【技術(shù)領(lǐng)域】

本發(fā)明涉及植物多酚提取技術(shù)領(lǐng)域領(lǐng)域，具體涉及一種芒果皮多酚的提取方法。

背景技術(shù)：

芒果皮是芒果加工的副產(chǎn)物，富含沒食子酸、間雙沒食子酸、沒食子鞣質(zhì)、槲皮素、異槲皮苷、芒果苷等多酚類化合物，這些化合物具有抗氧化、清除自由基和抗衰老等功能，在醫(yī)療、食品、日用化學(xué)品等方面具有重要應(yīng)用價值。現(xiàn)階段多酚的提取方法主要是浸提法和萃取法，且具體的技術(shù)操作只停留在實(shí)驗(yàn)室階段，雖然得率高，但操作復(fù)雜，對設(shè)備要求高，提取成本高，不適合規(guī)模生產(chǎn)。因此，優(yōu)化提取工藝，尋求一種操作簡單，成本低，得率高，純度高的提取方法是當(dāng)前要解決的問題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

針對上述問題，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種芒果皮多酚的提取方法，該方法通過超聲波輔助酶解對芒果皮進(jìn)行破壁、沉淀提取多酚、膜濾法進(jìn)行除雜等一系列技術(shù)手段相結(jié)合，使產(chǎn)品得率高，純度高，且操作方法簡單，設(shè)備要求低，提取成本低，適合大規(guī)模生產(chǎn)。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

一種芒果皮多酚的提取方法，包括以下步驟：

(1)原料粉碎：將洗凈的芒果皮放入干燥箱中，于55-65℃下烘干10-12h，粉碎，過35-45目篩，得到粉末，備用；

(2)酶解：向上述粉末中加入所述粉末重量0.6-0.8％的纖維素酶、1.5-2.5％的果膠酶、0.1-0.3％的中性蛋白酶和60-70％的水混合攪拌均勻，并用超聲波處理6-9min，停止超聲，于42-54℃下水浴保溫3-5h，得酶解液；

(3)沉淀：向上述酶解液中加入所述酶解液重量2-5％的氯化鋁，并將ph調(diào)整為5.5-6.5，靜置12-24h后，于2000-2400r/min下離心10-15min，過濾分離出濾液，得一次沉淀；向?yàn)V液中加入所述濾液重量3-8％的氯化鈣，并將ph調(diào)整為8-10，靜置6-8h后，于2000-2400r/min下離心10-15min，過濾，得二次沉淀；將所述一次沉淀和二次沉淀混合，得混合沉淀；

(4)萃取：將上述混合沉淀用酸溶解成液體，并向所述液體中添加等量的乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯的體積濃度為40-60％，得萃取液；

(5)超濾、濃縮和干燥：用截留分子量為1-3萬的pes膜對上述的萃取液進(jìn)行超濾，膜面流速為2-2.5m/s，操作溫度為35-45℃，跨膜壓力為0.1-0.2mpa，超濾后對濾液進(jìn)行濃縮，干燥，得到芒果皮多酚粉末。

較優(yōu)的，步驟(2)中，酶解時，向粉末中加入所述粉末重量0.7％的纖維素酶、0.4％的果膠酶、0.2％的中性蛋白酶和68％的水混合攪拌均勻。

進(jìn)一步地，步驟(2)中，所述的超聲波的功率為150-250w，頻率為20-35khz。

進(jìn)一步地，步驟(4)中，所述的酸為食品級硝酸或食品級鹽酸。

進(jìn)一步地，步驟(5)中，所述濃縮的溫度不超過75℃。

進(jìn)一步地，步驟(5)中，所述的干燥為真空干燥。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：

