本發(fā)明屬于藥物化學領域，具體涉及一種藥物組合物，該組合物包含泰瑞拉奉和精氨酸。

背景技術：

泰瑞拉奉，化學名稱：2-甲基-5-亞胺基-苯并[d][1,3]噁嗪[5-b]吡唑，結構如式(i)所示。泰瑞拉奉是基于先導化合物依達拉奉結構，通過分子骨架遷越藥物設計方法，設計和合成的一個的全新化合物(zl200910129816.3)。體外試驗表明泰瑞拉奉具有顯著清除羥氧和超氧自由基作用。體內(nèi)試驗表明泰瑞拉奉能呈劑量依賴性地顯著改善腦缺血再灌注動物的神經(jīng)缺陷癥狀，縮小腦梗死面積，降低腦損傷程度，減輕腦水腫，抑制受損腦組織的脂質(zhì)過氧化。藥效明顯優(yōu)于依達拉奉，是具有較好臨床應用特點的腦神經(jīng)保護藥。泰瑞拉奉結構剛性、化學性質(zhì)穩(wěn)定，在水或者通常有機溶劑中溶解度都比較小，基本不溶于水，成藥性較差。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種具有藥用價值的組合物，該組合物由泰瑞拉奉和精氨酸組合而成。

本發(fā)明的目的可以通過以下措施達到：

一種藥物組合物，由式i所示的泰瑞拉奉和式ii所示的精氨酸組合而成。

該藥物組合物是由泰瑞拉奉的大π共軛系統(tǒng)和精氨酸胍基離子通過π-離子作用力而形成的泰瑞拉奉-精氨酸組合物；所述的藥物組合物中泰瑞拉奉和精氨酸的摩爾比為1：1～1：6，優(yōu)選為1：4～1：6。

泰瑞拉奉化學結構呈雜環(huán)生物堿的結構特點，但和一般氮雜環(huán)不同，泰瑞拉奉不呈堿性。泰瑞拉奉因亞胺氫原子的電子云分布于大π共軛系統(tǒng)，反而使泰瑞拉奉具有路易斯酸的特性。

精氨酸與π共軛系統(tǒng)具有較強的π-離子作用力，根據(jù)這一特點，泰瑞拉奉大π共軛系統(tǒng)可以與多個精氨酸形成π-離子作用力，形成多少與ph值密切相關。如表1所示：在ph8.5～9.0之間，泰瑞拉奉-精氨酸組合物中泰瑞拉奉與氨基酸的摩爾比在1：1～1：6之間。泰瑞拉奉有3環(huán)6個面，最多可以和6個精氨酸胍基離子通過π-離子作用力而形成組合物，如下式所示：

表1.ph值對藥物組合物中泰瑞拉奉和精氨酸的摩爾比影響

本發(fā)明所述的藥物組合物的由制備方法，步驟如下：精氨酸溶于注射用水中，溶液加熱到80～90℃，再加入泰瑞拉奉，待泰瑞拉奉溶解后，冷卻至30～40℃左右調(diào)節(jié)ph至8.5～9.0，在2～6℃冷卻4h，過濾，濾液真空濃縮至干，得到泰瑞拉奉-精氨酸組合物。其中，所述的精氨酸、泰瑞拉奉和注射用水的用量比為1～5：0.5～5：100(w/w/v，單位：g/g/ml)。

泰瑞拉奉可以和1～6個精氨酸通過π-離子作用力而形成泰瑞拉奉-精氨酸組合物，精氨酸越多，泰瑞拉奉-精氨酸組合物的水溶性越好，使得泰瑞拉奉-精氨酸組合物在水中的溶解度較泰瑞拉奉有顯著的提高，從而為泰瑞拉奉血管內(nèi)給藥途徑成為可能。

因此，本發(fā)明的另一個目的是提供含有所述的藥物組合物的可注射用的藥物制劑。上述藥物制劑是以泰瑞拉奉-精氨酸組合物為活性成份，添加適當?shù)馁x形劑制備得到的可注射用的藥物制劑。凍干粉針劑中常用的賦形劑骨架材料主要有甘露醇、乳糖、葡萄糖、精氨酸、右旋糖苷等，以上賦形劑骨架材料均能達到制劑要求，用量也相近。由于甘露醇為常規(guī)賦形劑，就成本控制而言，優(yōu)選甘露醇為賦形劑較為適合。

