本發(fā)明涉及醫(yī)學及診斷試劑領域，具體地指一種阿爾茨海默病老年斑納米靶向磁共振診斷對比劑及制備方法。

背景技術：

長期以來，生物醫(yī)學中阿爾茨海默病(alzheimerdisease,ad)的診斷只有依靠病理活檢或尸檢來確診，但病理學活檢接受度不高，而利用腦脊液標志物來進行實驗室診斷，則面臨診斷準確性以及難以量化評估ad的嚴重程度等問題。目前針對ad的治療藥物一直難以取得實質的進展，主要原因在于當患者出現明顯的臨床癥狀時，疾病多數已經進入中晚期，往往延誤了患者的早期最佳治療時機，以至于療效均不理想。因此，只有采用合理有效的方法早期診斷ad患者，才可以在早期進行可能有效的干預治療，這對于挽救千百萬患者的生命和提高生活質量有著重要的社會和經濟意義。如何在ad發(fā)病的早期利用非創(chuàng)傷性方法來定性又定量的診斷ad，一直是廣大神經病學專家和研究者試圖解決的難題，現代分子影像學的飛速發(fā)展為早期診斷ad帶來可能，利用磁性納米顆粒特異性對老年斑進行活體磁共振顯像，是分子影像學與納米技術交叉整合的熱點和難點。本研究組在前期研究中發(fā)現：將磁性納米鐵顆粒進行表面修飾，連接生物肽段(aβ40肽段)特異性能與老年斑相結合的特性達到其靶向性作用，再連接生物肽段(hiv-1tat肽段)使之能夠通過血腦屏障，實現對app/ps1轉基因ad小鼠腦內老年斑的活體顯像。然而aβ40肽段作為老年斑的主要成分，但具有一定的毒性作用，同時其由40個氨基酸殘基組成，其免疫原性相對較大，同時空間結構上也會相對較大，不利于其通過血腦屏障。有研究表明，aβ40肽段的不同區(qū)域，其功能不同，其中aβ25-35是aβ40肽段的主要毒性部分，而aβ16-20則是aβ40肽段的主要結合部位。

在進一步的探索中，我們創(chuàng)新性地選擇aβ16-20代替aβ40肽段來與老年斑結合，不僅避開了毒性部分，還能降低免疫原性及空間體積，且aβ16-20分子量更小，合成費用更低。同時采用水向共沉淀法制備全新一代的超微超順磁性納米顆粒(uspio)，產物具有更好的生物相容性，且粒徑分布更窄，粒徑更小。

技術實現要素：

本發(fā)明針對現有技術存在的缺陷，提供了一種阿爾茨海默病老年斑納米靶向磁共振診斷對比劑及制備方法，本發(fā)明選擇aβ16-20代替aβ40肽段來與老年斑結合，不僅避開了毒性部分，還能降低免疫原性及空間體積，且aβ16-20分子量更小，合成費用更低。同時，本發(fā)明選用超微超順磁性納米顆粒(uspio)，產物具有更好的生物相容性，且粒徑分布更窄，粒徑更小。

為實現上述目的，本發(fā)明提供的一種阿爾茨海默病老年斑納米靶向磁共振診斷對比劑，所述診斷對比劑包括有效量的診斷物tat-ptd-uspio-aβ16-20和生理可接受的水；所述診斷物tat-ptd-uspio-aβ16-20由超順磁性納米氧化鐵顆粒uspio和負載在超順磁性納米氧化鐵顆粒上的兩個短肽組成，且兩個短肽分別人體免疫缺陷病毒(hiv-1)的轉錄活化因子肽段(簡稱:hiv-1tat肽段)和aβ16-20肽段，其中，轉錄活化因子肽段的氨基酸序列為：grkkrrqrrrppq，aβ16-20肽段的氨基酸序列為：klvff。

上述方法中所述的人免疫缺陷病毒hiv-1的轉錄活化因子肽段(hiv-1tat肽段)，可來源于多肽合成，其氨基酸序列為：grkkrrqrrrppq，[參見：1.dennisonsr,bakerrd,nichollid,phoenixda.interactionsofcellpenetratingpeptidetatwithmodelmembranes:abiophysicalstudybiochembiophysrescommun.2007nov9；363(1):178-82.epub2007sep4(pmid:17854767)；2.futakis.membrane-permeablearginine-richpeptidesandthetranslocationmechanismsadvdrugdelivrev.2005feb28；57(4):547-58.epub2004dec16(pmid:15722163)]；所述的ophysrescommun.}2007nov9；363(1):178-82.epub2007sep4(pmid:17854767)；2..membrane-permeablearginine-richpeptidesandthetranslocationmechanisms。2005feb28；57(4):547-58.epub2004dec16(pmid:15722163)]；所述的aβ16-20肽段，可來源于多肽合成，氨基酸序列為：klvff。

