本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體為一種可吸收復(fù)合止血粉及其制備方法。

背景技術(shù)：

隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷進(jìn)步，新型醫(yī)用材料及相關(guān)技術(shù)得到了良好的發(fā)展。其中止血材料的研制和改進(jìn)有利于改善手術(shù)出、滲血的問題，具有重要的意義，已經(jīng)成為目前醫(yī)藥領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。

戰(zhàn)傷、創(chuàng)傷急牧和外科手術(shù)都會形成出血，該問題亟需解決，正常人體均具有止血功能，緩慢少量的出血可以依靠自身機(jī)能止血，但是，對于各種突發(fā)性事故中人體動脈出血、臟器等破裂的隱蔽性滲血現(xiàn)象機(jī)體不能自行止血，也不能僅靠普通的止血繃帶壓迫止血，如果病人失血過多，可能會導(dǎo)致休克，甚至?xí)＜吧】?。目前常用的有效止血方法是采用生物相容性的可吸收性材料止血，在外科手術(shù)、急牧等止血中提供一種安全有效，使用方便，成本低廉的止血材料顯得尤為重要。

目前，臨床上使用的止血材料主要有纖維蛋白膠、膠原蛋白、明膠海綿及纖維素止血材料，這些材料在動物實(shí)驗(yàn)及臨床應(yīng)用中都取得了不錯(cuò)的效果，但也都存在一些不足：膠原其原料來源于動物組織，是異種蛋白，容易出現(xiàn)排異性，具有潛在的致敏性；明膠吸收速度緩慢，一般4周以上，會增加傷口的感染風(fēng)險(xiǎn)；纖維素類，人體缺乏使其降解的酶，降解時(shí)間長，可能會給病人帶來感染等副作用。

專利cn201410806354.5公開了一種可吸收性淀粉止血粉及其制備方法，該可吸收性淀粉止血粉是以植物原淀粉和羥乙基淀粉為原料，在ph9-10，45-70℃條件下經(jīng)司班80、吐溫80及植物油乳化分散，三偏磷酸鈉交聯(lián)，乙酸乙酯抽提分液，無水乙醇洗滌，烘箱干燥，滅菌即得。

專利cn201511015505.6公開了一種可吸收膠原止血粉的制備方法，其特征在于包括以下步驟：s1：取哺乳動物跟腱或者皮膚去除毛發(fā)，加入脫脂酶、丙酮、乙醇、正丁醇、甲氯中的一種，脫去油脂，冷凍切片；s2：在ph值為1.0～4.5的酸溶液中，加入蛋白酶，在0～25℃溫度下酶解1～96小時(shí)；離心機(jī)離心酶解液取上清液，使用堿溶液調(diào)節(jié)ph值為5～8，使用鹽溶液鹽析出膠原蛋白；s3：將鹽析出的膠原蛋白裝入透析袋中，將透析袋端口密封，在ph1～6的醋酸溶液中進(jìn)行梯度透析，至透析外液使用硝酸銀滴定無沉淀；s4：將透析完成的膠原蛋白凝膠，配置成含膠原蛋白0.5～1.5％wt溶液；s5：噴霧干燥，然后再使用4～100目的篩網(wǎng)進(jìn)行篩分，制得膠原止血粉；s6：將止血粉進(jìn)行紫外燈照射交聯(lián)或高溫真空法交聯(lián)固定，再進(jìn)行無菌包裝，使用輻照或干熱滅菌方法滅菌后使用。

