本專利申請(qǐng)案根據(jù)35U.S.C.§119(e)主張于2014年6月30日提交的第62/019,421號(hào)美國臨時(shí)專利申請(qǐng)的優(yōu)先權(quán)，其內(nèi)容在此被全部納入作為引用。
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明一般而言是有關(guān)癌癥治療。本發(fā)明更特定而言是有關(guān)特異于介白素-17受體B(IL-17RB)及其配體IL-17B之拮抗劑。具體而言，本發(fā)明是有關(guān)特異于IL-17RB之強(qiáng)效中和抗體，以及制造其之方法與用途。具體而言，本發(fā)明是有關(guān)特異于抑制IL-17RB與IL-17B之反義核酸，以及其制造與用途。本發(fā)明是有關(guān)預(yù)防及治療癌癥之組合物，具體而言為乳癌及胰腺癌。
背景技術(shù)：
：：乳癌為女性癌癥相關(guān)死亡的第二順位成因。在2005年，估計(jì)有212,000個(gè)浸潤(rùn)性乳癌新病例，以及58,000個(gè)非浸潤(rùn)性乳癌新病例被診斷出，其中有40,000例死亡。目前，乳癌之預(yù)防主要包括降低可修正之風(fēng)險(xiǎn)，包括經(jīng)由身體檢查和乳房X光攝影之早期檢測(cè)、避免不必要的更年期激素治療、減少酒精攝取、減重、增加體力活動(dòng)，以及偵測(cè)出乳癌第1型和第2型易感基因(分別為BRCA1及BRCA2)突變之基因檢測(cè)。在高危險(xiǎn)患者中更積極之方法包括以他莫昔芬(tamoxifen)、雷洛昔芬(raloxifene)、及芳香化酶抑制劑之化學(xué)預(yù)防，以及預(yù)防性雙側(cè)乳房切除術(shù)(mastectomy)及卵巢切除術(shù)(oophorectomy)。當(dāng)前用于治療乳癌，包括轉(zhuǎn)移性乳癌之治療選擇，包括外科手術(shù)(如手術(shù)切除、自體骨髓移植)、放射線療法、化學(xué)療法(如蒽環(huán)類抗生素如阿霉素(doxorubicin)、烷化劑如環(huán)磷酰胺及絲裂霉素C、紫杉烷類如紫杉醇及多西他賽(docetaxel)、抗代謝物如卡培他濱(capecitabine)、微管抑制劑如長(zhǎng)春花生物堿諾維本(navelbine))、內(nèi)分泌療法(如抗雌激素劑如他莫昔芬、孕激素如甲羥孕酮醋酸酯(medroxyprogesteroneacetate)、及甲地孕酮(megastrol)，芳香酶抑制劑如胺麩精(aminoglutethamide)及來曲唑(letrozole))、及生物制劑(如細(xì)胞激素、免疫療法如單株抗體)。最常見的轉(zhuǎn)移性乳癌系以單一或組合式化學(xué)療法治療(最有效之藥物包括環(huán)磷酰胺、阿霉素、諾維本(navelbine)、卡培他濱(capecitabine)、及絲裂霉素C)及內(nèi)分泌療法。胰腺癌系主要發(fā)生于胰腺管細(xì)胞中之胰臟惡性生長(zhǎng)。這種疾病是第九順位癌癥最常見形式，但他分別是男性及女性癌癥死亡之第四及第五順位主因。胰臟癌癥幾乎總是致命，具五年存活率小于3％。目前并無可治愈胰腺癌或顯著改善生存時(shí)間之治療程序。手術(shù)切除一直是提供生存機(jī)會(huì)的唯一方式。但是，由于大腫瘤負(fù)荷，僅有10％至25％的患者為“治愈性切除”候選人。對(duì)于那些正在接受手術(shù)治療的患者而言，五年生存率仍不良，平均只有約10％。介白素-17(IL-17)家族包含6個(gè)介白素(IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E＝IL-25、及IL-17F)及其受體(IL-17RA、IL-17RB、IL-17RC、IL-17RD、及IL-17RE)(Gaffen,S.L.(2009)"StructureandsignallingintheIL-17receptorfamily"Naturereviews.Immunology9(8):556-567)。WO2013/186236揭示IL-17異型體及其受體于在癌細(xì)胞中之表現(xiàn)量增加。其亦揭示由于IL-17B及IL-17RB上調(diào)，刺激癌細(xì)胞并增加癌癥細(xì)胞之轉(zhuǎn)移及侵襲，但未有特異于介白素-17B受體(IL-17RB)及其配體IL-17B之拮抗劑報(bào)導(dǎo)。目前技術(shù)上仍需要在胰腺癌、乳癌、及廣范圍癌癥中呈現(xiàn)高度選擇性之治療試劑。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明是基于發(fā)現(xiàn)一種特異于介白素-17B受體(IL-17RB)及其配體IL-17B之新穎拮抗劑。因此，本發(fā)明之一觀點(diǎn)是有關(guān)一種用于治療癌癥之組合物，該組合物包含一試劑，其為IL-17RB及/或IL-17B之拮抗劑，以及其中該拮抗劑為抗體或反義核酸，如小型發(fā)夾狀RNA(shRNA)、小型干擾RNA(siRNA)或微小RNA(miRNA)。在一些具體實(shí)施例中，抗體為多株抗體。在一些具體實(shí)施例中，抗體為單株抗體。在一些具體實(shí)施例中，反義核酸為短發(fā)夾狀RNA(shRNA)。在一些具體實(shí)施例中，shRNA包含一同義股，其選自于SEQIDNOS:5-9所示之核苷酸序列，以及一反義股，其可于嚴(yán)格條件下與該同義股雜合。本文所述之shRNA可抑制基因之表現(xiàn)，其系選自于由IL-17B及IL-17RB組成之群組。在一些具體實(shí)施例中，組合物更包含用于治療腫瘤之化療試劑。在另一觀點(diǎn)，本揭示提供一種用于抑制癌細(xì)胞增生之shRNA，其系靶向分別由SEQIDNO:1或3所示之DNA序列轉(zhuǎn)錄之IL-17RB或IL-17BmRNA。在一些具體實(shí)施例中，shRNA包含一核酸序列，其系選自于由SEQIDNOS:5-9組成之群組。本揭示亦有關(guān)一種核酸，由其可轉(zhuǎn)錄本文所述之shRNA，以及包含該核酸之載體。在另一觀點(diǎn)，本揭示系提供一種治療及預(yù)防癌癥之療法，其系藉由投予有效量之包含抗體或本文所述反義核酸之組合物至有此類治療需求之個(gè)體。亦提供一種使用包含抗體或本文所述反義核酸之組合物，以制造癌癥治療藥物。在一些具體實(shí)施例中，反義核酸可減少IL-17RB或IL-17B之表現(xiàn)。反義核酸之實(shí)例包括但不局限于，小型發(fā)夾狀RNA(shRNA)、小型干擾RNA(siRNA)、及微小RNA(miRNA)。在一些具體實(shí)施例中，有治療需求之個(gè)體(如人類病患)系診斷出、懷疑有、或有癌癥風(fēng)險(xiǎn)。癌癥之實(shí)例包括但不局限于，胰腺癌、乳癌、結(jié)腸直腸癌、肝癌、腎癌、頭頸部癌、食道癌、胃癌、膽道癌、膽囊及膽管癌、肺癌、乳腺癌、卵巢癌、子宮頸癌、子宮體癌、膀胱癌、前列腺癌、睪丸腫瘤、骨及軟組織肉瘤、白血病、惡性淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、皮膚癌、腦腫瘤、及胸膜惡性間皮瘤(pluramalignantmesothelioma)。在較佳具體實(shí)施例中，癌癥為乳癌或胰腺癌。在一觀點(diǎn)，本揭示系有關(guān)一種抗IL-17RB之分離之單株抗體，其中該單株抗體結(jié)合至IL-17RB細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域之介于胺基酸18至289之表位，或其中之抗原性表位。此抗IL-17RB抗體可為全長(zhǎng)抗體或其抗原結(jié)合片段，包括但不局限于，F(xiàn)ab片段、F(ab’)2片段、或單鏈Fv片段。本文所述之單株抗體可中和IL-17RB(即結(jié)合至IL-17RB并阻斷由受體介導(dǎo)之訊息傳遞)，并可為自然發(fā)生之抗體(如單株抗體)、其抗原結(jié)合片段、或經(jīng)基因工程產(chǎn)生之抗體(如人類抗體、人源化抗體、嵌合性抗體、小鼠抗體、或單鏈抗體)，其可中和IL-17RB，即結(jié)合至抗原或阻斷由其介導(dǎo)之訊息傳遞。在一些具體實(shí)施例中，本文所述之抗IL-17RB抗體包含一重鏈可變區(qū)(VH)，其包含SEQIDNO:14所示之VH互補(bǔ)性決定區(qū)(CDR)1、SEQIDNO:15所示之VHCDR2、及SEQIDNO:16所示之VHCDR3。此外或額外地，抗IL-17RB抗體可包含一輕鏈可變區(qū)(VL)，其包含SEQIDNO:17所示之VLCDR1、SEQIDNO:18所示之VLCDR2、及SEQIDNO:19所示之VLCDR3。在其他具體實(shí)施例中，抗體包含至少85％(如90％、95％、97％、98％、或99％)等同于SEQIDNO:12之VH。此外或額外地，抗IL-17RB抗體包含至少85％(如90％、95％、97％、98％、或99％)等同于SEQIDNO:13之VL。抗IL-17RB抗體結(jié)合至具SEQIDNO:12所示之VH及SEQIDNO:13所示之VL之抗IL-17RB抗體之相同表位。在一實(shí)例中，抗IL-17RB抗體包含SEQIDNO:12所示之VH及SEQIDNO:13所示之VL。亦提供編碼此類抗體之核酸，以及攜帶此核酸之載體及細(xì)胞。在一觀點(diǎn)，本揭示系提供一種分離之核酸，包含一核苷酸序列，其編碼一抗體重鏈可變區(qū)(VH)，其包含SEQIDNO:14所示之VHCDR1、SEQIDNO:15所示之VHCDR2、及SEQIDNO:16所示之VHCDR3，及/或一核苷酸序列，其編碼一抗體輕鏈可變區(qū)(VL)，其包含SEQIDNO:17所示之VLCDR1、SEQIDNO:18所示之VLCDR2、及SEQIDNO:19所示之VLCDR3。亦提供包含本文所述任一核酸之載體(如表現(xiàn)載體)，以及包含此載體之宿主細(xì)胞。在一些實(shí)例中，本文所述之載體(如表現(xiàn)載體)包含編碼本文所述抗IL-17RB抗體之重鏈與輕鏈二者之核苷酸序列。在其他實(shí)例中，編碼重鏈及輕鏈之核苷酸序列系位于不同載體上。在另一觀點(diǎn)，本揭示系提供一種制備本文所述之任一抗IL-17RB抗體之方法，該方法包含培養(yǎng)含有該編碼重鏈與輕鏈之表現(xiàn)載體之宿主細(xì)胞，以及收集培養(yǎng)之細(xì)胞以純化從而產(chǎn)生之抗體。此方法可進(jìn)一步包含由該培養(yǎng)之細(xì)胞或培養(yǎng)液中分離出抗體。此外，本揭示提供包含本文所述之任一抗IL-17RB抗體或本文所述之任一核酸或載體(vector)，以及載劑(carrier)，如醫(yī)藥上可接受之載劑之組合物(如醫(yī)藥組合物)。在一些具體實(shí)施例中，本文揭示之抗IL-17RB抗體為小鼠單株抗體D9、其抗原結(jié)合片段、或其功能性等效物。在一些具體實(shí)施例中，本文揭示之抗IL-17RB抗體為嵌合性單株抗體cD9、其抗原結(jié)合片段、或其功能性等效物。本揭示范疇亦包括(a)含有一或多個(gè)可抑制IL-17RB活性之試劑之醫(yī)藥組合物，以治療IL-17RB介導(dǎo)之增生性疾病，以及(b)其于制造治療癌癥之藥劑之用途。在另一觀點(diǎn)，本揭示系提供減少IL-17RB介導(dǎo)之增生性疾病之癥狀之方法。本發(fā)明方法包含之步驟為：(1)辨別有此類治療需求之個(gè)體，以及(2)投予該個(gè)體足夠量之本文所述之抗體，其中該抗體之量系足以降低IL-17RB于治療方法中之表現(xiàn)。在一些具體實(shí)施例中，該辨別步驟系藉抗IL-17RB之抗體如A81或本文所述之抗體進(jìn)行。在一些具體實(shí)施例中，該IL-17RB介導(dǎo)之增生性疾病為癌癥。癌癥之實(shí)例包括但不局限于，胰腺癌、乳癌、結(jié)腸直腸癌、肝癌、腎癌、頭頸部癌、食道癌、胃癌、膽道癌、膽囊及膽管癌、肺癌、乳腺癌、卵巢癌、子宮頸癌、子宮體癌、膀胱癌、前列腺癌、睪丸腫瘤、骨及軟組織肉瘤、白血病、惡性淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、皮膚癌、腦腫瘤、及胸膜惡性間皮瘤。在較佳具體實(shí)施例中，該癌癥為乳癌及胰腺癌。本發(fā)明方法可額外地包含使用第二治療試劑投藥。在一些具體實(shí)施例中，該第二治療試劑為核酸，其系選自于小型發(fā)夾狀RNA(shRNA)、小型干擾RNA(siRNA)、微小RNA(miRNA)、反義聚核苷酸、及核糖核酸酵素(ribozyme)。該些及其他觀點(diǎn)將由下列較佳具體實(shí)施例及其后附之圖示說明而更臻清楚，盡管其中可進(jìn)行變更及修改，但不背離本發(fā)明新穎概念之精神及范疇。附圖說明下列圖示構(gòu)成本說明書之一部分，并經(jīng)涵蓋以進(jìn)一步說明本發(fā)明之特定態(tài)樣，本發(fā)明可藉由參考該些圖示之一或多者并結(jié)合本文所述之特定具體實(shí)施例之詳細(xì)說明而有更進(jìn)一步之了解。本專利或申請(qǐng)案含有至少一圖示以彩圖標(biāo)出。智慧財(cái)產(chǎn)局將根據(jù)請(qǐng)求及支付必要費(fèi)用而提供本專利或?qū)＠暾?qǐng)公開案之彩圖副本。圖1顯示IL-17RB之高度表現(xiàn)會(huì)促進(jìn)乳癌腫瘤發(fā)生。(A)軟瓊脂集落形成試驗(yàn)顯示，以對(duì)應(yīng)之短發(fā)夾狀shRNA(sh17RB)消耗IL-17RB可妨礙MDA-MB-361細(xì)胞非錨定依賴性生長(zhǎng)(anchorageindependentgrowth)能力。(B)異體移植腫瘤形成試驗(yàn)，其系以MDA-MB-361shLacZ對(duì)照組或shIL-17RB細(xì)胞注射NOD/SCID/γnull小鼠。圖2顯示IL-17B經(jīng)由IL-17RB增進(jìn)腫瘤形成活性。(A)以對(duì)應(yīng)之短發(fā)夾狀shRNA(sh17B)敲落IL-17B會(huì)抑制MDA-MB-361細(xì)胞之集落形成能力。(B)IL-17B消耗之MDA-MB-361細(xì)胞之NF-κB啟動(dòng)子活性下降。