本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體地涉及一種創(chuàng)面保護(hù)組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
：創(chuàng)面修復(fù)是機(jī)體應(yīng)答損傷所表現(xiàn)的一個(gè)復(fù)雜的生物學(xué)過程，主要包括局部炎癥反應(yīng)階段、細(xì)胞增殖分化階段和組織重建階段。局部微環(huán)境的變化，包括創(chuàng)傷局部各種細(xì)胞、細(xì)胞外基質(zhì)及生長因子等的相互作用，對(duì)創(chuàng)面愈合有極大的影響。海洋是生命的搖籃，海水不僅是寶貴的水資源，而且蘊(yùn)藏著豐富的化學(xué)資源。中國是一個(gè)海洋資源大國,具備開發(fā)海洋、大規(guī)模發(fā)展藍(lán)色產(chǎn)業(yè)的有利條件。海水利用的技術(shù)條件也基本成熟,還有國外的先進(jìn)經(jīng)驗(yàn)可以借鑒，海水是一種非常復(fù)雜的多組分水溶液。海水中的成分很復(fù)雜，主要可以分為五類：1.主要成分(大量、常量元素)2.溶于海水的氣體成分3.營養(yǎng)元素(營養(yǎng)鹽、生源要素)：主要是與海洋植物生長有關(guān)的要素，通常是指N、P及Si等。4.微量元素：在海水中含量很低，但又不屬于營養(yǎng)元素者。5.海水中的有機(jī)物質(zhì)：如氨基酸、腐殖質(zhì)、葉綠素等。與豐富的海洋資源相比，我國的海水資源利用率則相對(duì)較低，雖然海洋資源在海水淡化、海洋采礦、海水能等利用上有了長足的發(fā)展，但是，海水資源在生物醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用相對(duì)較少。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種傷口進(jìn)入炎癥期后，能夠有效溶痂，抗感染促進(jìn)創(chuàng)面愈合的創(chuàng)面保護(hù)組合物。本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供一種創(chuàng)面保護(hù)組合物的制備方法。本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下：創(chuàng)面保護(hù)組合物，按質(zhì)量百分比由增稠劑1％-5％、保濕劑1％-40％、抗菌劑0.01-2％、余量為海水濾液組成。優(yōu)選地，按質(zhì)量百分比所述增稠劑為2％-3％、保濕劑為10％-30％、抗菌劑為0.01％-1％、余量為海水濾液。增稠劑為黃原膠、透明質(zhì)酸鈉、瓜爾豆膠、聚丙烯酸鈉、卡波姆、明膠、果膠、羧甲基纖維素或羧甲基纖維素鈉；所述保濕劑為1.3-丙二醇或1,3-丁二醇?？咕鷦樗呐鹚徕c、聚六亞甲基胍、聚賴氨酸、苯扎溴銨、含銀離子的鹽。海水濾液用如下步驟制得：取符合《GB3097-1997》中第一類的海水，依次用120目篩過濾、透過0.45μmPES微孔濾膜過濾、0.2μm的PES微孔濾膜過濾后得到海水濾液。創(chuàng)面保護(hù)組合物的制備方法，包括如下步驟：(1)按質(zhì)量百分比稱取增稠劑1％-5％、保濕劑1％-40％、抗菌劑0.01-2％、余量為海水濾液；(2)將保濕劑加入到水相罐中，攪拌加熱至70-80℃，加入抗菌劑，攪拌20-30min；(3)先將乳化罐加熱到70-80℃，將步驟(2)獲得的混合物抽入到乳化罐中，將增稠劑加入到乳化罐中，均質(zhì)攪拌300-400s；加入海水濾液，均質(zhì)攪拌300-400s，在轉(zhuǎn)速為15-25r/min條件下攪拌20-30min；(4)降溫至常溫，即得。