本發(fā)明涉及1-苯基單-或-多羥基丙烷衍生物用于對抗皮膚老化的用途，并且還涉及新穎1-苯基單-或-多羥基丙烷衍生物以及包含它們的組合物、尤其是化妝品組合物。
女人和男人目前具有希望盡可能長時間顯得年輕的趨勢，并因此試圖減輕尤其由皺紋和細紋反映的皮膚老化的跡象。在這點上，廣告和時尚行業(yè)提及用于使年輕皮膚的跡象——容光煥發(fā)和無皺紋的皮膚保持盡可能長時間的產(chǎn)品，因為外貌對精神和/或士氣有影響而更是如此。
迄今，皺紋和細紋使用含有活性劑的化妝品來處理，所述活性劑例如通過改善皮膚的細胞更新或替代地通過促進構成皮膚組織的彈性纖維的合成或防止其降解來作用于皮膚。
皮膚由相互作用的兩個區(qū)室(compartment)組成：表面區(qū)室——表皮和另一更深區(qū)室——真皮。天然的人表皮主要由三種類型的細胞組成，即構成絕大多數(shù)的角質(zhì)形成細胞、黑素細胞和朗格漢斯(langerhans)細胞。這三種類型的細胞中每一者由于其固有功能而有助于皮膚在身體中所起的必需作用、尤其是被稱為“屏障功能”的保護身體免受外部侵襲因素的作用。
表皮通常被分成構成表皮生發(fā)層的角質(zhì)形成細胞的基底層，位于生發(fā)層上的由數(shù)個多角細胞層組成的棘層，由含有相異細胞質(zhì)內(nèi)含物，透明角質(zhì)顆粒的扁平細胞組成的一至三個“顆?！睂樱约白詈笥商幱谄浞只┢诘慕琴|(zhì)形成細胞(稱為角層細胞)的一組層組成的角質(zhì)化層(或角質(zhì)層)。角層細胞是主要由含有細胞角蛋白的纖維狀材料組成的無核細胞，由角質(zhì)化包膜包圍。
真皮向表皮提供牢固的支撐。它還是表皮的營養(yǎng)元素。它主要由成纖維細胞和胞外基質(zhì)組成，胞外基質(zhì)主要由膠原、彈性蛋白和被稱為基質(zhì)的物質(zhì)組成，所述基質(zhì)包含硫酸化的糖胺聚糖(例如，硫酸軟骨素)或未硫酸化的糖胺聚糖(例如，透明質(zhì)酸)、蛋白聚糖和各種蛋白酶。這些組分由成纖維細胞合成。其中還發(fā)現(xiàn)了白細胞、肥大細胞或者組織巨噬細胞。最后，血管和神經(jīng)纖維穿過真皮。表皮與真皮之間的內(nèi)聚力由真皮-表皮接界(dermo-epidermaljunction)提供。
表皮不斷參與產(chǎn)生新角質(zhì)形成細胞以補償角質(zhì)化層處表皮細胞的持續(xù)損失。然而，在老化的過程中，可在生理上觀察到處于增殖階段的細胞的數(shù)量減少和因此活表皮層的減少。
皮膚且特別是表皮的穩(wěn)態(tài)由皮膚細胞的增殖與分化過程之間精細調(diào)節(jié)的平衡產(chǎn)生。這些增殖和分化過程受完全調(diào)控：它們參與皮膚的更新和/或再生并且導致皮膚恒定厚度、且特別是表皮恒定厚度的維持。這種皮膚穩(wěn)態(tài)還參與維持皮膚的機械性質(zhì)。
然而，這種皮膚穩(wěn)態(tài)可受到某些生理因素(年齡、絕經(jīng)期、激素等)或環(huán)境因素(uv脅迫、氧化應激、刺激性應激等)的損害。
增殖細胞在代謝上非?；钴S并且對這些(內(nèi)在或環(huán)境的)有害因素敏感，因此在表皮上其量降低。某些生化標志表征表皮的這種再生能力損失，諸如sab半乳糖苷酶活性(dimrigp等人，procnatlacadsciusa.1995)，或諸如p16(ink4a)的細胞周期損傷的標志(cordiscos等人，jinvestdermatol.2010)。
因此重要的是保持此細胞池以便有助于老化跡象延遲發(fā)生(onset)。
角質(zhì)形成細胞的細胞活力可降低，尤其是在老化情形下或由于氧化應激(例如太陽輻射，即uv、可見光、紅外)、由于表皮被毒素或微生物群落的代謝物侵襲、或更一般而言，在年代老化(chronologicalaging)期間。角質(zhì)形成細胞更新和分化的能力降低并且依賴于其的結構的穩(wěn)態(tài)、諸如表皮的屏障功能受損。
當表皮的再生潛能變得更小時：基底層的細胞分裂更不活躍，尤其導致表皮更新的減慢和/或減少。因此，細胞更新不再補償表面處所除去的細胞的損失，導致表皮萎縮和/或皮膚厚度降低。這對于例如指甲的表皮附件的增殖細胞是同樣的情況，其結果是指甲生長減慢。
表皮穩(wěn)態(tài)的損傷還由皮膚膚色的暗淡和/或變色外觀來反映。
屏障功能的損傷取決于定位由各種跡象來表明：干皮、角化過度、薄表皮、薄唇、表面皺紋。
因此，與表皮細胞活力損傷相關聯(lián)的病癥不僅涉及其結構，而且涉及其穩(wěn)態(tài)。表皮對應激的耐性和表皮再生的能力降低。若將老年人的皮膚屏障與年輕成人的相比較，初看之下并不顯現(xiàn)差異：角質(zhì)化層的厚度和其脂類的組成未必改變，并且由經(jīng)表皮失水表示的屏障功能被保存。在機械應力下或在暴露于刺激性因素期間顯現(xiàn)老年皮膚屏障的缺乏：老年表皮的屏障更迅速劣化，并且其功能恢復較慢。每天，酒精消毒，與檸檬汁或其它刺激物接觸則造成刺痛和灼傷，并且干燥空氣耐受性差，而年輕的皮膚無任何問題地耐受于此。受損皮膚屏障還促進過敏原與表皮的免疫系統(tǒng)接觸，因此增加變應性致敏的風險。
目前，沒有充分證據(jù)證明衰老細胞隨著年齡在身體中累積。衰老關聯(lián)性β-半乳糖苷酶是衰老細胞的標志并且其積累已在體內(nèi)在皮膚中顯示(dimaigp等人，procnatacad.sciusa.1995；92(20)：9363-7)。
衰老的另一個標志是線粒體功能的損傷。線粒體的作用在于產(chǎn)生細胞能量。
已廣泛描述了光老化現(xiàn)象的臨床跡象(photodermatolphotoimmunolphotomed.2008(4)fourtaniera，moyald，seités.)。