(C)NOD/SCID/γnull小鼠之腫瘤形成試驗(yàn)，其系注射MDA-MB-361shLacZ對(duì)照組或sh17B細(xì)胞。IL-17B之消耗可減少腫瘤生長(zhǎng)。(D)IL-17B消耗可減少源自腫瘤之MDA-MB-361重量。圖3顯示以特異性抗體中和IL-17RB或IL-17B可減少乳癌細(xì)胞之致腫瘤性。(A)藉加入2與4μg/ml抗IL17B抗體之IL-17B中和作用可減少過度表現(xiàn)IL-17RB之M10細(xì)胞之集落數(shù)目。IgG系作為對(duì)照組。(B)藉加入4μg/ml抗IL17B抗體之IL-17B中和作用可明顯減少M(fèi)DA-MB-361細(xì)胞之集落形成。(C)抗IL-17RB(0.5與1μg/ml)之抗體可減少M(fèi)DA-MB-361細(xì)胞之集落數(shù)目。(D)MDA-MB-361衍生之腫瘤系藉瘤內(nèi)注射(intratumoralinjection)處理小鼠正常IgG或IL-17RB抗體。箭頭代表抗體注射日。(E)示意圖顯示乳癌細(xì)胞之IL-17RB/IL-17B傳訊。以特異性抗體靶向可溶性IL-17B(藍(lán)色抗體)或受體IL-17RB(綠色抗體)系IL-17RB相關(guān)乳癌之潛在治療策略。圖4顯示IL-17RB過度表現(xiàn)系與乳癌病患之預(yù)后差相關(guān)。(A)IL-17RB之IHC染色。圖中顯示正常(N)及乳癌組織(T)個(gè)別之IL-17RB負(fù)(a,b)及正(c,d)薄膜染色(比例尺，25μm)。(B)IL-17RB正及負(fù)IHC染色病患之卡本-麥爾存活分析(Kaplan-Meiersurvivalanalysis)。(C)根據(jù)IL-17RBIHC染色之乳癌病患死亡率之單變量及多變量比例危害分析。圖5顯示IL-17RB或HER2表現(xiàn)上升之乳癌病患之預(yù)后比較。(A)IL-17RB(a,b)及HER2(c,d)于依序之石蠟包埋切片之IHC染色，顯示IL-17RB及HER2之表現(xiàn)共存(比例尺，25μm)。(B)IL-17RB之消耗明顯減少曲妥珠單抗(trastuzumab)抗性SKBR3-hr細(xì)胞之集落形成能力。圖6顯示自泌IL-17B/RB傳訊系胰腺癌腫瘤形成及轉(zhuǎn)移所需。(A)NOD/SCID/γnull小鼠皮下注射shLacZ轉(zhuǎn)導(dǎo)或IL-17RB消耗之CFPAC-1細(xì)胞之腫瘤形成試驗(yàn)。細(xì)胞劑量：每只小鼠1×106個(gè)細(xì)胞。各組使用六只小鼠。(B)NOD/SCID/γnull小鼠正位移植shLacZ轉(zhuǎn)導(dǎo)或IL-17RB消耗之CFPAC-1細(xì)胞之腫瘤重量。細(xì)胞劑量：每只小鼠2.5×105個(gè)細(xì)胞。各組使用六只小鼠。(C)小鼠正位移植shLacZ轉(zhuǎn)導(dǎo)或IL-17RB消耗之CFPAC-1細(xì)胞所衍生腫瘤之IL-17RB之IHC。(D)NOD/SCID/γnull小鼠靜脈注射shLacZ轉(zhuǎn)導(dǎo)或IL-17RB消耗之CFPAC-1細(xì)胞之肺臟轉(zhuǎn)移。細(xì)胞劑量：每只小鼠2.5×105個(gè)細(xì)胞。各組使用六只小鼠。(E)NOD/SCID/γnull小鼠皮下注射shLacZ轉(zhuǎn)導(dǎo)或IL-17B消耗之CFPAC-1細(xì)胞之腫瘤形成試驗(yàn)。細(xì)胞劑量：每只小鼠1×106個(gè)細(xì)胞。各組使用四只小鼠。(F)NOD/SCID/γnull小鼠正位移植shLacZ轉(zhuǎn)導(dǎo)或IL-17B消耗之CFPAC-1細(xì)胞之腫瘤重量。細(xì)胞劑量：每只小鼠2.5×105個(gè)細(xì)胞。各組使用三只小鼠。(G)NOD/SCID/γnull小鼠靜脈注射shLacZ轉(zhuǎn)導(dǎo)或IL-17B消耗之CFPAC-1細(xì)胞之肺臟轉(zhuǎn)移。細(xì)胞劑量：每只小鼠2.5×105個(gè)細(xì)胞。圖7顯示IL-17RB之過度表現(xiàn)系與胰腺癌病患之轉(zhuǎn)移及臨床結(jié)果差相關(guān)。(A)IL-17RB陰性案例、IL-17RB低陽性案例、及IL-17RB高案例之IL-17RB之IHC分析代表圖(比例尺＝50μm)。圖框顯示放大區(qū)域。(B)111個(gè)胰腺癌案例之IL-17RB表現(xiàn)與臨床參數(shù)之相關(guān)性。使用χ2檢定。(C)以卡本-麥爾法比較有或無IL-17RB表現(xiàn)之病患之無進(jìn)展存活期(progressionfreesurvival；PFS)。(D)IL-17RB表現(xiàn)對(duì)111位胰腺癌病患術(shù)后臨床結(jié)果影響之單變量及多變量Cox回歸分析。圖8顯示處理單株抗IL-17RB抗體(D9)可阻斷腫瘤生長(zhǎng)、抑制轉(zhuǎn)移、及促進(jìn)存活。(A)軟瓊脂集落形成及(B)CFPAC-1及BxPC3細(xì)胞以對(duì)照組IgG或D9抗體處理之侵襲試驗(yàn)。(C)正位異體移植小鼠之抗體處理示意圖。(D)IVIS造影及(E)抗體處理NOD/SCID/γnull小鼠之腫瘤重量，該小鼠系于第28天正位移植CFPAC-1細(xì)胞。細(xì)胞劑量：每只小鼠2.5×105個(gè)細(xì)胞。各組使用八只小鼠。于第28天，各組犧牲二只小鼠，以測(cè)量腫瘤重量。(F)以抗體處理正位注射CFPAC-1細(xì)胞之NOD/SCID/γnull小鼠之肺臟轉(zhuǎn)移。細(xì)胞劑量：每只小鼠2.5×105個(gè)細(xì)胞。各組使用六只小鼠。(G)上方：正位異體移植小鼠之抗體處理示意圖。下方：以卡本-麥爾法比較正位注射CFPAC-1細(xì)胞之NOD/SCID/γnull小鼠之抗體處理存活期。圖9顯示抗IL17RB嵌合性D9抗體(cD9)之特異性及結(jié)合效率。A，以FACS分析測(cè)定小鼠及嵌合性D9抗體對(duì)IL-17RB之特異性辨識(shí)，其系使用IL-17RB表現(xiàn)(WT)及IL-17RB剔除(KO)之胰腺癌細(xì)胞株CFPAC-1。以無抗體(無染色)或僅二次抗體(僅2ndAb)之FACS輪廓作為對(duì)照組。B，以FACS分析測(cè)定小鼠及嵌合性D9抗體之辨識(shí)效率，其系使用IL-17RB表現(xiàn)之胰腺癌細(xì)胞株、CFPAC-1、及HPAF-II。以無IL-17RB表現(xiàn)之MCF10A作為陰性對(duì)照組。圖10顯示嵌合性D9抗體(cD9)抑制胰腺癌細(xì)胞株之腫瘤形成活性。以軟瓊脂集落形成試驗(yàn)評(píng)估cD9抗體處理后IL-17RB陽性胰腺癌細(xì)胞、CFPAC1(A)、及HPAF-II(B)之腫瘤形成活性。分別以IgG或D9抗體處理組產(chǎn)生之集落數(shù)目作為陰性及陽性對(duì)照組。具體實(shí)施方式定義在下列說明中，參考同為本發(fā)明之一部份的圖示，其通過圖解可實(shí)施之特定具體實(shí)施例的方式呈現(xiàn)。這些具體實(shí)施例系詳述以使熟習(xí)本領(lǐng)域者能實(shí)施本發(fā)明，并應(yīng)理解到，可采用其他具體實(shí)施例，且可進(jìn)行結(jié)構(gòu)、邏輯、及電學(xué)的改變而不背離本發(fā)明之范疇。因此，下列示例性具體實(shí)施例之說明不可視為具有局限性，且本發(fā)明之范疇系如所附之權(quán)利要求書之定義。除非另有定義，本文所使用的技術(shù)性及科學(xué)性術(shù)語具有本發(fā)明領(lǐng)域之技術(shù)人員所能常規(guī)理解的意義。雖然類似或等同于本文所述之任何方法及材料可用于本發(fā)明之實(shí)施或測(cè)試，現(xiàn)將說明較佳之方法及材料。本文所特別提及的所有公開文獻(xiàn)及專利皆并入本案以作為參考數(shù)據(jù)，其目的在于包括說明及揭示公開文獻(xiàn)所報(bào)導(dǎo)的化學(xué)品、細(xì)胞株、載體、動(dòng)物、儀器、統(tǒng)計(jì)分析、及方法學(xué)，其使用可能與本發(fā)明相關(guān)。本說明書引用的所有參考文獻(xiàn)皆視為表示本領(lǐng)域之技術(shù)水準(zhǔn)。本文不可解釋為同意本發(fā)明無權(quán)先于先前發(fā)明揭露。在說明本發(fā)明之材料及方法前，應(yīng)理解到，本發(fā)明未局限于所述的特定方法學(xué)、步驟、材料、及試劑，因其可能改變。亦應(yīng)理解到，本文使用的術(shù)語目的僅在于說明特定具體實(shí)施例，且非旨在局限本發(fā)明之范疇，其將僅局限于所附之權(quán)利要求書。當(dāng)提供一范圍之?dāng)?shù)值時(shí)，應(yīng)理解到，除非本文另有明確說明，各中間值至下限單位的十分之一、該范圍之上限與下限之間、及該設(shè)定范圍的任何其他設(shè)定值或中間值皆涵蓋于本發(fā)明之內(nèi)。這些較小范圍的上限及下限可獨(dú)立地包括于較小范圍內(nèi)，亦可涵蓋于本發(fā)明之內(nèi)，其皆受到陳述范圍之任何特定排除限制。當(dāng)陳述范圍包括限制值之一或兩者時(shí)，該些涵蓋之限制值之任一或兩者以外之范圍亦包括于本發(fā)明。本發(fā)明之實(shí)施，除非另有指出，系使用分子生物學(xué)、微生物學(xué)、重組DNA、及免疫學(xué)之一般技術(shù)，其為本領(lǐng)域之技術(shù)范疇。此類技術(shù)可于文獻(xiàn)中得到完整解釋。參見如，MolecularCloningALaboratoryManual,2ndEd.,ed.bySambrook,FritschandManiatis(ColdSpringHarborLaboratoryPress,1989)；DNACloning,VolumesIandII(D.N.Glovered.,1985)；CultureOfAnimalCells(R.I.Freshney,AlanR.Liss,Inc.,1987)；ImmobilizedCellsAndEnzymes(IRLPress,1986)；B.Perbal,APracticalGuideToMolecularCloning(1984)；專著，MethodsInEnzymology(AcademicPress,Inc.,N.Y.)；GeneTransferVectorsForMammalianCells(J.H.MillerandM.P.Caloseds.,1987,ColdSpringHarborLaboratory)；MethodsInEnzymology,Vols.154and155(Wuetal.eds.),ImmunochemicalMethodsInCellAndMolecularBiology(MayerandWalker,eds.,AcademicPress,London,1987)；Antibodies:ALaboratoryManual,byHarlowandLanes(ColdSpringHarborLaboratoryPress,1988)；以及HandbookOfExperimentalImmunology,VolumesI-IV(D.M.WeirandC.C.Blackwell,eds.,1986)。使用于此及所附權(quán)利要求書，單數(shù)形式“一”、“一者”、及“該”包括復(fù)數(shù)個(gè)參考物，除非內(nèi)文另有明確指出。因此，舉例而言，“一傳輸增強(qiáng)子”包含復(fù)數(shù)個(gè)傳輸增強(qiáng)子，以及單一個(gè)傳輸增強(qiáng)子。所提及之“一螯合劑”包括二或多種螯合劑，以及單一螯合劑，以此類推。在本說明書及后附之權(quán)利要求書中，會(huì)提及多個(gè)術(shù)語，其系經(jīng)定義以具下列意義：本文所使用的“治療(treating)與治療(treatment)”乙詞是指投予試劑或配方至患有不利條件、病癥、或疾病之臨床癥狀個(gè)體，從而降低癥狀嚴(yán)重程度及/或頻率、消除癥狀及/或其潛在成因、及/或幫助改善或補(bǔ)救傷害。本文所使用的“預(yù)防(preventing)與預(yù)防(prevention)”乙詞是指投予試劑或組合物至懷疑有不利條件、病癥、或疾病之臨床癥狀個(gè)體，從于系有關(guān)預(yù)防癥狀及/或其潛在原因之發(fā)生。除非另有指出，不論是明示或暗示，若術(shù)語“治療(treatment)”(或“治療(treating)”)未指稱可能之預(yù)防，亦包含于本發(fā)明中?！叭我獾?Optional)”或“任意地存在”，如在“任意之取代基”或“任意地存在添加物”代表后續(xù)描述之成分(如取代基或添加物)可或不可存在，因此該敘述包括該成分存在之情況，以及該成分不存在之情況。本文所使用的“醫(yī)藥上可接受”乙詞是指該材料并非生物性或不希望，如該材料可加入本發(fā)明配方中，而不會(huì)導(dǎo)致任何不希望之生物效用或與該藥劑形式配方中之任一其他成分產(chǎn)生惡化作用。然而，當(dāng)術(shù)語“醫(yī)藥上可接受”系指一醫(yī)藥賦形劑時(shí)，其系指該賦形劑已符合毒理學(xué)與制造測(cè)試之要求標(biāo)準(zhǔn)，及/或其涵蓋于InactiveIngredientGuidepreparedbytheU.S.FoodandDrugAdministration。進(jìn)一步解釋，“具醫(yī)藥活性”(或簡(jiǎn)言之“具活性”)如于“藥學(xué)上具活性”之衍生物或類似物中，系指具相同類型之藥學(xué)活性之衍生物或類似物，以作為原始試劑。與分析化學(xué)、合成有機(jī)化學(xué)、及醫(yī)學(xué)和藥物化學(xué)技術(shù)之實(shí)驗(yàn)室流程與技術(shù)相聯(lián)結(jié)之命名法，為眾所周知及本領(lǐng)域慣用。標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)系用于化學(xué)合成、化學(xué)分析、藥物制備、配制、及輸送，以及患者之治療。下列定義系用于理解本發(fā)明：本文所使用的“抗原”乙詞是指可引發(fā)免疫反應(yīng)之任一物質(zhì)。