本發(fā)明通常涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體地涉及用于治療宮頸癌的組合物及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
宮頸癌是人體最常見的癌瘤之一，不但在女性生殖器官癌瘤中占首位，而且是女性各種惡性腫瘤中最多見的癌瘤。雖然浸潤性宮頸癌的發(fā)生率有所下降，但早期宮頸癌發(fā)生率的增加,特別是年輕化趨勢十分明顯，對女性身心構(gòu)成了嚴(yán)重的危害，因此宮頸癌相關(guān)治療的研究具有重要意義。
宮頸癌對女性健康構(gòu)成很大的威脅，主要表現(xiàn)為以下幾點(diǎn)：
1、引起女性不孕的產(chǎn)生：宮頸炎造成的“有菌”白帶和陰道堿環(huán)境都不利精子的生存和游動，嚴(yán)重的宮頸炎還會影響性生活。長期不治、或久治不愈的宮頸炎被認(rèn)為是宮頸癌發(fā)病的一個因素。
2、嚴(yán)重影響生理生活：由于子宮位于女性的腹部，是一個介于膀胱和直腸之間，中空的器官。宮頸位于子宮的下半部的一個較窄的部份，子宮頸的開口通到女性陰道。它的功能是月經(jīng)流出的信道，也是陰道微生物及空氣進(jìn)入女性子宮的屏障，能抵擋性生活時受到刺激引起炎癥反應(yīng)。
3、對子宮造成致命損傷：子宮是受精卵發(fā)育成長的地方，在治療過程中宮頸癌患者因?yàn)榉N種原因，有時候不得不割掉子宮以達(dá)到保全生命的目的，這從另一方面無情剝奪了女性作為母親的權(quán)利，甚至陷入絕望之境。
4、導(dǎo)致身體多部位的病變：宮頸癌能夠直接導(dǎo)致腰腹酸痛、陰道出血及白帶惡臭，這是最直接的表現(xiàn)。此外，復(fù)發(fā)部位的差異性也導(dǎo)致了細(xì)枝末節(jié)的千差萬別，如下腹部或盆壁會出現(xiàn)腫塊，下肢會水腫，患者可出現(xiàn)尿頻、尿急、尿痛、血尿等癥。
傳統(tǒng)的宮頸癌治療方法有手術(shù)治療、放射治療和藥物治療。這些方法具有諸多不利影響。例如，手術(shù)治療近期療效明確，但腫瘤易轉(zhuǎn)移，并且手術(shù)直接損傷較大。放射治療對于某些對放射線敏感的腫瘤細(xì)胞療效確切，但對放射線不敏感的腫瘤細(xì)胞療效則不確切，并且放射線可損傷人體正常細(xì)胞，副反應(yīng)明顯。化療的療效有限，療程較長，且化學(xué)藥物對正常細(xì)胞產(chǎn)生毒害損害、骨髓抑制、胃腸道反應(yīng)、重要臟器損害等毒副反應(yīng)明顯，多療程使用后可出現(xiàn)耐藥。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的發(fā)明人研究了新的治療方法—臍血提取物協(xié)同中醫(yī)藥有效治療宮頸癌。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，癌癥究其根本是由于人體免疫缺陷造成的，而包含臍血提取物和艾草提取物的組合物通過血液循環(huán)系統(tǒng)進(jìn)入人體，可以促進(jìn)自身免疫細(xì)胞的生成，從而特異性殺傷癌細(xì)胞。有利于大量的干細(xì)胞也會“歸巢”到病灶部位，自動修復(fù)受損傷的細(xì)胞、組織、器官，從而達(dá)到根除癌細(xì)胞，修復(fù)機(jī)體的療效。同時運(yùn)用中藥艾草提取物調(diào)理人體內(nèi)環(huán)境，形成不利于癌細(xì)胞生長的環(huán)境。基于此完成了本發(fā)明。
本發(fā)明提供用于治療宮頸癌的組合物，其包含臍血提取物、艾草提取物和生理鹽水。
優(yōu)選地，其中所述臍血提取物和所述艾草提取物質(zhì)量份數(shù)之比為3-6:1。
優(yōu)選地，所述艾草提取物包含按照質(zhì)量份計的，10-30份的5-羥基-6,7,3’,4’四甲氧基黃酮、10-30份的5,7-二羥基-6,3’,4’-三甲氧基黃酮、10-30份的木犀草素、10-30份的3,4’,5,7-四羥基黃酮、5-40份的α-香樹脂醇、5-30份的β-香樹脂醇和20-30份的24-亞甲基環(huán)木菠蘿烷酮。
優(yōu)選地，其中所述艾草提取物在所述組合物中的濃度為25-60μg/ml。
優(yōu)選地，所述組合物中臍血提取物通過包括下述步驟的方法獲得：
將臍帶血樣品與細(xì)胞稀釋劑接觸的步驟；
隨后加入細(xì)胞沉淀劑的步驟；
待分層后取出上層細(xì)胞液離心濃縮獲得沉淀，隨后將所述沉淀鋪到分層劑上層，離心分離得到中間位置的油狀物質(zhì)的步驟。
優(yōu)選地，所述細(xì)胞稀釋劑為0.1-30％氯化鈉注射液和0.1-20％的腦蛋白水解物組成的水溶液，或者0.1-30％的ph為7-7.5的磷酸鹽緩沖液和0.1％-20％的腦蛋白水解物組成的水溶液。
優(yōu)選地，所述細(xì)胞沉淀劑為0.1-30％羥乙基淀粉水溶液或0.1-20％甲基纖維素水溶液。
優(yōu)選地，所述分層劑為包含密度為1.0-1.2g/ml的聚蔗糖和泛影葡胺的水溶液。
優(yōu)選地，所述臍血提取物中不包含紅細(xì)胞。
優(yōu)選地，所述治療是指病癥的減輕、緩和、愈合和/或消除。
有益效果：
本發(fā)明所述的提供用于治療宮頸癌的組合物，利用所述組合物進(jìn)行回輸治療，組合物進(jìn)入受試者體內(nèi)，趨向性至宮頸癌細(xì)胞位置處，對宮頸癌細(xì)胞進(jìn)行殺傷，并主動分裂繁殖，修復(fù)受損的細(xì)胞、組織和器官，同時，改善人體內(nèi)部環(huán)境，從而達(dá)到根除癌細(xì)胞，修復(fù)機(jī)體的療效。
附圖說明