皮膚的內(nèi)因性老化、也被稱為年代老化被描述為細胞活力損傷的結果，與其它器官中所發(fā)生的相似。內(nèi)因性老化或年代老化由其它臨床標志和跡象、特別是如上所述的屏障功能損傷來表明(faragema等人，2009；10(2)：73-86)。
諸如干皮、皺紋、細紋等的這些審美障礙使得在化妝品中存在對作用于皮膚以在其受損時改善細胞活力的化合物的需要。
ampk存在于身體的所有細胞中并且在其中起能量計作用。ampk(或5'-腺苷單磷酸激活的蛋白激酶)是由具有激酶活性的催化亞基α以及兩個調(diào)節(jié)亞基β和γ組成的異源三聚體酶。ampk的活性取決于表征細胞能量水平的amp/atp比率的變化(atp水解成amp以“遞送”細胞的各種生化過程所需的能量)。它以磷酸化或非磷酸化的兩種形式存在，磷酸化形式是激活型。
當其響應于細胞的能量需求或應激而被激活時，ampk增加諸如糖酵解的能量產(chǎn)生過程并且它抑制非必需消耗過程，因此使細胞能夠存活。細胞能量狀態(tài)的保持涉及維持物種的壽命和對抗老化的跡象。因此，能夠提高ampk活性的化合物是目前在治療年齡相關性臨床表現(xiàn)中非常感興趣的對象?？衫斫庠诜乐蛊つw的年齡相關性損傷的情形下將對整個生物體有效的這種方法轉用到皮膚上的價值。
ampk活性對應于磷酸化ampk的細胞濃度。因此，值得的是具有最高可能水平的磷酸化蛋白以便具有此高活性。
ampk在控制角質(zhì)形成細胞能量代謝中的作用目前是存疑的(prahl等人，biofactors.2008；32(1-4)：245-55)，其參與角質(zhì)形成細胞的增殖和分化已得到確定(sahaak等人，biochembiophysrescommun.2006年10月20日；349(2)：519-24)。
wo2004/05098提出通過控制ampk活性來調(diào)節(jié)任何細胞或生物體的壽命，并且通過施用ampk代謝途徑的調(diào)節(jié)劑來治療年齡相關性病癥，而沒有說明它是否涉及激活劑或抑制劑。
saha等人(biochem.biophys.res.commun2006，349：519-524)研究了ampk調(diào)節(jié)的角質(zhì)形成細胞生長并且得出結論：諸如aicar的ampk激活劑促進角質(zhì)形成細胞的體外分化。
出乎意料地，已發(fā)現(xiàn)在本發(fā)明的情形下，下文描述的某些1-苯基單-或-多羥基丙烷衍生物能夠刺激ampk的活性、特別是由正常人角質(zhì)形成細胞產(chǎn)生磷酸化ampk。因此，這些化合物將特別可用于對抗老化期間皮膚細胞活力的降低和推遲與其相關聯(lián)跡象的發(fā)生。
其它作用路線是可能的以便防止或限制皮膚老化的后果，特別包括刺激諸如膠原和特別是膠原i以及還有絲聚合蛋白的皮膚的結構分子的合成。
根據(jù)本發(fā)明的用途是非治療性用途和有利地，化妝品用途；術語“化妝品”意指意圖改善皮膚或諸如指甲的皮膚附件的審美外觀、尤其是推遲或減少健康良好的個體隨著年齡出現(xiàn)的外觀上的生理變化。這些變化可從30或35歲開始出現(xiàn)，但一般在40歲之后更明顯，并且在50歲及以上變得嚴重。
根據(jù)本發(fā)明的化合物有效用于改善表皮更新和用于更有效對抗皮膚老化的跡象。
這些化合物因此在意圖用于以下的化妝品組合物中發(fā)現(xiàn)特定應用：防止和/或通過化妝處理皮膚老化；尤其是特別局部地防止和/或處理皮膚老化的跡象，和最特別地在與有皺紋的皮膚、展現(xiàn)其粘彈性質(zhì)或生物力學性質(zhì)損傷的皮膚、展現(xiàn)其組織內(nèi)聚力的損傷的皮膚、變薄的皮膚和/或展現(xiàn)其表面外觀損傷的皮膚相關的皮膚上的跡象。
具體地，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)1-苯基單-或-多羥基丙烷衍生物能夠刺激由角質(zhì)形成細胞激活ampk。
如上文解釋的，ampk的激活、特別是其磷酸化形式的增加對應于刺激角質(zhì)形成細胞的代謝功能：然后這些細胞處于與年輕的角質(zhì)形成細胞的那些相似的狀態(tài)，并且將有助于調(diào)節(jié)皮膚穩(wěn)態(tài)的生理機制。
使用根據(jù)本發(fā)明的化合物可更特別使得有可能維持和/或修復皮膚的生物力學性質(zhì)。
本文中術語“皮膚的生物力學性質(zhì)”意指皮膚的拉伸性、緊張性、堅固性、柔軟性和/或彈性性質(zhì)。
本文中術語“皮膚老化的跡象”意指因老化所致的皮膚外觀的任何變化，所述老化無論是年代老化和/或外因性老化、特別是光誘導性老化或激素老化；在這些跡象中，可能區(qū)分：
-有皺紋的皮膚，其尤其由皺紋和/或細紋的顯現(xiàn)來反映；
-展現(xiàn)其粘彈性質(zhì)或生物力學性質(zhì)損傷的皮膚，或展現(xiàn)彈性和/或拉伸性和/或堅固性和/或柔軟性和/或緊張性不足的皮膚，所述皮膚特別由干癟、松軟、松弛或下垂的皮膚來反映；
-展現(xiàn)其組織內(nèi)聚力損傷的皮膚；
-變薄的皮膚；以及
-展現(xiàn)其表面外觀損傷的皮膚，所述皮膚尤其由皮膚紋理(grain)的損傷、例如粗糙度來反映。
本發(fā)明涉及式(i)的化合物作為藥劑的非治療性用途，其用于防止和/或減少皮膚老化的跡象，尤其是選自以下的皮膚上的跡象：有皺紋的皮膚、展現(xiàn)其粘彈性質(zhì)或生物力學性質(zhì)損傷的皮膚、展現(xiàn)其組織內(nèi)聚力損傷的皮膚、變薄的皮膚，和展現(xiàn)其表面外觀損傷的皮膚。
特別地，本發(fā)明涉及式(i)的化合物
其中
-n＝0、1、2或3
-m＝0、1、2或3
并且1≤m+n≤3
-r1獨立地表示直鏈c1-c6烷基或支鏈c3-c6烷基或直鏈c1-c6?；?/p>
-r2和r3獨立地表示氫原子或oh基，
以及還有其旋光異構體、立體異構體和/或非對映異構體和/或其鹽，條件是當r1表示甲基、r2表示oh基、并且r3表示氫原子時，則2≤m+n≤3，