本文所使用的“免疫原”乙詞是指抗原或可誘發(fā)抗原產(chǎn)生之物質(zhì)，如DNA疫苗。本文所使用的“免疫原性”乙詞是指免疫原、抗原、或疫苗刺激免疫反應(yīng)之能力。本文所使用的“抗體(Ab)”乙詞包括單株抗體、多株抗體、多重特異性抗體(如雙特異性抗體)，以及抗體片段，只要其具有所需之生物活性即可。本文之術(shù)語“免疫球蛋白(Ig)”可與“抗體”交換使用。本文所使用的“中和抗體”乙詞是指可抑制或降低細(xì)胞IL-17RB或IL-17B之量者。單株抗體之抑制濃度可小于約25mg/ml，以中和約50％細(xì)胞中之標(biāo)靶分子之量。本文所使用的“免疫療法”乙詞是指基于調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)之概念的治療策略組合，以達(dá)到預(yù)防及/或治療目的。本文所使用的“分離抗體”乙詞是指自其天然環(huán)境組分中分離及/或復(fù)原。其自然環(huán)境中之污染組分系干擾抗體診斷或治療用途之材料，且可包括酵素、激素、及其他蛋白性或非蛋白性溶質(zhì)。在較佳具體實(shí)施例中，抗體系經(jīng)純化：(1)至大于95％重之抗體，其系以Lowry法測(cè)定，且最佳大于99％重；(2)至足以取得N端或內(nèi)部胺基酸序列至少15個(gè)殘基，其系藉轉(zhuǎn)杯式定序儀(spinningcupsequenator)進(jìn)行；或者(3)至均質(zhì)(homogeneity)，其系于還原或非還原條件下藉SDS-PAGE進(jìn)行，并使用考馬斯藍(lán)(Coomassieblue)染色，或較佳地銀染(silverstain)。分離之抗體包括重組型細(xì)胞內(nèi)之原位抗體，系因抗體自然環(huán)境中之至少一成分不存在。然而，通常分離之抗體可藉至少一純化步驟制備。基本之四鏈抗體單元系異四聚體醣蛋白，其系由二相同輕鏈(L)及二相同重鏈(H)組成(IgM抗體系由五個(gè)基本異四聚體單元伴隨一額外稱為J鏈之多勝肽組成，因此含10個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)，而分泌型IgA抗體能聚合化，以形成多價(jià)集聚物，包括2-5個(gè)基本四鏈單元與J鏈)。在IgG之情況中，四鏈單元通常約150,000道爾頓。各L鏈系藉一共價(jià)雙硫鍵與H鏈連接，而二H鏈系藉一或多個(gè)雙硫鍵相連接，其取決于H鏈之同種型。各L鏈之N端具可變區(qū)(VL)，之后于其另一端為恒定區(qū)(CL)。VL與VH對(duì)齊，且CL與重鏈之第一恒定區(qū)(CH1)對(duì)齊。據(jù)信，特定胺基酸殘基可于輕鏈與重鏈可變區(qū)之間形成接口。VH與VL之配對(duì)共同形成單一抗原結(jié)合位點(diǎn)。對(duì)于不同類型抗體之結(jié)構(gòu)及特性，參見例如，BasicandClinicalImmunology,8thedition,DanielP.Stites,AbbaI.TerrandTristramG.Parslow(eds.),Appleton&Lange,Norwalk,Conn.,1994,page71,andChapter6?！翱勺儭币以~是指V結(jié)構(gòu)域之特定部分之序列于抗體之間有很大差異。V結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)抗原結(jié)合，且定義特定抗體與其特定抗原之特異性。然而，該可變性并非均勻分布于110個(gè)胺基酸可變區(qū)。相反地，V區(qū)由稱為框架區(qū)(FRs)之15-30個(gè)胺基酸之相對(duì)非變體延伸組成，其由一段稱為“超變區(qū)”之較短高度之變異區(qū)分開，該區(qū)各9-12個(gè)胺基酸長(zhǎng)。各鏈之超變區(qū)系藉FR緊密相鄰，并與其他鏈之超變區(qū)一起形成抗體之抗原結(jié)合位點(diǎn)(參見Kabatetal.,SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,5thEd.PublicHealthService,NationalInstitutesofHealth,Bethesda,Md.(1991))。恒定區(qū)并未直接涉及抗體與抗體之結(jié)合，但具有各種效應(yīng)子作用，如抗體之參與抗體依賴性細(xì)胞毒殺作用(ADCC)。本文所使用的“超變區(qū)”乙詞是指抗體上負(fù)責(zé)結(jié)合抗原的胺基酸序列。該超變區(qū)通常包括“互補(bǔ)決定區(qū)”或“CDR”之胺基酸殘基(如VL之殘基24-34(L1)、50-56(L2)、及89-97(L3)，以及VH之殘基31-35(H1)、50-65(H2)、及95-102(H3)，其系根據(jù)Kabat編號(hào)系統(tǒng)編號(hào)；Kabatetal.,SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,5thEd.PublicHealthService,NationalInstitutesofHealth,Bethesda,Md.(1991))；及/或源自“超變環(huán)”之殘基(如VL之殘基24-34(L1)、50-56(L2)、及89-97(L3)，以及VH之殘基26-32(H1)、52-56(H2)、及95-101(H3)，其系根據(jù)Chothia編號(hào)系統(tǒng)編號(hào)；ChothiaandLesk,J.Mol.Biol.196:901-917(1987))；及/或來自“超變環(huán)”/CDR(如VL之殘基27-38(L1)、56-65(L2)、及105-120(L3)，以及VH之27-38(H1)、56-65(H2)、及105-120(H3)，其系根據(jù)IMGT編號(hào)系統(tǒng)編號(hào)；Lefranc,M.P.etal.Nucl.AcidsRes.27:209-212(1999),Ruiz,M.eal.Nucl.AcidsRes.28:219-221(2000))。任意地，該抗體于下列位點(diǎn)之一或多者上具有對(duì)稱性插入：VL之28、36(L1)、63、74-75(L2)、及123(L3)，以及VH之28、36(H1)、63、74-75(H2)、及123(H3)，其系根據(jù)AHo編號(hào)；Honneger,A.andPlunkthun,A.J.Mol.Biol.309:657-670(2001))。所謂“種系核酸殘基”是指天然存在于編碼恒定或可變區(qū)之種系基因之核酸殘基。“種系基因”系生殖細(xì)胞(即注定成為卵子或精子之細(xì)胞)之DNA?！胺N系突變”是指特定DNA之遺傳變化，其發(fā)生于單細(xì)胞階段之生殖細(xì)胞或受精卵，而當(dāng)傳遞到子代時(shí)，此類突變系整合至體內(nèi)每一細(xì)胞。種系突變系相對(duì)于體細(xì)胞突變，其發(fā)生于單一體細(xì)胞。在一些情況下，編碼可變區(qū)之種系DNA序列之核苷酸系經(jīng)突變(即體細(xì)胞突變)，并以不同之核苷酸取代。本文所使用的“單株抗體”乙詞是指來自基本上同質(zhì)之抗體群之抗體，即除了可能少量存在的天然突變以外，該抗體群中的各個(gè)抗體均相同。單株抗體針對(duì)單個(gè)抗原位點(diǎn)具有高度的特異性。此外，相對(duì)于多株抗體制劑，包括針對(duì)不同決定位(表位)之不同抗體，各單株抗體系針對(duì)抗原上之單一表位。除了其特異性之外，單株抗體之優(yōu)點(diǎn)在于其可以不受其他抗體污染之方式合成。修飾詞“單株”不應(yīng)理解為需通過任何特殊方法產(chǎn)生抗體。如用于本發(fā)明之單株抗體，可以Kohler等人(Nature,256:495(1975))首度描述之融合瘤法進(jìn)行制備，或者可經(jīng)由重組型DNA法，在細(xì)菌、真核動(dòng)物或植物細(xì)胞中進(jìn)行制備(參見例如，美國專利號(hào)4,816,567)?！皢沃昕贵w”還可利用如Clackson等人(Nature,352:624-628(1991))及Marks等人(J.Mol.Biol.,222:581-597(1991))所述技之術(shù)，從噬菌體抗體庫中分離出。在一些觀點(diǎn)中，系使用WO2004/076677所述之另一EBV不朽化法。使用此方法，產(chǎn)生本發(fā)明抗體之B細(xì)胞可于多株B細(xì)胞活化劑存在下以EBV轉(zhuǎn)形。以EBV轉(zhuǎn)形系標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)，且可易于包含多株B細(xì)胞活化劑?？稍谵D(zhuǎn)形步驟中加入額外之細(xì)胞生長(zhǎng)及分化刺激劑，以進(jìn)一步提高效率。這些刺激劑可為細(xì)胞激素，如IL-2及IL-15。在較佳觀點(diǎn)中，IL-2于不朽化步驟中加入，以進(jìn)一步改進(jìn)不朽化之效率，但其使用并非必需。本文所述之單株抗體包括“嵌合性”抗體，其重鏈及/或輕鏈之一部分與源自特殊物種或?qū)儆谔厥饪贵w種類或亞類之抗體的相應(yīng)序列相同或同源，但所述之鏈之剩余部分序列與源自另一物種或?qū)儆诹硪豢贵w種類或亞類之抗體(以及此抗體之片段，只要其顯示所需之生物學(xué)活性)之相應(yīng)序列相同或同源(參見美國專利號(hào)4,816,567；以及Morrison等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,81:6851-6855(1984))。本發(fā)明提供衍生自人類抗體之可變區(qū)域抗原結(jié)合序列。據(jù)此，本文之主要感興趣嵌合性抗體包括具一或多個(gè)人類抗原結(jié)合序列(如CDRs)且含有一或多個(gè)衍生自非人類抗體之序列如FR或C區(qū)域序列之抗體。此外，本文主要感興趣之嵌合性抗體包括含有一抗體種類或亞類之人類可變結(jié)構(gòu)域抗原結(jié)合序列，以及衍生自另一抗體種類或亞類之另一序列如FR或C區(qū)域序列。本文感興趣之嵌合性抗體亦包括該些含有相關(guān)于本文或衍生自不同物種如非人類靈長(zhǎng)類(如舊大陸猴、人猿等)之可變區(qū)抗原結(jié)合序列者。嵌合性抗體亦包括靈長(zhǎng)類化與人源化抗體。此外，嵌合性抗體可包含未于接受者抗體或提供者抗體中發(fā)現(xiàn)之殘基?？蛇M(jìn)行這些修飾，以進(jìn)一步微調(diào)抗體表現(xiàn)度。更詳細(xì)的內(nèi)容參見Jonesetal.,Nature321:522-525(1986)；Riechmannetal.,Nature332:323-329(1988)；以及Presta,Curr.Op.Struct.Biol.2:593-596(1992)?！叭嗽椿贵w”一般認(rèn)為系人類抗體，其導(dǎo)入來自非人類之一或多個(gè)胺基酸殘基。這些非人類胺基酸殘基通常稱之為“輸入”殘基，其通常來自于“輸入”可變結(jié)構(gòu)域。人源化傳統(tǒng)上依據(jù)Winter與其同事所述之方法進(jìn)行(Jonesetal.,Nature,321:522-525(1986)；Reichmannetal.,Nature,332:323-327(1988)；Verhoeyenetal.,Science,239:1534-1536(1988))，藉由取代輸入人類抗體對(duì)應(yīng)序列之超可變區(qū)序列。因此，此“人源化”抗體為嵌合性抗體(美國專利號(hào)4,816,567)，其中實(shí)質(zhì)上小于完整人類可變結(jié)構(gòu)域，經(jīng)來自人類物種對(duì)應(yīng)序列取代?！叭祟惪贵w”為僅含人類天然制造之抗體中存在之序列之抗體。然而，本文使用之人類抗體可包含未于天然發(fā)生之人類抗體中發(fā)現(xiàn)之殘基或修飾，包括本文所述之修飾與變異。這些修飾與變異一般進(jìn)行以進(jìn)一步微調(diào)或增強(qiáng)抗體效能。“完整”抗體系包括抗原結(jié)合可變區(qū)及CL與重鏈恒定區(qū)CH1、CH2、及CH3者。該恒定區(qū)可為原始序列恒定區(qū)(如人類原始序列恒定區(qū))或其胺基酸序列變體。較佳地，完整抗體具有一或多個(gè)效應(yīng)子功能?！翱贵w片段”包括完整抗體的一部分，較佳包括其抗原結(jié)合區(qū)或可變區(qū)?？贵w片段之實(shí)例包括Fab、Fab'、F(ab’)2、及Fv片段；雙體(diabodies)；線性抗體(參見美國專利號(hào)5,641,870；Zapataetal.,ProteinEng.8(10):1057-1062[1995])；單鏈抗體；以及由抗體片段形成的多特異性抗體?？贵w之“功能性片段或類似物”乙詞系具與全長(zhǎng)抗體相同之生物活性性質(zhì)之化合物。舉例而言，抗IgE抗體之一功能性片段或類似物是指可結(jié)合至IgE免疫球蛋白，以預(yù)防或顯著降低此分子具有結(jié)合至高親和性受體FcgammaRI之能力者。以木瓜蛋白酶切割抗體可產(chǎn)生二相同之抗原結(jié)合片段，即“Fab”片段及殘余之“Fc”片段，該名稱反映其易于結(jié)晶之能力。該Fab片段由完整之L鏈與H鏈之可變區(qū)(VH)結(jié)構(gòu)域，及一重鏈之第一恒定結(jié)構(gòu)域(CH1)組成。各Fab片段對(duì)于抗原結(jié)合系單價(jià)，亦即，其具單一抗原結(jié)合位點(diǎn)?？贵w經(jīng)胃蛋白酶處理可產(chǎn)生單一大型F(ab’)2片段，其大致相當(dāng)于二雙硫鍵連結(jié)之Fab片段，其具二價(jià)抗原結(jié)合活性，且其仍能與抗原交聯(lián)。Fab’片段與Fab片段之差別在于CH1結(jié)構(gòu)域之羧基端具額外幾個(gè)殘基，包括抗體鉸鏈區(qū)之一或多個(gè)半胱胺酸。Fab’-SH于此是指Fab’之稱謂，其中恒定結(jié)構(gòu)域之半胱胺酸殘基具一游離巰基。F(ab’)2抗體片段起初制成Fab’片段對(duì)，于其間具鉸鏈區(qū)半胱胺酸?？