.5克)分散在130毫升熱的甲苯中，并保持45分鐘。過濾所生成的混合物，在減壓下蒸發(fā)濾液。將殘余物(73.1克)熱溶解于380毫升乙酸乙酯中，并向其中加入23克0.4毫微米分子篩粉末。將此混合物加熱到回流溫度，趁熱過濾，濾液冷卻后，所需產(chǎn)品結(jié)晶析出，得到63克(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺。
熔點(diǎn)117℃?！拨痢?5D-91.3°(C＝1，丙酮)產(chǎn)率74.1%。
藥理試驗(yàn)對(duì)外消旋的α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺(化合物A)和本發(fā)明的(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺(化合物B)進(jìn)行了藥理試驗(yàn)。
1、抗缺氧的保護(hù)作用(小鼠)a.原理〔C·CIURGEA和F·MOURAVIEFF-LESUISSE“第十屆世界神經(jīng)心理學(xué)國際會(huì)議會(huì)議集”，Pergamon出版社，牛津，紐約，1978年，第1623～1631頁(C·GIURGEA and F·MOURAVIEFF-LESUISSE;Proc.Xth Intern.Congr，of the Coll.Intern.Neuro-Psych.-Pergamon Press Oxford and New York，1978P，1623～1631)〕本試驗(yàn)的原理是測(cè)定當(dāng)生物體被置于在含氧量逐漸下降的空氣中時(shí)尚能存活的可能性。由于神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)這種缺氧型的侵害具有特殊的敏感性，故可將由此試驗(yàn)得到的結(jié)果解釋為中樞神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)缺氧環(huán)境的抵抗力的一種量度。能夠增加動(dòng)物體對(duì)這種缺氧型侵害的抵抗力的化合物，適用于治療和防止中樞神經(jīng)系統(tǒng)的缺氧型侵害。
b.方法所用裝置由一個(gè)高37厘米，深39厘米和寬97厘米的氣密透明盒構(gòu)成。這個(gè)140升的盒子有60個(gè)各為6×10×10Cm的透明分隔間，使它能夠分別地容納60只小鼠。
鼓風(fēng)機(jī)通過一個(gè)網(wǎng)格底部(grid floor)使空氣能夠在各個(gè)分隔間之間循環(huán)。盒子上裝備了一個(gè)能以固定流速引入氮?dú)獾难b置，盒上還有一個(gè)小孔，用以同環(huán)境空氣溝通。試驗(yàn)前一天使體重20～22克的雄性小鼠(NMRI系種)斷食。在斷食的第二天進(jìn)行試驗(yàn)。試驗(yàn)是對(duì)20只一組的三組老鼠同時(shí)進(jìn)行的;給對(duì)照組中的老鼠喂以水，而另兩組的老鼠則喂以待測(cè)的一種化合物。服藥后過25分鐘，將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨便分散在各分隔間中，這樣，就不會(huì)使三組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中的任一組集中在盒子的某一特定區(qū)域內(nèi)。
服藥后30分鐘，將盒子關(guān)閉，以一恒定流速向盒中通氮(每分鐘通入7.75升工業(yè)純的氮?dú)?約37分鐘，這時(shí)，盒子中空氣含有3.7%的氧。
使盒子關(guān)閉放置，直至觀察到20只對(duì)照組的動(dòng)物中還活著的不到三只的危險(xiǎn)時(shí)刻到來。這時(shí)，打開盒子。通入大氣空氣。數(shù)分鐘后，對(duì)每組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中的存活者進(jìn)行計(jì)數(shù)。
對(duì)于所試化合物的每一種劑量，都重復(fù)實(shí)驗(yàn)一或兩次，把各次實(shí)驗(yàn)結(jié)果匯集起來，就得到每種劑量對(duì)至少40(或60)只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物〔相應(yīng)的對(duì)照動(dòng)物也至少有40(或60)只〕的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。對(duì)于被試化合物的每一種劑量，將服用該化合物的動(dòng)物的存活數(shù)同對(duì)照動(dòng)物的存活數(shù)進(jìn)行對(duì)比。這兩種數(shù)據(jù)的差別說明了該化合物抗由缺乏氧氣所引起的缺氧癥的保護(hù)作用。
