本發(fā)明涉及中藥技術(shù)領(lǐng)域，更具體涉及一種用于防治痤瘡的復(fù)方銀翹解毒乳膏。

背景技術(shù)：

一、中醫(yī)發(fā)展

許多中醫(yī)醫(yī)家提出多種辨證的角度去治療痤瘡，其中，從溫病學(xué)衛(wèi)氣營血的辨證角度去治療，有一定可取之處。主要有一下幾個方面：

1、熱在營分

《溫?zé)嵴摗贰盃I分受熱,則血液受劫,心神不安,夜甚無寐,成斑點隱隱”,臨床癥常見丘疹色紅,瘙癢或不癢,皮膚潮紅,伴見身熱夜盛,心煩少寐,口干,舌降少苔,脈細數(shù)。治療遵葉天士在《溫?zé)嵴摗分小霸谛l(wèi),汗之可也,到氣才可清氣,入營尤可透熱轉(zhuǎn)氣……”之治則,以清營湯透熱解毒、清營養(yǎng)陰。

2、血熱熾盛

葉天士在《溫?zé)嵴摗贰叭胙趾难獎友?直須涼血散血”之法,治療宜清熱解毒涼血散瘀,選用犀角地黃湯加減。《溫病條辨》上焦篇第11條曰“太陰溫病,血從上溢者,犀角地黃湯合銀翹散主之”。血分病引起的痤瘡，應(yīng)涼血滋陰，輔以宣散表熱。

3、氣血兩燔

《溫病條辨》上焦篇第16條:“太陰溫病,不可發(fā)汗。發(fā)汗而汗不出者,必發(fā)斑疹……發(fā)斑者,化斑湯主之。”本方是在《傷寒論》白虎湯的基礎(chǔ)上加清營涼血之品而成。此是熱淫于內(nèi),治以咸寒,佐以苦甘法也。

盡管痤瘡臨床辨證復(fù)雜多樣,但就其感受“火邪”、“熱毒”的病因以及病機傳變特點而言,該病符合溫病范疇,因此溫病衛(wèi)氣營血辨證理論,溫病“在衛(wèi)汗之可也,到氣才可清氣,入營猶可透熱轉(zhuǎn)氣,人血就恐耗血動血,直須涼血散血”的治療大法,對痤瘡辨證治療具有指導(dǎo)作用。

在物質(zhì)文化高度繁榮的現(xiàn)代，人們越來越重視外在形象，西醫(yī)不再符合人們對于美容產(chǎn)品純天然、無副作用的要求，而中醫(yī)藥在未來醫(yī)療美容方面的作用將顯得尤為重要，而更多的中醫(yī)人才也將會投入更多的精力在中醫(yī)美容方向，這也將成為中醫(yī)發(fā)展的新方向之一。

二、西醫(yī)發(fā)展

近幾年，西醫(yī)在痤瘡的認識方面也有了一定的進展：

痤瘡是侵犯毛囊皮脂腺單元的一種疾病，在正常的代謝過程中，毛囊皮脂腺導(dǎo)管上皮細胞脫屑，皮脂腺分泌皮脂，皮脂腺攜帶脫屑從毛囊口排除，其中毛囊可以寄生大量的皮膚正常菌群，例如痤瘡丙酸桿菌、需氧葡萄球菌等。不正常的因素導(dǎo)致的性激素紊亂和皮脂腺痤瘡丙酸桿菌的大量繁殖、皮脂腺導(dǎo)管的異常角化、皮脂的大量分泌導(dǎo)致了痤瘡的產(chǎn)生。

1、激素雄激素支配了皮脂腺的發(fā)育和皮脂的分泌。皮膚中睪酮在5q一還原酶的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)楦咝ЯΦ亩洳G酮(DHT)，DHT是激發(fā)皮脂增生的主要原因，其可與皮脂腺細胞內(nèi)受體結(jié)合，刺激皮脂腺細胞的增生和分泌。對小鼠耳朵使用DHT，能通過上調(diào)反應(yīng)固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白(SREBP)通路促進皮質(zhì)細胞增生、分化、促進皮脂生成L2J。皮脂腺受雄性激素刺激后使皮脂腺增生，合成分泌的皮脂增多且濃稠。同時，毛囊皮脂腺角化過度而使排泄皮脂的通道變窄，皮脂增多但排泄不暢，厭氧環(huán)境促進了痤瘡丙酸桿菌繁殖，形成了皮脂增生一排脂受阻一細菌感染為軸心的痤瘡發(fā)病機制。青春期雄激素水平增高，同時皮脂腺對雄激素的敏感性增高，導(dǎo)致了青春期好發(fā)痤瘡。痤瘡與毛囊皮脂腺單位雄激素受體(AR)對雄激素的敏感性有關(guān)。下丘腦的促皮質(zhì)素釋放激素(CRH)系統(tǒng)也能誘導(dǎo)脂質(zhì)和類固醇的生成，該系統(tǒng)的異常也易導(dǎo)致痤瘡的發(fā)生。