步驟(1)優(yōu)選為：按質(zhì)量百分比稱取增稠劑2％-3％、保濕劑10％-30％、抗菌劑0.01％-1％、余量為海水濾液。所述增稠劑為黃原膠、透明質(zhì)酸鈉、瓜爾豆膠、聚丙烯酸鈉、卡波姆、果膠、明膠、羧甲基纖維素或羧甲基纖維素鈉；所述保濕劑為1.3-丙二醇或1,3-丁二醇。所述抗菌劑為四硼酸鈉、聚六亞甲基胍、聚賴氨酸、苯扎溴銨、含銀離子的鹽。所述海水濾液用如下步驟制得：取符合《GB3097-1997》中第一類的海水，依次用120目篩過濾、透過0.45μmPES微孔濾膜過濾、0.2μm的PES微孔濾膜過濾后得到海水濾液。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：試驗(yàn)證明，本發(fā)明的組合物，能夠非特異性用于溶痂期創(chuàng)面，能夠有效促進(jìn)中性粒細(xì)胞蛋白酶的分泌，進(jìn)而加速壞死組織的脫落，加速溶痂，可以有效對(duì)患處進(jìn)行清潔滅菌消毒，抑制感染，促進(jìn)創(chuàng)面愈合。制備工藝簡單，成本低。具體實(shí)施方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明，在以下實(shí)施例中含銀離子的鹽以磺胺嘧啶銀為例。表1：實(shí)施例1‐‐‐實(shí)施例6創(chuàng)面保護(hù)的組合物的原料配比(質(zhì)量％)實(shí)施例10各實(shí)施例的海水濾液用如下步驟制得：取符合《GB3097-1997》中第一類的海水，依次用120目篩過濾、透過0.45μmPES微孔濾膜過濾、0.2μm的PES微孔濾膜過濾后得到海水濾液。實(shí)施例11一種創(chuàng)面保護(hù)組合物的制備方法，包括如下步驟：(1)按質(zhì)量百分比稱取實(shí)施例1中各組份；(2)將保濕劑加入到水相罐中，攪拌加熱至70℃，加入抗菌劑，攪拌30min；(3)先將乳化罐加熱到70℃，將步驟(2)獲得的混合物抽入到乳化罐中，將增稠劑加入到乳化罐中，均質(zhì)攪拌400s；加入海水濾液，均質(zhì)攪拌300，在轉(zhuǎn)速為25r/min條件下攪拌20min；(4)降溫至常溫，即得。實(shí)施例12一種創(chuàng)面保護(hù)組合物的制備方法，包括如下步驟：(1)按質(zhì)量百分比稱取實(shí)施例2中各組份；(2)將保濕劑加入到水相罐中，攪拌加熱至80℃，加入抗菌劑，攪拌20min；(3)先將乳化罐加熱到80℃，將步驟(2)獲得的混合物抽入到乳化罐中，將增稠劑加入到乳化罐中，均質(zhì)攪拌300s；加入海水濾液，均質(zhì)攪拌400s，在轉(zhuǎn)速為15r/min條件下攪拌30min；(4)降溫至常溫，即得。實(shí)施例13一種創(chuàng)面保護(hù)組合物的制備方法，包括如下步驟：(1)按質(zhì)量百分比稱取實(shí)施例3中各組份；(2)將保濕劑加入到水相罐中，攪拌加熱至75℃，加入抗菌劑，攪拌25min；(3)先將乳化罐加熱到75℃，將步驟(2)獲得的混合物抽入到乳化罐中，將增稠劑加入到乳化罐中，均質(zhì)攪拌350s；加入海水濾液，均質(zhì)攪拌350s，在轉(zhuǎn)速為20r/min條件下攪拌25min；(4)降溫至常溫，即得。實(shí)施例14一種創(chuàng)面保護(hù)組合物的制備方法，包括如下步驟：(1)按質(zhì)量百分比稱取實(shí)施例4中各組份；(2)將保濕劑加入到水相罐中，攪拌加熱至70℃，加入抗菌劑，攪拌23min；(3)先將乳化罐加熱到70℃，將步驟(2)獲得的混合物抽入到乳化罐中，將增稠劑加入到乳化罐中，均質(zhì)攪拌370s；加入海水濾液，均質(zhì)攪拌320s，在轉(zhuǎn)速為20r/min條件下攪拌25min；(4)降溫至常溫，即得。