此差異的統(tǒng)計(jì)顯著性(P)(stati stical significance)是根據(jù)費(fèi)希爾-耶茨試驗(yàn)(Fisoher-Yates test)計(jì)算的。
c.實(shí)驗(yàn)結(jié)果下面表Ⅰ給出了由增加化合物A和B的劑量所得到的結(jié)果。
表Ⅰ被試化合物 口服劑量 存活動(dòng)物數(shù)毫摩爾/公斤 對(duì)照組 實(shí)驗(yàn)組 PA 0.032 12/60 16/30 NS0.1 8/60 7/60 NS0.16 12/60 12/60 NS0.32 10/60 30/60 ＜0.001B 0.016 5/40 11/40 NS0.032 8/40 17/40 ＜0.60.1 6/40 19/40 ＜0.0050.16 6/40 19/40 ＜0.005
0.32 5/40 17/40 ＜0.01NS＝無統(tǒng)計(jì)顯著性d.結(jié)論在此試驗(yàn)中，本發(fā)明的左旋對(duì)映體(化合物B)當(dāng)其服用劑量為0.032毫摩爾/公斤以上時(shí)，能增加實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在低氧條件下的生存能力。而外消旋物(化合物A)服用劑量只有在0.32毫摩爾以上時(shí)(開始有效的劑量)才能表現(xiàn)出同樣的作用。因此，本發(fā)明的左旋對(duì)映體比相應(yīng)的外消旋物的有效性高十倍。
Ⅱ、抗大腦局部缺血的保護(hù)作用(大鼠)a.原理(C·GIURGEA和F·MOURVIEFF-LESUISSE;見上述Ⅰ·)腦電圖儀的監(jiān)測(cè)結(jié)果表明，結(jié)扎大鼠的兩條普通頸動(dòng)脈(commoncarotids)可引起真實(shí)的大腦局部缺血腦電圖變平甚至成為等電位〔電寂靜(electric silent)〕。
b.方法對(duì)體重250克和350克之間的雄性Wistar大鼠腹膜內(nèi)注射劑量為50毫克/公斤(0.5毫升/100克)的戊巴比妥使之麻醉。
麻醉后，立即給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腹膜內(nèi)注射溶于等滲氯化鈉溶液中的被測(cè)化合物(對(duì)被試組動(dòng)物)或僅注射等滲壓氯化鈉溶液或無效劑(對(duì)對(duì)照組動(dòng)物)，其量都是0.5毫升/100克。約20分鐘之后，將2條普通頸動(dòng)脈剝離出來，約十分鐘后，同時(shí)結(jié)扎這2條頸動(dòng)脈。此手術(shù)對(duì)對(duì)照動(dòng)物和試驗(yàn)動(dòng)物是同時(shí)施行的。
注射被測(cè)化合物或無效劑之后一小時(shí)，再次腹膜內(nèi)注射同樣劑量的被試化合物(對(duì)被試動(dòng)物)或無效劑(對(duì)對(duì)照動(dòng)物)。
第一次注射后5小時(shí)，再第三次注射同樣劑量的被測(cè)化合物(對(duì)還活著的被試動(dòng)物)或無效劑(對(duì)還活著的對(duì)照動(dòng)物)。
第一次注射后24小時(shí)，在戊巴比妥麻醉下從結(jié)扎線下切斷向下液流頸動(dòng)脈，對(duì)所有試驗(yàn)動(dòng)物檢查結(jié)扎的效能。對(duì)被試動(dòng)物和對(duì)照動(dòng)物中的存活者進(jìn)行計(jì)數(shù)。對(duì)被測(cè)化合物的每種劑量，將用該化合物處理過的動(dòng)物中存活數(shù)同對(duì)照動(dòng)物存活數(shù)進(jìn)行對(duì)比。二者之差表示該化合物具有的減少因同時(shí)結(jié)扎2條頸動(dòng)脈所引起死亡的死亡率的保護(hù)作用。該差別的統(tǒng)計(jì)顯著性(P)是根據(jù)布蘭德-斯耐得考試驗(yàn)(Brandt-Snedecor test)計(jì)算的。
c.實(shí)驗(yàn)結(jié)果下面表Ⅱ給出了增加化合物A和B的劑量所得到的結(jié)果。
表Ⅱ被測(cè)化合物 腹膜內(nèi)注射劑量 存活動(dòng)物數(shù)(毫摩爾/公斤) 對(duì)照組 被試組 PA 0.32 6/29 8/29 NS0.64 11/30 21/30 0.01B 0.1 9/29 14/29 NS0.16 6/29 14/30 0.050.32 3/30 19/29 0.01NS＝?jīng)]有顯著的差別d.結(jié)論表Ⅱ說明，外消旋物(化合物A)當(dāng)其劑量在0.64毫摩爾/公斤以上時(shí)才有效果，而本發(fā)明的左旋對(duì)映體(化合物B)僅當(dāng)其使用劑量在0.16毫摩爾/公斤以上時(shí)就有降低因同時(shí)結(jié)扎兩條頸動(dòng)脈而引起的死亡率的保護(hù)作用，因此，其有效性4倍于外消旋體。
