本發(fā)明涉及美容產(chǎn)品
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種富血小板血漿組合物及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：皮膚由表皮、真皮、皮下組織三層組成，是維護(hù)人體生命和健康的重要組成部分，覆蓋于人體表面，直接與外界接觸，是機(jī)體的第一道屏障，極易受到環(huán)境的影響而導(dǎo)致?lián)p傷。在人年齡的増長及外機(jī)環(huán)境因素(如應(yīng)激反應(yīng)、污染、紫外線等)作用下，皮膚會漸漸地表現(xiàn)衰老，出現(xiàn)皮膚功能和美觀的衰落，其皮膚衰老的體表特征為出現(xiàn)色斑、皺紋和皮膚松弛下垂等。皺紋的形成主要是由于內(nèi)部的原因，體細(xì)胞老化是中老年人產(chǎn)生皺紋最根本的原因。這是遺傳學(xué)的規(guī)律，隨著年齡的增長，細(xì)胞活性逐漸降低，代謝能力減弱，造成新生細(xì)胞數(shù)目增速低于細(xì)胞老化速度，老化細(xì)胞水合能力低下和光老化作用增強(qiáng)，導(dǎo)致皮膚縮水性和保濕性下降，加重纖維組織惡化，皮膚干燥易出細(xì)紋。另外，皮膚老化也伴隨著汗腺系統(tǒng)衰退，皮脂分泌不足，加劇皮膚壞損和干燥程度，誘發(fā)皺紋產(chǎn)生。色斑的形成是由于皮膚產(chǎn)生黑色素過多所致，而黑色素形成又與酪氨酸酶密切相關(guān)。在人的表皮基底層細(xì)胞間，分布著黑色素細(xì)胞，它含有的酪氨酸酶可以將酪氨酸氧化成多糖，中間再經(jīng)過一系列的代謝過程，最后便可生成黑色素。黑色素生成越多，皮膚就越黝黑；反之，則皮膚就越白皙。面部的老化雖然是正常人的自然生理過程，但由于人的社會性特點(diǎn)，這種老化表現(xiàn)會給人們造成很大的心理壓力。為了解決上述問題，人們開發(fā)了無數(shù)的美容產(chǎn)品。富血小板血漿(Platelet-richplasma，PRP)是通過離心自體全血而得到的高濃度血小板血漿，含有豐富的生長因子，如血小板衍生生長因子(PDGF)、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β)、胰島素樣生長因子(IGF)、表皮生長因子(EGF)、成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)等。這些生長因子對促進(jìn)細(xì)胞的增殖與分化，增加膠原合成能力，促進(jìn)基質(zhì)合成和沉降及組織的形成有著極其重要的作用，并且生長因子之間有良好的協(xié)同作用。另外，PRP的血清中還含有大量的細(xì)胞粘合蛋白：纖維素、纖粘連蛋白和親玻粘連蛋白，為皮膚修復(fù)提供了良好的3D立體結(jié)構(gòu)支架，還可以收緊松弛的皮膚。在修復(fù)皮膚損傷有良好的應(yīng)用前景。肉毒桿菌毒素作為一種神經(jīng)毒素，注射于局部后能阻斷乙酰神經(jīng)膽堿的釋放，從而阻斷神經(jīng)對肌肉的傳導(dǎo)，從而使肌肉麻痹，達(dá)到除皺美容的目的。通常注射2～3天出現(xiàn)肌肉運(yùn)動(dòng)的減弱。但最終軸突可萌芽形成新運(yùn)動(dòng)終板，同時(shí)無功能的運(yùn)動(dòng)單位被吸收，從而肌肉功能逐漸得以恢復(fù)。肉毒桿菌毒素主要是用來去除動(dòng)態(tài)的皺紋，可以用于去除面上半部的額頭紋(抬頭紋)、眉間紋和眼眶周圍的魚尾紋，也可用于去除面部以下的下頦和前頸部皺紋。酪氨酸酶抑制劑通過抑制酪氨酸酶活性，減少人體因紫外線、光過敏、感光食物等因素，形成大量黑色素，出現(xiàn)斑點(diǎn)、膚色變黑等狀況，從而達(dá)到美白、淡斑的效果?