實(shí)施例15一種創(chuàng)面保護(hù)組合物的制備方法，包括如下步驟：(1)按質(zhì)量百分比稱取實(shí)施例5中各組份；(2)將保濕劑加入到水相罐中，攪拌加熱至80℃，加入抗菌劑，攪拌30min；(3)先將乳化罐加熱到80℃，將步驟(2)獲得的混合物抽入到乳化罐中，將增稠劑加入到乳化罐中，均質(zhì)攪拌300s；加入海水濾液，均質(zhì)攪拌400s，在轉(zhuǎn)速為25r/min條件下攪拌30min；(4)降溫至常溫，即得。實(shí)施例16一種創(chuàng)面保護(hù)組合物的制備方法，包括如下步驟：(1)按質(zhì)量百分比稱取實(shí)施例6中各組份；(2)將保濕劑加入到水相罐中，攪拌加熱至80℃，加入抗菌劑，攪拌25min；(3)先將乳化罐加熱到80℃，將步驟(2)獲得的混合物抽入到乳化罐中，將增稠劑加入到乳化罐中，均質(zhì)攪拌350s；加入海水濾液，均質(zhì)攪拌350s，在轉(zhuǎn)速為20r/min條件下攪拌25min；(4)降溫至常溫，即得。實(shí)施例17一種創(chuàng)面保護(hù)組合物的制備方法，包括如下步驟：(1)按質(zhì)量百分比稱取實(shí)施例7中各組份；(2)將保濕劑加入到水相罐中，攪拌加熱至75℃，加入抗菌劑，攪拌20min；(3)先將乳化罐加熱到75℃，將步驟(2)獲得的混合物抽入到乳化罐中，將增稠劑加入到乳化罐中，均質(zhì)攪拌300s；加入海水濾液，均質(zhì)攪拌400s，在轉(zhuǎn)速為20r/min條件下攪拌25min；(4)降溫至常溫，即得。實(shí)施例18一種創(chuàng)面保護(hù)組合物的制備方法，包括如下步驟：(1)按質(zhì)量百分比稱取實(shí)施例8中各組份；(2)將保濕劑加入到水相罐中，攪拌加熱至70℃，加入抗菌劑，攪拌25min；(3)先將乳化罐加熱到80℃，將步驟(2)獲得的混合物抽入到乳化罐中，將增稠劑加入到乳化罐中，均質(zhì)攪拌300s；加入海水濾液，均質(zhì)攪拌350s，在轉(zhuǎn)速為20r/min條件下攪拌25min；(4)降溫至常溫，即得。實(shí)施例19一種創(chuàng)面保護(hù)組合物的制備方法，包括如下步驟：(1)按質(zhì)量百分比稱取實(shí)施例9中各組份；(2)將保濕劑加入到水相罐中，攪拌加熱至80℃，加入抗菌劑，攪拌20min；(3)先將乳化罐加熱到70℃，將步驟(2)獲得的混合物抽入到乳化罐中，將增稠劑加入到乳化罐中，均質(zhì)攪拌400s；加入海水濾液，均質(zhì)攪拌300s，在轉(zhuǎn)速為25r/min條件下攪拌25min；(4)降溫至常溫，即得。實(shí)施例20微生物實(shí)驗(yàn)依據(jù)文獻(xiàn)，選擇四種創(chuàng)面常見菌作為實(shí)驗(yàn)菌：表皮葡萄球菌、大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌(四種菌均購自天津市藥檢所)。依據(jù)GB2738-2012中所述實(shí)驗(yàn)方法對(duì)實(shí)施例11-19的創(chuàng)面保護(hù)組合物、四硼酸鈉(質(zhì)量濃度為1.05％四硼酸鈉水溶液)、聚六亞甲基胍(質(zhì)量濃度為1.4％聚六亞甲基胍水溶液)、苯扎溴銨(質(zhì)量濃度為0.01％苯扎溴銨水溶液)、磺胺嘧啶銀(質(zhì)量濃度為0.8％磺胺嘧啶銀水溶液)、聚賴氨酸(質(zhì)量濃度為2％聚賴氨酸水溶液)做抗菌、抑菌實(shí)驗(yàn)?？咕翰捎没瘜W(xué)或物理方法殺滅細(xì)菌或妨礙細(xì)菌生長繁殖及其活性的過程。抑菌：采用化學(xué)或物理方法抑制或妨礙細(xì)菌生長繁殖及活性的過程。