本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的母胎血型不合血漿凈化器，主要用于母胎血型不合孕婦血漿中抗胎兒紅細(xì)胞抗體及紅細(xì)胞溶解產(chǎn)物的清除。

背景技術(shù)：

胎兒繼承父親和母親各一半的基因成分，胎兒紅細(xì)胞可以攜帶來(lái)自父體的抗原，表現(xiàn)為胎兒的血型不同于母體。當(dāng)胎兒的紅細(xì)胞進(jìn)入母體的血液循環(huán)后，誘導(dǎo)母體的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體，抗體經(jīng)過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血液循環(huán)系統(tǒng)，結(jié)合胎兒紅細(xì)胞，使胎兒紅細(xì)胞被破壞，導(dǎo)致胎兒和新生兒的母胎血型不合溶血性疾病。

人類(lèi)紅細(xì)胞血型有26種，包括ABO血型、Rh血型以及MN、Lew、Kell和Fya等血型，但能引起母胎血型不合溶血病的血型以Rh血型和ABO血型為最常見(jiàn)。Rh血型抗原是由1號(hào)染色體上3對(duì)緊密連鎖的等位基因決定的，共有6種抗原，即C和c，D和d，E和e。由于D抗原最早被發(fā)現(xiàn)，抗原性最強(qiáng)，故臨床上凡是D抗原陽(yáng)性者稱(chēng)為Rh陽(yáng)性，無(wú)D抗原者稱(chēng)為Rh陰性。Rh血型抗原的抗原性決定了溶血病的嚴(yán)重程度，D抗原可引起嚴(yán)重的溶血病，其次為E抗原，再次為C、c和e抗原，d抗原的抗原性最弱，目前尚無(wú)抗d抗體發(fā)現(xiàn)。在我國(guó)漢族人群中Rh陰性的頻率約為0.4％，而西北地區(qū)少數(shù)民族Rh陰性的頻率高達(dá)10％以上。

雖然ABO血型不合的發(fā)生率很高，但胎兒溶血發(fā)生率很低，即使發(fā)生溶血，癥狀亦較輕，極少發(fā)生核黃疸和水腫，妊娠期無(wú)需特殊處理。而Rh血型不合雖然少見(jiàn)，但其引起母胎血型不合溶血病的病情程度要重于ABO血型不合，所以對(duì)Rh血型不合的診斷及預(yù)防極其重要。Rh血型不合由于母體產(chǎn)生大量抗胎兒紅細(xì)胞的Rh抗體(IgG抗-D)，進(jìn)入胎兒體內(nèi)后破壞大量的胎兒紅細(xì)胞，使胎兒嚴(yán)重貧血、缺氧、心衰、肝臟損傷、低蛋白血癥、全身水腫、胸水、腹水甚至胎死宮內(nèi)。在新生兒時(shí)期，Rh血型不合溶血較ABO血型不合出現(xiàn)黃疸時(shí)間早，最早出現(xiàn)在出生后12小時(shí)內(nèi)，多數(shù)出現(xiàn)在24小時(shí)內(nèi)。由于溶血產(chǎn)生的大量膽紅素不能及時(shí)從肝臟排除，使新生兒黃疸加重，大量的膽紅素滲入腦細(xì)胞而引起核黃疸，常死于嚴(yán)重貧血、心力衰竭、核黃疸，死亡率很高。

雖然Rh抗體進(jìn)入胎兒體內(nèi)后通過(guò)破壞胎兒的紅細(xì)胞而可引發(fā)嚴(yán)重的溶血病，但某些孕婦也能通過(guò)預(yù)先注射Rh抗體來(lái)預(yù)防入侵的Rh(D)陽(yáng)性紅細(xì)胞致敏機(jī)體，進(jìn)而能預(yù)防Rh溶血病的發(fā)生。由于目前大多數(shù)國(guó)家已禁止用志愿者進(jìn)行D抗原免疫，多克隆Ig抗-D的來(lái)源已十分有限，而利用EB病毒轉(zhuǎn)化人B淋巴細(xì)胞分泌Ig抗-D或EB病毒轉(zhuǎn)化結(jié)合細(xì)胞融合制備Ig抗-D，因在體內(nèi)使用EBV轉(zhuǎn)化的B淋巴細(xì)胞株或雜交瘤細(xì)胞株分泌的Ig抗-D仍存在很多問(wèn)題，如所含的EBV有潛在的致病性；可能帶有HIV和肝炎病毒等病原體；用雜交瘤技術(shù)生產(chǎn)的Ig抗-D含鼠源蛋白、容易引起過(guò)敏反應(yīng)、或帶有鼠的癌基因，所以通過(guò)直接在體內(nèi)注射Ig抗-D來(lái)預(yù)防Rh溶血病就受到了限制。

