本發(fā)明涉及一種具有清咽功能的組合物及其制備方法和應(yīng)用，屬于醫(yī)藥和保健食品領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
咽炎為耳鼻咽喉科常見(jiàn)疾病之一，據(jù)統(tǒng)計(jì)發(fā)病率約占喉部疾病的10-20％，依據(jù)病程長(zhǎng)短和病理改變性質(zhì)不同，分為急性咽炎、慢性咽炎兩大類。
急性咽炎臨床表現(xiàn)為：起病急，初起時(shí)咽部干燥、灼熱，繼而疼痛，吞咽唾液時(shí)咽痛往往比進(jìn)食時(shí)更為明顯；可伴發(fā)熱、頭痛、食欲不振和四肢酸痛；侵及喉部，可伴聲嘶和咳嗽。急性咽炎常因受涼、過(guò)度疲勞、煙酒過(guò)度等致全身及局部抵抗力下降，病原微生物感染而引發(fā)本病。營(yíng)養(yǎng)不良，患慢性心、腎、關(guān)節(jié)疾病，生活及生活環(huán)境不佳，經(jīng)常接觸高溫、粉塵、有害刺激氣體等人群皆易患病。
慢性咽炎的典型癥狀為：咽部有異物感，作癢微痛，干燥灼熱等；常有粘稠分泌物附于咽后壁不易清除，夜間尤甚，“吭吭”作聲，意欲清除而后快。分泌物可引起刺激性咳嗽，甚或惡心、嘔吐。慢性咽炎的患者經(jīng)常感到咽部不適，稍一受涼、勞累，或講話多、較長(zhǎng)時(shí)間沒(méi)喝水，便覺(jué)咽痛、灼熱加重，咽癢引起陣陣刺激性咳嗽，影響休息。慢性咽炎多為非菌性炎癥，病程長(zhǎng)，癥狀頑固，由于局部炎癥長(zhǎng)期刺激導(dǎo)致咽部粘膜及粘膜下微循環(huán)障礙，組織缺氧，腺體分泌功能失調(diào)，代謝紊亂，咽部神經(jīng)末梢處于慢性刺激狀態(tài)，病情反復(fù)發(fā)作，對(duì)人們的工作和生活造成嚴(yán)重的影響。
目前西藥治療大多是選用抗病毒藥，如嗎啉雙呱、金剛烷、干擾素等或抗生素及磺胺類藥物暫時(shí)控制病情，但服用太多抗生素對(duì)人體有害無(wú)益，因?yàn)闉E用抗生素可能導(dǎo)致咽喉正常菌群失調(diào)，并會(huì)引起細(xì)菌抗藥性加強(qiáng)，人體免疫功能減退，致使病情反復(fù)難愈。中藥對(duì)病毒及細(xì)菌感染均有較好療效，它以中醫(yī)辯證理論為基礎(chǔ)，以滋陰增液、滋養(yǎng)肺腎、清熱化痰、潤(rùn)喉利咽為治則，能夠發(fā)揮更好的治療效果。
本申請(qǐng)組合物是根據(jù)咽炎的中醫(yī)藥研究、發(fā)病原因及中醫(yī)理論，組方而成。方中雪梨是我國(guó)一種傳統(tǒng)的止咳良果，功能生津、止咳、清熱；川貝母化痰止咳，清熱散結(jié)；蒲公英清熱解毒，消腫散結(jié)；青果清熱，利咽，生津，解毒；玉竹、麥冬滋陰潤(rùn)肺，生津養(yǎng)胃；枸杞子滋補(bǔ)肝腎，明目潤(rùn)肺；全方中雪梨、川貝母清肺利咽、化痰止咳；蒲公英、青果清火熱，解熱毒，預(yù)防熱毒引起的燥熱、咳嗽等，從而綜合預(yù)防咽喉疾病的發(fā)生。
現(xiàn)代藥理研究表明：川貝母中含有生物堿類物質(zhì)有很好的鎮(zhèn)咳平喘作用，其醇提物對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌等病菌有明顯抑制作用；蒲公英中含有的甾醇類物質(zhì)，對(duì)金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌有較強(qiáng)的殺滅作用，對(duì)肺炎雙球菌、綠膿桿菌等亦有殺滅作用，通過(guò)這些活性物質(zhì)對(duì)有害病菌的殺滅作用來(lái)預(yù)防咽喉疾病的發(fā)生；雪梨中含有多種維生素和礦物質(zhì)；麥冬中的皂苷類、多糖類物質(zhì)和枸杞子中含有的多糖類物質(zhì)能有效維護(hù)身體健康，增加機(jī)體免疫力，提高身體綜合抵抗疾病的能力。綜合以上內(nèi)容可以看出，全方不僅對(duì)通過(guò)對(duì)引起口腔、咽喉疾病的多種病菌的抑制、殺滅作用來(lái)保護(hù)口腔、咽喉免受損害，而且通過(guò)加強(qiáng)機(jī)體免疫力來(lái)提高機(jī)體對(duì)疾病的抵抗力，增強(qiáng)體制，達(dá)到全面維護(hù)機(jī)體健康的效果。
本發(fā)明人對(duì)該組方進(jìn)行了系統(tǒng)藥學(xué)研究，在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，合理配伍，以內(nèi)養(yǎng)外，標(biāo)本兼顧，全面調(diào)節(jié)機(jī)體健康，以達(dá)到清咽之功效。本發(fā)明組合物幾種原料的配伍應(yīng)用能夠起到減少用量，增強(qiáng)療效的協(xié)同作用。本方經(jīng)過(guò)詳細(xì)的工藝研究，進(jìn)行了安全性及功效等試驗(yàn)，證明本產(chǎn)品安全性高，適用人群廣泛，患者依從性好，服用方便，具有確切的效果，適合作為保健食品或藥品長(zhǎng)期服用。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的首要目的在于提供一種新的具有清咽功能的組合物。