作為藥劑的優(yōu)選非治療性用途，其用于預防和/或減少皮膚老化的跡象，尤其是選自以下的皮膚上的跡象：有皺紋的皮膚、展現(xiàn)其粘彈性質(zhì)或生物力學性質(zhì)損傷的皮膚、展現(xiàn)其組織內(nèi)聚力損傷的皮膚、變薄的皮膚，和展現(xiàn)其表面外觀損傷的皮膚。
本發(fā)明還涉及一種在生理上可接受的介質(zhì)中包含至少一種根據(jù)本發(fā)明的式(i)的化合物的組合物、尤其是化妝品組合物。
特別地，本發(fā)明涉及一種在生理上可接受的介質(zhì)中包含除如下化合物以外的至少一種根據(jù)本發(fā)明的式(i)的化合物的組合物、尤其是化妝品組合物；
本發(fā)明還涉及在生理上可接受的介質(zhì)中包含至少一種式(i)的化合物的組合物、尤其是化妝品組合物的非治療性用途。
特別地，本發(fā)明涉及在生理上可接受的介質(zhì)中包含至少一種式(i)的化合物的組合物、尤其是化妝品組合物的非治療性用途，其中當r1表示甲基、r2表示oh基、并且r3表示氫原子時，則2≤m+n≤3。
本發(fā)明還涉及一種用于處理皮膚的非治療性化妝方法，所述方法包括將至少一種式(i)的化合物和/或含有至少一種根據(jù)本發(fā)明的式(i)的化合物的化妝品組合物施加于皮膚。這種方法在處理皮膚，尤其是成熟皮膚(至少40歲的個體的皮膚)和/或有皺紋的皮膚，特別是臉部、尤其是額、頸、領口(neckline)和/或手的皮膚方面發(fā)現(xiàn)有利應用。本發(fā)明的主題還是一種化妝處理方法，其特征在于所述方法意圖用來促進角質(zhì)形成細胞更新以及減少或防止選自表皮變薄、表面皺紋和屏障功能損傷的跡象。
特別地，本發(fā)明涉及一種用于處理皮膚的非治療性化妝方法，所述方法包括將至少一種式(i)的化合物施加于皮膚，其中當r1表示甲基、r2表示oh基、并且r3表示氫原子時，則2≤m+n≤3。
特別地，本發(fā)明涉及一種含有除如下化合物以外的至少一種根據(jù)本發(fā)明的式(i)的化合物的化妝品組合物：
本發(fā)明的主題還是如下文定義的式(v)至(ix)的新穎1-苯基單-或-多羥基丙烷化合物。
本發(fā)明的主題還是在生理上可接受的介質(zhì)中包含至少一種式(v)至(ix)的化合物的組合物、尤其是化妝品組合物。
本發(fā)明還涉及式(v)至(ix)的新穎化合物或式(v)至(ix)的新穎化合物的組合物、尤其是化妝品組合物特別作為藥劑的非治療性用途，其用于防止和/或減少皮膚老化的跡象，尤其是選自以下的皮膚上的跡象：有皺紋的皮膚、展現(xiàn)其粘彈性質(zhì)或生物力學性質(zhì)損傷的皮膚、展現(xiàn)其組織內(nèi)聚力損傷的皮膚、變薄的皮膚，和展現(xiàn)其表面外觀損傷的皮膚。
本發(fā)明最后涉及一種用于處理皮膚的非治療性化妝方法，所述方法包括將至少一種式(v)至(ix)的新穎化合物和/或含有至少一種根據(jù)本發(fā)明的式(v)至(ix)的新穎化合物的化妝品組合物施加于皮膚。這種方法在處理皮膚，尤其是成熟皮膚和/或有皺紋的皮膚，特別是臉部、尤其是額、頸和/或手的皮膚方面發(fā)現(xiàn)有利應用。
因此，根據(jù)本發(fā)明的化合物對應于下式(i)：
其中
-n＝0、1、2或3
-m＝0、1、2或3
并且1≤m+n≤3
-r1獨立地表示直鏈c1-c6烷基或支鏈c3-c6烷基或直鏈c1-c6?；?/p>
-r2和r3獨立地表示氫原子或羥基，
以及還有其旋光異構體、立體異構體和/或非對映異構體和/或其鹽。
在本發(fā)明的實施方案中，所述化合物對應于下式(i)：
其中
-n＝0、1、2或3
-m＝0、1、2或3
并且1≤m+n≤3
-r1獨立地表示直鏈c1-c6烷基或支鏈c3-c6烷基或直鏈c1-c6?；?，
-r2和r3獨立地表示氫原子或oh基，
以及還有其旋光異構體、立體異構體和/或非對映異構體和/或其鹽，條件是當r1表示甲基、r2表示oh基、并且r3表示氫原子時，則2≤m+n≤3。
式(i)的化合物的鹽可為有機鹽和/或無機物。它們可選自金屬鹽，例如鋁(al3+)、鋅(zn2+)、錳(mn2+)或銅(cu2+)；堿金屬鹽，例如鋰(li+)、鈉(na+)或鉀(k+)；和堿土金屬鹽，例如鈣(ca2+)或鎂(mg2+)。它還可包括式nh4+的鹽或式nhx3+的有機鹽，nx3指示有機胺，基團x為相同或不同的，兩個或三個x基可成對與攜帶它們的氮原子形成環(huán)，或nx3可能表示芳族胺。有機胺特別表示烷基胺，諸如甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺或乙胺；羥烷基胺，諸如2-羥乙胺、雙-(2-羥乙基)胺或三-(2-羥乙基)胺；環(huán)烷基胺，諸如二環(huán)己胺或葡糖胺、哌啶；吡啶和類似物，例如可力丁、奎寧或喹啉；以及具有堿性特征的氨基酸，如例如賴氨酸或精氨酸。
優(yōu)選式(i)的化合物的鹽是鈣鹽。
優(yōu)選地：
-n＝0、1、2或3
-m＝0、1、2或3
并且2≤m+n≤3
-r1獨立地表示直鏈c1-c6烷基或支鏈c3-c6烷基或直鏈c1-c6?；?/p>
-r2和r3獨立地表示氫原子或oh基。
優(yōu)選地：
n＝0、1、2或3
m＝0、1、2或3
并且1≤m+n≤3
取代基r1中每一者獨立地表示直鏈c1-c4烷基
r2和r3獨立地表示氫原子或羥基，
以及還有其旋光異構體、立體異構體和/或非對映異構體。
優(yōu)選地，直鏈飽和或支鏈烷基可選自甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基和叔丁基，更優(yōu)選甲基。
優(yōu)選地：
n＝0、1、2或3
m＝0、1、2或3
并且2≤m+n≤3
取代基r1中每一者獨立地表示直鏈c1-c4烷基；優(yōu)選表示甲基；
r2和r3獨立地表示氫原子或羥基。