目前臨床上對(duì)母胎血型不合溶血病的治療主要有孕期血漿置換、胎兒輸血、終止妊娠和新生兒換血治療?？?D效價(jià)在32以上需考慮宮內(nèi)輸血，胎兒輸血包括胎兒腹腔內(nèi)輸血和胎兒血管內(nèi)輸血，均具有一定風(fēng)險(xiǎn)，且無(wú)一被證實(shí)有效；新生兒高膽紅素血癥者可采用藍(lán)光照射、靜脈注射免疫球蛋白等藥物治療，必要時(shí)換血治療，換血治療仍為治療新生兒溶血病的主要方法；妊娠期間抗-D效價(jià)在64以上，需考慮血漿置換治療，孕婦血漿置換就是在體外循環(huán)通路中以濾過(guò)法分離孕婦的血細(xì)胞和血漿，去除血漿并以等量的置換液(新鮮冰凍血漿或5％白蛋白)補(bǔ)充回輸，每次置換量2 000～3 000ml、速度20～30ml/min、治療時(shí)間2～4h、每1～3d治療1次；或每次取孕婦全血約400ml，低溫離心后去其血漿約300ml，補(bǔ)充等量同型新鮮血漿，還輸自身紅細(xì)胞(RBC)。血漿置換能與被去除的血漿量成比例地降低致病抗體的滴度(效價(jià))，從而能延長(zhǎng)胎兒在母體內(nèi)的存活和生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)間、能延遲終止妊娠的時(shí)間，是母胎ABO、Rh或其它血型不合的孕婦在臨床早期保胎治療上的良好選擇，具有較好的療效，也無(wú)其他不良反應(yīng)。但血漿置換只能去除血液中的部分抗體，不能中止抗體的繼續(xù)產(chǎn)生，也不能逆轉(zhuǎn)已發(fā)生的母胎血型不合溶血病，需要不間斷地進(jìn)行血漿置換才有效，僅適用于曾在妊娠20～22周前發(fā)生過(guò)胎兒水腫的孕婦，或配偶為致病抗原的純合子者，特別是在去除部份致病抗體的同時(shí)，也一同去除了大量的血漿(多種有益成份)，雖然以置換液作了補(bǔ)充，但無(wú)法完全補(bǔ)足被去除血漿及其各種有益成份，而且替補(bǔ)的置換液量大、費(fèi)用昂貴，補(bǔ)充異體血漿易致傳染病和輸液反應(yīng)等各種副作用，這就限制了血漿置換的普遍開(kāi)展。

所以，迫切需要一種僅去除致病抗體、不去除血漿及其多種有益成份、無(wú)需使用血漿置換液的廉價(jià)、安全、無(wú)副作用的母胎血型不合溶血病的治療新方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了解決久攻不克的母胎血型不合溶血病的治療問(wèn)題，本發(fā)明人提出了本發(fā)明。