為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案：一種具有清咽功能的組合物，它是由下列重量份的原料制成的：雪梨10～40份、川貝母0.1～5份、蒲公英0.5～10份、青果0.1～5份、玉竹0.5～10份、麥冬0.1～5份、枸杞子0.1～5份。
作為進(jìn)一步的優(yōu)選方案，本發(fā)明組合物是由下列重量份的原料制成的：雪梨25份、川貝母0.5份、蒲公英2份、青果1份、玉竹2份、麥冬2份，枸杞子2份。
作為另一種的優(yōu)選方案，本發(fā)明組合物是由下列重量份的原料制成的：雪梨25份、川貝母0.5份、蒲公英2份、青果0.5份、玉竹1.2份、麥冬0.5份，枸杞子0.5份。
作為另一種的優(yōu)選方案，本發(fā)明組合物是由下列重量份的原料制成的：雪梨25份、川貝母0.8份、蒲公英1.9份、青果0.8份、玉竹1.25份、麥冬0.8份，枸杞子0.8份。
在本發(fā)明的一種技術(shù)方案中，本發(fā)明組合物的制備方法包含如下步驟：按上述配比稱取雪梨、川貝母、蒲公英、青果、玉竹、麥冬、枸杞子七種原料混合后粉碎，或粉碎后混合得到。
在本發(fā)明的一種技術(shù)方案中，本發(fā)明組合物的制備方法包含如下步驟：按上述配比稱取雪梨、川貝母、蒲公英、青果、玉竹、麥冬、枸杞子七種原料混合后提取，經(jīng)過(guò)濾、濃縮、干燥得到。
在本發(fā)明的一種技術(shù)方案中，本發(fā)明組合物制備方法包含如下步驟：按上述配比稱取雪梨、川貝母、蒲公英、青果、玉竹、麥冬、枸杞子七種原料的步驟，制備雪梨提取物的步驟，制備川貝母提取物的步驟，制備蒲公英提取物的步驟，制備青果提取物的步驟，制備玉竹提取物的步驟，制備麥冬提取物的步驟，制備枸杞子提取物的步驟。
作為進(jìn)一步優(yōu)選的方案：本發(fā)明組合物由包含如下步驟的制備方法制備而成：
(1)將雪梨去皮、核、清洗后，榨汁，過(guò)濾，濾液濃縮，得濃縮物Ⅰ；
(2)麥冬、枸杞子、玉竹經(jīng)水提后過(guò)濾，濾液濃縮，得濃縮物Ⅱ；
(3)蒲公英、青果、川貝母經(jīng)醇提過(guò)濾、濃縮、得濃縮物Ⅲ；
(4)將濃縮物Ⅰ、濃縮物Ⅱ、濃縮物Ⅲ混合均勻。
本發(fā)明的第二個(gè)目的在于提供一種新的具有清咽功能的口服制劑。
為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案：雪梨10～40份、川貝母0.1～5份、蒲公英0.5～10份、青果0.1～5份、玉竹0.5～10份、麥冬0.1～5份、枸杞子0.1～5份，制備成組合物并與藥用輔料一起混合，按常規(guī)方法制備。在一些方案中優(yōu)選制備成硬膠囊劑、軟膠囊劑、片劑、顆粒劑、散劑、丸劑、袋泡茶中的一種。
作為優(yōu)選技術(shù)方案，本發(fā)明口服制劑采用以下技術(shù)方案：雪梨25份、川貝母0.5份、蒲公英2份、青果1份、玉竹2份、麥冬2份，枸杞子2份，制備成組合物并與藥用輔料一起混合，按常規(guī)方法制備。在一些方案中優(yōu)選制備成硬膠囊劑、軟膠囊劑、片劑、顆粒劑、散劑、丸劑、袋泡茶中的一種。
作為優(yōu)選技術(shù)方案，本發(fā)明口服制劑采用以下技術(shù)方案：雪梨25份、川貝母0.5份、蒲公英2份、青果0.5份、玉竹1.2份、麥冬0.5份，枸杞子0.5份，制備成組合物并與藥用輔料一起混合，按常規(guī)方法制備。在一些方案中優(yōu)選制備成硬膠囊劑、軟膠囊劑、片劑、顆粒劑、散劑、丸劑、袋泡茶中的一種。
作為優(yōu)選技術(shù)方案，本發(fā)明口服制劑采用以下技術(shù)方案：雪梨25份、川貝母0.8份、蒲公英1.9份、青果0.8份、玉竹1.25份、麥冬0.8份，枸杞子0.8份，制備成組合物并與藥用輔料一起混合，按常規(guī)方法制備。在一些方案中優(yōu)選制備成硬膠囊劑、軟膠囊劑、片劑、顆粒劑、散劑、丸劑、袋泡茶中的一種。
作為優(yōu)選技術(shù)方案，本發(fā)明上述口服制劑的制備方法包含如下步驟：
(1)將雪梨去皮、核、清洗后，榨汁，過(guò)濾，濾液濃縮，得濃縮物Ⅰ；
(2)麥冬、枸杞子、玉竹經(jīng)水提后過(guò)濾，濾液濃縮，得濃縮物Ⅱ；
(3)蒲公英、青果、川貝母經(jīng)醇提過(guò)濾、濃縮、得濃縮物Ⅲ；
(4)將濃縮物Ⅰ、濃縮物Ⅱ、濃縮物Ⅲ混合均勻。
本發(fā)明的第三個(gè)目的在于提供一種具有清咽功能的顆粒劑。
為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案：雪梨10～40份、川貝母0.1～5份、蒲公英0.5～10份、青果0.1～5份、玉竹0.5～10份、麥冬0.1～5份、枸杞子0.1～5份，制備成組合物并與藥用輔料一起混合，按常規(guī)方法制備成顆粒劑。在一些實(shí)施方案中，制備所述顆粒劑的藥用輔料優(yōu)選包含淀粉、糊精。其中，作為優(yōu)選技術(shù)方案，雪梨、川貝母、蒲公英、青果、玉竹、麥冬、枸杞子制備而成的組合物和所述藥用輔料重量比優(yōu)選30～40:70～60；作為優(yōu)選技術(shù)方案，制備上述顆粒劑的藥用輔料重量配比為淀粉10～45份，糊精10～35份。