2、細胞因子細胞因子是一類由免疫細胞(淋巴細胞、單核巨噬細胞)和相關(guān)細胞(成纖維細胞、內(nèi)皮細胞)產(chǎn)生的調(diào)節(jié)細胞功能的高活性多功能低分子蛋白質(zhì)。各種細胞因子在痤瘡發(fā)病過程的多個環(huán)節(jié)，如皮脂腺導(dǎo)管的角化過度、粉刺形成、炎癥反應(yīng)中起了重要的作用。研究發(fā)現(xiàn)多種細胞因子都和痤瘡有關(guān)，包括(slL-2R、TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8等)。體外培養(yǎng)皮質(zhì)細胞研究中發(fā)現(xiàn)P.acnes和脂多糖(LPS)能明顯上調(diào)促炎癥因子的表達，脂多糖能刺激皮質(zhì)細胞基質(zhì)細胞源性因子(CXCL8)、TNF-α僅和IL一1α釋放，P.acnes能刺激CXCL8和TNF-α的釋放，而CRH可通過一個IL-1β依賴的信號通路增強IL-6和IL-8的釋放。在前阿片黑素細胞皮質(zhì)激素(POMC)系統(tǒng)中，α-促黑激素(α-MSH)肽能抑制IL-113-誘導(dǎo)IL-8的釋放，在痤瘡的炎癥機制中，a-MSH被認為是一個中樞促炎癥介質(zhì)。在皮質(zhì)細胞表面發(fā)現(xiàn)能表達活性血小板活性因子受體(PAFR)，PAF-R和調(diào)節(jié)炎性介質(zhì)表達有關(guān)，包括環(huán)氧合酶-2、前列腺素E和IL-8。對比痤瘡女性患者和正常女性血清sIL-2R的水平，發(fā)現(xiàn)患者的sIL-2的水平明顯大于正常組(P<0.01)，推測淋巴介導(dǎo)的遲發(fā)超敏反應(yīng)可能參與痤瘡致炎。

3、痤瘡丙酸桿P.acnes是革蘭陽性無芽孢厭氧桿菌，主要定居在人類皮膚毛囊皮脂腺濾泡。P.acnes能產(chǎn)生蛋白酶、透明質(zhì)酸酶和一些趨化因子，誘導(dǎo)產(chǎn)生抗體及激活補體，引起毛囊的炎癥，并導(dǎo)致毛囊漏斗部的過度角化形成粉刺；皮脂的異常大量分泌，皮脂排泄不暢，又能為提供良好的厭氧環(huán)境，從而引起炎癥性丘疹。P.acnes可以刺激角質(zhì)形成細胞產(chǎn)生大量的IL-1α、TNF-α和GM-csf，而這些因子可以趨化炎癥細胞到毛囊周圍，引起炎癥損傷。P.acnes引起局部炎癥的機制有：①細胞壁成分肽聚糖通過毛囊上皮擴散至周圍組織，刺激巨噬細胞產(chǎn)生IL-8和TNF并上調(diào)黏附分子的表達；②多種中性粒細胞和淋巴細胞趨化因子，以及IL-8和TNF誘導(dǎo)中性粒細胞和淋巴細胞聚集到毛囊皮脂腺上皮；③P.acnes與特異性抗體集合，經(jīng)過經(jīng)典途徑激活補體系統(tǒng)，產(chǎn)生對中性粒細胞有強大趨化作用的補體片段C5a；④P.acnes分泌多種蛋白酶和脂酶，破壞了毛囊壁的完整性；⑤細胞壤成分肽聚糖、多糖刺激皮脂腺周圍組織產(chǎn)生肉芽腫反應(yīng)；⑥P.acnes在直接免疫應(yīng)答中誘導(dǎo)角質(zhì)形成細胞表達TLR-2和TLR-4，Toll樣受體能促進IL-1α的功能和促炎癥因子的產(chǎn)生；⑦P.acnes通過刺激成纖維細胞(hDF)產(chǎn)生TNF-α，TNF-α能介導(dǎo)金屬蛋白酶-2(MMP-2)的釋放，MMP被認為和痤瘡的炎癥有關(guān)；⑧P.acnes刺激皮質(zhì)細胞產(chǎn)生抗菌肽和β-防衛(wèi)素-2(hBD-2)，不同P.acnes菌簇能分泌不同的蛋白，而且他們誘導(dǎo)角蛋白細胞和皮質(zhì)細胞炎癥反應(yīng)的能力也不同，主要是通過誘導(dǎo)抗菌肽和hBD-2產(chǎn)生協(xié)同抗菌作用。