本發(fā)明的目的是要提供母胎血型不合血漿凈化器；另一目的是要提供凈化器的制備及應(yīng)用方法。

本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的：取足夠量的新鮮Rh陽(yáng)性O(shè)型紅細(xì)胞，分別在4℃和37℃的條件下以生理鹽水清洗4次，以去除紅細(xì)胞表面可能存在的免疫性抗體或天然抗體，然后以0.04mol/L Na₂HPO₄和0.04mol/L NaH₂PO₄配制的滲透濃度為25和35mmol/L的PH7.4的PB裂解液交替洗滌紅細(xì)胞，最后以生理鹽水清洗直至上清液無(wú)色，以透析紅細(xì)胞中對(duì)人體有害的血紅蛋白，經(jīng)4℃2500r/min離心10min，所得細(xì)胞沉淀即為含D抗原的血影細(xì)胞，經(jīng)檢測(cè)細(xì)胞形態(tài)和抗原性后，裝配高生物相容性材料制成的出入口設(shè)置了能阻擋特定微粒網(wǎng)篩的圓柱形凈化器，繼之高速離心使之形成高密壓縮的細(xì)胞凈化劑，凈化器上下部均設(shè)置細(xì)胞篩網(wǎng)，頂徑為500目，底徑為50目，液體出口設(shè)置200目的細(xì)胞濾網(wǎng)，構(gòu)成防止細(xì)胞碎片進(jìn)入循環(huán)的第二道防線，液體進(jìn)出口與網(wǎng)篩之間設(shè)置緩沖區(qū)以使體外循環(huán)的穩(wěn)定，當(dāng)血漿流經(jīng)凈化器時(shí)，Rh抗體被其中的血影細(xì)胞結(jié)合成固定的免疫復(fù)合物，被破壞的紅細(xì)胞碎片及與之結(jié)合而成的大分子免疫復(fù)合物被凈化器的篩網(wǎng)阻留，去除致病物質(zhì)的血漿從凈化器濾出后回輸體內(nèi)，以此清除血漿Rh抗體及紅細(xì)胞溶解產(chǎn)物。

Rh抗體是母胎Rh血型不合溶血病的致病因子，Rh(D)陽(yáng)性紅細(xì)胞是Rh抗體的天然抗原，本發(fā)明選取Rh(D)陽(yáng)性O(shè)型紅細(xì)胞以PB裂解液透析制成去除有害于人體的血紅蛋白但保留吸附Rh抗體的抗原性而不吸附抗-A和抗-B的天然抗體的血影細(xì)胞，繼之以高速離心制成高密壓縮的細(xì)胞凈化劑而以嚴(yán)密的細(xì)胞間隙固定于特制的凈化器，有利于壓縮細(xì)胞表面與濾過(guò)血漿的充分接觸，從而因增加了血影細(xì)胞對(duì)Rh抗體的均勻接觸面而增加吸附Rh抗體的效果，以及因設(shè)置了多個(gè)極小出入口微孔的特制凈化器篩網(wǎng)對(duì)紅細(xì)胞碎片和大分子抗原抗體復(fù)合物的阻擋特性，形成了Rh(D)陽(yáng)性血影細(xì)胞吸附Rh抗體和凈化器網(wǎng)篩機(jī)械阻擋紅細(xì)胞溶解產(chǎn)物的雙重凈化屏障，使流經(jīng)凈化器的血漿中的Rh抗體及溶血病患者的紅細(xì)胞溶解產(chǎn)物被吸附清除，凈化后的血漿回輸，實(shí)現(xiàn)了人工將Rh抗體從體內(nèi)轉(zhuǎn)移到體外的治療，是一種僅去除致病性抗體和紅細(xì)胞溶解物，不去除血漿及其多種有益成份的無(wú)需血漿置換液的廉價(jià)、安全、無(wú)副作用的母胎血型不合溶血病的治療新方法。

具體實(shí)施方式

圖1是根據(jù)本發(fā)明提出的母胎血型不合血漿凈化器的應(yīng)用示意圖。

圖2是根據(jù)本發(fā)明提出的血漿分離器的內(nèi)部結(jié)構(gòu)示意圖。

圖3是根據(jù)本發(fā)明提出的凈化器的內(nèi)部結(jié)構(gòu)示意圖

圖1中，動(dòng)脈血路管(1)的一端與動(dòng)脈血管相連通，另一端經(jīng)肝素泵(2)和血液泵(3)與血漿分離器(4)相連，血漿分離器(4)經(jīng)血漿泵(6)和循環(huán)管路(7)與2個(gè)并聯(lián)的凈化器(8)、凈化器(9)相連，然后依次與循環(huán)管路(10)、靜脈管路(5)相連，靜脈管路(5)的另一端與靜脈血管相連。