表2、抗菌效果(時(shí)間：1.5h)表皮葡萄球菌大腸埃希菌金黃色葡萄球菌綠膿桿菌實(shí)施例1186.35％△78.26％△97.98％△71.68％△實(shí)施例1287.21％△79.36％△98.67％△70.29％△實(shí)施例1386.29％△80.35％△97.46％△71.37％△實(shí)施例1486.95％△81.27％△98.35％△71.06％△實(shí)施例1587.39％△80.39％△99.14％△70.68％△實(shí)施例1688.15％△82.51％△100％△73.51％△實(shí)施例1787.39％79.62％99.34％69.35％實(shí)施例1885.91％80.29％98.91％71.58％實(shí)施例1986.43％79.80％98.75％72.08％聚六亞甲基胍42.19％41.39％59.81％32.68％四硼酸鈉35.93％29.68％38.69％40.49％苯扎溴銨58.61％42.69％69.28％41.36％磺胺嘧啶銀61.39％49.68％72.64％50.15％聚賴氨酸59.68％43.28％63.38％47.24％△與磺胺嘧啶銀組比P＜0.05實(shí)驗(yàn)結(jié)果，在抗菌劑中，不同的抗菌劑對(duì)不同的菌種展現(xiàn)出不同的抗菌性，而實(shí)施例11-19的組合物對(duì)不同菌種均有抗菌性且有顯著性差異。表3、抑菌效果(時(shí)間：1.5h)表皮葡萄球菌大腸埃希菌金黃色葡萄球菌綠膿桿菌實(shí)施例1184.85％△79.16％△96.29％△69.35％△實(shí)施例1284.29％△79.52％△97.05％△69.66％△實(shí)施例1385.17％△78.74％△96.34％△68.59％△實(shí)施例1485.02％△78.65％△96.58％△68.94％△實(shí)施例1585.09％△78.62％△97.64％△67.29％△實(shí)施例1686.39％△80.36％△98.26％△70.26％△實(shí)施例1784.39％76.35％95.02％69.34％實(shí)施例1885.27％78.95％96.31％68.04％實(shí)施例1985.59％79.05％95.80％68.17％聚六亞甲基胍28.95％39.62％70.26％29.43％四硼酸鈉39.46％30.05％52.61％35.61％苯扎溴銨39.12％40.28％56.39％40.39％磺胺嘧啶銀48.66％48.38％62.39％45.39％聚賴氨酸45.28％43.65％55.85％38.41％△與磺胺嘧啶銀比P＜0.05實(shí)驗(yàn)結(jié)果，在抗菌劑中，不同的抗菌劑對(duì)不同的菌種展現(xiàn)出不同的抑菌性，而實(shí)施例11-19的組合物對(duì)不同菌種均有抑菌性且有顯著性差異。實(shí)施例21清潔級(jí)SD大鼠90只，8-10周齡，體重230-260g，雄性，購自北京華阜康生物科技股份有限公司，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周，自由進(jìn)食，飲水。大鼠用3％戊巴比妥鈉(50mg/kg)腹腔注射麻醉。麻醉起效后，背部用理發(fā)器剃毛，硫化鋇脫毛后擦凈備皮區(qū)，用碘酊消毒兩遍，用電熱恒溫干燥箱(75℃，8s)在大鼠背部制成3*3cm的圓形深I(lǐng)I度燒傷創(chuàng)面。SD大鼠90只隨機(jī)分為對(duì)照組(聚氨酯水凝膠燒傷敷料，蘇食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2013第2641260號(hào))、實(shí)施例11組、實(shí)施例12組、實(shí)施例13組、實(shí)施例14組、實(shí)施例15組、實(shí)施例16組、實(shí)施例17組、實(shí)施例18組、實(shí)施例19組。