4、皮脂腺導(dǎo)管異常角化痤瘡患者的角質(zhì)細胞過度增生，引起皮脂腺導(dǎo)管上皮細胞層不斷增厚、管徑變小、通暢度減弱，最終導(dǎo)致毛囊皮脂腺導(dǎo)管急性閉塞，毛囊隆起而形成粉刺。皮脂的分泌抑制為P.acnes提供了良好的厭氧環(huán)境，導(dǎo)致了繼發(fā)性的炎癥痤瘡。在電子顯微鏡下觀察，角化部位可以見到透明角質(zhì)顆粒數(shù)量和體積變大，脂質(zhì)小滴積累。細胞因子1L-1α能誘導(dǎo)角質(zhì)形成細胞的過度角化，漏斗部角蛋白細胞角化過度和增生過度伴隨著角蛋白細胞keratin(K)6和K16的增生過度，IL-1α能通過自分泌產(chǎn)物誘導(dǎo)K16表達激活基底的角蛋白形成細胞。在閉合粉刺中終端分化的異常對漏斗部的過度角化起了重要作用，雄激素依賴性的成纖維細胞生長因子受體(FGFR)-2信號系統(tǒng)也被認為和漏斗部的過度角化有關(guān)，Ser252Trp-FGFR2mutation通過增加IL-1α的表達來增加FGFR2的信號系統(tǒng)。免疫組化學(xué)研究證實，基底層的角質(zhì)形成細胞和毛囊角質(zhì)細胞異常分化，這些異常能導(dǎo)致皮脂中的亞油酸降低，而亞油酸是毛囊上皮細胞生長的必需脂肪酸。若亞油酸缺乏可使角質(zhì)形成細胞變致密，形成粉刺。皮脂腺的角化可能與5α-還原酶、局部維生素A缺乏有關(guān)。

5、其他因素調(diào)節(jié)神經(jīng)肽P物質(zhì)在痤瘡炎性病變早期可能起著重要的控制作用。除此之外，還與表皮脯氨酸過多癥、遺傳、心理、婦科月經(jīng)失調(diào)、缺鋅、飲食、吸煙等因素有關(guān)。

基于此種認識，西醫(yī)的治療方法主要是：

1、局部外用藥物維A酸類(維A酸乳膏、阿達帕林凝膠、他扎羅汀凝膠)、過氧化苯甲酰、抗生素類(克林霉素、紅霉素、氯霉素等)、壬二酸、硫磺洗劑等。

2、口服抗生素首選四環(huán)素類(米諾環(huán)素、多西環(huán)素等)，其次為大環(huán)內(nèi)酯類(紅霉素)，避免選擇常用于治療系統(tǒng)感染的抗生素如左氧氟沙星等。抗生素療程通常6～12周。

3、口服異維A酸對于嚴(yán)重的痤瘡，口服異維A酸是標(biāo)準(zhǔn)療法，也是目前治療痤瘡最有效的方法。療程以達到最小累積劑量60mg/kg為目標(biāo)。

4、抗雄激素治療如口服避孕藥復(fù)方醋酸環(huán)丙孕酮片，適用于女性中、重度痤瘡患者，伴有雄激素水平過高表現(xiàn)(如多毛、皮脂溢出等)或多囊卵巢綜合征。遲發(fā)型痤瘡及月經(jīng)期前痤瘡顯著加重的女性患者也可考慮應(yīng)用口服避孕藥。

