本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種蜘蛛香揮發(fā)油抗菌劑包合物及其制備方法。

背景技術(shù)：

蜘蛛香（valerianajatamansijones.）是敗醬科纈草屬植物，又名馬蹄香、土細辛、鬼見愁、雷公七、老虎七、印度纈草等，為多年生草本植物，入藥部位為其根莖，在我國主要分布于陜西、河南、湖北、四川、貴州、云南等地?，F(xiàn)已收載于《中華人民共和國藥典》（2010年版）。

《本草綱目》中記載:“蜘蛛香出蜀西茂松藩山中。草根也，黑色有粗須，狀如蜘蛛及藁本，芎窮，氣味芳香。

蜘蛛香在《滇南本草》中有如下記載：“馬蹄香（即蜘蛛香），一名鬼見愁，形似小牛舌，葉根黑，采枝葉入藥，味苦、性寒。主治婦人潮熱，陰虛火動，頭眩發(fā)暈，虛勞可療，曬干燒煙，可辟邪物。”

關(guān)于蜘蛛香的功用，李時珍指出：“辟瘟疫，中惡邪精，鬼氣尸疰”。蜘蛛香其性味微苦、辛，溫，具有理氣止痛、消食止瀉、祛風除濕、鎮(zhèn)驚安神的功效。常用于消食健胃、小兒疽積、腹瀉、理氣止痛及祛風解毒等功效。其揮發(fā)油有抗心率失常作用。

蜘蛛香揮發(fā)油，主要成分是酸類和萜類化合物，蜘蛛香揮發(fā)油中的酸類主要為異戊酸，異戊酸具有濃烈的特殊氣味，是蜘蛛香藥材氣味的主要來源，異戊酸和3-甲基戊酸可用于制備香料；有機酸類具有誘導(dǎo)細胞凋亡的作用，包括油酸、亞油酸等。萜類化合物具有多方面的生物活性，主要為單萜烯類、倍半萜烯類及其含氧衍生物等，也是蜘蛛香的主要有效成分。

有關(guān)蜘蛛香揮發(fā)油的提取已有許多報道，提取法有水蒸氣蒸餾提取、索氏提取、有機溶劑浸提、微波輔助萃取法、超臨界流體萃取等。

蒸餾法是提取中藥揮發(fā)油最常用的方法，也是《中國藥典》收載的方法，蒸餾法經(jīng)濟適用，也適合中小型實驗室進行揮發(fā)油提取的實驗研究，但水蒸汽蒸餾法不適用于對熱不穩(wěn)定成分的提取，長時間與水共沸易使一些熱敏物質(zhì)發(fā)生聚合、氧化等反應(yīng)導(dǎo)致變性。有機溶劑提取法多采用低沸點的親脂性有機溶劑石油醚、乙醚提取，由于其溶劑易燃、易爆，故僅作為實驗方法，同時會出現(xiàn)有機溶劑的殘留與其回收等問題。超臨界流體萃取法中二氧化碳的臨界溫度比較低，所以對熱敏性成分比較理想，又可提高揮發(fā)油的品質(zhì)，但設(shè)備成本高且操作復(fù)雜。超聲波輔助萃取法、微波輔助萃取都可以加速藥物有效成分進入溶劑，從而提高提取效率，但目前此兩種方法不適用于大規(guī)模的工業(yè)生產(chǎn)。

包埋法利用具有特殊分子結(jié)構(gòu)的壁材進行包埋而成。環(huán)糊精(cycoldxertin，cd)是一種水溶性非還原性不易被酸水解的白色晶體無毒，可食用，具有多孔性。它是由環(huán)糊精葡萄糖轉(zhuǎn)移酶(cgt)作用于淀粉所產(chǎn)生的一組環(huán)狀糊精。

β-環(huán)糊精(β-cyclodextrin，β-ｃｄ)是研究最多的壁材，它由7個葡萄糖分子以α-1，4糖苷鍵連接而成，主體構(gòu)像是一個中間有空洞，兩端不封閉的圓筒，其顯著的結(jié)構(gòu)特征是存在一個立體筒狀手性疏水空腔，特殊的非極性疏水環(huán)境使β-ｃｄ能以范德華力、疏水和氫鍵等作用力，與一些極性、大小、形狀及性質(zhì)相匹配的分子或某些分子的疏水性基團作用，在其空間結(jié)構(gòu)中全部或部分包入另一種分子形成穩(wěn)定的超分子包合化合物，稱β-ｃｄ包合物或β-ｃｄ分子微囊。處于包合物外層的β-ｃｄ稱為主分子，被包合在主分子之內(nèi)的小分子物質(zhì)稱為客分子(心材)。由于β-環(huán)糊精有一個相對疏水的中心和一個相對親水的表面，客分子物質(zhì)“鑲嵌”在中間，在使用過程中既能均勻分散，又對客分子物質(zhì)起到一定的保護作用。

近年來，由于各種抗生素的濫用，導(dǎo)致臨床上細菌與真菌抗藥性問題日益嚴重。因此尋找天然的抗菌劑就顯得尤為重要。揮發(fā)油中含多種活性成分，協(xié)同作用，可有效地避免耐藥及抗藥性，是發(fā)揮中草藥的治病優(yōu)勢的重要化合物群。