，F(xiàn)有技術(shù)中，PRP可通過細(xì)胞活性因子激活多條細(xì)胞通路，逐步改善細(xì)胞，持續(xù)時(shí)間長，但見效緩慢；單獨(dú)使用肉毒桿菌毒素后4～48小時(shí)內(nèi)即可發(fā)揮作用，一般能維持3～6個(gè)月，如要維持效果需要持續(xù)注射，一般一年內(nèi)要注射3-4次，在使用后需要長時(shí)間(1-2個(gè)月)的恢復(fù)期，僵硬、不自然等副作用對于期間的正常生活影響較大；天然酪氨酸酶抑制劑如氧化白藜蘆醇目前主要應(yīng)用于口服保健品，需要長期服用，見效緩慢。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明目的是提供一種富血小板血漿組合物及其制備方法和應(yīng)用，以解決現(xiàn)有技術(shù)的不足。本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：一種富血小板血漿組合物，包括如下組分：a、富血小板血漿b、肉毒桿菌毒素c、天然酪氨酸酶抑制劑。進(jìn)一步地，含血小板濃度為8×107/mL-1×109/mL，肉毒桿菌毒素1-20U/mL，天然酪氨酸酶抑制劑濃度為0.1-2mg/mL。進(jìn)一步地，所述富血小板血漿制備方法如下：在無菌條件下，將外周血分裝到PRP觸變分離膠提取管中，1500-2000g離心8-12min，觸變分離膠上層的血漿即為富血小板血漿；提取的富血小板血漿中含濃度至少為300×109個(gè)細(xì)胞/L的血小板，紅細(xì)胞濃度低于0.3×1012個(gè)細(xì)胞/L。進(jìn)一步地，所述天然酪氨酸酶抑制劑包括氧化白藜蘆醇、白藜蘆醇、熊果苷或桑皮苷。一種富血小板血漿組合物的制備方法，包括如下步驟：步驟1、制備富血小板血漿；肉毒桿菌毒素用生理鹽水稀釋；天然酪氨酸酶抑制劑用少量溶劑溶解后再用生理鹽水稀釋，濾膜過濾除菌；步驟2、將步驟1的富血小板血漿、生理鹽水稀釋后的肉毒桿菌毒素、濾膜過濾后的天然酪氨酸酶抑制劑按比例混合，得到所述富血小板血漿組合物。進(jìn)一步地，步驟1中生理鹽水稀釋的天然酪氨酸酶抑制劑用0.22μm濾膜過濾除菌。上述富血小板血漿組合物在美容方面的應(yīng)用。進(jìn)一步地，所述美容為面部美容。進(jìn)一步地，將所述富血小板血漿組合物在臉部美容者的臉部進(jìn)行皮內(nèi)點(diǎn)狀注射，間隔5-6mm，每點(diǎn)注射0.02-0.06ml，注射量在3-8ml。進(jìn)一步地，將所述富血小板血漿組合物0.5-2ml直接涂抺在皮膚上皺紋處，敷用15～30min，間隔1天涂抹一次，持續(xù)2周。本發(fā)明的有益效果：1、單獨(dú)使用肉毒桿菌毒素需要1-2個(gè)月的恢復(fù)期，PRP富含的細(xì)胞生長因子能夠激活細(xì)胞活性，天然酪氨酸酶抑制劑(如氧化白藜蘆醇)也可以加速細(xì)胞的更新，聯(lián)合PRP和天然酪氨酸酶抑制劑(如氧化白藜蘆醇)可以明顯改善使用肉毒桿菌毒素帶來的面部表情呆板，局部麻木等癥狀，而且能有效延長作用時(shí)間，使效果持續(xù)到8-12個(gè)月。2、天然酪氨酸酶抑制劑(如氧化白藜蘆醇)目前主要應(yīng)用于口服保健品，需要長期服用，見效緩慢，PRP富含的細(xì)胞生長因子能促進(jìn)細(xì)胞對天然酪氨酸酶抑制劑(如氧化白藜蘆醇)的吸收，加強(qiáng)天然酪氨酸酶抑制劑(如氧化白藜蘆醇)對酪氨酸酶抑制能力，減少黑色素形成，提高美白效果。綜上，本發(fā)明可以減緩肉毒桿菌毒素使用后的副反應(yīng)，縮短恢復(fù)期，使效果持續(xù)時(shí)間延長；同時(shí)提高天然酪氨酸酶抑制劑(如氧化白藜蘆醇)吸收效率，使美白效果得到極大的提高。本發(fā)明富血小板血漿組合物融合了PRP、肉毒桿菌毒素、天然酪氨酸酶抑制劑(如氧化白藜蘆醇)三者的美容優(yōu)勢，三者共同作用可以產(chǎn)生速效、中效、長效的美白除皺效果。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明做更進(jìn)一步地解釋。下列實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明，但并不用來限定本發(fā)明的實(shí)施范圍。一種富血小板血漿組合物，包括如下組分：a、富血小板血漿b、肉毒桿菌毒素c、天然酪氨酸酶抑制劑。在富血小板血漿組合物中，含血小板濃度為8×107/mL-1×109/mL，肉毒桿菌毒素1-20U/mL，天然酪氨酸酶抑制劑濃度為0.1-2mg/mL。所述富血小板血漿制備方法如下：在無菌條件下，將5-12mL外周血分裝到PRP觸變分離膠提取管中，1500-2000g離心8-12min，觸變分離膠上層的血漿即為富血小板血漿；提取的富血小板血漿中含濃度至少為300×109個(gè)細(xì)胞/L的血小板，紅細(xì)胞濃度低于0.3×1012個(gè)細(xì)胞/L。所述天然酪氨酸酶抑制劑包括氧化白藜蘆醇、白藜蘆醇、熊果苷或桑皮苷。一種富血小板血漿組合物的制備方法，包括如下步驟：步驟1、制備富血小板血漿；肉毒桿菌毒素用生理鹽水稀釋；天然酪氨酸酶抑制劑用少量溶劑溶解后再用生理鹽水稀釋，濾膜過濾除菌。其中，富血小板血漿制備方法如下：在無菌條件下，將5-12mL外周血分裝到PRP觸變分離膠提取管中，1500-2000g離心8-12min，觸變分離膠上層的血漿即為富血小板血漿；提取的富血小板血漿中含濃度至少為300×109個(gè)細(xì)胞/L的血小板，紅細(xì)胞濃度低于0.3×1012個(gè)細(xì)胞/L。天然酪氨酸酶抑制劑包括氧化白藜蘆醇、白藜蘆醇、熊果苷或桑皮苷。步驟2、將步驟1的富血小板血漿、生理鹽水稀釋后的肉毒桿菌毒素、濾膜過濾后的天然酪氨酸酶抑制劑按比例混合，得到所述富血小板血漿組合物。得到所述富血小板血漿組合物。制備的富血小板血漿組合物中含血小板濃度為8×107/mL-1×109/mL、肉毒桿菌毒素1-20U/mL、天然酪氨酸酶抑制劑濃度為0.1-2mg/mL。上述富血小板血漿組合物在美容方面的應(yīng)用。所述美容為面部美容。將所述富血小板血漿組合物在臉部美容者的臉部進(jìn)行皮內(nèi)點(diǎn)狀注射，間隔5-6mm，每點(diǎn)注射0.02-0.06ml，注射量在3-8ml?；蛘邔⑺龈谎“逖獫{組合物0.5-2ml直接涂抺在皮膚上皺紋處，敷用15～30min，間隔1天涂抹一次，持續(xù)2周。以下實(shí)施例涉及的肉毒桿菌毒素：蘭州生物制品研究所有限公司的衡力A型肉毒素50單位，用生理鹽水4ml稀釋成25U/ml；氧化白藜蘆醇：純度≥98％，購自梯希愛(上海)化成工業(yè)發(fā)展有限公司，使用前按4mg/10μL溶于DMSO中，完全溶解后，緩慢加入1mL生理鹽水中，氧化白藜蘆醇終濃度4mg/mL，用0.22μm濾膜過濾除菌。PRP觸變分離膠提取管為BDPRP專用采血管，貨號：362761。實(shí)施例1選取10名女性臉部美容者，年齡21-60歲，有不同程度的額紋、魚尾紋、面部皮膚松弛、毛孔粗大，色斑、黑眼圈等情況。PRP制備：無菌條件下，抽取臉部美容者靜脈外周血9-12ml，注入PRP觸變分離膠提取管中，1800g離心10min，吸取分離膠上層血漿3-4ml。10名臉部美容者PRP提取如表1所示。將得到的富血小板血漿分別與濃度為4mg/mL的氧化白藜蘆醇和25U/mL的肉毒桿菌毒素按體積比3:1:1混勻，得到10組6ml富血小板血漿組合物，血小板濃度為2.4×108—5.2×108/mL，氧化白藜蘆醇終濃度為0.8mg/mL，肉毒桿菌毒素為5U/mL。將得到的10組富血小板血漿組合物分別在對應(yīng)臉部美容者臉部進(jìn)行皮內(nèi)點(diǎn)狀注射，間隔約5-6mm，每點(diǎn)注射約0.05ml，總注射量為4.6-6.0ml，在注射后每月隨訪，持續(xù)一年。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示。整個(gè)過程中，無過敏現(xiàn)象發(fā)生，較少出現(xiàn)面部僵直現(xiàn)象，且很快恢復(fù)。所有臉部美容者的皮膚都得到了不同程度的改善，治療過程中，深皺紋逐漸平坦，淺皺紋消失，持續(xù)時(shí)間為8-12個(gè)月。面部皮膚變的有光澤，色斑變小，顏色變淺，毛孔縮小，并能顯著改善黑眼圈和眼袋情況。表1表2編號注射量(ml)除皺效果維持時(shí)間(月)15.5825.61035.21145.5955.3865.8976.01284.6895.410105.710當(dāng)前第1頁1 2 3