進一步地，所述超順磁性納米氧化鐵顆粒的粒徑為6～10nm。

再進一步地，所述診斷對比劑中，以鐵元素含量計量該診斷對比劑中診斷物tat-ptd-uspio-aβ16-20的濃度為：其鐵元素含量為0.01-20摩爾/升。

再進一步地，所述診斷物tat-ptd-uspio-aβ16-20的粒徑為50-65nm。

本發(fā)明還提供了一種阿爾茨海默病老年斑納米靶向磁共振診斷對比劑的制備方法，包括以下步驟：

1)利用水向共沉淀法制備葡聚糖包覆的超順磁性納米氧化鐵顆粒：

a.將2-5重量份的葡聚糖溶解于5-10重量份的蒸餾水中，得到葡聚糖溶液；

b.將1-3重量份的fecl3和1-4重量份的fecl2溶于2-4重量份蒸餾水中，得到鐵離子溶液；

c.將上述葡聚糖溶液和鐵離子溶液混合均勻，并在惰性氣體環(huán)境下磁力攪拌30-60mins，得到初級混合液，在溫度為4～10℃，按體積比為1：2～4向初級混合液中以33-60滴/秒的速度滴加濃度為0.1-0.25mol/l的氨水；氨水滴加完畢后升溫至60-70℃并繼續(xù)磁力攪拌90-120mins；然后往制備好的葡聚糖覆的納米氧化鐵顆粒；

2)表面官能化的超順磁性納米氧化鐵顆粒uspio的制備：

a.制備好的葡聚糖包覆的納米氧化鐵顆粒中加入絮凝劑，在8000-9000轉/min條件下離心10-20min，棄去上清液，得到沉淀物；

b.將沉淀物分散于蒸餾水中，得到含有超順磁性納米顆粒的混合溶液；

c.取2-4體積份的含有超順磁性納米顆粒的混合溶液與10-15體積份的含nabh4的naoh溶液在室溫下混合均勻，在惰性氣體環(huán)境下升溫至60-70℃，邊攪拌邊加入3-5體積份的表氯醇，反應約10-12小時后取下，加入絮凝劑，離心，重新分散，洗滌三至五次后，重新分散于蒸餾水中；得到分散液；

d.向分散液5-10體積份的乙二胺，反應10-12小時后取下，加入絮凝劑，離心，洗滌后重新分散于ph值為7.4-8的磷酸緩沖溶液(pbs)中，形成含有表官能化的超順磁性納米氧化鐵顆粒uspio的溶液；

3)交聯劑溶液與磷酸鹽溶液的混合液制備

按重量/體積比5～10:1～2mg/ml將3-(2-吡啶二巰基)丙酸n-羥基琥珀酰亞胺酯(spdp)溶于二甲基亞砜中，得交聯劑溶液，再將該交聯劑溶液與濃度為0.1-0.2mol/l、ph＝7.4-8的磷酸鹽緩沖溶液混合，得到交聯劑溶液與磷酸鹽溶液的混合液；

4)超順磁性納米氧化鐵顆粒uspio的交聯

向3～5體積份的含有表面官能化的超順磁性納米氧化鐵顆粒uspio的溶液加入步驟3)得到的2～3體積份的混合液中，在室溫下放置60～120分鐘，置于超濾管中，6000-8000轉/分離心50-60分鐘，過濾去除雜質和未反應的交聯劑溶液，得到經交聯液處理過的表面官能化的超順磁性納米氧化鐵顆粒(uspio)磷酸鹽溶液；其中超順磁性納米氧化鐵顆粒(uspio)磷酸鹽溶液中，超順磁性納米氧化鐵顆粒(uspio)含量為1.0-2.5mg/ml；