臨床研究發(fā)現(xiàn)，蜘蛛香提取物對革蘭氏陽性細菌及輪狀、非輪狀病毒腸炎都具良好的療效。蜘蛛香的藥用價值很大一部分歸因于其根和莖所含的豐富揮發(fā)油，具有中樞抑制、抗菌、抗病毒、緩解胃腸道疾病及細胞毒性和抗腫瘤活性等。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明目的在于提供一種蜘蛛香揮發(fā)油抗菌劑包合物，其采用減壓蒸餾的方法提取蜘蛛香揮發(fā)油，然后以β-環(huán)糊精作為包埋劑，超聲輔助進行包埋制得，其中β-環(huán)糊精與蜘蛛香揮發(fā)油的質(zhì)量體積比為6:1-10:1。

上述蜘蛛香揮發(fā)油抗菌劑包合物的制備方法具體步驟如下：

（1）將蜘蛛香原料切片，粉碎過篩；

（2）在過篩后的蜘蛛香粉末中加入其質(zhì)量8-13倍的蒸餾水，40-70℃回流浸提6-12h；

（3）回流浸提后，再于55-62℃、壓力為0.086～0.090mpa條件下，減壓蒸餾提取揮發(fā)油，收集后即得蜘蛛香揮發(fā)油；

（4）將β-環(huán)糊精溶解在蒸餾水中，蜘蛛香揮發(fā)油與乙醇混合，然后將蜘蛛香揮發(fā)油混合物與β-環(huán)糊精溶液混合，其中β-環(huán)糊精與蜘蛛香揮發(fā)油的質(zhì)量比為6:1-10:1；

（5）將步驟（4）最終的混合物置于溫度為55-75℃條件下，超聲振蕩15-25h得包合物，靜置12h后，抽濾，濾渣用石油醚潤洗2-3次后干燥，即得蜘蛛香揮發(fā)油抗菌劑包合物。

所述粉碎后過20-40目篩。

所述蜘蛛香揮發(fā)油與乙醇按體積比1:1-1:2的比例混合。

蜘蛛香揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物可以作為擦劑、顆粒劑、口服液中活性成分，根據(jù)所需劑型添加常規(guī)劑量的常規(guī)輔料，包合物添加量為0.5-9.0%。

本發(fā)明的優(yōu)點和技術(shù)效果：

本發(fā)明采用減壓蒸餾的方法提取蜘蛛香揮發(fā)油，避免了蒸餾過程中高溫對揮發(fā)油中有效物質(zhì)的破壞，同時也適用于大規(guī)模生產(chǎn)，具有提取率高，耗時少，對人體無害以及對環(huán)境無污染的特點；減壓蒸餾的方法是借助于真空泵降低系統(tǒng)內(nèi)壓力，從而降低液體的沸點，更有助于具有揮發(fā)性物質(zhì)的揮發(fā)。

由于蜘蛛香揮發(fā)油易揮發(fā)、有強烈的臭味、穩(wěn)定性差等影響了其臨床應(yīng)用。通過包埋可阻留其揮發(fā)，以供最佳條件時釋放；β-環(huán)糊精對蜘蛛香揮發(fā)油的包合，可以包埋易揮發(fā)油溶性香味物質(zhì)，從而達到留香的目的，同時也可以掩蔽不良異味改善這些不良因素，提高蜘蛛香揮發(fā)油的藥效，為蜘蛛香揮發(fā)油的臨床應(yīng)用提供基礎(chǔ)研究依據(jù)；且該包合物制備方法具有安全無毒、耗時短、提取率高、工藝簡單的優(yōu)點。

具體實施方式

下面通過實施例對本發(fā)明作進一步詳細說明，但本發(fā)明保護范圍不局限于所述內(nèi)容，實施例中方法如無特殊說明均為常規(guī)方法，使用的試劑如無特殊說明均為常規(guī)市售或按常規(guī)方法配制的試劑。

實施例1：本蜘蛛香揮發(fā)油抗菌劑包合物采用減壓蒸餾的方法提取蜘蛛香揮發(fā)油，然后以β-環(huán)糊精作為包埋劑，超聲輔助進行包埋制得，其中β-環(huán)糊精與蜘蛛香揮發(fā)油的質(zhì)量體積比為6:1。

上述蜘蛛香揮發(fā)油抗菌劑包合物的制備方法具體步驟如下：

（1）將蜘蛛香原料切片，粉碎過篩20目；

（2）在過篩后的蜘蛛香粉末中加入其質(zhì)量8倍的蒸餾水，50℃回流浸提12h；

（3）回流浸提后，再于55℃、壓力為0.086mpa條件下，減壓蒸餾提取揮發(fā)油，收集后即得蜘蛛香揮發(fā)油，蜘蛛香得油率為0.75%；

（4）將β-環(huán)糊精溶解在蒸餾水中，蜘蛛香揮發(fā)油與乙醇按體積比1:1的比例混合，然后將蜘蛛香揮發(fā)油混合物與β-環(huán)糊精溶液混合，其中β-環(huán)糊精與蜘蛛香揮發(fā)油的質(zhì)量比為6:1；

