本發(fā)明涉及一種降血糖口服液及其制備方法,屬于保健食品技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù):
近年來,我國糖尿病患病率逐漸上升,目前治療糖尿病主要靠口服降糖藥和胰島素。但西藥常出現(xiàn)低血糖癥和胃腸道不適等不良反應;而中藥治療具有療效穩(wěn)定、副作用小、多靶點同時作用的特點,適宜糖尿病及其并發(fā)癥的治療。
青錢柳〔cyclocaryapaliurus(bata1)iljinsk〕系胡桃科青錢柳屬落葉喬木,江西民間長期以來,采用其嫩葉制茶飲用,該茶具有生津止渴、清熱解暑、降血糖、降血脂、降血壓和延年益壽等作用,青錢柳中的黃酮類、多糖及微量元素具有較好的降血糖作用。目前青錢柳降血糖產(chǎn)品主要有青錢柳袋泡茶、口含片等固體制劑,其為青錢柳葉直接泡茶或青錢柳粗提物制劑,存在有效成分在體內(nèi)吸收率低、吸收時間長、服用不方便等缺點。
技術(shù)實現(xiàn)要素:
針對上述現(xiàn)有技術(shù)存在的問題,本發(fā)明提供一種降血糖口服液及其制備方法,提高青錢柳葉降血糖生物利用度,起到多藥協(xié)同降血糖的作用,從而提高整個制劑的降糖效果。
為了實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用的一種降血糖口服液,包含下列重量比的原料:青錢柳多糖15~30%,青錢柳黃酮提取物2~4%,黃蜀葵花提取物15~40%,ztc1+1天然澄清劑4~6%,苯甲酸鈉0.4~0.6%,甜蜜素0.1~0.2%,甘油0.8~1.5%,其余為水,原料總和為100%。
作為改進,各原料比例按照10ml口服液中含有青錢柳多糖1.54g,青錢柳黃酮提取物0.235g,黃蜀葵花提取物1.9g,ztc1+1天然澄清劑0.6ml,苯甲酸鈉0.04g,甜蜜素0.02g,甘油0.15ml,余量為水。
另外,本發(fā)明還提供了一種降血糖口服液的制備方法,將青錢柳多糖、青錢柳黃酮提取物、黃蜀葵花提取物、ztc1+1天然澄清劑、苯甲酸鈉、甜蜜素、甘油和水混合,經(jīng)200目篩網(wǎng)過濾,灌裝、封蓋后,采用100~120℃殺菌10~30min,冷卻到室溫,貼標、外包裝得產(chǎn)品。
作為改進,所述青錢柳黃酮提取物和青錢柳多糖分別通過以下步驟制得:
1)取青錢柳干燥葉粉碎,加水煎煮三遍,合并濾液,過濾、濃縮,冷卻后加無水乙醇至含醇量達65%,放置24小時,過濾,濾液與沉淀分別備用;
2)大孔吸附樹脂預處理后,將步驟1)得到的濾液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮后上大孔吸附樹脂柱,吸附5小時后,分別用水、60%乙醇、85%乙醇、95%乙醇沖大孔樹脂,收集洗脫液,薄層色譜點板后合并,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮,回收乙醇后干燥,即得青錢柳黃酮提取物;
3)將步驟1)得到的沉淀用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮,回收乙醇,向濃縮液中加入其體積1/5的氯仿和1/5的正丁醇,振搖30min,震蕩后的混合液在2000r/min的轉(zhuǎn)速下離心10min,取出上清液,重復以上步驟5次,去除有機溶劑部分和蛋白質(zhì)部分,得精制青錢柳多糖。
作為改進,所述黃蜀葵花提取物采用以下步驟制得:黃蜀葵花粉碎,加乙醇煎煮三遍,合并濾液,過濾后濃縮即得黃蜀葵花提取物。
作為改進,所述ztc1+1天然澄清劑采用以下步驟制得:a組分和b組分分別配置成1%粘膠液,先加b后加a,靜置6-12小時即得。
