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促生長(zhǎng)及強(qiáng)免疫的禽用中藥生物制劑及其制備方法與流程

文檔序號(hào):12780936閱讀:238來(lái)源:國(guó)知局
本發(fā)明涉及中藥
技術(shù)領(lǐng)域
,特別涉及一種促生長(zhǎng)及強(qiáng)免疫的禽用中藥生物制劑及其制備方法。
背景技術(shù)
:隨著養(yǎng)雞業(yè)規(guī)?;?、集約化的迅速發(fā)展,各種疾病也常有發(fā)生,獸藥的使用也日益頻繁。抗生素作為飼料添加劑被廣泛的應(yīng)用于動(dòng)物生產(chǎn),但同時(shí)也帶來(lái)很多問(wèn)題,例如耐藥性的產(chǎn)生,畜禽產(chǎn)品中的抗生素殘留,引起畜禽體內(nèi)正常菌群失調(diào)等負(fù)面效應(yīng)。雛雞一般為7周齡以下的雞,具有體溫調(diào)節(jié)機(jī)制不健全、消化系統(tǒng)發(fā)育不健全,抵抗力弱,敏感性強(qiáng)等的生理特點(diǎn)。抵抗能力弱使雛雞容易外邪入侵機(jī)體,從而導(dǎo)致發(fā)病。常見(jiàn)的一些細(xì)菌病如大腸桿菌病、雞白痢等,嚴(yán)重影響雛雞的生長(zhǎng)發(fā)育,給養(yǎng)禽業(yè)帶來(lái)很大的經(jīng)濟(jì)損失。為了適應(yīng)消費(fèi)者的需求,中藥養(yǎng)雞技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生。中藥不僅有預(yù)防治療疾病、提高免疫及促生長(zhǎng)發(fā)育等作用,而且相對(duì)于西藥毒副作用小、不易產(chǎn)生耐藥性、無(wú)殘留、成本低。相關(guān)研究顯示,合理開(kāi)發(fā)利用中草藥資源,用中藥逐步取代常規(guī)的抗生素、促生長(zhǎng)素和化學(xué)藥物添加劑,對(duì)降低獸藥殘留,發(fā)展綠色養(yǎng)雞業(yè)具有的生素、促生長(zhǎng)素和化學(xué)藥物添加劑,對(duì)降低獸藥殘留,發(fā)展綠色養(yǎng)雞業(yè)具有的廣闊的前景。中草藥、酶制劑與益生素在動(dòng)物生產(chǎn)方面的應(yīng)用被人們預(yù)言為取代抗生素的必然之路。如果利用一些有益的微生物通過(guò)發(fā)酵中草藥而制得集“中草藥、酶制劑、益生素”與一體的產(chǎn)品將會(huì)更有力地推動(dòng)畜牧業(yè)的發(fā)展。中藥發(fā)酵歷史悠久,早在四千多年以前,我國(guó)人民即已學(xué)會(huì)利用發(fā)酵技術(shù)來(lái)釀酒,其后又相繼用來(lái)生產(chǎn)醬、醋、豆豉等食品。20世紀(jì)80年代現(xiàn)代生物技術(shù)開(kāi)始被運(yùn)用到發(fā)酵中,從現(xiàn)代科學(xué)角度探索發(fā)酵炮制的工藝及其機(jī)制,是一種典型的生物轉(zhuǎn)化過(guò)程。現(xiàn)代中藥發(fā)酵技術(shù),又稱(chēng)中藥生物轉(zhuǎn)化技術(shù),是在繼承傳統(tǒng)中藥發(fā)酵炮制方法的基礎(chǔ)上,結(jié)合現(xiàn)代微生態(tài)學(xué)、生物工程學(xué)、發(fā)酵工程技術(shù)等學(xué)科,形成的中藥現(xiàn)代化制藥新技術(shù)。植物中草藥的細(xì)胞有細(xì)胞壁,細(xì)胞壁的主要組成成份有纖維、蛋白質(zhì)等,常規(guī)的一些提取方法難以將其破壞,細(xì)胞里面的活性成分難以溶出,從而使中草藥的有效成分提取不充分,提取率低。微生物發(fā)酵能產(chǎn)生各種酶類(lèi)物質(zhì),如纖維素酶、淀粉酶、蛋白酶等,可以破壞植物細(xì)胞壁,從而使細(xì)胞內(nèi)活性成分大量析出,提高中草藥有效成分提取率。