圖1為本發(fā)明其中一個實(shí)施例所述的用于治療宮頸癌的組合物對宮頸癌病例進(jìn)行治療后的陰道鏡檢圖。
具體實(shí)施方式
現(xiàn)詳細(xì)說明本發(fā)明的多種示例性實(shí)施方式，該詳細(xì)說明不應(yīng)認(rèn)為是對本發(fā)明的限制，而應(yīng)理解為是對本發(fā)明的某些方面、特性和實(shí)施方案的更詳細(xì)的描述。
應(yīng)理解本發(fā)明中所述的術(shù)語僅僅是為描述特別的實(shí)施方式，并非用于限制本發(fā)明。另外，對于本發(fā)明中的數(shù)值范圍，應(yīng)理解為具體公開了該范圍的上限和下限值以及它們之間的每個中間值。在任何陳述值或陳述范圍內(nèi)的中間值以及任何其他陳述值或在所述范圍內(nèi)的中間值之間的每個較小的范圍也包括在本發(fā)明內(nèi)。這些較小范圍的上限和下限可獨(dú)立地包括或排除在范圍內(nèi)。
除非另有說明，否則本文使用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語具有本發(fā)明所述領(lǐng)域的常規(guī)技術(shù)人員通常理解的相同含義。雖然本發(fā)明僅描述了優(yōu)選的方法和材料，但是在本發(fā)明的實(shí)施或測試中也可以使用與本文所述相似或等同的任何方法和材料。本說明書中提到的所有文獻(xiàn)通過引用并入，用以公開和描述與所述文獻(xiàn)相關(guān)的方法和/或材料。在與任何并入的文獻(xiàn)沖突時，以本說明書的內(nèi)容為準(zhǔn)。
本發(fā)明中，名詞術(shù)語既包括單數(shù)形式，也包括復(fù)數(shù)形式，除非上下文另行明確指出。本發(fā)明中所述的“至少一種”不僅僅指包含“一個”或“一種”的情況，更重要的還包含“多個”或“多種”的情況。
本發(fā)明中，所述“臍血”是指哺乳動物(例如，人類)胎兒娩出、臍帶結(jié)扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液。優(yōu)選地，胎盤和臍帶可從動物體分離后經(jīng)冷凍保存。更優(yōu)選地，胎盤和臍帶為從動物體分離的新鮮胎盤和臍帶。更優(yōu)選地，胎盤和臍帶為從動物例如人體分離后1-12小時，優(yōu)選1-5小時之內(nèi)的胎盤和臍帶。新鮮的胎盤和臍帶具有更多高活性的物質(zhì)。因此，本發(fā)明的臍帶血優(yōu)選為新鮮胎盤和臍帶中的血液。
本發(fā)明中，所述“臍血提取物”是指包含臍血成分的液體。優(yōu)選地，包含利用一定提取方法從臍血中提取的物質(zhì)。示例性地所述提取方法包括將臍帶血樣品與細(xì)胞稀釋劑接觸的步驟；隨后加入細(xì)胞沉淀劑的步驟；待分層后取出上層細(xì)胞液離心濃縮獲得沉淀，隨后將所述沉淀鋪到分層劑上層，離心分離得到中間油狀物的步驟。
優(yōu)選地，本發(fā)明臍血提取物不采取凍存、復(fù)蘇、體外培養(yǎng)擴(kuò)增的步驟。因?yàn)閮龃婧髲?fù)蘇后，會有部分活性成分失活，其數(shù)量過少不滿足臨床療效(數(shù)目要求達(dá)到108)，此時需要進(jìn)一步的體外處理步驟。體外處理存在如下缺陷：
a、體外細(xì)胞生長所處的微環(huán)境與體內(nèi)不同，因此處理后的細(xì)胞部分功能缺失。比如：心肌細(xì)胞沒有收縮功能；神經(jīng)細(xì)胞無傳導(dǎo)功能。
b、提取物中細(xì)胞傳代復(fù)制后活性減弱，接近于終端細(xì)胞。
c、培養(yǎng)成本增高。
d、提取物中細(xì)胞多次復(fù)制后存在變異問題。
e、體外擴(kuò)增培養(yǎng)傳代的代數(shù)不容易控制。
f、體外培養(yǎng)過程中感染機(jī)率增大。
因此，臍血提取物在分離后需及時回輸，以保證最好的臨床療效。
本發(fā)明中，所述稀釋劑為下列水溶液之一：0.1-30％氯化鈉注射液和0.1-20％的腦蛋白水解物組成的水溶液、或者0.1-30％的ph為7-7.5的磷酸鹽緩沖液和0.1％-20％的腦蛋白水解物組成的水溶液；優(yōu)選地，所述稀釋劑為0.1-15％氯化鈉注射液和0.1-10％的腦蛋白水解物組成的水溶液；更優(yōu)選地，所述稀釋劑為0.1-3％氯化鈉注射液和0.1-5％的腦蛋白水解物組成的水溶液；進(jìn)一步地，所述稀釋劑為0.1％、0.3％、0.5％、0.7％、0.8％、0.9％、1.2％、1.5％、1.8％、2.1％、2.4％、2.7％或3％氯化鈉注射液和0.1％、0.5％、0.7％、0.9％、1.5％、1.8％、2.1％、2.7％、3％、3.7％、4.2％、4.7％或5％的腦蛋白水解物組成的水溶液；優(yōu)選地，所述稀釋劑0.1-30％的ph為7-7.5的磷酸鹽緩沖液和0.1％-20％的腦蛋白水解物組成的水溶液；優(yōu)選地，所述稀釋劑為0.1-15％的ph為7-7.5的磷酸鹽緩沖液和0.1％-10％的腦蛋白水解物組成的水溶液；更優(yōu)選地，所述稀釋劑為0.1-3％的ph為7-7.5的磷酸鹽緩沖液和0.1％-5％的腦蛋白水解物組成的水溶液；進(jìn)一步地，所述稀釋劑為0.1％、0.3％、0.5％、0.7％、0.8％、0.9％、1.2％、1.5％、1.8％、2.1％、2.4％、2.7％或3％的ph為7-7.5的磷酸鹽緩沖液和0.1％、0.5％、0.7％、0.9％、1.5％、1.8％、2.1％、2.7％、3％、3.7％、4.2％、4.7％或5％的腦蛋白水解物組成的水溶液。
本發(fā)明中，所述腦蛋白水解物為選自下列產(chǎn)品之一：國藥準(zhǔn)字h20052182、國藥準(zhǔn)字h20003386、國藥準(zhǔn)字h20003384或國藥準(zhǔn)字h20003385。
