本發(fā)明涉及中藥提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種治療陰道炎的凝膠劑及其制備方法。

背景技術(shù)：

陰道炎常見于絕經(jīng)后的老年婦女，因卵巢功能衰退，雌激素很多水平降低，陰道壁萎縮，粘膜變薄，上皮細胞內(nèi)糖原含量減少，陰道內(nèi)Ph值上升，局部抵抗力降低，致病菌父母容易入侵繁殖引起并且炎癥。主要癥狀為陰道分泌物增多及外陰瘙癢、灼熱感。檢查見陰道呈老年性改變，上皮萎縮，皺襞消失，上皮變平滑、菲薄。陰道粘膜充血，有小出血點，有時見淺表潰瘍。目前無特殊治療方法，一般采用抗生素抑制細菌生長，或使用消毒劑及雌激素制劑，但抗生素長期使用會產(chǎn)生耐藥性，雌激素制劑有可能產(chǎn)生致癌作用，市場急需一種行之有效、己被大多數(shù)人證實能治療陰道炎中藥。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

發(fā)明目的：為了解決上述問題，本發(fā)明的目的在于提供一種治療陰道炎的凝膠劑及其制備方法。

技術(shù)方案：本發(fā)明的目的是通過如下的方案實現(xiàn)的：

一種治療陰道炎的凝膠劑，由下列原料藥及輔料重量份配比提取制備而成：取金釵股20份、紅三七18份、小魚仙草15份、滇苦菜28份、白蠟樹葉14份、文冠果20份、卡波姆1份、丙二醇20份、乙醇2份、氮酮2份、三乙醇胺3份、蒸餾水250份。

所述治療陰道炎的凝膠劑，制備方法為：取金釵股20份、紅三七18份、小魚仙草15份、滇苦菜28份、白蠟樹葉14份、文冠果20份，加藥材10倍重量的水，浸泡0.5h，煎煮1小時，過濾，藥渣再加入藥材8倍重量的水，煎煮1小時，藥液濾出，合并兩次煎煮液，濃縮至60℃相對密度為1.05，加乙醇使含醇量的體積百分比達75％，攪拌，靜置，過濾，濾液濃縮至65℃時相對密度為1.25，并回收乙醇，得濃縮液，使用硅膠精制，預先將選定的硅膠裝入樹脂柱中，同時將所述濃縮液經(jīng)純化水稀釋后，通過反相硅膠柱，去掉液體中的雜質(zhì)，收集全部流出液，至出水無色止，所述硅膠比表面為300～500m2/g，孔容為0.70～0.90ml/g，繼續(xù)濃縮，將濃縮液進行干燥；另取卡波姆加適量蒸餾水充分溶脹，加丙二醇，乙醇，氮酮，用三乙醇胺調(diào)節(jié)pH值在4.5-5.5，攪拌均勻，加入中藥提取后的干燥物，即得。

所述治療陰道炎的凝膠劑，上述制備方法中三次濃縮使用裝置，包括罐體，設置在所述罐體上的進料口和設置在所述罐體底部的出料管，在所述出料管上設有出料閥門和過濾器，在所述罐體內(nèi)設有攪拌軸，在所述攪拌軸上設有攪拌槳，在所述罐體的頂部設有與所述攪拌軸相連接的攪拌電機，在所述罐體內(nèi)的底壁設有震動腔，在所述震動腔內(nèi)設有震動板，在所述震動板與所述震動腔之間設有震動器，在所述罐體內(nèi)的側(cè)壁上設有凹腔，在所述震動板的頂面設有刮板，在所述刮板與所述凹腔之間設有伸縮氣缸，所述刮板在所述伸縮氣缸的作用下實現(xiàn)對震動板表面的刮擦，在所述震動板的中心設有與所述出料管相連通的出料口。

所述治療陰道炎的凝膠劑，上述制備方法中濃縮裝置所述震動板與所述震動腔的連接處設有密封金屬條，在所述罐體上設有與所述震動器相連接的震動控制器。

所述治療陰道炎的凝膠劑，上述制備方法中濃縮裝置所述刮板的底部設有金屬刮絲層，所述金屬刮絲層抵壓在所述震動板上，在所述罐體上設有與所述伸縮氣缸相連接的伸縮控制按鈕。