5、口服糖皮質(zhì)激素主要用于暴發(fā)性或聚合性痤瘡，遵循短期、小劑量、與其他方法聯(lián)合應(yīng)用的原則。

綜上所述，急需開發(fā)一種治療痤瘡有效的藥物，特別是開發(fā)一種治療痤瘡有效的中藥藥物。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

(一)要解決的技術(shù)問題

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題就是如何開發(fā)中藥治療痤瘡，而提供一種用于防治痤瘡的復(fù)方銀翹解毒乳膏。

(二)技術(shù)方案

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種用于防治痤瘡的復(fù)方銀翹解毒乳膏(所用原料均市購獲得)，該乳膏含有：銀花、連翹，大青葉、白花蛇舌草、玄參、丹皮、土茯苓、白術(shù)、地丁、黃柏。

優(yōu)選地，所述乳膏按重量份計含有：銀花10-20份、連翹10-20份，大青葉5-15份、白花蛇舌草10-20份、玄參10-20份、丹皮5-15份、土茯苓5-15份、白術(shù)10-20份、地丁5-15份、黃柏5-15份。

優(yōu)選地，所述乳膏按重量份計含有：銀花15份、連翹15份，大青葉10份、白花蛇舌草15份、玄參15份、丹皮10份、土茯苓10份、白術(shù)15份、地丁10份、黃柏10份。

優(yōu)選地，所述乳膏按重量份計還含有：對羥基苯甲酸乙脂40-60份、凡士林150-180份、單硬脂酸甘油酯70-90份、16-18醇40-60份、液體石蠟40-60份、乙二胺四乙酸二鈉鹽5-15份和甘油10-20份。

優(yōu)選地，所述乳膏按重量份計還含有：對羥基苯甲酸乙脂50份、凡士林160份、單硬脂酸甘油酯80份、16-18醇50份、液體石蠟50份、乙二胺四乙酸二鈉鹽10份和甘油15份。

本發(fā)明還提供了用于防治痤瘡的復(fù)方銀翹解毒乳膏的制備方法，該方法包括下述步驟：

步驟一：制備中藥膏：按配比稱取藥物，加水煎煮2次，每次1h，合并煎液，過濾，濾液適當(dāng)濃縮后加1倍量乙醇使沉淀，靜置12～24h，濾取上清液，濃縮至比重為1.20，加對羥基苯甲酸乙脂、凡士林，混勻，制成藥膏；

步驟二：制備油相：稱取單硬脂酸甘油酯、16-18醇、液體石蠟，混合，加熱，在85-90℃溫度下保溫，得到油相；

步驟三：制備水相：將乙二胺四乙酸二鈉鹽加入純水中，在80-85℃溫度下保溫，得到水相；

步驟四：乳化：將油相加入水相中，在70-80℃下按同一方向均勻攪拌，完全乳化，得到乳化液；

步驟五：制備乳膏：在步驟四得到乳化液中加入甘油和中藥膏，攪拌均勻，在45-55℃加入香精和防腐劑，冷卻到室溫，即得乳膏。

本發(fā)明還提供了用于防治痤瘡的復(fù)方銀翹解毒乳膏在制備面膜上的用途。

(三)有益效果

本發(fā)明對于風(fēng)濕熱瘀滯，肺胃熱盛，蘊結(jié)成毒，溫毒發(fā)于肌膚成痤瘡的病人有良好的治療效果。

具體實施方式

下面結(jié)合實施例對本發(fā)明的實施方式作進一步詳細描述。以下實施例用于說明本發(fā)明，但不能用來限制本發(fā)明的范圍。

用銀花、連翹清熱解毒,取其輕清宣透之品以清宣肺衛(wèi)之邪,加丹皮、大青葉、玄參、白花蛇舌草、地丁以清營涼血解毒,此方風(fēng)熱得去,營血分熱毒得清；土茯苓、白術(shù)淡滲與燥濕相結(jié)合，除濕解毒；黃柏清熱解毒燥濕。

實施例1

本實施例復(fù)方銀翹解毒乳膏按重量計含有：銀花10g、連翹10g，大青葉5g、白花蛇舌草10g、玄參10g、丹皮5g、土茯苓5g、白術(shù)10g、地丁5g、黃柏5g。