所述的可注射用的藥物制劑中，賦形劑甘露醇的用量是泰瑞拉奉-精氨酸組合物的3.33倍或3.33倍以上，就成本控制而言，優(yōu)選3.33倍。

所述的藥物制劑優(yōu)選制成為注射用凍干粉針劑、噴霧干燥無菌粉針劑。

本發(fā)明的另一個目的是提供所述的藥物組合物在制備治療或預防心腦血管疾病藥物中的應用。藥效實驗表明，本發(fā)明泰瑞拉奉能呈劑量依賴性地顯著地改善腦缺血再灌注動物的神經(jīng)缺陷癥狀，減小腦梗死面積。

附圖說明

圖1為泰瑞拉奉、依達拉奉的腦梗死面積的劑量效應比較圖。

圖2為泰瑞拉奉、依達拉奉的藥效強度比較圖，p＝0.004。

具體實施方式

下面結合具體實施方式對本發(fā)明的技術方案做進一步說明。

實施例1泰瑞拉奉-精氨酸組合物1的制備

在100ml注射用水中，加入精氨酸1g，溶液加熱到80℃，加入泰瑞拉奉1g，溶解后，冷卻30℃左右調(diào)節(jié)ph9.0，在4℃冷卻4h，過濾，濾液真空濃縮至干，得到泰瑞拉奉-精氨酸組合物1。

hplc測定組合物1中泰瑞拉奉與精氨酸摩爾比為1：1.49。

實施例2泰瑞拉奉-精氨酸組合物2的制備

在100ml注射用水中，加入精氨酸1g，溶液加熱到80℃，加入泰瑞拉奉1g，溶解后，冷卻30℃左右調(diào)節(jié)ph8.5，在4℃冷卻4h，過濾，濾液真空濃縮至干，得到泰瑞拉奉-精氨酸組合物2。

hplc測定組合物2中泰瑞拉奉與精氨酸摩爾比為1：3.19。

實施例3泰瑞拉奉-精氨酸組合物3的制備

在100ml注射用水中，加入精氨酸2g，溶液加熱到90℃，加入泰瑞拉奉2g，溶解后，冷卻30℃左右調(diào)節(jié)ph9.0，在4℃冷卻4h，過濾，濾液真空濃縮至干，得到泰瑞拉奉-精氨酸組合物3。

hplc測定組合物3中泰瑞拉奉與精氨酸摩爾比為1：2.25。

實施例4泰瑞拉奉-精氨酸組合物4的制備

在100ml注射用水中，加入精氨酸2g，溶液加熱到80℃，加入泰瑞拉奉2g，溶解后，冷卻30℃左右調(diào)節(jié)ph8.5，在4℃冷卻4h，過濾，濾液真空濃縮至干，得到泰瑞拉奉-精氨酸組合物4。

hplc測定組合物4中泰瑞拉奉與精氨酸摩爾比為1：5.10。

實施例5泰瑞拉奉-精氨酸組合物5的制備

在100ml注射用水中，加入精氨酸5g，溶液加熱到85℃，加入泰瑞拉奉5g，溶解后，冷卻30℃左右調(diào)節(jié)ph9.0，在4℃冷卻4h，過濾，濾液真空濃縮至干，得到泰瑞拉奉-精氨酸組合物5。

hplc測定組合物5中泰瑞拉奉與精氨酸摩爾比為1：2.55。

實施例6泰瑞拉奉-精氨酸組合物6的制備

在100ml注射用水中，加入精氨酸5g，溶液加熱到85℃，加入泰瑞拉奉5g，溶解后，冷卻30℃左右調(diào)節(jié)ph8.5，在4℃冷卻4h，過濾，濾液真空濃縮至干，得到泰瑞拉奉-精氨酸組合物6。