圖2中，1是血漿分離器，2是血漿分離器內(nèi)腔，3是血漿分離器內(nèi)腔管壁上的微孔，4是不能通過(guò)微孔(3)的血細(xì)胞，5是能通過(guò)微孔(3)的小分子血漿成份，6是血漿分離器外腔，7是血漿流出口，8是可開(kāi)關(guān)的閥門(mén)。

圖3中，1是凈化器，2是被固定在凈化器中的Rh陽(yáng)性血影細(xì)胞，3是進(jìn)入凈化器的Rh抗體，4是Rh抗體被Rh陽(yáng)性血影細(xì)胞結(jié)合形成的抗原抗體免疫復(fù)合物，5為RBC碎片。

下面結(jié)合圖1、圖2和圖3，對(duì)本發(fā)明提出的母胎血型不合血漿凈化器的實(shí)施方案作詳細(xì)的描述。

一、Rh(D)陽(yáng)性血影細(xì)胞的制備

1、Rh(D)陽(yáng)性紅細(xì)胞的獲取

(1)從浙江省血站購(gòu)買(mǎi)新鮮濃縮Rh(D)陽(yáng)性“O”型紅細(xì)胞；(2)取新生兒已離體的廢棄臍帶Rh(D)陽(yáng)性“O”型血紅細(xì)胞。

2、主要試劑

30mmol/L PB緩沖液：甲液為0.04mol/L Na₂HPO₄(Na₂HPO₄.12H₂O 14.328g溶解于1000ml去離子水中，室溫儲(chǔ)存?zhèn)溆?；乙液為0.04mol/L NaH₂PO₄(NaH₂PO₄.2H₂O 6.24g溶于1000ml去離子水中，室溫儲(chǔ)存?zhèn)溆?。分別取甲液81.0ml與乙液19.0ml混合即成40mmol/L的PB，然后在40mmol/L PB緩沖液的基礎(chǔ)上加去離子水稀釋0.75倍即成為30mmol/L PB緩沖液，同法按比例配成25和35mmol/L?？?D標(biāo)準(zhǔn)品和Rh(D)標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞購(gòu)自廣州聯(lián)泰生物技術(shù)有限公司。

3、制備方法

(1)取足夠量的新鮮Rh陽(yáng)性O(shè)型紅細(xì)胞，分別在4℃和37℃的條件下，以1500r/min×5min的離心速度，以等體積的生理鹽水清洗紅細(xì)胞4～5次，以去除紅細(xì)胞表面可能附著的ABO血型和Rh血型以及其他的免疫性抗體或天然抗體。

(2)以0.04mol/L Na₂HPO₄和0.04mol/L NaH₂PO₄配制的滲透濃度為25和35mmol/L的PH7.4的PB裂解液，在4℃及2500r/min×10min的離心條件下，反復(fù)交替洗滌紅細(xì)胞，通過(guò)滲透濃度的交替變化，促使血紅蛋白透析出紅細(xì)胞外而被去除。

