本發(fā)明屬于涉及土木香內(nèi)酯衍生物及其鹽及其應(yīng)用與制劑。
背景技術(shù)：
：：土木香(Inulahelenium)為菊科(Compositae)旋覆花屬植物，多年生草本，根供藥用。有健脾和胃、調(diào)氣解郁、止痛安胎功能，用于胸脅、脘腹脹痛，嘔吐瀉痢，胸脅挫傷，岔氣作痛，胎動不安等癥。土木香揮發(fā)油中含有異土木香內(nèi)酯、異異土木香內(nèi)酯等成分，其化學(xué)結(jié)構(gòu)與山道年類似，對豬、犬、貓均有驅(qū)蟲作用，其療效較山道年優(yōu)，且毒性較低。異土木香內(nèi)酯(CAS：470-17-7)屬于倍半萜類化合物，亦是土木香藥材中含量較高的主要有效成分。其結(jié)構(gòu)如下所示近年來研究發(fā)現(xiàn)土木香中的倍半萜-異土木香內(nèi)酯類成分有抗腫瘤細(xì)胞增值的作用和抗結(jié)核分支桿菌等新作用。分別在1999年和2002年，Charles和Konishi等人在對異土木香內(nèi)酯類化合物的藥理作用進(jìn)行研究后，提出α-亞甲基-γ-內(nèi)酯可能是該類化合物抗腫瘤細(xì)胞增值和抗結(jié)核分支桿菌的必須功能基團(tuán)。但由于異土木香內(nèi)酯的水溶性較差，難于以常規(guī)給藥途徑作用于人體，且經(jīng)過進(jìn)一步實驗發(fā)現(xiàn)異土木香內(nèi)酯的毒性較大。自身免疫性甲狀腺炎(AIT)又稱橋本(Hashimoto)甲狀腺炎,或稱慢性淋巴細(xì)胞性甲狀腺炎,是最常見的甲狀腺炎性疾病。臨床表現(xiàn)為甲狀腺呈彌漫性淋巴細(xì)胞浸潤,纖維化,間質(zhì)萎縮及腺泡細(xì)胞的嗜酸性改變。遺傳、妊娠、性別和環(huán)境等多種因素共同作用,使患者免疫功能發(fā)生紊亂及甲狀腺組織多種淋巴細(xì)胞浸潤,從而產(chǎn)生一系列針對甲狀腺組織的自身抗體—甲狀腺球蛋白抗體(TGAb)和甲狀腺過氧化物酶抗體(TPOAb)等超過正常導(dǎo)致自身免疫性甲狀腺炎的發(fā)生與發(fā)展。現(xiàn)有治療方法多采取甲狀腺激素(左旋甲狀腺素鈉片等)、替代療法、免疫抑制劑(雷公藤多苷片等)、手術(shù)治療等，雖有一定的臨床療效，但是在安全性上仍存在不小的問題，如藥物性甲亢等副作用仍困擾臨床治療，而且一旦停藥很容易復(fù)發(fā)。所以開發(fā)安全有效治療甲狀腺炎的藥物成為現(xiàn)有技術(shù)中亟待解決的問題技術(shù)實現(xiàn)要素：為解決前述問題，本發(fā)明提供如下的技術(shù)方案：提供了一種如式(I)所示的異土木香內(nèi)酯衍生物，式(I)中，R1＝H或-OR2R2選自H、TBDPS、Ts、Ms、TBS、烷基、環(huán)烷基、烯基、炔基、芳基、烷基芳基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、雜環(huán)基、酰基、氨基甲酰基、磺?；?、磺酰胺基；Y＝氧或單鍵R3和R4可以相同或不同，分別為氫、烷基、環(huán)烷基、羥基取代烷基、烯基、炔基、芳基、烷基芳基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、雜環(huán)基、三氟甲基、多氟取代烷基、腈基、腈基甲基、?；?、氨基甲酰基、磺?；⒒酋０坊蚍佳跬榛籖3、R4和N原子形成3-9元環(huán)的環(huán)狀結(jié)構(gòu)，環(huán)狀結(jié)構(gòu)上可以被一個或多個取代基取代，所述取代基選自氫、烷基、環(huán)烷基、烯基、炔基、芳基、烷基芳基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基或雜環(huán)基。R3和R4優(yōu)選為氫、碳原子數(shù)為1-8的烷基或環(huán)烷基。更優(yōu)選R3和R4均為甲基，所述異土木香內(nèi)酯衍生物優(yōu)選為式(I-II)、式(I-III)或式(I-IV)化合物本發(fā)明還提供了一種所述異土木香內(nèi)酯衍生物鹽，所述成鹽的酸為無機酸或有機酸，所述無機酸選自氫氟酸、鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、硝酸、磷酸、碳酸，硼酸、亞硒酸、磷鉬酸、亞磷酸、亞硫酸，所述有機酸選自檸檬酸、馬來酸、D-蘋果酸、L-蘋果酸、DL-蘋果酸、L-乳酸、D-乳酸、DL-酸、草酸、甲磺酸、戊酸、油酸、月桂酸、對甲基苯磺酸、1-萘磺酸、2-萘磺酸、酞酸、酒石酸、丙二酸、丁二酸、富馬酸、乙醇酸、硫醇酸、甘氨酸、肌氨酸、磺酸、煙酸、甲基吡啶酸、異煙酸、苯甲酸或取代苯甲酸。