專利cn201410384076.9公開了一種具有抗菌促愈合活性的復(fù)合止血粉的制備方法：(1)將溶菌酶溶解于ph＝5～8的磷酸緩沖溶液中得到溶菌酶溶液，加入埃洛石納米管，得溶菌酶和埃洛石的復(fù)合懸液，懸液超聲處理，使埃洛石納米管均勻分散并充分吸附溶菌酶，再將混合體系經(jīng)離心沉降、洗滌和冷凍干燥，得到負(fù)載溶菌酶的埃洛石納米管；(2)將殼聚糖溶于乙酸水溶液中配制成殼聚糖溶液，并將ph調(diào)節(jié)為6，然后加入步驟(1)制得的負(fù)載溶菌酶的埃洛石納米管，攪拌5～15min，加入氫氧化鈉溶液將ph調(diào)為7制得懸濁液，或是加入有機(jī)沉淀劑制得懸濁液，或是加入交聯(lián)劑制得懸濁液；(3)將步驟(2)得到的懸濁液離心分離，沉淀用去離子水洗滌后，重復(fù)離心分離和去離子水洗滌的操作2～5次，將沉淀冷凍干燥，即得。

現(xiàn)有技術(shù)中的止血粉存在以下缺陷：

1、改性淀粉類止血粉，需要使用多種有毒化學(xué)試劑，存在潛在殘留毒性問題；

2、膠原類止血粉來源于動物，是異種蛋白，容易出現(xiàn)排斥性，具有潛在的致敏性，且吸收速度緩慢，一般需要4周以上；

3、大部分止血粉僅有止血作用，無抑菌作用和促進(jìn)傷口愈合、抑制疤痕形成作用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺陷，本發(fā)明提供一種可吸收復(fù)合止血粉，該止血粉不含毒性化學(xué)劑，具有抑菌、促進(jìn)傷口愈合、抑制疤痕形成的作用，收撒涂敷后能使止血粉在創(chuàng)面均勻快速吸收血液中的水分，不會形成“白芯”，是一種使用方便、高效無副作用、止血效果極佳的止血粉。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

本發(fā)明的可吸收復(fù)合止血粉，由以下重量份的原料制備而成：

羧甲基殼聚糖10-30份、海藻酸鈉10-30份、羧甲基纖維素鈉10-20份、羧甲淀粉鈉15-50份、甘露醇30-60份、氯化鈣1-5份、蒸餾水2000-4000份。

優(yōu)選地，所述的可吸收復(fù)合止血粉，由以下重量份的原料制備而成：

羧甲基殼聚糖15-25份、海藻酸鈉15-25份、羧甲基纖維素鈉12-18份、羧甲淀粉鈉20-30份、甘露醇40-50份、氯化鈣2-3份、蒸餾水2500-3000份。

本發(fā)明的可吸收復(fù)合止血粉，其制備方法包括以下步驟：

a、按重量份分別稱取羧甲基殼聚糖、海藻酸鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲淀粉鈉粉末，混合均勻，得混合粉末a；

b、按重量份稱取蒸餾水，一邊攪拌一邊將步驟a所述的混合粉末加入蒸餾水中，直至完全溶解，得溶解液b；

c、按重量份稱取甘露醇，加入溶解液b中，攪拌均勻，得溶解液c；

d、將溶解液c進(jìn)行冷凍干燥，凍干后的樣品進(jìn)行粉碎，過60-100目篩，得混合粉末d；

e、按重量份稱取氯化鈣，粉碎，過60-100目篩，與混合粉末d混勻，分裝，即得復(fù)合止血粉。

本發(fā)明的止血粉中，羧甲基纖維素鈉和羧甲淀粉鈉具有極強(qiáng)的吸水性和膨脹性，能迅速吸收血液中的水分，濃縮血液中的固形成分如血小板、紅細(xì)胞、凝血酶和纖維蛋白原等到微粒表面，機(jī)械封堵血管，同時(shí)形成凝膠狀基質(zhì)，具有凝膠阻塞作用，加速自然止血，凝膠中濃縮的凝血因子和血小板增強(qiáng)了正常的凝血反應(yīng)，增加了止血塞的穩(wěn)定性；海藻酸鈉形成的韌性薄膜潤濕狀態(tài)下與氯化鈣發(fā)生固化形成原位凝膠，具有防止龜裂作用，同時(shí)，凝膠保護(hù)了神經(jīng)末梢從而有效減輕疼痛感；甘露醇溶解時(shí)吸熱，對創(chuàng)口有舒適感，且具組織脫水作用，提高血漿滲透壓，導(dǎo)致組織內(nèi)水分進(jìn)入血管內(nèi)，從而減輕組織水腫；羧甲基殼聚糖與海藻酸鈉協(xié)同作用快速止血，促進(jìn)創(chuàng)口愈合，且具廣譜抑菌作用，防止創(chuàng)面感染，減少后期疤痕形成；由于添加了氯化鈣成分，本發(fā)明的止血粉在潤濕狀態(tài)下能夠釋放出的鈣離子，具有促凝血作用，協(xié)同增強(qiáng)止血作用；加入甘露醇凍干后的止血粉，粉體細(xì)膩，比表面積大，流動性好，易于撒敷。

