本發(fā)明涉及中藥劑型設(shè)計(jì)領(lǐng)域，具體地說(shuō)是一種供霧化用復(fù)方桔梗牡丹皮吸入制劑的制備方法。
背景技術(shù)：
近年來(lái)，隨著城市化節(jié)奏的加快，環(huán)境污染問(wèn)題，尤其是空氣污染問(wèn)題越來(lái)越嚴(yán)峻。有報(bào)道表明，空氣污染物主要有：氮氧化物、碳?xì)浠衔铩⒘蜓趸铩㈩w粒物(PM)、致病菌等。如何預(yù)防空氣污染對(duì)機(jī)體最大的氣體交換器官肺臟及相關(guān)生理結(jié)構(gòu)的損害，已經(jīng)成為一個(gè)亟待解決的問(wèn)題。桔梗Platycodon grandifloram(Jacq.)A.DC.作為常用治療肺病用中藥，為多年生草本植物，南北皆適于種植，主產(chǎn)于安徽、河南、山東、遼寧、吉林等省份，人工種植量大，野生資源也很豐富。桔梗性味苦、辛、平，歸肺經(jīng)，具有宣肺，利咽，祛痰，排膿之功效，用于咳嗽痰多、胸悶不暢、咽痛、音啞、肺癰吐膿等癥。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明桔梗有廣泛的藥理作用，包括鎮(zhèn)咳祛痰、解熱鎮(zhèn)痛、免疫調(diào)節(jié)、抗炎等。桔梗中含有大量的三萜皂苷類成分，如桔梗皂苷A、C、D、遠(yuǎn)志皂苷Dl、D2等，其中桔梗皂苷D是主要皂苷，是桔梗主要的有效成分，具有顯著的鎮(zhèn)咳祛痰、抗腫瘤、抗氧化及免疫增強(qiáng)作用，對(duì)呼吸系統(tǒng)疾病有顯著的療效與預(yù)防作用。
丹皮酚為毛茛科芍藥屬植物牡丹(Paeonia suffruticosa Andr.)的特征性成分。其具有清熱涼血、活血化瘀的功效。牡丹皮是在中醫(yī)臨床應(yīng)用中比較廣泛的一種中藥，常用于溫毒發(fā)斑，吐血衄血，夜熱早涼，無(wú)汗骨蒸，癰腫瘡毒，跌撲損傷等癥?，F(xiàn)代研究表明牡丹皮提取物丹皮酚具有抗病原微生物、抗心肌缺血、抗炎、保肝、降血糖、對(duì)心肌動(dòng)作電位調(diào)節(jié)、調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞等作用。其抗病原微生物的作用對(duì)金黃色葡萄球菌菌、肺炎克雷伯桿菌、綠膿桿菌、甲型鏈球菌、大腸桿菌、白色念珠菌等均有抑制作用，同時(shí)也能非特異性免疫中中性白細(xì)胞對(duì)細(xì)菌的清除作用。丹皮酚與桔梗的聯(lián)合使用，可起到對(duì)呼吸道與肺臟一定的保護(hù)作用。但口服桔梗提取物或丹皮酚，易造成惡心、嘔吐等胃腸道不良反應(yīng)，因此如何在保留桔梗與丹皮酚原有功效的基礎(chǔ)上，克服這一缺陷，值得深入研究。
吸入療法已經(jīng)成為治療呼吸系統(tǒng)疾病的常用治療方法，主要包括壓力定量吸入、干粉吸入和霧化吸入給藥等。與其他給藥方法相比，具有劑量可靈活調(diào)節(jié)、應(yīng)用方便等特點(diǎn)。由于霧化吸入給藥的明顯優(yōu)勢(shì)，近幾年來(lái)其臨床應(yīng)用藥物種類、治療疾病類型等有了進(jìn)一步的發(fā)展。肺部具有巨大的肺泡表面積、肺泡細(xì)胞膜較薄、豐富的毛細(xì)血管網(wǎng)、狹小的氣血通路、低酶活性、肺深處較慢的清除速率等生理解剖特點(diǎn)。與傳統(tǒng)的給藥方式相比，它提高了局部藥物濃度，免去全身用藥時(shí)先使血藥濃度達(dá)到一定值后，才能對(duì)局部感染或其他疾病發(fā)揮作用的缺點(diǎn)。因而可以減少毒副作用，特別是免去藥物的胃腸道不良反應(yīng)。綜合上述，發(fā)明一種桔梗牡丹皮供霧化液體制劑對(duì)桔梗和丹皮酚的應(yīng)用具有實(shí)際意義。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明旨在提供一種供霧化用復(fù)方桔梗牡丹皮吸入制劑的制備方法，所要解決的技術(shù)問(wèn)題是在保證丹皮酚與桔梗協(xié)同作用的基礎(chǔ)上克服其帶來(lái)的胃腸道不良反應(yīng)。
