本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領域，具體涉及廣東蟲草子實體多糖在制備治療和改善糖尿病腎病的產品中的應用。

背景技術：

1、糖尿病是一種由于胰島素分泌不足或者胰島素利用障礙引起的，以高血糖為主的慢性病，ⅱ型糖尿病是最常見的糖尿病類型，占全球糖尿病人數的90％左右。ⅱ型糖尿病的病因尚不完全清楚，但與超重、肥胖、年齡增長、種族和家族史有密切聯系。隨著病情的發(fā)展，會進一步引起糖尿病腎病、視網膜病變、神經病變、外周動脈疾病和足部潰瘍等糖尿病并發(fā)癥。糖尿病腎病(diabetic?kidney?disease,dkd)是糖尿病患者最常見、最嚴重的微血管并發(fā)癥之一，也是終末期腎病(end-stage?kidney?disease,eskd)的主要原因，全球大約有30％-40％的糖尿病患者伴有腎臟損傷。dkd發(fā)病機制復雜，涉及糖代謝障礙、腎臟血流動力學改變、細胞因子異常表達、氧化應激、腎臟組織炎癥和遺傳等多種因素的相互作用。目前臨床缺乏有效改善和治療dkd的藥物，常用臨床治療主要包括控制血糖、血壓和血脂等，當dkd發(fā)展到一定階段，需要通過血液透析、腹膜透析和腎臟移植等手段治療。迫切需要提高對dkd發(fā)病機制的認知，開發(fā)新的有效的治療方法和策略來減緩dkd發(fā)展。

2、食藥用真菌中富含多糖、蛋白質、三萜和多酚等，具有抗氧化，降膽固醇，抗高血壓，抗炎，保護肝臟，抗病毒和抗糖尿病等健康益處。廣東蟲草(cordycepsguangdongensis)屬于子囊菌門，線蟲草科(ophiocordicipitaceae)，彎頸霉屬(tolypocladium)，是我國特有的蟲草資源，于2013年批準為新資源食品(衛(wèi)生部2013年第1號公告)，廣東蟲草與野生冬蟲夏草活性成分非常相似，包括蟲草酸、腺苷、蟲草多糖、蟲草多肽、黃酮、生物堿、有機酸及維生素和微量元素等活性成分。具有抗疲勞、抗氧化、抗病毒、改善慢性支氣管炎和提高免疫力等藥理活性。目前，未見有廣東蟲草子實體多糖組分改善糖尿病腎病相關方面的報導。

技術實現思路

1、本發(fā)明的目的是提供蟲草子實體多糖的醫(yī)藥新用途。

2、本發(fā)明所提供的蟲草子實體多糖的醫(yī)藥新用途，為：蟲草子實體多糖在制備治療和改善糖尿病腎病的產品中的應用。

3、所述蟲草子實體多糖具體可為廣東蟲草子實體多糖。

4、所述蟲草子實體多糖通過包括如下步驟的方法制備得到：

5、將蟲草子實體干燥，粉碎，用無水乙醇回流提取，過濾，收集乙醇提取后的殘渣，干燥，用蒸餾水回流提取，收集提取液，濃縮，采用sevag試劑除去蛋白，將所得去除蛋白質的提取液采用乙醇分級沉淀的方法純化，得到蟲草子實體多糖，

6、上述方法中，所述蟲草子實體具體可為廣東蟲草子實體；

7、所述干燥在50-60℃鼓風干燥箱中進行；

8、蟲草子實體與無水乙醇的配比可為1kg：10-30l，具體可為1kg：10l；

9、用無水乙醇回流提取多次，具體可為3次，每次0.5h-3.0h，具體可為1.0h；

10、蟲草子實體殘渣與蒸餾水的配比可為1kg:20-50l；

11、用蒸餾水回流提取多次，具體可為3次，每次0.5h-3.0h,具體可為2h；

12、所述采用sevag試劑除蛋白的操作為：向提取液中(粗多糖溶液)中加入氯仿—正丁醇混合溶液，充分振搖，將游離蛋白變性成為不溶性物質，經離心分離去除沉淀，收集濃縮液，即可。

13、所述乙醇分級沉淀包括如下操作：

14、向所得去除蛋白質的提取液中加入無水乙醇至乙醇體積濃度為30％，醇沉過夜，離心，收集沉淀和上清液，得到粗多糖1和上清液1；

15、在上清液1中加入無水乙醇至乙醇體積終濃度為50％，醇沉過夜，離心，收集沉淀和上清液，得到粗多糖2和上清液2；

16、在上清液2中加入無水乙醇至乙醇體積終濃度為75％，醇沉過夜，離心，收集沉淀和上清液，得到粗多糖3和上清液3；

17、收集50％乙醇沉淀組份(粗多糖2)，分別用無水乙醇、丙酮和無水乙醚洗滌沉淀，將沉淀用蒸餾水復溶，真空冷凍干燥，得到蟲草子實體多糖cgdp；

18、其中，所述醇沉過夜的溫度為4℃。

19、所得蟲草子實體多糖的單糖組成為：以色譜峰面積計，甘露糖35-60％，葡萄糖5％-20％和半乳糖35％-55％。

20、所述應用中，所述產品具體可為食品和/或藥物；

21、所述應用包括：1)改善腎功能；

22、2)降低腎臟炎癥(降低腎臟中il-6、tnf-α、il-1β和mcp-1的mrna表達)；

23、3)抑制腎臟氧化應激和纖維化(降低腎臟rac1、keap1、ncf2和nsf11c的mrna表達)