甚至更優(yōu)選地，
n＝0、1、2或3
m＝0、1、2或3
并且2≤m+n≤3
取代基r1中每一者表示甲基
r2和r3獨立地表示氫原子或羥基，
以及還有其旋光異構體、立體異構體和/或非對映異構體。
在本發(fā)明的第一優(yōu)選變體中，在式(i)的化合物、或其旋光異構體、立體異構體和/或非對映異構體和/或其鹽中，將優(yōu)選選擇r2表示氫原子或羥基并且r3表示氫原子的化合物，
即，對應于下式(ii)的化合物：
其中：
n＝0、1、2或3
m＝0、1、2或3
并且1≤m+n≤3
-取代基r1中每一者獨立地表示直鏈c1-c6烷基或支鏈c3-c6烷基或直鏈c1-c6?；?，
r2表示氫原子或羥基。
優(yōu)選地：
-n＝0、1、2或3
-m＝0、1、2或3
并且2≤m+n≤3
-r1獨立地表示直鏈c1-c6烷基或支鏈c3-c6烷基或直鏈c1-c6?；?，
-r2和r3獨立地表示氫原子或oh基。
優(yōu)選地：
n＝0、1、2或3
m＝0、1、2或3
并且1≤m+n≤3
-取代基r1中每一者獨立地表示直鏈c1-c4烷基
-r2表示氫原子或羥基。
優(yōu)選地：
n＝0、1、2或3
m＝0、1、2或3
并且2≤m+n≤3
取代基r1中每一者獨立地表示直鏈c1-c4烷基；優(yōu)選表示甲基；
r2和r3獨立地表示氫原子或羥基。
甚至更優(yōu)選地，
n＝0、1、2或3
m＝0、1、2或3
并且2≤m+n≤3
r1表示甲基
r2表示氫原子或羥基。
在式(ii)的化合物中，將更特別地選擇以下化合物1至4和7、其旋光異構體、立體異構體和非對映異構體和/或其幾何異構體和/或其鹽：
在本發(fā)明的第二優(yōu)選變體中，在式(i)的化合物、或其旋光異構體、立體異構體和/或非對映異構體和/或其鹽中，將優(yōu)選選擇r2表示氫原子并且r3表示羥基的化合物，即，對應于式(iii)的化合物，
其中：
n＝0、1、2或3
m＝0、1、2或3
并且1≤m+n≤3
-取代基r1中每一者獨立地表示直鏈c1-c6烷基或支鏈c3-c6烷基或直鏈c1-c6?；?，
優(yōu)選地：
n＝0、1、2或3
m＝0、1、2或3
并且1≤m+n≤3
-取代基r1中每一者獨立地表示直鏈c1-c4烷基。
甚至更優(yōu)選地，
n＝0、1、2或3
m＝0、1、2或3
并且2≤m+n≤3
r1表示甲基
在式(iii)的化合物中，將更特別優(yōu)選選擇以下化合物5和6、其旋光異構體、立體異構體和非對映異構體或其幾何異構體和/或其鹽，并且甚至更特別選擇化合物5：
優(yōu)選地，在式(iii)的化合物中，將更特別地選擇以上化合物5和6的鈣鹽，并且甚至更特別選擇化合物5的鈣鹽。
本發(fā)明的主題還是下式(v)至(ix)的新穎化合物：
式(v)：
其中：
-n＝1或2
-取代基r1中每一者獨立地表示氫原子或直鏈c1-c6烷基或支鏈c3-c6烷基
式(vi)：
其中：
-當r2表示羥基時，則r3表示氫原子，
-當r2表示氫原子時，則r3表示羥基，
-取代基r1中每一者獨立地表示氫原子或直鏈c1-c6烷基或支鏈c3-c6烷基
式(vii)：
其中：
-r3表示氫原子或羥基
-取代基r1中每一者獨立地表示氫原子或直鏈c1-c6烷基或支鏈c3-c6烷基
式(viii)：
其中：
-當r2表示羥基時，則r3表示氫原子，
-當r2表示氫原子時，則r3表示羥基，
-取代基r1中每一者獨立地表示氫原子或直鏈c1-c6烷基或支鏈c3-c6烷基
式(ix)：
其中r1表示氫或直鏈c1-c6烷基或支鏈c3-c6烷基。
取決于丙烷單元的取代單元(r2和r3的值)，對應于式(i)的化合物可根據(jù)四個反應順序來制備。
其中r2＝r3＝h的情況
m、n和r1具有與前述相同的含義。
將m-cpba(1-5當量)在諸如二氯甲烷的非質(zhì)子溶劑中的溶液逐滴添加至預溶解于相同溶劑中的烯烴。攪拌反應混合物(0℃-50℃)持續(xù)1-72小時并且然后用na2so3水溶液(濃度5％-20％)處理(workup)以中和過量氧化劑。分離各相并且將有機相用諸如10％nahco3水溶液的堿性水溶液洗滌兩次、干燥并濃縮?？赏ㄟ^硅膠上的柱層析純化殘余物。
有利地，當m＝0時，化合物(i)可通過對應的酚衍生物的烷基化直接獲得。
r1和n具有與前述相同的含義。
在0-70℃下將環(huán)氧丙烷(1-10當量)逐滴添加至酚衍生物(1當量)在諸如thf的有機溶劑中的溶液。逐滴添加n-buli在己烷中的溶液(例如市售1.6m溶液(0.1-2當量)，并且然后在室溫下攪拌反應混合物1-24小時。通過添加飽和nh4cl水溶液中和過量堿，并且用諸如乙酸乙酯或二氯甲烷的有機溶劑萃取混合物。將有機相合并、干燥并濃縮。通過硅膠上的柱層析純化殘余物。
其中r2＝oh，r3＝h的情況
r1、m和n具有與前述相同的含義。
當m≥1時，prot表示羥基官能保護基，特別是-co-ch3或ch2-ph。
a)根據(jù)本領域技術人員已知的標準方法保護游離酚官能(參見，例如，greene'sprotectivegroupsinorganicsynthesis，p.g.m.wutz，t.greene編，wiley-blackwell)，例如通過使用乙酸酯基或芐基作為保護基；
b)對應受保護苯乙烯的雙羥基化：
該反應可使用市售sharpless體系ad-mix-α(可以參考392758購自供應商sigmausa)或ad-mix-β(可以參考392766購自供應商sigmausa)來進行。
將氧化體系ad-mix(1-3當量)和衍生自第一步的受保護苯乙烯溶解于諸如1/1比例的t-buoh/水混合物的烷醇-水兩相混合物中，并且在0-50℃下攪拌介質(zhì)直至完全溶解。
在0-70℃下加熱反應介質(zhì)2-96小時。在冷卻至室溫之后，攪拌所述介質(zhì)使其與亞硫酸鈉接觸以中和過氧化物。用諸如乙酸乙酯的有機溶劑萃取產(chǎn)物，并且將有機相合并、干燥并濃縮。通過硅膠上的柱層析純化殘余物。