（5）將步驟（4）中混合物置于溫度為60℃條件下，超聲振蕩20h得包合物，靜置12h后，抽濾，濾渣用石油醚潤洗3次后，放入烘干箱中干燥，即得蜘蛛香揮發(fā)油抗菌劑包合物。

包合物穩(wěn)定性試驗：按照新藥標準規(guī)定,質(zhì)量穩(wěn)定性技術(shù)要求在光照、濕熱條件下加速實驗3個月以推算新藥或制劑兩年的變化量；實驗顯示經(jīng)β-cd包合的蜘蛛香揮發(fā)油兩年后仍保持65%；而未包合的蜘蛛香揮發(fā)油量已完全揮發(fā)。

本實施例包合物與茶樹精油、常規(guī)輔料一起制成擦劑，包合物添加量為6%。

實施例2：本蜘蛛香揮發(fā)油抗菌劑包合物采用減壓蒸餾的方法提取蜘蛛香揮發(fā)油，然后以β-環(huán)糊精作為包埋劑，超聲輔助進行包埋制得，其中β-環(huán)糊精與蜘蛛香揮發(fā)油的質(zhì)量體積比為8:1。

上述蜘蛛香揮發(fā)油抗菌劑包合物的制備方法具體步驟如下：

（1）將蜘蛛香原料切片，粉碎過篩30目；

（2）在過篩后的蜘蛛香粉末中加入其質(zhì)量10倍的蒸餾水，60℃回流浸提10h；

（3）回流浸提后，再于60℃、壓力為0.088mpa條件下，減壓蒸餾提取揮發(fā)油，收集后即得蜘蛛香揮發(fā)油，蜘蛛香得油率為0.1%；

（4）將β-環(huán)糊精溶解在蒸餾水中，蜘蛛香揮發(fā)油與乙醇按體積比1:2的比例混合，然后將蜘蛛香揮發(fā)油混合物與β-環(huán)糊精溶液混合，其中β-環(huán)糊精與蜘蛛香揮發(fā)油的質(zhì)量比為8:1；

（5）將步驟（4）中混合物置于溫度為65℃條件下，超聲振蕩18h得包合物，靜置12h后，抽濾，濾渣用石油醚潤洗3次后，放入烘干箱中干燥，即得蜘蛛香揮發(fā)油抗菌劑包合物。

包合物穩(wěn)定性試驗：按照新藥標準規(guī)定,質(zhì)量穩(wěn)定性技術(shù)要求在光照、濕熱條件下加速實驗3個月以推算新藥或制劑兩年的變化量；實驗顯示經(jīng)β-cd包合的蜘蛛香揮發(fā)油兩年后仍保持63%。而未包合的蜘蛛香揮發(fā)油量已完全揮發(fā)。

本實施例包合物與乳糖、甘露醇、水溶性淀粉等一起制成顆粒劑，包合物添加量為3%。

實施例3：本蜘蛛香揮發(fā)油抗菌劑包合物采用減壓蒸餾的方法提取蜘蛛香揮發(fā)油，然后以β-環(huán)糊精作為包埋劑，超聲輔助進行包埋制得，其中β-環(huán)糊精與蜘蛛香揮發(fā)油的質(zhì)量體積比為10:1。

上述蜘蛛香揮發(fā)油抗菌劑包合物的制備方法具體步驟如下：

（1）將蜘蛛香原料切片，粉碎過篩20目；

（2）在過篩后的蜘蛛香粉末中加入其質(zhì)量12倍的蒸餾水，70℃回流浸提6h；

（3）回流浸提后，再于60℃、壓力為0.09mpa條件下，減壓蒸餾提取揮發(fā)油，收集后即得蜘蛛香揮發(fā)油，蜘蛛香得油率為0.9%；

（4）將β-環(huán)糊精溶解在蒸餾水中，蜘蛛香揮發(fā)油與乙醇按體積比1:1的比例混合，然后將蜘蛛香揮發(fā)油混合物與β-環(huán)糊精溶液混合，其中β-環(huán)糊精與蜘蛛香揮發(fā)油的質(zhì)量比為10:1；

（5）將步驟（4）中混合物置于溫度為70℃條件下，超聲振蕩15h得包合物，靜置12h后，抽濾，濾渣用石油醚潤洗2次后，放入烘干箱中干燥，即得蜘蛛香揮發(fā)油抗菌劑包合物。

包合物穩(wěn)定性試驗：按照新藥標準規(guī)定,質(zhì)量穩(wěn)定性技術(shù)要求在光照、濕熱條件下加速實驗3個月以推算新藥或制劑兩年的變化量；實驗顯示經(jīng)β-cd包合的蜘蛛香揮發(fā)油兩年后仍保持68%。而未包合的蜘蛛香揮發(fā)油量已完全揮發(fā)。

本實施例包合物與水、輔料等一起制成口服液，包合物添加量為2%。