所述異土木香內(nèi)酯衍生物鹽優(yōu)選為富馬酸鹽。更優(yōu)選為式(II)、式(III)或式(IV)化合物化合物本發(fā)明還提供了所述異土木香內(nèi)酯衍生物及其鹽在制備抗炎藥物中的應(yīng)用；所述異土木香內(nèi)酯衍生物鹽為式(II)化合物、式(III)或式(IV)化合物，所述異土木香內(nèi)酯衍生物為式(I-II)化合物、式(I-III)化合物或式(I-IV)化合物。本發(fā)明還提供了所述異土木香內(nèi)酯衍生物及其鹽在制備治療甲狀腺炎藥物中的應(yīng)用；所述異土木香內(nèi)酯衍生物鹽為式(II)化合物、式(III)或式(IV)化合物，所述異土木香內(nèi)酯衍生物為式(I-II)化合物、式(I-III)化合物或式(I-IV)化合物。本發(fā)明還提供了一種口服藥用組合物，其特征是包括作為活性成分的化合物(I-II)、化合物(I-III)、化合物(I-IV)、化合物(II)、化合物(III)或化合物(IV)及至少一種適用于口服的藥用輔料。所述口服組合物的劑型選自片劑、膠囊劑、溶液劑、顆粒劑、散劑或糖漿劑。優(yōu)選為片劑，所述片劑的配方為活性成分50～200重量份，粘合劑10～20重量份、填充劑400～600重量份、潤滑劑1～5重量份、崩解劑50～100重量份，助崩劑30-50重量份。所述填充劑選自而乳糖、甘露醇或山梨醇，所述粘合劑，選自聚乙二醇6000、聚乙二醇4000中的至少一種，潤滑劑選自硬脂酸鎂、滑石粉、微粉硅膠、亮氨酸等中的一種或幾種，助崩劑為微晶纖維素，崩解劑為交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮。本發(fā)明通過異土木香內(nèi)酯進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造，提供了新型異土木香內(nèi)酯衍生物及其無機酸鹽。尤其是本發(fā)明優(yōu)選的化合物(I-II)、化合物(I-III)、化合物(I-IV)及作為其前體藥物的化合物(II)、化合物(III)、化合物(IV)，在動物實驗中能夠產(chǎn)生對橋本甲狀腺炎模型動物產(chǎn)生明顯的治療效果，尤其是將化合物(I-II)、化合物(I-III)、化合物(I-IV)分別制成富馬酸鹽得到的化合物(II)、化合物(III)、化合物(IV)，其治療效果更為明顯。具體實施方式為了理解本發(fā)明，下面以實施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，但不用于限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。實施例1：化合物(II)的制備1)化合物(1.1)的制備1)異土木香內(nèi)酯(1.0g,4.3mmol)溶解在二氯甲烷(16mL)中，緩慢分批向體系中加入過氧苯甲酸(1.1g,5.2mmol)，室溫下反應(yīng)3小時，飽和硫代硫酸鈉(16mL)淬滅反應(yīng)，二氯甲烷萃取(16mL×3)，飽和碳酸氫鈉水溶液(16mL)洗滌有機相，干燥濃縮，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝20：1)得化合物1.2(白色固體，984mg，產(chǎn)率92.0％)。2)化合物(I-II)的制備，將步驟1)得到的化合物1.2溶解在二氯甲烷(98mL)中，依次向體系中加入碳酸鉀(16.4g,118.9mmol)和二甲胺鹽酸鹽(4.8g,59.4mmol),混合體系攪拌回流反應(yīng)3小時，反應(yīng)結(jié)束后，抽濾除去反應(yīng)液中的固體，濾液用水洗滌(80mL×3)，有機層用無水硫酸鈉干燥后，濃縮得到化合物(I-II)，3)化合物(II)的制備將步驟2)得到的化合物(I-II)溶解在甲醇中(50mL)，攪拌均勻后，向體系中加入富馬酸(250mg,2.1mmol),室溫下攪拌反應(yīng)20分鐘，旋除甲醇并向體系中加入乙酸乙酯(200mL)，抽濾得到化合物(II)(白色固體，1.1g，兩步產(chǎn)率70.0％)元素分析測定化合物(II)分子式：C21H31NO7HMR數(shù)據(jù)：1HNMR(400MHz,DMSO):δ6.57(s,2H),4.50(s,1H),3.19(m,1H),2.74–2.66(m,2H),2.61–2.54(m,1H),2.50(s,1H),2.46(m,1H),2.32(s,6H),1.96(d,J＝15.4Hz,1H),1.19–1.10(m,1H),1.76(m,1H),1.60(d,J＝10.9Hz,3H),1.47(d,J＝15.6Hz,2H),1.42–1.34(m,1H),1.27–1.20(m,1H),0.84(s,3H),0.60(q,J＝12.8Hz,1H)；13CNMR(100MHz,DMSO)δ176.9,166.7,134.3,77.4,58.2,53.3,49.6,44.3,44.0,43.5,41.1,40.6,38.2,34.9,34.3,20.0,18.3,16.0。.