與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明將青錢柳葉降血糖有效部位提取物配伍降血糖藥用植物黃蜀葵花提取物制備成降糖口服液,既提高了青錢柳葉降血糖生物利用度,又起到多藥協(xié)同降血糖的作用,從而提高了整個制劑的降糖效果。
附圖說明
圖1為本發(fā)明中青錢柳黃酮提取物、青錢柳多糖的提取工藝流程圖;
圖2為本發(fā)明繪制的葡萄糖標準曲線;
圖3為空白對照組的胰腺組織細胞圖;
圖4為口服液(青錢柳多糖+青錢柳黃酮+黃蜀葵花提取物)中劑量(100×)后的胰腺組織細胞圖;
圖5為模型組(100×)的胰腺組織細胞圖;
圖6為消渴丸組(100×)的胰腺組織細胞圖。
具體實施方式
為使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚明了,下面通過附圖及實施例,對本發(fā)明進行進一步詳細說明。但是應該理解,此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發(fā)明,并不用于限制本發(fā)明的范圍。
除非另有定義,本文所使用的所有的技術(shù)術(shù)語和科學術(shù)語與屬于本發(fā)明的技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員通常理解的含義相同,本文中在本發(fā)明的說明書中所使用的術(shù)語只是為了描述具體的實施例的目的,不是旨在于限制本發(fā)明。
實施例一
1.青錢柳黃酮提取物、青錢柳多糖和黃蜀葵花提取物的提取分離。
1.1原料與試劑
青錢柳葉:2013年6月采自江西修水;
黃蜀葵花:2013年6月采自安徽無為;
蘆丁標準品;葡萄糖;苯酚;濃硫酸;
無水乙醇:無錫市蘇強化工有限公司;
氫氧化鈉:天津市科密歐化學試劑有限公司;
鹽酸;氯仿;正丁醇;甲醇;
1.2儀器與設(shè)備
粉碎機(rhp-400a型):浙江永康市榮浩工貿(mào)有限公司;
d101大孔吸附樹脂:杭州普修生物科技有限公司;
旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(n1100):上海愛朗儀器有限公司;
數(shù)顯控溫水浴鍋:上海波洛實驗設(shè)備有限公司;
數(shù)顯鼓風干燥箱(gzx-9246):上海博遠實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠;
科生牌醫(yī)用超聲波清洗機(ks-600d):寧波海曙科生超聲設(shè)備有限公司;
大容量離心機(xyj-a2):金壇市城東新瑞儀器廠;
電子天平(acs-30):永康市友升衡器有限公司制造;電磁爐;
tu-1900雙光束紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限公司);
uv-2000型紫外可見分光光度計(尤尼科上海儀器有限公司);
搖床;加濕器;具塞試管;容量瓶;
1.3青錢柳黃酮提取物、青錢柳多糖的提取,其工藝如圖1所示:
1.3.1水提醇沉法
步驟:青錢柳葉粉碎→加水煎煮三遍,合并濾液→過濾→濃縮,冷卻→加無水乙醇至含醇量達65%→放置24小時,過濾,濾液與沉淀分別備用。
1.3.2大孔樹脂吸附法精制黃酮
大孔吸附樹脂預處理后,將上步實驗得到的濾液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮后上大孔吸附樹脂柱,吸附五個小時后,分別用水、60%乙醇、85%乙醇、95%乙醇沖大孔樹脂,收集洗脫液,薄層色譜點板后合并,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮,回收乙醇后,得干燥的總黃酮部位。
1.3.3黃酮含量的測定:紫外分光光度法
(1)步驟:
①蘆丁標準溶液:稱取在120℃干燥至恒重的蘆丁對照品5.5mg于50ml容量瓶中,用70%乙醇溶解定容至刻度,搖勻,作為對照品溶液(每1ml含蘆丁0.11mg)。
②同法配置青錢柳總黃酮液:稱取干燥后的總黃酮5.5mg于50ml容量瓶中,定容,搖勻(每1ml含總黃酮0.11mg)。
③分別取青錢柳總黃酮液、蘆丁對照品溶液各1ml于10ml具塞試管中,乙醇定容,搖勻,10min后用雙光束紫外分光光度計在200~450nm波長范圍內(nèi)進行掃描,乙醇作空白液。
(2)結(jié)果:得到的青錢柳葉總黃酮中黃酮的含量為75%。
1.3.4sevage法精制多糖
(1)步驟:
①將上步實驗得到的沉淀用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮,回收乙醇;
②向濃縮液中加入其體積1/5的氯仿和1/5的正丁醇,振搖30min,震蕩后的混合液在2000r/min的轉(zhuǎn)速下離心10min;取出上清液,重復以上步驟5次;
③去除有機溶劑部分和蛋白質(zhì)部分,得精制青錢柳多糖。
(2)現(xiàn)象及結(jié)論
①有凝膠狀物生成,水層和溶劑層交界處的是變性蛋白質(zhì)。
②除去有機溶劑部分和蛋白質(zhì)部分,即可得到脫蛋白的多糖溶液。
1.3.5多糖含量的測定:硫酸-苯酚法
(1)步驟:
①葡萄糖標準曲線的繪制:取葡萄糖100g干燥至恒重,精確稱取209.2mg,置200ml容量瓶中,加水溶解并稀釋至刻度,得濃度為1.046mg/ml的標準溶液,吸取葡萄糖標準溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8ml,分別置100ml容量瓶中,加水定容,各吸取2ml,分別置于比色管中,加5%苯酚液1ml,搖勻,迅速滴加濃硫酸5ml,搖勻,于沸水浴中加熱20min,迅速冷卻至室溫,另以蒸餾水2ml,同上操作加苯酚和硫酸進行顯色反應,作空白對照,測定吸光度,繪制標準曲線,計算回歸方程。
②青錢柳多糖溶液的配置:稱取干燥后的多糖5.0mg于50ml容量瓶中,定容,搖勻(每1ml含粗多糖0.1mg)。
③多糖含量的測定:
取青錢柳多糖液0.5ml→加入1.5ml蒸餾水→取5%的苯酚1ml→濃硫酸5ml→搖勻,100℃沸水浴中20min→室溫自然冷卻→在波長488nm處測od。
④葡萄糖標準曲線:以葡萄糖標準品濃度為橫坐標,吸光度為縱坐標,作標準曲線(如圖2),求回歸方程,標準曲線的回歸方程為y=5.4407c+0.0253(其中y為吸光度值,c為葡萄糖濃度),r^2=0.9990。
(2)結(jié)果:青錢柳葉中總多糖中多糖的含量約為27%。
1.3.6結(jié)果與討論
通過水提醇沉法,大孔樹脂吸附法精制和sevage法得到青錢柳總黃酮和粗多糖。紫外分光光度法和硫酸-苯酚法分別測得青錢柳葉總黃酮中黃酮的含量為75%,總多糖中多糖的含量27%。
1.4黃蜀葵花提取物的提取分離
步驟:黃蜀葵花粉碎→加乙醇煎煮三遍,合并濾液→過濾→濃縮備用。
實施例二
1.青錢柳降血糖口服液的制備
1.1原料與試劑
青錢柳提取液:黃酮液,多糖液,黃蜀葵花提取液;
澄清劑:101果汁澄清劑(滑石粉),ztc1+1天然澄清劑,明膠-單寧酸;
防腐劑:苯甲酸鈉;矯味劑:甜蜜素;增溶劑:甘油;
冰乙酸:天津市福晨化學試劑廠;丙三醇:天津市福晨化學試劑廠;
蘆丁標準品;葡萄糖;苯酚;濃硫酸;無水乙醇;無水甲醇;
1.2儀器與設(shè)備
大容量離心機(xyj-a2):金壇市城東新瑞儀器廠;
數(shù)顯鼓風干燥箱(gzx-9246):上海博遠實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠;
數(shù)顯控溫水浴鍋(上海波洛實驗設(shè)備有限公司);
微量移液器(10-1000μl)(浙江華威科學儀器有限公司);
電子分析天平(fa2004):上海越平科學儀器有限公司;