c)根據(jù)本領域技術人員已知的標準方法使預先受保護的酚官能脫保護(參見，例如，greene'sprotectivegroupsinorganicsynthesis，p.g.m.wutz，t.greene編，wiley-blackwell)
其中r2＝oh，r3＝oh的情況
r1、m和n具有與前述相同的含義。
當m≥1時，prot表示羥基官能保護基，特別是-co-ch3或ch2-ph。
a)根據(jù)本領域技術人員已知的標準方法保護游離酚官能(參見，例如，greene'sprotectivegroupsinorganicsynthesis，p.g.m.wutz，t.greene編，wiley-blackwell)，例如通過使用乙酸酯基或芐基作為保護基；
b)對應受保護烯烴的雙羥基化：
該反應可使用市售sharpless體系ad-mix-α(可以參考392758購自供應商sigmausa)或ad-mix-β(可以參考392766購自供應商sigmausa)來進行。
將氧化體系ad-mix(1-3當量)和衍生自第一步的受保護烯烴溶解于諸如1/1比例的t-buoh/水混合物的烷醇-水兩相混合物中，并且在0-50℃下攪拌介質(zhì)直至完全溶解。
在0-70℃下加熱反應介質(zhì)2-96小時。在冷卻至室溫之后，攪拌所述介質(zhì)使其與亞硫酸鈉接觸以中和過氧化物。用諸如乙酸乙酯的有機溶劑萃取產(chǎn)物，并且將有機相合并、干燥并濃縮。通過硅膠上的柱層析純化殘余物。
或者，此雙羥基化可經(jīng)由環(huán)氧化/水解順序進行。
將m-cpba(1-5當量)在諸如二氯甲烷的非質(zhì)子溶劑中的溶液逐滴添加至預溶解于相同溶劑中的衍生自第一步的受保護烯烴(1當量)。攪拌反應混合物(0℃-50℃)持續(xù)1-72小時并且然后用na2so3水溶液(濃度5％-20％)處理以中和過量氧化劑。分離各相并且將有機相用諸如10％nahco3水溶液的堿性水溶液洗滌兩次、干燥并濃縮。通過硅膠上的柱層析純化殘余物。
將如此分離的產(chǎn)物溶解于諸如二氯甲烷的非質(zhì)子溶劑中，并且在0-30℃下添加諸如1％-20％硫酸水溶液的酸性水溶液。在室溫下攪拌反應混合物1-96小時，并且然后通過蒸發(fā)除去溶劑。將所獲得的水溶液用諸如乙酸乙酯或二乙醚的有機溶劑萃取三次。將有機相合并、干燥并且然后在減壓下濃縮。通過硅膠上的柱層析純化殘余物。
c)根據(jù)本領域技術人員已知的標準方法使預先受保護的酚官能脫保護(參見，例如，greene'sprotectivegroupsinorganicsynthesis，p.g.m.wutz，t.greene編，wiley-blackwell)
其中r2＝r3＝oh的情況
使得r2＝r3＝oh的式(i)的衍生物可通過預先受保護的對應烯丙醇的雙羥基化獲得。
r1、m和n具有與前述相同的含義。
當m≥1時，prot表示羥基官能保護基，特別是-co-ch3或ch2-ph。
a)根據(jù)本領域技術人員已知的標準方法保護游離酚官能(參見，例如，greene'sprotectivegroupsinorganicsynthesis，p.g.m.wutz，t.greene編，wiley-blackwell)，例如通過使用乙酸酯基或芐基作為保護基；
b)受保護的烯丙醇的雙羥基化：
該反應可使用市售sharpless體系ad-mix-α(可以參考392758購自供應商sigmausa)或ad-mix-β(可以參考392766購自供應商sigmausa)來進行。
將氧化體系ad-mix(1-3當量)和衍生自第一步的受保護烯烴溶解于諸如1/1比例的t-buoh/水混合物的烷醇-水兩相混合物中，并且在0-50℃下攪拌介質(zhì)直至完全溶解。
在0-70℃下加熱反應介質(zhì)2-96小時。在冷卻至室溫之后，攪拌所述介質(zhì)使其與亞硫酸鈉接觸以中和過氧化物。用諸如乙酸乙酯的有機溶劑萃取產(chǎn)物，并且將有機相合并、干燥并濃縮。通過硅膠上的柱層析純化殘余物。
c)根據(jù)本領域技術人員已知的標準方法使預先受保護的酚官能脫保護(參見，例如，greene'sprotectivegroupsinorganicsynthesis，p.g.m.wutz，t.greene編，wiley-blackwell)
根據(jù)這些路線，獲得式(i)、(ii)、(iii)的化合物以及特別是式(v)至(ix)的新穎化合物。
本發(fā)明還涉及一種在生理上可接受的介質(zhì)中包含至少一種式(i)的化合物和優(yōu)選選自前述化合物1至7的至少一種化合物的組合物、尤其是化妝品組合物。
在特定實施方案中，本發(fā)明涉及一種在生理上可接受的介質(zhì)中包含如上文定義的至少一種式(i)的化合物的組合物、尤其是化妝品組合物，條件是所述組合物不包含過氧化氫。
特別地，本發(fā)明涉及一種在生理上可接受的介質(zhì)中包含除如下化合物以外的如上文定義的至少一種式(i)的化合物的組合物、尤其是化妝品組合物；
特別地，所述組合物適合于局部施加于皮膚。
本發(fā)明還涉及一種在生理上可接受的介質(zhì)中包含至少一種式(v)至(ix)的新穎化合物的組合物、尤其是化妝品組合物。
式(i)和(v)至(ix)的化合物可單獨或作為混合物以相對于組合物的總重量計0.01重量％和30重量％之間、優(yōu)選0.1重量％和10重量％之間、尤其是0.5重量％和5重量％之間的量存在于根據(jù)本發(fā)明的組合物中。
根據(jù)本發(fā)明的組合物還包含生理上可接受的介質(zhì)，所述介質(zhì)將優(yōu)選是化妝品可接受的介質(zhì)，即，不具有令人不悅的氣味、顏色或外觀并且不對使用者造成任何不能接受的刺痛、繃緊或發(fā)紅的介質(zhì)。出于本發(fā)明的目的，術語“生理上可接受的介質(zhì)”意指與諸如身體或臉部的皮膚、唇、粘膜、睫毛或指甲的人角蛋白材料相容的介質(zhì)。