該復(fù)方銀翹解毒乳膏的制備方法如下：按配比稱取藥物，加水煎煮2次，每次1h，合并煎液，過濾，濾液適當(dāng)濃縮后加1倍量乙醇使沉淀，靜置12h，濾取上清液，濃縮至比重為1.20，加對羥基苯甲酸乙脂40g、凡士林150g，混勻，制成藥膏。按處方組成稱取單硬脂酸甘油酯70g、16-18醇40g、液體石蠟40g，混合，加熱，在90℃溫度下保溫，得到油相。將乙二胺四乙酸二鈉鹽5g加入純水中，在85℃溫度下保溫，得到水相。將油相加入水相中，在80℃下按同一方向均勻攪拌，完全乳化，得到乳化液。在得到乳化液中加入甘油10g和中藥膏，攪拌均勻，在55℃加入香精和防腐劑，冷卻到室溫，即得乳膏。

實施例2

本實施例復(fù)方銀翹解毒乳膏按重量計含有：銀花20g、連翹20g，大青葉15g、白花蛇舌草20g、玄參20g、丹皮15g、土茯苓15g、白術(shù)20g、地丁15g、黃柏15g。

該復(fù)方銀翹解毒乳膏的制備方法如下：按配比稱取藥物，加水煎煮2次，每次1h，合并煎液，過濾，濾液適當(dāng)濃縮后加1倍量乙醇使沉淀，靜置24h，濾取上清液，濃縮至比重為1.20，加對羥基苯甲酸乙脂60g、凡士林180g，混勻，制成藥膏。按處方組成稱取單硬脂酸甘油酯90g、16-18醇60g、液體石蠟60g，混合，加熱，在85℃溫度下保溫，得到油相。將乙二胺四乙酸二鈉鹽15g加入純水中，在80℃溫度下保溫，得到水相。將油相加入水相中，在70℃下按同一方向均勻攪拌，完全乳化，得到乳化液。在得到乳化液中加入甘油20g和中藥膏，攪拌均勻，在45℃加入香精和防腐劑，冷卻到室溫，即得乳膏。

實施例3

本實施例復(fù)方銀翹解毒乳膏按重量計含有：銀花15g、連翹15g，大青葉10g、白花蛇舌草15g、玄參15g、丹皮10g、土茯苓10g、白術(shù)15g、地丁10g、黃柏10g。

該復(fù)方銀翹解毒乳膏的制備方法如下：按配比稱取藥物，加水煎煮2次，每次1h，合并煎液，過濾，濾液適當(dāng)濃縮后加1倍量乙醇使沉淀，靜置18h，濾取上清液，濃縮至比重為1.20，加對羥基苯甲酸乙脂50g、凡士林160g，混勻，制成藥膏。按處方組成稱取單硬脂酸甘油酯80g、16-18醇50g、液體石蠟50g，混合，加熱，在90℃溫度下保溫，得到油相。將乙二胺四乙酸二鈉鹽10g加入純水中，在85℃溫度下保溫，得到水相。將油相加入水相中，在80℃下按同一方向均勻攪拌，完全乳化，得到乳化液。在得到乳化液中加入甘油15g和中藥膏，攪拌均勻，在55℃加入香精和防腐劑，冷卻到室溫，即得乳膏。

實驗例1

1、急性皮膚毒性試驗

1.1實驗動物：70只小白鼠。

1.2試劑：復(fù)方銀翹解毒乳膏面膜。

1.3試驗方法：

1.3.1分組：取70只小白鼠，隨機分成7組，即完整皮膚高、中、低劑量組和破損皮膚高、中、低劑量組(此為6組實驗組)以及正常對照組，每組10只。

1.3.2脫毛：給藥前將小白鼠對稱性脫毛，脫毛面積大約為4cm×5cm。破損皮膚組采用手術(shù)刀片在脫毛皮膚區(qū)域作#字劃痕，以滲血為度。

1.3.3給藥：分別將2.5g(高劑量)、2g(中劑量)、1.5g(低劑量)復(fù)方銀翹解毒乳膏面膜均勻涂抹于6組實驗組小白鼠的脫毛區(qū)。再以玻璃紙和雙層紗布封包受試區(qū)。24h后清洗受試物。

1.3.4觀察指標(biāo)：連續(xù)觀察14天，每日觀察小白鼠體重、進食量、呼吸、體態(tài)、眼、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、四肢活動、糞便性狀及死亡情況。