肉眼觀察：分別于制創(chuàng)后第1、3、5、7、10、14天觀察燒傷前后各組溶痂情況，完全溶痂時(shí)間。見表4中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶的測(cè)定：于創(chuàng)面形成后的第1、3、5、7、10、14天隨機(jī)取各組動(dòng)物，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA法)測(cè)定創(chuàng)面組織中中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶。中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶是中性粒細(xì)胞分泌的重要蛋白酶，屬于絲氨酸蛋白酶的糜蛋白超家族成員，它能夠分解幾乎所有細(xì)胞外基質(zhì)和許多重要的血漿蛋白，被認(rèn)為是最具破壞力的酶類蛋白之一。中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶同時(shí)具有防御組織損傷、促分泌、放大炎癥等作用，中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶的增高提示了中性粒細(xì)胞的活性和促進(jìn)對(duì)壞死組織的溶解。加速局部壞死組織的脫落及對(duì)入侵細(xì)菌的防御力，促進(jìn)機(jī)體的自溶性清創(chuàng)，提高局部免疫力以抗感染。見表5。創(chuàng)面愈合率：采用透明方格紙，眼瘡面痂皮邊緣描記創(chuàng)面大小形狀，以用藥前痂皮面積為除濕面積，以后每天分別記錄各組創(chuàng)面痂皮面積，經(jīng)計(jì)算機(jī)掃描后，采用Photoshop和Osiris軟件進(jìn)行計(jì)算創(chuàng)面溶痂率。計(jì)算公式：創(chuàng)面愈合率＝(創(chuàng)面初始痂皮面積-創(chuàng)面形成后第n天的創(chuàng)面痂皮面積)/創(chuàng)面初始痂皮面積*100％。見表6。肉眼觀察：各組大鼠均創(chuàng)面均從燒傷后3天開始溶痂，創(chuàng)面用藥后痂皮逐漸變軟，邊緣翹起，痂皮與基地鏈接的纖維條逐漸減少直至完全分離，痂皮多呈整塊和塊狀分離，去痂后的基地屏障并伴有出血點(diǎn)。自燒傷后5天，各組開始表現(xiàn)出溶痂速度差異。表4溶痂時(shí)間(單位：天)：組別時(shí)間組別時(shí)間實(shí)施例11組10.29±2.68△實(shí)施例16組10.06±2.17△實(shí)施例12組10.28±2.71△實(shí)施例17組10.98±2.48△實(shí)施例13組10.31±2.83△實(shí)施例18組11.00±2.39△實(shí)施例14組10.68±2.57△實(shí)施例19組10.85±2.17△實(shí)施例15組10.20±2.53△對(duì)照組13.29±2.81△△與對(duì)照組相比P<0.01表5創(chuàng)面組織中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶的測(cè)定：△與對(duì)照組相比P<0.01表6、創(chuàng)面愈合率：△與對(duì)照組相比P<0.01以上述實(shí)施例僅表達(dá)了本發(fā)明的具體實(shí)施方式，其描述較為具體和詳細(xì)，但并不能因此而理解為對(duì)本發(fā)明專利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進(jìn)，這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。當(dāng)前第1頁1 2 3