5)診斷對比劑的制備

診斷對比劑分別稱取1-2體積份的濃度為0.02mol/l的n-羥基琥珀酰亞胺(nhs)溶液和1-2體積份的濃度為0.2mol/l的3-二甲胺基丙基碳二亞胺(edc)溶液，并加入上述3-5體積份交聯溶液處理過的表面官能化的超順磁性納米氧化鐵顆粒(uspio)磷酸鹽溶液中，在溫度為35～40℃條件下放置30-90分鐘，然后再加入3-5重量份的人體免疫缺陷病毒hiv-1的轉錄活化因子肽段(hiv-1tat肽段)和3-5重量的份aβ16-20肽段，混合后室溫下放置10-12小時；置于超濾管中，6000-8000轉/分離心40-60分鐘，過濾去除雜質和未反應的(固體)成分，管中即為水相的診斷對比劑，診斷對比劑包括有效量的診斷物tat-ptd-uspio-aβ16-20和生理可接受的水。

作為優(yōu)選方案，所述步驟2)的第a小步中，絮凝劑為乙醇、甲醇、丙醇和丁醇中任意一種。

作為優(yōu)選方案，其特征在于：所述步驟2)的第b小步中，naoh濃度為1.8-2mol/l。

作為優(yōu)選方案，所述步驟2)的第c小步中，惰性氣為氮氣或氬氣。

作為優(yōu)選方案，其特征在于：所述步驟3)中，交聯劑溶液與磷酸鹽溶液的體積用量比為1：1-2。

本發(fā)明的有益效果在于：

本發(fā)明采用了小分子的aβ16-20來作為識別ad老年斑的特異性探針，同時采用水向共沉淀法制備全新一代的超微超順磁性納米顆粒，與現有的ad診斷方法相比又具有安全無創(chuàng)性，同時又能實腦內老年斑的活體磁共振顯像。與前期產品相比毒性低，分子量小、免疫排斥少、結合能力強、及整體成本低廉等優(yōu)點。

附圖說明

圖1為按照實施例1、2方法制備的uspio的透射電子顯微鏡圖，納米氧化鐵粒子均勻分散于基底中，總體來看其大小在6-10nm，呈球形；

圖2為按照實施例1、2方法制備的uspio樣品的水化粒徑分布圖：其水化半徑主要分布在10-15nm左右；

圖3為連接轉錄活化因子肽段(tat-ptd肽段)和aβ16-20的診斷物(tat-ptd-uspio-aβ16-20)樣品的水化直徑分布圖：其水化直徑分布在50-65nm左右；

圖4為按照實施例3、6方法制備的官能化的uspio樣品的電荷分布圖，這種官能化的uspio樣品其表面帶有負電荷，電荷大小為-8.003mv；

圖5為按照實施例4、9方法制備的官能化的uspio樣品在進行弛豫性能檢測時的磁共振儀屏幕截圖，截圖中，樣品按照鐵濃度(mmol/l)依次排列，從下至上，樣品中鐵濃度依次遞增；

圖6為按照實施例4、9方法制備的官能化的uspio樣品其弛豫時間倒數(1/t2)與樣品中鐵濃度(mmol/l)之間的曲線圖。橫坐標為樣品中鐵濃度(mmol/l)，縱坐標為樣品的t2弛豫時間的倒數(1/t2)。通過對該曲線的線性擬合計算可以得到樣品的r2值為140(mm-1sec-1)；

圖7為按照實施例4、9方法制備診斷對比劑(診斷對比劑包括有效量的診斷物tat-ptd-uspio-aβ16-20和生理可接受的水)的園二色譜對照；

圖8為按照實施例4、9方法制備uspio樣品的磁性分析。在室溫下測得了uspio和uspio-nh2的磁滯回線，可以看到其磁性都表現為超順磁性；

圖9為tat-ptd-uspio-aβ16-20與神經干細胞孵育后鐵染色驗證：細胞內可見藍色鐵顆粒(a:perl’s染色)與棕褐色鐵顆粒(b:dab復染)，如箭頭所示，細胞胞體內存在均勻分布的tat-ptd-uspio-aβ16-20，其中的鐵元素使細胞染色呈藍色(左圖)和棕褐色(右圖)。

圖10為tat-ptd-uspio-aβ16-20與神經干細胞孵育后體外磁共振檢測驗證其弛豫性(a，b)，透射電鏡證實細胞質內散在分布鐵顆粒(c,d)：神經干細胞與tat-ptd-uspio-aβ16-20孵育后1.5tmri成像結果(ep管1、2、3、4分別對應培養(yǎng)基，tat-ptd-uspio-aβ16-20,與tat-ptd-uspio-aβ16-20共孵育后的神經干細胞，單純的神經干細胞)，從上述四個樣品的mr圖像上可以清楚看到，第3管的t2信號強度介于第2管和第4管之間，即與tat-ptd-uspio-aβ16-20共孵育過的細胞的t2信號強度介于單純的tat-ptd-uspio-aβ16-20與單純的神經干細胞之間。