本發(fā)明得到的供霧化用復(fù)方桔梗牡丹皮吸入制劑，每毫升中總皂苷含量不少于2mg，桔梗皂苷D含量不少于0.1mg，丹皮酚含量不少于0.2mg。
本發(fā)明供霧化用復(fù)方桔梗牡丹皮吸入制劑的制備方法，包括如下步驟：
1、取注射用水，加入助溶劑，攪拌混合均勻，即得溶劑；溶劑中助溶劑與注射用水的體積比為1：99至15：85；
2、向步驟1獲得的溶劑中加入桔梗提取物3-100g、丹皮酚提取物0.1-10g、矯味劑0.01-0.5g和抗氧化劑0.01-0.5g，定容至1000-10000mL，攪拌均勻，調(diào)pH至4.0，即為初溶液；
3、將所得初溶液依次經(jīng)粗濾、精濾，獲得終溶液；
4、將所得終溶液灌注至安瓿瓶中，封裝，滅菌，檢漏，包裝，得到成品。
步驟1中，所述助溶劑為乙醇、丙二醇、PEG300、甘油中的一種或幾種的混合物。
步驟2中，桔梗提取物為藥用植物桔梗經(jīng)加工后質(zhì)量穩(wěn)定可靠的提取物成品，其桔?？傇碥蘸坎坏陀?0％，桔梗皂苷D含量不低于1％；
步驟2中，丹皮酚提取物為藥用植物牡丹經(jīng)加工后質(zhì)量穩(wěn)定可靠的丹皮酚成品，其丹皮酚含量不低于90％；
步驟2中，所述矯味劑為薄荷油、桂皮油、檸檬油、陳皮油及其芳香水劑中的一種或幾種的混合物。
步驟2中，所述抗氧化劑為維生素C、亞硫酸鈉、乙二胺四乙酸中的一種或幾種的混合物。
步驟3中，粗濾采用濾布高置靜壓過(guò)濾，濾布目數(shù)為50-200目；精濾采用濾膜減壓或加壓過(guò)濾，濾孔直徑為0.01-0.45微米。
步驟4中，滅菌采用高壓滅菌鍋，121℃、104KPa下滅菌15分鐘。
步驟4中，安瓿瓶容量可為1ml-25ml。
本發(fā)明的有益效果體現(xiàn)在：
本發(fā)明制備供霧化用復(fù)方桔梗牡丹皮吸入制劑充分考慮到口服桔梗提取物與丹皮酚易產(chǎn)生胃腸道不良反應(yīng)等不足之處，采用了先進(jìn)的制劑工藝，由口服給藥變?yōu)槲虢o藥，使藥物能直接到達(dá)作用部位氣管、支氣管、肺部組織等，減輕了副作用；同時(shí)桔梗提取物鎮(zhèn)咳祛痰與丹皮酚的抗菌消炎協(xié)同作用，能有效減輕空氣污染物對(duì)呼吸道與呼吸器官的損傷；除此之外，霧化吸入方法方便快捷，省去了傳統(tǒng)中藥先煎煮再使用的缺陷；從工藝生產(chǎn)角度來(lái)看，本方法技術(shù)路線成熟，步驟簡(jiǎn)單重復(fù)性好，可控性高，產(chǎn)品穩(wěn)定性好。
具體實(shí)施方式
下面將對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整的描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅是本發(fā)明的一部分實(shí)施例，而不是全部實(shí)施例，本領(lǐng)域技術(shù)人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)成果前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
實(shí)施例1：
本實(shí)施例中供霧化用復(fù)方桔梗牡丹皮吸入制劑的制備方法如下：
1、取1,2-丙二醇100g，加入900g注射用水?dāng)嚢杌旌暇鶆颍礊槿軇?，備用?/p>
2、稱取桔梗提取物5g(總皂苷含量為66.12％，桔梗皂苷D含量為2.45％)、丹皮酚提取物0.3g(丹皮酚含量為95.12％)、陳皮油0.05g和亞硫酸氫鈉0.1g，加入所述溶劑定容至1000ml，攪拌均勻，加稀鹽酸調(diào)pH至4.0，得到初溶液。
3、取初溶液，80目濾布高置靜壓過(guò)濾，濾液過(guò)0.22微米濾膜，減壓抽濾，得到終溶液。