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:為解決以上技術(shù)問(wèn)題,本發(fā)明提供的促生長(zhǎng)及強(qiáng)免疫的禽用中藥生物制劑及其制備方法,以解決利用微生物發(fā)酵提高中草藥有效成分提取率,促進(jìn)畜禽生長(zhǎng)發(fā)育,增強(qiáng)免疫力,實(shí)現(xiàn)傳統(tǒng)中藥方劑與現(xiàn)代生物技術(shù)的有機(jī)結(jié)合的問(wèn)題。本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下:一種促生長(zhǎng)及強(qiáng)免疫的禽用中藥生物制劑,關(guān)鍵在于中藥組合物經(jīng)過(guò)微生物發(fā)酵制備而成;所述中藥組合物由以下質(zhì)量份數(shù)的原料組成:蒲公英2~6份,金銀花2~5份,連翹2~5份,陳皮1~5份,厚皮1~5份,甘草1~5份。優(yōu)選的,所述原料的質(zhì)量份數(shù)為:蒲公英4份,金銀花3份,連翹3份,陳皮2份,厚樸2份,甘草3份。優(yōu)選的,所述微生物為枯草芽孢桿菌。一種促生長(zhǎng)及強(qiáng)免疫的禽用中藥生物制劑的制備方法,關(guān)鍵在于按以下步驟進(jìn)行:步驟一、制備中藥培養(yǎng)基:將蒲公英、金銀花、連翹、陳皮、厚皮和甘草分別經(jīng)過(guò)篩選、清洗、干燥后混合,得到中藥混合物,將中藥混合物粉碎成藥材細(xì)粉,將所述藥材細(xì)粉中加入蒸餾水,得到所述中藥培養(yǎng)基;步驟二、活化微生物:將微生物置于液體培養(yǎng)基中接種培養(yǎng),然后經(jīng)過(guò)兩次傳代,得到所述活化微生物;步驟三、制備種子液:將步驟二中得到的活化微生物接種于液體培養(yǎng)基中,經(jīng)過(guò)震蕩培養(yǎng)得到所述種子液;步驟四、制備中藥生物制劑:調(diào)整步驟一中得到的所述中藥培養(yǎng)基的ph值,經(jīng)過(guò)高溫滅菌后冷卻至室溫,然后接入所述種子液,接著放入搖床振蕩培養(yǎng)箱中經(jīng)過(guò)震蕩培養(yǎng)后得到所述中藥生物制劑。優(yōu)選的,所述步驟二具體為:將微生物的菌種接種到營(yíng)養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基中,在30-40℃的溫度下培養(yǎng)12-30h后,傳代兩次;經(jīng)過(guò)兩次傳代后的菌液用鉤菌環(huán)將其接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂固體培養(yǎng)基,在30-40℃的溫度下培養(yǎng)12-30h,然后挑取單個(gè)菌落于營(yíng)養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基中,在30-40℃的溫度下培養(yǎng)12-30h,得到活化微生物種。優(yōu)選的,所述步驟三具體為:將步驟二中得到的活化微生物按照0.5%-5%的量接種于營(yíng)養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基中后,放置在搖床振蕩培養(yǎng)箱中,在培養(yǎng)溫度為30-40℃,培養(yǎng)轉(zhuǎn)速為100-200r/min,培養(yǎng)時(shí)間為12-30h,得到種子液。優(yōu)選的,所述步驟四中的ph值為4.0-7.0。優(yōu)選的,所述步驟四中的高溫滅菌條件為:溫度為105℃,滅菌時(shí)間為20min。優(yōu)選的,所述步驟四中種子液的接入量為中藥培養(yǎng)基重量的0.5%-8%。優(yōu)選的,所述步驟四中的震蕩培養(yǎng)工藝條件為:溫度為25℃-45℃,轉(zhuǎn)速為120r/min-240r/min,培養(yǎng)時(shí)間為12h-84h。