實施例2：化合物(III)的制備1)化合物1.3的制備0℃下，將二氧化硒(87.5mg,0.75mmol)溶解在二氯甲烷(5mL)中，加入過氧化叔丁醇(0.37mL)，攪拌反應(yīng)30分鐘后，將異土木香內(nèi)酯(500mg,2.15mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液緩慢的加入到上述體系中，室溫下攪拌24小時，飽和硫代硫酸鈉水溶液(8mL)淬滅反應(yīng)，二氯甲烷萃取(8mL×3)，干燥濃縮，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝9:1至3:1)得化合物1.23(白色固體，350mg，產(chǎn)率：82.8％)。2)化合物(I-III)的制備將上步得到的化合物1.3溶解在二氯甲烷(35mL)中，依次向體系中加入碳酸鉀(5.8g,42.2mmol)和二甲胺鹽酸鹽(1.7g,21.1mmol),混合體系攪拌回流反應(yīng)3小時，反應(yīng)結(jié)束后，抽濾除去反應(yīng)液中的固體，濾液用水洗滌(30mL×3)，有機層用無水硫酸鈉干燥后，濃縮得到化合物(I-III)。3)將得到的化合物(I-III)溶解在甲醇中(20mL)，攪拌均勻后，向體系中加入富馬酸(88.7mg,0.7mmol)，室溫下攪拌反應(yīng)20分鐘，旋除甲醇并向體系中加入乙酸乙酯(70mL)，抽濾得到化合物(III)(白色固體，450mg，兩步產(chǎn)率75.0％)元素分析測定化合物(III)分子式：C22H35NO7NMR譜圖數(shù)據(jù)：1HNMR(400MHz,DMSO):δ6.56(s,2H),6.14(s,1H),5.60(s,1H),4.52(t,J＝4.1Hz,1H),4.33(s,1H),2.61–2.54(m,1H),2.50(s,1H),2.42(d,J＝12.4Hz,1H),2.32(s,6H),2.20(d,J＝15.6Hz,1H),1.82–1.65(m,4H),1.59(d,J＝4.3Hz,1H),1.43(d,J＝8.9Hz,1H),1.35(t,J＝12.6Hz,2H),0.82(s,3H)；13CNMR(100MHz,DMSO)δ177.0,166.7,151.7,134.4,107.7,77.7,71.3,53.2,44.3,44.1,40.5,39.8,38.4,35.4,34.3,29.4,20.2,17.0..實施例3化合物IV的制備1)化合物1.4的制備化合物1.3(112mg,0.45mmol)溶解在二氯甲烷(1mL)中，緩慢將過氧苯甲酸(100mg,0.60mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液滴加到上述體系中，室溫下反應(yīng)2小時，飽和硫代硫酸鈉(2mL)淬滅反應(yīng)，二氯甲烷萃取(2mL×3)，干燥濃縮，柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝4:1至1:1)得化合物1.4(白色固體，89mg，產(chǎn)率：74.5％)。2)化合物(I-IV)的制備將上一步得到的化合物1.4溶解在二氯甲烷(35mL)中，依次向體系中加入碳酸鉀(5.8g,42.2mmol)和二甲胺鹽酸鹽(1.7g,21.1mmol),混合體系攪拌回流反應(yīng)3小時，反應(yīng)結(jié)束后，抽濾除去反應(yīng)液中的固體，濾液用水洗滌(30mL×3)，有機層用無水硫酸鈉干燥后，濃縮得到化合物(I-IV)。3)化合物(IV)的制備，將得到的化合物(I-IV)溶解在甲醇中(20mL)，攪拌均勻后，向體系中加入富馬酸(88.7mg,0.7mmol)，室溫下攪拌反應(yīng)20分鐘，旋除甲醇并向體系中加入乙酸乙酯(70mL)，抽濾得到白色固體(103mg，兩步產(chǎn)率72.1％)。