本發(fā)明中，所述沉淀劑為0.1-30％羥乙基淀粉水溶液或0.1-20％甲基纖維素水溶液。優(yōu)選地，所述沉淀劑包為1-10％羥乙基淀粉水溶液或0.3-1.5％甲基纖維素水溶液。更優(yōu)選地，所述沉淀劑為3-7％羥乙基淀粉水溶液或0.3-1％甲基纖維素水溶液。進(jìn)一步地，所述沉淀劑為3％、4％、5％、6％或7％的羥乙基淀粉水溶液，進(jìn)一步地，所述沉淀劑為0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、或1％的甲基纖維素水溶液。
本發(fā)明中，所述分層劑包含密度為1.0-1.2g/ml的聚蔗糖和泛影葡胺的水溶液。優(yōu)選地，液聚蔗糖和泛影葡胺的密度為1.01-1.088g/ml、優(yōu)選1.035-1.08g/ml、更優(yōu)選為1.075g/ml。
本發(fā)明中，將所述稀釋樣品與所述沉淀劑按體積1:1混合。
本發(fā)明中，將所述稀釋樣品與所述沉淀劑按體積2:1混合。
本發(fā)明中，將所述稀釋樣品和所述沉淀劑按照體積2:1混合后，搖勻1-8分鐘，靜置3分鐘-180分鐘，待分層后吸取上層細(xì)胞液，分裝至50ml離心管中，以500-4000轉(zhuǎn)/分鐘，離心1-20分鐘，棄上清液得到所述濃縮樣品。
本發(fā)明中，用生理鹽水稀釋所述濃縮樣品，將稀釋后的所述濃縮樣品鋪設(shè)在所述分層劑上，以500-4000轉(zhuǎn)/分鐘轉(zhuǎn)速，離心1-60分鐘，收集臍血提取物，進(jìn)一步地所述臍血提取物位于所述離心管中間位置的2-4mm厚的油狀細(xì)胞層。
進(jìn)一步地，所述方法還包括，將所述臍血提取物用生理鹽水清洗1-5次。
本發(fā)明中，所述“艾草提取物”是指利用下述方法從艾草中提取的物質(zhì)。所述艾草提取物占所述組合物的質(zhì)量濃度為25-60μg/ml。進(jìn)一步地，所述艾草提取物占所述組合物的質(zhì)量濃度為30-45μg/ml。更進(jìn)一步地，所述艾草提取物占所述組合物的質(zhì)量濃度為30、32、35、37、40、42或45μg/ml
本發(fā)明中，所述“艾草提取物”主要包含揮發(fā)油、黃酮類、三萜類衍生物、微量元素、鞣質(zhì)、綠原酸、朝鮮薊酸、脂肪酸、鞣酸和多糖等化合物。進(jìn)一步地，所述揮發(fā)油主要包括單萜類化合物、單萜類衍生物、倍單萜類化合物及其衍生物；進(jìn)一步地，所述揮發(fā)油包括葉腦、松油醇、α-側(cè)柏烯、蒎烯、崁烯、香檜烯、1-辛烯-3-醇、對-聚傘花素、1,8-桉葉素、γ-松油烯、樟腦、龍腦、萜品烯-4-醇、α-松油醇、丁香酚、反-丁香酚、順-β-合歡烯草烯、β-芹子烯、丁香烯氧化物、六氫金歡基丙酮基棕櫚酸等。進(jìn)一步地，所述黃酮類主要包括黃酮和黃酮醇化合物，進(jìn)一步地，所述黃酮類主要包括游離黃酮，更進(jìn)一步地，所述黃酮類包括5,7-二羥基-6,3,4-三甲氧基黃酮、5-羥基-6,7,3,4四甲氧基黃酮、5,7,4’-三羥基-6,3’-二甲氧基黃酮、5,3,7,3’,4-五羥基黃酮、5,7,4’-三羥基黃酮、芹菜素、木犀草素和單乃芬等。進(jìn)一步地，所述三萜類化合物包括α-及β-香樹脂醇、無羈萜、α-及β-香樹脂醇的乙酸酯、羽扇烯酮、粘霉烯酮、羊齒烯酮、24-亞甲基環(huán)木菠蘿烷酮、西米杜鵑醇和3β-甲氧基-9β、19-環(huán)羊毛甾-23(e)烯-25,26-二醇等。進(jìn)一步地，所述微量元素包含金屬錫(sr)、鉻(cr)、鈷(co)、鎳(ni)、錳(mn)、銅(cu)、鋅(zn)、鐵(fe)、鈉(na)、鉀(k)、鈣(ca)和鎂(mg)。
本發(fā)明中，所述的“艾草提取物”是利用水蒸氣蒸餾法、大孔樹脂吸附法、溶劑萃取法、微波萃取法和/或超臨界流體萃取法從艾草中提取的。進(jìn)一步地，所述大孔徑樹脂吸附法是以大孔吸附試著xda-1吸附艾草提取液中的所述艾草合物，所述的超臨界流體萃取法，是用臨界二氧化碳萃取技術(shù)萃取艾草中的所述艾草提取物。更進(jìn)一步地，將艾草葉放置于蒸餾燒瓶中，用40-60％的乙醇溶解搖勻，靜止20-40分鐘；用微波爐解凍檔處理1-3分鐘；將蒸餾燒瓶放置在55-70℃恒溫水浴中回流2小時，趁熱抽濾棄去濾渣。然后濾液轉(zhuǎn)入分液漏斗中，用石油醚萃取濾液中的葉綠素、胡蘿卜素和脂溶性脂類等雜質(zhì)。棄去上層液，保留下層液。重復(fù)萃取2-5次，直至濾液顏色無色是，將濾液轉(zhuǎn)入容量瓶中，用30-50％的乙醇除去多糖、蛋白質(zhì)等可溶性雜質(zhì)。每2ml去雜溶液加入12.5ml的30-50％的乙醇和1mlnano2，5-10分鐘后，按照每2ml去雜溶液對應(yīng)0.8ml6％的al(no3)3的比例加入al(no3)3，5-10分鐘后，按照每2ml去雜溶液對應(yīng)3.5ml10％naoh的比例加入naoh，震蕩混勻，獲取所述艾草提取物。
優(yōu)選地，所述艾草提取物包含按照質(zhì)量份計的，10-30份的5-羥基-6,7,3’,4’四甲氧基黃酮、10-30份的5,7-二羥基-6,3’,4’-三甲氧基黃酮、10-30份的木犀草素、10-30份的3,4’,5,7-四羥基黃酮、5-40份的α-香樹脂醇、5-30份的β-香樹脂醇和20-30份的24-亞甲基環(huán)木菠蘿烷酮，或者由上述物質(zhì)組成。
