本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種具有延緩衰老和美容養(yǎng)顏功能的組合物及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
2014年年底，中國(guó)的老年人口數(shù)量達(dá)到2.12億人，成為世界上第一個(gè)老年人口破2億的國(guó)家，人口老齡化問(wèn)題日漸嚴(yán)重。隨著我國(guó)的工業(yè)化進(jìn)程加快，不良的生活方式以及環(huán)境污染等問(wèn)題，人體的健康受到威脅，專(zhuān)家指出，我國(guó)的亞健康人群約占70％，伴隨而來(lái)的問(wèn)題就是適應(yīng)力減弱，免疫水平低下，皮膚健康問(wèn)題日益顯著。因此，尋求抗衰老、增強(qiáng)機(jī)體免疫力的活性物質(zhì)，對(duì)過(guò)多的老齡化人口以及人類(lèi)的健康具有非常重要的作用。
衰老是生命過(guò)程的必然規(guī)律，可分兩大類(lèi)：一是生理性衰老,指人體達(dá)到成熟后所出現(xiàn)的生理退化現(xiàn)象；二是病理性衰老,即在生理變化的基礎(chǔ)上，因患某些疾病或受外界因素的影響，而加速衰老的過(guò)程?，F(xiàn)代研究較多的是衰老的自由基學(xué)說(shuō)和免疫學(xué)說(shuō)，生物體的衰老過(guò)程是機(jī)體的組織細(xì)胞不斷產(chǎn)生的自由基積累結(jié)果，自由基可以引起DNA損傷從而導(dǎo)致突變，誘發(fā)腫瘤形成。自由基是正常代謝的中間產(chǎn)物，其反應(yīng)能力很強(qiáng)，可使細(xì)胞中的多種物質(zhì)發(fā)生氧化，損害生物膜。還能夠使蛋白質(zhì)、核酸等大分子交聯(lián)，影響其正常功能。衰老的免疫學(xué)說(shuō)可以分為兩種觀點(diǎn)：第一，免疫功能的衰老是造成機(jī)體衰老的原因；第二，自身免疫學(xué)說(shuō)，認(rèn)為與自身抗體有關(guān)的自身免疫在導(dǎo)致衰老的過(guò)程中起著決定性的作用。衰老并非是細(xì)胞死亡和脫落的被動(dòng)過(guò)程，而是最為積極地自身破壞過(guò)程。
近年來(lái)研究表明，益生菌具有潛在的抗衰老作用。益生菌可以通過(guò)調(diào)節(jié)宿主免疫系統(tǒng)而起到一定的抗衰老作用，包括腸道黏膜免疫系統(tǒng)、體液免疫系統(tǒng)及細(xì)胞免疫系統(tǒng)。在衰老過(guò)程中機(jī)體的氧化應(yīng)激明顯增強(qiáng)，氧化應(yīng)激不僅會(huì)造成大分子物質(zhì)如蛋白質(zhì)、核酸等氧化損傷，還會(huì)對(duì)免疫系統(tǒng)產(chǎn)生有害的影響；益生菌的抗氧化作用可能有利于維持機(jī)體免疫系統(tǒng)的平衡，提高免疫調(diào)控能力從而延長(zhǎng)壽命。從免疫學(xué)角度看，益生菌在宿主體內(nèi)定殖，通過(guò)產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物或菌體本身來(lái)調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫系統(tǒng)，表現(xiàn)為刺激淋巴細(xì)胞增殖，激活細(xì)胞的吞噬活性等。免疫功能的改善可以減少衰老疾病的發(fā)生率，從而起到一定的延長(zhǎng)壽命的效果。從抗氧化的角度看，益生菌的抗衰老作用可能是通過(guò)誘導(dǎo)SOD、GSH-Px等具有抗衰老功能的活性酶的合成，使衰老特征產(chǎn)物如MDA、LPO的含量降低，從而提高機(jī)體的抗氧化能力，抑制機(jī)體、組織、細(xì)胞的過(guò)氧化過(guò)程而起到延緩衰老的作用。益生元的添加有利于人體腸道內(nèi)有益菌的生長(zhǎng)，同時(shí)抑制有害菌的繁殖，從而達(dá)到調(diào)節(jié)腸道菌群平衡的功效，間接的促進(jìn)益生菌的抗氧化及增強(qiáng)免疫力的功能。