本發(fā)明的有益效果為：

現(xiàn)有的止血粉制備方法中，通常是先使用海藻酸鈉與氯化鈣形成海藻酸鈣，再凍干，粉碎使用，這種方法制備的粉末韌性大，較難粉碎，且不具吸水能力，在創(chuàng)口中遇血液不再形成原位凝膠。本發(fā)明止血粉的制備中，摒棄現(xiàn)有技術(shù)中將氯化鈣溶液與其他成分的溶液混合后凍干成粉的方式，在制備凍干粉之后，再將氯化鈣以粉末狀態(tài)加入，起到多重作用：(1)海藻酸鈉粉末狀態(tài)下加入氯化鈣混勻，保留了海藻酸鈉的吸水凝膠特性，在創(chuàng)口血液潤濕狀態(tài)下，氯化鈣釋放出的鈣離子與海藻酸鈉絡(luò)合，在創(chuàng)口形成原位凝膠，增強(qiáng)機(jī)械封堵作用，亦有利于羧甲基纖維素鈉和羧甲淀粉鈉凝膠的固定，部分游離的鈣離子誘發(fā)凝血過程，激活凝血因子，增強(qiáng)止血作用；(2)使用時(shí)在創(chuàng)口潤濕狀態(tài)下釋放的鈣離子能激活凝血因子，誘發(fā)凝血；氯化鈣增加細(xì)菌細(xì)胞壁通透性，協(xié)同甘露醇使用易使細(xì)菌失水死亡；(3)氯化鈣粉末可在止血粉貯存過程充當(dāng)干燥劑，防止止血粉在貯存過程或啟封后吸潮。

本發(fā)明的可吸收復(fù)合止血粉，不含毒性化學(xué)劑，具有抑菌、促進(jìn)傷口愈合、抑制疤痕形成的作用，收撒涂敷后能使止血粉在創(chuàng)面均勻快速吸收血液中的水分，不會形成“白芯”，是一種使用方便、高效無副作用、止血效果極佳的止血粉。

具體實(shí)施方式

下面通過具體實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。

實(shí)施例1

本發(fā)明的可吸收復(fù)合止血粉，原料用量為：

羧甲基殼聚糖10g、海藻酸鈉10g、羧甲基纖維素鈉10g、羧甲淀粉鈉15g、甘露醇30g、氯化鈣1g、蒸餾水2000g。

本發(fā)明的可吸收復(fù)合止血粉的制備方法為：

a、分別稱取羧甲基殼聚糖、海藻酸鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲淀粉鈉粉末，混合均勻，得混合粉末a；

b、稱取蒸餾水，一邊攪拌一邊將步驟a所述的混合粉末加入蒸餾水中，直至完全溶解，得溶解液b；

c、稱取甘露醇，加入溶解液b中，攪拌均勻，得溶解液c；

d、將溶解液c進(jìn)行冷凍干燥，凍干后的樣品進(jìn)行粉碎，過60目篩，得混合粉末d；

e、稱取氯化鈣，粉碎，過60目篩，與混合粉末d混勻，分裝，即得復(fù)合止血粉。

實(shí)施例2

本發(fā)明的可吸收復(fù)合止血粉，原料用量為：

羧甲基殼聚糖15g、海藻酸鈉15g、羧甲基纖維素鈉12g、羧甲淀粉鈉20g、甘露醇30g、氯化鈣2g、蒸餾水2500g。

本發(fā)明的可吸收復(fù)合止血粉的制備方法為：

a、分別稱取羧甲基殼聚糖、海藻酸鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲淀粉鈉粉末，混合均勻，得混合粉末a；