tu-1900雙光束紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限公司);
uv-2000型紫外可見分光光度計(尤尼科上海儀器有限公司);
搖床;加濕器;具塞試管;
1.3本發(fā)明所述技術(shù)方案的各種參數(shù)以下列實驗數(shù)據(jù)和分析為依據(jù):
1.3.1附加劑篩選預實驗
(1)澄清劑的配置及步驟:
①101果汁澄清劑:濃度5%,用量為藥液的9%,加入0.5%的滑石粉。
②ztc1+1天然澄清劑:a組分和b組分分別配置成1%粘膠液,用量5%,先加b后加a,靜置6-12小時。
③明膠-單寧酸:用量為2%,最佳溫度50℃,靜置40min以上。
(2)實驗結(jié)果:
經(jīng)實驗比較發(fā)現(xiàn),添加了ztc1+1天然澄清劑的藥液澄清度最好,故我們選用ztc1+1天然澄清劑作為澄清劑。常用的防腐劑有苯甲酸鈉和山梨酸鈉,我們通過抑菌實驗發(fā)現(xiàn)苯甲酸鈉的防腐效果更好。適合糖尿病患者的矯味劑有甜蜜素和甜菊苷,我們通過口服品嘗等方法,發(fā)現(xiàn)甜蜜素更適合。常用的增溶劑如司盤、吐溫等均有異味,不適合口服制劑增溶,口服液中加入適量醫(yī)用甘油增溶,可提高澄明度,且甘油味甜、無異味、無刺激性。
1.3.2口服液的制備工藝考察
口服液的質(zhì)量及穩(wěn)定性與其配方中的澄清劑、防腐劑、矯味劑、增溶劑密切相關(guān)。因此通過正交試驗分別考察澄清劑、防腐劑、矯味劑、增溶劑對口服液的主要有效成分含量的影響,確定最佳制備工藝。
正交實驗設(shè)計:在預試驗的基礎(chǔ)上,確定各因素水平值,以有效成分的含量為考察指標,進行正交試驗設(shè)計,實驗因素水平見表1。
表1口服液的制備工藝因素水平表
1.3.3口服液含量測定
1.3.3.1黃酮含量的測定:紫外分光光度法
①蘆丁標準溶液:稱取在120℃干燥至恒重的蘆丁對照品5.5mg于50ml容量瓶中,用70%乙醇溶解定容至刻度,搖勻,作為對照品溶液(每1ml含蘆丁0.11mg)。
②分別取青錢柳黃蜀葵口服液、蘆丁對照品溶液各1ml于10ml具塞試管中,甲醇定容,搖勻,10min后用雙光束紫外分光光度計在200~450nm波長范圍內(nèi)進行掃描,甲醇作空白液。
1.3.3.2多糖含量的測定:硫酸-苯酚法
①葡萄糖標準曲線的繪制:取葡萄糖100g干燥至恒重,精確稱取209.2mg,置200ml容量瓶中,加水溶解并稀釋至刻度,得濃度為1.046mg/ml的標準溶液,吸取葡萄糖標準溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8ml,分別置100ml容量瓶中,加水定容,各吸取2ml,分別置于比色管中,加5%苯酚液1ml,搖勻,迅速滴加濃硫酸5ml,搖勻,于沸水浴中加熱20min,迅速冷卻至室溫,另以蒸餾水2ml,同上操作加苯酚和硫酸進行顯色反應,作空白對照,測定吸光度,繪制標準曲線,計算回歸方程。
②多糖含量的測定:
取口服液1ml→定容,稀釋100倍→取稀釋液0.5ml→加入1.5ml蒸餾水→取5%的苯酚1ml→濃硫酸5ml→搖勻,100℃沸水浴中20min→室溫自然冷卻→在波長488nm處測od。
1.3.4正交實驗與結(jié)果
以口服液中黃酮和多糖的含量為考察指標,選擇l9(34)正交表進行實驗(見表2、表3)。
表2口服液制備l9(34)正交試驗結(jié)果
表3口服液制備方差分析結(jié)果
注:f0.01(2,2)=99;f0.05(2,2)=19。