4、將所得終溶液灌注至已洗凈的20毫升安瓿瓶中，封裝；封裝后安瓿瓶置于高壓滅菌鍋中，121℃、104KPa下滅菌15分鐘，得到供霧化用復(fù)方桔梗牡丹皮吸入制劑。
實(shí)施例2：
1、取1,2-丙二醇100g，加入900g注射用水?dāng)嚢杌旌暇鶆颍礊槿軇?，備用?/p>
2、稱取桔梗提取物7.5g(總皂苷含量為68.93％，桔梗皂苷D含量為2.77％)、丹皮酚提取物0.5g(丹皮酚含量為92.28％)、薄荷油0.05g和亞硫酸氫鈉0.1g，加入所述溶劑定容至1000ml，攪拌均勻，加稀鹽酸調(diào)pH至4.0，得到初溶液；
3、取初溶液，80目濾布高置靜壓過(guò)濾，濾液過(guò)0.22微米濾膜，減壓抽濾，得到終溶液；
4、將所得終溶液灌注至已洗凈的25毫升安瓿瓶中，封裝；封裝后安瓿瓶置于高壓滅菌鍋中，121℃、104KPa下滅菌15分鐘，得到供霧化用復(fù)方桔梗牡丹皮吸入制劑。
實(shí)施例3：
1、取1,2-丙二醇50g，食用95％乙醇50g，加入900g注射用水?dāng)嚢杌旌暇鶆?，即為溶劑，備用?/p>
2、稱取桔梗提取物10g(總皂苷含量為66.12％，桔梗皂苷D含量為2.45％)、丹皮酚提取物3g(丹皮酚含量為92.28％)、陳皮油0.5g和亞硫酸氫鈉1g，加入所述溶劑定容至1000ml，攪拌均勻，加稀鹽酸調(diào)pH至4.0，得到初溶液。
3、取初溶液，80目濾布高置靜壓過(guò)濾，濾液過(guò)0.22微米濾膜，減壓抽濾，得到終溶液。
4、將所得終溶液灌注至已洗凈的15毫升安瓿瓶中，封裝；封裝后安瓿瓶置于高壓滅菌鍋中，121℃、104KPa下滅菌15分鐘，得到供霧化用復(fù)方桔梗牡丹皮吸入制劑。
實(shí)施例4：
1、取1,2-丙二醇50g，食用95％乙醇50g，加入900g注射用水?dāng)嚢杌旌暇鶆?，即為溶劑，備用?/p>
2、稱取桔梗提取物7.5g(總皂苷含量為66.12％，桔梗皂苷D含量為2.45％)、丹皮酚提取物0.5g(丹皮酚含量為92.28％)、薄荷油0.05g和維生素C 0.1g，加入所述溶劑定容至1000ml，攪拌均勻，加稀鹽酸調(diào)pH至4.0，得到初溶液；
3、取初溶液，80目濾布高置靜壓過(guò)濾，濾液過(guò)0.22微米濾膜，減壓抽濾，得到終溶液；
4、將所得終溶液灌注至已洗凈的10毫升安瓿瓶中，封裝；封裝后安瓿瓶置于高壓滅菌鍋中，121℃、104KPa下滅菌15分鐘，得到供霧化用復(fù)方桔梗牡丹皮吸入制劑。
實(shí)施例5：
1、取1,2-丙二醇1000g，加入9000g注射用水?dāng)嚢杌旌暇鶆?，即為溶劑，備用?/p>
2、稱取桔梗提取物50g(總皂苷含量為68.93％，桔梗皂苷D含量為2.77％)、丹皮酚提取物3g(丹皮酚含量為95.12％)、陳皮油0.5g和維生素C 1g，加入所述溶劑定容至10000ml，攪拌均勻，加稀鹽酸調(diào)pH至4.0，得到初溶液。
3、取初溶液，80目濾布高置靜壓過(guò)濾，濾液過(guò)0.22微米濾膜，減壓抽濾，得到終溶液。
4、將所得終溶液灌注至已洗凈的20毫升安瓿瓶中，封裝；封裝后安瓿瓶置于高壓滅菌鍋中，121℃、104KPa下滅菌15分鐘，得到供霧化用復(fù)方桔梗牡丹皮吸入制劑。
實(shí)施例6：
1、取1,2-丙二醇1000g，加入9000g注射用水?dāng)嚢杌旌暇鶆?，即為溶劑，備用?/p>
2、稱取桔梗提取物50g(總皂苷含量為66.12％，桔梗皂苷D含量為2.45％)、丹皮酚提取物3g(丹皮酚含量為92.28％)、陳皮油0.5g和亞硫酸氫鈉C 1g，加入所述溶劑定容至10000ml，攪拌均勻，加稀鹽酸調(diào)pH至4.0，得到初溶液。
3、取初溶液，80目濾布高置靜壓過(guò)濾，濾液過(guò)0.22微米濾膜，減壓抽濾，得到終溶液。
4、將所得終溶液灌注至已洗凈的10毫升安瓿瓶中，封裝；封裝后安瓿瓶置于高壓滅菌鍋中，121℃、104KPa下滅菌15分鐘，得到供霧化用復(fù)方桔梗牡丹皮吸入制劑。