贵w片段之其他化學(xué)偶聯(lián)系習(xí)知?！癋c”片段包括兩個(gè)由雙硫鍵連接在一起之H鏈羧基端部分?？贵w之效應(yīng)子功能系由Fc區(qū)之序列決定，該區(qū)亦由特定類型細(xì)胞上發(fā)現(xiàn)之Fc受體(FcR)所辨識(shí)之部分?！癋v”系含有完整之抗原辨識(shí)及抗原結(jié)合位點(diǎn)之最小抗體片段。此區(qū)系由緊密、非共價(jià)連接之一重鏈及一輕鏈可變區(qū)結(jié)構(gòu)域之二聚體組成。此二結(jié)構(gòu)域之折迭產(chǎn)生六個(gè)超變環(huán)(H鏈及L鏈各三個(gè)環(huán))，其提供與抗原結(jié)合之胺基酸殘基，并賦予抗體抗原結(jié)合特異性。然而，即使單一可變結(jié)構(gòu)域(或Fv之一半僅含三個(gè)抗原特異性CDRs)亦具辨識(shí)及結(jié)合抗原之能力，盡管與整個(gè)結(jié)合位點(diǎn)相比其親和力較低?！皢捂淔v”(亦縮寫為“sFv”或“scFv”)系包括相連接成單一多勝肽鏈之VH與VL抗體結(jié)構(gòu)域之抗體片段。較佳地，sFv多勝肽之VH與VL結(jié)構(gòu)域間進(jìn)一步包含多勝肽連接符，其能使sFv形成抗原結(jié)合所需之結(jié)構(gòu)。關(guān)于sFv之綜述，參見Pluckthun于ThePharmacologyofMonoclonylAntibodies,vol.113,RosenburgandMooreeds.,Springer-Verlag,NewYork,pp.269-315(1994)；Borrebaeck1995之內(nèi)文。術(shù)語“雙體(diabodies)”是指小型抗體片段，其經(jīng)由VH與VL結(jié)構(gòu)域間之短連接符(大約5-10個(gè)殘基)構(gòu)建sFv片段(見上段)而制備，以使V結(jié)構(gòu)域于鏈間而非鏈內(nèi)配對(duì)，得到二價(jià)片段，亦即具二抗原結(jié)合位點(diǎn)之片段。雙特異性雙體系二“交換體”sFv片段之異源二聚體，其中二雙體之VH及VL結(jié)構(gòu)域以不同之多勝肽鏈呈現(xiàn)。舉例而言，EP404,097；WO93/11161；以及Hollinger等人之Proc.Natl.Acad.Sci.USA,90:6444-6448(1993)有雙體之更詳細(xì)描述。結(jié)構(gòu)域抗體(dAbs)，其可由完整人類形式產(chǎn)生，為抗體之最小習(xí)知抗原結(jié)合片段，范圍為11kDa至15kDa。dAbs免疫球蛋白重鏈與輕鏈(分別為VH與VL)之強(qiáng)力可變區(qū)。其可于微生物細(xì)胞培養(yǎng)中高度表現(xiàn)，顯示良好生物物理特性，包括溶解度及溫度穩(wěn)定性，并且非常適合以體外篩選系統(tǒng)，如噬菌體展示系統(tǒng)篩選及進(jìn)行親和力成熟作用(affinitymaturation)。dAb之單體具生物活性，系因其小尺寸及固有之穩(wěn)定性，可制成更大之分子，以創(chuàng)造具延長(zhǎng)之血清半衰期或其他藥理活性之藥物。此技術(shù)之實(shí)例已描述于WO9425591，為衍生自駱駝(Camelidae)重鏈Ig之抗體，以及US20030130496，描述自噬菌體庫中分離出結(jié)構(gòu)域完整之人類抗體。本文使用的抗體“內(nèi)化”是指抗體由于與哺乳動(dòng)物細(xì)胞上之抗原結(jié)合(例如，細(xì)胞表面之多勝肽或受體)，而被細(xì)胞攝入(即進(jìn)入)。內(nèi)化的抗體當(dāng)然包括抗體片段、人類或嵌合性抗體、及抗體結(jié)合物。在特定治療應(yīng)用中，考慮到體內(nèi)內(nèi)化。內(nèi)化之抗體分子數(shù)目將足以或適于殺死細(xì)胞或抑制其生長(zhǎng)，尤其是癌細(xì)胞。根據(jù)抗體或抗體結(jié)合物之效力，在一些情況下，攝入單一抗體分子至細(xì)胞中便足以殺死該抗體所結(jié)合之標(biāo)靶細(xì)胞。舉例而言，特定毒素在毒殺時(shí)具高度效力，使得與該毒素結(jié)合之抗體單一分子內(nèi)化，便足以殺死癌細(xì)胞。本文使用的抗體系描述為“免疫特異性”、“特異于”，或“特定地結(jié)合”至一抗原，如果其在可偵測(cè)范圍內(nèi)與抗原反應(yīng)，較佳具親和常數(shù)，Ka，大于或等于約104M-1，或大于或等于約105M-1，大于或等于約106M-1，大于或等于約107M-1，或大于或等于108M-1?？贵w對(duì)其關(guān)聯(lián)抗原之親和力通常亦表示成解離常數(shù)KD，且在一些具體實(shí)施例中，IL-17RB或IL-17B抗體特定結(jié)合至IL-17RB或IL-17B多勝肽，假若其結(jié)合之KD小于或等于10-4M，小于或等于約10-5M，小于或等于約10-6M，小于或等于10-7M，或小于或等于10-8M?？贵w之親和力可立即使用常規(guī)技術(shù)，如描述于Scatchardetal.(Ann.N.Y.Acad.Sci.USA51:660(1949))者測(cè)定?？贵w與抗原、細(xì)胞或其組織之結(jié)合特性一般可使用免疫偵測(cè)法包括如免疫熒光為基礎(chǔ)的測(cè)定，如免疫組織化學(xué)(IHC)及/或熒光激活細(xì)胞分選(FACS)測(cè)定與評(píng)估。具有指定抗體之“生物特征”之抗體是指該抗體具有一或多個(gè)生物特征，使其與其他抗體不同。舉例而言，在一些具體實(shí)施例中，具指定抗體之生物特征之抗體可結(jié)合至與該指定抗體可結(jié)合之相同表位，及/或具有與指定抗體相同之效應(yīng)子功能。本文所使用的“拮抗劑”抗體乙詞是指最廣義之定義，并包括部分或完全阻斷、抑制或中和其特異性結(jié)合之表位、多勝肽或細(xì)胞之生物活性之抗體。辨識(shí)抗體拮抗劑之方法包含將特異性結(jié)合有候選拮抗劑抗體之多勝肽或細(xì)胞，與該候選拮抗劑抗體接觸，并測(cè)量一或多個(gè)一般與該多勝肽或細(xì)胞相關(guān)之生物活性之可偵測(cè)變化?！耙种瓢┘?xì)胞生長(zhǎng)之抗體”或“生長(zhǎng)抑制性”抗體是指該抗體與表現(xiàn)或可表現(xiàn)IL-17RB或IL-17B表位之腫瘤細(xì)胞結(jié)合并導(dǎo)致其生長(zhǎng)抑制。與適當(dāng)之對(duì)照組相比(該對(duì)照組通常為沒有用所測(cè)試抗體處理的腫瘤細(xì)胞)，較佳的生長(zhǎng)抑制性抗抗體可抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)大于20％，較佳地約20％-50％，更佳地大于50％(例如約50％至約100％)。在細(xì)胞培養(yǎng)中，可以在約0.1至約30pg/ml或約0.5nM至200nM抗體濃度下檢測(cè)生長(zhǎng)抑制，其中該生長(zhǎng)抑制系于腫瘤細(xì)胞暴露于該抗體1-10天后檢測(cè)?？梢越?jīng)由技術(shù)上已知之各種方法檢測(cè)體內(nèi)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制。如果在第一次投藥約1μg/kg至約100mg/kg體重的抗體后5天至3個(gè)月之內(nèi)(較佳5至30天之內(nèi))，可導(dǎo)致癌細(xì)胞百分比或癌細(xì)胞總數(shù)下降，則該抗體在體內(nèi)為生長(zhǎng)抑制性?！罢T導(dǎo)凋亡”的抗體是指那些可誘導(dǎo)細(xì)胞程序性細(xì)胞死亡的抗體，所述凋亡可通過膜聯(lián)蛋白V(annexinV)的結(jié)合、DNA片段化、細(xì)胞萎縮、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膨脹、細(xì)胞碎裂、及/或膜泡(稱為凋亡小體)的形成而判定。較佳該細(xì)胞為癌細(xì)胞?？捎酶鞣N方法檢測(cè)與凋亡相關(guān)的細(xì)胞事件。舉例而言，磷脂酰絲胺酸(PS)易位可經(jīng)由膜聯(lián)蛋白結(jié)合來測(cè)定；DNA片段化可經(jīng)由DNA序列梯(laddering)來評(píng)估；伴隨DNA片段化的核/染色體濃縮可經(jīng)由亞二倍體細(xì)胞中的任何增加來評(píng)估。較佳地，凋亡誘導(dǎo)抗體是在膜聯(lián)蛋白結(jié)合試驗(yàn)中，導(dǎo)致對(duì)膜聯(lián)蛋白的結(jié)合為未處理細(xì)胞的約2至50倍，較佳約5至50倍，最佳約10至50倍的那些抗體。抗體的“效應(yīng)子功能”是指該些可歸因于抗體Fc區(qū)域(天然序列Fc區(qū)域或胺基酸序列變體Fc區(qū)域)的生物學(xué)活性，且依據(jù)抗體同種型而不同?？贵w效應(yīng)子功能的實(shí)施例包括:Clq結(jié)合和補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒作用；Fc受體結(jié)合；抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒殺作用(ADCC)；吞噬作用；細(xì)胞表面受體(如B細(xì)胞受體)等的向下調(diào)節(jié)；以及B細(xì)胞活化?！翱贵w依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒殺作用”或“ADCC”是指一種細(xì)胞毒殺形式，其中與某些細(xì)胞毒殺細(xì)胞(例如自然殺手(NK)細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞)上呈現(xiàn)的結(jié)合至Fc受體(FcR)的分泌性Ig，可使這些細(xì)胞毒殺效應(yīng)細(xì)胞特異性結(jié)合至攜帶抗原之目標(biāo)細(xì)胞，隨后用細(xì)胞毒素殺死目標(biāo)細(xì)胞。該抗體“武裝”了細(xì)胞毒殺細(xì)胞，且此為這種毒殺方式所必須的。介導(dǎo)ADCC作用的主要細(xì)胞NK細(xì)胞僅表現(xiàn)FcγRIII，而單核細(xì)胞則表現(xiàn)FcγRI、FcγRII和FcγRIII。關(guān)于造血細(xì)胞上FcR表現(xiàn)的總結(jié)見Ravetch和Kinet，Annu.Rev.Immunol9：457-92(1991)的464頁上的表三。為了評(píng)估目的分子的ADCC活性，可進(jìn)行體外ADCC檢測(cè)，例如美國專利5,500,362或5,821,337中所述?？捎帽疚念悪z測(cè)的效應(yīng)子細(xì)胞包括周邊血液?jiǎn)魏思?xì)胞(PBMC)和自然殺手(NK)細(xì)胞。此外或額外地，有興趣分子的ADCC活性可于體內(nèi)評(píng)估，例如在Clynesetal.,Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)95:652-656(1998)中所述之動(dòng)物模式中?！癋c受體”或“FcR”用來描述與抗體Fc區(qū)域結(jié)合的受體。較佳之FcR為原始序列人類FcR。而且，較佳的FcR為結(jié)合IgG抗體的受體(γ受體)，包括FcγRI、FcγRII和FcγRIII亞類(包括這些受體的等位基因變體和選擇性剪接型)。FcγRII受體包括具有相似的胺基酸序列的FcγRIIA(“活化受體”)和FcγRIIB(“抑制受體”)，其主要區(qū)別在于其細(xì)胞質(zhì)性結(jié)構(gòu)域。活化受體FcγRIIA在其細(xì)胞質(zhì)性結(jié)構(gòu)域中含有以免疫受體酪胺酸為基礎(chǔ)的活化模體(ITAM)。抑制受體FcγRIIB在其細(xì)胞質(zhì)性結(jié)構(gòu)域中含有以免疫受體酪胺酸為基礎(chǔ)的抑制模體(ITIM)。(見綜述M.inDaeron，Annu.Rev.Immunol.15：203-234(1997))。FcR的綜述見Ravetch和Kinet，Annu.Rev.Immunol.9：457-92(1991)；Capel等人，Immunomethods4:25-34(1994)；以及deHaas等，J.Lab.Clin.Med.126：330-41(1995)。本文中術(shù)語“FcR”涵蓋其他FcR，包括那些未來將被辨識(shí)出的FcR。該術(shù)語還包括負(fù)責(zé)將母體IgG轉(zhuǎn)移到胎兒的新生期受體FcRn(Guyeretal.,J.Immunol.117:587(1976)andKimetal.,J.Immunol.24:249(1994))。“人類效應(yīng)子細(xì)胞”是表現(xiàn)一或多個(gè)FcR并執(zhí)行效應(yīng)子功能的白細(xì)胞。較佳地，該細(xì)胞至少表現(xiàn)FcγRIII并執(zhí)行ADCC效應(yīng)子功能。介導(dǎo)ADCC作用的人類白細(xì)胞的實(shí)例包括周邊血液?jiǎn)魏思?xì)胞(PBMC)、自然殺手(NK)細(xì)胞、單核細(xì)胞、細(xì)胞毒殺T細(xì)胞和中性顆粒細(xì)胞；較佳為BMC和NK細(xì)胞。該效應(yīng)子細(xì)胞可從其天然來源中分離，例如從血液中分離?！把a(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒殺作用”或“CDC”是指在補(bǔ)體存在的條件下裂解目標(biāo)細(xì)胞的能力。典型補(bǔ)體路徑之活化起始于補(bǔ)體系統(tǒng)的第一個(gè)成分(C1q)與結(jié)合至其相關(guān)(cognate)抗原的抗體(適當(dāng)?shù)膩嗩?的結(jié)合。為了評(píng)估補(bǔ)體活化作用，可進(jìn)行CDC檢測(cè)，如Gazzano-Santoroetal.,J.Immunol.Methods202:163(1996)所述。