b、稱取蒸餾水，一邊攪拌一邊將步驟a所述的混合粉末加入蒸餾水中，直至完全溶解，得溶解液b；

c、稱取甘露醇，加入溶解液b中，攪拌均勻，得溶解液c；

d、將溶解液c進(jìn)行冷凍干燥，凍干后的樣品進(jìn)行粉碎，過70目篩，得混合粉末d；

e、稱取氯化鈣，粉碎，過70目篩，與混合粉末d混勻，分裝，即得復(fù)合止血粉。

實(shí)施例3

本發(fā)明的可吸收復(fù)合止血粉，原料用量為：

羧甲基殼聚糖20g、海藻酸鈉20g、羧甲基纖維素鈉15g、羧甲淀粉鈉25g、甘露醇35g、氯化鈣3g、蒸餾水2800g。

本發(fā)明的可吸收復(fù)合止血粉的制備方法為：

a、分別稱取羧甲基殼聚糖、海藻酸鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲淀粉鈉粉末，混合均勻，得混合粉末a；

b、稱取蒸餾水，一邊攪拌一邊將步驟a所述的混合粉末加入蒸餾水中，直至完全溶解，得溶解液b；

c、稱取甘露醇，加入溶解液b中，攪拌均勻，得溶解液c；

d、將溶解液c進(jìn)行冷凍干燥，凍干后的樣品進(jìn)行粉碎，過80目篩，得混合粉末d；

e、稱取氯化鈣，粉碎，過80目篩，與混合粉末d混勻，分裝，即得復(fù)合止血粉。

實(shí)施例4

本發(fā)明的可吸收復(fù)合止血粉，原料用量為：

羧甲基殼聚糖25g、海藻酸鈉25g、羧甲基纖維素鈉18g、羧甲淀粉鈉30g、甘露醇40g、氯化鈣4g、蒸餾水3000g。

本發(fā)明的可吸收復(fù)合止血粉的制備方法為：

a、分別稱取羧甲基殼聚糖、海藻酸鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲淀粉鈉粉末，混合均勻，得混合粉末a；

b、稱取蒸餾水，一邊攪拌一邊將步驟a所述的混合粉末加入蒸餾水中，直至完全溶解，得溶解液b；

c、稱取甘露醇，加入溶解液b中，攪拌均勻，得溶解液c；

d、將溶解液c進(jìn)行冷凍干燥，凍干后的樣品進(jìn)行粉碎，過90目篩，得混合粉末d；

e、稱取氯化鈣，粉碎，過90目篩，與混合粉末d混勻，分裝，即得復(fù)合止血粉。

實(shí)施例5

本發(fā)明的可吸收復(fù)合止血粉，原料用量為：

羧甲基殼聚糖30g、海藻酸鈉30g、羧甲基纖維素鈉20g、羧甲淀粉鈉35g、甘露醇45g、氯化鈣5g、蒸餾水3500g。

本發(fā)明的可吸收復(fù)合止血粉的制備方法為：

a、分別稱取羧甲基殼聚糖、海藻酸鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲淀粉鈉粉末，混合均勻，得混合粉末a；

b、稱取蒸餾水，一邊攪拌一邊將步驟a所述的混合粉末加入蒸餾水中，直至完全溶解，得溶解液b；

c、稱取甘露醇，加入溶解液b中，攪拌均勻，得溶解液c；

d、將溶解液c進(jìn)行冷凍干燥，凍干后的樣品進(jìn)行粉碎，過100目篩，得混合粉末d；

e、稱取氯化鈣，粉碎，過100目篩，與混合粉末d混勻，分裝，即得復(fù)合止血粉。

實(shí)施例6

本發(fā)明的可吸收復(fù)合止血粉，原料用量為：

羧甲基殼聚糖30g、海藻酸鈉30g、羧甲基纖維素鈉20g、羧甲淀粉鈉40g、甘露醇50g、氯化鈣5g、蒸餾水3800g。

本發(fā)明的可吸收復(fù)合止血粉的制備方法為：

a、分別稱取羧甲基殼聚糖、海藻酸鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲淀粉鈉粉末，混合均勻，得混合粉末a；

