本發(fā)明屬于藥物領(lǐng)域，具體地，涉及一種預(yù)防和治療干燥性角/結(jié)膜炎的滴眼液及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
干燥性角/結(jié)膜炎，又稱(chēng)干眼癥，是指由各種原因引起的淚液質(zhì)和量或動(dòng)力學(xué)異常，導(dǎo)致淚膜不穩(wěn)定和眼表組織病變，并伴有眼部不適癥狀為特征的一類(lèi)疾病的總稱(chēng)，是當(dāng)今社會(huì)最常見(jiàn)的眼部疾病之一，最常見(jiàn)的癥狀包括干澀感、異物感、視疲勞，較嚴(yán)重的眼睛會(huì)充血、角膜上皮剝脫，如果治療不及時(shí)，可發(fā)展成進(jìn)展性的角膜混濁甚至失明。引起干燥性角/結(jié)膜炎的因素很多，主要包括年齡增長(zhǎng)，不合理用眼導(dǎo)致的淚液過(guò)度蒸發(fā)、淚腺堵塞、病毒感染、環(huán)境污染等等。
目前，臨床上針對(duì)于干燥性角/結(jié)膜炎的預(yù)防和治療多以外源性補(bǔ)充人工淚液，緩解干燥性角/結(jié)膜炎的臨床癥狀，或局部使用類(lèi)固醇激素或非甾體抗炎藥減輕眼表炎癥，上述治療方法可以一定程度上緩解干燥性角/結(jié)膜炎的部分臨床癥狀，但僅能治標(biāo)不能治本，甚至還可能導(dǎo)致外源性滴眼液的依賴(lài)，且滴眼液為了長(zhǎng)期保存，避免滴眼液施用導(dǎo)致的眼部感染，往往含有防腐劑，而長(zhǎng)期使用含有防腐劑的滴眼液，不僅不利于治療干燥性角/結(jié)膜炎，甚至還會(huì)使眼睛感覺(jué)干澀、痛癢，從而加重干燥性角/結(jié)膜炎的臨床癥狀，嚴(yán)重者對(duì)角膜上皮造成損傷。
目前臨床上廣泛使用的淚然、新淚然滴眼液在外源性補(bǔ)充人工淚眼的同時(shí)，也只能通過(guò)在眼球表面形成保護(hù)膜減緩眼球表面的液體的蒸發(fā)，對(duì)干燥性角/結(jié)膜炎起到緩解不適癥狀的治療效果，其也不能從根本上治療干燥性角/結(jié)膜炎。
因此，針對(duì)于干燥性角/結(jié)膜炎需要開(kāi)發(fā)出緩解其臨床不適癥狀的同時(shí)，從根本上治療干燥性角/結(jié)膜炎的藥物組合物，本申請(qǐng)即是在本領(lǐng)域現(xiàn)有干燥性角/結(jié)膜炎治療藥物的基礎(chǔ)上致力于開(kāi)發(fā)即能治標(biāo)也能治本的干燥癥角/結(jié)膜炎的預(yù)防和治療藥物組合物。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種預(yù)防和治療干燥性角/結(jié)膜炎的滴眼液，所述滴眼液包括：環(huán)蒜氨酸、花青素、右旋糖酐70、羥丙基甲基纖維素、滲透壓調(diào)節(jié)劑、ph調(diào)節(jié)劑和純凈水。
優(yōu)選的，所述滲透壓調(diào)節(jié)劑選擇氯化鉀、氯化鈉或其混合物，所述ph調(diào)節(jié)劑選自硼酸鈉、鹽酸或氫氧化鈉，將所述滴眼液的ph調(diào)整至7.2。
進(jìn)一步的，所述滴眼液含有環(huán)蒜氨酸0.2％、花青素0.1％、右旋糖酐700.2％、羥丙基甲基纖維素0.2％。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種預(yù)防和治療干燥性角/結(jié)膜炎的滴眼液的制備方法，包括以下步驟：
(1)按配方稱(chēng)取滴眼液各原料備用；
(2)將羥丙基甲基纖維素、右旋糖酐70添加至純凈水中，強(qiáng)力攪拌，直至完全溶解；
(3)將花青素、環(huán)蒜氨酸添加至步驟(2)溶液中攪拌均勻；
(4)使用滲透壓調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)溶液為等滲溶液；