所述治療陰道炎的凝膠劑，上述制備方法中濃縮裝置所述罐體內(nèi)設有水份測試儀，在所述出料管內(nèi)設有冷卻器。

所述治療陰道炎的凝膠劑，上述制備方法中干燥使用裝置，包括箱體，設置在所述箱體內(nèi)的物料架和設置在所述箱體頂部的進風管和出風管，其特征在于：在所述箱體的側(cè)壁內(nèi)設有與所述進風管相連通的進風通道，在所述箱體的側(cè)壁上設有與所述進風通道相連通的風孔，所述出風管穿過所述箱體的頂壁連通箱體內(nèi)與箱體外部，在所述箱體的側(cè)壁內(nèi)還設有調(diào)溫腔和滅菌腔，在所述調(diào)溫腔內(nèi)設有電加熱塊，所述進風通道穿過所述調(diào)節(jié)腔和滅菌腔設置，在所述箱體的底壁內(nèi)設有旋轉(zhuǎn)腔，在所述旋轉(zhuǎn)腔內(nèi)設有旋轉(zhuǎn)電機，所述旋轉(zhuǎn)電機的主軸與所述物料架相連接，在所述物料架內(nèi)設有震動凹槽，在所述物料架的頂面設有盛放板，在所述盛放板與所述震動凹槽之間設有震動裝置。

所述治療陰道炎的凝膠劑，上述制備方法中干燥使用裝置所述震動裝置包括驅(qū)動電機，設置在所述驅(qū)動電機主軸上的偏心輪，所述偏心輪的輪邊抵壓在所述盛放板的底面中心，在所述盛放板的底部與所述震動凹槽的底壁之間設有拉簧，所述拉簧以所述偏心輪為中心對稱設置。

所述治療陰道炎的凝膠劑，上述制備方法中干燥使用裝置所述箱體內(nèi)設有溫度傳感器，在所述箱體的側(cè)壁內(nèi)設有與所述溫度傳感器相連接的驅(qū)動器，所述驅(qū)動器與所述電加熱塊的控制端相連接，在所述箱體上還設有箱門。

所述治療陰道炎的凝膠劑在制備抑制人纖維肉瘤HT-1080細胞增殖藥物中的應用。

金釵股為蘭科釵子蘭屬植物柱葉釵子蘭Luisia teretifolia Gaudich.,以全草入藥。清熱解毒，截瘧，催吐。用于扁桃體炎，咽喉炎，惡性瘧疾，中耳炎，骨折。

紅三七為蓼科植物支柱蓼的根莖。散血，止血，行氣，調(diào)經(jīng)。治跌打損傷，勞傷吐血，便血，崩漏，月經(jīng)不調(diào)。

小魚仙草，拉丁學名為Mosla dianthera(Buch.-Ham.ex Roxb.)Maxim.，是唇形科石薺寧屬一年生草本植物。莖高至1米，呈四稜形。葉卵狀披針形或菱伏披針形，總狀花序生于主莖及分枝的頂部，小堅果灰褐色，近球形?；?、果期在5-11月。以全草入藥，夏秋采收，洗凈，鮮用或曬干，具有多種醫(yī)藥價值。祛風發(fā)表，利濕止癢。用于感冒頭痛，扁桃體炎，中暑，潰瘍病，痢疾；外用治濕疹，痱子，皮膚瘙癢，瘡癤，蜈蚣咬傷。取半陰干的全草燒煙可以熏蚊。本發(fā)明以全草入藥。

滇苦菜為菊科苦苣菜屬植物苦苣菜Sonchus oleraceus L.,以全草入藥。清熱解毒，涼血止血。用于腸炎，痢疾，急性黃疸型傳染性肝炎，闌尾炎，乳腺炎，口腔炎，咽炎，扁桃體炎，吐血，衄血，咯血，便血，崩漏；外用治癰瘡腫毒，中耳炎。

白蠟樹葉為木犀種植物白蠟樹的樹葉，調(diào)經(jīng)，止血生肌。

文冠果，拉丁名Xanthoceras sorbifolia Bunge，為無患子科植物文冠果的木材或枝葉，甘，平。祛風除濕。本發(fā)明以枝葉入藥。

有益效果：本發(fā)明金釵股、白蠟樹葉為君藥，清熱解毒，紅三七、小魚仙草為臣藥，散血，止血，行氣，調(diào)經(jīng)，滇苦菜、文冠果為佐使藥，涼血止血，全方治療陰道炎效果明顯。本發(fā)明中的濃縮設備結(jié)構(gòu)簡單、操作便捷，其設有震動板和震動器，而還設有刮板和與所述刮板相連接的伸縮氣缸，可有效防止罐體底部結(jié)塊，一定程度上可大大提高加熱效率，有效解決了傳統(tǒng)技術(shù)中藥濃縮設備中容易出現(xiàn)底部結(jié)塊而影響加熱效率的技術(shù)不足，使用穩(wěn)定性好且適用性強，藥物的有效成分穩(wěn)定不被破壞。本干燥設備結(jié)構(gòu)簡單、操作簡單快捷，其采用箱體側(cè)壁進行送風，并增設了電加熱塊，可以根據(jù)箱內(nèi)的溫度進行調(diào)節(jié)，從而保證了干燥溫度的穩(wěn)定性，而且設有旋轉(zhuǎn)電機和震動裝置，可以在加熱的同時對盛放板進行旋轉(zhuǎn)和震動，從而可防止藥局部干燥，從而一定程度上可以提高干燥的效率，解決了傳統(tǒng)技術(shù)的干燥裝置干燥效率低的技術(shù)不足。并且發(fā)現(xiàn)治療陰道炎的凝膠劑在制備抑制人纖維肉瘤HT-1080細胞增殖藥物中的應用。

附圖說明

為了使本發(fā)明的內(nèi)容更容易被清楚的理解，下面根據(jù)具體實施例并結(jié)合附圖，對本發(fā)明作進一步詳細的說明，其中：

圖1為本發(fā)明濃縮裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。

圖2為本發(fā)明干燥裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。

具體實施方式

以下通過實施例形式，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進一步的詳細說明，但不應將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例，凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。

實施例1

取金釵股20份、紅三七18份、小魚仙草15份、滇苦菜28份、白蠟樹葉14份、文冠果20份，加藥材10倍重量的水，浸泡0.5h，煎煮1小時，過濾，藥渣再加入藥材8倍重量的水，煎煮1小時，藥液濾出，合并兩次煎煮液，濃縮至60℃相對密度為1.05，加乙醇使含醇量的體積百分比達75％，攪拌，靜置，過濾，濾液濃縮至65℃時相對密度為1.25，并回收乙醇，得濃縮液，使用硅膠精制，預先將選定的硅膠裝入樹脂柱中，同時將所述濃縮液經(jīng)純化水稀釋后，通過反相硅膠柱，去掉液體中的雜質(zhì)，收集全部流出液，至出水無色止，所述硅膠比表面為300m2/g，孔容為0.90ml/g，繼續(xù)濃縮，將濃縮液進行干燥；另取卡波姆加適量蒸餾水充分溶脹，加丙二醇，乙醇，氮酮，用三乙醇胺調(diào)節(jié)pH值在4.5，攪拌均勻，加入中藥提取后的干燥物，即得。

見圖1：所述治療陰道炎的凝膠劑的制備方法，上述三次濃縮使用裝置，包括罐體1，設置在所述罐體1上的進料口2和設置在所述罐體1底部的出料管3，在所述出料管3上設有出料閥門4和過濾器5，在所述罐體1內(nèi)設有攪拌軸6，在所述攪拌軸6上設有攪拌槳7，在所述罐體1的頂部設有與所述攪拌軸6相連接的攪拌電機8，在所述罐體1內(nèi)的底壁設有震動腔9，在所述震動腔9內(nèi)設有震動板10，在所述震動板10與所述震動腔9之間設有震動器11，通過震動器可以使震動板震動，從而可有效防止藥物顆粒集結(jié)在震動板上，從而可防止藥物顆粒在震動板上結(jié)塊，在所述罐體1內(nèi)的側(cè)壁上設有凹腔12，在所述震動板10的頂面設有刮板13，在所述刮板13與所述凹腔12之間設有伸縮氣缸14，可以根據(jù)需要控制伸縮氣缸，使刮板在震動板的表面刮動，從而將部分集結(jié)在震動板表面的藥物顆粒刮動，所述刮板13在所述伸縮氣缸14的作用下實現(xiàn)對震動板10表面的刮擦，在所述震動板10的中心設有與所述出料管3相連通的出料口15。

在所述震動板10與所述震動腔9的連接處設有密封金屬條16，在所述罐體上設有與所述震動器相連接的震動控制器17。

在所述刮板的底部設有金屬刮絲層18，所述金屬刮絲層抵壓在所述震動板上，在所述罐體上設有與所述伸縮氣缸相連接的伸縮控制按鈕19。

在所述罐體內(nèi)設有水份測試儀21，在所述出料管內(nèi)設有冷卻器20。

見圖2：所述治療陰道炎的凝膠劑的制備方法，上述干燥使用裝置，包括箱體1，設置在所述箱體1內(nèi)的物料架2和設置在所述箱體1頂部的進風管3和出風管4，在所述箱體1的側(cè)壁內(nèi)設有與所述進風管3相連通的進風通道5，在所述箱體1的側(cè)壁上設有與所述進風通道5相連通的風孔6，進風孔設置在側(cè)壁上，可以保證通風的均勻性，而且可以大大提高與藥物的接觸面積，所述出風管4穿過所述箱體1的頂壁連通箱體1內(nèi)與箱體1外部，在所述箱體1的側(cè)壁內(nèi)還設有調(diào)溫腔7和滅菌腔8，在所述調(diào)溫腔7內(nèi)設有電加熱塊9，設有電加熱塊可以根據(jù)需要對進風管的溫度進行調(diào)節(jié)，保證干燥溫度的穩(wěn)定性，所述進風通道5穿過所述調(diào)節(jié)腔7和滅菌腔8設置，在所述箱體1的底壁內(nèi)設有旋轉(zhuǎn)腔10，在所述旋轉(zhuǎn)腔10內(nèi)設有旋轉(zhuǎn)電機11，所述旋轉(zhuǎn)電機11的主軸與所述物料架2相連接，在所述物料架2內(nèi)設有震動凹槽12，在所述物料架2的頂面設有盛放板13，在所述盛放板13與所述震動凹槽12之間設有震動裝置14。

所述震動裝置14包括驅(qū)動電機141，設置在所述驅(qū)動電機141主軸上的偏心輪142，所述偏心輪142的輪邊抵壓在所述盛放板13的底面中心，在所述盛放板13的底部與所述震動凹槽12的底壁之間設有拉簧15，所述拉簧以所述偏心輪為中心對稱設置，在使用時通過偏心輪的抵壓使盛放板上升，當偏心輪的凹部抵壓盛放板時，盛放板在拉簧的作用下復位，在下落過程中使物材脫離盛放板之后再跌落在盛放板上實現(xiàn)物料的震動。

在所述箱體1內(nèi)設有溫度傳感器16，在所述箱體的側(cè)壁內(nèi)設有與所述溫度傳感器相連接的驅(qū)動器17，所述驅(qū)動器與所述電加熱塊的控制端相連接。溫度傳干器和驅(qū)動器為市場上已有的現(xiàn)有技術(shù)，其在使用連接時只需要按照對應的連接說明連接即可。

在所述箱體上還設有箱門18。

實施例2

取金釵股20份、紅三七18份、小魚仙草15份、滇苦菜28份、白蠟樹葉14份、文冠果20份，加藥材10倍重量的水，浸泡0.5h，煎煮1小時，過濾，藥渣再加入藥材8倍重量的水，煎煮1小時，藥液濾出，合并兩次煎煮液，濃縮至60℃相對密度為1.05，加乙醇使含醇量的體積百分比達75％，攪拌，靜置，過濾，濾液濃縮至65℃時相對密度為1.25，并回收乙醇，得濃縮液，使用硅膠精制，預先將選定的硅膠裝入樹脂柱中，同時將所述濃縮液經(jīng)純化水稀釋后，通過反相硅膠柱，去掉液體中的雜質(zhì)，收集全部流出液，至出水無色止，所述硅膠比表面為500m2/g，孔容為0.70ml/g，繼續(xù)濃縮，將濃縮液進行干燥；另取卡波姆加適量蒸餾水充分溶脹，加丙二醇，乙醇，氮酮，用三乙醇胺調(diào)節(jié)pH值在5.5，攪拌均勻，加入中藥提取后的干燥物，即得。

濃縮和干燥設備同上。

實施例3

取金釵股20份、紅三七18份、小魚仙草15份、滇苦菜28份、白蠟樹葉14份、文冠果20份，加藥材10倍重量的水，浸泡0.5h，煎煮1小時，過濾，藥渣再加入藥材8倍重量的水，煎煮1小時，藥液濾出，合并兩次煎煮液，濃縮至60℃相對密度為1.05，加乙醇使含醇量的體積百分比達75％，攪拌，靜置，過濾，濾液濃縮至65℃時相對密度為1.25，并回收乙醇，得濃縮液，使用硅膠精制，預先將選定的硅膠裝入樹脂柱中，同時將所述濃縮液經(jīng)純化水稀釋后，通過反相硅膠柱，去掉液體中的雜質(zhì)，收集全部流出液，至出水無色止，所述硅膠比表面為400m2/g，孔容為0.70ml/g，繼續(xù)濃縮，將濃縮液進行干燥；另取卡波姆加適量蒸餾水充分溶脹，加丙二醇，乙醇，氮酮，用三乙醇胺調(diào)節(jié)pH值在5，攪拌均勻，加入中藥提取后的干燥物，即得。

濃縮和干燥設備同上。

實施例4：臨床觀察資料

樣品制備：按上述實施例1制備臨床試驗樣品，規(guī)格為10g/支，含生藥量為1.37g/支，南京醫(yī)科大學提供。

臨床資料：50例患者均為2012年4月～2014年8月在我院婦科門診就診病人。年齡45歲以上，參照《中藥新藥治療陰道炎的臨床指導原則》,具備以下條件:1.絕經(jīng)婦女，有明確的陰道炎病史；2.符合陰道炎的中、西醫(yī)診斷標準。絕經(jīng)后陰道分泌物增多，水樣或膿性，偶帶血，外陰瘙癢或有灼熱感。3.陰道粘膜多平滑充血，有散在小出血點，或表面潰瘍，甚至出現(xiàn)粘連。4.宮頸刮片及陰道后穹窿涂片檢查以底層上皮細胞居多，未見腫瘤細胞。5.符合陰道炎診斷標準和納入標準的知情志愿患者。

治療方法：陰道炎患者的治療：每晚睡前用1:5000高錳酸鉀沖洗陰道，無菌干棉球擦干陰道，用無菌棉簽蘸取本發(fā)明凝膠劑，凝膠劑涂抹整個陰道,每日1次，2g/次，每周隨訪一次，4周為1療程。記錄每1例患者的自覺癥狀,陰道檢查情況及白帶清潔度的檢查。

療效觀察：療效標準參照《中藥新藥治療陰道炎的臨床指導原則》。①綜合療效評定：痊愈：治療后癥狀體征全部消失，下腹及陰道墜脹、陰道皮膚瘙癢灼熱感完全消失，療效指數(shù)≥95％。顯效：癥狀明顯減輕，下腹及陰道墜脹、陰道皮膚瘙癢灼熱感減輕，陰道粘膜充血或潰瘍治療后比治療前明顯消退，95％＞療效指數(shù)≥70％。有效：癥狀減輕，下腹及陰道墜脹、陰道皮膚瘙癢灼熱感好轉(zhuǎn)，陰道粘膜充血或潰瘍治療后比治療前消退，70％＞療效指數(shù)≥30％。無效：治療后無改善，療效指數(shù)＜30％。②中醫(yī)癥候療效評定：痊愈：治療后臨床癥狀基本消失，療效指數(shù)≥95％。顯效：治療后臨床癥狀明顯減輕，95％＞療效指數(shù)≥70％。有效：治療后臨床癥狀減輕，70％＞療效指數(shù)≥30％。無效：治療后臨床癥狀無變化，療效指數(shù)＜30％。③主觀癥狀療效評定痊愈：療效指數(shù)≥95％。顯效：95％＞療效指數(shù)≥70％。有效：70％＞療效指數(shù)≥30％。無效：療效指數(shù)＜30％。

治療結(jié)果：50例均于1個療程結(jié)束后立即進行復查。結(jié)果如下：

治療前后癥狀評分比較

帶下量評分比較(表1)

注：經(jīng)x2檢驗，P＜0.05，有統(tǒng)計學意義，用藥前后差異有顯著性。

陰道灼熱感評分比較(表2)

注：經(jīng)x2檢驗，P＜0.05，有統(tǒng)計學意義，用藥前后差異有顯著性。

2.2綜合療效評定(表3)

實施例5：本發(fā)明治療陰道炎的凝膠劑抑制人纖維肉瘤HT-1080細胞增殖的實驗研究資料

1實驗材料

1.1實驗用細胞株

人纖維肉瘤HT-1080細胞，南京醫(yī)科大學實驗室細胞庫，DMEM+10％FBS常規(guī)培養(yǎng)。

1.2實驗藥物

研究藥物：本發(fā)明治療陰道炎的凝膠劑：按實施例1方法制備。

藥液儲液：稱取100mg治療陰道炎的凝膠劑，溶于5ml無水乙醇中，0.2μm濾器過濾，500μl doff管分裝，-20℃存儲，同時0.2μm濾器過濾無水乙醇以備對照組之用。

1.3實驗試劑

DMEM(GIBCO公司Cat.No.12100-061 Lot.No.758137)；胎牛血清(浙江天杭生物科技有限公司Lot.No.100419)；NaHCO3(上海久億化學試劑有限公司Cat.No.11810-033 Lot.No.1088387)；Trypsin(AMRESCO公司批號：2010/04)；EDTA(AMRESCO公司批號：2009/10)；Penicillin G Sodium Salt(AMRESCO公司批號：2010242)；Streptomycin Sulfate(AMRESCO公司批號：2010382)；無水乙醇(南京化學試劑有限公司批號：080310182)；MTT(Biosharp批號：0793)；PBS(實驗室自配)；

1.4實驗器材

萊卡倒置顯微鏡(德國Leica型號：DM1L)；可見-紫外光微孔板檢測儀(美國MD公司型號：SPECTRA MAX 190)；CO2培養(yǎng)箱(FORMA型號：3111)；超凈臺(蘇凈集團安泰公司制造型號：SW-CJ-ZFD)；純水儀(美國Spring公司型號：S/N 020579)；精密移液器(法國吉爾森公司型號：P2)；電子天平(德國賽多利斯有限公司型號：BT323S)；全自動高壓滅菌鍋(日本SANYO公司型號：MLS-3020)；臺式電熱鼓風干燥箱(上海精密實驗設備公司型號：DHG9123A)；冰箱(西門子公司型號：KG18V21TI)；液氮罐(CBS型號：2001)；低速離心機(上海安亭科學儀器廠型號：KA-1000)；0.2μm濾器(MILLIPORE型號：SLGP033RB)；10cm培養(yǎng)皿(NEST公司)、96孔培養(yǎng)板(NEST公司)；細胞計數(shù)板；離心管、移液管、Tips若干。

2實驗方法

1)人纖維肉瘤HT-1080細胞用DMEM+10％FBS于37℃、5％CO2進行常規(guī)培養(yǎng)(10cm培養(yǎng)皿)，當細胞生長至對數(shù)期時，收集細胞，棄去培養(yǎng)液，PBS輕洗3遍，加入3ml 0.25％胰蛋白酶-0.04％EDTA，37℃消化2min后，向其中加入5ml完全培養(yǎng)基中和反應，吹打細胞后將其轉(zhuǎn)入離心管中，1000rpm離心5min，調(diào)整細胞懸液濃度3×104個/ml。

2)將細胞種入96孔培養(yǎng)板中，每孔加入細胞懸液180μl，培養(yǎng)板放入細胞培養(yǎng)箱中(37℃，5％CO2)常規(guī)培養(yǎng)。

3)根據(jù)細胞生長情況，一般長至50％-70％，加入治療陰道炎的凝膠劑溶液，繼續(xù)培養(yǎng)24h。

4)24h后加入20μl MTT溶液(5mg/ml，即0.5％MTT)，繼續(xù)培養(yǎng)4h。

5)4h后扣板法倒去上清，用吸水紙輕輕拍干，每孔加入200μl二甲基亞砜，置搖床上低速振蕩10min，使結(jié)晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測儀490nm處測量各孔的吸光值。

6)同時設置本底(不加細胞，只加培養(yǎng)液)，對照孔(細胞、相同濃度的藥物溶解介質(zhì)、培養(yǎng)液、MTT、二甲基亞砜)，每組設定6個復孔。

7)結(jié)果以藥物對細胞的抑制率表示：

細胞增值抑制率(％)＝(對照孔OD值-給藥孔OD值)/對照孔OD值×100％。實驗重復3次。

3統(tǒng)計處理

采用Microsoft Excel 2003軟件中的相關(guān)分析和Student t檢驗，數(shù)據(jù)以mean±S.D.表示。

4實驗結(jié)果

MTT法實驗后統(tǒng)計結(jié)果顯示，與對照組比較，當劑量達到5mg/ml時，對人纖維肉瘤HT-1080細胞增殖抑制有差異(P<0.05)，劑量在10mg/ml時該差異具有顯著性(P<0.01)，當劑量達到15-20mg/ml時有極顯著性差異(P<0.001)。

表4治療陰道炎的凝膠劑對人纖維肉瘤HT-1080細胞增殖抑制影響研究

注：與對照組比較，*P<0.01；**P<0.001

5實驗結(jié)論

治療陰道炎的凝膠劑可以抑制人纖維肉瘤HT-1080細胞增殖，減少人纖維肉瘤HT-1080細胞的細胞生長數(shù)目，該作用呈劑量依賴性。