本發(fā)明多酚提取方法通過超聲波輔助酶解對芒果皮進(jìn)行破壁，沉淀提取多酚，膜濾法進(jìn)行除雜等一系列技術(shù)手段，使產(chǎn)品得率高，純度高，且操作方法簡單，設(shè)備要求低，提取成本低，適合大規(guī)模生產(chǎn)。經(jīng)檢測，本發(fā)明方法的芒果皮多酚得率為11.5-14.8mg/g，純度為93.12-95.11％。其中，酶解步驟中，超聲波可提高酶活力，加上纖維素酶、果膠酶和中性蛋白酶協(xié)同增效，加快酶反應(yīng)速度，提高了芒果皮細(xì)胞的破碎和溶解程度，使多酚物質(zhì)能最大程度的釋放、滲出，且果膠酶和中性蛋白酶還將細(xì)胞中的蛋白質(zhì)和果膠溶解成小分子物質(zhì)，降低了蛋白質(zhì)和果膠的含量，進(jìn)而減少了多酚類物質(zhì)與蛋白質(zhì)、多糖的結(jié)合，進(jìn)一步提高了游離多酚物質(zhì)的含量；沉淀步驟中，采用氯化鋁與氯化鈣聯(lián)合沉淀，先用氯化鋁沉淀出大部分多酚物質(zhì)，再用氯化鈣再次沉淀，可使多酚沉淀完全，提高了得率和純度；在超濾、濃縮和干燥步驟中，用pes膜對萃取液進(jìn)行超濾，可進(jìn)一步去除雜質(zhì)，提高純度。

【具體實(shí)施方式】

以下結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明的具體實(shí)施方式做進(jìn)一步說明。

實(shí)施例1

本實(shí)施例一種芒果皮多酚的提取方法，包括以下步驟：

(1)原料粉碎：將洗凈的芒果皮放入干燥箱中，于55℃下烘干10h，粉碎，過35目篩，得到粉末，備用；

(2)酶解：向上述粉末中加入所述粉末重量0.6％的纖維素酶、1.5％的果膠酶、0.1％的中性蛋白酶和60％的水混合攪拌均勻，并用超聲波處理6min，超聲波的功率為150w，頻率為20khz，停止超聲，于42℃下水浴保溫3h，得酶解液；

(3)沉淀：向上述酶解液中加入所述酶解液重量2％的氯化鋁，并將ph調(diào)整為5.5，靜置12h后，于2000r/min下離心10min，過濾分離出濾液，得一次沉淀；向?yàn)V液中加入所述濾液重量3％的氯化鈣，并將ph調(diào)整為8，靜置6h后，于2000r/min下離心10min，過濾，得二次沉淀；將所述一次沉淀和二次沉淀混合，得混合沉淀；

(4)萃?。簩⑸鲜龌旌铣恋碛檬称芳壪跛崛芙獬梢后w，并向所述液體中添加等量的乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯的體積濃度為40％，得萃取液；

(5)超濾、濃縮和干燥：用截留分子量為1萬的pes膜對上述的萃取液進(jìn)行超濾，膜面流速為2m/s，操作溫度為35℃，跨膜壓力為0.1mpa，超濾后對濾液進(jìn)行濃縮，濃縮的溫度為65℃，真空干燥，得到芒果皮多酚粉末。

實(shí)施例2

本實(shí)施例一種芒果皮多酚的提取方法，包括以下步驟：

(1)原料粉碎：將洗凈的芒果皮放入干燥箱中，于65℃下烘干12h，粉碎，過45目篩，得到粉末，備用；

(2)酶解：向上述粉末中加入所述粉末重量0.8％的纖維素酶、2.5％的果膠酶、0.3％的中性蛋白酶和70％的水混合攪拌均勻，并用超聲波處理9min，超聲波的功率為250w，頻率為35khz，停止超聲，于54℃下水浴保溫5h，得酶解液；

(3)沉淀：向上述酶解液中加入所述酶解液重量5％的氯化鋁，并將ph調(diào)整為6.5，靜置24h后，于2400r/min下離心15min，過濾分離出濾液，得一次沉淀；向?yàn)V液中加入所述濾液重量8％的氯化鈣，并將ph調(diào)整為10，靜置8h后，于2400r/min下離心15min，過濾，得二次沉淀；將所述一次沉淀和二次沉淀混合，得混合沉淀；

(4)萃?。簩⑸鲜龌旌铣恋碛檬称芳夳}酸溶解成液體，并向所述液體中添加等量的乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯的體積濃度為60％，得萃取液；