有益效果:與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明提供的促生長(zhǎng)及強(qiáng)免疫的禽用中藥生物制劑及其制備方法,本發(fā)明的原料含有蒲公英、金銀花、連翹、陳皮、厚樸和甘草,通過(guò)微生物發(fā)酵后使藥物有效成分的提取率升高,更容易吸收,藥效更充分;本發(fā)明為純中藥制劑,原料來(lái)源廣泛,成本低廉,并且無(wú)毒副作用,長(zhǎng)期使用不會(huì)產(chǎn)生抗藥性;傳統(tǒng)中藥劑適口性差、內(nèi)服后有效成分不易從植物細(xì)胞中游離出來(lái)被機(jī)體充分吸收,生物利用度低,而煎劑在制備過(guò)程中對(duì)中藥有效成分破壞性大,降低了藥物應(yīng)有的療效;本發(fā)明采用的微生物發(fā)酵法,反應(yīng)條件溫和,可以最大限度的保護(hù)中藥有效成分免遭破壞,同時(shí),可使某些有效成分含量增加及產(chǎn)生新的藥物成分,從而提高藥物療效、擴(kuò)大適應(yīng)癥、減少服用劑量。具體實(shí)施方式為使本領(lǐng)域技術(shù)人員更好的理解本發(fā)明的技術(shù)方案,下面結(jié)合附表和具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明作詳細(xì)說(shuō)明。實(shí)施例1一種禽用中藥生物制劑(1)禽用中藥生物制劑原料的挑選:蒲公英,別名黃花地丁、婆婆丁、華花郎等,菊科多年生草本植物。味苦、甘,寒。歸肝、胃經(jīng)。功效:清熱解毒,消腫散結(jié),利尿通淋。應(yīng)用:瘡毒,乳癰,肺癰,目赤,咽痛,濕熱黃疸,熱淋。金銀花,別名忍冬,忍冬科忍冬屬植物。味甘,寒。歸肺、心、胃經(jīng)。功效:清熱解毒,疏散風(fēng)熱。應(yīng)用:溫?zé)岚l(fā)病,風(fēng)熱感冒,肺熱咳嗽,咽喉腫痛,熱毒血痢,乳房腫痛,癰腫瘡毒。連翹,落葉灌木,香港俗稱(chēng)一串金,是木犀科連翹屬植物。味苦,微寒。歸肺、心、小腸經(jīng)。功效:清熱解毒,消腫散結(jié)。應(yīng)用:溫病發(fā)熱,瘡黃腫毒。陳皮,別名橘皮,為蕓香科植物橘及其栽培變種的成熟果皮。味苦、辛,溫。歸肺、脾經(jīng)。功效:理氣健脾,燥濕化痰。應(yīng)用:食欲減少,腹痛,肚脹,泄瀉,痰濕咳嗽。厚樸,別名紫樸、紫油樸、溫樸等,為木蘭科、木蘭屬植物。味苦、辛,溫。歸脾、胃、肺、大腸經(jīng)。功效:下氣消脹,燥濕消痰。應(yīng)用:宿食不消,食積氣滯,肚脹便秘,痰飲咳喘。甘草,別名國(guó)老、甜草、烏拉爾甘草、甜根子,豆科、甘草屬多年生草本。味甘,平。歸心、肺、脾、胃經(jīng)。功效:補(bǔ)脾益氣,祛痰止咳,和中緩急,解毒,調(diào)和諸藥,緩解藥物毒性、烈性。應(yīng)用:脾胃虛弱,倦怠無(wú)力,咳喘,咽喉腫痛,中毒,瘡瘍。(2)禽用中藥生物制劑的配制比例:將禽用中藥生物制劑中各原料分別按表1所述質(zhì)量份數(shù)進(jìn)行混合,得到不同混合比例的禽用中藥生物制劑i~iii。表1不同混合比例(質(zhì)量份數(shù))的禽用中藥生物制劑實(shí)施例2:禽用中藥生物制劑的制備方法步驟一、制備中藥培養(yǎng)基:將蒲公英2份、金銀花2份、連翹2份、陳皮1份、厚皮1份和甘草1份分別經(jīng)過(guò)篩選、清洗、干燥后混合,得到中藥混合物,將該中藥混合物粉碎成30目的藥材細(xì)粉,向藥材細(xì)粉中加入相當(dāng)于該藥材細(xì)粉10倍重量的蒸餾水,得到所述中藥培養(yǎng)基;步驟二、活化微生物:將微生物的菌種接種到營(yíng)養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基中,在30-40℃的溫度下培養(yǎng)12h后,傳代兩次;經(jīng)過(guò)兩次傳代后的菌液用鉤菌環(huán)將其接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂固體培養(yǎng)基,在30℃的溫度下培養(yǎng)12h,然后挑取單個(gè)菌落于營(yíng)養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基中,在30℃的溫度下培養(yǎng)12h,得到活化微生物種。