本發(fā)明的組合物可以根據(jù)本領(lǐng)域常規(guī)方法胃腸外施用，例如通過注射進(jìn)入損傷區(qū)域以及注射進(jìn)入腦脊液例如腰椎穿刺術(shù)和實(shí)質(zhì)注射(parenchymalinjection)、靜脈或動脈。優(yōu)選地，其可以通過直接注射施用。另外，可以使用douglaskondziolka(douglaskondziolka，pittsburgh，1998)的臨床方法將本發(fā)明的組合物施用給損傷區(qū)域。特別地，將對象的顱骨切開一個直徑1cm的孔，將于hbss(hank’s平衡鹽溶液)中的組合物的懸浮液通過長針注射器和立體定位架而注射進(jìn)該孔。
所述組合物的典型劑量范圍從1×105到8×107細(xì)胞/kg體重/注射，優(yōu)選從5×105到8×106細(xì)胞/kg體重/注射，其可以單劑量或分份劑量施用。另外，應(yīng)理解實(shí)際施用給某個患者的有效成分的量應(yīng)根據(jù)多種相關(guān)因素包括被分化增殖的神經(jīng)細(xì)胞的量、選擇的施用途徑和個體患者的體重、年齡和性別確定。例如，用量為，45ml的臍血提取物濃度為6.2×107個/ml組合物懸液，50ml的臍血提取物濃度為5.7×107個/ml組合物懸液，55ml的臍血提取物濃度為4.9×107個/ml組合物懸液，60ml的臍血提取物濃度為8×107個/ml組合物懸液，58ml的臍血提取物濃度為7.5×107個/ml組合物懸液,61ml的臍血提取物濃度為5.8×107個/ml組合物懸液,60ml的臍血提取物濃度為5.7×107個/ml組合物懸液。
實(shí)施例
實(shí)施例1
一種用于治療宮頸癌的組合物，其包含臍血提取物、艾草提取物和生理鹽水，其中，中所述臍血提取物中不包含紅細(xì)胞。
將所述臍血提取物、所述艾草提取和所述生理鹽水按照體積比為3:1:1的比例混合，制得所述的用于促進(jìn)細(xì)胞損傷修復(fù)的組合物。
上述方案中，所述艾草提取物包含按照質(zhì)量份計的，10份的5-羥基-6,7,3’,4’四甲氧基黃酮、10份的5,7-二羥基-6,3’,4’-三甲氧基黃酮、10份的木犀草素、10份的3,4’,5,7-四羥基黃酮、5的α-香樹脂醇、5份的β-香樹脂醇和20份的24-亞甲基環(huán)木菠蘿烷酮。
實(shí)施例2
一種用于治療宮頸癌的組合物，其包含臍血提取物、艾草提取物和生理鹽水，其中，中所述臍血提取物中不包含紅細(xì)胞。
將所述臍血提取物、所述艾草提取和所述生理鹽水按照體積比為4:1:2的比例混合，制得所述的用于促進(jìn)細(xì)胞損傷修復(fù)的組合物。
上述方案中，所述艾草提取物包含按照質(zhì)量份計的，30份的5-羥基-6,7,3’,4’四甲氧基黃酮、30份的5,7-二羥基-6,3’,4’-三甲氧基黃酮、30份的木犀草素、30份的3,4’,5,7-四羥基黃酮、40份的α-香樹脂醇、30份的β-香樹脂醇和30份的24-亞甲基環(huán)木菠蘿烷酮。
實(shí)施例3
一種用于治療宮頸癌的組合物，其包含臍血提取物、艾草提取物和生理鹽水，其中，中所述臍血提取物中不包含紅細(xì)胞。
將所述臍血提取物、所述艾草提取和所述生理鹽水按照體積比為5:1:1.5的比例混合，制得所述的用于促進(jìn)細(xì)胞損傷修復(fù)的組合物。
上述方案中，所述艾草提取物包含按照質(zhì)量份計的，20份的5-羥基-6,7,3’,4’四甲氧基黃酮、20份的5,7-二羥基-6,3’,4’-三甲氧基黃酮、20份的木犀草素、20份的3,4’,5,7-四羥基黃酮、30份的α-香樹脂醇、15份的β-香樹脂醇和25份的24-亞甲基環(huán)木菠蘿烷酮。
實(shí)施例4
一種用于治療宮頸癌的組合物，其包含臍血提取物、艾草提取物和生理鹽水，其中，中所述臍血提取物中不包含紅細(xì)胞。
將所述臍血提取物、所述艾草提取和所述生理鹽水按照體積比為6:1:2的比例混合，制得所述的用于促進(jìn)細(xì)胞損傷修復(fù)的組合物。
上述方案中，所述艾草提取物包含按照質(zhì)量份計的，25份的5-羥基-6,7,3’,4’四甲氧基黃酮、15份的5,7-二羥基-6,3’,4’-三甲氧基黃酮、15份的木犀草素、15份的3,4’,5,7-四羥基黃酮、25份的α-香樹脂醇、25份的β-香樹脂醇和20份的24-亞甲基環(huán)木菠蘿烷酮。
試驗(yàn)例1藥理實(shí)驗(yàn)
1材料
1.1動物：km小鼠體質(zhì)量18～22g，雌雄各半。健康雜種家犬，體重12～18kg，雌雄皆用。動物飼養(yǎng)于spf級實(shí)驗(yàn)動物實(shí)驗(yàn)室條件下，室內(nèi)溫度19～22℃，相對濕度40％～50％，給予全價顆粒飼料，自由攝食、飲水。
1.2藥物：實(shí)施例1的組合物，其中干細(xì)胞含量為8×107個/ml。
1.3上海欣曼公司sys-g型小鼠自主活動測頻儀，美國biopac公司rm-6000型多導(dǎo)生理記錄儀。
2試驗(yàn)方法
2.1對精神神經(jīng)系統(tǒng)的影響
2.1.1對小鼠一般外觀行為的影響：取小鼠80只，隨機(jī)分為四組，每組20只，雌雄各半，給藥組分設(shè)0.5、1.0、2.0ul/kg三個劑量組，對照組給予5％葡萄糖注射液，均按0.1ml/10g體重尾靜脈注射給藥，給藥后10min，觀察小鼠的一般行為表現(xiàn)，步態(tài)、姿勢、肌肉緊張度、瞳孔變化、流涎、二便、皮毛等，同對照組比較，了解受試藥對動物的影響。
2.1.2對小鼠協(xié)調(diào)運(yùn)動的影響：分組及給藥同前，采用傾斜板法，于給藥前及給藥后10min、30min及60min各進(jìn)行一次測定，計算各組小鼠從木板上跌落的百分率，按簡化直接法統(tǒng)計。