b、稱取蒸餾水，一邊攪拌一邊將步驟a所述的混合粉末加入蒸餾水中，直至完全溶解，得溶解液b；

c、稱取甘露醇，加入溶解液b中，攪拌均勻，得溶解液c；

d、將溶解液c進(jìn)行冷凍干燥，凍干后的樣品進(jìn)行粉碎，過90目篩，得混合粉末d；

e、稱取氯化鈣，粉碎，過90目篩，與混合粉末d混勻，分裝，即得復(fù)合止血粉。

實(shí)施例7

本發(fā)明的可吸收復(fù)合止血粉，原料用量為：

羧甲基殼聚糖30g、海藻酸鈉30g、羧甲基纖維素鈉20g、羧甲淀粉鈉50g、甘露醇60g、氯化鈣5g、蒸餾水4000g。

本發(fā)明的可吸收復(fù)合止血粉的制備方法為：

a、分別稱取羧甲基殼聚糖、海藻酸鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲淀粉鈉粉末，混合均勻，得混合粉末a；

b、稱取蒸餾水，一邊攪拌一邊將步驟a所述的混合粉末加入蒸餾水中，直至完全溶解，得溶解液b；

c、稱取甘露醇，加入溶解液b中，攪拌均勻，得溶解液c；

d、將溶解液c進(jìn)行冷凍干燥，凍干后的樣品進(jìn)行粉碎，過70目篩，得混合粉末d；

e、稱取氯化鈣，粉碎，過70目篩，與混合粉末d混勻，分裝，即得復(fù)合止血粉。

實(shí)施例8

本發(fā)明的可吸收復(fù)合止血粉，原料用量為：

羧甲基殼聚糖20g、海藻酸鈉20g、羧甲基纖維素鈉15g、羧甲淀粉鈉25g、甘露醇45g、氯化鈣2.5g、蒸餾水2800g。

本發(fā)明的可吸收復(fù)合止血粉的制備方法為：

a、分別稱取羧甲基殼聚糖、海藻酸鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲淀粉鈉粉末，混合均勻，得混合粉末a；

b、稱取蒸餾水，一邊攪拌一邊將步驟a所述的混合粉末加入蒸餾水中，直至完全溶解，得溶解液b；

c、稱取甘露醇，加入溶解液b中，攪拌均勻，得溶解液c；

d、將溶解液c進(jìn)行冷凍干燥，凍干后的樣品進(jìn)行粉碎，過80目篩，得混合粉末d；

e、稱取氯化鈣，粉碎，過80目篩，與混合粉末d混勻，分裝，即得復(fù)合止血粉。

實(shí)施例9可吸收復(fù)合止血粉止血效能測定與比較

一、樣品制備：

對照組：市售的arista止血粉。

供試組1：按照本發(fā)明實(shí)施例3的制備方法制備止血粉用于止血。

供試組2：按照本發(fā)明實(shí)施例3的原料用量分別稱取羧甲基殼聚糖、海藻酸鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲淀粉鈉、甘露醇、氯化鈣、蒸餾水，將羧甲基殼聚糖、海藻酸鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲淀粉鈉粉末混合均勻，邊快速攪拌邊加入蒸餾水中，直至溶解完全；將甘露醇加入上述溶液，攪拌均勻至完全溶解；將氯化鈣，加入上述溶液，攪拌均勻至完全溶解；將配制好的溶液分裝至凍干盤中，進(jìn)行冷凍干燥；將凍干后的樣品進(jìn)行粉碎，過80目篩；分裝，即得止血粉用于止血。