作為優(yōu)選技術(shù)方案，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：雪梨25份、川貝母0.5份、蒲公英2份、青果1份、玉竹2份、麥冬2份，枸杞子2份，制備成組合物并與藥用輔料一起混合，按常規(guī)方法制備成顆粒劑。在一些實(shí)施方案中，制備所述顆粒劑的藥用輔料優(yōu)選包含淀粉、糊精。其中，作為優(yōu)選技術(shù)方案，雪梨、川貝母、蒲公英、青果、玉竹、麥冬、枸杞子制備而成的組合物和所述藥用輔料重量比優(yōu)選30～40:70～60；作為優(yōu)選技術(shù)方案，制備上述顆粒劑的藥用輔料重量配比為淀粉15～40份，糊精15～30份。
作為優(yōu)選技術(shù)方案，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：雪梨25份、川貝母0.5份、蒲公英2份、青果0.5份、玉竹1.2份、麥冬0.5份，枸杞子0.5份，制備成組合物并與藥用輔料一起混合，按常規(guī)方法制備成顆粒劑。在一些實(shí)施方案中，制備所述顆粒劑的藥用輔料優(yōu)選包含淀粉、糊精。其中，其中，作為優(yōu)選技術(shù)方案，雪梨、川貝母、蒲公英、青果、玉竹、麥冬、枸杞子制備而成的組合物和所述藥用輔料重量比優(yōu)選30～40:70～60；作為優(yōu)選技術(shù)方案，制備上述顆粒劑的藥用輔料重量配比為淀粉20～38份，糊精20～30份。
作為優(yōu)選技術(shù)方案，本發(fā)明顆粒劑采用以下技術(shù)方案：雪梨25份、川貝母0.8份、蒲公英1.9份、青果0.8份、玉竹1.25份、麥冬0.8份，枸杞子0.8份，制備成組合物并與藥用輔料一起混合，按常規(guī)方法制備成顆粒劑。在一些實(shí)施方案中，制備所述顆粒劑的藥用輔料優(yōu)選包含淀粉、糊精。其中，其中，作為優(yōu)選技術(shù)方案，雪梨、川貝母、蒲公英、青果、玉竹、麥冬、枸杞子制備而成的組合物和所述藥用輔料重量比優(yōu)選30～40:70～60；作為優(yōu)選技術(shù)方案，制備上述顆粒劑的藥用輔料重量配比為淀粉35份，糊精25份。
作為優(yōu)選技術(shù)方案，本發(fā)明上述顆粒劑的制備方法包含如下步驟：
(1)將雪梨去皮、核、清洗后，榨汁，過(guò)濾，濾液濃縮，得濃縮物Ⅰ；
(2)麥冬、枸杞子、玉竹經(jīng)水提后過(guò)濾，濾液濃縮，得濃縮物Ⅱ；
(3)蒲公英、青果、川貝母經(jīng)醇提過(guò)濾、濃縮、得濃縮物Ⅲ；
(4)將濃縮物Ⅰ、濃縮物Ⅱ、濃縮物Ⅲ混合均勻。
(5)將淀粉、糊精與步驟(4)所得混合物混合均勻，經(jīng)制粒、整粒，得顆粒劑。
本發(fā)明的第四個(gè)目的在于提供一種本發(fā)明所述組合物在制備預(yù)防或治療咽喉疾病的藥品或保健品中的應(yīng)用。
本發(fā)明所述的組合物是多種中藥成分聯(lián)合協(xié)同配方，不是成分的簡(jiǎn)單疊加，動(dòng)物試驗(yàn)及臨床試驗(yàn)表明本發(fā)明組合物及其制劑對(duì)咽喉疾病具有很好的治療和預(yù)防作用。
具體實(shí)施方案
下述是結(jié)合具體實(shí)施例和實(shí)驗(yàn)例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。但這些實(shí)施例和實(shí)驗(yàn)例僅限于說(shuō)明本發(fā)明而不是用于限制本發(fā)明的范圍。
第一部分：本發(fā)明組合物、制劑及其制備方法
實(shí)施例1
制備方法：
雪梨按處方量稱好后，去皮、核、清洗，然后進(jìn)入榨汁機(jī)，清汁過(guò)濾，再減壓濃縮、低溫干燥、粉碎，得雪梨提取物。
麥冬、枸杞子、玉竹按處方量稱好后，加入8倍量水提取2小時(shí)，提取液過(guò)濾，濾液減壓濃縮，低溫干燥、粉碎，得麥冬枸杞玉竹提取物。
蒲公英、青果、川貝母按處方量稱好后，加8倍量乙醇回流提取1小時(shí)，過(guò)濾，濾液減壓濃縮、低溫干燥、粉碎，得蒲公英青果川貝母提取物。
將上述三種提取物混合均勻，即得本發(fā)明組合物。
實(shí)施例2
制備方法：
雪梨按處方量稱好后，去皮、核、清洗，然后進(jìn)入榨汁機(jī)，清汁過(guò)濾，再減壓濃縮、低溫干燥、粉碎，得雪梨提取物。
麥冬、枸杞子、玉竹按處方量稱好后，加入10倍量水提取1小時(shí)，提取液過(guò)濾，濾液減壓濃縮，低溫干燥、粉碎，得麥冬枸杞玉竹提取物。
蒲公英、青果、川貝母按處方量稱好后，加10倍量乙醇回流提取1小時(shí)，過(guò)濾，濾液減壓濃縮、低溫干燥、粉碎，得蒲公英青果川貝母提取物。
將上述三種提取物混合均勻，即得本發(fā)明組合物。
實(shí)施例3
組方：
制備方法：
雪梨按處方量稱好后，去皮、核、清洗，然后進(jìn)入榨汁機(jī)，清汁過(guò)濾，再減壓濃縮、低溫干燥、粉碎，得雪梨提取物。