元素分析測定化合物(IV)分子式：C22H35NO8HMR數(shù)據(jù)：1HNMR(400MHz,DMSO):δ6.56(s,2H),4.52(t,J＝4.1Hz,1H),4.33(s,1H),2.61–2.54(m,1H),2.50(s,1H),2.42(d,J＝12.4Hz,1H),2.32(s,6H),2.24(d,J＝13.0Hz,1H),2.20(d,J＝15.6Hz,1H),2.17(d,J＝15.7Hz,1H),1.82–1.65(m,4H),1.59(d,J＝4.3Hz,1H),1.43(d,J＝8.9Hz,1H),1.35(t,J＝12.6Hz,2H),0.82(s,3H)；13CNMR(100MHz,DMSO)δ177.0,166.6,134.3,77.5,71.0,60.8,53.4,48.0,44.4,44.0,41.2,38.4,36.7,34.6,34.2,27.6,17.9,15.5.藥理實施例3：對高碘水誘導(dǎo)的橋本甲狀腺炎疾病模型動物的治療1.實驗方法選用SPF級昆明種雌性小鼠，體重28-32g，采用高碘水(0.64g碘化鈉溶于1L自來水)。將豬甲狀腺球蛋白100mg溶解于滅菌雙蒸水50mL中(2mg/mL)，取10mL與等體積完全弗氏佐劑充分混合成油包水狀。皮膚消毒后，取0.1mL(100μg)給模型組組小鼠進(jìn)行皮下多點(足趾皮下、背部皮下、腹部皮下、頸部皮下)注射作為初次免疫。實驗第12天,取豬甲狀腺球蛋白10mL(2mg/mL)與不完全弗氏佐劑10mL充分混合成油包水狀后，取0.1mL(100μg)給模型組小鼠多點皮下注射進(jìn)行加強免疫，再間隔12天進(jìn)行一次免疫后進(jìn)行建模評價。建模成功后將高碘水撤去，給以正常水飲用。小鼠建模成功后開始給藥治療(給藥前稱重)，將造模成功的實驗動物隨機分組，每組10只，另取10只正常小鼠作空白組，分組與給藥情況見下表：2.實驗結(jié)果給藥結(jié)束后，分別測量各組實驗動物的體重，并監(jiān)測實驗動物血液中TPOAb(抗甲狀腺過氧化物酶抗體)及TGAb(甲狀腺球蛋白抗體)含量的變化監(jiān)測結(jié)果見下表實驗分組體重(g)TGAb(ng/L)TGAb(IU/ml)空白組29.4±1.5832.6±6.635.2±6.1模型組18.7±1.8979.4±16.569.4±20.1地塞米松組26.2±1.9844.5±6.242.2±4.3化合物(II)組27.1±1.3445.7±9.346.3±8.9化合物(III)組26.9±1.7141.8±7.740.6±6.9化合物(IV)組27.2±1.7143.5±8.442.4±7.8化合物(I-II)組24.5±1.6750.6±6.745.9±8.1化合物(I-III)組24.1±1.7248.5±7.047.4±8.5化合物(I-IV)組23.9±1.6649.1±6.946.8±7.9給藥結(jié)束后，與空白組相比，模型組小鼠體重顯著降低；而化合物(II)、化合物(III)、化合物(I-V)、化合物(I-II)、化合物(I-III)和化合物(I-IV)組的體重增長情況均好于模型組，表明上述化合物均能改善小鼠體重情況。與空白組相比，模型組小鼠TPOAb及TGAb顯著升高，分別為空白組小鼠的244％、197％，化合物(II)組TPOAb及TGAb分別為空白組的140％、132％，化合物(III)組的TPOAb及TGAB分別為空白組的128％、115％，化合物(IV)組的TPOAb及TGAb分別為空白組的133％、120％，與模型組相比小鼠的TPOAb及TGAb均顯著降低?；衔?I-II)～(I-IV)組的小鼠的TPOAb及TGAb與模型組相比也有所降低。以上結(jié)果表明化合物(II)、化合物(III)、化合物(I-V)、化合物(I-II)、化合物(I-III)和化合物(I-IV)均對橋本甲狀腺炎具有一定得治療作用。制劑實施例1～6，提供作為口服藥用組合物的片劑。配方見下表(單位為重量份)所述配方中，粘合劑選自聚乙二醇4000(PEG4000)或聚乙二醇6000(PEG6000)，崩解劑為交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮，助崩劑為微晶纖維素，潤滑劑為硬脂酸鎂。所述片劑的配制方法為活性成分溶于適量乙醇后，加入處方量的粘合劑、填充劑、助崩劑、崩解劑混合，并以無水乙醇進(jìn)行濕法制粒，得到顆粒；將顆粒烘干后與潤滑劑混合后壓片，得到片劑。當(dāng)前第1頁1 2 3