供試組3：按照本發(fā)明實(shí)施例3的原料用量分別稱取羧甲基殼聚糖、海藻酸鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲淀粉鈉、甘露醇、蒸餾水，將羧甲基殼聚糖、海藻酸鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲淀粉鈉粉末混合均勻；稱取對應(yīng)份數(shù)的蒸餾水，邊快速攪拌邊加入蒸餾水中，直至溶解完全；將甘露醇加入上述溶液，攪拌均勻至完全溶解；將配制好的溶液分裝至凍干盤中，進(jìn)行冷凍干燥；將凍干后的樣品進(jìn)行粉碎，過80目篩；分裝，得止血粉用于止血。

二、實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)動物及分組成年健康家兔100只(廣西醫(yī)科大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心提供)，體重2.5-3kg，雌雄不限，隨機(jī)分成4組，每組各25只，每個(gè)壓迫時(shí)間段內(nèi)各5只。每只家兔兩側(cè)腎臟作長1cm，深0.5cm大小出血?jiǎng)?chuàng)面，每組隨機(jī)用一供試組止血粉對兩側(cè)出血?jiǎng)?chuàng)面進(jìn)行止血。

三、實(shí)驗(yàn)方法及觀察指標(biāo)

出血模型制作：3％戊巴比妥鈉注射液(30-40mg/kg)沿家兔耳沿靜脈注射麻醉，在實(shí)驗(yàn)臺上固定好家兔，無菌操作逐層開腹，暴露家兔腎臟，用手術(shù)刀片隨機(jī)在腎臟不同位置作二縱向切割傷，長約1cm，深約0.5cm，切口部位血液用稱過重量的干燥紗布吸干后，隨機(jī)用1g本發(fā)明的止血粉對出血?jiǎng)?chuàng)面進(jìn)行止血，以1garista粉對另一側(cè)創(chuàng)面的止血為對照組，用紗布壓迫創(chuàng)面，分別壓迫10s、20s、30s、40s、50s并記錄各時(shí)間組的出血量及止血時(shí)間。

四、出血指標(biāo)觀察

止血時(shí)間腎臟出血?jiǎng)?chuàng)面觀察：計(jì)算從各供試組及對照組止血粉開始應(yīng)用于創(chuàng)面至創(chuàng)面血液滲出停止或止血粉顆粒紅染面積不再擴(kuò)大記錄為止血時(shí)間。

出血量用分析天平預(yù)先精確稱量供試組和對照組止血前和止血后干燥紗布重量，分別計(jì)算出血量(出血量＝(止血后重量-止血前重量)/血液比重)

五、結(jié)果

各供試組及對照組外觀性狀等物理特性比較見表1。

表1各供試組及對照組物理特性比較

由表1可以看出，供試組1性狀最好，比表面積大，增強(qiáng)吸附能力。吸水極迅速，形成穩(wěn)定凝膠。

表2是不同壓迫時(shí)間內(nèi)，各供試組及對照組出血量和止血時(shí)間的比較。在壓迫10s、20s時(shí)，腎臟出血量大，出血時(shí)間長；壓迫時(shí)間超過30s后，出血量和出血時(shí)間變化比較明顯，兩者明顯縮短，壓迫40s、50s后，出血指標(biāo)變化幅度進(jìn)一步減小。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明：各組實(shí)驗(yàn)均需壓迫30s以上，止血效果才能體現(xiàn)。

表2各供試組及對照組出血量和止血時(shí)間的比較

暴露腎臟后，在正常腎臟表面做手術(shù)切口后，血液迅速涌出，用干燥紗布吸干血液后，快速灑上1g各組止血粉，出血區(qū)止血粉由白色立即變紅，干燥紗布持續(xù)壓迫。20s壓迫組，移走紗布，出血?jiǎng)?chuàng)面有少量血液滲出，各組止血粉的紅染面積緩慢擴(kuò)大；30s壓迫組，腎臟切口出血基本停止，無明顯滲血現(xiàn)象；40s和50s壓迫組，移走紗布后，可見本發(fā)明的止血粉呈凝膠狀黏附于切口表面，出血停止。

通過表2可以看出供試組1的止血效果最優(yōu)，明顯由于供試組4，其次為供試組2，供試組3與對照組4止血效果相似。