本文所使用的“細(xì)胞激素”乙詞是指可調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間的各種小型分泌性蛋白質(zhì)，藉由影響免疫細(xì)胞分化過程，其通常涉及前驅(qū)細(xì)胞之基因表現(xiàn)，而使該前驅(qū)細(xì)胞變?yōu)楠?dú)特之特化細(xì)胞類型。細(xì)胞激素已有各種命名，淋巴激素、介白素和趨化激素，基于其預(yù)訂的功能、分泌的細(xì)胞，或作用目標(biāo)而定。舉例而言，某些常見之介白素包括但不局限于IL-17、IL-12、IL-18、IL-2、IFN-γ、TNF、IL-4、IL-10、IL-13、IL-21、及TGF-β。本文所使用的“表位”乙詞是指與抗體或T細(xì)胞受體之抗原結(jié)合位點(diǎn)接觸之抗原分子部分。本文所使用的“疫苗”乙詞是指包含抗原之制劑，由完整致病生物(已死亡或減弱)或此類生物體之成分，如蛋白質(zhì)、勝肽、或多醣組成，其用于賦予針對(duì)該生物體引起之疾病的抵抗力。疫苗制劑可以是天然的、合成的或衍生自重組DNA技術(shù)。本文所使用的“免疫性佐劑”乙詞是指與免疫原一起使用，而可增強(qiáng)或修飾對(duì)免疫原的免疫反應(yīng)的物質(zhì)。α-GalCer類似物用于作為免疫佐劑，已修改或放大疫苗效用，經(jīng)由刺激施用該疫苗之患者的免疫系統(tǒng)，而使其對(duì)于疫苗的反應(yīng)更劇烈。增強(qiáng)疫苗的效果。在示范性實(shí)施例中，類似物C34使用作為佐劑。本文所使用的“明礬佐劑”乙詞是指具免疫佐劑活性鋁鹽。此試劑會(huì)吸附和沉淀溶液中的蛋白質(zhì)抗原；所得沉淀物會(huì)增進(jìn)疫苗的免疫原性，經(jīng)由自接種部位形成之疫苗儲(chǔ)存處促進(jìn)抗原之緩慢釋放而達(dá)成。本文所使用的“抗腫瘤免疫療法活性試劑”乙詞是指由本發(fā)明疫苗制造之抗體，其可抑制降低及/或消除腫瘤。本文所使用的“抗原特異性”乙詞是指一群細(xì)胞之特性，使其可提供特異性抗原或該抗原之片段，而產(chǎn)生特異性細(xì)胞增生。本文所使用的“RNA干擾”或“RNAi”乙詞是指藉由RNAi試劑(如“短干擾RNA”、“siRNA”、“shRNA”、“短干擾核酸分子”、“短干擾寡核苷酸分子”、或“經(jīng)化學(xué)性修飾之短干擾核酸分子”)靜默或降低基因表現(xiàn)。本文所使用的“短干擾RNA、siRNA、shRNA、短干擾核酸分子、短干擾寡核苷酸分子，或經(jīng)化學(xué)性修飾之短干擾核酸分子”乙詞是指可抑制或向下調(diào)節(jié)基因表現(xiàn)或病毒復(fù)制之核酸分子，例如藉由介導(dǎo)RNA干擾(參見如(Grimm,Adv.DrugDeliv.Rev.,61,672,2009；Gondi,J.CellPhysiol,220,285,2009；Carthew,136,642,2009；Jinek,457,405,2009；Ghildiyal,Nat.Rev.Genet.,10,94,2009)。RNAi為細(xì)胞、動(dòng)物和植物之序列特異性、轉(zhuǎn)錄后基因靜默的過程，由RNAi試劑啟動(dòng)，其在雙鏈區(qū)與待靜默的基因序列同源。該基因可以是生物體內(nèi)生性或外源性，以整合入染色體方式存在，或于未整合到基因組中的轉(zhuǎn)染載體中存在。該基因的表現(xiàn)被完全或部分抑制。RNAi亦可視為抑制標(biāo)靶RNA的功能；標(biāo)靶RNA的功能可被完全或部分地抑制。在一些具體實(shí)施例中，RNAi試劑可為雙股聚核苷酸分子，包含自我互補(bǔ)同義與反義區(qū)，其中該反義區(qū)包含與目標(biāo)核酸分子或其一部份之核苷酸序列互補(bǔ)之核苷酸序列，，以及具有與目標(biāo)核酸序列或其一部份對(duì)應(yīng)之核苷酸序列之同義區(qū)。RNAi試劑由二單獨(dú)之寡核苷酸組成，其中一股為同義股且另一股為反義股，其中該反義與同義股為自我互補(bǔ)(及每一股皆包含互補(bǔ)于另一股核苷酸序列之核苷酸序列；如其中該反義股與同義股形成雙重或雙股結(jié)構(gòu)，例如其中該雙股區(qū)為約19個(gè)堿基對(duì))；該反義股包含互補(bǔ)于目標(biāo)核酸分子或其一部份核苷酸序列之核苷酸序列，以及該同義股包含對(duì)應(yīng)于目標(biāo)核酸分子或其一部份核苷酸序列之核苷酸序列。此外，RNAi試劑可由單一寡核苷酸組成，其中該RNAi試劑之自我互補(bǔ)同義與反義區(qū)以核酸基礎(chǔ)或非核酸基礎(chǔ)連接符連結(jié)。該RNAi試劑可為具重復(fù)、非對(duì)稱重復(fù)、發(fā)夾狀、或非對(duì)稱發(fā)夾狀二級(jí)結(jié)構(gòu)之聚核苷酸，具自我互補(bǔ)同義與反義區(qū)，其中該反義區(qū)包含互補(bǔ)于單獨(dú)目標(biāo)核酸分子或其一部份核苷酸序列之核苷酸序列，且該同義區(qū)具對(duì)應(yīng)于目標(biāo)核酸序列或其一部份核苷酸序列之核苷酸序列。RNAi試劑可為圓形單股聚核苷酸，具二或多個(gè)環(huán)結(jié)構(gòu)，以及一主干，包含自我互補(bǔ)同義與反義區(qū)，其中該反義區(qū)包含互補(bǔ)于單獨(dú)目標(biāo)核酸分子或其一部份核苷酸序列之核苷酸序列，且該同義區(qū)具對(duì)應(yīng)于目標(biāo)核酸序列或其一部份核苷酸序列之核苷酸序列，其中該圓形聚核苷酸可于體內(nèi)或體外處理，以產(chǎn)生活性小型核酸分子，其可產(chǎn)生RNAi。該RNAi試劑亦可包含單股聚核苷酸，其具互補(bǔ)于單獨(dú)目標(biāo)核酸分子或其一部份核苷酸序列之核苷酸序列。就本目的而言，RNAi試劑分子不應(yīng)限制于僅含有天然產(chǎn)生RNA者，但更包含化學(xué)性修飾之核苷酸與非核苷酸。術(shù)語“RNAi試劑”系與用于描述核酸分子之其他術(shù)語等效，其可產(chǎn)生序列特異性RNAi，例如，短干擾RNA(siRNA)、雙股RNA(dsRNA)、微小-RNA(miRNA)、短發(fā)夾狀RNA(shRNA)、短干擾寡核苷酸、短干擾核酸、短干擾修飾寡核苷酸、化學(xué)性修飾siRNA、轉(zhuǎn)錄后基因靜默RNA(ptgsRNA)，以及其他。此外，本文所使用的“RNAi”乙詞系與用于描述序列序列RNA干擾之其他術(shù)語等效，如轉(zhuǎn)錄后基因靜默、轉(zhuǎn)譯抑制或表觀遺傳學(xué)。本文所使用的“siRNA”乙詞是指人造核苷酸序列，其用于RNA干擾療法中。典型地，siRNA為雙股核酸分子，其包含二核苷酸股，每一股具有約19制約28個(gè)核苷酸。短發(fā)夾狀RNA(shRNA)為一RNA序列，其產(chǎn)生緊密發(fā)夾狀彎曲，其可經(jīng)由RNA干擾而靜默基因表現(xiàn)。典型使用作為載體以導(dǎo)入shRNA至細(xì)胞中，并使用促進(jìn)子(如U6促進(jìn)子)以確保shRNA之表現(xiàn)。此載體通常會(huì)傳至子細(xì)胞中，使得基因靜默被遺傳下去。shRNA發(fā)夾狀結(jié)構(gòu)會(huì)被細(xì)胞內(nèi)機(jī)制切割為siRNA，其之后結(jié)合至RNA-誘導(dǎo)靜默復(fù)合體(RISC)。此復(fù)合體結(jié)合至配對(duì)其上結(jié)合siRNA之mRNAs，并將其切割。微小RNAs(miRNAs)為一群內(nèi)生性、單股或雙股、約22個(gè)核苷酸-長(zhǎng)之RNA分子，其調(diào)節(jié)多達(dá)30％哺乳動(dòng)物基因，在細(xì)胞分化、增生與凋亡調(diào)節(jié)方面扮演重要角色。目前已了解miRNAs在各人類腫瘤類型中之向上調(diào)節(jié)與向下調(diào)節(jié)之特定途徑。miRNA會(huì)藉由阻斷轉(zhuǎn)譯或?qū)е罗D(zhuǎn)錄物降解而抑制蛋白質(zhì)制造。術(shù)語“基因敲落”、“敲落(knockdown)”或“敲落(knock-down)”可互換使用，是指降低其中一或多個(gè)生物體之基因表現(xiàn)之技術(shù)，或經(jīng)由基因修飾(改變其中一生物體之基因體之DNA)或以試劑如互補(bǔ)于mRNA轉(zhuǎn)錄體或基因之短DNA或RNA寡核苷酸之序列處理。使用RNAi試劑之處理會(huì)改變基因表現(xiàn)，經(jīng)由降解mRNA、阻斷mRNA轉(zhuǎn)譯、或阻斷前-mRNA成熟為mRNA。術(shù)語“針對(duì)(一個(gè)基因名稱)的siRNA”、“抗(基因名稱)的siRNA”可互換使用，是指引導(dǎo)基因以達(dá)沉默該基因目的之siRNA。術(shù)語所述RNAi試劑的“表現(xiàn)”和“轉(zhuǎn)染”可互換使用，是指所述RNAi試劑在傳送至細(xì)胞內(nèi)之后的活性。高度表現(xiàn)或轉(zhuǎn)染代表目標(biāo)蛋白質(zhì)的有效敲落。對(duì)于siGLO，一種綠色熒光dsRNA分子設(shè)計(jì)為在送入細(xì)胞質(zhì)后運(yùn)送至細(xì)胞核，且自載體或內(nèi)涵體釋放后為游離分子，其表現(xiàn)或轉(zhuǎn)染是由細(xì)胞核中綠色熒光的累積指示。本文所使用的“RNAi試劑之細(xì)胞內(nèi)生物可獲得性”乙詞是指RNAi試劑可自其載體、胞內(nèi)體或溶小體中完整釋放，即未被降解，其一般可在到達(dá)細(xì)胞內(nèi)RNAi機(jī)器時(shí)獲得，或其具可完成RNA干擾作用之功能。本文所使用的“RIDES”乙詞是指多成分RNAi載體系統(tǒng)，其可用于投予RNAi試劑。RIDES負(fù)責(zé)RNAi之傳送與表現(xiàn)系統(tǒng)。RIDES之一成分為聚乙二醇化脂質(zhì)體陽離子RNAi載體，PCat脂質(zhì)體。RIDES的另一成分包含紫杉醇、阿霉素(doxorubicin)、其他微管蛋白活性試劑或其他拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑之一或多者。包含入這些試劑之一或多者可改善RNAi載體，包括PCat-siRNA，傳送至細(xì)胞，并改善RNAi從其載體、胞內(nèi)體與溶酶體釋放至細(xì)胞質(zhì)，而使基因沉默。本文所使用的“載體”乙詞是指可完成基因傳送或核酸傳送之載體或其他機(jī)制。在一些具體實(shí)施例中，基因傳送或核酸傳送，包括RNAi試劑之傳送，可由數(shù)種機(jī)制完成，包括如衍生自病毒與非病毒來源之載體、陽離子復(fù)合體、奈米顆粒、脂質(zhì)體與類似物。本文所使用的“載劑(carrier)”與“載體(vector)”乙詞可互換使用，皆指載體。舉例而言，RNAi載劑指的是用于運(yùn)輸RNAi的載劑，例如脂質(zhì)體；RNAi載劑脂質(zhì)體或RNAi脂質(zhì)體載劑是指其中脂質(zhì)體為所述RNAi的載體或載劑；醫(yī)藥上可接受的載體是本領(lǐng)域公認(rèn)的術(shù)語，是指含有試劑，推測(cè)為具有治療目的之產(chǎn)物之載體或介導(dǎo)。術(shù)語“藥物”和“試劑”可互換使用，指的是用于診斷、檢測(cè)或監(jiān)測(cè)腫瘤或增殖性疾病的物質(zhì)。術(shù)語“試劑”包括小分子，巨分子(例如，勝肽、蛋白質(zhì)、抗體，或抗體片段)、核酸(例如，基因治療構(gòu)建體)、重組病毒、核酸片段(包括如合成的核酸片段、siRNA分子、反義分子)、奈米顆粒、及微米顆粒。術(shù)語“亞治療”、“亞細(xì)胞毒性”和“無細(xì)胞毒性”可互換使用，并且是指該劑量或濃度低于典型用于人類治療中者，或引起實(shí)驗(yàn)中培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞毒性者。舉例而言，在用于紫杉醇人類個(gè)體之亞治療劑量為小于約120mg/m2，多西他賽(docetaxel)為小于約72mg/m2，長(zhǎng)春新堿(vincristine)小于約1mg/m2，秋水仙堿(colchicine)小于約3mg口服劑量，多柔比星(doxorubicin)小于約60mg/m2。本文所使用的“細(xì)胞凋亡”乙詞是指非壞死性、良好調(diào)節(jié)之細(xì)胞死亡形式，如技術(shù)上已建立之標(biāo)準(zhǔn)定義。在本發(fā)明之特定具體實(shí)施例中，系提供醫(yī)藥組合物與方法，其特征為存在或投予本發(fā)明之一或多個(gè)RNAi分子或其他的dsRNA或其類似物，與多勝肽的可能組合、復(fù)合或結(jié)合，任選地與醫(yī)藥上可接受的載體，如稀釋劑、穩(wěn)定劑、緩沖液或類似物，一同配制。本發(fā)明帶負(fù)電的dsRNA分子，可經(jīng)由任何標(biāo)準(zhǔn)的手段投予病患，使用或未使用穩(wěn)定劑、緩沖液，或類似物，以形成適用于治療的組合物。當(dāng)希望使用脂質(zhì)體傳送機(jī)制，可遵循用于形成脂質(zhì)體的標(biāo)準(zhǔn)流程。本發(fā)明組合物可經(jīng)配制，并使用作為用于口服給藥之錠劑、膠囊或酏劑、用于直腸給藥之栓劑，用于注射給藥之無菌溶液、或懸浮液，無論是具有或沒有本領(lǐng)域已知的其他化合物。因此，本發(fā)明的dsRNA可以任何形式投藥，諸如經(jīng)鼻、經(jīng)皮、非經(jīng)腸胃、或局部注射。術(shù)語“癌癥”、“腫瘤細(xì)胞”、“腫瘤”、“白血病”、或“白血病細(xì)胞”可互換使用，是指任何腫瘤(“新生長(zhǎng)的”)，如“癌癥”(衍生自上皮細(xì)胞)、腺癌(衍生自腺組織)、肉瘤(衍生自結(jié)締組織)、淋巴瘤(衍生自淋巴組織)，或血液癌癥(例如，白血病或紅白血病)。術(shù)語“癌癥”或“腫瘤細(xì)胞”也包括癌組織或腫瘤，其應(yīng)理解為癌細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞的總稱，并涵蓋良性、癌前病變或惡性得癌癥或細(xì)胞。典型地，癌癥或腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出各領(lǐng)域公認(rèn)的標(biāo)記，例如，非生長(zhǎng)因子依賴性、缺乏細(xì)胞/細(xì)胞接觸生長(zhǎng)抑制，及/或異常核型。