根據(jù)本發(fā)明的組合物可包含通常用于預期應用領域中的任何化妝品成分。
因此，根據(jù)本發(fā)明的組合物可包含選自以下的至少一種化妝品成分：水；有機溶劑，特別是c1-c6醇和c2-c10羧酸酯；烴基油、硅油、氟油、蠟、顏料、填料、染料、表面活性劑、乳化劑、化妝品活性劑、uv遮蔽劑、成膜聚合物、親水性或親脂性膠凝劑、親水性或親脂性增稠劑、防腐劑、香料、氣味吸收劑/中和劑和抗氧化劑。
這些任選成分可以相對于組合物的總重量計0.001重量％至99重量％且尤其是0.01重量％至40重量％的比例存在于組合物中。
根據(jù)本發(fā)明的組合物可為可包含脂肪相和/或水相的組合物。
取決于其性質(zhì)，可將這些任選成分引入組合物的脂肪相或水相中，或者引入脂囊泡中。在任何情況下，這些成分及其比例將由本領域技術人員選擇以使得根據(jù)本發(fā)明的化合物的有利性質(zhì)不受、或基本上不受所設想添加的不利影響。
作為可用于本發(fā)明的油，可提及礦物油、諸如液態(tài)石油膏的烴基油、植物來源的油、動物來源的油、合成油和硅酮基油。當它存在時，脂肪相還可含有脂肪醇、脂肪酸或蠟。
作為親水性增稠劑或膠凝劑，可提及羧乙烯基聚合物(卡波姆)、諸如丙烯酸酯/丙烯酸烷基酯共聚物的丙烯酸類共聚物、聚丙烯酰胺、多糖、天然樹膠和粘土，以及作為親脂性增稠劑或膠凝劑，可提及諸如有機皂土(bentone)的改性粘土、脂肪酸的金屬鹽和疏水性二氧化硅。
根據(jù)本發(fā)明的組合物可包含除了式(i)的化合物以外的至少一種化妝品活性劑，特別是選自以下的至少一種化合物：脫皮劑；保濕劑；脫色素劑或色素原劑(propigmentingagent)；抗糖化劑；no合酶抑制劑；用于刺激真皮或表皮大分子合成和/或用于防止其降解的藥劑；用于刺激成纖維細胞和/或角質(zhì)形成細胞增殖或用于刺激角質(zhì)形成細胞分化的藥劑；皮膚除皺劑(dermo-decontractingagent)；張緊劑；作用于微循環(huán)的藥劑；作用于細胞能量代謝的藥劑；及其混合物。
此組合物可呈通常用于化妝品或皮膚病學領域的任何蓋侖制劑形式，并且尤其呈以下形式：任選地膠凝水溶液或含水酒精溶液、洗液型的分散體，任選地兩相分散體、通過將脂肪相分散于水相中(o/w)或反之(w/o)獲得的乳液、或三重(w/o/w或o/w/o)乳液或離子和/或非離子型的囊泡分散體；水性凝膠或油性凝膠。這些組合物根據(jù)常規(guī)方法來制備。
所述組合物可為或多或少的流體并且可具有白色或有色的霜、軟膏、乳、洗液、精華、糊膏、凝膠或摩絲的外觀。它可任選地以氣溶膠形式應用。它還可呈固體形式，特別呈棒狀(stickform)。
當所述組合物是乳液時，脂肪相的比例相對于組合物的總重量計可在5重量％至80重量％并優(yōu)選8重量％至50重量％范圍內(nèi)。乳化劑相對于組合物的總重量計可以0.3重量％至30重量％并優(yōu)選0.5重量％至20重量％范圍內(nèi)的比例存在。
根據(jù)本發(fā)明的組合物可構成護膚組合物，特別是用于臉部、手、足、主要解剖學皺褶(anatomicalfold)或身體的清潔、防護、處理或護理霜(例如，日霜、晚霜、卸妝霜、粉底霜、防曬霜)；卸妝乳、防護或護理身體乳、或防曬乳；或用于護膚的洗液、凝膠或泡沫，諸如清潔洗液。
根據(jù)本發(fā)明的組合物有利地是抗老化組合物，尤其是用于處理和/或?qū)?尤其通過化妝)皮膚老化的外部跡象的護理組合物。
所述組合物更特別是用于護理成熟皮膚的組合物。
所述組合物還可為化妝組合物，尤其是粉底。
在本說明書中和在以下實施例中，除非另外提及，否則百分比是重量百分比并且以“...和...之間”形式書寫的值的范圍包括所述下限和上限。在形成之前，將所述成分以由本領域技術人員所容易確定的次序和條件混合。
下文中的實施例作為本發(fā)明領域的非限制性說明呈現(xiàn)。
實施例1-化合物1的合成
第1步
將m-cpba(22.3g，129.3mmol，2當量)在二氯甲烷中的溶液逐滴添加至預溶解于二氯甲烷(100ml)中的丁子香酚(10.6g，64.6mmol，1當量)。在室溫下攪拌反應混合物12小時并且然后用na2so3水溶液(濃度10％，200ml)處理以中和氧化劑。分離各相并且將有機相用10％nahco3水溶液洗滌兩次、經(jīng)na2so4干燥并且濃縮。通過硅膠上的柱層析(己烷/etoac：25/1)純化殘余物以產(chǎn)生環(huán)氧化物中間體(6.4g，55％產(chǎn)率)。
第2步
在氫氣(dihydrogen)氣氛下在10％pd/c催化劑(1.0g)的存在下攪拌獲自第一步的中間體環(huán)氧化物(6.4g，35.5mmol)在甲醇(80ml)中的溶液24小時。通過過濾除去催化劑并且然后將濾液濃縮至干燥。通過硅膠上的柱層析(己烷/etoac：5/1)純化殘余物以產(chǎn)生呈白色粉末形式的化合物1(2.9g，45％產(chǎn)率)。
1hnmr譜和質(zhì)譜與預期結構一致。
實施例2-化合物2的合成
在40℃下將環(huán)氧丙烷(8.3g，142.8mmol)逐滴添加至1,3,4-三甲氧基苯(6.0g，35.7mmol)在thf(100ml)中的溶液。使反應混合物維持在此溫度下2小時并且然后冷卻至室溫。逐滴添加n-buli在己烷中的溶液(1.6m，17.1ml，14.4mmol)，并且然后在室溫下攪拌反應混合物1小時。通過添加飽和nh4cl水溶液(20ml)來中和過量堿，并且用50ml乙酸乙酯萃取混合物3次。將有機相合并、經(jīng)na2so4干燥并且濃縮。通過硅膠上的柱層析(己烷/etoac：10/1)純化殘余物以分離呈淺黃色油形式的化合物2(4.2g，52％產(chǎn)率)。
1hnmr譜和質(zhì)譜與預期結構一致。
實施例3-化合物3的合成