結(jié)果顯示：完整皮膚受試的各組小鼠皮膚未見明顯異常，可見毛發(fā)生長，并且小白鼠體重、進食量、呼吸、體態(tài)、眼、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、四肢活動、糞便性狀未見明顯異常，未見小鼠死亡情況；同時，破損皮膚受試的各組小鼠創(chuàng)口明顯愈合，皮膚未見明顯異常，可見毛發(fā)生長，并且小白鼠體重、進食量、呼吸、體態(tài)、眼、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、四肢活動、糞便性狀未見明顯異常，未見小鼠死亡情況。

2、皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗

2.1實驗動物：30只小白鼠。

2.2試劑：2，4一二硝基氯代苯，乙醇，空白賦形劑。

2.3試驗方法：

2.3.1分組：將小白鼠隨機分成3組，其中第1組為復(fù)方銀翹解毒乳膏面膜組(復(fù)方銀翹解毒乳膏面膜0.2g/只)，第2組為陽性對照組(1％2，4一二硝基氯代苯0.2mL/只)，第3組為空白對照組(空白賦形劑0.2g/只)，每組10只。

2.3.2脫毛：于給藥前24h。將30只小白鼠背部兩側(cè)脫毛，去毛區(qū)范圍每側(cè)為3cm×3cm。

2.3.3給藥：陽性致敏物可用2，4一二硝基氯代苯配成1％的致敏濃度和0.1％的激發(fā)濃度(用70％的乙醇作為溶劑)。①致敏接觸：取復(fù)方銀翹解毒乳膏面膜0.2g涂于小白鼠左側(cè)脫毛區(qū)，用兩層紗布和一層玻璃紙覆蓋，再以無刺激膠布封閉、固定，6h后去除敷料和清洗受試物。第7天和第14天以同樣方法各重復(fù)1次?？瞻讓φ战M與陽性對照組的方法同上。②激發(fā)接觸：于末次給復(fù)方銀翹解毒乳膏面膜致變態(tài)反應(yīng)后14天，將復(fù)方銀翹解毒乳膏面膜0.2g涂于小白鼠右側(cè)脫毛區(qū)，其中陽性對照組給予0.1％2，4一二硝基氯代苯，6h后去掉受試物，即刻觀察皮膚變態(tài)反應(yīng)情況，之后于24，48，72h再次觀察皮膚反應(yīng)，根據(jù)表1評分標(biāo)準(zhǔn)進行評測，評分大于等于2即為陽性反應(yīng)。評測是否存在變態(tài)反應(yīng)見表1-2。

表1：皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗皮膚反應(yīng)評分

表2：致敏

注：當(dāng)致敏率為0時，可判為未見皮膚變態(tài)反應(yīng)。

結(jié)果顯示：各組小鼠皮膚未見變態(tài)反應(yīng)。

3、長期皮膚毒性試驗

3.1實驗動物：40只小白鼠。

3.2試劑：復(fù)方銀翹解毒乳膏面膜，水合氯醛。

3.3試驗方法：

3.3.1分組：將40只小白鼠，隨機分成4組，即高、中、低劑量組和正常對照組。

3.3.2脫毛：每組10只，給藥前將小白鼠背部兩側(cè)脫毛，脫毛面積為4cm×5cm。

3.3.3給藥：分別取2.5g(高劑量)、2g(中劑量)、1.5g(低劑量)均勻涂抹于脫毛區(qū)。再以雙層紗布和玻璃紙覆蓋，再以無刺激性膠布封閉、固定，4h后清洗受試物。每日給藥1次，連續(xù)給藥60天。每日觀察小白鼠體重、進食量、呼吸、體態(tài)、眼、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、四肢活動、糞便性狀及死亡情況。

3.3.4評測指標(biāo)：末次給藥后24h用10％的水合氯醛麻醉小白鼠(8mL/kg)，然后取腹主動脈血3—4mL進行血液學(xué)、血液生化學(xué)檢查，并對受試區(qū)皮膚組織及各臟器進行病理學(xué)檢查。檢查臟器包括：肝、腎、肺、心臟、脾、胃、胰腺、甲狀腺、腦及生殖器官。

結(jié)果顯示：小鼠受試區(qū)皮膚組織及肝、腎、肺、心臟、脾、胃、胰腺、甲狀腺、腦及生殖器官經(jīng)病理學(xué)檢查未見異常，說明復(fù)方銀翹解毒乳膏長期使用，無中毒反應(yīng)。