2010年，Takashi Kuda等人對(duì)日本傳統(tǒng)發(fā)酵食品中分離的菌株Lactobacillus plantarum(植物乳桿菌)的抗氧化能力進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)其可有效清除氧自由基。孟和畢力格等研究了酸馬奶中L.acidophilusMG2-1的抗氧化作用，發(fā)現(xiàn)活菌制劑灌服大鼠至28d后能夠使大鼠肝臟組織勻漿中SOD活力和GSH-Px活力均明顯提高，并顯著地降低大鼠血液和肝臟組織勻漿中MDA含量。許多研究表明益生菌在清除體內(nèi)自由基、提高SOD活力以及降低MDA含量方面發(fā)揮重要作用。
中醫(yī)衰老學(xué)說(shuō)和現(xiàn)代衰老理論,分別從不同的角度對(duì)衰老理論進(jìn)行研究?！端貑?wèn)·上古天真論》就詳細(xì)論述了女子以七、男子以八為基數(shù)遞進(jìn)的生長(zhǎng)、發(fā)育、衰老的腎氣盛衰曲線(xiàn)，明確指出機(jī)體的生、長(zhǎng)、壯、老、已，受腎中精氣的調(diào)節(jié)，總結(jié)衰老的內(nèi)因是“腎”起主導(dǎo)作用?，F(xiàn)代衰老理論自由基學(xué)說(shuō),免疫衰弱學(xué)說(shuō),以及脂褐質(zhì)積累學(xué)說(shuō)等,其抗衰老的本質(zhì)主要表現(xiàn)為：調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)功能、促進(jìn)免疫力、修復(fù)DNA、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌功能、清除自由基、促進(jìn)物質(zhì)代謝等方面,從分子水平對(duì)衰老機(jī)制進(jìn)行了闡述。利用現(xiàn)代科技提取中藥的有效成分,如黃酮類(lèi)化合物、多糖、苷類(lèi)、萜內(nèi)酯類(lèi)、香豆素、揮發(fā)油及生物堿等,經(jīng)過(guò)分離、純化，進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，藥物的有效成分在動(dòng)物壽命實(shí)驗(yàn)、免疫功能實(shí)驗(yàn)、抗氧化、抗動(dòng)脈粥樣硬化以及血流變有效降低體內(nèi)過(guò)氧化脂質(zhì)等方面具有良好的抗衰老的作用。
目前市場(chǎng)上延緩衰老的主要產(chǎn)品為單一的益生菌粉或黃酮類(lèi)提取物如大豆異黃酮等，或人類(lèi)自的自體物質(zhì)如維生素類(lèi)、氨基酸等，較少有益生菌粉和中藥提取物復(fù)合的產(chǎn)品，本發(fā)明的目的在于提供一種具有延緩衰老美容養(yǎng)顏功能的益生菌組合物，能加和單獨(dú)的益生菌或中藥提取物的抗氧化功能，從而達(dá)到延緩衰老養(yǎng)顏美容的效果。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種具有延緩衰老和美容養(yǎng)顏功能的組合物。該組合物安全有效，能夠有效增強(qiáng)人體免疫力，提高機(jī)體的抗氧化能力，從而達(dá)到延緩衰老美容養(yǎng)顏的效果。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為：
具有延緩衰老和美容養(yǎng)顏功能的組合物，由益生菌與具有延緩衰老和美容養(yǎng)顏功能的藥食同源中藥協(xié)同組合而成；所述益生菌由植物乳桿菌BL-WHSYM9、植物乳桿菌BLCC2-0015和植物乳桿菌BLCC2-0126組成。