(3)最后以生理鹽水清洗直至上清液無(wú)色，以完全透析紅細(xì)胞中對(duì)人體有害的血紅蛋白，沉淀即為含D抗原的血影細(xì)胞。

(4)抗原性檢測(cè)：①將血影細(xì)胞與抗-D標(biāo)準(zhǔn)品37℃孵育5min，離心取上清液檢測(cè)抗-D標(biāo)準(zhǔn)品效價(jià)降低數(shù)值來(lái)確定血影細(xì)胞的抗原性。具體方法是：取試管10支，分別編號(hào)1～10，第1管加入血影細(xì)胞沉淀1.0ml，其他各管加生理鹽水0.5ml，然后從第1管吸血影細(xì)胞沉淀0.5ml加入到第2管，混勻后吸0.5ml至第3管，以同樣操作稀釋至第10管，最后管吸出0.5ml棄去，每管加抗-D標(biāo)準(zhǔn)品0.5ml，37℃孵育5min，離心后輕輕混勻，以出現(xiàn)完全凝集、幾乎無(wú)游離細(xì)胞的最大稀釋倍數(shù)代表血影細(xì)胞的抗原性，稀釋倍數(shù)越大，抗原性越強(qiáng)，吸附Rh抗體的能力越強(qiáng)。也可以用Rh(D)標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞測(cè)定上清液抗體效價(jià)來(lái)確定血影細(xì)胞的抗原性；②用Rh(D)標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞測(cè)定上清液抗體效價(jià)，抗-D標(biāo)準(zhǔn)品效價(jià)(已知)減去上清液抗體效價(jià)即為血影細(xì)胞的抗原性(效價(jià))。上清液抗體效價(jià)檢測(cè)方法為：取10支試管，分別編號(hào)1～10，各管加入生理鹽水1ml，取上清液1ml加入到第1管混勻后移出1ml轉(zhuǎn)至第2管，以同樣操作稀釋至第10管，最后管吸出1ml液體棄去，將稀釋好的血清40μl與Rh(D)標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞10μl混合，孵育10分鐘，離心5分鐘判讀結(jié)果，最大稀釋倍數(shù)的凝集管即為抗原性(效價(jià))，效價(jià)應(yīng)在1∶1500以上。

(5)血紅蛋白含量檢測(cè)：以低滲破壞血影細(xì)胞，以常規(guī)化學(xué)發(fā)光分析法或熒光分析法，定性和定量檢測(cè)血影細(xì)胞中的血紅蛋白含量，應(yīng)低于正常人血漿的參考值低限。

(6)血影細(xì)胞形態(tài)：在顯微鏡下觀察血影細(xì)胞的形態(tài)和完整性，應(yīng)呈圈影、無(wú)反光。

(7)對(duì)于細(xì)胞形態(tài)呈圈影、無(wú)反光，高靈敏度常規(guī)血紅蛋白定性檢測(cè)為陰性，定量檢測(cè)低于正常人血漿的參考值低限，吸附Rh抗體效價(jià)1∶1500以上的血影細(xì)胞，留取備用。

二、凈化器的制備

1、制備原理

本發(fā)明基于母胎Rh血型不合溶血病是因孕婦血漿中的游離Rh抗體進(jìn)入胎兒血液破壞胎兒紅細(xì)胞所致，而Rh抗體能被相應(yīng)的天然抗原即Rh陽(yáng)性紅細(xì)胞結(jié)合吸附，以及凈化器的外殼可制成僅允許特定小分子通過(guò)的篩網(wǎng)以阻擋較大分子通過(guò)的機(jī)制制備。

2、制備材料

選用與人類(lèi)血管內(nèi)皮接近的高生物相容性材料，要求生物相容性好，無(wú)補(bǔ)體激活、無(wú)炎癥反應(yīng)、無(wú)白細(xì)胞、血小板、血氧分壓、補(bǔ)體C3aC5a的改變。要求通過(guò)共價(jià)、接枝、聚合等方法改進(jìn)材料表面的均勻性、親水性、減少對(duì)凝血及氧化應(yīng)激的影響。在凈化器內(nèi)表面加親水凝膠，如固化2甲基丙烯酰氧乙基磷酸膽堿-丁基異丁烯酸在醋酸纖維素膜上，通過(guò)控制濕紡過(guò)程而生成CA/PMB30、CA/PMB80和CA/PMB30-80，可以提高生物相容性。將某些抗凝物質(zhì)固化在載體或凈化器內(nèi)表面，可抑制血液凝固、降低肝素用量甚至實(shí)現(xiàn)無(wú)肝素化，如將肝素聚合在聚丙烯腈-聚乙烯亞胺膜上，可減少過(guò)敏體質(zhì)的過(guò)敏反應(yīng)；將肝素共價(jià)結(jié)合到聚醚砜表面，可保持聚醚砜的力學(xué)性能和提高凈化器內(nèi)表面的抗凝血性能。在醋酸纖維膜上共價(jià)固化亞油酸膜，或?qū)⒐矁r(jià)結(jié)合到聚丙烯酸的亞油酸嫁接到聚砜膜表面，都可以有更好的組織相容性和抗凝血效果。