4、兔耳模型實驗——療效試驗

4.1實驗動物：新西蘭大耳白兔共30只，體重2.5kg-3kg。

4.2試劑：煤焦油，純度為50％，用95％酒精配制成濃度為2％的煤焦油溶液，硫磺粉刺洗劑。

4.3實驗方法：

4.3.1分組：將50只新西蘭長耳白兔隨機分成實驗組44只和實驗對照組6只。

4.3.2造模：于實驗組每只兔耳內(nèi)側(cè)面耳導(dǎo)管開口處約2cm×2cm范圍，每日涂2％煤焦油溶液1次，每次約涂1-0.5ml，連續(xù)2周以制作動物痤瘡模型。正常對照組未作任何處理以作對照。造模成功后(造模成功的兔耳涂藥處可見局部組織明顯增厚、變硬、粗糙，毛囊口有黑色角栓。呈黑頭粉刺狀，毛囊口隆起呈丘疹狀，整個兔耳表面粗糙。通過電鏡下觀察可見角化的細胞出現(xiàn)許多脂滴；毛囊上皮細胞中張力微絲、橋粒增多；細胞中透明角質(zhì)顆粒增多并變大；線粒體腫脹，嵴間隙增大、斷裂，部分形成髓鞘樣結(jié)構(gòu)，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張。痤瘡模型制造成功以三度Ⅳ級法為標(biāo)準(zhǔn)：①輕度(I級)——粉刺為主要的皮損，可有少量丘疹和膿皰，總病灶數(shù)少于30個。②中度(Ⅱ～Ⅲ級)——其中Ⅱ級有粉刺，伴有中等量的丘疹和膿皰，總病灶數(shù)在31～50個之間；Ⅲ級有粉刺，伴有大量丘疹和膿皰，偶見大的炎性損害，分布廣泛，總病灶數(shù)在51～100個之間，有少數(shù)結(jié)節(jié)。③重度(IV級)——除上述皮疹外，還伴有3個以上結(jié)節(jié)與囊腫)。兔耳痤瘡造模參見劉文彬《痤瘡模型的研究現(xiàn)狀》。

4.3.3二次分組：取實驗組32只IV級痤瘡白兔再次隨機分為4組，即涂抹復(fù)方銀翹解毒乳膏并使用離子噴霧10min組(1組)8只、只使用復(fù)方銀翹解毒乳膏組(2組)8只、硫磺粉刺洗劑組(3組)8只和生理鹽水組(4組)8只，其中硫磺粉刺洗劑組為陽性對照組，生理鹽水組為陰性對照組。

4.3.4給藥:于兔耳涂煤焦油處分別用復(fù)方銀翹解毒乳膏并離子噴霧10min、只使用復(fù)方銀翹解毒乳膏、硫磺粉刺洗劑、生理鹽水薄薄涂一層，不見顏色為佳，每天1次，每次約0.5ml，連續(xù)3周，觀察組織變化。

實驗結(jié)果：1組實驗效果最好，能有效將IV級痤瘡降為更低等級痤瘡，最終治愈，且使用時間最短；2組能將大多數(shù)IV級痤瘡降為更低等級痤瘡并治愈，療效較1組差，使用時間較1組長；3組能將一部分痤瘡治愈，但療效次于2組，使用時間較2組更長；4組實驗對象無明顯改善。

5、動物實驗治愈率

6、典型案例

焦玲，女，25歲，初診日期：2016年6月18日。患者因面部反復(fù)長痤瘡數(shù)年，使用抗生素軟膏涂抹局部能緩解，但病情仍反復(fù)，現(xiàn)見面部散在分布紅癤，部分結(jié)節(jié)有膿液，稍有癢痛，伴有臉部灼熱，時有便秘，月經(jīng)推后，舌質(zhì)暗紅苔黃膩，脈細數(shù)。此為風(fēng)濕熱蘊結(jié)皮膚成毒，囑用復(fù)方銀翹解毒乳膏涂抹局部，一天三次，連用七天。

2016年6月25日復(fù)診：現(xiàn)見面部紅癤明顯減少，顏色變淺，化膿明顯減少，臉部灼熱癢痛感消除，囑用復(fù)方銀翹解毒乳膏涂抹局部，一天三次善后。

以上實施方式僅用于說明本發(fā)明，而非對本發(fā)明的限制。盡管參照實施例對本發(fā)明進行了詳細說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，對本發(fā)明的技術(shù)方案進行各種組合、修改或者等同替換，都不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的精神和范圍，均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍當(dāng)中。