(5)使用ph調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)溶液ph為7.2；
(6)過(guò)濾后，輻照滅菌，無(wú)菌灌裝，即得本發(fā)明預(yù)防和治療干燥性角/結(jié)膜炎的滴眼液。
本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供環(huán)蒜氨酸、花青素、右旋糖酐70和羥丙基甲基纖維素的組合在制備預(yù)防和治療干燥性角/結(jié)膜炎的滴眼液的用途。
優(yōu)選的，所述滴眼液含有環(huán)蒜氨酸0.2％、花青素0.1％、右旋糖酐700.2％、羥丙基甲基纖維素0.2％。
環(huán)蒜氨酸為洋蔥內(nèi)致淚物質(zhì)的主要成分，易揮發(fā)，可引起眼睛刺痛感，刺激眼睛流淚與眨眼，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，其具有抗菌、抗肝毒性和抗衰老等功效，還可以增強(qiáng)纖維蛋白溶解酶原活性，從而有助于血栓的溶解，但尚未有將其用于干燥性角/結(jié)膜炎預(yù)防和治療的報(bào)道。
花青素，廣泛存在于植物中的水溶性色素，屬黃酮類(lèi)物質(zhì)，為強(qiáng)力抗氧化劑，可保護(hù)機(jī)體免受氧自由基的損傷，具有抗氧化、抗突變、抗衰老、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能、預(yù)防和治療心腦血管、保肝、護(hù)肝、抗輻射、預(yù)防近視、保護(hù)和預(yù)防眼部疾病、增強(qiáng)視力等功效，目前臨床上已有口服花青素用于干燥性角/結(jié)膜炎預(yù)防和治療的報(bào)道。
有益效果
本發(fā)明預(yù)防和治療干燥性角/結(jié)膜炎的滴眼液，在外源性補(bǔ)充眼睛水分，在眼睛表面形成保護(hù)膜，減緩水分的蒸發(fā)，有效緩解干燥性角/結(jié)膜炎的眼睛干澀等癥狀的同時(shí)，環(huán)蒜氨酸與花青素的組合還可以刺激淚腺的分泌，增加眨眼次數(shù)，環(huán)蒜氨酸同時(shí)可以抑制炎性因子的分泌從根本上治療干眼癥，且不含防腐劑，對(duì)眼睛安全無(wú)刺激，長(zhǎng)期穩(wěn)定性高，可廣泛用于干燥性角/結(jié)膜炎的預(yù)防和治療。
具體實(shí)施方式
在下文中更詳細(xì)地描述了本發(fā)明以有助于對(duì)本發(fā)明的理解。
應(yīng)當(dāng)理解的是，在說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求書(shū)中使用的術(shù)語(yǔ)或詞語(yǔ)不應(yīng)當(dāng)理解為具有在字典中限定的含義，而應(yīng)理解為在以下原則的基礎(chǔ)上具有與其在本發(fā)明上下文中的含義一致的含義：術(shù)語(yǔ)的概念可以適當(dāng)?shù)赜砂l(fā)明人為了對(duì)本發(fā)明的最佳說(shuō)明而限定。
實(shí)施例1：一種預(yù)防和治療干燥性角/結(jié)膜炎的滴眼液
環(huán)蒜氨酸2g；
花青素1g；
右旋糖酐702g；
羥丙基甲基纖維素2g；
氯化鉀與氯化鈉適量；
ph調(diào)節(jié)劑適量；
添加純凈水至1l；
按照以下步驟制備：
(1)按配方量稱(chēng)取滴眼液各原料備用；
(2)將羥丙基甲基纖維素、右旋糖酐70添加至純凈水中，強(qiáng)力攪拌，直至完全溶解；
(3)將花青素、環(huán)蒜氨酸添加至步驟(2)溶液中攪拌均勻；
(4)使用氯化鉀與氯化鈉調(diào)節(jié)溶液為等滲溶液；
(5)使用ph調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)溶液ph為7.2；
(6)溶液過(guò)濾后，輻照滅菌，無(wú)菌灌裝，即得本發(fā)明預(yù)防和治療干燥性角/結(jié)膜炎的滴眼液。