3、凈化器外殼的規(guī)格

制成50mm×60mm的底徑小、頂徑大的圓柱形容器，或制成方形、漏斗形，容積約200～300ml，上下部均設(shè)有細(xì)胞篩網(wǎng)，頂徑篩網(wǎng)目數(shù)為500目，底徑篩網(wǎng)目數(shù)為50目，液體出口處設(shè)置目數(shù)為200目的細(xì)胞濾網(wǎng)，構(gòu)成了防止細(xì)胞碎片進(jìn)入循環(huán)的第二道防線，液體進(jìn)出口與網(wǎng)篩之間設(shè)有緩沖區(qū)，有利于系統(tǒng)循環(huán)的穩(wěn)定性。

4、凈化劑的充填

取本發(fā)明制備的Rh(D)陽(yáng)性血影細(xì)胞，裝入凈化器，以10000r/min離心15～30min，去除上清液，再裝入血影細(xì)胞，以10000r/min離心15～30min，重復(fù)上述操作，直至凈化器中裝滿血影細(xì)胞，封蓋，備用。

三、血漿分離器的制備

1、制備原理：根據(jù)血細(xì)胞和血漿成份的分子大小制備。如人體血液中有形成份(血細(xì)胞)的大小為：正常紅細(xì)胞大約為7微米(μm)，是雙凹圓盤(pán)狀的細(xì)胞；白細(xì)胞分為5種，中性粒細(xì)胞約12μm，嗜酸性粒細(xì)胞略大些，嗜堿性粒細(xì)胞與中性粒細(xì)胞接近，小淋巴細(xì)胞6-8μm，與紅細(xì)胞近似，單核細(xì)胞最大，約15-20μm。血小板為圓盤(pán)形，直徑1～4微米到7～8微米不等，人的血小板平均直徑為2-4微米，厚0.5～1.5微米。

2制備材料：可選用聚醋無(wú)紡布、醋酸纖維、脫脂棉等，要求生物相容性好，幾乎不激活補(bǔ)體、不引起炎癥反應(yīng)、不引起白細(xì)胞、血小板、血氧分壓、補(bǔ)體C3a、C5a的改變?？赏ㄟ^(guò)共價(jià)、接枝、聚合等方法改進(jìn)材料的結(jié)構(gòu)、調(diào)節(jié)表面的微觀不均勻性、親水性、減少對(duì)凝血及氧化應(yīng)激的影響、從而提高篩濾充分性和生物相容性、減少并發(fā)癥的發(fā)生。

3規(guī)格：就分離器的外形來(lái)說(shuō)，可以醋酸纖維或脫脂棉等材料作濾芯制備成柱形結(jié)構(gòu)、以聚醋無(wú)紡布等材料作濾芯制備成扁平結(jié)構(gòu)等形狀；按待分離的血細(xì)胞和血漿成份的分子大小確定孔徑。本發(fā)明所涉及的血漿分離器用性質(zhì)穩(wěn)定、生物相容性好、通透性高的高分子聚合物制成空心纖維型濾器，空心纖維膜直徑為270～370μm，膜厚度為50μm，孔徑為0.2～0.6μm，纖維長(zhǎng)度為13.5～26μm。該孔僅準(zhǔn)許血漿濾過(guò)，但能阻擋所有的細(xì)胞成分。

四、本發(fā)明的應(yīng)用

需與相關(guān)構(gòu)件共同組成體外循環(huán)支路。

1、體外循環(huán)支路的構(gòu)件及用途

(1)凈化器：內(nèi)部的Rh(D)陽(yáng)性血影細(xì)胞用于清除Rh抗體；凈化器外殼進(jìn)出口的網(wǎng)篩具有濾除RBC碎片、Rh抗體與RBC碎片形成的大分子復(fù)合物的作用。

(2)血漿分離器：用于分離血細(xì)胞和血漿。

(3)動(dòng)靜脈壓監(jiān)測(cè)：動(dòng)脈壓監(jiān)測(cè)主要用以動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)凈化器微孔的堵塞情況，另外用以監(jiān)測(cè)體外循環(huán)血栓、凝固和壓力的變化。當(dāng)血流不足時(shí)，動(dòng)脈壓就會(huì)降低；當(dāng)有凝血、血栓形成，特別是凈化器微孔堵塞時(shí)，動(dòng)脈壓就會(huì)升高；靜脈壓監(jiān)測(cè)用來(lái)監(jiān)測(cè)管路血液回流的壓力，當(dāng)凈化器微孔堵塞、凝血、血栓形成、血流不足以及靜脈血回流針頭脫落時(shí)，靜脈壓就會(huì)下降，如果血路回流管扭曲堵塞或回流針頭發(fā)生堵塞時(shí)，靜脈壓就會(huì)升高。