麥冬、枸杞子、玉竹按處方量稱好后，分別加入4倍量水提取兩次，每次1.5小時(shí)，合并提取液，提取液過(guò)濾，濾液減壓濃縮，低溫干燥、粉碎，得麥冬枸杞玉竹提取物。
蒲公英、青果、川貝母按處方量稱好后，分別加6倍量乙醇回流提取兩次，每次1.5小時(shí)，合并提取液，提取液過(guò)濾，濾液減壓濃縮、低溫干燥、粉碎，得蒲公英青果川貝母提取物。
將上述三種提取物混合均勻，即得本發(fā)明組合物。
實(shí)施例4
組方：
制備方法：
雪梨按處方量稱好后，去皮、核、清洗，然后進(jìn)入榨汁機(jī)，清汁過(guò)濾，再減壓濃縮、低溫干燥、粉碎，得雪梨提取物。
麥冬、枸杞子、玉竹按處方量稱好后，分別加入5倍量水提取兩次，每次1小時(shí)，合并提取液，提取液過(guò)濾，濾液減壓濃縮，低溫干燥、粉碎，得麥冬枸杞玉竹提取物。
蒲公英、青果、川貝母按處方量稱好后，分別加5倍量乙醇回流提取兩次，每次1小時(shí)，合并提取液，提取液過(guò)濾，濾液減壓濃縮、低溫干燥、粉碎，得蒲公英青果川貝母提取物。
將上述三種提取物混合均勻，即得本發(fā)明組合物。
實(shí)施例5
組方：
制備方法：
雪梨按處方量稱好后，去皮、核、清洗，然后進(jìn)入榨汁機(jī)，清汁過(guò)濾，再減壓濃縮、低溫干燥、粉碎，得雪梨提取物。
麥冬、枸杞子、玉竹按處方量稱好后，分別加入5倍量水提取兩次，每次1小時(shí)，合并提取液，提取液過(guò)濾，濾液減壓濃縮，低溫干燥、粉碎，得麥冬枸杞玉竹提取物。
蒲公英、青果、川貝母按處方量稱好后，分別加5倍量乙醇回流提取兩次，每次1小時(shí)，合并提取液，提取液過(guò)濾，濾液減壓濃縮、低溫干燥、粉碎，得蒲公英青果川貝母提取物。
將上述三種提取物混合均勻，即得本發(fā)明組合物。
實(shí)施例6
組方：
制備方法：
雪梨按處方量稱好后，去皮、核、清洗，然后進(jìn)入榨汁機(jī)，清汁過(guò)濾，再減壓濃縮、低溫干燥、粉碎，得雪梨提取物。
麥冬、枸杞子、玉竹按處方量稱好后，分別加入5倍量水提取兩次，每次1小時(shí)，合并提取液，提取液過(guò)濾，濾液減壓濃縮，低溫干燥、粉碎，得麥冬枸杞玉竹提取物。
蒲公英、青果、川貝母按處方量稱好后，分別加5倍量乙醇回流提取兩次，每次1小時(shí)，合并提取液，提取液過(guò)濾，濾液減壓濃縮、低溫干燥、粉碎，得蒲公英青果川貝母提取物。
將上述三種提取物混合均勻，即得本發(fā)明組合物。
實(shí)施例8
組方：
制備方法：
雪梨按處方量稱好后，去皮、核、清洗，然后進(jìn)入榨汁機(jī)，清汁過(guò)濾，再減壓濃縮、低溫干燥、粉碎，得雪梨提取物。
麥冬、枸杞子、玉竹按處方量稱好后，分別加入5倍量水提取兩次，每次1小時(shí)，合并提取液，提取液過(guò)濾，濾液減壓濃縮，低溫干燥、粉碎，得麥冬枸杞玉竹提取物。
蒲公英、青果、川貝母按處方量稱好后，分別加5倍量乙醇回流提取兩次，每次1小時(shí)，合并提取液，提取液過(guò)濾，濾液減壓濃縮、低溫干燥、粉碎，得蒲公英青果川貝母提取物。
將上述三種提取物混合均勻，即得本發(fā)明組合物。
實(shí)施例9
將實(shí)施例1得到的組合物加糊精和硬脂酸鎂適量，混合至均勻，灌入膠囊，制得膠囊劑。
實(shí)施例10
將實(shí)施例2得到的本發(fā)明組合物加糊精和淀粉適量，混合至均勻，壓片，制得片劑。
實(shí)施例11
將實(shí)施例8得到的本發(fā)明組合物加淀粉、糊精適量，混合至均勻，制粒，制得顆粒劑。
實(shí)施例12
將實(shí)施例5得到的本發(fā)明組合物加淀粉和蜂蜜適量，混合至均勻，制丸，制得丸劑。
實(shí)施例13
將實(shí)施例4得到的本發(fā)明組合物混合至均勻，分小袋包裝，制得散劑。
實(shí)施例14
稱取淀粉35g、糊精35g，加入實(shí)施例1得到的本發(fā)明組合物30g，混勻后加入干法制粒機(jī)中制粒，然后通過(guò)14目篩整粒，在自動(dòng)小袋分裝機(jī)上分裝，得顆粒劑。
實(shí)施例15
稱取淀粉35g、糊精25g，加入實(shí)施例2得到的本發(fā)明組合物40g，混勻后加入干法制粒機(jī)中制粒，然后通過(guò)14目篩整粒，在自動(dòng)小袋分裝機(jī)上分裝，得顆粒劑。
實(shí)施例16
稱取淀粉40g、糊精30g，加入實(shí)施例3得到的本發(fā)明組合物30g，混勻后加入干法制粒機(jī)中制粒，然后通過(guò)14目篩整粒，在自動(dòng)小袋分裝機(jī)上分裝，得顆粒劑。
實(shí)施例17
稱取淀粉30g、糊精30g，加入實(shí)施例4得到的本發(fā)明組合物40g，混勻后加入干法制粒機(jī)中制粒，然后通過(guò)14目篩整粒，在自動(dòng)小袋分裝機(jī)上分裝，得顆粒劑。
對(duì)比例1
組方
制備方法：
雪梨按處方量稱好后，去皮、核、清洗，然后進(jìn)入榨汁機(jī)，清汁過(guò)濾，再減壓濃縮、低溫干燥、粉碎，得雪梨提取物。
麥冬、枸杞子、玉竹按處方量稱好后，分別加入8倍量水提取2小時(shí)，提取液過(guò)濾，濾液減壓濃縮，低溫干燥、粉碎，得麥冬枸杞玉竹提取物。