對(duì)照例1：一種環(huán)蒜氨酸滴眼液
按照實(shí)施例1的配方和制備方法制備環(huán)蒜氨酸滴眼液，其中將花青素替換為等量的環(huán)蒜氨酸。
對(duì)照例2：一種花青素滴眼液
按照實(shí)施例1的配方和制備方法制備環(huán)蒜氨酸滴眼液，其中將環(huán)蒜氨酸替換為等量的花青素。
對(duì)照例3：一種環(huán)蒜氨酸、維生素c滴眼液
按照實(shí)施例1的配方和制備方法制備換氨酸滴眼液，其中將花青素替換為等量維生素c。
效果例1：對(duì)維生素a缺乏導(dǎo)致的干燥性角/結(jié)膜炎的臨床癥狀淚液分泌的影響
1.1實(shí)驗(yàn)方法
4周齡新西蘭白兔65只，雌雄各半，體重550±100g，正常飼養(yǎng)2天后，進(jìn)行schirmer試驗(yàn)，測(cè)定淚液分泌情況，具體為，取淚液檢測(cè)濾紙條，一端折疊5mm，置于兔子眼睛下瞼中外1/3處，5min后取出測(cè)量自折疊處的濕潤(rùn)長(zhǎng)度，并記錄為正常淚液分泌情況，之后開(kāi)始喂養(yǎng)維生素a缺乏飼料6個(gè)月，制備干燥性角/結(jié)膜炎模型，造模完成后進(jìn)行schirmer試驗(yàn)，測(cè)定淚液分泌情況，選取濾紙條濕潤(rùn)長(zhǎng)度<10mm的新西蘭白兔50只，隨機(jī)分為五組，每組10只，具體為空白組、實(shí)施例1組、對(duì)照例1-3組，其中實(shí)施例1組、對(duì)照例1-3組滴用相應(yīng)滴眼液，空白組滴用不含有環(huán)蒜氨酸與花青素的實(shí)施例1滴眼液，每天滴用3次，連續(xù)給藥20天，末次給藥24h后，再次進(jìn)行schirmer試驗(yàn)，測(cè)定淚液分泌情況，計(jì)算淚液分泌增長(zhǎng)率，具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1，其中
淚液分泌增長(zhǎng)率＝(給藥后濕潤(rùn)長(zhǎng)度-給藥前濕潤(rùn)長(zhǎng)度)/給藥前濕潤(rùn)長(zhǎng)度×100％。
1.2試驗(yàn)結(jié)果
表1、對(duì)維生素a缺乏導(dǎo)致的干燥性角/結(jié)膜炎淚液分泌的影響
注：與給藥前濕潤(rùn)長(zhǎng)度比較：**p<0.01。
表1實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，喂養(yǎng)維生素a缺乏飼料6個(gè)月后，新西蘭白兔的淚液分泌量明顯減少，表明了本申請(qǐng)干燥性角/結(jié)膜炎造模成功，施用不含花青素、環(huán)蒜氨酸滴眼液的空白組在末次給藥24小時(shí)后，新西蘭白兔自主淚液分泌不僅未增加，還出現(xiàn)了一定程度的減少，從而表明，施用不含花青素、環(huán)蒜氨酸的滴眼液并不具有刺激淚液分泌的作用，施用該類(lèi)型的滴眼液只能緩解干燥性角/結(jié)膜炎的臨床癥狀，停藥后，干燥性角/結(jié)膜炎不僅不能治愈或緩解，甚至還會(huì)加重，施用單獨(dú)包含環(huán)蒜氨酸、花青素或環(huán)蒜氨酸與其他抗氧化劑維生素c的滴眼液后，新西蘭白兔的自主淚液分泌量均有一定程度的提高，而施用本發(fā)明實(shí)施例1包含花青素、環(huán)蒜氨酸的滴眼液的實(shí)施例1組，停藥后，新西蘭白兔的自主淚液分泌量明顯增加，從而表明了本發(fā)明滴眼液在緩解干燥性角/結(jié)膜炎的臨床癥狀的同時(shí)，對(duì)于干燥性角/結(jié)膜炎還具有治療效果，且環(huán)蒜氨酸與花青素素組合后，新西蘭白兔的自主淚液分泌量相對(duì)于單獨(dú)環(huán)蒜氨酸或花青素素或環(huán)蒜氨酸與其他抗氧化劑，如維生素c均增加明顯，該實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明了環(huán)蒜氨酸與花青素素的組合具有協(xié)同增加新西蘭白兔自主淚液分泌的作用。