與此相反，正常的細(xì)胞通常只能在培養(yǎng)中下傳有限代數(shù)，及/或顯示出各種本領(lǐng)域公認(rèn)的正常細(xì)胞標(biāo)志(例如，生長(zhǎng)因子依賴性、接觸抑制，及/或正常核型)。在生理上部分異常生長(zhǎng)，且經(jīng)常在增生過程扮演不可或缺的角色的基因正常細(xì)胞，也被稱為癌癥細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞。這包括，除其他外，基質(zhì)細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞，其在腫瘤分泌因子影響下而增生，以及間質(zhì)細(xì)胞，其刺激上皮腫瘤細(xì)胞增生。術(shù)語“細(xì)胞”包括任何真核細(xì)胞，例如體細(xì)胞或種系哺乳動(dòng)物細(xì)胞，或細(xì)胞株，例如，HeLa細(xì)胞(人)、NIH3T3細(xì)胞(鼠)、胚胎干細(xì)胞，以及細(xì)胞類型如造血干細(xì)胞、肌肉細(xì)胞、肝細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、及上皮細(xì)胞，以及如本文所述之細(xì)胞株。術(shù)語“個(gè)體”包括人類和非人類動(dòng)物(例如，除其他外，小鼠、大鼠、兔、貓、狗、家畜、及靈長(zhǎng)類)。術(shù)語“顆?！笔侵改蚊最w粒、微米顆粒、或奈米顆粒和微米顆粒二者。術(shù)語“微米顆?！笔侵讣s0.1μm至約100μm、約0.5μm至約50μm、0.5μm至約20μm尺寸之顆粒，較佳約1μm至約10μm、約5μm尺寸之顆粒，或其混合物。微米顆?？砂薹肿尤鏡NAi試劑。典型地，微米顆?？删植炕騾^(qū)域性投藥。術(shù)語“奈米顆?！毕抵讣s0.1nm至約1μm、約1nm至約1μm、約10nm至約1μm、約50nm至約1μm、約100nm至約1μm之顆粒。奈米顆?？砂薹肿尤鏡NAi試劑。典型地，奈米顆粒可局部、區(qū)域性或系統(tǒng)性投藥。本文揭示用于治療與IL-17RB或IL-17B介導(dǎo)之訊息傳遞路徑相關(guān)之癌癥之組合物與方法。抑制IL-17RB或IL-17B活性之試劑包括但不局限于：(i)可經(jīng)由如結(jié)合至IL-17RB或IL-17B，而中和IL-17RB或IL-17B活性或細(xì)胞內(nèi)濃度之抗體，或(ii)IL-17RB或IL-17B之反義核酸RNAi。序列下表1顯示IL17RB(介白素17受體B)之胺基酸序列與編碼其之基因序列。用于制造多株與單株抗體之細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域(胺基酸18-289)下標(biāo)出。下表2顯示IL-17B之胺基酸序列與編碼其之基因序列?？笽L-17RB抗體本文所述為分離之抗IL-17RB抗體，其靶向位于IL-17RB細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域之特異性片段。本文所使用的“經(jīng)分離抗體”乙詞是指實(shí)質(zhì)上不含天然相關(guān)分子之抗體，即天然相關(guān)分子組成至多20％重之含該抗體之制劑。純度可由任何適當(dāng)方法測(cè)量，如管柱色譜法、聚丙烯酰胺凝膠電泳、及HPLC。抗體(可與復(fù)數(shù)形式互換使用)為免疫球蛋白分子，可特異性結(jié)合至標(biāo)靶，如水化合物，聚核苷酸，脂質(zhì)或多勝肽，經(jīng)由位于該免疫球蛋白分子可變區(qū)的至少一個(gè)抗原辨識(shí)位置。本文所使用的“抗體”乙詞不只包含完整(如全長(zhǎng))多株或單株抗體，亦包含其抗原結(jié)合片段(如Fab、Fab'、F(ab’)2、及Fv)、單鏈scFv)、其突變物、含有抗體部分之融合蛋白、人源化抗體、嵌合性抗體、雙抗體、線性抗體、單鏈抗體、特異性抗體(例如，雙特異性抗體)，以及任何其他免疫球蛋白分子經(jīng)修飾構(gòu)形，其包含所需特異性的抗原識(shí)別位點(diǎn)，包括抗體之醣基化變體、抗體的胺基酸序列變體和抗體的共價(jià)修飾?？贵w包括任何種類的抗體，如IgD、IgE、IgG、IgA、或IgM抗體(或其亞類)，且抗體不必是任何特定類型。取決于抗體上之重鏈恒定結(jié)構(gòu)域的胺基酸序列，免疫球蛋白可分為不同類型。有五大類免疫球蛋白：IgA、IgD、IgE、IgG、及IgM，其中一些還可進(jìn)一步分為亞類(同種型)，例如，IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1、及IgA2。對(duì)應(yīng)于不同類型免疫球蛋白的重鏈恒定區(qū)分別稱為α、δ、ε、γ、及μ。不同類型的免疫球蛋白之次單元結(jié)構(gòu)和三維構(gòu)形為已知。本文所述之抗IL-17RB抗體，其可用于減輕IL-17RB介導(dǎo)的疾病，可為嚙齒類、大鼠、人或任何其他來源(包括嵌合性或人源化抗體)。在某些實(shí)施例中，該抗體包含經(jīng)修飾的恒定區(qū)，如免疫惰性的恒定區(qū)，例如，不會(huì)觸發(fā)補(bǔ)體介導(dǎo)的裂解，或者不刺激抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(ADCC)。在其他具體實(shí)施例中，恒定區(qū)經(jīng)修飾，如Eur.J.Immunol.(1999)29:2613-2624；PCT申請(qǐng)案號(hào)PCT/GB99/01441；及/或UK專利申請(qǐng)案號(hào)9809951.8中所述。任何本文所述的抗體可為單株或多株?！皢沃昕贵w”是指同質(zhì)抗體群，“多株抗體”是指非同質(zhì)抗體群。這兩個(gè)術(shù)語不限制抗體的來源或其制造方式。在一些具體實(shí)施例中，本文所述之抗體為嵌合性抗體，其可包括來自人類抗體之一重鏈恒定區(qū)與一輕鏈恒定區(qū)。嵌合性抗體可為具有來自第一物種之可變區(qū)或可變區(qū)部分和來自第二物種之恒定區(qū)之抗體。在一些具體實(shí)施例中，在這些嵌合性抗體中，包括輕鏈和重鏈二者之可變區(qū)可模仿來自哺乳動(dòng)物物種(例如，非人類哺乳動(dòng)物如小鼠、兔和大鼠)之抗體的可變區(qū)，而恒定部分可為衍生自另一哺乳動(dòng)物如人類之抗體同源序列。在一些具體實(shí)施例中，可于可變區(qū)及/或恒定區(qū)進(jìn)行胺基酸修飾。在一些具體實(shí)施例中，本文提供的抗體為人源化抗體。人源化抗體系指各種形式的非人類(例如，嚙齒類)抗體，其為特異性嵌合性免疫球蛋白、免疫球蛋白鏈或其抗原結(jié)合片段，其包含衍生自非人類免疫球蛋白之最小序列。人源化抗體可為人類免疫球蛋白(接受者抗體)，其中來自接受者的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)的殘基，可取代為非人類物種(提供者抗體)如小鼠、大鼠或兔，其具有所需特異性、親和力、及能力之CDR。在一些具體實(shí)施例中，人類免疫球蛋白的Fv構(gòu)架o區(qū)(FR)殘基，被相對(duì)應(yīng)的非人類殘基取代。此外，人源化抗體可包含既不在接受者抗體上也不在引入的CDR或框架序列上所發(fā)現(xiàn)的殘基，但可包含入以進(jìn)一步改進(jìn)和使抗體表現(xiàn)度優(yōu)化。在一些具體實(shí)施例中，，人源化抗體可實(shí)質(zhì)上包含至少一或二個(gè)可變結(jié)構(gòu)域全部，其中所有或?qū)嵸|(zhì)上所有CDR區(qū)對(duì)應(yīng)于非人類免疫球蛋白，以及所有或?qū)嵸|(zhì)上所有的FR區(qū)為人類免疫球蛋白的共同序列。人源化抗體亦可包含免疫球蛋白恒定區(qū)或結(jié)構(gòu)域(Fc)之至少一部分，典型地為人類免疫球蛋白?？贵w可具Fc區(qū)，如WO99/58572所述之修飾。人源化抗體之其他形式可具有至少一CDR(1、2、3、4、5、6)，其可以相對(duì)于來源抗體方式改變，其亦稱之為至少一CDR“衍生自”來源抗體之至少一CDR。人源化抗體亦涉及親和力成熟作用。本文所述抗體之可結(jié)合至新辨識(shí)出之IL-17RB之抗原片段，即含有SEQIDNO:1胺基酸18至289之片段，或其抗原性表位。此抗體可結(jié)合至剛辨識(shí)出位于細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域ofIL-17RB之抗原片段/表位。在一些具體實(shí)施例中，本文所述的抗IL-17RB抗體特異性地及/或優(yōu)先地結(jié)合至抗原17RB片段或在其中之表位?？贵w“特異性地結(jié)合至”(此處可互換使用)目標(biāo)或表位是本領(lǐng)域已知的術(shù)語，以及測(cè)定此種特異性結(jié)合之方法也是本領(lǐng)域公知的。被認(rèn)為具有“特異性結(jié)合”的分子，如果其與特定目標(biāo)抗原之反應(yīng)或結(jié)合更頻繁、更迅速，期間更長(zhǎng)，及/或具更大親和力，與其他目標(biāo)相較?？贵w“特異性地結(jié)合”至目標(biāo)抗原，如果其與特定目標(biāo)抗原之反應(yīng)或結(jié)合更頻繁、更迅速，期間更長(zhǎng)，及/或具更大親和力，與其他物質(zhì)相較。在一些具體實(shí)施例中，特定地結(jié)合至第一目標(biāo)抗原之抗體，可或未特異性地或優(yōu)先地結(jié)合至第二目標(biāo)抗原。如此，“特異性結(jié)合”或“優(yōu)先地結(jié)合”不一定需要(盡管其可包括)排他性結(jié)合。在一些具體實(shí)施例中，結(jié)合系指優(yōu)先結(jié)合。抗IL-17RB抗體之結(jié)合親和性，或忼原性表位可小于約100nM、約50nM、約10nM、約1nM、約500pM、約100pM或約50pM至約2pM。結(jié)合親和性可以KD或解離常數(shù)表達(dá)，結(jié)合親和性增加對(duì)應(yīng)于KD降低。決定抗體對(duì)IL-17RB之結(jié)合親和性之一方法為測(cè)量抗體單官能基Fab片段之結(jié)合親和性。為了獲得單官能基Fab片段，抗體(如IgG)可以木瓜酵素切割或重組性表現(xiàn)出?？贵w之抗IgEFab片段之親和性可以表面等離子體共振測(cè)量(BIAcore3000表面等離子體共振(SPR)系統(tǒng)，BIAcore，INC，PiscawayN.J.)。可獲得動(dòng)力學(xué)結(jié)合常數(shù)(kon)與解離常數(shù)(koff)(一般于25℃測(cè)量)；而平衡解離常數(shù)(KD)可以koff/kon計(jì)算。中和IL-17RB活性之抗體可結(jié)合至受體并抑制由受體介導(dǎo)之訊息傳遞(如降低IL-17RB受體介導(dǎo)之訊息傳遞至少20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、或更大)。本文所使用的“抗原”乙詞包括完整之免疫球蛋白分子，如IgG、IgA、及IgM抗原結(jié)合片段，如Fab、F(ab′)2與Fv，與基因改造抗體分子，如嵌合性抗體、人源化抗體、scFv(單鏈抗體)、dAb(結(jié)構(gòu)域抗體；參見Ward,et.al.(1989)Nature,341:544)、及雙特異性抗體。本文用于治療的抗體可為單株或多株。“單株抗體”是指同質(zhì)抗體群，而“多株抗體”是指非同質(zhì)抗體群。這些術(shù)語不限制抗體的來源或其制造方式。在一實(shí)施例中，IL-17RB-中和用抗體為人源化抗體。人源化抗體包含人類免疫球蛋白(即接受者抗體)，其中對(duì)應(yīng)于抗原結(jié)合之區(qū)/殘基(如互補(bǔ)性決定區(qū)，具體而言為特異性-決定殘基)，取代為來自非-人類免疫球蛋白者(即提供者抗體)。辨識(shí)抗體重鏈與輕鏈各區(qū)/殘基之方法為技術(shù)上已知。參見，如Almagro,J.Mol.Recognit.17:132-143(2004)；以及Chothiaetal.,J.Mol.Biol.227:799-817(1987)。在某些情況下，接受者抗體框架區(qū)中之一或多殘基亦經(jīng)來自提供者抗體者取代。人源化抗體亦可包含并非來自接受者抗體亦非提供者抗體之殘基。這些殘基可包含入以進(jìn)一步微調(diào)并使抗體表現(xiàn)度優(yōu)化。在一些具體實(shí)施例中，IL-17RB-中合用抗體為小鼠單株抗體mAbD9、其抗原結(jié)合片段，或mAbD9之功能等效物。在一些具體實(shí)施例中，IL-17RB-中合用抗體為嵌合性單株抗體mAbcD9、其抗原結(jié)合片段，或mAbcD9之功能等效物。該mAbD9為小鼠單株抗體，由融合瘤細(xì)胞株制造。該mAbcD9為嵌合性單株抗體，由融合瘤細(xì)胞株制造?？贵w結(jié)合至D9與cD9之相同表位，落于本發(fā)明范疇中。表3.抗體D9與cD9之重鏈可變區(qū)(VH)、輕鏈可變區(qū)(VL)、VH互補(bǔ)性決定區(qū)(CDRs)與VL互補(bǔ)性決定區(qū)(CDRs)之胺基酸與核苷酸序列mAbD9或cD9之功能性等效物具與mAbD9或cD9相同之表位結(jié)合特異性，并具有至少20％(如30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、或更高)之IL-17RB中和活性，與mAbD9或cD9相較。在一些具體實(shí)施例中，mAbD9或cD9之功能性等效物含有相同之區(qū)/殘基，對(duì)應(yīng)于mAbD9或cD9之抗原結(jié)合位置，如CDRs或整個(gè)CDRs上相同之特異性-決定性殘基。對(duì)應(yīng)于抗原結(jié)合之區(qū)/殘基可由mAbD9之重鏈/輕鏈序列之胺基酸序列辨識(shí)出，以技術(shù)上以之之方法。參見如www.bioinf.org.uk/abs；,Almagro,J.Mol.Recognit.17:132-143(2004)；andChothiaetal.,J.Mol.Biol.227:799-817(1987)。