蒲公英、青果、川貝母按處方量稱好后，分別加8倍量乙醇回流提取1小時(shí)，過(guò)濾，濾液減壓濃縮、低溫干燥、粉碎，得蒲公英青果川貝母提取物。
將上述三種提取物混合均勻，即得對(duì)比例1組合物。
對(duì)比例2
組方
制備方法：
雪梨按處方量稱好后，去皮、核、清洗，然后進(jìn)入榨汁機(jī)，清汁過(guò)濾，再減壓濃縮、低溫干燥、粉碎，得雪梨提取物。
麥冬、枸杞子、玉竹按處方量稱好后，分別加入8倍量水提取2小時(shí)，提取液過(guò)濾，濾液減壓濃縮，低溫干燥、粉碎，得麥冬枸杞玉竹提取物。
蒲公英、青果、川貝母按處方量稱好后，分別加8倍量乙醇回流提取1小時(shí)，過(guò)濾，濾液減壓濃縮、低溫干燥、粉碎，得蒲公英青果川貝母提取物。
將上述三種提取物混合均勻，即得對(duì)比例2組合物。
對(duì)比例3
組方
雪梨 25kg
制備方法：
雪梨按處方量稱好后，去皮、核、清洗，然后進(jìn)入榨汁機(jī)，清汁過(guò)濾，再減壓濃縮、低溫干燥、粉碎，得對(duì)比例3組合物。
對(duì)比例4
組方
玉竹 0.5kg 麥冬 1.2kg 枸杞子0.5kg
制備方法：
麥冬、枸杞子、玉竹按處方量稱好后，分別加入8倍量水提取2小時(shí)，提取液過(guò)濾，濾液減壓濃縮，低溫干燥、粉碎，得對(duì)比例4組合物。
對(duì)比例5
組方
川貝母 0.5kg 蒲公英 2.0kg 青果0.5kg
制備方法：
蒲公英、青果、川貝母按處方量稱好后，分別加8倍量乙醇回流提取1小時(shí)，過(guò)濾，濾液減壓濃縮、低溫干燥、粉碎，得對(duì)比例5組合物。
第二部分 毒理及藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)例1毒理實(shí)驗(yàn)
1、小鼠急性毒性試驗(yàn)：選用清潔級(jí)昆明種小鼠40只，體重18-22克，雌雄各半，按Horn氏法進(jìn)行試驗(yàn)。最高劑量為21500mg/kg.bw(以蒸餾水為溶劑，下同)，采用等體積灌胃法(0.2ml/10g.bw)24小時(shí)內(nèi)一次灌胃，連續(xù)觀察兩周。記錄中毒表現(xiàn)及死亡情況。
2、大鼠急性毒性試驗(yàn)：選用清潔級(jí)SD大鼠40只，體重180-220克，雌雄各半，按Horn氏法進(jìn)行試驗(yàn)。劑量為21500mg/kg.bw，采用等體積灌胃法(1ml/100g.bw)24小時(shí)內(nèi)二次灌胃，連續(xù)觀察兩周。記錄中毒表現(xiàn)及死亡情況。
3、遺傳毒性試驗(yàn)：
(1)Ames試驗(yàn)：本實(shí)驗(yàn)采用平板摻入法，分加與不加S9混合液兩種。試驗(yàn)前樣品經(jīng)XAD-Ⅱ樹脂柱過(guò)濾洗脫預(yù)處理。劑量分別為0.005、0.025、0.25、1.0、5.0mg/皿，另設(shè)空白對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照組。陽(yáng)性對(duì)照組使用2-AF20ug/皿、2,4,7-TNFone0.5ug/皿、NaN32.5ug/皿、絲裂霉素C4.0ug/皿、1、8-二羥基蒽醌50ug/皿，每個(gè)劑量組做3個(gè)平皿，重復(fù)做2次。菌種為T A97(a)、T A98、T A100、TA102四株菌，由中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院營(yíng)養(yǎng)與食品衛(wèi)生研究所提供，S9購(gòu)自中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院勞動(dòng)衛(wèi)生與職業(yè)病研究所，試劑從北京化學(xué)試劑公司購(gòu)進(jìn)。
(2)小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)：選用清潔級(jí)昆明種小鼠50只，體重25-30克，隨機(jī)分為五組，每組10只，雌雄各半；設(shè)三個(gè)劑量組：5000、10000、20000mg/kg體重，同時(shí)設(shè)陰性對(duì)照組(蒸餾水)和陽(yáng)性對(duì)照組(CP.40mg/kg)，各組均間隔24小時(shí)兩次給樣，第二次給樣后6小時(shí)取胸骨骨髓制片，每只動(dòng)物計(jì)數(shù)1000個(gè)嗜多染紅細(xì)胞，計(jì)算其微核發(fā)生率。
(3)小鼠精子畸形試驗(yàn)：選用清潔級(jí)昆明種雄性小鼠25只，體重30-35克，隨機(jī)分為五組，每組五只；設(shè)三個(gè)劑量組：5000、10000、20000mg/kg體重，同時(shí)設(shè)陰性對(duì)照組(蒸餾水)和陽(yáng)性對(duì)照組(CP.40mg/kg)，連續(xù)經(jīng)口給樣5天。從首次給樣計(jì)第35天處死動(dòng)物，取雙側(cè)附睪制片，每只動(dòng)物計(jì)數(shù)1000個(gè)精子，計(jì)算畸形率。