供霧化用復(fù)方桔梗牡丹皮吸入制劑的含量測(cè)定：為了規(guī)范本品保存，流通，銷售和使用過(guò)程中質(zhì)量的控制方式，采用高效液相色譜法測(cè)定供霧化用復(fù)方桔梗吸入制劑成品中桔梗皂苷D與丹皮酚的含量，同時(shí)采用紫外分光光度法測(cè)定總皂苷含量。
(一)桔梗皂苷的含量測(cè)定
色譜條件：色譜柱為C18柱(4.6mm×250mm，5μm)，流動(dòng)相為乙腈-0.1％磷酸(25∶75)，流速1.0mL·min-1，ELSD檢測(cè)器，柱溫25℃。
對(duì)照品溶液的制備：精密稱取桔梗皂苷D對(duì)照品適量，置10ml量瓶中，加甲醇定容，制得0.3mg/ml桔梗皂苷D對(duì)照品溶液，備用。
樣品溶液的制備：取本品25ml，加25ml水飽和正丁醇萃取3次，合并正丁醇萃取液，減壓干燥，回收溶劑，殘?jiān)恿鲃?dòng)相溶解，并轉(zhuǎn)移至25ml容量瓶中，加流動(dòng)相定容，搖勻，過(guò)濾，收取濾液，密封，即得樣品溶液，備用，重復(fù)三次實(shí)驗(yàn)。
測(cè)定法：分別精密吸取對(duì)照品溶液10μ1、20μ1，樣品20μ1，注入液相色譜儀，測(cè)定，用外標(biāo)兩點(diǎn)法對(duì)數(shù)方程計(jì)算，即得。
經(jīng)高效液相色譜法檢測(cè)，本發(fā)明制備的供霧化用復(fù)方桔梗吸入制劑中理論板數(shù)按桔梗皂苷D計(jì)算，應(yīng)不低于3000。桔梗皂苷D最低含量為每毫升0.1mg。
(二)丹皮酚的含量測(cè)定
色譜條件：色譜柱為C18柱(4.6mm×250mm，5μm)，流動(dòng)相為甲醇-水(45∶55)，流速1.0mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)274nm，柱溫25℃。
對(duì)照品溶液的制備：精密稱取丹皮酚對(duì)照品適量，置10ml量瓶中，加甲醇定容，制得20μg/ml丹皮酚對(duì)照品溶液，備用。
樣品溶液的制備：精密移取取本品1.00ml，轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中，加流動(dòng)相定容，搖勻，過(guò)濾，收取濾液，密封，即得樣品溶液，備用，重復(fù)三次實(shí)驗(yàn)。
測(cè)定法：分別精密吸取對(duì)照品溶液20μ1，樣品溶液20μ1，注入液相色譜儀，測(cè)定，用外標(biāo)法計(jì)算，即得。
經(jīng)高效液相色譜法檢測(cè)，本發(fā)明制備的供霧化用復(fù)方桔梗吸入制劑中理論板數(shù)按丹皮酚計(jì)算，應(yīng)不低于5000。丹皮酚最低含量為每毫升0.2mg。
(三)總皂苷的含量測(cè)定
對(duì)照品溶液的制備：對(duì)照品溶液的制備：精密稱取桔梗皂苷D對(duì)照品適量，置10ml量瓶中，加甲醇定容，制得0.3mg/ml桔梗皂苷D對(duì)照品溶液，備用。
樣品溶液的制備：精密移取取本品1.00ml，轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中，加流動(dòng)相定容，搖勻，過(guò)濾，收取濾液，密封，即得樣品溶液，備用，重復(fù)三次實(shí)驗(yàn)。
測(cè)定法：分別精密吸取對(duì)照品溶液0.1ml，樣品溶液0.1ml，置于不同具塞試管中水浴蒸干，加入5％香草醛-冰醋酸0.20ml，高氯酸0.8ml，搖勻，于60℃水浴加熱15min，冰水浴中冷卻3min，隨行試劑做空白測(cè)定，置于紫外分光光度計(jì)中，與475nm處，測(cè)定吸光度，用外標(biāo)法計(jì)算總皂苷含量，即得。
經(jīng)紫外分光光度法檢測(cè)，本發(fā)明制備的供霧化用復(fù)方桔梗吸入制劑中，總皂苷最低含量為每毫升2mg。