步驟三、制備種子液:將活化微生物接種于營(yíng)養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基中,活化微生物接入量相當(dāng)于營(yíng)養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基重量0.5%,然后放置在搖床振蕩培養(yǎng)箱中,在培養(yǎng)溫度為30℃,培養(yǎng)轉(zhuǎn)速為100r/min,培養(yǎng)時(shí)間為12h,得到種子液;步驟四、制備中藥生物制劑:將步驟一中得到的所述中藥培養(yǎng)基的ph值調(diào)整到4.0,經(jīng)過(guò)105℃高溫滅菌20min后,冷卻至室溫,然后接入中藥培養(yǎng)基重量的0.5%的種子液,接著放入搖床振蕩培養(yǎng)箱中,,在培養(yǎng)溫度為25℃,培養(yǎng)轉(zhuǎn)速為120r/min,培養(yǎng)時(shí)間為12h,得到所述中藥生物制劑i。實(shí)施例3:禽用中藥生物制劑的制備方法步驟一、制備中藥培養(yǎng)基:將蒲公英6份、金銀花5份、連翹5份、陳皮5份、厚皮5份和甘草5份分別經(jīng)過(guò)篩選、清洗、干燥后混合,得到中藥混合物,將該中藥混合物粉碎成80目的藥材細(xì)粉,向藥材細(xì)粉中加入相當(dāng)于該藥材細(xì)粉5倍重量的蒸餾水,得到所述中藥培養(yǎng)基;步驟二、活化微生物:將微生物的菌種接種到營(yíng)養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基中,在40℃的溫度下培養(yǎng)30h后,傳代兩次;經(jīng)過(guò)兩次傳代后的菌液用鉤菌環(huán)將其接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂固體培養(yǎng)基,在40℃的溫度下培養(yǎng)30h,然后挑取單個(gè)菌落于營(yíng)養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基中,在40℃的溫度下培養(yǎng)30h,得到活化微生物種;步驟三、制備種子液:將活化微生物接種于營(yíng)養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基中,活化微生物接入量相當(dāng)于營(yíng)養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基重量5%,然后放置在搖床振蕩培養(yǎng)箱中,在培養(yǎng)溫度為40℃,培養(yǎng)轉(zhuǎn)速為200r/min,培養(yǎng)時(shí)間為30h,得到種子液;步驟四、制備中藥生物制劑:將步驟一中得到的所述中藥培養(yǎng)基的ph值調(diào)整到7.0,經(jīng)過(guò)105℃高溫滅菌20min后,冷卻至室溫,然后接入中藥培養(yǎng)基重量的8%的種子液,接著放入搖床振蕩培養(yǎng)箱中,,在培養(yǎng)溫度為45℃,培養(yǎng)轉(zhuǎn)速為240r/min,培養(yǎng)時(shí)間為84h,得到所述中藥生物制劑ii。實(shí)施例4:禽用中藥生物制劑的制備方法步驟一、制備中藥培養(yǎng)基:將蒲公英4份、金銀花3份、連翹3份、陳皮2份、厚皮2份和甘草3份分別經(jīng)過(guò)篩選、清洗、干燥后混合,得到中藥混合物,將該中藥混合物粉碎成40目的藥材細(xì)粉,向藥材細(xì)粉中加入相當(dāng)于該藥材細(xì)粉10倍重量的蒸餾水,得到所述中藥培養(yǎng)基;步驟二、活化微生物:將微生物的菌種接種到營(yíng)養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基中,在37℃的溫度下培養(yǎng)24h后,傳代兩次;經(jīng)過(guò)兩次傳代后的菌液用鉤菌環(huán)將其接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂固體培養(yǎng)基,在37℃的溫度下培養(yǎng)24h,然后挑取單個(gè)菌落于營(yíng)養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基中,在37℃的溫度下培養(yǎng)24h,得到活化微生物種;步驟三、制備種子液:將活化微生物接種于營(yíng)養