(4)30天喂養(yǎng)試驗(yàn)：選用清潔級(jí)SD大鼠80只，體重50-70g，隨機(jī)分成四組，每組20只。雌雄各半，單籠飼養(yǎng)。受試物設(shè)三個(gè)試驗(yàn)劑量，分別為2.63g(有效成分)/kg體重、5.25g(有效成分)/kg體重、10.50g(有效成分)/kg體重(相當(dāng)于推薦量的100倍)，設(shè)一個(gè)陰性對(duì)照組。按每100g大鼠每天食用10g飼料計(jì)算，三個(gè)劑量組的受試物分別以2.63％、5.25％、10.50％摻入到基礎(chǔ)飼料中喂飼各組動(dòng)物，陰性對(duì)照組只給基礎(chǔ)飼料，連續(xù)30天。喂養(yǎng)期間各組動(dòng)物均自由進(jìn)食和飲水，每周稱鼠體重并記錄飼料消耗量一次，試驗(yàn)?zāi)┢诓晌惭M(jìn)行血液學(xué)和生化學(xué)檢查。觀察指標(biāo)有生長(zhǎng)發(fā)育、食物利用率、血液學(xué)檢查(采用血球計(jì)數(shù)儀測(cè)定)、生化學(xué)檢查(分離血清后采用相應(yīng)試劑盒及F1型全自動(dòng)生化分析儀(德國(guó)Human公司)測(cè)定)，試驗(yàn)?zāi)┢谔幩来笫?，解剖取肝、脾、腎、睪丸(卵巢)稱重，計(jì)算臟器系數(shù)，然后對(duì)肝、腎、胃、腸進(jìn)行病理組織學(xué)檢查(石蠟切片)。
本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明組合物對(duì)兩種性別的大、小鼠的LD50均大于21500mg/kg.bw，說(shuō)明該產(chǎn)品無(wú)毒物；三項(xiàng)致突變?cè)囼?yàn)結(jié)果陰性；大鼠30天喂養(yǎng)試驗(yàn)各項(xiàng)指標(biāo)均未見(jiàn)異常。
上述實(shí)驗(yàn)采用的藥品為實(shí)施例15制備的顆粒劑。
實(shí)驗(yàn)例2對(duì)急性咽炎模型大鼠的影響
取健康大鼠，隨機(jī)分組。實(shí)驗(yàn)開始第1～3d上、下午各用15％氨水噴大鼠咽喉部1次，每次噴3撳，正常對(duì)照組噴等量的蒸餾水。第4d灌胃給予試驗(yàn)藥物，對(duì)照組給予相同體積的蒸餾水，連續(xù)5d，每天一次。第9d處死動(dòng)物后立即取下咽部粘膜及粘膜下組織肉眼觀察，并用10％甲醛固定，作病理學(xué)檢查，其病變程度采用秩和檢驗(yàn)和記分t檢驗(yàn)兩種方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。結(jié)果見(jiàn)表1(秩和檢驗(yàn))、表2(分值t檢驗(yàn))。
表1對(duì)大鼠咽部粘膜及其下組織炎癥病變等級(jí)的影響(n＝10)
注：與模型組相比*
表2對(duì)大鼠咽部粘膜及其下組織炎癥病變積分的影響(n＝10)
注：與模型組相比*P＜0.05，**P＜0.01
病理分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：“-”正常結(jié)構(gòu)?！?”咽喉上皮增生不明顯，上皮下輕度炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)(積1分)?！?+”咽喉上皮明顯增生，上皮下有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)(積2分)。“+++”咽喉上皮中度增生，并形成釘突，上皮下有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)(積3分)?！?+++”咽喉上皮重度增生，腺上皮有壞死，并形成釘突，上皮下有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)(積4分)。
結(jié)論：肉眼觀察，造模后大鼠咽部均有不同程度的腫脹、充血，給藥組與模型組相比，病變程度有所減輕。鏡下觀察，造模大鼠咽組織的粘膜出現(xiàn)不同程度的上皮外層角層化、上皮層增生，上皮下固有層小血管擴(kuò)張、充血、水腫。表1、表2所示，藥物各組與模型組相比，粘膜增生及角化有明顯減輕，上皮下固有層腫脹及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)有所好轉(zhuǎn)，在相同的藥物劑量下，本發(fā)明組合物對(duì)急性咽炎大鼠模型的治療效果較對(duì)比例各組合物的好，證明本發(fā)明組合物有更好的抗炎作用。兩種統(tǒng)計(jì)結(jié)果基本相同，本發(fā)明組合物組均有更明顯的治療作用，雪梨、川貝母、蒲公英、青果、玉竹、麥冬、枸杞子七種中藥具有協(xié)同作用，且在本發(fā)明的重量配比范圍的效果更好。
實(shí)驗(yàn)例3對(duì)慢性咽炎兔模型動(dòng)物的影響