在40℃下將環(huán)氧丙烷(2.8g，48mmol)逐滴添加至1,2,5-三甲氧基苯在thf(100ml)中的溶液。使反應混合物維持在此溫度下2小時并且然后冷卻至室溫。逐滴添加n-buli在己烷中的溶液(1.6m，9ml，14.4mmol)，并且然后在室溫下攪拌反應混合物1小時。通過添加飽和nh4cl水溶液(20ml)來中和過量堿，并且用50ml乙酸乙酯萃取混合物3次。將有機相合并、經(jīng)na2so4干燥并且濃縮。通過硅膠上的柱層析(己烷/etoac：10/1)純化殘余物以分離呈白色粉末形式的化合物3(500mg，18％產(chǎn)率)。
1hnmr譜和質(zhì)譜與預期結構一致。
實施例4-化合物4的合成
第1步
乙醇鈉溶液通過在0℃下將鈉(4.0g，174mmol)逐份添加至無水乙醇(500ml)來制備。在鈉完全消耗之后，在0℃下在惰性氣氛下逐滴添加2,6-二甲氧基苯酚(19.8g，129mmol)。在添加之后，在室溫下攪拌反應介質(zhì)2小時。然后逐滴添加3-溴丙烯(20g，165mmol)，并且攪拌介質(zhì)16小時。在減壓下濃縮之后，將殘余物溶解在水中并且用二氯甲烷萃取。將有機相合并、經(jīng)na2so4干燥并且濃縮。通過硅膠上的柱層析(己烷/etoac：5/1)純化殘余物以產(chǎn)生呈褐色油形式的中間體a(20.0g，81％產(chǎn)率)。
第2步
在230℃下伴隨攪拌加熱中間體a2小時。如此獲得的粗產(chǎn)物通過硅膠上的柱層析(己烷/etoac：5/1)來純化以產(chǎn)生呈無色油形式的中間體b(16.0g，80％產(chǎn)率)。
第3步
在室溫下攪拌在n,n-二甲基甲酰胺(30ml)中的由中間體b(1.94g，10mmol，1當量)、芐基溴(2.05g，12mmol，1.2當量)和碳酸鉀(2.07g，15mmol，1.5當量)組成的混合物16小時。通過添加乙酸乙酯稀釋反應介質(zhì)并且用飽和氯化鈉水溶液洗滌。將有機相經(jīng)na2so4干燥并且濃縮。通過硅膠上的柱層析(己烷/etoac：5/1)純化殘余物以產(chǎn)生呈淡黃色油形式的中間體c(2.0g，70％產(chǎn)率)。
第4步
在室溫下攪拌在50ml水/t-buoh混合物(1/1)中的中間體c(1.0g，3.5mmol，1當量)和氧化體系ad-mix-α(5g，3.5mmol)16小時。然后將反應介質(zhì)稀釋在水中并且用乙酸乙酯萃取。將有機相合并，用na2so3水溶液并且然后用飽和nacl水溶液洗滌，經(jīng)na2so4干燥并且在真空下濃縮。通過硅膠上的柱層析(己烷/etoac：1/1)純化殘余物以產(chǎn)生呈白色固體形式的中間體d(1.0g，90％產(chǎn)率)。
第5步
在0℃下在三乙胺(710mg，7.0mmol，2.1當量)的存在下用對甲苯磺酰氯(760mg，4.0mmol，1.2當量)處理在二氯甲烷(25ml)中的中間體d(1.0g，3.3mmol，1當量)。在0℃下攪拌反應介質(zhì)3小時并且然后在室溫下攪拌16小時。然后，將混合物用h2so4水溶液(5％)、然后用nahco3水溶液(5％)并且然后用飽和nacl水溶液洗滌。然后，將有機相經(jīng)na2so4干燥并且濃縮。通過硅膠上的柱層析(己烷/etoac：3/1)純化殘余物以產(chǎn)生呈白色固體形式的中間體e(900mg，60％產(chǎn)率)。
第6步
在0℃下將預溶解于thf(5ml)中的中間體e(900mg，1.9mmol，1當量)逐滴添加至lialh4(100mg，2.6mmol)在thf(5ml)中的懸浮液。然后，在室溫下攪拌反應介質(zhì)5小時。將混合物傾倒至冰-水(10ml)和5nhcl水溶液(5ml)的混合物上并且然后用乙酸乙酯萃取3次。將有機相合并，用飽和nacl水溶液洗滌，經(jīng)na2so4干燥并且濃縮。通過硅膠上的柱層析(己烷/etoac：梯度3/1至1/1)純化殘余物以產(chǎn)生呈白色固體形式的中間體f(500mg，60％產(chǎn)率)。
第7步
將溶解于乙醇(10ml)中的中間體f(500mg，6.3mmol)置于與10％pd/c催化劑(10mg)接觸。在氫氣(0.1mpa)下在室溫下攪拌反應混合物16小時。通過過濾除去催化劑并且然后濃縮濾液。通過硅膠上的柱層析(己烷/etoac：梯度2/1至1/1)純化殘余物以產(chǎn)生呈白色固體形式的化合物4(200mg，57％產(chǎn)率)。
1hnmr譜和質(zhì)譜與預期結構一致。
實施例5-化合物5的合成
第1步
將m-cpba(22.3g，129.3mmol，2當量)在二氯甲烷中的溶液逐滴添加至預溶解于二氯甲烷(100ml)中的丁子香酚(10.6g，64.6mmol，1當量)。在室溫下攪拌反應混合物12小時并且然后用na2so3水溶液(濃度10％，200ml)處理以中和氧化劑。分離各相并且將有機相用10％nahco3水溶液洗滌兩次、經(jīng)na2so4干燥并且濃縮。通過硅膠上的柱層析(己烷/etoac：25/1)純化殘余物以產(chǎn)生環(huán)氧化物中間體(6.4g，55％產(chǎn)率)。
第2步
用50ml水并且然后用25ml5％h2so4水溶液處理獲自第一步的中間體環(huán)氧化物(6.4g，35.5mmol)在二氯甲烷(50ml)中的溶液。在室溫下攪拌反應混合物24小時，并且然后通過蒸發(fā)除去二氯甲烷。用乙酸乙酯萃取所得水溶液三次。將有機相合并、經(jīng)na2so4干燥并且然后在減壓下濃縮。通過硅膠上的柱層析(ch2cl2/meoh＝20/1)純化殘余物以產(chǎn)生呈黃/橙色油形式的化合物5(4.6g，65％產(chǎn)率)。
1hnmr譜和質(zhì)譜與預期結構一致。
實施例6-化合物6的合成
第1步