植物乳桿菌BL-WHSYM9，是一種嗜甘草的植物乳桿菌，所述嗜甘草的植物乳桿菌是在乳桿菌發(fā)酵甘草過(guò)程中獲得的，其在以甘草為唯一營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基環(huán)境中能夠旺盛繁殖，該菌株命名為L(zhǎng)actobacillus plantarum BL-WHSYM9，WHSYM9，已于2013年09月26日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為：CCTCC NO：M 2013449。
植物乳桿菌BLCC2-0015，是一株具高抗氧化活性的植物乳桿菌，該乳酸菌命名為植物乳桿菌BLCC2-0015(Lactobacillus plantarumBLCC2-0015)，保藏編號(hào)為CCTCC NO:M2015126，保藏日期為2015年3月18日，保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心。該植物乳桿菌具高抗氧化活性，還可以具有良好的耐酸耐膽鹽特性，將該乳酸菌制備成菌粉后制成機(jī)體抗氧化食品或保健品，直接食用或沖服飲用，使用方便，可增強(qiáng)機(jī)體免疫力。
植物乳桿菌BLCC2-0126，保藏編號(hào)CCTCC NO：M2015128是一株具有吸附或降解腸毒素功能的乳酸菌，所述乳酸菌具有吸附或降解腸毒素功能，且有較好的耐酸、耐膽鹽及耐人工胃液、腸液效果。具體體現(xiàn)在：可吸附或降解腸毒素，具有較好的清除腸毒素能力；能夠抑制常見(jiàn)病原菌的生長(zhǎng)；能夠耐酸、耐膽鹽可在消化道內(nèi)存活。不僅具高清腸毒素能力，還具有良好的性能，可用于人體保健。保藏編號(hào)CCTCC NO：M2015128，保藏日期為2015年3月18日，保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心。
進(jìn)一步，所述組合物還包括益生元、麥芽糊精和輔料填充物。
作為一種優(yōu)選，所述輔料填充物包括檸檬酸、果粉、糖醇等。
進(jìn)一步，所述組合物按質(zhì)量百分比計(jì)，包括以下組分：益生菌2-10％、藥食同源中藥提取物20-30％、益生元50-60％、麥芽糊精和輔料填充物5-10％。
作為一種優(yōu)選，所述組合物按質(zhì)量百分比計(jì)，包括以下組分：益生菌5％、藥食同源中藥提取物30％、益生元55％、麥芽糊精和輔料填充物10％。
進(jìn)一步，其特征在于，所述益生菌的含量為8.0×109-4.0×1010cfu/g。
作為一種優(yōu)選，所述益生菌的含量為8.0×109cfu/g。
進(jìn)一步，其特征在于，所述植物乳桿菌BL-WHSYM9、植物乳桿菌BLCC2-0015和植物乳桿菌BLCC2-0126的質(zhì)量比為1:1:1。
作為一種優(yōu)選，所述益生菌為益生菌的凍干粉。
所述益生菌的凍干粉的具體的制備方法包括以下步驟：
1)按上述重量份分別將三株植物乳桿菌經(jīng)培養(yǎng)基活化后，接種于發(fā)酵培養(yǎng)液中，37℃恒溫靜置培養(yǎng)，使菌體濃度達(dá)到對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期4.0×109-8.0×109cfu/ml；
2)將步驟1)中各種發(fā)酵液分別離心，棄上清，得到菌泥；
3)配制凍干保護(hù)劑；
4)將菌泥和凍干保護(hù)劑混合均勻，將混合物預(yù)凍，再真空冷凍干燥，制成具有包埋層的活性益生菌組合物的凍干粉。
進(jìn)一步，所述藥食同源中藥由沙棘、枸杞、山藥、桂圓和紅棗組成。
近年來(lái)關(guān)于中藥的有效成分如黃酮類(lèi)、多糖、皂苷類(lèi)、萜內(nèi)酯類(lèi)等在機(jī)體抗衰老、抗氧化方面的研究越來(lái)越多。本發(fā)明中中藥提取物的各組分主要有效成分為多糖，有研究表明，具有生物活性的天然產(chǎn)物多糖類(lèi)物質(zhì)，有清除氧自由基的作用。當(dāng)體內(nèi)氧自由基積累過(guò)多時(shí)，將對(duì)人體造成毒害，導(dǎo)致癌變、衰老、炎癥、免疫功能紊亂等疾病。