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基中,活化微生物接入量相當(dāng)于營(yíng)養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基重量1%,然后放置在搖床振蕩培養(yǎng)箱中,在培養(yǎng)溫度為37℃,培養(yǎng)轉(zhuǎn)速為180r/min,培養(yǎng)時(shí)間為24h,得到種子液;步驟四、制備中藥生物制劑:將步驟一中得到的所述中藥培養(yǎng)基的ph值調(diào)整到5.0,經(jīng)過(guò)105℃高溫滅菌20min后,冷卻至室溫,然后接入中藥培養(yǎng)基重量的2%的種子液,接著放入搖床振蕩培養(yǎng)箱中,在培養(yǎng)溫度為35℃,培養(yǎng)轉(zhuǎn)速為210r/min,培養(yǎng)時(shí)間為24h,得到所述中藥生物制劑iii。實(shí)施例5:禽用中藥生物制劑的制備方法步驟一、制備中藥培養(yǎng)基:將蒲公英4份、金銀花3份、連翹3份、陳皮2份、厚皮2份和甘草3份分別經(jīng)過(guò)篩選、清洗、干燥后混合,得到中藥混合物,將該中藥混合物粉碎成40目的藥材細(xì)粉,向藥材細(xì)粉中加入相當(dāng)于該藥材細(xì)粉10倍重量的蒸餾水,得到所述中藥培養(yǎng)基;步驟二、活化微生物:將微生物的菌種接種到營(yíng)養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基中,在37℃的溫度下培養(yǎng)24h后,傳代兩次;經(jīng)過(guò)兩次傳代后的菌液用鉤菌環(huán)將其接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂固體培養(yǎng)基,在37℃的溫度下培養(yǎng)24h,然后挑取單個(gè)菌落于營(yíng)養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基中,在37℃的溫度下培養(yǎng)24h,得到活化微生物種;步驟三、制備種子液:將活化微生物接種于營(yíng)養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基中,活化微生物接入量相當(dāng)于營(yíng)養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基重量1%,然后放置在搖床振蕩培養(yǎng)箱中,在培養(yǎng)溫度為37℃,培養(yǎng)轉(zhuǎn)速為180r/min,培養(yǎng)時(shí)間為24h,得到種子液;步驟四、制備中藥生物制劑:將步驟一中得到的所述中藥培養(yǎng)基的ph值調(diào)整到7.0,經(jīng)過(guò)105℃高溫滅菌20min后,冷卻至室溫,然后接入中藥培養(yǎng)基重量的2%的種子液,接著放入搖床振蕩培養(yǎng)箱中,在培養(yǎng)溫度為37℃,培養(yǎng)轉(zhuǎn)速為150r/min,培養(yǎng)時(shí)間為48h,得到所述中藥生物制劑iv。二、分別對(duì)本發(fā)明制備的禽用中藥生物制劑i~iv進(jìn)行藥效測(cè)定,以禽用中藥生物制劑iii為例:(1)總黃酮含量測(cè)定a.對(duì)照品溶液的制備取蘆丁對(duì)照品9.7mg,精密稱(chēng)量,置于50ml量瓶中,加適量的甲醇溶解,再加蒸餾水至刻度,搖勻,即得對(duì)照品溶液(每1ml含蘆丁0.194mg)。b.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密量取對(duì)照品溶液0.0、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3ml,分別置10ml容量瓶中,各加蒸餾水至3ml,加5%亞硝酸鈉溶液0.4ml,混勻,放置6min;再加10%硝酸鋁溶液0.4ml,搖勻,放置6min;加4%氫氧化鈉溶液4.0ml,再加蒸餾水至刻度,搖勻,放置15min,以0.0為空白。