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一種青苔有效部位抗EV?71病毒的制備方法與流程

文檔序號:11604926閱讀:237來源:國知局

本發(fā)明涉及中藥活性成分生產提取工藝,涉及青苔抗病毒有效部位提取的新思路新方法以及在制藥領域的新用途,具體涉及利用抗病毒追蹤的方式提取分離純化青苔抗腸道病毒71型有效成分抗病毒的研究。



背景技術:

我國的中草藥資源豐富,而且價格低廉,藥源廣泛,藥理作用顯著,不良反應小,隨著篩選、提取、分離、純化的技術不斷提高,從中藥中研究尋找具有抗病毒活性的成分已經成為開發(fā)抗病毒藥物的重要途徑之一。

青苔為苔蘚類植物,屬于苔蘚植物門蘚綱真蘚目葫蘆蘚科葫蘆蘚屬,生長在陰暗潮濕的地上、墻上、井中、屋瓦及水中等處。

手足口?。╤and-foot-mouthdisease,hfmd)是由腸道病毒引發(fā)的比較急性的病毒性傳染病,大多數(shù)的手足口病患者是因為感染腸道病毒71型(entervirus71,ev71)所引起的。ev71是目前發(fā)現(xiàn)最晚的腸道病毒,且ev71的病毒危害性很強,主要引起嬰幼兒(0~6歲)手足口病,還能夠引起多種與神經系統(tǒng)相關的疾病,比如無菌性腦膜炎還有腦干腦炎等。手足口病和中樞神經系統(tǒng)感染是ev71感染而引起的兩大常見臨床癥狀。

青苔提取物具有抗腸道病毒71型的作用。

青苔味微咸,性寒無毒,入肝經,查閱相關資料,青苔具有抗菌消炎、清熱解毒鎮(zhèn)痛、涼血散瘀的功效。目前在抗病毒方面研究較少,是一種開發(fā)潛力廣闊的植物藥。



技術實現(xiàn)要素:

本發(fā)明所要解決的技術問題是明確了青苔抗ev-71病毒的有效部位,為該有效部位的分離提取提供了一種利用抗病毒追蹤的方式制備青苔抗病毒有效部位的新方法。

本發(fā)明的優(yōu)點是,本發(fā)明首次分離出了青苔中具有抗ev-71病毒的一種有效部位,并發(fā)明了一種抗病毒追蹤的方法對該有效部位進行了制備,此分離方法目的性強,簡單節(jié)省了大量的人力物力,優(yōu)于傳統(tǒng)的系統(tǒng)分離。制備得到的有效部位對ev-71病毒具有較好的治療作用。

本發(fā)明青苔有效部位抗病毒的制備方法,包括如下步驟:

(1)取一定量的青苔水提;

(2)將提取液減壓濃縮,濃縮至每毫升藥液含有1克的藥材,然后加乙醇調節(jié)乙醇的濃度為70%,靜置24小時。過濾得到沉淀和上清液;

(3)將上清液回收乙醇,將沉淀用水溶解,分別進行抗病毒實驗。實驗顯示沉淀的抗病毒效果較好;

(4)取一定的dm130型號大孔吸附樹脂分別用95%的乙醇浸泡24小時,之后裝柱,用蒸餾水洗至無醇味,然后用5倍柱體積5%的鹽酸水溶液進行沖洗浸泡3個小時,之后用蒸餾水沖至ph等于7,再用5倍柱體積的5%的naoh水溶液進行沖洗浸泡3個小時,之后用蒸餾水沖至ph等于7,備用;

(5)取(3)中的沉淀上樣于處理好的大孔樹脂柱,分別用水,25%乙醇,50%乙醇,75%乙醇進行沖洗,每個洗脫液中每200ml接一瓶,并且沖洗到沒有顏色之后再換下一種洗脫液;

(6)將上述接到的樣品進行抗病毒實驗。實驗顯示經過大孔樹脂的篩選,青苔的水相部位抗病毒效果較好。

具體實施方式

實例1(1)稱取一定量的青苔,將水提取液減壓濃縮至每毫升藥液含有1克的藥材,加乙醇調節(jié)溶液乙醇的濃度為70%,靜置24小時;

(2)將(1)得到的醇沉液減壓抽濾,得到沉淀,將沉淀用蒸餾水超聲溶解;

(3)將(2)得到的溶液上樣于處理好的dm130大孔吸附樹脂,用水、不同濃度的乙醇進行沖洗,每200ml接一瓶,沖洗至無;

(4)合并(3)中水、不同濃度的乙醇部位,濃縮至一定體積;

(5)將(4)中得到的青苔不同洗脫部位分別進行抗病毒實驗,結果顯示水相的青苔提取物抗病毒效果較好。



技術特征:

技術總結
本發(fā)明屬于中藥有效成分的提取工藝及抗病毒有效部位的分離,主要為青苔提取物抗EV?71病毒有效部位的分離方法,具體步驟為采用青苔水提,醇沉,抗病毒,溶解沉淀,上樣于DM130型號的大孔吸附樹脂,不同濃度的洗脫劑洗脫,每200ml接一瓶,每個濃度梯度洗脫至無色并濃縮,每個洗脫液進行抗病毒實驗。經篩選后,青苔的提取物經水進行分離抗病毒效果較好,確定抗病毒有效部位。本發(fā)明采用抗病毒追蹤的方法發(fā)現(xiàn)了青苔抗病毒有效部位,抗病毒效果較好。

技術研發(fā)人員:周長征;張加澤;周祉延;牛鳳菊
受保護的技術使用者:周長征
技術研發(fā)日:2017.06.01
技術公布日:2017.08.04
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