2.1.3對小鼠自主活動的影響：小鼠80只，分組及給藥同前，于尾靜脈注射給藥后10min，置小鼠于自發(fā)活動測定儀中，穩(wěn)定5min后，測定10min內(nèi)自主活動次數(shù)，用組間t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計處理。
2.2對呼吸系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)的影響
家犬6只，雌雄各半，用戊巴比妥鈉30mg/kg，靜脈注射麻醉后，背位固定，分離右頸總動脈，插管連接tp-101型壓力轉(zhuǎn)換能以多導(dǎo)生理記錄儀記錄收縮壓，舒張壓及平均動脈壓；以針形電極刺入四肢皮下記錄ⅱ導(dǎo)聯(lián)心電圖，以立位轉(zhuǎn)換能器連接胸骨記錄呼吸頻率及幅度。實(shí)驗(yàn)設(shè)0.5、1.0、2.0ul/kg三個劑量組，對照組用5％葡萄糖注射液，給藥容積為1ml/kg，由股靜脈插管給藥，注射速度為30s，分別在靜脈注射給藥后1、2、5、10、15、20及30min時記錄上述各項(xiàng)指標(biāo)，觀察本發(fā)明組合物對呼吸，心電及血壓的作用，用t檢驗(yàn)法進(jìn)行用藥前后顯著性檢驗(yàn)分析。
3結(jié)論
3.1對小鼠一般行為表現(xiàn)的影響：實(shí)驗(yàn)各組動物在用藥后60min內(nèi)的一般行為，步態(tài)、肌緊張度、活動、飲食、皮毛及二便，均無顯著變化，未見有瞳孔大小改變，豎毛、倦伏、流涎等異常癥狀，同對照組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
3.2對協(xié)調(diào)運(yùn)動的影響：各組動物于給藥前及給藥后各觀測點(diǎn)的跌落率均為0，表明在實(shí)驗(yàn)所用0.5、1.0、2.0ul/kg劑量下對小鼠協(xié)調(diào)運(yùn)動無明顯影響。
3.3對小鼠自主活動的影響：本發(fā)明組合物各劑量組對小鼠自主活動的影響見表1。
表1對小鼠自主活動的影響
注：與對照組比較p＞0.05。
從表1結(jié)果可見：實(shí)驗(yàn)組1.0、2.0ul/kg劑量時，活動次數(shù)略有減少，但同對照組比較，差異并無統(tǒng)計學(xué)意義，表明本發(fā)明組合物對小鼠自主活動無明顯影響。
3.4對呼吸系統(tǒng)的影響：靜脈注射各劑量后，分別在不同時間點(diǎn)描記呼吸頻率及幅度的變化，結(jié)果見表2。
表2對麻醉犬呼吸頻率及幅度的影響
注：對照組和實(shí)驗(yàn)組與用藥前比較p均＞0.05。
從表2結(jié)果可見：用藥組在0.5、1.0ul/kg劑量時靜脈注射對麻醉犬各時間點(diǎn)的呼吸頻率及幅度均無明顯作用，在2.0ul/kg劑量時，頻率及幅度均略有增加，但同對照組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。表明本發(fā)明組合物對犬的呼吸系統(tǒng)無顯著影響。
3.5對心血管系統(tǒng)的影響：結(jié)果見表3、4。
表3對麻醉犬平均動脈壓的影響(kpa)
注：與用藥前比較p＞0.05。
表4對麻醉犬心率的影響(次/min)
注：與用藥前比較p＞0.05。
表3、4結(jié)果表明：本發(fā)明組合物懸液靜脈注射1.0、2.0ul/kg時，對麻醉犬的心率計平均動脈壓無明顯作用，同對照組及用藥前相比，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)，表明本發(fā)明組合物在本劑量時無心血管刺激作用。
表5對麻醉犬ⅱ導(dǎo)聯(lián)心電圖(ecg)的影響
從表5結(jié)果可見：靜脈注射本發(fā)明組合物0.5、1.0、2.0ul/kg計量時，對麻醉犬心電圖無明顯作用，其各波間隔時間及電壓振幅均在正常范圍內(nèi)波動，用藥前后及用藥組同對照組相比，均未發(fā)現(xiàn)差異有統(tǒng)計學(xué)意義，表明本發(fā)明組合物在本實(shí)驗(yàn)所用劑量下，對麻醉犬的心電圖無影響。
4結(jié)論
本發(fā)明組合物的臨床用藥途徑多為靜脈滴注。故在本實(shí)驗(yàn)研究中，采用了與臨床用藥途徑相同的靜脈給藥方式。當(dāng)劑量分別為0.5、1.0、2.0ul/kg時，對小鼠的一般行為、協(xié)調(diào)運(yùn)動及自主活動均無明顯作用，表明本品對神經(jīng)系統(tǒng)無明顯影響。0.5、1.0及2.0ul/kg劑量時，對麻醉犬的呼吸次數(shù)和呼吸幅度無影響，對麻醉犬的血壓亦無明顯影響。在0.5、1.0及2.0ul/kg劑量時，對麻醉犬的心率、收縮壓、舒張壓及平均動脈壓皆無明顯影響。表明本發(fā)明組合物靜脈滴注的安全性較高。
試驗(yàn)例2急性毒性實(shí)驗(yàn)
1、材料
a.嚙齒類動物組：sd大鼠，周齡6～9周，體重180～240g
1.1實(shí)驗(yàn)組：大鼠60只(雌雄比例1:1)
1.2空白對照組：大鼠20只(雌雄比例1:1)
b.非嚙齒類動物組：beagle犬，月齡6～10個月，體重8～15kg。
1.1實(shí)驗(yàn)組：犬30只(雌雄比例1:1)
1.2空白對照組：犬10只(雌雄比例1:1)
c.藥物：實(shí)施例2的組合物，其中干細(xì)胞的含量為8×107個/ml。
2、方法
2.1給藥途徑：靜脈注射
2.2給藥劑量(起始劑量，中間劑量，最大劑量)：
a組：a、大鼠2.5ml/kgb、大鼠5.0ml/kgc、大鼠10.0ml/kg
b組：a、犬1.25ml/kgb、犬2.5ml/kgc、犬5.0ml/kg
3、觀察方法
給藥后2h同時觀察各組觀察動物反應(yīng)，以后每天上、下午各觀察一次，連續(xù)觀察15天。