本發(fā)明的中藥提取物其中組分之一枸杞含有大量的枸杞多糖(LBP)，給一定濃度范圍的LBP，能劑量依賴(lài)性地增加細(xì)胞的增殖活性，增加細(xì)胞內(nèi)SOD活性、減少M(fèi)DA含量；同時(shí)LBP能有效清除DPPH自由基，降低蛋白質(zhì)氧化損傷而發(fā)揮抗衰老的作用。沙棘中含有維生素類(lèi)、糖類(lèi)、氨基酸類(lèi)、不飽和脂肪酸、多酚類(lèi)、黃酮類(lèi)、SOD、5-羥色胺以及各種微量元素等，具有抗氧化、抗衰老、提高免疫等多種作用。茯苓多糖能不同程度增加血清中T-SOD和Cu-SOD活性，降低MDA含量，茯苓多糖具有較好的抗衰老作用。覆盆子中的有效成分如黃酮類(lèi)、苷類(lèi)及其糖蛋白均具有很好的抗氧化能力，能夠很好的的清除DPPH和ABTS，具有很好的還原能力。山藥具有補(bǔ)脾養(yǎng)胃、生津益肺、補(bǔ)腎澀精之功效；玫瑰花能夠行氣解郁、和血止痛；桂圓具有補(bǔ)益心脾、養(yǎng)血安神之功效；紅棗補(bǔ)中益氣、養(yǎng)血安神，各種中藥均能發(fā)揮其作用，且中藥提取物的制備是已有技術(shù)，各個(gè)成分均能在本發(fā)明中實(shí)施應(yīng)用并能發(fā)揮有益作用，綜合評(píng)價(jià)，該中藥提取物的各有效成分具有較好的延緩衰老養(yǎng)顏美容的功效。
進(jìn)一步，所述藥食同源中藥按重量份計(jì)，由以下組分組成：沙棘3-9份，枸杞6-12份，山藥15-30份，桂圓9-15份，紅棗6-15份。
進(jìn)一步，所述益生元包括低聚異麥芽糖、低聚果糖和低聚木糖；所述低聚異麥芽糖、低聚果糖和低聚木糖的質(zhì)量比為5:3:1。
所述藥食同源中藥提取物制備方法包括以下步驟：
取上述重量份的沙棘，枸杞，山藥，桂圓，紅棗置于10倍水中浸泡30-60min，煎煮，水開(kāi)后繼續(xù)煎煮20-40min，過(guò)濾得到第一濾液；藥渣用8倍水進(jìn)行二次煎煮，水開(kāi)后繼續(xù)煎煮20-40min，過(guò)濾得到第二濾液與第一濾液混合均勻，通過(guò)真空減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮中藥液，至固形物含量為30％以上，進(jìn)噴霧干燥器，進(jìn)風(fēng)溫度控制140℃，出風(fēng)溫度90℃，霧化器轉(zhuǎn)速45轉(zhuǎn)/分鐘，進(jìn)料速度為5ml/分鐘，得噴霧干燥粉，粉碎，過(guò)100目以上篩子即得藥食同源中藥提取物。
本發(fā)明的具有延緩衰老和美容養(yǎng)顏功能的組合物的制備方法包括選料、過(guò)篩、配料、混合，具體包括以下步驟：
將制備好的益生菌的凍干粉和藥食同源中藥提取物分別過(guò)100目以上篩子，并稱(chēng)量備用；所述各組分的質(zhì)量百分比為益生菌干粉2-10％(8.0×109-4.0×1010cfu/g)，中藥提取物20-30％，益生元50-60％，麥芽糊精、檸檬酸、果粉、糖醇等輔料填充物5-10％。將以上各物質(zhì)在混合機(jī)中充分混勻至色澤均勻，無(wú)色差，即得到具有延緩衰老和美容養(yǎng)顏功能的組合物。
本發(fā)明的目的之二在于提供一種所述的具有延緩衰老和美容養(yǎng)顏功能的組合物在制備延緩衰老和美容養(yǎng)顏產(chǎn)品中的應(yīng)用。
本發(fā)明的目的還在于提供一種具有延緩衰老和美容養(yǎng)顏功能的益生菌組合物，所述益生菌組合物由植物乳桿菌BL-WHSYM9、植物乳桿菌BLCC2-0015和植物乳桿菌BLCC2-0126組成。所述益生菌組合物能應(yīng)用在制備延緩衰老和美容養(yǎng)顏產(chǎn)品中。
根據(jù)上述提到的植物乳桿菌BL-WHSYM9、植物乳桿菌BLCC2-0015和植物乳桿菌BLCC2-0126的特點(diǎn)和活性，也能以單獨(dú)益生菌組合物作用實(shí)現(xiàn)延緩衰老和美容養(yǎng)顏的功能。
作為一優(yōu)選，所述益生菌組合物的益生菌總數(shù)量為8.0×109-4.0×1010cfu/g。