由上述實驗結(jié)果記錄表2、表3可知,在對正交實驗結(jié)果的極差分析中,rj越大,對實驗結(jié)果影響越大。通過對該試驗的極差分析可知:rd>rb>ra>rc即增溶劑>防腐劑>澄清劑>矯味劑。比較各因子不同水平的平均指標,對應k值大者所對應的水平為好,因素d的k值最大的是k3,因素b的k值最大的是k2,因素a的k值最大的是k1,因素c的k值最大的是k1即可以確定口服液制備的最佳工藝為:a1b2c1d3,即可以選擇澄清劑為0.6ml,防腐劑為0.04g,矯味劑為0.02g,增溶劑0.15ml,青錢柳黃酮0.235g,青錢柳多糖1.54g,黃蜀葵花提取物1.9g,為最佳制備工藝條件。
1.3.5穩(wěn)定性試驗
以上九組實驗中每組設(shè)置三個平行對照組,分別置于常溫、高溫、高濕的環(huán)境下,考察其穩(wěn)定性。
①高溫試驗方法
按上述方法制備的九組口服液置于80℃的干燥箱中觀察,30天后測其含藥量。
②高濕試驗方法
配置飽和的硝酸鉀溶液于高濕器中觀察,30天后測其含藥量。
③長期穩(wěn)定性試驗方法
按上述方法制備的九組口服液置于常溫下觀察,30天后測其含藥量。
④含量測定:照1.3.3項下的方法進行。
表4實驗后各組別中的含藥量(常溫)
表5實驗后各組別中的含藥量(高溫)
表6實驗后各組別中的含藥量(高濕)
分析上述各表格可知:
①三種澄清劑中,aztc1+1天然澄清劑的澄清效果最好。
②通過紫外分光光度法測黃酮含量和硫酸-苯酚法測多糖含量發(fā)現(xiàn),第二、三、六、八組的藥物含量略優(yōu)于其他組。
③通過三組平行對照實驗發(fā)現(xiàn),常溫下的口服液較高溫高濕下的更穩(wěn)定。
④在第二、三、六、八組中,第八組底部沉淀最少,其穩(wěn)定性效果最好。故從穩(wěn)定性效果看,可選用第八組作為青錢柳黃蜀葵降血糖口服液的最佳配方。第八組的ztc1+1天然澄清劑的劑量是0.8ml/10ml,甘油的劑量是0.25ml/10ml,苯甲酸鈉的劑量是0.04g/10ml,甜蜜素的劑量是0.025g/10ml。
實施例三
本發(fā)明口服液降血糖作用研究。
1.1試驗樣品
青錢柳葉(產(chǎn)地江西修水縣)
黃蜀葵花
1.2實驗儀器
auw-220d型電子天平(日本島津公司)
ks-600d醫(yī)用超聲波清洗機(寧波海曙科生超聲設(shè)備有限公司)
n-1100旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海愛朗儀器有限公司)
包埋機;顯微鏡(德國bresser)
rm-2235型生物組織切片機(德國leica)
1.3試劑
四氧嘧啶(sigma公司);消渴丸(廣州中一藥業(yè)有限公司);
血糖試劑盒(四川省邁克科技有限責任公司);甲醛;生理鹽水;
1.4實驗動物
健康sd小鼠(清潔級),雌雄各半,體重(20g-30g)。
1.5小鼠降血糖實驗
1.5.1糖尿病小鼠模型的建立及分組
取小鼠120只,雌雄各半,隨機選取10只作為空白對照組(nc),剩余小鼠喂食高糖高脂的飼料一周,再尾部靜脈注射新鮮配置的四氧嘧啶溶液65mg/kg,第三天后用血糖試劑盒對禁食12h的小鼠測其空腹血糖,選取血糖高于11mmol/l的小鼠作為實驗對象,隨機選取合格小鼠分成11組,設(shè)糖尿病模型組(dmc),消渴丸對照組(xkp),青錢柳多糖高劑量組(cpph),青錢柳多糖中劑量組(cppm),青錢柳多糖低劑量組(cppl),青錢柳黃酮高劑量組(cpfh),青錢柳黃酮中劑量組(cpfm),青錢柳黃酮低劑量組(cpfl),口服液(青錢柳多糖+青錢柳黃酮+黃蜀葵花提取物)高劑量組(pfhh),口服液(青錢柳多糖+青錢柳黃酮+黃蜀葵花提取物)中劑量組(pfhm),口服液(青錢柳多糖+青錢柳黃酮+黃蜀葵花提取物)低劑量組(pfhl)。
1.5.2降血糖實驗