(5)超濾、濃縮和干燥：用截留分子量為3萬的pes膜對上述的萃取液進(jìn)行超濾，膜面流速為2.5m/s，操作溫度為45℃，跨膜壓力為0.2mpa，超濾后對濾液進(jìn)行濃縮，濃縮的溫度為74℃，真空干燥，得到芒果皮多酚粉末。

實(shí)施例3

本實(shí)施例一種芒果皮多酚的提取方法，包括以下步驟：

(1)原料粉碎：將洗凈的芒果皮放入干燥箱中，于60℃下烘干11h，粉碎，過40目篩，得到粉末，備用；

(2)酶解：向上述粉末中加入所述粉末重量0.7％的纖維素酶、2％的果膠酶、0.2％的中性蛋白酶和68％的水混合攪拌均勻，并用超聲波處理7min，超聲波的功率為200w，頻率為29khz，停止超聲，于48℃下水浴保溫4h，得酶解液；

(3)沉淀：向上述酶解液中加入所述酶解液重量3％的氯化鋁，并將ph調(diào)整為6，靜置20h后，于2100r/min下離心13min，過濾分離出濾液，得一次沉淀；向?yàn)V液中加入所述濾液重量6％的氯化鈣，并將ph調(diào)整為9，靜置7h后，于2200r/min下離心13min，過濾，得二次沉淀；將所述一次沉淀和二次沉淀混合，得混合沉淀；

(4)萃?。簩⑸鲜龌旌铣恋碛檬称芳壪跛崛芙獬梢后w，并向所述液體中添加等量的乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯的體積濃度為50％，得萃取液；

(5)超濾、濃縮和干燥：用截留分子量為2萬的pes膜對上述的萃取液進(jìn)行超濾，膜面流速為2.3m/s，操作溫度為40℃，跨膜壓力為0.15mpa，超濾后對濾液進(jìn)行濃縮，濃縮的溫度為60℃，真空干燥，得到芒果皮多酚粉末。

為了說明本發(fā)明芒果皮多酚提取效果，申請人做了以下對比試驗(yàn)：試驗(yàn)分為第1組、第2組、第3組、對照組1、對照組2、對照組3共6個小組，第1組、第2組、第3組分別使用實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3的方法提取，對照組1在酶解步驟中未添加果膠酶和中性蛋白酶，其他步驟均與實(shí)施例3相同；對照組2在酶解步驟中未使用超聲波進(jìn)行處理，其他步驟均與實(shí)施例3相同；對照組3在沉淀步驟中只用氯化鋁進(jìn)行一次沉淀，未進(jìn)行二次沉淀，其他步驟均與實(shí)施例3相同；各組使用的芒果皮均來自生長在廣西百色的同一植株芒果，且芒果品種為“臺農(nóng)一號”，提取結(jié)束后，取各組的終產(chǎn)品進(jìn)行檢測，其中，多酚得率用酒石酸亞鐵比色法測定；多酚純度用高效液相色譜法測定。檢測結(jié)果見表1：

表1檢測結(jié)果

從第1組、第2組、第3組可知，本發(fā)明方法最終得到的芒果皮多酚得率為11.5-14.8mg/g，純度為93.12-95.11％。從第3組與對照組1、對照組2的對比可知，本發(fā)明酶解步驟中，超聲波與纖維素酶、果膠酶和中性蛋白酶協(xié)同增效，加快酶反應(yīng)速度，提高了芒果皮細(xì)胞的破碎和溶解程度，使多酚物質(zhì)能最大程度的滲出，提高了游離多酚物質(zhì)的含量，進(jìn)而提高提取得率；從第3組與對照組3對比可知，本發(fā)明沉淀步驟中，采用氯化鋁與氯化鈣聯(lián)合沉淀，可使多酚沉淀完全，提高了得率和純度。

上述說明是針對本發(fā)明較佳可行實(shí)施例的詳細(xì)說明，但實(shí)施例并非用以限定本發(fā)明的專利申請范圍，凡本發(fā)明所提示的技術(shù)精神下所完成的同等變化或修飾變更，均應(yīng)屬于本發(fā)明所涵蓋專利范圍。