日本大耳白兔，隨機(jī)抽取10只(雌雄各半)作正常對(duì)照組，其余(雌雄各半)造模。按彭氏造模法，運(yùn)用2.5％的氨水和松節(jié)油造模，將造模成功的日本大耳白兔慢性咽炎模型，雌雄配對(duì)，隨機(jī)分組，分為模型組、給藥組。給藥組分別每天灌胃給藥，正常對(duì)照組和模型組每天用與給藥組等容的蒸餾水灌胃。每日灌胃1次，連續(xù)給藥2周后，先從兔耳緣靜脈取血4ml，運(yùn)用血球壓積管離心測(cè)定法檢測(cè)血球壓積，用3-990型電腦多功能血流變學(xué)系列儀，測(cè)定全血粘度、血漿粘度、全血還原粘度、紅細(xì)胞剛性、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、纖維蛋白原，并進(jìn)行比較，結(jié)果如表3、4。然后將家兔股動(dòng)脈放血處死，取咽部組織，立即投入10％福爾馬林液固定。取材后經(jīng)常規(guī)脫水，石蠟包埋、切片，HE染色后在光學(xué)顯微鏡下用10×10、10×40倍做鏡下觀察并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)比較(注：有現(xiàn)象則為“+”無(wú)現(xiàn)象則為“-”)結(jié)果見(jiàn)表5。
表3對(duì)慢性咽炎兔全血粘度值及全血還原粘度值的影響(n＝10)
注：與對(duì)照組相比*P＜0.01；與模型組相比ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01
表4對(duì)慢性咽炎兔血漿粘度、紅細(xì)胞積壓、剛性指數(shù)、聚集指數(shù)及纖維蛋白原的影響(n＝10)
注：與對(duì)照組相比**P＜0.01；與模型組相比ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01
表5對(duì)慢性咽炎兔咽部病理學(xué)形態(tài)的影響(n＝10)
由表3、4結(jié)果表明，本發(fā)明藥物明顯降低慢性咽炎兔高低切變率下的全血粘度、血漿粘度、全血還原粘度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、纖維蛋白原含量，同時(shí)提高紅細(xì)胞的變形能力(P＜0.01)，效果優(yōu)于對(duì)比例組合物。由表5結(jié)果表明，本發(fā)明組合物可減輕咽部炎細(xì)胞的浸潤(rùn)，降低纖維組織的增生與減輕血管的擴(kuò)展充血，且效果優(yōu)于對(duì)比例組合物。
由此可見(jiàn)，本發(fā)明藥物能夠顯著改善慢性咽炎動(dòng)物的血流流變性，雪梨、川貝母、蒲公英、青果、玉竹、麥冬、枸杞子七種中藥具有協(xié)同作用，且在本發(fā)明的重量配比范圍的效果更好。
實(shí)驗(yàn)例4酚紅排泌試驗(yàn)
KM小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，隨機(jī)分組，分別為空白對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、本發(fā)明組合物及對(duì)比例組合物組，每組10只(雌雄各半)。給藥組分別灌胃給藥，正常對(duì)照組給予給藥組等容的蒸餾水灌胃，陽(yáng)性對(duì)照組給予沐舒坦鹽酸氨溴索片懸混液(30mg/kg)。各組小鼠給樣/藥1次/d，連續(xù)7d。小鼠禁食12h，于末次給藥后30min，腹腔注射0.5％酚紅溶液0.5ml，30min后采用頸椎脫臼處死小鼠，分離氣管，氣管插管并與注射液相連，用5％NaHCO3溶液沖洗氣管3次，0.5ml/次，合并沖洗液，用上述NaHCO3溶液定容至3ml。2000r/min離心5min，得到紅色上清液，用722分光光度計(jì)，波長(zhǎng)545nm測(cè)OD值。用分析天平精確稱取一定量的酚紅以5g/dl NaHCO3溶液溶解，使每ml溶液含1000μg酚紅，依次稀釋成每ml含酚紅0.1、0.5、1.0、2.0、5.0μg，測(cè)吸光度，以酚紅劑量為橫坐標(biāo)吸收度為縱坐標(biāo)作出標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算出每鼠酚紅排泌量，根據(jù)酚紅的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算酚紅的排泌量。數(shù)據(jù)用“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。方法：采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件包統(tǒng)計(jì)，兩兩比較用t檢驗(yàn)；檢驗(yàn)其差異性，均以P<0.05或P<0.01為其差異顯著性的標(biāo)準(zhǔn)。
表6對(duì)卻痰作用的影響(n＝10)
注：與對(duì)照組相比**P＜0.01；與陽(yáng)性對(duì)照組相比ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01