Ⅲ、毒性下面的表Ⅲ給出了化合物A和B的LD50(半致死量)數(shù)據(jù)，其單位是毫克/公斤，這是在給雄性小鼠和雄性大鼠靜脈注射上述化合物之后測(cè)定的表Ⅲ被測(cè)化合物 LD50(單位毫克/公斤)小鼠 大鼠A 1790 1500B 1081 1038由上表可見，同外消旋物(化合物A)相似，本發(fā)明的左旋對(duì)映體(化合物B)毒性也很低，其中毒劑量遠(yuǎn)在其有效劑量之上。
本發(fā)明的化合物既能以固體或液體組合物的形式(例如片劑、丸劑糖衣丸劑、膠囊、溶液或糖漿等形式)口服，也能以可注射的溶液或懸浮液的形式非腸胃道用藥?？砂闯Ｒ?guī)的藥物制劑法制備諸如溶液式片劑等藥物劑型。本發(fā)明的化合物可以與一種固體或液體的藥物上可接受的無毒載體混合，同時(shí)也可任意地和一種分散劑、穩(wěn)定劑以及必要時(shí)，和著色劑相混合。
同樣，用于上述組合物的固體的或液體的藥物載體都是公眾所熟知的。
用于制備片劑或膠囊的固體藥物賦形劑包括，例如淀粉、滑石、碳酸鈣、乳糖、蔗糖和硬脂酸鎂。
根據(jù)服用方式和病人的狀況不同，有效產(chǎn)品在藥物組合物中的百分含量可以在很大范圍內(nèi)變動(dòng)。用于人體的劑量可在每天250毫克至3克之間變動(dòng)。
下面給出了含有本發(fā)明化合物的組合物的一個(gè)非限制實(shí)施例，即一種口服用的100毫克劑量的膠囊。
化合物B 100毫克化維塞爾(微晶纖維素) 217毫克硬脂酸鎂 5毫克
權(quán)利要求
1.制備(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺的方法，包括，將(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酸依次同(1)一種其式為HalCOOZ的鹵代甲酸烷基酯(其中Hal代表鹵素原子，Z代表具有1到4個(gè)碳原子的烷基)和(2)氨進(jìn)行反應(yīng)。
2.制備(S)-a-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺的方法，包括，在一種惰性溶劑中并在一種堿性物質(zhì)存在下，將式為(其中X代表ZOOC-或HalCH2-基團(tuán)，Z是具有1到4個(gè)碳原子的烷基，Hal是鹵素原子，而Y代表-CH2-或-CO-基團(tuán))的(S)-2-氨基-丁酰胺環(huán)化，其條件是，當(dāng)X代表ZOOC-基團(tuán)時(shí)，Y是-CH2-基團(tuán)，而當(dāng)X代表HalCH2-基團(tuán)時(shí)，則Y是-CO-基團(tuán)。
3.如權(quán)項(xiàng)2所述的方法，其中式A的化合物是一個(gè)式為ZOOCCH2CH2CH2NHCH(C2H5)CONH2的(S)-4-〔〔1-(氨基羰基)丙基〕氨基〕丁酸酯，并已通過(S)-2-氨基-丁酰胺和一種式為ZOOCCH2CH2CH2Hal的4-鹵代丁酸烷基酯進(jìn)行縮合而制得，Z具有權(quán)項(xiàng)3中所給的意義，Hal是鹵素原子。
4.如權(quán)項(xiàng)2所述的方法，其中式A的化合物是一個(gè)式為HalCH2CH2CH2CONHCH(C2H5)CONH2的(S)-N-〔1-(氨基羰基)丙基〕-4-鹵代丁酰胺，并已通過(S)-2-氨基-丁酰胺和一種式為HalCH2CH2CH2COHal的4-鹵代丁酰鹵進(jìn)行縮合而制得，Hal是鹵素原子。
5.制備一種藥物組合物的方法，該法包括將有效治療量的(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺與用于此組合物的藥物上可接受的固體的或液體的稀釋劑或載體摻混在一起。
專利摘要
(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺，其制備方法和含有該成份的藥劑組合物。它可以通過將(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酸依次同一種鹵甲酸烷基酯和氨反應(yīng)或通過將一種其式為X-CH
文檔編號(hào)C07D207/27GK85105301SQ85105301
公開日1987年1月14日 申請(qǐng)日期1985年7月10日
發(fā)明者瓊·戈貝爾特 申請(qǐng)人:尤西比公司導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan