本發(fā)明涉及醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體的涉及熊果酸在制備治療痛風(fēng)藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：高尿酸血癥和痛風(fēng)已成為現(xiàn)代生活的文明病之一，是一種由于體內(nèi)嘌呤合成代謝增多，尿酸產(chǎn)生超量或因尿酸排泄不良而導(dǎo)致血中尿酸升高，高尿酸血癥只是痛風(fēng)疾病的一個生化標(biāo)志。痛風(fēng)的臨床表現(xiàn)常分為急性期、間歇期、慢性期和腎臟病變等，主要表現(xiàn)為痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎和痛風(fēng)性腎病。腎臟病變的發(fā)生是長期高尿酸血癥發(fā)展的結(jié)果，高尿酸血癥患者腎臟病理檢查幾乎均有不同程度的損害，大約1/3患者在病程中出現(xiàn)腎臟癥狀。關(guān)于高尿酸血癥的治療，繼發(fā)性高尿酸血癥主要針對其基礎(chǔ)疾病進(jìn)行治療，而原發(fā)性高尿酸血癥的治療，一般采用飲食、運(yùn)動控制加以藥物治療。抑制尿酸生成藥物主要機(jī)制為抑制黃嘌呤氧化酶（XO）的活性。別嘌醇是這類藥的代表，一直以來都是抗痛風(fēng)的臨床一線藥物，雖然降尿酸效果顯著，但對腎臟的保護(hù)功能甚弱。本發(fā)明涉及的化合物熊果酸，其CAS號:77-52-1，可從薔薇科植物枇杷的葉子中提取得到，是存在于天然植物中的一種三萜類化合物，具有鎮(zhèn)靜、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗?jié)?、降低血糖等多種生物學(xué)效應(yīng)。本發(fā)明將其用作制備抗通風(fēng)藥物為首次公開。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供熊果酸在制備治療痛風(fēng)藥物中的應(yīng)用，為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，擬采用如下技術(shù)方案：本發(fā)明一方面涉及熊果酸在制備治療痛風(fēng)藥物中的應(yīng)用，所述的化合物的結(jié)構(gòu)式為：在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，所述的藥物中包括或者不包括其它活性成分。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方式中，所述的藥物不含有其它活性成分，還含有藥學(xué)上可接受的輔料。本發(fā)明為痛風(fēng)病人提供了新的治療藥物，具有見效快、療程短、效果穩(wěn)定的特點(diǎn)。具體實(shí)施方式若未特別說明，實(shí)施例中所用的技術(shù)手段為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的常規(guī)手段。實(shí)施例1下面通過藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)來進(jìn)一步說明其藥物活性。實(shí)驗(yàn)例1：熊果酸抗急性痛風(fēng)炎癥實(shí)驗(yàn)：1:方法①溶液配制5g尿酸加1000ml蒸餾水煮沸，加5％NaOH溶液調(diào)pH7.4，攪拌，冷卻析晶制成尿酸鈉結(jié)晶(MSU)。將制好的MSU10mg高壓滅菌，加不含血清的DMEM培養(yǎng)液10ml，研磨配成1mg/ml的DMEM溶液。實(shí)驗(yàn)時，此溶液再加DMEM培養(yǎng)液配成不同濃度DMEM的MSU溶液。熊果酸2.5mg，用乙醇溶解，終濃度<0.02％，再加無血清的DMEM培養(yǎng)液，配制成濃度2.5ug/ml、25ug/ml、250ug/ml。陽性藥吲哚美辛2.0mg，方法同熊果酸，配制濃度20ug/ml。②血管內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC株，由廣西某醫(yī)學(xué)院提供，細(xì)胞經(jīng)支原體檢測，無支原體污染，細(xì)胞經(jīng)0.25％胰蛋白酶消化，含10％小牛血清的DMEM培養(yǎng)液中和，離心(1000r/min×6min)，去上清液，加含10％小牛血清的DMEM培養(yǎng)液，移入細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，放37℃、5％CO2培養(yǎng)箱中傳代培養(yǎng)。③對MSU刺激HUVEC活力的影響HUVEC在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，待生長至70％～80％融合時，以0.25％胰蛋白酶消化、離心，10％小牛血清DMEM培養(yǎng)液洗滌3次，用10％小牛血清DMEM培養(yǎng)液調(diào)成4×104/ml細(xì)胞懸液，植入96孔板(每孔200ul)，培養(yǎng)24小時后輕吸出原培養(yǎng)液，進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)，每組各8孔，具體分組及加液如下：對照組(200ulDMEM培養(yǎng)液)、模型組(100ug/mlMSU溶液)、干預(yù)A組(100ug/mlMSU溶液+2.5ug/ml熊果酸)、干預(yù)B組(100ug/mlMSU溶液+25ug/ml熊果酸)、干預(yù)C組(100ug/mlMSU溶液+250ug/ml熊果酸)，加液后繼續(xù)放37℃、5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時，收集上清液，剩余的HUVEC用于測定細(xì)胞活性，每孔再加5mg/mlMTT液20ul，繼續(xù)放37℃、5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4小時后，棄MTT液，加入二甲基亞砜200ul溶解，震蕩，于酶標(biāo)儀讀取吸光度值，波長490nm。陽性藥組加液(100ug/mlMSU溶液+20ug/ml吲哚美辛)，其他方法同上。數(shù)據(jù)統(tǒng)計學(xué)處理，細(xì)胞活力(％)＝實(shí)驗(yàn)組吸光度值/對照組吸光度值×100％，結(jié)果見表1。與對照組相比，模型組細(xì)胞活力顯著減小(P<0.01，P<0.05)，陽性藥吲哚美辛及熊果酸干預(yù)后細(xì)胞活力顯著提高(P<0.01，P<0.05)，并強(qiáng)于對照組，其中，熊果酸各濃度組的細(xì)胞活力強(qiáng)于陽性藥吲哚美辛。表1熊果酸對MSU刺激的血管內(nèi)皮細(xì)胞活力的影響(X±s)組別藥物濃度（微克/毫升）n/孔細(xì)胞活力（%）對照組08100模型組0884陽性藥物208103干預(yù)A組2.58169干預(yù)B組258200干預(yù)C組2508195④對ICAM-1表達(dá)影響將處于對數(shù)生長期的HUVEC用0.25％的胰蛋白酶消化，輕輕吹打，制成細(xì)胞懸液，調(diào)整細(xì)胞密度為5×109/L，接種于細(xì)胞培養(yǎng)瓶中。待細(xì)胞長滿后(約24h)，棄去上清液，分為下列組：對照組、模型組(100ug/mlMSU溶液)、熊果酸組(100ug/mlMSU溶液+25ug/ml熊果酸)，繼續(xù)培養(yǎng)24小時，PBS收集細(xì)胞，離心去上清，加入CD54單克隆抗體，30min后，PBS洗滌，重懸細(xì)胞，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測其陽性細(xì)胞百分率(n＝10000)，重復(fù)3次，結(jié)果見表2。表2熊果酸對MSU刺激的血管內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1表達(dá)的影響(X±s)組別藥物濃度ICAM表達(dá)對照組012±67模型組0231±55熊果酸組25155±37與模型組比較，**P<0.01*P<0.05，與對照組比較，##P<0.01#P<0.052、結(jié)果結(jié)果顯示，空白組HUVEC幾乎無ICAM-1表達(dá)，模型組ICAM-1的表達(dá)最高，與模型組相比，熊果酸對ICAM-1的表達(dá)有較強(qiáng)的抑制作用。結(jié)論：用MSU致HUVEC損傷的急性痛風(fēng)模型評價顯示，熊果酸可保護(hù)MSU致HUVEC損傷，減少細(xì)胞凋亡，提高細(xì)胞活性，抑制ICAM-1表達(dá)，具有抗痛風(fēng)活性，熊果酸可用于制備治療急性痛風(fēng)炎癥藥物。以上所述是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例，應(yīng)當(dāng)指出，對于本
技術(shù)領(lǐng)域：
的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明所述原理的前提下，還可以作出若干改進(jìn)和潤飾，這些改進(jìn)和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。當(dāng)前第1頁1 2 3