用紫外分光光度計(jì)510nm處測(cè)定吸光度,以吸光度為縱坐標(biāo),質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),計(jì)算得回歸方程。c.平行測(cè)試3個(gè)樣品,取其算術(shù)平均值。(2)總多糖含量測(cè)定a.葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液和苯酚溶液的配制取105℃烘干至恒重的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品精密稱(chēng)取10.0mg于100ml的容量瓶中,加蒸餾水至刻度,配制成濃度為0.1mg/ml的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。稱(chēng)取苯酚40g,加鋅粉0.5g和nahc0320mg蒸餾(空氣冷凝),收集182℃的餾分。稱(chēng)取5.0g餾分于100ml的容量瓶中,加蒸餾水至刻度,配制成5%的苯酚溶液。b.葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制分別吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6ml葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液于試管中,加水至1.6ml,然后加入6%苯酚1.0ml和濃硫酸5.0ml,搖勻,以2ml蒸餾水做參比,室溫放置25min后在490nm測(cè)定吸光度值,繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線,并求出回歸方程。c.平行測(cè)試3個(gè)樣品,取其算術(shù)平均值。表2中藥生物制劑的藥效測(cè)定結(jié)果組別總黃酮mg/g總多糖mg/g中藥生物制劑iii83.1526.11中藥生物制劑iv69.03-未發(fā)酵中藥-20.76從上表中可以看到,中藥生物制劑iii中總黃酮的含量比中藥生物制劑iv中總黃酮的含量提高了20.46%,采用實(shí)施例4的發(fā)酵條件得到的中藥生物制劑iii比采用實(shí)施例5的發(fā)酵條件得到的中藥生物制劑iv,有效成分總黃酮的提取更加充分;采用苯酚-硫酸法測(cè)定中藥生物制劑iii的多糖含量比未發(fā)酵處理中藥的多糖含量提高25.77%,發(fā)酵處理使中藥組合物的多糖含量顯著提高,也使其有效成分總黃酮的提取更加充分。(3)臨床療效研究a.研究對(duì)象:取1日齡健康紅羽肉雞180只,隨機(jī)分為6組,分別為空白對(duì)照組(空白組)、菌液對(duì)照組(菌液組)、中藥生物制劑試驗(yàn)組(即未經(jīng)滅菌處理的)ⅰ、ⅱ、ⅲ組和中藥生物制劑滅菌試驗(yàn)組(ⅳ組),每組設(shè)3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10只。采用籠養(yǎng),料槽、飲水器充足,自由采食、飲水,24h光照,整個(gè)試驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)46天,分為2個(gè)階段(0~21日齡、21~46日齡)。8日齡時(shí)接種新-流二聯(lián)苗,21日齡時(shí)接種傳染性法氏囊活疫苗,采用點(diǎn)眼滴鼻的方式接種。各組處理為:空白組采用詞料中添加0.5%的蒸餾水進(jìn)行喂養(yǎng)、菌液組采用詞料中添加0.5%的菌液進(jìn)行喂養(yǎng),發(fā)酵中藥滅菌組采用詞料中添加0.5%的滅菌處理的中藥生物制劑iii進(jìn)行喂養(yǎng),中藥生物制劑試驗(yàn)組ⅰ、ⅱ、ⅲ分別采用詞料中添加i0.25%、0.5%、1.0%的中藥生物制劑ii進(jìn)行喂養(yǎng)。b.生長(zhǎng)性能指標(biāo)測(cè)定:每天記錄飼喂飼料量,剩余飼料量,灑落飼料量,并計(jì)算出每天的實(shí)際采食量。分別在1日齡、21日齡、46日齡早晨空腹進(jìn)行稱(chēng)重。計(jì)算各階段平均日采食量、平均日增重、料重比。