(4)空氣監(jiān)測(cè)(Air Detector)：用來(lái)監(jiān)測(cè)血液流路的空氣氣泡，一般用超聲波探測(cè)的原理，為了避免病人發(fā)生空氣栓塞而設(shè)置。當(dāng)監(jiān)測(cè)到有空氣氣泡時(shí)，檢測(cè)系統(tǒng)會(huì)驅(qū)動(dòng)動(dòng)、靜脈血路夾來(lái)阻斷血流，防止危險(xiǎn)的發(fā)生。

(5)血泵(Blood Pump)：用來(lái)推動(dòng)血液循環(huán)以維持治療的順利進(jìn)行，通常血泵部分往往具有轉(zhuǎn)速檢測(cè)功能，以監(jiān)測(cè)病人的血流情況，因此血泵轉(zhuǎn)輪與凹槽間距設(shè)定要精確，并需要經(jīng)常調(diào)整，根據(jù)血路泵管的情況，一般將間距設(shè)定為3.2～3.3mm，不可太松，否則會(huì)造成血流檢測(cè)不準(zhǔn)；也不可太緊，否則會(huì)造成管路破裂。

(6)肝素泵(Heparin Pump)：肝素泵相當(dāng)于臨床上應(yīng)用的微量注射泵，用以持續(xù)向篩濾管道(病人血液)中注射肝素，由于病人的血液在體外循環(huán)與空氣接觸，容易發(fā)生凝血現(xiàn)象，使用肝素泵可以防止凝血的發(fā)生。

此外還包括溫度控制系統(tǒng)、配液系統(tǒng)、除氣系統(tǒng)、電導(dǎo)率監(jiān)測(cè)系統(tǒng)、超濾監(jiān)測(cè)和漏血監(jiān)測(cè)等部分?？傊?，在本發(fā)明關(guān)鍵構(gòu)成體系的基礎(chǔ)上，有望進(jìn)一步發(fā)展為自動(dòng)化、人性化、個(gè)性化、模塊化、自動(dòng)監(jiān)測(cè)及調(diào)控、液晶顯示、自行判斷警報(bào)原因及解除信號(hào)等微電腦處理系統(tǒng)。

2、本發(fā)明的使用方法

(1)安裝：以無(wú)菌操作連接各部件，包括血漿分離器、凈化器及各循環(huán)管路等各部。

(2)排氣：以無(wú)菌生理鹽水充液分離器、凈化器及各循環(huán)管路，排除分離器、凈化器及其循環(huán)管道內(nèi)的氣體、氣泡，仔細(xì)檢查，確認(rèn)無(wú)氣體、氣泡后使用。

(3)通液：將動(dòng)脈血路管1接通艾滋病患者的動(dòng)脈血管，在操作中再次仔細(xì)檢查排氣是否完全，液流是否通暢，并避免管內(nèi)流液污染。