指標(biāo)：觀察一般指標(biāo)(見下表6)，動物死亡情況，體重變化。
表6急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果
注：3.1實(shí)驗(yàn)組大鼠偶發(fā)呼吸急促(1/20)，給藥后30min出現(xiàn)，持續(xù)2min。
3.2實(shí)驗(yàn)組大鼠自發(fā)活動增多(3/20)，表現(xiàn)為神經(jīng)系統(tǒng)興奮狀態(tài)，給藥后3～15天間歇性出現(xiàn)。
3.3實(shí)驗(yàn)組beagle犬自發(fā)活動增多(2/20)，表現(xiàn)為神經(jīng)系統(tǒng)興奮狀態(tài)，給藥后7～14天間歇性出現(xiàn)。
3.4空白對照組大鼠出現(xiàn)困倦(2/20)，表現(xiàn)為偶爾昏睡，正常飼養(yǎng)第8～13天間歇性出現(xiàn)。
3.5空白對照組beagle犬出現(xiàn)困倦(1/20)，表現(xiàn)為偶爾昏睡，正常飼養(yǎng)第9～11天間歇性出現(xiàn)。
3.6.實(shí)驗(yàn)組beagle犬出現(xiàn)小微血管擴(kuò)張(1/20)，表現(xiàn)為舌、耳、結(jié)膜、陰囊發(fā)紅，體熱等。給藥后5～13天出現(xiàn)。
4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
參與實(shí)驗(yàn)的大鼠及beagle犬在實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)皆未出現(xiàn)死亡，體重稍有增加，大鼠平均增加10～15g，犬平均增加400～900g，實(shí)驗(yàn)組與空白對照組相比無明顯差別。除最大劑量組及空白對照組出現(xiàn)陽性表現(xiàn)外，其余各組均為出現(xiàn)有意義的陽性體征，現(xiàn)以表格形式記錄如下，癥狀陽性表現(xiàn)用“+”表示，陰性表現(xiàn)用“—”表示，并記錄了陽性表現(xiàn)的出現(xiàn)比例及起始時間(詳見下表及注釋)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后對全部實(shí)驗(yàn)動物進(jìn)行大體解剖，其組織器官的體積，顏色，質(zhì)地均未見異常。
5、結(jié)論
5.1最高劑量下，a組實(shí)驗(yàn)組大鼠偶發(fā)的呼吸急促，且持續(xù)時間很短，考慮可能與該大鼠心肺功能不全有關(guān)。a組實(shí)驗(yàn)組3只大鼠及b組實(shí)驗(yàn)組2只犬在給藥后分別出現(xiàn)了間歇性的自發(fā)活動增加，探究，梳理毛發(fā)，運(yùn)動增加，考慮是由于干細(xì)胞增殖，增加了神經(jīng)細(xì)胞的數(shù)量，刺激中樞神經(jīng)系統(tǒng)使其表現(xiàn)為興奮狀態(tài)。另有a組空白對照組2只大鼠及b組空白對照組1只犬出現(xiàn)昏睡狀態(tài)，但易警醒而恢復(fù)正?；顒?，睡眠中樞短暫受到抑制，考慮可能與飼養(yǎng)環(huán)境較封閉，運(yùn)動減少，通風(fēng)不良有關(guān)。b組實(shí)驗(yàn)組1只犬出現(xiàn)體表微血管擴(kuò)張，微循環(huán)加快，考慮為心輸出量增加，或局部環(huán)境溫度過高所致。
5.2由起始劑量到中間劑量均未出現(xiàn)有意義的陽性表現(xiàn)，說明本發(fā)明組合物作用于動物的安全性高，最高劑量下偶發(fā)中樞神經(jīng)興奮，說明其不良反應(yīng)少，受試物安全范圍為大鼠0～5.0ml/kg，犬0～2.5ml/kg，毒性反應(yīng)小，對心腦肺等重要器官基本無不良影響，并且短時間內(nèi)可恢復(fù)正常。
試驗(yàn)例3長期毒性實(shí)驗(yàn)
1材料
1.1動物：采用spf級sd大鼠，雌雄各半，體質(zhì)量80～90g。動物飼養(yǎng)于spf級實(shí)驗(yàn)動物實(shí)驗(yàn)室條件下，室內(nèi)溫度19～22℃，相對濕度40％～50％，每籠6只動物，給予鼠全價顆粒飼料，自由攝食、飲水。
1.2藥物：實(shí)施例2的組合物，其中干細(xì)胞的含量為8×107個/ml。
2方法
2.1分組與給藥
將本發(fā)明的組合物每日上午以最大劑量2.0ul/kg尾靜脈注射給藥1次，對照組注射等劑量的蒸餾水，每周稱1次體重并記錄攝食量，根據(jù)體重的變化重新計算給藥量。根據(jù)急性毒性試驗(yàn)、藥效學(xué)試驗(yàn)結(jié)果確定本發(fā)明組合物的高劑量組2.0ul/kg、中劑量組1.0ul/kg、低劑量組0.5ul/kg。
2.2觀察指標(biāo)
2.2.1一般觀察給藥期間，觀察動物的外觀，行為活動，飲食、糞便及被毛的情況，并記錄體質(zhì)量(每周稱重1次)、進(jìn)食量、進(jìn)水量。
2.2.2血液學(xué)檢查采用美國雅培cd-1200型全自動血球記數(shù)儀，測定紅細(xì)胞(rbc)、白細(xì)胞(wbc)、血小板(plt)、紅細(xì)胞壓積容量(hct)、紅細(xì)胞平均體積(mcv)、平均血紅蛋白含量(mch)、平均血紅蛋白濃度(mchc)、淋巴細(xì)胞數(shù)目(lym)、單核細(xì)胞數(shù)目(mid)、粒細(xì)胞數(shù)目(gra)、紅細(xì)胞分布寬度(rdw)、血紅蛋白(hgb)。