表6表明，與正常組比較，對(duì)比例組大鼠和實(shí)施例組大鼠酚紅分泌量均顯著減少(P＜0.01，P＜0.05)，表明對(duì)比例和實(shí)施例的均具有良好的祛痰作用；與對(duì)比例組相比，實(shí)施例各組大鼠酚紅分泌量均顯著減少(P＜0.01)，提示實(shí)施例各組的祛痰作用均優(yōu)于對(duì)比例組。
由此可見(jiàn)，本發(fā)明藥物能夠顯著改善慢性咽炎動(dòng)物的酚紅分泌量，雪梨、川貝母、蒲公英、青果、玉竹、麥冬、枸杞子七種中藥具有協(xié)同作用，且在本發(fā)明的重量配比范圍的效果更好。
實(shí)驗(yàn)例5本發(fā)明組合物清咽功能臨床試驗(yàn)
1、受試對(duì)象：按自愿原則選擇18-60歲，無(wú)嚴(yán)重心、肝、腎等并發(fā)癥的40例慢性咽炎受試者，采用自身對(duì)照設(shè)計(jì)。
納入者標(biāo)準(zhǔn).有咽痛、咽癢、咽干澀、咳痰不爽、干咳等癥狀反復(fù)發(fā)作史。具有上述癥狀及1項(xiàng)或1項(xiàng)以上檢查所見(jiàn)自愿受試者，經(jīng)體檢合格均可進(jìn)行試食觀察。
排除者標(biāo)準(zhǔn)：年齡在18歲以下或65歲以上者，妊娠或哺乳期婦女及對(duì)本品過(guò)敏者；經(jīng)檢查證實(shí)由口咽、鼻咽、咽喉、鼻、喉、食管、頸部及全身某些隱匿性病變所致者；合并有心血管、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病，精神病患者。不符合納入標(biāo)準(zhǔn)，未按規(guī)定服用受試物，無(wú)法判斷功效或資料不全等影響功效或安全性判斷者。
2、服用方法：每日2次，每次服用3g實(shí)施例17制備的顆粒劑，連續(xù)15天。
儀器與試劑：MEK-6318K型血球計(jì)數(shù)儀(日本產(chǎn))，尿十項(xiàng)分析儀(德國(guó)寶靈曼公司產(chǎn))，RA1000全自動(dòng)生化分析儀(美國(guó)產(chǎn))，生化試劑盒全部由中生公司提供。
3、觀察指標(biāo)：各項(xiàng)指標(biāo)于試驗(yàn)開始及結(jié)束時(shí)各測(cè)試一次。
癥狀觀察：詳細(xì)詢問(wèn)病史，觀察主要癥狀：咽痛、咽癢、干咳、咽干澀等。按癥狀輕重(重度3分、中度2分、輕度1分)在含服前后統(tǒng)計(jì)積分值及癥狀改善率。
咽部檢查：觀察咽充血、咽后壁濾泡增生、粘膜水腫、分泌物等體征，按輕、中、重分為1、2、3級(jí)，服用前、后檢查體征變化及其改善率。
血液常規(guī)檢查：紅細(xì)胞計(jì)數(shù)，血紅蛋白，白細(xì)胞計(jì)數(shù)及其分類。
安全性觀察：包括生化指標(biāo)測(cè)定、腹部B超，心電圖，X線胸部透視。
祛斑功效判定：癥狀消失或明顯減輕，咽部體征減輕2級(jí)為顯效；癥狀減輕，咽部體征減輕1級(jí)為有效；癥狀體征無(wú)明顯變化為無(wú)效。
4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
共觀察40例受試者，男性13例，女性27例，年齡最小18歲，最大60歲，平均43.50±11.28歲，平均病程5.83±5.33年，其中1-5年29例，6-10年6例，10年以上5例，病程最短1年，最長(zhǎng)20年。
功效觀察：
表7功效觀察情況
癥狀改善狀況：
表8主要癥狀改善情況
咽部體征改善狀況：
表9咽部體征改善情況
臨床癥狀積分統(tǒng)計(jì)：
表10臨床癥狀積分統(tǒng)計(jì)
**P＜0.01
表11臨床癥狀積分統(tǒng)計(jì)
**P＜0.01
血尿常規(guī)變化情況：
表12試食前后血尿常規(guī)變化情況
試食前后血常規(guī)各項(xiàng)指標(biāo)及尿常規(guī)均在正常范圍。
血液安全指標(biāo)觀察：)
表13試食前后血液安全指標(biāo)變化比較
試食前后，血液檢測(cè)各項(xiàng)生化指標(biāo)均在正常范圍。
試食前后試食者心電圖，腹部B超，X光胸透均屬正常范圍。
5、結(jié)論：本發(fā)明顆粒劑對(duì)慢性咽炎試食者咽痛、咽癢、干咳、咽干澀等主要癥狀及咽部充血、水腫、咽后壁濾泡增生等體征均有較好的改善作用。試食本發(fā)明顆粒劑前后，血紅蛋白、紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血清總蛋白、白蛋白、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、肌苷、尿素、血糖及尿常規(guī)等各項(xiàng)檢查均在正常范圍，說(shuō)明本發(fā)明顆粒劑對(duì)受試者健康無(wú)不良影響。試食過(guò)程中未觀察到過(guò)敏及其他不良反應(yīng)。
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