效果例2：對(duì)阿托品致干燥性角/結(jié)膜炎的臨床癥狀淚液分泌的影響
2.1實(shí)驗(yàn)方法
10周齡新西蘭白兔20只，雌雄各半，體重2300±200g，隨機(jī)分為兩組，具體為空白組和實(shí)施例1組，適應(yīng)性飼養(yǎng)2天后，進(jìn)行schirmer試驗(yàn)，測(cè)定淚液分泌情況，具體為，取淚液檢測(cè)濾紙條，一端折疊5mm，置于兔子眼睛下瞼中外1/3處，5min后取出測(cè)量自折疊處的濕潤(rùn)長(zhǎng)度，并記錄為正常淚液分泌情況，然后開(kāi)始施用1％硫酸阿托品滴眼液，連續(xù)施用2周，每天3次，施用硫酸阿托品滴眼液1周后開(kāi)始施用實(shí)驗(yàn)藥物，其中空白組滴用不含有環(huán)蒜氨酸與花青素的實(shí)施例1滴眼液，實(shí)施例1組滴用實(shí)施例1滴眼液，實(shí)驗(yàn)藥物于硫酸阿托品施用后2h施用，每天3次，連續(xù)給藥10天，通過(guò)schirmer試驗(yàn)測(cè)定硫酸阿托品滴眼液施用1周(造模1周)、給藥第5天、第10天的淚液分泌情況，具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。
2.2試驗(yàn)結(jié)果
表2、對(duì)阿托品致干燥性角/結(jié)膜炎淚液分泌的影響
注：與正常濕潤(rùn)長(zhǎng)度比較：**p<0.01；與空白組比較：#p<0.05；##p<0.01。
表2實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，通過(guò)施用硫酸阿托品滴眼液，新西蘭白兔的淚液分泌明顯減少，而施用相應(yīng)滴眼液后顯示了與效果例1中維生素a缺乏導(dǎo)致的干燥性角/結(jié)膜炎模型類(lèi)似的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，表明了本發(fā)明的滴眼液可廣泛用于各類(lèi)型干燥性角/結(jié)膜炎的治療。
另外，schirmer試驗(yàn)結(jié)束后，處死新西蘭白兔取其右眼組織，勻漿后提取蛋白，通過(guò)bca定量將各組蛋白提取液至4mg/ml；然后采用elisa試劑盒對(duì)蛋白提取液中的il-6和tnf-α進(jìn)行檢測(cè)；結(jié)果見(jiàn)下表：
表3環(huán)蒜氨酸對(duì)炎癥因子的抑制活性
注：與空白組比較：*p<0.05；**p<0.01。
效果例4：本發(fā)明滴眼液的長(zhǎng)期穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)
將實(shí)施例1的預(yù)防和治療干燥性角/結(jié)膜炎的滴眼液封裝于聚氨酯瓶中，于25±2℃、60％±5％的適度條件下放置18個(gè)月，考察滴眼液在長(zhǎng)期放置過(guò)程中外觀(guān)、ph、活性成分含量與有關(guān)物質(zhì)含量的變化，從而考察本發(fā)明滴眼液的長(zhǎng)期穩(wěn)定性，具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4。
表4、本發(fā)明滴眼液的長(zhǎng)期穩(wěn)定性
表4的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示了本發(fā)明滴眼液在放置18個(gè)月后與放置前比較，各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)明顯變化，本發(fā)明滴眼液具有長(zhǎng)期穩(wěn)定性。