圖11為6月齡陽性鼠在尾靜脈注射tatptd-uspio-aβ16-20-hilytefluor555(0.01-20m)后24h腦部所成的mri像，可見皮層及海馬區(qū)有散在分布的小點狀低t2信號區(qū)。

圖12為圖9的腦區(qū)局部放大圖，箭頭所示位置即為散在分布于皮層及海馬區(qū)的小點狀低t2信號區(qū)的代表。

圖13為上述注射過tatptd-uspio-aβ16-20-hilytefluor555的老鼠作腦組織切片后在熒光顯微鏡下觀察，發(fā)紅色熒光的箭頭所指處為tatptd-uspio-aβ16-20-hilytefluor555聚集的部位。

圖14為上述注射過tatptd-uspio-aβ16-20-hilytefluor555的老鼠作腦組織切片并進行老年斑硫磺素染色后在熒光顯微鏡下觀察，發(fā)綠色熒光的箭頭所指處為老年斑所在部位。

具體實施方式

為了更好地解釋本發(fā)明，以下結合具體實施例進一步闡明本發(fā)明的主要內容，但本發(fā)明的內容不僅僅局限于以下實施例。

實施例1：

用水向共沉淀法制備葡聚糖包覆的納米氧化鐵顆粒，將10g分子量為兩萬的葡聚糖溶解于50ml蒸餾水中，再加2.34g六水氯化鐵和0.86g四水氯化亞鐵；將上面的葡聚糖溶液和鐵離子溶液混合均勻并在惰性氣體環(huán)境下磁力攪拌30-60mins，接著在4-10℃下以33-60滴/秒的速度滴加30ml濃度為0.1-0.25mol/l的氨水；等到氨水滴加完畢后升溫至60-70℃并繼續(xù)磁力攪拌90-120mins；然后向超順磁性納米鐵顆粒中加入無水乙醇直至有黑色絮凝出現為止，通過8000轉/分的速度離心10分鐘，棄去上清液，收集下部黑色沉淀均勻溶解于60ml的蒸餾水中。取該溶液20ml，在室溫下加入10ml含0.1gnabh4的naoh溶液(naoh溶液濃度為2mol/l)，混合均勻后，再于惰性氣體環(huán)境下升溫至60℃，磁力攪拌速度200轉/分下，注入3ml表氯醇，反應10小時后停止反應，加入無水乙醇直至有黑色絮凝出現為止，通過8000轉/分的速度離心，棄去上清液，收集下部黑色沉淀溶于50ml的蒸餾水中，然后在50℃的惰性氣體環(huán)境下，向其中加入5ml乙二胺，反應10小時后停止反應，加入無水乙醇直至有黑色絮凝出現為止，通過8000轉/分的速度離心，棄去上清液，收集下部黑色沉淀(即表面官能化的uspio)溶于ph值為7.4的磷酸緩沖液(pbs溶液)中。

將100ul濃度為0.02mol/l的n-羥基琥珀酰亞胺(nhs)溶液與100ul濃度為0.2mol/l的3-二甲胺基丙基碳二亞胺(edc)溶液混合，然后向其中加入0.1ml表面官能化的uspio溶液，37℃下放置30mins；再向其中加入0.5mg的spdp、和0.128ml二甲基亞砜，然后再加入0.1ml的hiv-1tat溶液和0.1ml的aβ16-20肽段溶液，混合后在室溫下放置反應10小時；然后置于規(guī)格為0.5ml、100k的超濾管中，在離心機上離心，離心機的轉速為6000轉/分，離心時間為50mins，過濾去除雜質和未反應的溶液，得到診斷對比劑，診斷對比劑包括有效量的診斷物tat-ptd-uspio-aβ16-20和生理可接受的水，于4℃下保存。

實施例2

向超順磁性納米鐵顆粒中加入無水乙醇直至有黑色絮凝出現為止，通過8000轉/分的速度離心10分鐘，棄去上清液，收集下部黑色沉淀超聲溶于60ml的蒸餾水中。取該溶液25ml，在室溫下加入15ml含0.1gnabh4的naoh溶液(naoh溶液濃度為2mol/l)，混合均勻后，再于惰性氣體環(huán)境下升溫至60℃，磁力攪拌速度300轉/分下，注入4ml表氯醇，反應11小時后停止反應，加入無水乙醇直至有黑色絮凝出現為止，通過8000轉/分的速度離心，棄去上清液，收集下部黑色沉淀溶于50ml的蒸餾水中，然后在50℃的惰性氣體環(huán)境下，向其中加入8ml乙二胺，反應11小時后停止反應，加入無水乙醇直至有黑色絮凝出現為止，通過8000轉/分的速度離心，棄去上清液，收集下部黑色沉淀(即表面官能化的uspio)溶于ph值為7.8的磷酸緩沖液(pbs溶液)中。

