本發(fā)明屬于畜禽用中藥領(lǐng)域，具體而言，涉及一種用于新城疫、溫和型流感等病毒病治療的中藥發(fā)酵液及其制備工藝。

背景技術(shù)：

新城疫、溫和型流感等是造成影響家禽養(yǎng)殖效益的主要疾病，溫和型流感能夠引起免疫抑制，引起免疫失敗，造成其他疾病的爆發(fā)，給廣大養(yǎng)殖戶帶來(lái)了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

溫和型流感沒(méi)有典型臨床癥狀，主要表現(xiàn)為氣管環(huán)出血，造成免疫抑制，激發(fā)各類(lèi)感染，新城疫主要表現(xiàn)高熱、呼吸困難、下痢和出現(xiàn)神經(jīng)癥狀。腺胃乳頭腫脹、出血或潰瘍，尤以在與食管或肌胃交界處最明顯。

中藥發(fā)酵技術(shù)是模擬中藥在人體內(nèi)的消化分解過(guò)程，采用現(xiàn)代生物工程技術(shù)，在體外建立一個(gè)“工業(yè)化腸胃系統(tǒng)”，采用的多種益生菌，對(duì)中藥進(jìn)行預(yù)消化、分解和轉(zhuǎn)化，把大分子的中間物質(zhì)，分解轉(zhuǎn)化成為能夠被直接吸收的有效小分子物質(zhì)。因此，發(fā)酵中藥療效快、效果確切。發(fā)酵后的中藥經(jīng)過(guò)預(yù)消化和轉(zhuǎn)化。徹底解除藥物有害毒性，并去除了傳統(tǒng)中藥湯劑“苦口”的缺陷，口味好轉(zhuǎn)，患者可以長(zhǎng)期服用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種抗病毒的發(fā)酵液及制備方法。本發(fā)明中藥發(fā)酵液，使用方便，適合在規(guī)?；B(yǎng)殖中使用。

為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明的技術(shù)方案是：一種抗病毒的中藥發(fā)酵液的原料中藥材，包括以下重量份數(shù)比的原料藥材：鉤藤5～10份、黃連5～10份、梔子5～20份、地黃5～10份、陳皮5～15份、連翹葉10～30份、白術(shù)5～15份和白扁豆5～15份。

所述抗病毒中藥發(fā)酵液中各原料藥材及其重量份數(shù)比優(yōu)選為：鉤藤5份、黃連5份、梔子5份、地黃5份、陳皮5份、連翹葉10份、白術(shù)5份和白扁豆5份。

所述抗病毒中藥發(fā)酵液中各原料藥材及其重量份數(shù)比還可以優(yōu)選為：鉤藤10份、黃連10份、梔子20份、地黃10份、陳皮15份、連翹葉30份、白術(shù)15份和白扁豆15份。。

所述抗病毒中藥發(fā)酵液中各原料藥材及其重量份數(shù)比又可以優(yōu)選為：鉤藤7份、黃連8份、梔子12份、地黃7份、陳皮10份、連翹葉20份、白術(shù)10份和白扁豆10份。

為了更好的實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明還提供了抗病毒中藥發(fā)酵液的制備方法，制備方法包括以下步驟：

（1）中藥提取步驟：將各原料藥材按重量配比投入到中藥提取罐，煎煮提取2次；

（2）復(fù)合菌種發(fā)酵步驟：將所述中藥提取步驟中得到中藥提取液轉(zhuǎn)移到發(fā)酵罐中，接種混合菌種，發(fā)酵，得到抗病毒中藥發(fā)酵液。

其中，所述中藥提取步驟包括：將各原料藥材按重量份稱重后，放置于中藥提取罐中，按混合物總重量的6～12倍量加水下浸泡2小時(shí)，然后加溫至100℃煎煮1～2小時(shí)，過(guò)濾，得到第一次提取藥液；在盛放藥渣的中藥提取罐中按原料藥材總重量的6～10倍量第二次加水，煎煮1～2小時(shí)，過(guò)濾，得到第二次提取藥液，將第二次提取藥液與第一次提取藥液混合，濃縮至每升含生藥0.2kg，過(guò)濾，得到中藥提取液。

所述復(fù)合菌種發(fā)酵步驟優(yōu)選為：將中藥提取液轉(zhuǎn)移到發(fā)酵罐中，加入酵母膏，葡萄糖，硫酸銨、硫酸鎂，酵母膏加入量為中藥提取液量的0.05%～0.5%，加入葡萄糖的量為中藥提取液量的0.1～0.5%，加入硫酸銨的量為中藥提取液量的0.01%～0.1%，硫酸鎂的加入量為中藥提取液量的0.001%～0.01%，加入氫氧化鈣調(diào)節(jié)ph值至6.0～7.0。加熱加入輔料的中藥提取液，溫度至90℃以上，保持30～60分鐘，降低溫度至20～37℃，按照中藥提取液的1%接種發(fā)酵用的混合菌種Ⅰ，攪拌發(fā)酵48h～96h，轉(zhuǎn)速為10～30r/min，結(jié)束后，接種1%的混合菌種Ⅱ，密封，保持溫度20～37℃，厭氧發(fā)酵12～36h。發(fā)酵結(jié)束后，即得中藥發(fā)酵液。

其中，所述復(fù)合菌種發(fā)酵步驟中的混合菌種Ⅰ為：米曲霉10⁹～10¹¹個(gè)/mL、釀酒酵母10⁷～10⁹個(gè)/mL、短小芽孢桿菌10⁹～10¹¹個(gè)/mL、凝結(jié)芽孢桿菌10⁸～10¹⁰個(gè)/mL。所述復(fù)合菌種發(fā)酵步驟中混合菌種Ⅱ?yàn)椋喊l(fā)酵乳桿菌10⁹～10¹¹個(gè)/mL、動(dòng)物雙歧桿菌10⁷～10⁹個(gè)/mL。

本發(fā)明中藥組方采用清熱瀉火、涼血解毒、健脾祛濕的中醫(yī)治療原則，科學(xué)組方，調(diào)整機(jī)體功能，殺滅病毒、降低病毒對(duì)機(jī)體的損傷，促進(jìn)采食。本發(fā)明中鉤藤、黃連作為君藥，鉤藤清熱平肝，黃連清熱瀉火；梔子、地黃作為臣藥，梔子善清三焦之火，加強(qiáng)黃連瀉火作用，地黃滋陰生津，防治黃連瀉下太過(guò)，陳皮、白扁豆、白術(shù)具有健脾作用，促進(jìn)采食增加，提高機(jī)體恢復(fù)，上述諸藥組合，共同起到防治病毒病的作用，且通過(guò)發(fā)酵技術(shù),改善中藥“苦口”的特點(diǎn)，中藥發(fā)酵液中含有有益菌，改善腸道功能，改善機(jī)體抵抗力。

本發(fā)明還提供了抗病毒中藥發(fā)酵液的使用方法，在每噸肉雞飲水中加入所述中藥發(fā)酵液3～8L。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：

（1）本發(fā)明在中藥提取技術(shù)基礎(chǔ)上加入了有益菌的發(fā)酵，與中藥提取制備的提取液相比，每只雞中藥使用量減少50-70%；

（2）本發(fā)明將中藥提取液發(fā)酵后，提高有效成分含量，與提取液相比，部分有效成分含量提高50%以上；

（3）對(duì)新城疫、流感等病毒的防治效果明顯，攻毒保護(hù)率在80%以上。

具體實(shí)施方式

以下通過(guò)具體實(shí)施例說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明并不僅僅限定于這些實(shí)施例。

實(shí)施例1

本實(shí)施例的中藥發(fā)酵液由原料藥材組成：鉤藤5kg、黃連5kg、梔子5kg、地黃5kg、陳皮5kg、連翹葉10kg、白術(shù)5kg和白扁豆5kg。

本實(shí)施例的中藥發(fā)酵液制備方法如下.

（1）制備中藥提取液：將鉤藤5kg、黃連5kg、梔子5kg、地黃5kg、陳皮5kg、連翹葉10kg、白術(shù)5kg和白扁豆5kg，放置于中藥提取罐中，煎煮提取2次，合并提取液、濃縮至每升含生藥0.2kg，過(guò)濾，得到中藥提取液。

（2）復(fù)合菌種發(fā)酵為：將中藥提取液轉(zhuǎn)移到發(fā)酵罐中，每升中藥提取液中加入酵母膏5g，葡萄糖5g，硫酸銨1g，硫酸鎂0.1g，加入氫氧化鈣調(diào)節(jié)ph值至6.0～7.0。加熱至90℃以上，保持30～60分鐘，降低溫度至37℃后，每升中藥提取液中接種發(fā)酵用的混合菌種Ⅰ10ml，攪拌發(fā)酵48h，轉(zhuǎn)速為10r/min，結(jié)束后，按照每升中藥提取液再次接種的混合菌種Ⅱ10ml，密封，保持溫度20℃，厭氧發(fā)酵12h，發(fā)酵結(jié)束后，即得中藥發(fā)酵液。

復(fù)合菌種發(fā)酵中的混合菌種Ⅰ為：米曲霉10⁹個(gè)/mL、釀酒酵母10⁷個(gè)/mL、短小芽孢桿菌10⁹個(gè)/mL、凝結(jié)芽孢桿菌10⁸個(gè)/mL。所述復(fù)合菌種發(fā)酵步驟中混合菌種Ⅱ?yàn)椋喊l(fā)酵乳桿菌10⁹個(gè)/mL、動(dòng)物雙歧桿菌10⁷個(gè)/mL。

技術(shù)效果：

通過(guò)高效液相法測(cè)定實(shí)施例1中藥提取液和中藥發(fā)酵液中小檗堿和連翹苷的含量，發(fā)酵液中小檗堿含量為0.52mg/ mL，連翹苷含量為0.34mg/ mL，提取液中小檗堿含量為0.31mg/ mL，連翹苷含量為0.22mg/ mL，由此可見(jiàn)，本發(fā)明實(shí)施例1的中藥發(fā)酵液中小檗堿含量增加67%，連翹苷含量增加54%。

在實(shí)驗(yàn)室條件下，人工建立流感和新城疫疾病模型，在發(fā)病后分別在飲水中添加本實(shí)施例1中的中藥提取液和中藥發(fā)酵液，中藥提取液的使用量為每噸飲水中添加12L，中藥發(fā)酵液的使用量為每噸飲水中添加5L，死亡率分別為：中藥提取液組22%、中藥發(fā)酵液組18%，攻毒對(duì)照組36%，發(fā)病率分別為中藥提取液組46%、中藥發(fā)酵液組32%，攻毒對(duì)照組72%，由此可見(jiàn)，使用本實(shí)施例1的中藥發(fā)酵液每只雞的使用量可減少58%，攻毒保護(hù)率為82%，顯著降低肉雞發(fā)病率。

本實(shí)施例發(fā)酵過(guò)程中的采用的接種量，發(fā)酵時(shí)間，轉(zhuǎn)速等因素，盡可能的保證發(fā)酵的充分進(jìn)行；當(dāng)然，通過(guò)本實(shí)施例的說(shuō)明，本領(lǐng)域內(nèi)的普通技術(shù)人員不經(jīng)過(guò)創(chuàng)造性勞動(dòng)也可得出如下方法：將發(fā)酵接種量在1%以上，轉(zhuǎn)速小于10r/min，發(fā)酵時(shí)間小于48h，這些地方也應(yīng)在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。

實(shí)施例2

本實(shí)施例的中藥發(fā)酵液由以下原料藥材組成：鉤藤10kg、黃連10kg、梔子20kg、地黃10kg、陳皮15kg、連翹葉30kg、白術(shù)15kg和白扁豆15kg。

本實(shí)施例的中藥發(fā)酵液制備方法如下.

（1）制備中藥提取液：將鉤藤10kg、黃連10kg、梔子20kg、地黃10kg、陳皮15kg、連翹葉30kg、白術(shù)15kg和白扁豆15kg，放置于中藥提取罐中，煎煮提取2次，合并提取液、濃縮至每升含生藥0.2kg，過(guò)濾，得到中藥提取液。

（2）復(fù)合菌種發(fā)酵為：將中藥提取液轉(zhuǎn)移到發(fā)酵罐中，每升中藥提取液中加入酵母膏0.5g，葡萄糖1g，硫酸銨0.1g，硫酸鎂0.01g，加入氫氧化鈣調(diào)節(jié)ph值至6.0～7.0。加熱至90℃以上，保持30～60分鐘，降低溫度至20℃后，每升中藥提取液中接種發(fā)酵用的混合菌種Ⅰ10ml，攪拌發(fā)酵96h，轉(zhuǎn)速為10r/min，結(jié)束后，按照每升中藥提取液再次接種的混合菌種Ⅱ10ml，密封，保持溫度37℃，厭氧發(fā)酵36h，發(fā)酵結(jié)束后，即得中藥發(fā)酵液。

復(fù)合菌種發(fā)酵中的混合菌種Ⅰ為：米曲霉10¹¹個(gè)/mL、釀酒酵母10⁹個(gè)/mL、短小芽孢桿菌10¹¹個(gè)/mL、凝結(jié)芽孢桿菌10¹⁰個(gè)/mL。所述復(fù)合菌種發(fā)酵步驟中混合菌種Ⅱ?yàn)椋喊l(fā)酵乳桿菌10¹¹個(gè)/mL、動(dòng)物雙歧桿菌10⁹個(gè)/mL。

技術(shù)效果：

通過(guò)高效液相法測(cè)定實(shí)施例2中藥提取液和中藥發(fā)酵液中梔子苷和橙皮苷的含量，發(fā)酵液中梔子苷含量為0.32mg/ mL，橙皮苷含量為0.64mg/ mL，提取液中梔子含量為0.17mg/ mL，橙皮苷含量為0.42mg/ mL，由此可見(jiàn)，本發(fā)明實(shí)施例1的中藥發(fā)酵液中梔子苷含量增加88%，橙皮苷含量增加52%。

2015年12月，萊陽(yáng)市某肉雞場(chǎng)，25日齡肉雞，發(fā)生疾病，死淘率大幅增加，每天死淘率在0.5%以上，采食量降低，飲水減少，肉雞出現(xiàn)咳喘現(xiàn)象，解剖發(fā)現(xiàn)氣管出血，肺部實(shí)質(zhì)化，拉綠色糞便，部分出現(xiàn)新城疫的典型神經(jīng)癥狀。選擇一棟雞舍，15113只，按照每噸飲水中添加8L實(shí)施例2的中藥發(fā)酵液，連續(xù)使用5天，5天后與未使用藥物的雞舍相比，死淘率顯著降低，每天死淘數(shù)量不足0.05%，未使用藥物的雞舍每天死淘1.5%以上，實(shí)驗(yàn)后全部使用實(shí)施例2的中藥發(fā)酵液治療，最終出欄成活率在88%以上。

本實(shí)施例發(fā)酵過(guò)程中的采用的接種量，發(fā)酵時(shí)間，轉(zhuǎn)速等因素，盡可能的保證發(fā)酵的充分進(jìn)行；當(dāng)然，通過(guò)本實(shí)施例的說(shuō)明，本領(lǐng)域內(nèi)的普通技術(shù)人員不經(jīng)過(guò)創(chuàng)造性勞動(dòng)也可得出如下方法：將發(fā)酵接種量在1%以上，轉(zhuǎn)速大于30r/min，發(fā)酵時(shí)間大于96h，這些地方也應(yīng)在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。

實(shí)施例3

本實(shí)施例的中藥發(fā)酵液由以下原料藥材組成：鉤藤7kg、黃連8kg、梔子12kg、地黃7kg、陳皮10kg、連翹葉20kg、白術(shù)10kg和白扁豆10kg。

本實(shí)施例的中藥發(fā)酵液制備方法如下.

（1）制備中藥提取液：將鉤藤7kg、黃連8kg、梔子12kg、地黃7kg、陳皮10kg、連翹葉20kg、白術(shù)10kg和白扁豆10kg，放置于中藥提取罐中，煎煮提取2次，合并提取液、濃縮至每升含生藥0.2kg，過(guò)濾，得到中藥提取液。

（2）復(fù)合菌種發(fā)酵為：將中藥提取液轉(zhuǎn)移到發(fā)酵罐中，每升中藥提取液中加入酵母膏0.25g，葡萄糖0.5g，硫酸銨0.05g，硫酸鎂0.005g，加入氫氧化鈣調(diào)節(jié)ph值至6.0～7.0。加熱至90℃以上，保持30～60分鐘，降低溫度至30℃后，每升中藥提取液中接種發(fā)酵用的混合菌種Ⅰ10ml，攪拌發(fā)酵60h，轉(zhuǎn)速為20r/min，結(jié)束后，按照每升中藥提取液再次接種的混合菌種Ⅱ10ml，密封，保持溫度30℃，厭氧發(fā)酵28h，發(fā)酵結(jié)束后，即得中藥發(fā)酵液。

復(fù)合菌種發(fā)酵中的混合菌種Ⅰ為：米曲霉10¹⁰個(gè)/mL、釀酒酵母10⁸個(gè)/mL、短小芽孢桿菌10¹⁰個(gè)/mL、凝結(jié)芽孢桿菌10⁹個(gè)/mL。所述復(fù)合菌種發(fā)酵步驟中混合菌種Ⅱ?yàn)椋喊l(fā)酵乳桿菌10¹⁰個(gè)/mL、動(dòng)物雙歧桿菌10⁸個(gè)/mL。

技術(shù)效果：

通過(guò)高效液相法測(cè)定實(shí)施例3中藥提取液和中藥發(fā)酵液中梔子苷和連翹苷的含量，發(fā)酵液中梔子苷含量為0.44mg/ mL，連翹苷含量為0.38mg/ mL，提取液中梔子苷含量為0.29mg/ mL，連翹苷含量為0.24mg/ mL，由此可見(jiàn)，本發(fā)明實(shí)施例3的中藥發(fā)酵液中小檗堿含量增加51%，連翹苷含量增加58%。

在實(shí)驗(yàn)室條件下，人工建立新城疫疾病模型，在人工攻毒前分別在飲水中連續(xù)3天添加本實(shí)施例3中的中藥提取液和中藥發(fā)酵液，作為預(yù)防用藥，中藥提取液的使用量為每噸飲水中添加10L，中藥發(fā)酵液的使用量為每噸飲水中添加3L，攻毒后，每天的死亡數(shù)量見(jiàn)表1。

死淘數(shù)量變化

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。