作為一優(yōu)選，所述植物乳桿菌BL-WHSYM9、植物乳桿菌BLCC2-0015和植物乳桿菌BLCC2-0126的質(zhì)量比為1:1:1。
所述延緩衰老和美容養(yǎng)顏產(chǎn)品包括食品和保健品，具體可制成粉劑、片劑、膠囊劑、顆粒、沖劑等。
本發(fā)明的有益效果在于：
1)本發(fā)明提供的本發(fā)明所提供的具有延緩衰老和美容養(yǎng)顏功能的組合物其優(yōu)勢(shì)在于益生菌和中藥提取物科學(xué)復(fù)配，按照重量科學(xué)配比而成，安全有效，較目前市場(chǎng)現(xiàn)有的產(chǎn)品單純的益生菌產(chǎn)品或單純的中藥產(chǎn)品有更加明顯的效果。
2)該組合物制備工藝簡(jiǎn)單，中藥中的各個(gè)有效成分損失較少，安全性高，保證了產(chǎn)品批次之間的穩(wěn)定性。
3)益生菌和中藥提取物完美結(jié)合，中藥提取物具有明顯的增菌作用，益生菌能夠?qū)⒅兴幪崛∥锔玫姆纸獬尚》肿游镔|(zhì)，有利于腸道的吸收，中藥和益生菌合理配伍，經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證，效果優(yōu)于任何一種單一的原料，各種有效成分協(xié)同作用。
具體實(shí)施方式
以下將對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)描述。優(yōu)選實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件，所舉實(shí)施例是為了更好地對(duì)本發(fā)明的內(nèi)容進(jìn)行說(shuō)明，但并不是本發(fā)明的內(nèi)容僅限于所舉實(shí)施例。所以熟悉本領(lǐng)域的技術(shù)人員根據(jù)上述發(fā)明內(nèi)容對(duì)實(shí)施方案進(jìn)行非本質(zhì)的改進(jìn)和調(diào)整，和任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所做的改變、修飾、替代、組合、簡(jiǎn)化，均應(yīng)為等效的置換方式仍屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
實(shí)施例1益生菌的凍干粉的制備
1)分別將三株植物乳桿菌經(jīng)培養(yǎng)基活化后，接種于發(fā)酵培養(yǎng)液中，37℃恒溫靜置培養(yǎng)，使菌體濃度達(dá)到對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期4.0×109-8.0×109cfu/ml；
乳桿菌種子液的制備：取出菌種保藏管，用乳酸菌斜面固體培養(yǎng)基分別劃線(xiàn)進(jìn)行復(fù)蘇，37度培養(yǎng)24-36h。挑取斜面培養(yǎng)基上的菌落結(jié)晶紫染色鏡檢，為短桿菌或長(zhǎng)桿菌。挑取菌落接種100mL乳酸菌培養(yǎng)基中，在37度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。種子采用2-5％的接種量，接種至3L大三角瓶中，37度培養(yǎng)24-36h，檢測(cè)其菌液濃度，菌含量超過(guò)20億/毫升，即可作為乳桿菌液體菌種接種。其中所述的MRS培養(yǎng)基：葡萄糖2.0％、檸檬酸銨0.2％、乙酸鈉0.5％、磷酸氫二鉀0.5％、硫酸錳0.02％、硫酸鎂0.05％、蛋白胨1.0％、牛肉膏1.0％、酵母膏0.5％、吐溫80 0.1％，調(diào)節(jié)pH至6.0；固體培養(yǎng)基加1.5％瓊脂粉。培養(yǎng)基滅菌條件為：0.10-0.15MPa，121℃滅菌20min。
2)將步驟1)中各種發(fā)酵液分別離心，棄上清，得到菌泥；
3)配制凍干保護(hù)劑；其中凍干保護(hù)劑的配方組成為：脫脂奶粉25g、蔗糖8g、食用甘油1g、蒸餾水100mL。