hplc測定組合物6中泰瑞拉奉與精氨酸摩爾比為1：5.27。

實施例7注射用泰瑞拉奉-精氨酸組合物凍干粉1的制備

取泰瑞拉奉-精氨酸組合物6(9g)、甘露醇(30g)、注射用水(300ml)，攪拌溶解，0.22μm微孔濾膜精濾除菌。罐裝、冷凍干燥、壓塞、出箱、軋蓋。

凍干粉1每瓶含：泰瑞拉奉14.98mg、精氨酸69.3mg。凍干粉1呈白色塊狀物，外觀完整。泰瑞拉奉-精氨酸摩爾比為1：5.29。

對凍干粉1進行穩(wěn)定性考察，結果見表2、表3。

表2.光照(4500±500lx)試驗結果

表3.高溫60℃試驗結果

實施例8注射用泰瑞拉奉-精氨酸組合物凍干粉2的制備

取注射用水(2500ml)，加熱至80～90℃，加入精氨酸(75g)、甘露醇(300g)，攪拌溶解。邊攪拌邊加入泰瑞拉奉(15.75g)，攪拌至完全溶解，以10％鹽酸溶液調(diào)節(jié)ph值至8.7～8.9，注射用水加至全量的95％，加入針用炭(1.5g)，60～80℃保溫攪拌20分鐘，0.45μm濾膜過濾脫炭，測定中間體含量，按含量測定結果補足注射用水至體積3000ml。0.22μm微孔濾膜精濾除菌。罐裝、冷凍干燥、壓塞、出箱、軋蓋。

凍干粉2每瓶含：泰瑞拉奉15.24mg；精氨酸73.8mg。呈白色塊狀物，外觀完整。泰瑞拉奉-精氨酸摩爾比為1：5.54。

對凍干粉2進行穩(wěn)定性考察，結果見表4。

表4.加速試驗(40℃±2℃、rh75％±5％)結果

實施例9泰瑞拉奉-精氨酸組合物無菌粉的制備

在注射用水(300ml)中，加入精氨酸(7.5g)，溶液加熱到80～90℃，加入泰瑞拉奉(1.5g)，溶解后，加入活性炭(0.15g)，攪拌并冷卻至30～40℃，調(diào)節(jié)ph8.5，脫炭，微孔濾膜過濾，濾液噴霧干燥得到泰瑞拉奉-精氨酸組合物無菌粉。

hplc測定無菌粉中泰瑞拉奉與精氨酸摩爾比為1：5.31。

實施例10大鼠藥效學試驗

采用頸內(nèi)動脈線栓法制備大腦中動脈阻塞(middlecerebralartery,mcao)腦缺血再灌注模型，于腦缺血2小時再灌注時分別給予泰瑞拉奉(采用實施例6的泰瑞拉奉-精氨酸組合物)、依達拉奉，劑量分別為0.75、1.5、3.0、6.0和12mg/kg。在缺血再灌注24小時后測定所試藥物對腦缺血大鼠的神經(jīng)缺陷癥狀、腦梗死面積等影響。

對神經(jīng)缺陷癥狀的影響

表5.泰瑞拉奉對神經(jīng)缺陷癥狀的影響

均值±標準誤。^***p<0.001，與模型組比較；^#p<0.05，^###p<0.001，與0.75mg/kg組比較；與1.5mg/kg組比較。

表6.依達拉奉對神經(jīng)缺陷癥狀的影響

均值±標準誤。^**p<0.01，^***p<0.001，與模型組比較；^##p<0.01，^###p<0.001，與0.75mg/kg組比較。

對神經(jīng)缺陷癥狀的影響結果見表5和表6。表5表明泰瑞拉奉能顯著改善腦缺血再灌注引起的神經(jīng)缺陷癥狀，并呈顯著的劑量依賴性。表6表明依達拉奉能顯著改善腦缺血再灌注引起的神經(jīng)缺陷癥狀，并在一定的劑量范圍內(nèi)呈劑量依賴性。

對腦梗死面積的影響

表7.泰瑞拉奉對腦梗死面積的影響

均值±標準誤。^**p<0.01，^***p<0.001，與模型組比較；^##p<0.01，^###p<0.001，與0.75mg/kg組比較；與1.5mg/kg組比較。

表8.依達拉奉對腦梗死面積的影響

均值±標準誤。^*p<0.05，^**p<0.01，與模型組比較；^#p<0.05，與0.75mg/kg組比較。

對腦梗死面積的影響的結果見表7、表8和圖1。表7表明泰瑞拉奉能顯著減小腦缺血再灌注引起的腦梗死面積，并呈顯著的劑量依賴性。表8表明，依達拉奉能顯著減小腦缺血再灌注引起的腦梗死面積，并在一定的劑量范圍內(nèi)呈劑量依賴性。圖1表明泰瑞拉奉減少腦梗死面積作用顯著優(yōu)于相同劑量的依達拉奉。

在試驗涉及的劑量范圍內(nèi)，通過對依達拉奉和泰瑞拉奉的量效關系分析，結果表明泰瑞拉奉(tr)具有顯著的缺血腦保護作用，且作用強度明顯優(yōu)于依達拉奉，泰瑞拉奉的藥效相當于同等劑量依達拉奉的2倍，大鼠藥效強度比較試驗結果見圖2。