1.一種用于治療奶牛乳腺炎的藥物注入劑,其特征在于,所述藥物注入劑包含有特異性抗DP-BM-IgY卵黃抗體和中藥組合物提取液,為乳房注入劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于治療奶牛乳腺炎的藥物注入劑,其特征在于,所述藥物注入劑中,按照體積百分比計(jì)特異性抗DP-BM-IgY卵黃抗體:中藥組合物提取液為(5%-15%):(10%-25%)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種用于治療奶牛乳腺炎的藥物注入劑,其特征在于,所述藥物注入劑中,按照體積百分比計(jì)特異性抗DP-BM-IgY卵黃抗體:中藥組合物提取液為10%:20%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的一種用于治療奶牛乳腺炎的藥物注入劑,其特征在于,所述中藥組合物由按照重量份計(jì)的以下原料藥組成:漏蘆5-15 份,蒲公英5-15份,紫花地丁5-15 份,連翹5-20 份,地榆5-15 份,瓜蔞5-15 份,當(dāng)歸5-10 份,黃芪10-20 份。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種用于治療奶牛乳腺炎的藥物注入劑,其特征在于,所述中藥組合物由按照重量份計(jì)的以下原料藥組成:漏蘆6 份,蒲公英10份,紫花地丁10 份,連翹12份,地榆8 份,瓜蔞10 份,當(dāng)歸7 份,黃芪15份。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種用于治療奶牛乳腺炎的藥物注入劑,其特征在于,所述特異性抗DP-BM-IgY卵黃抗體的制備方法包括以下步驟:
a)選取制備多價(jià)菌體蛋白抗原的主要致病菌,無(wú)乳鏈球菌、停乳鏈球菌、金黃色葡萄球菌及大腸桿菌,鑒定得到純種,分別在營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物中進(jìn)行體外擴(kuò)大培養(yǎng),營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物為加有體積百分比5-10 %犢牛血清、質(zhì)量體積百分比1-2 %葡萄糖的LB 營(yíng)養(yǎng)肉湯;將培養(yǎng)好的菌液離心濃縮,采用細(xì)菌裂解液結(jié)合超聲細(xì)胞破碎方法,分別制備單一抗原,單一抗原進(jìn)行等濃度組合即得所需的復(fù)合抗原;將制備的復(fù)合菌體蛋白抗原加入與等量的弗氏完全佐劑混合,充分乳化制得抗原免疫物;采用多次交替的免疫程序,通過(guò)肌肉、皮下多點(diǎn)注射式途徑,免疫接種具有高免應(yīng)答能力的180日齡健康產(chǎn)蛋雞,首免后,收集免疫雞產(chǎn)下的蛋為樣品,即高免雞蛋,備用;
b)采用水稀釋法-冷凍法-聚乙二醇沉淀法分離提純抗DP-BM-IgY,將分離出的卵黃用7-9倍體積磷酸緩沖液稀釋?zhuān)琾H 值調(diào)至5.2,經(jīng)冷凍、解凍、離心去除脂肪沉淀,收集的上清液經(jīng)4 %、12 %的PEG-6000分別去除卵黃磷脂及蛋白沉淀,高速冷凍離心獲得特異性抗DP-BM-IgY 卵黃抗體液,將其濃度調(diào)節(jié)到50 mg/mL,在無(wú)菌條件下采用微孔濾膜過(guò)濾除菌,分裝,-20 ℃保存,備用。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種用于治療奶牛乳腺炎的藥物注入劑的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
1)特異性抗DP-BM-IgY卵黃抗體的制備方法:
a)選取制備多價(jià)菌體蛋白抗原的主要致病菌,無(wú)乳鏈球菌、停乳鏈球菌、金黃色葡萄球菌及大腸桿菌,鑒定得到純種,分別在營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物中進(jìn)行體外擴(kuò)大培養(yǎng),營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物為加有體積百分比5-10 %犢牛血清、質(zhì)量體積百分比1-2 %葡萄糖的LB 營(yíng)養(yǎng)肉湯;將培養(yǎng)好的菌液離心濃縮,采用細(xì)菌裂解液結(jié)合超聲細(xì)胞破碎方法,分別制備單一抗原,單一抗原進(jìn)行等濃度組合即得所需的復(fù)合抗原;將制備的復(fù)合菌體蛋白抗原加入與等量的弗氏完全佐劑混合,充分乳化制得抗原免疫物;采用多次交替的免疫程序,通過(guò)肌肉、皮下多點(diǎn)注射式途徑,免疫接種具有高免應(yīng)答能力的180日齡健康產(chǎn)蛋雞,首免后,收集免疫雞產(chǎn)下的蛋為樣品,即高免雞蛋,備用;
b)采用水稀釋法-冷凍法-聚乙二醇沉淀法分離提純抗DP-BM-IgY,將分離出的卵黃用7-9倍體積磷酸緩沖液稀釋?zhuān)琾H 值調(diào)至5.2,經(jīng)冷凍、解凍、離心去除脂肪沉淀,收集的上清液經(jīng)4 %、12 %的PEG-6000分別去除卵黃磷脂及蛋白沉淀,高速冷凍離心獲得特異性抗DP-BM-IgY 卵黃抗體液,將其濃度調(diào)節(jié)到50 mg/mL,在無(wú)菌條件下采用微孔濾膜過(guò)濾除菌,分裝,-20 ℃保存,備用;
2)中藥組合物提取液的制備方法:
按所述重量份稱(chēng)取各原料藥,混合、攪拌、粉碎,加水煎煮,合并濾液、濃縮,得到濃縮濾液;之后用乙醇醇提,去乙醇后,在藥液中加注射用水,殺菌,得到本發(fā)明的乳房注入劑中藥提取液;
所述加水煎熬是加入相對(duì)于原料藥質(zhì)量之和5-15倍質(zhì)量的水,煎煮1-4 h,煎煮3 次;
所述乙醇醇提是在濃縮濾液中加入1倍濃縮液質(zhì)量的乙醇,將醇沉液離心,取上清液,上清液去乙醇后再加入乙醇進(jìn)行醇沉,醇沉液過(guò)濾,濾過(guò)液去乙醇,再加入去離子水,得到含生藥量為0.5 g/mL的溶液,過(guò)濾,得濾液,即為該中藥組合物的提取液;
3)乳房注入劑藥物的制備方法:
取所述中藥組合物提取液20 mL,在其中加入0.5 mL吐溫-80和50 mg苯甲醇,混合均勻后,加注射用水至 90mL,氫氧化鈉調(diào)pH 值至7.4,100℃滅菌30 min,冷卻,至溫度降至20℃,無(wú)菌加入抗DP-BM-IgY卵黃抗體10 mL,在無(wú)菌條件下進(jìn)行灌裝得成品乳房注入劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于治療奶牛乳腺炎的藥物注入劑在制備用于防治奶牛乳腺炎的乳房注入劑藥物中的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用,其特征在于,所述乳房注入劑藥物的使用量為每頭奶牛每個(gè)乳區(qū)20-60 mL。