2.2.3血液生化檢測采用日本日立7610型自動儀，測定丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alt)、總蛋白(tp)、白蛋白(alb)、尿素氮(urea)、肌酐(crea)、總膽紅素(tb)等。
2.2.4系統(tǒng)尸解及臟器系數(shù)全面細(xì)致觀察每只動物的臟器，并稱量每只動物的心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胸腺、腦等，并計算臟器系數(shù)。
3結(jié)果
3.1本發(fā)明組合物對大鼠血液學(xué)指標(biāo)的影響結(jié)果見表7-8。
3.2本發(fā)明組合物對大鼠血液生化學(xué)指標(biāo)的影響結(jié)果見表9-10。
3.3本發(fā)明組合物對大鼠臟器系數(shù)的影響結(jié)果見表11。
表7本發(fā)明組合物對給藥180d末期大鼠血液學(xué)指標(biāo)的影響
表8本發(fā)明組合物對停藥15d后大鼠血液學(xué)指標(biāo)的影響
表9本發(fā)明組合物對給藥180d末期大鼠血液生化學(xué)指標(biāo)的影響
表10本發(fā)明組合物對停藥15d后大鼠血液生化學(xué)指標(biāo)的影響
表11本發(fā)明組合物對給藥180d末期大鼠臟器系數(shù)的影響
4結(jié)論
大鼠長期毒性實(shí)驗(yàn)以3個劑量(即2.0，1.0，0.5ul/kg)連續(xù)給藥6個月及停藥2周后，對大鼠一般狀況、體質(zhì)量增長無明顯影響；血液學(xué)指標(biāo)及血液生化學(xué)指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)，對大鼠心、肝、脾、肺、腎、腦等重要臟器重量，臟器系數(shù)與對照組比較均無顯著差異，并對大鼠心、肝、脾、肺、腎、腦、睪丸、子宮等重要臟器進(jìn)行組織檢查也未見明顯病理改變。故本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示本發(fā)明組合物在大鼠6個月長期毒性實(shí)驗(yàn)中，未發(fā)現(xiàn)明顯的毒性反應(yīng)及延遲性毒性反應(yīng)，可以安全地應(yīng)用于臨床。
試驗(yàn)例4靜脈注射對血管刺激性、溶血、過敏性實(shí)驗(yàn)
1材料
1.1實(shí)施例3組合物，其中干細(xì)胞的含量為8×107個/ml。
5％葡萄糖注射液；甲醛；白蛋白；牛血清白蛋白；白百破三聯(lián)疫苗；伊文思蘭。
1.2受試動物日本大耳白家兔，體重2～3kg，雌雄兼用；荷蘭豚鼠，體重200～250g，雄性。sd大鼠，體重180～220g，雄性。
2方法
2.1血管刺激性實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)開始前，動物預(yù)先飼養(yǎng)1周以觀察其活動表現(xiàn)，動物室溫度22～24℃，濕度40％～60％，取家兔3只，右側(cè)耳緣靜脈以無菌操作方法注射量為8.3ml/kg(注：由于該系列實(shí)驗(yàn)涉及到受試物的耐受性，因此選用最大濃度進(jìn)行試驗(yàn)。)的組合物，左側(cè)耳緣靜脈注射等體積5％葡萄糖注射液，1次/d，連續(xù)給藥5d。上述兩組均分別于末次給藥后96h，肉眼觀察注射部位有無紅腫、充血等刺激現(xiàn)象，處死動物，以耳緣靜脈注射點(diǎn)至向心方向，連續(xù)取3段血管連同周圍組織，每段1cm，用10％甲醛溶液固定，常規(guī)脫水，石蠟包埋，切5μm薄片，he染色，光鏡下做組織學(xué)檢查，另一側(cè)對照血管也同法處理。
2.2溶血實(shí)驗(yàn)
2.2.12％兔紅細(xì)胞混懸液制備取健康家兔1只，自心臟取血約20ml，置于三角瓶中，用玻璃棒攪拌，除去纖維蛋白，然后將血移入刻度離心管內(nèi)，加入生理鹽水10ml，混勻后離心5min(2000～2500r/min)，去除上清液，再加生理鹽水混勻離心，反復(fù)洗滌3～4次，至上清液無色透明，將所得紅細(xì)胞按其容積用生理鹽水稀釋成2％的混懸液。
2.2.2方法取干凈試管7支，編號排列于試管架上，按配比量依次加入2％兔紅細(xì)胞混懸液和生理鹽水，混勻后，置于37℃恒溫箱中30min，然后于1-5管中加入不同量的組合物,分別為1ml，2ml，3ml，4ml，5ml，6號管中加入1ml生理鹽水，7號管中加入1ml溶血素。(第6管為陰性對照管，第7管為陽性對照管)，搖勻，置37℃恒溫箱中進(jìn)行溫育，觀察15，30，45min，1，2，3，24h有無溶血及凝集情況。
結(jié)果判定：
全溶血：溶液澄明紅色，管底無細(xì)胞殘留。
部分溶血：溶液澄明紅色或棕色，管底有少量紅細(xì)胞殘留。
無溶血：紅細(xì)胞全部下沉，上層液體無色澄明。
凝集：雖不溶血，但出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集，振搖后不能分散。
2.3全身主動過敏實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)開始前，動物預(yù)先飼養(yǎng)1周以觀察其活動表現(xiàn)，動物室溫度22～24℃，濕度40％～60％，取48只健康雄性豚鼠，隨機(jī)分成5％葡萄糖注射液組、陽性藥物組(白蛋白組)、本發(fā)明組合物大劑量組、小劑量組，每組12只。分別給各組豚鼠隔日腹腔注射5％葡萄糖注射液、白蛋白25mg/kg，本發(fā)明組合物4，16ul/kg，體積為0.5ml，共注射3次，然后每組內(nèi)分成兩批，于第1次給藥后14d及21d分別靜脈注射5％葡萄糖注射液、白蛋白50mg/kg，本發(fā)明組合物16，64ul/kg，體積為1ml，觀察豚鼠在靜脈注射后30min內(nèi)有無表12中的躁動、搔鼻、豎毛、呼吸困難、痙攣、甚至死亡等過敏反應(yīng)癥狀。