4)將菌泥和凍干保護(hù)劑混合均勻，將混合物預(yù)凍，再真空冷凍干燥，制成具有包埋層的活性益生菌的凍干粉。
實(shí)施例2中藥提取物的制備
1)按照重量份：沙棘5g，枸杞10g，山藥15g，桂圓12，紅棗15g；
2)將混合物置于10倍水中浸泡40min，煎煮，水開(kāi)后繼續(xù)煎煮30min，過(guò)濾得到第一濾液；藥渣用8倍水進(jìn)行二次煎煮，水開(kāi)后繼續(xù)煎煮30min，過(guò)濾得到第二濾液與第一濾液混合均勻，通過(guò)真空減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮中藥液，至固形物含量為30％以上，進(jìn)噴霧干燥器，進(jìn)風(fēng)溫度控制140℃，出風(fēng)溫度90℃，霧化器轉(zhuǎn)速45轉(zhuǎn)/分鐘，進(jìn)料速度為5ml/分鐘，得噴霧干燥粉，粉碎，過(guò)100目以上篩子即得中藥提取物。
實(shí)施例3中藥提取物的制備
1)按照重量份：沙棘9g，枸杞10g，山藥28g，桂圓14g，紅棗13g；
2)將混合物置于10倍水中浸泡50min，煎煮，水開(kāi)后繼續(xù)煎煮40min，過(guò)濾得到第一濾液；藥渣用8倍水進(jìn)行二次煎煮，水開(kāi)后繼續(xù)煎煮40min，過(guò)濾得到第二濾液與第一濾液混合均勻，通過(guò)真空減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮中藥液，至固形物含量為30％以上，進(jìn)噴霧干燥器，進(jìn)風(fēng)溫度控制140℃，出風(fēng)溫度90℃，霧化器轉(zhuǎn)速45轉(zhuǎn)/分鐘，進(jìn)料速度為5ml/分鐘，得噴霧干燥粉，粉碎，過(guò)100目以上篩子即得中藥提取物。
實(shí)施例4益生菌的凍干粉與中藥提取物等的復(fù)配
將制備好的益生菌的凍干粉和中藥提取物分別過(guò)100目以上篩子，并稱(chēng)量備用；所述各組分的質(zhì)量百分比為益生菌干粉8％，中藥提取物30％，益生元55％，麥芽糊精、檸檬酸、果粉、糖醇等輔料填充物7％。將以上各物質(zhì)在混合機(jī)中充分混勻至色澤均勻，無(wú)色差，即得到具有延緩衰老養(yǎng)顏美容的益生菌混合物。
實(shí)施例5益生菌的凍干粉與中藥提取物等的復(fù)配
將制備好的益生菌的凍干粉和中藥提取物分別過(guò)100目以上篩子，并稱(chēng)量備用；所述各組分的質(zhì)量百分比為益生菌干粉10％，中藥提取物25％，益生元58％，麥芽糊精、檸檬酸、果粉、糖醇等輔料填充物7％。將以上各物質(zhì)在混合機(jī)中充分混勻至色澤均勻，無(wú)色差，即得到具有延緩衰老養(yǎng)顏美容的益生菌混合物。
實(shí)施例6具有延緩衰老和美容養(yǎng)顏功能的組合物對(duì)自然衰老小鼠的延緩作用
1)具有延緩衰老養(yǎng)顏美容對(duì)的益生菌組合物對(duì)衰老小鼠各內(nèi)臟指標(biāo)的影響
優(yōu)選的益生菌組合物比例：益生菌干粉5％(8.0×109cfu/g)，中藥提取物30％，益生元55％，麥芽糊精等其它輔料填充物10％，將以上物料充分混勻，按照不同的劑量灌服小鼠。
選取8月齡以上的衰老小鼠，隨機(jī)分為6組，每組10只，即高劑量組(0.55g/只)，中劑量組(0.055g/只)，低劑量組(0.0275g/只)，益生菌組(5.0×107cfu/只)，陽(yáng)性組(原花青素+維生素C)，對(duì)照組(純水)，各個(gè)分組的小鼠每天進(jìn)行灌胃操作，連續(xù)灌胃30d。
停藥次日，小鼠稱(chēng)重，取血清并處死，解剖后分別取脾臟、肝臟、腎臟、胸腺稱(chēng)重，保留肝臟制備肝臟組織懸液。
表1益生菌組合物對(duì)小鼠內(nèi)臟指數(shù)的益生功能(x±s，n＝10)
注：a，b，c表示差異顯著(0.01<P<0.05)。