空白對照組和模型組灌胃等體積的生理鹽水,消渴丸組灌胃消渴丸40mg/kg,粗多糖高中低分別給予50mg/kg.d,25mg/kg.d,12.5mg/kg.d??傸S酮高中低分別給予9mg/kg.d,4.5mg/kg.d,2.25mg/kg.d。黃蜀葵花提取物高中低分別給予80mg/kg.d,40mg/kg.d,20mg/kg.d??诜?青錢柳多糖+青錢柳黃酮+黃蜀葵花提取物)高中低劑量灌胃。連續(xù)灌胃6周,分別于第2周、第4周、第6周測空腹血糖值。
1.5.3統(tǒng)計方法
各項指標以
1.5.4小鼠胰腺細胞形態(tài)觀察
將取血后的小鼠脫頸處死,解剖取胰腺組織浸泡在4%的甲醛溶液中48小時,再用多梯度的乙醇脫水,浸蠟,包埋,切片,染色,封片,顯微鏡下觀察胰腺組織細胞形態(tài),拍照,記錄。
1.6口服液降血糖作用分析
1.6.1口服液(青錢柳多糖+青錢柳黃酮+黃蜀葵花提取物)對小鼠血糖的影響
表7青錢柳有效部位對小鼠血糖影響
注:*表示p<0.05與模型組有顯著性差異;**表示p<0.01有較大顯著差異;括號內(nèi)表示小鼠量。
從表7可以看出空白組小鼠灌胃后血糖無顯著變化,模型組與空白對照組血糖有顯著差異(p<0.01),說明模型建立成功,青錢柳多糖高中低組與模型組血糖有顯著差異(p<0.05),青錢柳黃酮高中低組與模型組血糖有顯著差異(p<0.01),口服液(青錢柳多糖+青錢柳黃酮+黃蜀葵花提取物)高中低組與模型組血糖有顯著性差異(p<0.01),消渴丸組與模型組血糖有顯著差異(p<0.01);但可看出消渴丸組,多糖高劑量組,黃酮高劑量組,口服液(青錢柳多糖+青錢柳黃酮+黃蜀葵花提取物)高劑量組小鼠死亡率較高。
1.6.2胰腺組織細胞的觀察
在顯微鏡下:圖3正常對照組胰島為橢圓形的細胞團,細胞核大小均勻,分散于胰腺腺泡之間,胰島中細胞數(shù)量較多,細胞分布均勻,排列規(guī)整,結(jié)構(gòu)清晰,胞漿豐富,核圓居中;圖5為模型組胰島中細胞數(shù)量明顯減少,細胞排列紊亂,結(jié)構(gòu)破壞,胰島輪廓消失,邊界模糊不清;圖6消渴丸組的胰島結(jié)構(gòu)較清晰,邊緣較整齊,但胰島細胞分布稀疏,數(shù)量較少,密度較低;圖4口服液(青錢柳多糖+青錢柳黃酮+黃蜀葵花提取物)中劑量組胰島細胞數(shù)量較多,胰島結(jié)構(gòu)完整,胰島細胞排列較整齊,核圓、胞漿豐富。
目前,治療糖尿病主要依靠口服降糖藥和注射胰島素。其中,西藥雖然顯效快,作用直接,但常出現(xiàn)低血糖癥和胃腸道不適等不良反應。而中藥治療具有療效穩(wěn)定,副作用小,多靶點同時作用的特點,適宜糖尿病及其并發(fā)癥的治療。目前對于有效活性部位的研究普遍采用動物模型建立和細胞水平模型來進行篩選。
本發(fā)明是通過四氧嘧啶選擇性地破壞胰島β細胞致使β細胞分泌胰島素的功能發(fā)生障礙,誘發(fā)小鼠高血糖,為胰島素低下型高血糖動物模型,小鼠灌胃青錢柳高中低劑量多糖和黃酮六周后,血糖均出現(xiàn)明顯下降,表明了青錢柳多糖和黃酮均具有降血糖的功效,是青錢柳的降血糖有效活性部分,但當灌胃高劑量的多糖和黃酮時小鼠死亡率較大,可能由于高劑量的多糖和黃酮具有弱毒性作用,而由實施例可知口服液(青錢柳多糖+青錢柳黃酮+黃蜀葵花提取物)中劑量灌胃降血糖作用最明顯,且小鼠死亡率較低;從胰島細胞形態(tài)分析,多糖和黃酮中劑量的胰島細胞正常,說明青錢柳多糖和黃酮及黃蜀葵花提取物的聯(lián)合應用能明顯減輕和修復四氧嘧啶對小鼠胰島細胞的損傷,有改善胰島細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的作用。
以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例而已,并不用以限制本發(fā)明,凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換或改進等,均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。