表12過敏反應(yīng)癥狀
2.4被動皮膚過敏實(shí)驗(yàn)
2.4.1大鼠含ige的抗血清制備取4只健康雄性sd大鼠，按注射劑大鼠同種被動皮膚過敏試驗(yàn)的要求，分別腹腔注射5％葡萄糖注射液、牛血清白蛋白25mg/kg，本發(fā)明組合物4，16ul/kg，同時腹腔注射白百破三聯(lián)疫苗1ml/只，隔日1次、共3次。11d后眼眶取血，分離血清，－20℃保存，備用。
2.4.2大鼠同種被動皮膚過敏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)開始前，動物預(yù)先飼養(yǎng)1周以觀察其活動表現(xiàn)，動物室溫度22～24℃，濕度40％～60％，取16只健康雄性sd大鼠，隨機(jī)分為5％葡萄糖組、陽性組(牛血清白蛋白組)、大劑量組和小劑量組。分別在各組大鼠背中線兩側(cè)距脊柱約1.5cm處備皮，4cm×4cm。
取上述含ige的抗血清，用5％葡萄糖注射液按1∶2，1∶4，1∶8，1∶16比例分別稀釋成4個稀釋度，將稀釋的抗血清按逆時針方向(左上-左下-右下-右上)皮內(nèi)注射于大鼠背部預(yù)先備皮部位，每一稀釋度注射一個點(diǎn)，每點(diǎn)注射0.1ml。致敏24h后，各組靜脈注射與致敏劑量相同的激發(fā)抗原加等量的0.8％伊文思蘭染料共1ml，進(jìn)行激發(fā)。30min后處死各組大鼠，測量皮膚內(nèi)層的藍(lán)色反應(yīng)斑直徑，直徑大于5mm者判定為陽性。不規(guī)則斑點(diǎn)的直徑為長徑與短徑之和。
3結(jié)果
3.1血管刺激性實(shí)驗(yàn)：給藥組3只家兔耳緣靜脈注射部位均未見紅腫、充血等刺激現(xiàn)象。光鏡病理組織學(xué)檢查：本發(fā)明組合物給藥組和5％葡萄糖對照組家兔耳緣靜脈注射部位血管結(jié)構(gòu)完整，血管內(nèi)皮細(xì)胞無腫脹、變性、壞死，管壁無炎細(xì)胞浸潤，管腔內(nèi)無血栓形成。
3.2溶血性實(shí)驗(yàn)：在0.25～3h及24h內(nèi)除第7管(陽性對照管)溶液呈現(xiàn)澄明紅色，其余6管均末見澄明紅色，且紅細(xì)胞全部下沉，上層液體無色澄明，經(jīng)振搖后紅細(xì)胞能均勻分散。表明臍本發(fā)明組合物無溶血及無凝集作用。
3.3全身主動過敏實(shí)驗(yàn)：5％葡萄糖注射液組、本發(fā)明組合物大、小劑量組在靜脈給藥30min后，豚鼠活動正常，未出現(xiàn)1～20級反應(yīng)癥狀，判定為過敏反應(yīng)陰性。而陽性藥組豚鼠出現(xiàn)痙攣、抽搐、休克死亡，判定為過敏反應(yīng)極強(qiáng)陽性。
3.4被動皮膚過敏實(shí)驗(yàn)：本發(fā)明組合物大、小劑量組、5％葡萄糖注射液組大鼠背部皮膚均未見藍(lán)色反應(yīng)斑點(diǎn)。陽性組注射部位皮膚均不同程度的出現(xiàn)藍(lán)色斑點(diǎn)反應(yīng)，其中1∶16處有3例出現(xiàn)藍(lán)斑，1∶8處有4例出現(xiàn)藍(lán)斑，1∶4與1∶2處6例均出現(xiàn)藍(lán)斑，藍(lán)斑直徑均大于5mm，判定為陽性反應(yīng)。結(jié)果表明：本發(fā)明組合物無同種被動皮膚致敏作用。
4結(jié)論
本實(shí)驗(yàn)采用的方法簡便、準(zhǔn)確、可靠，4項(xiàng)指標(biāo)檢測本發(fā)明組合物均未出現(xiàn)陽性結(jié)果，說明本發(fā)明組合物對血管無刺激性，無溶血作用，全身主動過敏反應(yīng)陰性，無同種被動皮膚致敏作用。表明本發(fā)明組合物安全性好，可供臨床應(yīng)用。
試驗(yàn)例5本發(fā)明組合物治療宮頸癌的效果例
以中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院某女性病例為例，其2013年治療前檢查結(jié)果如表13-15所示。
表13組織病理學(xué)診斷報告
表14人乳頭瘤病毒(hpv)核酸檢測(導(dǎo)流雜交、捕獲法，宮頸拭子)
表15宮頸液基細(xì)胞償(tct)檢查報告
使用本發(fā)明實(shí)施例1中的組合物對該病例進(jìn)行定期定量用藥。經(jīng)過治療后，病理學(xué)檢查相關(guān)生理功能指標(biāo)正常，患者自覺癥狀消除。參見圖1和表16。
表16人乳頭瘤病毒(hpv)核酸檢測(導(dǎo)流雜交、捕獲法，宮頸拭子)
本發(fā)明的組合物通過修復(fù)免疫系統(tǒng)缺陷，特異性殺傷癌細(xì)胞，并修復(fù)機(jī)體受損細(xì)胞、組織、器官，結(jié)合中藥艾草成分的輔助治療，改善人體內(nèi)環(huán)境，創(chuàng)造一個不利于癌細(xì)胞生長的體內(nèi)環(huán)境，整個治療過程安全有效，無任何毒副反應(yīng)，可以在臨床上廣泛推廣，對于宮頸癌治療具有很大科研價值和臨床意義。
在不背離本發(fā)明的范圍或精神的情況下，可對本發(fā)明說明書的具體實(shí)施方式做多種改進(jìn)和變化，這對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。由本發(fā)明的說明書得到的其他實(shí)施方式對技術(shù)人員而言是顯而易見得的。本申請說明書和實(shí)施例僅是示例性的。