結(jié)果顯示：以上數(shù)據(jù)表明產(chǎn)品組尤其是中、低劑量組均能提高各內(nèi)臟指標(biāo)，其中脾臟、胸腺指數(shù)低劑量組較對(duì)照組分別提高10.2％、6.7％，對(duì)免疫器官脾臟、胸腺均有一定的益生功能，可能會(huì)相應(yīng)的提高免疫器官的免疫水平，從而增加機(jī)體的免疫力，達(dá)到延緩衰老保健的效果。
2)具有延緩衰老養(yǎng)顏美容對(duì)的益生菌組合物對(duì)衰老小鼠各抗氧化指標(biāo)的影響
根據(jù)保健食品抗氧化功能評(píng)價(jià)方法需要脂質(zhì)氧化物、蛋白質(zhì)氧化產(chǎn)物、抗氧化酶、抗氧化物質(zhì)四項(xiàng)指標(biāo)。根據(jù)需要本發(fā)明分別檢測(cè)小鼠血清中的T-SOD(總超氧化物歧化酶)、MDA(丙二醛)，以及肝臟組織懸液中蛋白質(zhì)羰基、GSH(谷胱甘肽)的含量，通過(guò)以上抗氧化指標(biāo)判定益生菌組合物對(duì)衰老小鼠的抗氧化能力，結(jié)果判定動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中以上四項(xiàng)指標(biāo)中三項(xiàng)陽(yáng)性，可判定受試樣品抗氧化功能結(jié)果為陽(yáng)性。
表2益生菌組合物對(duì)各個(gè)抗氧化指標(biāo)的影響
注：a，b，c表示差異顯著(0.01<P<0.05)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：高劑量組SOD水平較對(duì)照組提高14.4％；MDA的水平各個(gè)組較對(duì)照組均有減少，但是益生菌組和陽(yáng)性組較對(duì)照組有顯著差異，MDA減少約18.3％；蛋白質(zhì)羰基檢測(cè)水平各組較對(duì)照組均有顯著性差異，減少率分別為33.3％、33.1％、35.3％、43.0％、38.9％，綜合以上數(shù)據(jù)，益生菌組效果較好，產(chǎn)品組也有一定的效果，說(shuō)明產(chǎn)品和益生菌均能對(duì)小鼠的抗氧化能力有明顯的提高。
3)具有延緩衰老養(yǎng)顏美容對(duì)的益生菌組合物對(duì)過(guò)氧化氫造成的氧化損傷的保護(hù)作用
取10％的肝臟勻漿上清液0.8mL，分別加入0.1mL 0.5、0.05、0.03g/mL的益生菌組合物以及0.04g/mL的原花青素和維生素C，過(guò)氧化氫對(duì)照與陰性對(duì)照均加入等體積的0.9％的生理鹽水，37℃水浴，30min；陰性對(duì)照加0.1mL0.9％的生理鹽水，其余各組均加入0.1mL的50mmol/L H2O2，再37℃水浴50min；冰浴15min終止反應(yīng)，最后4℃，3000rmp離心20min，取上清液，檢測(cè)丙二醛(MDA)的含量。
表3益生菌組合物對(duì)H2O2引起的氧化損傷的保護(hù)效果
注：a，b，c表示差異顯著(0.01<P<0.05)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：H2O2對(duì)照組與其它各組有顯著差異性，說(shuō)明H2O2對(duì)組織液有很好的氧化應(yīng)激作用；陽(yáng)性組較其他組均有極顯著差異，說(shuō)明0PC+VC對(duì)H2O2的氧化損傷刺激有較好的保護(hù)效果；從比較結(jié)果來(lái)看，1、2、3組和H2O2比較差異顯著，說(shuō)明產(chǎn)品組能較好中和H2O2對(duì)組織上清的刺激作用，所以產(chǎn)品對(duì)H2O2引起的氧化應(yīng)激有一定的保護(hù)效果。
最后說(shuō)明的是，以上實(shí)施例僅用以說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的宗旨和范圍，其均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍當(dāng)中。