乙醇鈉溶液通過在0℃下將鈉(4.0g，174mmol)逐份添加至無水乙醇(500ml)來制備。在鈉完全消耗之后，在0℃下在惰性氣氛下逐滴添加2,6-二甲氧基苯酚(19.8g，129mmol)。在添加之后，在室溫下攪拌反應介質(zhì)2小時。然后逐滴添加3-溴丙烯(20g，165mmol)，并且攪拌介質(zhì)16小時。在減壓下濃縮之后，將殘余物溶解在水中并且用二氯甲烷萃取。將有機相合并、經(jīng)na2so4干燥并且濃縮。通過硅膠上的柱層析(己烷/etoac：5/1)純化殘余物以產(chǎn)生呈褐色油形式的中間體a(20.0g，81％產(chǎn)率)。
第2步
在230℃下伴隨攪拌加熱中間體a2小時。如此獲得的粗產(chǎn)物通過硅膠上的柱層析(己烷/etoac：5/1)來純化以產(chǎn)生呈無色油形式的中間體b(16.0g，80％產(chǎn)率)。
第3步
在室溫下在攪拌n,n-二甲基甲酰胺(30ml)中的由中間體b(1.94g，10mmol，1當量)、芐基溴(2.05g，12mmol，1.2當量)和碳酸鉀(2.07g，15mmol，1.5當量)組成的混合物16小時。通過添加乙酸乙酯稀釋反應介質(zhì)并且用飽和氯化鈉水溶液洗滌。將有機相經(jīng)na2so4干燥并且濃縮。通過硅膠上的柱層析(己烷/etoac：5/1)純化殘余物以產(chǎn)生呈淡黃色油形式的中間體c(2.0g，70％產(chǎn)率)。
第4步
在室溫下攪拌在50ml水/t-buoh混合物(1/1)中的中間體c(1.0g，3.5mmol，1當量)和氧化體系ad-mix-α(5g，3.5mmol，1當量)16小時。然后將反應介質(zhì)稀釋在水中并且用乙酸乙酯萃取。將有機相合并，用na2so3水溶液并且然后用飽和nacl水溶液洗滌，經(jīng)na2so4干燥并且濃縮。通過硅膠上的柱層析(己烷/etoac：1/1)純化殘余物以產(chǎn)生呈白色固體形式的中間體d(1.0g，90％產(chǎn)率)。
第5步
將溶解于乙醇(10ml)中的中間體d(2.0mg，6.3mmol)置于與10％pd/c催化劑(10mg)接觸。在氫氣(0.1mpa)下在室溫下攪拌反應混合物16小時。通過過濾除去催化劑并且然后濃縮濾液。通過硅膠上的柱層析(己烷/etoac：梯度1/2)純化殘余物兩次。為了獲得更高純度，然后從etoh/己烷混合物中使產(chǎn)物重結晶并且分離呈白色固體形式的化合物6(1.3g，90％產(chǎn)率)。
1hnmr譜和質(zhì)譜與預期結構一致。
實施例7-化合物7的合成
第1步：異丁子香酚的保護
將含有異丁子香酚(5g，30.5mmol，1當量)、碳酸鉀(6.3g，45.7mmol，1.5當量)和芐基溴(4.5ml，36.6mmol，1.2當量)的混合物在乙腈(80ml)中回流12小時。在冷卻至室溫之后，通過添加100ml水稀釋混合物并且然后用二氯甲烷萃取3次。將有機相合并，用飽和nacl水溶液洗滌并且然后經(jīng)na2so4干燥并濃縮。通過硅膠上的柱層析(100％己烷)純化殘余物以產(chǎn)生呈白色固體形式的芐化異丁子香酚(7.4g，96％產(chǎn)率)。
第2步：受保護的異丁子香酚的雙羥基化
在0℃下將芐化異丁子香酚中間體添加至氧化劑ad-mix-β在t-buoh/水混合物(1/1，400ml)中的溶液。劇烈攪拌反應介質(zhì)24小時。通過添加na2so3(36g)來中和過量氧化劑。在通過沉降分離各相之后，收集有機相并且用乙酸乙酯萃取水相3次。將有機相合并、經(jīng)na2so4干燥并且濃縮。通過硅膠上的柱層析(ch2cl2/meoh：500/4)純化殘余物以產(chǎn)生呈無色油形式的受保護二醇中間體(7.5g，96％產(chǎn)率)。
第3步：中間體二醇的脫保護
將溶解于甲醇(100ml)中的獲自第二步的受保護的二醇中間體(6.46g，22.4mmol)置于與10％pd/c催化劑(0.65g)接觸。在室溫下在氫氣氣氛下攪拌反應混合物24小時。通過過濾除去催化劑，并且然后在真空下濃縮濾液以產(chǎn)生呈白色粉末形式的化合物7(4.0g，90％產(chǎn)率)。
1hnmr譜和質(zhì)譜與預期結構一致。
實施例8
將正常人表皮角質(zhì)形成細胞以每孔180000個細胞接種并在補充有0.25ng/mlegf、25μg/ml垂體提取物和25μg/ml慶大霉素的sfm培養(yǎng)基(供應商gibco)中培養(yǎng)，直至融合，并且在37℃和5％co2下在潮濕烘箱中溫育。然后，用含有或不含有(對照)測試化合物的測試介質(zhì)(補充有25μg/ml慶大霉素的sfm(gibco))或者參考物(500μm的aicar-(5-氨基-4-咪唑甲酰胺核苷))替換培養(yǎng)基。然后溫育細胞18或48小時。
通過蛋白質(zhì)印跡分析p-ampk的表達水平。
在溫育結束時，將蛋白質(zhì)提取并量化，并然后通過在10％聚丙烯酰胺凝膠上的電泳分離并然后轉移至硝酸纖維素膜上。
膜在pbs/tween/1％bsa溶液中飽和之后，使用特異性抗體相繼展現(xiàn)磷酸-ampk蛋白(thr-172)(p-ampk)和gapdh，所述抗體自身使用抗免疫球蛋白-過氧化物酶綴合物來展現(xiàn)。在用pbs/tween洗滌之后，經(jīng)由ecl+(增強化學發(fā)光)法展現(xiàn)過氧化物酶活性并因此展現(xiàn)目標蛋白。在各相繼展現(xiàn)之間，使用“剝離”緩沖液使抗體脫離。使用fujilas3000化學發(fā)光掃描儀(fujifilm)獲取圖像并且使用multigauge軟件(fujifilm)進行密度計分析。
在此測試中評價ampk的磷酸化形式(酶的激活型)相對于對照的增加。
結果
以相對于對照(100％)的p-ampk/gapdh比率形式表示：
實施例9：
制備如下抗老化組合物：
百分數(shù)基于重量表示。
am：活性材料
當施加于皮膚時，這種霜減少皮膚老化的跡象。