mAbD9之功能性等效物可為經(jīng)基因改造之抗體，衍生自單株抗體(如嵌合性、單鏈或人源化)之一者。于動(dòng)物中制造單株與多株抗體與其片段之方法為技術(shù)上習(xí)知。參見如HarlowandLane,(1988)Antibodies:ALaboratoryManual,ColdSpringHarborLaboratory,NewYork。一般而言，制造對(duì)抗某一蛋白(如IL-17RB)之抗體、該蛋白或其片段可任意地耦合至一載體蛋白上，如KLH，可與一佐劑混合，并注入至宿主動(dòng)物中。由動(dòng)物所制造之抗體可藉由勝肽親和性層析法純化。一般使用的宿主動(dòng)物包括兔、小鼠、豚鼠和大鼠?？墒褂酶鞣N佐劑以增加免疫反應(yīng)，其取決于宿主物種，包括Freund's佐劑(完整與不完整)、礦物性凝膠如氫氧化鋁、CpG、界面活性物質(zhì)如溶血卵磷脂、多元醇、聚陰離子、勝肽、油乳劑、匙孔血藍(lán)蛋白和二硝基苯酚?？墒褂弥祟愑米魟┌˙CG(卡介苗)與短小棒狀桿菌。多株抗體存在于免疫化個(gè)體的血清中。單株抗體可以使用標(biāo)準(zhǔn)的融合瘤技術(shù)制備(參見如Kohleretal.(1975)Nature256,495；Kohleretal.(1976)Eur.J.Immunol.6,511；Kohleretal.(1976)EurJImmunol6,292；以及Hammerlingetal.(1981)MonoclonalAntibodiesandTCellHybridomas,Elsevier,N.Y.)。具體而言，單株抗體可經(jīng)由任何可產(chǎn)生抗體分子之技術(shù)獲得，如培養(yǎng)連續(xù)細(xì)胞株，如描述于Kohleretal.(1975)Nature256,495及美國專利號(hào)4,376,110；人類B細(xì)胞融合瘤技術(shù)(Kosboretal.(1983)ImmunolToday4,72；Coleetal.(1983)Proc.Natl.Acad.Sci.USA80,2026，以及EBV融合瘤技術(shù)(Coleetal.(1983)MonoclonalAntibodiesandCancerTherapy,AlanR.Liss,Inc.,pp.77-96)。此類抗體可以是任何免疫球蛋白族群，包括IgG、IgM、IgE、IgA、IgD、及其任何亞類。本文所述制造單株抗體之融合瘤可于體外或體內(nèi)培養(yǎng)。體內(nèi)產(chǎn)生高滴度單株抗體的的能力，使其可用于制造方法中。取得特異于IL-17RB之抗體后，其能夠中和IL-17RB能力可經(jīng)由常規(guī)方法來測(cè)定。剛提及之IL-17RB中和抗體之抗原結(jié)合片段，可經(jīng)由常規(guī)方法制備。舉例而言，F(xiàn)(ab′)2片段可經(jīng)由胃蛋白酶消化抗體分子而制造，且Fab片段可經(jīng)由還原F(ab′)2片段的雙硫鍵而產(chǎn)生。IL-17RB中和抗體也可以用來作為制備基因改造抗體的基礎(chǔ)，包括嵌合性抗體、人源化抗體、及單鏈抗體?？墒褂冒l(fā)展用于生產(chǎn)“嵌合性抗體”之技術(shù)。參見如Morrisonetal.(1984)Proc.Natl.Acad.Sci.USA81,6851；Neubergeretal.(1984)Nature312,604；以及Takedaetal.(1984)Nature314:452。嵌合性抗體系其中不同部分衍生自不同動(dòng)物物種者，例如具有衍生自鼠單株抗體可變區(qū)及人類免疫球蛋白恒定區(qū)者?？贵w亦可以本領(lǐng)域中習(xí)知之方法進(jìn)行人源化。舉例而言，具有所需結(jié)合特異性之單株抗體可人源化以販賣。完整人類抗體，如表現(xiàn)于基因轉(zhuǎn)殖動(dòng)物者，亦為本發(fā)明特征之一(參見如Greenetal.(1994)NatureGenetics7,13；以及美國專利號(hào)5,545,806及5,569,825)。此外，完整人類抗體可藉由以抗原(如IL-20R1)篩選人類抗體庫而獲得(如噬菌體展示法或酵母菌展示庫)。單鏈抗體可經(jīng)由重組技術(shù)制備，經(jīng)由將一個(gè)編碼重鏈可變區(qū)之核苷酸序列與編碼輕鏈可變區(qū)的核苷酸序列連結(jié)而得。較佳地，彈性連接符位于兩個(gè)可變區(qū)之間。此外，用于產(chǎn)生單鏈抗體之技術(shù)(美國專利號(hào)4,946,778及4,704,692)可用于產(chǎn)生特異于IL-17RB之噬菌體scFv庫及scFv殖株，可依據(jù)常規(guī)流程辨別。陽性殖株可進(jìn)行進(jìn)一步篩選以辨別該些抑制IL-17RB活性者。本發(fā)明抗體或其片段可具有任何各種生物或功能特性。在一些具體實(shí)施例中，這些抗體為IL-17RB蛋白特異性抗體，這表明其特異性定地結(jié)合到或優(yōu)先結(jié)合至細(xì)胞中之IL-17RB。在特定具體實(shí)施例中，本發(fā)明之抗體系拮抗劑抗體，其部分或完全阻斷或抑制其所特定或優(yōu)先結(jié)合之多勝肽或細(xì)胞之生物活性。在其他具體實(shí)施例中，本發(fā)明之抗體系生長(zhǎng)抑制性抗體，其部分或完全阻斷或抑制其所結(jié)合之感染細(xì)胞之生長(zhǎng)。在另一具體實(shí)施例中，本發(fā)明之抗體誘發(fā)細(xì)胞凋亡(apoptosis)。在又另一具體實(shí)施例中，本發(fā)明之抗體誘發(fā)或促進(jìn)抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)之細(xì)胞毒性或補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒性。經(jīng)確定之人類抗體可隨即進(jìn)一步確認(rèn)。舉例而言，可以表現(xiàn)之IL-17RB多勝肽之定點(diǎn)突變(site-directedmutagenesis)確認(rèn)IL-17RB多勝肽內(nèi)結(jié)合抗體所需或足夠之特定構(gòu)形表位。該些方法易于確認(rèn)人類抗體結(jié)合于細(xì)胞表面表現(xiàn)之任何蛋白。編碼抗體、其可變區(qū)、或其抗原結(jié)合片段之多核苷酸序列可選殖至表現(xiàn)載體以重組生產(chǎn)人類抗IL-17RB抗體。在一具體實(shí)施例中，此系伴隨由病患取得單核細(xì)胞，其血清中含有經(jīng)確認(rèn)之IL-17RB抗體；由單核細(xì)胞產(chǎn)生B細(xì)胞殖株；誘導(dǎo)B細(xì)胞變成生產(chǎn)抗體之血漿細(xì)胞；以及篩選血漿細(xì)胞產(chǎn)生之上清液，以確定是否其含有IL-17RB抗體。一旦確認(rèn)產(chǎn)生IL-17RB抗體之B細(xì)胞殖株，進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈鎖反應(yīng)(RT-PCR)，以選殖編碼IL-17RB抗體之可變區(qū)或其部分之DNA。該些序列系隨即選殖至適于重組生產(chǎn)人類IL-17RB抗體之表現(xiàn)載體。藉由測(cè)定重組型抗體結(jié)合表現(xiàn)IL-17RB多勝肽之細(xì)胞之能力，確認(rèn)結(jié)合特異性。經(jīng)分離之編碼本發(fā)明多勝肽之多核苷酸可選殖至表現(xiàn)載體以重組生產(chǎn)本發(fā)明之抗體及多勝肽，其系使用本領(lǐng)域及其中所述之習(xí)知程序?？贵w(或其片段)與IL-17RB多勝肽或IL-17RB表現(xiàn)細(xì)胞或組織之結(jié)合性質(zhì)，一般而言可以免疫檢測(cè)方法測(cè)定及評(píng)估，包括例如，免疫熒光為主之試驗(yàn)，如免疫組織化學(xué)法(IHC)及/或多勝肽熒光活化細(xì)胞分類法(fluorescence-activatedcellsorting；FACS)。反義核酸IL-17RB、DNA、或RNA之反義核酸，系能與IL-17RB基因形成堿基對(duì)之寡核苷酸(即同義鏈或反義鏈)，從而抑制其表現(xiàn)。較佳地，寡核苷酸具最大長(zhǎng)度150個(gè)(如100、80、60、或40個(gè))核苷酸。反義核酸可為雙股RNA(dsRNA)，其經(jīng)由RNA干擾而抑制IL-17RB之表現(xiàn)。RNA干擾(RNAi)系dsRNA導(dǎo)向傳訊RNA之同源性序列特異性降解之過程。于哺乳類細(xì)胞中，RNAi可由21個(gè)核苷酸雙股之小型干擾RNA(siRNA)驅(qū)動(dòng)而不活化宿主干擾素反應(yīng)。本文揭示方法所使用之dsRNA可為siRNA(含有二分離及互補(bǔ)之RNA鏈)或短發(fā)夾狀RNA(shRNA鏈形成緊之發(fā)夾狀結(jié)構(gòu))，兩者可基于標(biāo)靶基因之序列設(shè)計(jì)?；蛘?，其可為microRNA。較佳地，上述之反義核酸含有非天然存在核堿基、糖類、或共價(jià)核苷間鍵聯(lián)(骨架)。此類經(jīng)修飾之寡核苷酸含有所需性質(zhì)，如增進(jìn)之細(xì)胞攝取、改進(jìn)之標(biāo)靶核酸親和性、及增加之體內(nèi)穩(wěn)定性。于一實(shí)例中，反義核酸具有經(jīng)修飾之骨架，包括該些保留磷原子者(參見例如，美國專利號(hào)3,687,808；4,469,863；5,321,131；5,399,676；以及5,625,050)及該些不具磷原子者(參見例如，美國專利號(hào)5,034,506；5,166,315；以及5,792,608)。含磷之經(jīng)修飾骨架之實(shí)例包括但不局限于，硫代磷酸酯(phosphorothioates)、手性硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、磷酸三酯、胺基烷基磷酸三酯、甲基及其他烷基膦酸酯(phosphonates)，包括3′-亞烷基膦酸酯、5′-亞烷基膦酸酯、及手性膦酸酯、膦酯(phosphinates)、磷酰胺酯(phosphoramidates)，包括3′-胺基磷酰胺酯及胺基烷基磷酰胺酯、硫酮基磷酰胺酯、硫酮基烷基膦酸酯、硫酮基烷基磷酸三酯、具3′-5′鍵聯(lián)或2′-5′鍵聯(lián)之硒基磷酸酯(selenophosphates)及硼烷基磷酸酯。此類骨架亦包括該些具反向極性(invertedpolarity)者，亦即3′至3′、5′至5′、或2′至2′鍵聯(lián)。不包括磷原子之經(jīng)修飾骨架系由短鏈烷基或環(huán)烷基核苷間鍵聯(lián)、混合之雜原子及烷基或環(huán)烷基核苷間鍵聯(lián)、或一或多個(gè)短鏈雜原子或雜環(huán)核苷間鍵聯(lián)形成。此類骨架包括該些具嗎啉基(morpholino)鍵聯(lián)者(部分由核苷之糖部分形成)；硅氧烷骨架；硫化物、亞砜、及砜骨架；甲乙酰(formacetyl)及硫甲乙酰骨架；亞甲基甲乙酰及硫甲乙酰骨架；核糖乙?；?riboacetyl)骨架；含烯烴骨架；胺磺酸(sulfamate)骨架；亞甲基亞胺基及亞甲基肼基(hydrazino)骨架；磺酸及磺酰胺骨架；酰胺骨架；以及其他具混合之N、O、S、及CH2組分部分者。在另一實(shí)例中，本文揭示方法所使用之反義核酸包括一或多個(gè)經(jīng)取代之糖部分。此類經(jīng)取代之糖部分可包括下列2′位置經(jīng)取代之基團(tuán)之一者：OH；F；O-烷基、S-烷基、N-烷基、O-烯基、S-烯基、N-烯基；O-炔基、S-炔基、N-炔基、及O-烷基-O-烷基。在該些基團(tuán)中，烷基、烯基、及炔基可為經(jīng)取代或未經(jīng)取代之C1至C10烷基或C2至C10烯基與炔基。其亦可包括于其2′位置之雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷芳基、胺基烷基胺基、聚烷基胺基、經(jīng)取代之硅基、RNA切割基團(tuán)、報(bào)導(dǎo)子基團(tuán)、嵌入子(intercalator)、改進(jìn)寡核苷酸藥物動(dòng)力學(xué)性質(zhì)(pharmacokineticproperties)之基團(tuán)、或改進(jìn)寡核苷酸藥效動(dòng)力學(xué)性質(zhì)(pharmacodynamicproperties)之基團(tuán)。較佳之經(jīng)取代之糖部分包括該些具2′-甲氧基乙氧基、2′-二甲基胺基氧基乙氧基、及2′-二甲基胺基乙氧基乙氧基。參見Martinetal.,Helv.Chim.Acta,1995,78,486-504。在又另一實(shí)例中，反義核酸包括一或多個(gè)經(jīng)修飾之原始核堿基(亦即，腺嘌呤、鳥嘌呤、胸腺嘧啶、胞嘧啶、及尿嘧啶)。經(jīng)修飾之核堿基包括描述于美國專利號(hào)3,687,808、TheConciseEncyclopediaOfPolymerScienceAndEngineering,pages858-859、Kroschwitz,J.I.,ed.JohnWiley&Sons,1990、Englischetal.,AngewandteChemie,InternationalEdition,1991,30,613、及Sanghvi,Y.S.,Chapter15、AntisenseResearchandApplications,pages289-302,CRCPress,1993之彼等。特定之該些核堿基系具體而言適于增加反義寡核苷酸與其標(biāo)靶核酸之結(jié)合親和性。彼等包括5-經(jīng)取代之嘧啶、6-氮雜嘧啶、及N-2、N-6、及O-6經(jīng)取代之嘌呤(如2-胺基丙基腺嘌呤、5-丙炔基尿嘧啶、及5-丙炔基胞嘧啶)。參見Sanghvi,etal.,eds.,AntisenseResearchandApplications,CRCPress,BocaRaton,1993,pp.276-278)。反義核酸之任一者可由本領(lǐng)域之習(xí)知方法合成。