24、4)降低腸道和腎臟中致病菌(主要是大腸埃希氏菌屬escherichia)的豐度。

25、所得蟲草子實體多糖是一種天然、無毒副作用的食藥用真菌提取物，經動物實驗證實其具有明顯的治療和改善糖尿病腎病的作用。

26、所述蟲草子實體多糖可以和藥劑學上可接受的輔料按傳統(tǒng)或現代生產工藝制成臨床可以接受的口服劑型。如散劑、茶劑、顆粒劑、膠囊劑、片劑、濃縮丸、滴丸、膜劑、煎膏劑、口服液或口服乳等等。所用的藥物輔料可以是淀粉、糊精、乳糖、微晶纖維、明膠、蔗糖、硬脂酸鎂，赤蘚糖醇、木糖醇、山梨糖醇、甘露糖醇、麥芽糖醇、異麥芽糖醇、氫化淀粉水解物、甜菊苷、甜菊雙糖苷、二氫查耳酮、甘草甜素、木糖醇、阿斯巴甜、阿力甜、糖精、甜蜜素、安塞蜜、三氯蔗糖等。臨床上需要長期用藥，制成固體制劑貯存方便，患者服用便利，也更適應市場需求。優(yōu)選的劑型是膠囊劑、顆粒劑、片劑。

27、與現有技術相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點：

28、(1)本發(fā)明制備的廣東蟲草子實體多糖可以治療和改善糖尿病腎病，改善腎功能，降低血清尿素氮和血肌酐水平，降低糖尿病小鼠血漿中尿毒癥毒素吲哚硫酸酚(indoxylsulfate,is)的水平；改善腎臟炎癥，降低腎臟中il-6、tnf-α、il-1β和mcp-1的mrna表達；抑制腎臟氧化應激和纖維化，降低腎臟rac1、keap1、ncf2和nsf11c的mrna表達；降低腸道和腎臟中致病菌的豐度，主要是大腸埃希氏菌屬escherichia。

29、(2)本發(fā)明的廣東蟲草子實體多糖的制備方法簡便，制備條件溫和，可以最大程度的保留多糖完整結構和活性成分。

30、因此，對廣東蟲草子實體多糖進行治療和改善糖尿病腎病的食品或藥物研發(fā)，具有重大的臨床意義和科學價值。

技術特征：

1.蟲草子實體多糖在制備治療和改善糖尿病腎病的產品中的應用。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于：所述蟲草子實體多糖為廣東蟲草子實體多糖。

3.根據權利要求1或2所述的應用，其特征在于：所述蟲草子實體多糖通過包括如下步驟的方法制備得到：

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于：所述干燥在50-60oc鼓風干燥箱中進行；

5.根據權利要求3所述的應用，其特征在于：所述乙醇分級沉淀包括如下操作：

6.根據權利要求1-5中任一項所述的應用，其特征在于：所述蟲草子實體多糖的單糖組成為：以色譜峰面積計，甘露糖35-60％，葡萄糖5％-20％和半乳糖35％-55％。

7.根據權利要求1-6中任一項所述的應用，其特征在于：所述產品為食品和/或藥物。

8.根據權利要求1-7中任一項所述的應用，其特征在于：所述應用包括：1)改善腎功能；

9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于：所述致病菌主要是大腸埃希氏菌屬escherichia。

技術總結
本發(fā)明公開了廣東蟲草子實體多糖在制備治療和改善糖尿病腎病的產品中的應用。實驗結果表明廣東蟲草子實體多糖可以治療和改善糖尿病腎病，改善腎功能，降低血清尿素氮和血肌酐水平，降低糖尿病小鼠血漿中尿毒癥毒素吲哚硫酸酚的水平；改善腎臟炎癥，降低腎臟中IL?6、TNF?α、IL?1β和MCP?1的mRNA表達；抑制腎臟氧化應激和纖維化，降低腎臟Rac1、keap1、Ncf2和Nsf11c的mRNA表達；降低腸道和腎臟中致病菌的豐度，主要是大腸埃希氏菌屬Escherichia。

技術研發(fā)人員：劉宏偉,王濤,李泰輝,鄧旺秋
受保護的技術使用者：中國科學院微生物研究所
技術研發(fā)日：
技術公布日：2024/12/19