(4)抗凝：從肝素泵向液流中注射抗凝劑(肝素)，初次為2500∪或20～30∪/kg。

(5)啟動(dòng)：將動(dòng)脈血路管(1)接通治療者的動(dòng)脈血管，將靜脈管路(5)接通治療者的靜脈血管，然后打開(kāi)血液泵，血流量為100～150ml/min，如圖1，當(dāng)動(dòng)脈血液經(jīng)動(dòng)脈血路管(1)進(jìn)入血漿分離器(4)，分離出來(lái)的血漿在血漿泵(6)的作用下經(jīng)循環(huán)管路(7)到達(dá)凈化器(8)，待充滿血漿、約10分鐘，開(kāi)始放出血漿，經(jīng)循環(huán)管路(10)流出，同步向凈化器(9)灌注血漿，在凈化器(8)內(nèi)的血漿將近流完時(shí)，再次開(kāi)始灌注血漿，此時(shí)凈化器(9)開(kāi)始放出血漿，兩個(gè)并聯(lián)的凈化器(8)、凈化器(9)交替進(jìn)行。如圖2，當(dāng)待分離的血液進(jìn)入血漿分離器(1)的內(nèi)腔(2)時(shí)，經(jīng)閥門(mén)(8)的作用，能通過(guò)微孔(3)的小分子血漿及其成份(5)進(jìn)入分離器的外腔(6)，然后經(jīng)血漿出口(7)流出，而不能通過(guò)微孔(3)的血細(xì)胞(4)經(jīng)閥門(mén)(8)流出。如圖3，當(dāng)Rh抗體(3)隨血漿進(jìn)入凈化器(1)時(shí)，被凈化器中的Rh陽(yáng)性血影細(xì)胞(2)結(jié)合成抗原抗體復(fù)合物(4)而不再往下移動(dòng)，被破壞的紅細(xì)胞碎片(5)及與之結(jié)合而成的大分子抗原抗體復(fù)合物不能通過(guò)凈化器出口的網(wǎng)篩而被阻留，凈化后的血漿與血漿分離器分離出來(lái)的血細(xì)胞匯合后回輸，如此直至事先設(shè)定的血漿循環(huán)量(通常為9L)，治療才宣告結(jié)束，如果配套電腦程序控制，整個(gè)治療過(guò)程均由電腦控制，并可隨時(shí)檢測(cè)工作狀態(tài)，使用會(huì)更加方便、自動(dòng)化和安全。

五、本發(fā)明應(yīng)用功效的驗(yàn)證

為了驗(yàn)證治療功效，本發(fā)明設(shè)計(jì)了凈化器功效的簡(jiǎn)易測(cè)試方法：取所制備的血影細(xì)胞，加入到經(jīng)100℃溶化后保溫在37℃?zhèn)溆玫?.0％瓊脂糖C1-4B中，配制成95％血影細(xì)胞濃度的凈化劑；取滅菌的2.5×300mm魏氏血沉管9支，吸取95％血影細(xì)胞濃度的凈化劑至200mm刻度，凈化劑冷卻后成為半固體；購(gòu)買(mǎi)浙江省中心血站新鮮冰凍血漿200mL，另購(gòu)買(mǎi)Rh抗體(人抗D型血清干粉標(biāo)準(zhǔn)品，廣州聯(lián)泰生物技術(shù)有限公司)，以新鮮血漿配成1∶200、1∶300、1∶600抗體滴度，按常規(guī)Rh(抗D)滴度檢測(cè)方法(參考說(shuō)明書(shū))，進(jìn)一步檢測(cè)確認(rèn)上述所配制的抗體滴度是否相符，稱(chēng)為濾前(Rh)抗體(滴度)，然后各取10ml濾前抗體分別注入3支血沉管的上端空管，待流經(jīng)血沉管下層的含有血影細(xì)胞的吸附劑后，收集流出液，稱(chēng)為濾后(Rh)抗體，按常規(guī)Rh(抗D)滴度檢測(cè)方法確認(rèn)滴度，再分別將濾后抗體經(jīng)含有血影細(xì)胞的凈化劑中作第2次濾出，如此重復(fù)3次濾過(guò)及抗體滴度檢測(cè)，結(jié)果(表1)說(shuō)明，Rh抗體濾過(guò)簡(jiǎn)易凈化劑后，大部分Rh抗體已被相應(yīng)的含有血影細(xì)胞的凈化劑吸附，經(jīng)第1次、第2次、第3次濾過(guò)后，Rh抗體的平均滴度分別從濾前的1∶367降為濾后的1∶183、1∶58、1∶29，說(shuō)明隨著濾過(guò)次數(shù)的增加，Rh抗體會(huì)不斷地被血影細(xì)胞吸附清除，從而達(dá)到降低孕婦(新生兒)血漿Rh抗體滴度而治療母胎血型不合溶血病的目的。

表1 Rh抗體濾過(guò)含有血影細(xì)胞的凈化劑前后滴度檢測(cè)結(jié)果(1/x)