將150μl濃度為0.02mol/l的n-羥基琥珀酰亞胺(nhs)溶液與150μl濃度為0.2mol/l的3-二甲胺基丙基碳二亞胺(edc)溶液混合，然后向其中加入0.2ml表面官能化的uspio溶液，37℃下放置50mins；再向其中加入1mg的spdp、和0.128ml二甲基亞砜，然后再加入0.2ml的hiv-1tat溶液和0.2ml的aβ16-20-hilytefluor555肽段溶液，混合后在室溫下放置反應11小時，然后置于規(guī)格為0.5ml、100k的超濾管中，在離心機上離心，離心機的轉速為7000轉/分，離心時間為40mins，過濾去除雜質和未反應的溶液，得到診斷對比劑，診斷對比劑包括有效量的診斷物tat-ptd-uspio-aβ16-20和生理可接受的水，于4℃下保存。

實施例3

向超順磁性納米鐵顆粒中加入無水乙醇直至有黑色絮凝出現為止，通過8000轉/分的速度離心10分鐘，棄去上清液，收集下部黑色沉淀溶于60ml的蒸餾水中。取該溶液30ml，在室溫下加入20ml含0.1gnabh4的naoh溶液(naoh溶液濃度為2mol/l)，混合均勻后，再于惰性氣體環(huán)境下升溫至60℃，磁力攪拌速度400轉/分下，注入5ml表氯醇，反應12小時后停止反應，加入無水乙醇直至有黑色絮凝出現為止，通過8000轉/分的速度離心，棄去上清液，收集下部黑色沉淀溶于50ml的蒸餾水中，然后在50℃的惰性氣體環(huán)境下，向其中加入10ml乙二胺，反應12小時后停止反應，加入無水乙醇直至有黑色絮凝出現為止，通過8000轉/分的速度離心，棄去上清液，收集下部黑色沉淀(即表面官能化的uspio)溶于ph值為7.4的磷酸緩沖液(pbs溶液)中。

將200μl濃度為0.02mol/l的n-羥基琥珀酰亞胺(nhs)溶液與200μl濃度為0.2mol/l的3-二甲胺基丙基碳二亞胺(edc)溶液混合，然后向其中加入0.3ml表面官能化的uspio溶液，37℃下放置60mins；再向其中加入1mg的spdp、和0.128ml二甲基亞砜，然后再加入0.3ml的hiv-1tat(fitc)溶液和0.3ml的aβ16-20肽段溶液，混合后在室溫下放置反應12小時；然后置于規(guī)格為0.5ml、100k的超濾管中，在離心機上離心，離心機的轉速為8000轉/分，離心時間為30mins，過濾去除雜質和未反應的溶液，得到診斷對比劑，診斷對比劑包括有效量的診斷物tat-ptd-uspio-aβ16-20和生理可接受的水，于4℃下保存。

實施例4

向超順磁性納米鐵顆粒中加入無水乙醇直至有黑色絮凝出現為止，通過8000轉/分的速度離心10分鐘，棄去上清液，收集下部黑色沉淀溶于60ml的蒸餾水中。取該溶液30ml，在室溫下加入10ml含0.1gnabh4的naoh溶液(naoh溶液濃度為2mol/l)，混合均勻后，再于惰性氣體環(huán)境下升溫至60℃，磁力攪拌速度500轉/分下，注入5ml表氯醇，反應12小時后停止反應，加入無水乙醇直至有黑色絮凝出現為止，通過8000轉/分的速度離心，棄去上清液，收集下部黑色沉淀溶于50ml的蒸餾水中，然后在50℃的惰性氣體環(huán)境下，向其中加入10ml乙二胺，反應12小時后停止反應，加入無水乙醇直至有黑色絮凝出現為止，通過8000轉/分的速度離心，棄去上清液，收集下部黑色沉淀(即表面官能化的uspio)溶于ph值為7.4的磷酸緩沖液(pbs溶液)中。

