本發(fā)明涉及生物藥技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種促胰液素藥物及其制藥新用途。
背景技術(shù)：
骨質(zhì)疏松癥是以單位體積內(nèi)骨組織量減少，骨皮質(zhì)變薄、骨小梁減少、變細(xì)，骨微觀結(jié)構(gòu)退化、髓腔增寬、骨荷載降低等為特征的，骨的脆性增加以及易發(fā)生骨折的一種全身性骨骼疾病。臨床上表現(xiàn)為腰背和四肢痛、脊柱畸形、易發(fā)生骨折等。根據(jù)病因不同，其又有原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥、繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥之分。
原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥是以骨質(zhì)減少，骨的微觀結(jié)構(gòu)退化為特征的，致使骨的脆性增加以及易于發(fā)生骨折的一種全身性骨骼疾病。分為絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥和老年性骨質(zhì)疏松癥。臨床癥狀主要有疼痛，腰背四肢伸長縮短，駝背，骨折及呼吸系統(tǒng)障礙，部分患者出現(xiàn)肌肉疼痛。
繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥中以腎上腺皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松癥較多見。因為長期大劑量使用腎上腺皮質(zhì)激素會使機(jī)體的水、鹽、蛋白質(zhì)、糖和脂肪代謝帶來嚴(yán)重的不良反應(yīng)，腎上腺皮質(zhì)激素能造成骨代謝紊亂，誘發(fā)骨質(zhì)疏松癥。目前國內(nèi)外研究結(jié)果將腎上腺皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松癥的形成機(jī)制歸納為：①減少腸鈣吸收；②影響性激素的生成分泌；③對腎臟鈣、磷排泄的影響；④促進(jìn)PTH生成；⑤間接影響維生素D的代謝；⑥對破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞的作用；⑦其他：腎上腺皮質(zhì)激素尚能對具有骨吸收激勵作用的細(xì)胞因子如：IL-1、IL-6、TNF-α和IGF等產(chǎn)生作用，從而影響骨代謝。現(xiàn)在臨床上除了采用大劑量短期的沖擊療法、局部用藥等方法外，并沒有十分有效的防治腎上腺皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松癥的手段。西藥中維生素D、鈣制劑和雌激素等有防治繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的療效。
促胰液素是第一種被發(fā)現(xiàn)的動物激素。為一種堿性多肽，由27個氨基酸組成，含11種不同的氨基酸，分子量為305.6。由貝利斯與斯塔林（Bayliss與Starling）等于1902年發(fā)現(xiàn)。產(chǎn)生促胰液素的細(xì)胞為“S”細(xì)胞，主要在十二指腸粘膜，少量分布在空腸、回腸和胃竇。促胰液素和同族的胰高血糖素、腸抑胃肽、血管活性腸肽有些類似。促胰液素具有促進(jìn)胰液分泌，增加胰液總量及所含重碳酸鹽等生理作用，研究報道，促胰液素對消化道潰瘍及腫瘤具有一定的治療作用，還廣泛用于胰外分泌機(jī)能試驗，診斷胰腺疾患。
發(fā)明人在醫(yī)學(xué)試驗與實踐中偶然發(fā)現(xiàn)，對原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥患者給予促胰液素治療，取得顯著療效。在進(jìn)行規(guī)范、科學(xué)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)呐R床試驗與藥效學(xué)實驗后，得到了本發(fā)明的技術(shù)方案。
本發(fā)明的促胰液素來源于市售或采用《醫(yī)藥化工》雜志1985年第16卷第4期上刊登的論文《促胰液素制備和藥理的研究》中所記載的方法制備。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種促胰液素藥物。
本發(fā)明的另一目的是提供促胰液素藥物在制備治療骨質(zhì)疏松癥、原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥、抑郁癥、慢性腸炎、腸易激綜合癥、腸痙攣藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明的目的是通過以下方式實現(xiàn)的：
一種促胰液素藥物在制備治療骨質(zhì)疏松癥藥物中的應(yīng)用。
所述的促胰液素藥物在制備治療骨質(zhì)疏松癥藥物中的應(yīng)用，該促胰液素藥物為促胰液素片劑、促胰液素膠囊、促胰液素注射劑。
一種促胰液素藥物在制備治療原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥藥物中的應(yīng)用。
一種促胰液素藥物在制備治療抑郁癥藥物中的應(yīng)用。
一種促胰液素藥物在制備治療慢性腸炎藥物中的應(yīng)用。
一種促胰液素藥物在制備治療腸易激綜合癥藥物中的應(yīng)用。
一種促胰液素藥物在制備治療腸痙攣藥物中的應(yīng)用。
具體實施方式：
實施例1：促胰液素治療原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的實驗研究
1 材料與方法
1.1 實驗動物
6月齡雌性Wistar大鼠80只，體重200～250g，來源于浙江中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心。
1.2 藥物及試劑
促胰液素：來源于上海普振生物科技有限公司。乙烯雌酚：來源于北京四環(huán)制藥二廠。
1.3 儀器
XR-36雙能X線骨密度檢測儀：ICPQ-100，日本產(chǎn)；等離子光譜分析儀，由浙江大學(xué)提供與協(xié)作。
1.4 造模方法
大鼠經(jīng)1%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉（40mg/kg），無菌條件下從腹部正中入路，結(jié)扎雙側(cè)輸卵管切除雙側(cè)卵巢，縫合切口。
1.5 實驗分組及用藥
術(shù)后第91d將80只大鼠隨機(jī)分為4組，每組20只：假性切除卵巢對照組：給予生理鹽水1mL/d；模型空白組：給予生理鹽水lmL/d；雌激素對照組：給予乙烯雌酚水溶液，劑量為0.01mg/kg/d；促胰液素組：給予促胰液素水溶液，劑量為0.01mg/kg/d，每組均灌胃給藥，每日1次，持續(xù)90d。
1.6 標(biāo)本處理
術(shù)后第181d，麻醉（藥物及劑量與造模時相同）后，無菌條件下取出每只大鼠左側(cè)膠管及腔骨髁部，作為實驗標(biāo)本，行骨密度測定，后去除軟組織并烘干至恒重，酸溶法將骨全部溶解，無離子水等倍稀釋后，用等離子光譜分析儀測鈣、磷含量，并計算出每克骨干重的鈣、磷相對含量（mg/g）。
2 結(jié)果
2.1 促胰液素對各組大鼠骨質(zhì)鈣、磷的測定結(jié)果
實驗結(jié)果見表1-1。
表1-1 促胰液素對各組大鼠骨質(zhì)鈣、磷的測定結(jié)果
注：與假性切除卵巢對照組比較，*P<0.05；與模型空白組比較，#P<0.05。
2.2 促胰液素對各組大鼠腰椎骨密度測定結(jié)果的影響
實驗結(jié)果見表1-2。
表1-2 促胰液素對各組大鼠腰椎骨密度測定結(jié)果的影響
注：與假性切除卵巢對照組比較，*P<0.05；與模型空白組比較，#P<0.05。
3 討論
鈣在骨中的主要作用是維持峰值骨量，其含量直接反映骨量。模型空白組的骨鈣含量較假性切除卵巢對照組明顯減低（P<0.05），說明大鼠去卵巢后，骨量大量喪失。促胰液素治療組及乙烯雌酚治療組的骨鈣、骨密度均明顯高于模型空白組（P<0.05），且二組無顯著性差異，反映促胰液素能抑制絕經(jīng)后骨量的丟失。骨磷含量四組均無顯著性差異，說明其不能反映骨代謝情況。測量腰椎骨密度（BMD）是診斷骨質(zhì)疏松最重要的指標(biāo)。通過實驗證實促胰液素與乙烯雌酚一樣，均能明顯抑制去卵巢大鼠腰椎BMD的降低，防止骨質(zhì)疏松的產(chǎn)生。
本實驗表明，促胰液素可表現(xiàn)較弱的雌激素作用，并有種屬的特異性，可以抑制破骨細(xì)胞的活性，加強(qiáng)成骨細(xì)胞的活性，維持成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞間的動態(tài)平衡，有效地預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松，又可避免對機(jī)體帶來其他的副作用，是一種很有前景的防治骨質(zhì)疏松的新制劑。
實施例2：促胰液素防治繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥實驗研究
臨床上長期大劑量使用腎上腺皮質(zhì)激素可以誘發(fā)繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥。本實驗通過促胰液素用于實驗性繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥模型大鼠，觀察其療效。
1 材料和方法
1.1 藥物
促胰液素：來源于上海普振生物科技有限公司，制成0.01mg/mL的水溶液，4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>
1.2 實驗動物
SD雄性大鼠，由浙江中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。
1.3 動物飼養(yǎng)方法
實驗動物隨機(jī)分組后，具體用藥情況如表2-1。
表2-1 各組模型動物用藥情況
1.4 方法
血鈣、血磷測定：采用斷頭處死法，收集血液后送理化實驗室檢驗；骨密度測定：將大鼠充分展開平鋪，置于雙能X線骨密度儀（NOR-LANDXR-36型）的探頭下掃描，自動打印測定結(jié)果。
1.5 統(tǒng)計學(xué)處理
各組大鼠觀察數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，各組間數(shù)據(jù)比較采用F檢驗。
2 結(jié)果
2.1 各組動物全身、腰椎、股骨BMD比較
實驗結(jié)果顯示，與正常對照組比較，模型組大鼠的全身、腰椎、股骨BMD均明顯降低，具有顯著性差異（P<0.05）；與模型組比較，西藥組大鼠的全身、股骨和腰椎的BMD有明顯升高，具有顯著性差異（P<0.05）；而促胰液素組大鼠的全身、股骨和腰椎的BMD沒有明顯升高，沒有顯著性差異（P>0.05）。見表2-2。
表2-2 各組模型動物全身、腰椎、股骨BMD比較（g/cm2）
注：與對照組比*P<0.05，與模型組比#P<0.05
2.2 各組動物治療前后血鈣、血磷和AKP情況
實驗結(jié)果顯示，模型組大鼠的血鈣、血磷和AKP與正常對照組比較，具有顯著性差異（P<0.05）；西藥組大鼠的血鈣、血磷和AKP與模型組比較，具有顯著性差異（P<0.05）；而促胰液素組的血鈣、血磷和AKP與模型組比較，沒有顯著性差異（P>0.05）。結(jié)果見表2-3。
表2-3 各組模型動物血鈣、血磷、AKP比較表（mol/L）
注：與對照組比*P<0.05，與模型組比#P<0.05
2.3 各組動物股骨生物力學(xué)檢測數(shù)據(jù)
實驗結(jié)果顯示，與正常對照組比較，模型組大鼠的斷裂載荷、彈性載荷、橈度均明顯降低，具有顯著性差異（P<0.05）；與模型組比較，西藥組大鼠的斷裂載荷、彈性載荷、橈度均有明顯升高，具有顯著性差異（P<0.05）；而促胰液素組大鼠的的斷裂載荷、彈性載荷、橈度沒有明顯升高，沒有顯著性差異（P>0.05）。見表2-4。
表2-4 大鼠股骨三點彎曲試驗
注：與對照組比*P<0.05，與模型組比#P<0.05
3 討論與結(jié)論
繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥中以腎上腺皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松癥較多見。因為長期大劑量使用腎上腺皮質(zhì)激素會使機(jī)體的水、鹽、蛋白質(zhì)、糖和脂肪代謝帶來嚴(yán)重的不良反應(yīng)，腎上腺皮質(zhì)激素能造成骨代謝紊亂，誘發(fā)骨質(zhì)疏松癥?，F(xiàn)在臨床上除了采用大劑量短期的沖擊療法、局部用藥等方法外，并沒有十分有效的防治腎上腺皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松癥的手段。西藥中維生素D、鈣制劑和雌激素等具有一定的防治繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的療效。研究表明，促胰液素對防治腎上腺皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松癥沒有明顯療效。
本發(fā)明促胰液素在治療原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥方面具有特異性的、意想不到的、突出的治療效果。本發(fā)明的技術(shù)方案具有非常大的醫(yī)藥臨床價值，是一個重大的發(fā)明創(chuàng)造。
實施例3：促胰腺素治療抑郁癥的藥效實驗研究
1 材料
1. 1 藥物
（1）受試藥物（促胰腺素）：上海普振生物科技有限公司，制成0.01mg/mL的水溶液，4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>
（2）陽性對照藥（鹽酸氟西汀片）：常州四藥制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H19980139。
1. 2 動物
ICR 雄性小鼠，體重 18～22 g，由浙江中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供，所有動物提前1周購入，常規(guī)飼養(yǎng)。
1. 3
儀器 Medlab 生物信號采集系統(tǒng)（淮北正華生物儀器設(shè)備有限公司），JZ100型100g 張力換能器（上海益聯(lián)醫(yī)學(xué)儀器發(fā)展有限公司），Sony DSC2P8 數(shù)碼攝像機(jī)（廣州蕭揚(yáng)電子科技有限公司），MC-145 電子體溫計（長春市康祥科技有限責(zé)任公司）。
2 方法
2. 1 小鼠懸尾實驗
正常小鼠隨機(jī)區(qū)組法分為3組，即空白對照組、陽性藥鹽酸氟西汀組（給予鹽酸氟西汀2.0mg·kg-1、受試藥促胰腺素組（給予促胰腺素2.0mg·kg-1）。各組均按0. 2 mL·（10 g）-1體重灌胃給藥。每日1次，連續(xù)給藥7 d，空白對照組給去離子水。于末次給藥后1h進(jìn)行實驗。將小鼠尾端（在距尾尖2 cm 處）用膠布固定在100 g張力換能器的連線上，使其呈倒懸狀態(tài)，頭部離實驗臺約15cm，換能器連接到Medlab 生物信號采集系統(tǒng)，適應(yīng)2 min后，記錄4min之內(nèi)的不動時間（s）。
2. 2 小鼠強(qiáng)迫游泳實驗
動物分組及給藥方式、劑量、時間同 2. 1，于末次給藥后1h進(jìn)行實驗。將
小鼠單個放入高20 cm，直徑18 cm，水深10 cm，水溫（23 ± 2）℃ 的水缸中，觀察6 min，適應(yīng)2 min，記錄后4 min 內(nèi)累計不動時間（s）。
2. 3 小鼠利血平拮抗實驗
體溫下降的觀測正常小鼠隨機(jī)區(qū)組法分為4組，即空白對照組、模型組、鹽酸氟西汀組（3.5mg·kg-1）、促胰腺素組（3.5mg·kg-1）。組均按0.2 mL·（10g）-1體重灌胃給藥。每日1次，連續(xù)給藥7d，空白對照組灌胃給去離子水。于末次給藥后1h，按1.6 mg·kg-1劑量腹腔注射利血平，2h后測小鼠肛溫（將電子體溫計探頭插入小鼠肛門內(nèi)約1.5cm處）。
2. 4 統(tǒng)計學(xué)處理
實驗結(jié)果均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（± s） 表示，使用 SPSS13. 0軟件中的方差分析（ANOVA）進(jìn)行檢驗，P < 0. 05 表示差異有顯著性。
3 結(jié)果
3. 1 對小鼠懸尾不動時間的影響
實驗結(jié)果表明，促胰腺素組能明顯縮短小鼠懸尾不動時間，與空白組比較差異顯著（P < 0. 05），并且優(yōu)于陽性對照藥（鹽酸氟西?。Ｒ姳?-1。
表3-1 對小鼠懸尾不動時間的影響（± s，n = 20）
注：與空白組比較*P < 0. 05。
3. 2 對小鼠強(qiáng)迫游泳不動時間的影響
實驗結(jié)果表明，促胰腺素組能明顯縮短小鼠強(qiáng)迫游泳不動時間，與空白組比較差異顯著（P < 0. 05），并且優(yōu)于陽性對照藥（鹽酸氟西?。?。見表3-2。
表3-2 對小鼠強(qiáng)迫游泳不動時間的影響（± s，n = 20）
注：與空白組比較*P < 0. 05。
3. 3 對利血平所致小鼠體溫下降的影響
實驗結(jié)果表明，促胰腺素組能顯著對抗利血平所致小鼠體溫下降，與模型組比較差異顯著（P < 0. 05），并且優(yōu)于陽性對照藥（鹽酸氟西?。?。見表3-3。
表3-3 對利血平所致小鼠體溫下降的影響（± s，n = 20）
注：與空白組比較*P < 0. 05。
4 結(jié)論與討論
抑郁癥的動物模型很多，小鼠懸尾試驗和小鼠強(qiáng)迫游泳試驗具有簡單、經(jīng)費少、敏感和可靠性較強(qiáng)的特點，因此本研究首先采用這兩個模型對促胰腺素進(jìn)行初步研究。實驗結(jié)果表明，促胰腺素可顯著縮短小鼠懸尾試驗和小鼠強(qiáng)迫游泳試驗的不動時間，顯示其具有抗抑郁作用。
以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤飾，這些改進(jìn)和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。