實(shí)際采食量=飼喂飼料量-剩余飼料量-灑落飼料量平均日采食量=總實(shí)際采食量/試驗(yàn)天數(shù)平均日增重=(階段末重-階段始重)/階段天數(shù)料重比=階段實(shí)際總采食量/階段總增重表3中藥生物制劑對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能指標(biāo)影響注:不同的小寫(xiě)字母表示差異顯著(0.01<p<0.05),不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著(p<0.01)從上表結(jié)果顯示,在0~21日齡階段各試驗(yàn)組的肉雞總采食量、平均日采食量、平均日增重與空白組比較,差異極顯著(p<0.01),試驗(yàn)組的料重比均低于空白組,差異極顯著(p<0.01);試驗(yàn)ⅱ組的肉雛雞的平均日增重和料重與其它試驗(yàn)組比較差異極顯著(p<0.01),其平均日增重與空白組比較增加27.3%,料重比與空白組比較降低12.1%。試驗(yàn)ⅱ組、ⅲ組的總采食量、平均日采食量與菌液組比較,差異極顯著(p<0.01)。試驗(yàn)ⅱ組的平均日增重、料重比與菌液組比較,差異極顯著(p<0.01)。在21~46日齡階段,試驗(yàn)各組除ⅰ組外,其它試驗(yàn)組肉雞的總采食量和平均日采食量與空白組比較,差異極顯著(p<0.01)。各試驗(yàn)組肉雞的平均日增重與空白組比較,差異極顯著(p<0.01);試驗(yàn)ⅰ組肉雞的平均日增重與空白組比較增加8.7%,試驗(yàn)ⅱ組增加7.0%,試驗(yàn)ⅲ組增加5.7%,試驗(yàn)ⅳ組增加19.8%。各試驗(yàn)組的料重比與空白組比較,差異顯著(0.01<p<0.05),其中試驗(yàn)ⅱ組的料重比最小,比空白組降低18.2%。試驗(yàn)ⅰ、ⅱ、ⅲ組的總采食量、平均日采食量、平均日增重與菌液組比較,差異極顯著(p<0.01)。試驗(yàn)ⅰ、ⅱ、ⅲ組的總采食量、平均日采食量、平均日增重均低于菌液組。試驗(yàn)ⅱ、ⅲ組的料重比與菌液組比較,差異顯著(0.01<p<0.05),且都低于菌液組。c.免疫臟器指數(shù):將46日齡雞采血后致死,取脾臟、法氏囊稱(chēng)重,計(jì)算免疫臟器指數(shù)。免疫器官指數(shù)=免疫器官重量(g)/宰前空腹活重(100g)表4中藥生物制劑對(duì)肉雞免疫臟器指數(shù)的影響組別脾臟指數(shù)法氏囊指數(shù)ⅰ組0.157±0.032ab0.145±0.036ⅱ組0.162±0.024a0.125±0.018ⅲ組0.115±0.026b0.136±0.019ⅳ組0.166±0.031a0.157±0.058菌液組0.127±0.028ab0.167±0.085空白組0.117±0.051b0.129±0.018注:不同的小寫(xiě)字母表示差異顯著(0.01<p<0.05)從上表結(jié)果顯示,試驗(yàn)ⅱ組和ⅳ組肉雞的脾臟指數(shù)與空白組比較,差異顯著(0.01<p<0.05),與菌液組比較,差異不顯著(p>0.05);但除ⅲ組外,其它試驗(yàn)組肉雞的脾臟指數(shù)都高于空白組。試驗(yàn)ⅰ、ⅱ、ⅳ組的脾臟指數(shù)均高于菌液組。各試驗(yàn)組肉雞的法氏囊指數(shù)與空白組和菌液組比較,差異都不顯著(p>0.05),其中除試驗(yàn)ⅱ組外,其它試驗(yàn)組肉雞的法氏囊指數(shù)都高于空白組,各試驗(yàn)組的法氏囊指數(shù)都低于菌液組。綜合上述結(jié)果可以得到中藥生物制劑iii對(duì)肉雞的免疫器官發(fā)育都有一定的促進(jìn)作用。最后需要說(shuō)明,上述描述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例,本領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明的啟示下,在不違背本發(fā)明宗旨及權(quán)利要求的前提下,可以做出多種類(lèi)似的表示,這樣的變換均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁(yè)12
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