將100μl濃度為0.02mol/l的n-羥基琥珀酰亞胺(nhs)溶液與150μl濃度為0.2mol/l的3-二甲胺基丙基碳二亞胺(edc)溶液混合，然后向其中加入0.1ml表面官能化的uspio溶液，37℃下放置30mins；再向其中加入1mg的spdp、和0.128ml二甲基亞砜，然后再加入0.15ml的hiv-1tat(fitc)溶液和0.15ml的aβ16-20肽段溶液，混合后在室溫下放置反應12小時；然后置于規(guī)格為0.5ml、100k的超濾管中，在離心機上離心，離心機的轉速為6000轉/分，離心時間為60mins，過濾去除雜質和未反應的溶液，得到診斷對比劑，診斷對比劑包括有效量的診斷物tat-ptd-uspio-aβ16-20和生理可接受的水，于4℃下保存。

實施例5-14：其成分及配比見下表，其制備過程同實例1-4：

實施例15

用klaff替代aβ16-20，其他制備方法同上，也可以得到相同的結果。

實施例16

用klvaf替代aβ16-20，其他制備方法同上，也可以得到相同的結果。

效果評價：tat-ptd-uspio-aβ16-20

檢測uspio的粒徑在6-10nm，見圖1,其水化半徑在50nm左右，見圖2，且在水相中分散性能良好，無團聚現象；通過檢測納米顆粒表面其帶有負電荷，電荷大小為-8.003mv，見圖3。

我們在1.5t磁共振儀下測量了官能化的uspio的馳豫性能，通過測量其t2馳豫時間，獲得其馳豫速率r2值為140(mm-1sec-1)。見圖4、圖5，其中圖4為官能化的uspio進行弛豫性能檢測的磁共振儀屏幕截圖，圖5為t2弛豫時間倒數與樣品中鐵濃度之間的關系曲線，通過對曲線的擬合計算可以得到樣品的r2值為140(mm-1sec-1)。

將診斷對比劑(診斷對比劑包括有效量的診斷物tat-ptd-uspio-aβ16-20和生理可接受的水，)在體外與神經細胞共孵育后，普魯士藍染色顯示tat-ptd-uspio-aβ16-20能夠進入活體細胞內，使細胞染色呈淡藍色，均勻分布于細胞質內,見圖7。透射電鏡顯示tat-ptd-uspio-aβ16-20位于細胞質內，細胞膜內側居多，呈直徑約數十至數百納米的致密電子沉積顆粒，部分聚集成片狀，見圖8，說明tat-ptd-uspio-aβ16-20能夠穿透細胞膜進入細胞體內。

利用tat-ptd-uspio-aβ16-20與神經細胞共孵育后所測得的細胞t2信號強度介于未孵育純細胞與官能化的uspio之間(圖8)，說明tat-uspio-aβ40能夠縮短t2弛豫時間，改變目標組織的t2信號強度，磁共振圖像上能夠對目標區(qū)域起負性強化作用。

6月齡陽性鼠在尾靜脈注射實施例2中制備的帶有紅色熒光tatptd-uspio-aβ16-20-hilytefluor555(0.01-20m)后24h可見到在皮層及海馬區(qū)有散在分布的小點狀低t2信號區(qū)，見圖9，腦區(qū)局部放大見圖10。制備腦組織切片后熒光顯微鏡下顯像，見圖11，之后將腦組織切片進行特異性的老年斑硫磺素染色，見圖12，可見磁共振成像與組織學切片中tatptd-uspio-aβ16-20-hilytefluor555所在位置以及老年斑病灶相吻合良好，說明靶向磁性納米材料經靜脈注射能夠突破血腦屏障進入腦內，進而特異性與老年斑結合，最終改變老年斑的t2信號強度，達到活體診斷ad腦內老年斑的目的。所有陰性小鼠在注射上述磁性納米材料之前及之后不同的時間點后成像均沒有發(fā)現特異性的點狀低信號區(qū)，所有月齡的陽性鼠在注射tatptd-uspio-aβ16-20-hilytefluor555之前掃描均沒有明顯的點狀低信號改變。

圖9-12綜合說明磁共振成像與組織學切片中本發(fā)明中的診斷試劑所在的位置以及老年斑病灶均吻合良好。

其它未詳細說明的部分均為現有技術。盡管上述實施例對本發(fā)明做出了詳盡的描述，但它僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部實施例，人們還可以根據本實施例在不經創(chuàng)造性前提下獲得其他實施例，這些實施例都屬于本發(fā)明保護范圍。