參見例如，Caruthersetal.,1992,MethodsinEnzymology211,3-19、Wincottetal.,1995,NucleicAcidsRes.23,2677-2684、Wincottetal.,1997,MethodsMol.Bio.74,59、Brennanetal.,1998,BiotechnolBioeng.,61,33-45、及Brennan,美國專利號(hào)6,001,311。其亦可轉(zhuǎn)錄自表現(xiàn)載體及使用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)分離。當(dāng)靶向胸苷酸合成酶(thymidylatesynthase)之mRNA部位時(shí)，能抑制本發(fā)明之IL-17B或IL-17RB表現(xiàn)之短發(fā)夾狀RNA(以下簡(jiǎn)稱為“shRNA”)呈現(xiàn)IL-17B或IL-17RB特異性RNAi作用。據(jù)此，短發(fā)夾狀RNA可明顯抑制IL-17B或IL-17RB表現(xiàn)。因此，當(dāng)本發(fā)明之RNAi分子“靶向mRNA部位”時(shí)，此意指下列詳述之shRNA之反義股可于嚴(yán)格條件下雜合至標(biāo)靶mRNA部位。嚴(yán)格條件可根據(jù)核酸熔化溫度(Tm)決定，其中雜合體系根據(jù)常規(guī)方法形成。舉例而言，容許維持雜合之清洗條件包含例如，一般而言“1xSSC，0.1％SDS，37℃”，更嚴(yán)格地，“0.5xSSC，0.1％SDS，42℃”、及又更嚴(yán)格地“0.1xSSC，0.1％SDS，65℃”。本發(fā)明之shRNA包含具編碼TS之ORF之核苷酸序列或部分等同于其之核苷酸序列之同義股，以及于嚴(yán)格條件下與同義股雜合之反義股。因此，術(shù)語“ORF之核苷酸序列或部分等同于其之核苷酸序列”意指核苷酸序列之取得系于ORF之核苷酸序列或部分等同于其之核苷酸序列中以尿嘧啶取代胸腺嘧啶。同義股系由15至25個(gè)核苷酸且較佳地19個(gè)核苷酸組成。同義股之核苷酸序列系理想地等同于編碼IL-17RB或IL-17B之ORF之核苷酸序列。然而，其可實(shí)質(zhì)上為相同(及同源性)序列。特定而言，同義股之核苷酸序列可包含包括取代、刪除、插入、及/或添加一或復(fù)數(shù)個(gè)(即1至3)核苷酸，較佳地1至2個(gè)核苷酸，及更佳地1個(gè)核苷酸，之ORF之核苷酸序列。反義股具有可于嚴(yán)格條件下與同義股雜合之核苷酸序列。反義股可包含誤配(mismatch)，包括取代、刪除、插入、及/或添加1至3個(gè)核苷酸，較佳地1或2個(gè)核苷酸，及更佳地1個(gè)核苷酸，只要其可于嚴(yán)格條件下雜合。較佳地，反義股由核苷酸序列組成，較佳地系互補(bǔ)于同義股。同義股及反義股核苷酸序列之選取可基于習(xí)知之編碼IL-17B或IL-17RB之核苷酸序列(表1及2)。有許多習(xí)知之用于選取此類核苷酸序列之方法。舉例而言，可使用siRNADesignSupportSystem(TakaraBioInc.)。同義股與反義股系經(jīng)由連接符部分連接。連接符部分形成圈環(huán)，以使所得之股折迭。據(jù)此，反義股與同義股彼此雜合，使得形成雙股。此含于shRNA分子之連接符部分系未具體局限，因此其可為多核苷酸連接符或非多核苷酸連接符，只要其連接同義股與反義股以形成莖環(huán)結(jié)構(gòu)(stemloopstructure)。較佳地，多核苷酸連接符亦同樣由2至22個(gè)本領(lǐng)域習(xí)知之核苷酸組成。其具體實(shí)例顯示于表3。本發(fā)明之shRNA可具懸垂(overhang)，其3'端包含至少2個(gè)核苷酸。舉例而言，此類懸垂由含1至5個(gè)核苷酸，較佳地1至3個(gè)核苷酸，及更佳地1或2個(gè)核苷酸之序列組成。序列之實(shí)例包括TTT、UU、及TT。較佳地，系使用UU。根據(jù)本發(fā)明，shRNA之較佳實(shí)例系由SEQIDNOS:5-9所示之核苷酸序列組成之單股RNA，如下表4所示。醫(yī)藥組合物及治療本發(fā)明進(jìn)一步包括醫(yī)藥配方，其包括本發(fā)明之多勝肽、抗體、或調(diào)節(jié)劑，其系于所需程度之純度，以及醫(yī)藥上可接受載體、賦形劑、或安定劑(Remingion's醫(yī)藥Sciences16thedition,Osol,A.Ed.(1980))。在特定具體實(shí)施例中，醫(yī)藥配方系經(jīng)制備以增進(jìn)多勝肽或抗體于保存期間之安定性，例如，凍干配方或水溶液形式。所采用之可接受之載體、賦形劑、或安定劑之劑量及濃度系對(duì)接受者無毒，且包括例如，緩沖液如醋酸鹽、Tris、磷酸鹽、檸檬酸鹽、及其他有機(jī)酸；抗氧化劑包括抗壞血酸及甲硫胺酸；防腐劑(如十八烷基二甲基芐基氯化銨；六羥季銨氯化物；芐烷銨氯化物(benzalkoniumchloride)、本索寧氯化物(benzethoniumchloride)；苯酚、丁基或芐基醇；對(duì)羥苯甲酸烷酯(alkylparabens)，如對(duì)羥苯甲酸甲酯或?qū)αu苯甲酸乙酯；兒茶酚(catechol)；間苯二酚(resorcinol)；環(huán)己醇；3-戊醇；以及間甲酚(m-cresol))；低分子量(小于約10個(gè)殘基)多勝肽；蛋白質(zhì)，如血清白蛋白、明膠、或免疫球蛋白；親水性聚合物如聚乙烯基吡咯烷酮；胺基酸如甘胺酸、麩酰胺酸、天冬酰胺酸、組胺酸、精胺酸、或離胺酸；單醣、雙醣、及其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖、或糊精；螯合劑如EDTA；張力劑(tonicifiers)如海藻糖及氯化鈉；糖類如蔗糖、甘露醇、海藻糖、或山梨糖醇；界面活性劑如聚山梨糖醇酯(polysorbate)；成鹽相對(duì)離子如鈉；金屬復(fù)合物(如Zn-蛋白質(zhì)復(fù)合物)；及/或非離子性界面活性劑如TWEENTM、PLURONICSTM、或聚乙二醇(PEG)。在特定具體實(shí)施例中，治療配方較佳包含多勝肽或抗體，其濃度介于5-200mg/ml之間，較佳地介于10-100mg/ml之間。欲實(shí)施本文揭示之治療，一有效量之前述醫(yī)藥組合物可投予至需經(jīng)由適當(dāng)途徑治療之個(gè)體(如人類)。需要此類治療之人類個(gè)體可為人類病患，其患有、具風(fēng)險(xiǎn)、或疑似患有與IL-17RB或IL-17B介導(dǎo)之傳訊路徑相關(guān)聯(lián)之失調(diào)。此類病患可由常規(guī)醫(yī)學(xué)檢查確認(rèn)。本文使用之“一有效量”意指賦予個(gè)體治療效果所需之各活性試劑之量，其系單獨(dú)或結(jié)合一或多個(gè)其他活性試劑使用。有效量之變化，如同本領(lǐng)域技術(shù)人員之認(rèn)知，系取決于欲治療之特定病況、病況嚴(yán)重度、個(gè)別病患參數(shù)，包括年齡、身體條件、體型、性別、及體重、治療時(shí)程、同時(shí)治療之性質(zhì)(若有)、特殊投予途徑、及保健醫(yī)師之知識(shí)及經(jīng)驗(yàn)范圍內(nèi)之其他因素。該些因素系本領(lǐng)域普通技術(shù)人員習(xí)知，且毋須超出常規(guī)之實(shí)驗(yàn)即可理解。一般而言較佳為，使用個(gè)別組分或其結(jié)合物之最大劑量，亦即，根據(jù)合理醫(yī)學(xué)判斷之最高安全劑量。然而，本領(lǐng)域之普通技術(shù)人員應(yīng)理解到，病患可能基于醫(yī)學(xué)原因、心理原因、或幾乎任何其他原因堅(jiān)持較低劑量或耐受劑量。在一些具體實(shí)施例中，抑制IL-17RB或IL-17B活性之試劑系投予至有治療需求之個(gè)體，其治療量系足以將IL-17RB或IL-17B介導(dǎo)之傳訊量減少至至少20％(如30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、或以上)?？捎糜谕队栳t(yī)藥組合物至個(gè)體之常規(guī)方法，其系醫(yī)學(xué)領(lǐng)域之普通技術(shù)人員習(xí)知，取決于欲治療之疾病種類或發(fā)病部位。此組合物亦可經(jīng)由其他常規(guī)途徑投予，例如，口服、非經(jīng)口、藉吸入噴霧、局部、直腸、經(jīng)鼻、口腔、陰道、或經(jīng)由植入儲(chǔ)器投予。本文使用之“非經(jīng)口”乙詞包括皮下、皮內(nèi)、靜脈、肌內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、滑膜內(nèi)、胸骨內(nèi)、鞘內(nèi)、病灶內(nèi)、及顱內(nèi)注射或輸注技術(shù)。此外，可經(jīng)由注射貯庫投予途徑如使用1-、3-、或6個(gè)月注射貯庫或生物可降解材料及方法投予至個(gè)體?？勺⑸浣M合物可包含各種載體，如植物油、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺、乳酸乙酯、碳酸乙酯、肉荳蔻酸異丙酯(isopropylmyristate)、乙醇、多元醇(甘油、丙二醇、液態(tài)聚乙二醇、及其類似物)。針對(duì)靜脈注射，可藉由滴注法(dripmethod)投予水溶性抗體，其中系注入含抗體及生理上可接受賦形劑之醫(yī)藥配方。生理上可接受之賦形劑可包括例如，5％葡萄糖、0.9％鹽液、林格氏液(Ringer'ssolution)、或其他適用之賦形劑。肌內(nèi)注射制備物，如抗體之適用可溶性鹽類形式之無菌配方，可溶解于醫(yī)藥賦形劑如注射用水、0.9％鹽液、或5％葡萄糖液，并投予。當(dāng)使用IL-17RB或IL-17B之反義核酸時(shí)，核酸或表現(xiàn)其之載體可以一些方法輸送至個(gè)體，該方法如Akhtaretal.,1992,TrendsCellBio.2,139之描述。舉例而言，其可以微脂體、水凝膠、環(huán)糊精、生物可降解奈米膠囊、或生物黏附性微球?qū)爰?xì)胞?；蛘?，核酸或載體可藉直接注射或使用輸注泵局部輸送。其他方式包括采用各種傳輸及載送系統(tǒng)，例如，藉由使用共軛體及生物可降解聚合物。為方便輸送，IL-17RB或IL-17B抑制劑之任一者可共軛結(jié)合伴護(hù)(chaperon)試劑。本文使用之“共軛結(jié)合”意指二實(shí)體相結(jié)合，較佳地具足夠親和性，以實(shí)現(xiàn)二實(shí)體間相結(jié)合之治療效益。共軛結(jié)合包括共價(jià)或非共價(jià)結(jié)合，以及其他形式之結(jié)合，如留滯一實(shí)體或于他者之內(nèi)、或留滯其一或兩實(shí)體或于第三實(shí)體之內(nèi)(如微胞)。伴護(hù)試劑可為天然存在之物質(zhì)，如蛋白質(zhì)(如人類血清白蛋白、低密度脂蛋白、或球蛋白)、碳水化合物(如葡聚醣、支鏈淀粉(pullulan)、幾丁質(zhì)、幾丁聚醣(chitosan)、菊糖(inulin)、環(huán)糊精、或透明質(zhì)酸)、或脂質(zhì)。其亦可為重組型或合成之分子，如合成之聚合物，如合成之聚胺基酸。聚胺基酸之實(shí)例包括聚離胺酸(PLL)、聚L-天門冬胺酸、聚L-麩胺酸、苯乙烯-馬來酸酐共聚物、聚(L-乳酸交酯-共-乙交酯)共聚物、二乙烯基醚-馬來酸酐共聚物、N-(2-羥丙基)甲基丙烯酰胺共聚物(HMPA)、聚乙二醇(PEG)、聚乙烯醇(PVA)、聚胺甲酸酯、聚(2-乙基丙烯酸)、N-異丙基丙烯酰胺聚合物、及聚膦嗪(polyphosphazine)。在一實(shí)例中，伴護(hù)試劑系微胞、微脂體、奈米顆粒、或微球，其中寡核苷酸/干擾RNA系經(jīng)包囊。制備此類微胞、微脂體、奈米顆粒、或微球之方法系本領(lǐng)域習(xí)知。參見例如，美國專利號(hào)5,108,921；5,354,844；5,416,016；以及5,527,5285。在另一實(shí)例中，伴護(hù)試劑系作為結(jié)合融合或縮合劑之一或多者之基質(zhì)。融合試劑系反應(yīng)于局部pH。舉例而言，于胞內(nèi)體(endosome)內(nèi)遭遇pH時(shí)，可導(dǎo)致其中間物環(huán)境之物理性變化，如滲透性改變，其破壞或增加胞內(nèi)體膜之滲透性，從而有助于釋放反義寡核苷酸至宿主細(xì)胞之細(xì)胞質(zhì)。較佳之融合試劑會(huì)改變電荷，例如，于低于生理范圍之pH時(shí)(如于pH4.5-6.5)變得質(zhì)子化。融合試劑可為含胺基之分子，其于曝露至特定pH范圍時(shí)能經(jīng)受電荷變化(如質(zhì)子化)。此類融合試劑包括具聚胺基鏈之聚合物(如聚乙烯亞胺)及膜破壞劑(如蜂毒肽(mellittin))。其他實(shí)例包括具組胺酸、聚咪唑、聚吡啶、聚丙烯亞胺、及聚縮醛物質(zhì)(如陽離子性聚縮醛)?？s合劑與反義寡核苷酸交互作用，使其縮合(如減少寡核苷酸尺寸)，從而保護(hù)其免于降解。較佳地，縮合劑包括一部分(如帶電部分)，其系經(jīng)由離子性交互作用與寡核苷酸作用。縮合劑之實(shí)例包括聚離胺酸、精胺(spermine)、亞精胺(spermidine)、聚胺或其季鹽、偽勝肽-聚胺(pseudopeptide-polyamine)、擬勝肽聚胺(peptidomimeticpolyamine)、樹狀體聚胺、精胺酸、脒(amidine)、魚精蛋白(protamine)、陽離子脂質(zhì)、陽離子卟啉(cationicporphyrin)、及α-螺旋勝肽。無需進(jìn)一步詳盡說明，據(jù)信本領(lǐng)域之技術(shù)人員可根據(jù)上述，最大限度利用本發(fā)明。因此，下列特定具體實(shí)施例應(yīng)理解為僅具說明性，且不以任何方式局限本揭露之其余部分?；诒疚闹畢⒖寄康幕蛑黝}，本文引用之所有出版品在此并入本案以作為參考數(shù)據(jù)。經(jīng)驗(yàn)上之考慮，如半衰期，通常將有助于決定劑量。舉例而言，兼容于人類免疫系統(tǒng)之抗體，如人源化抗體或完整人類抗體，可用于延長(zhǎng)抗體半衰期且防止抗體受宿主免疫系統(tǒng)攻擊。于治療過程中可決定及調(diào)整投予頻率，且一般而言但非必要，根據(jù)癌癥之治療及/或抑制及/或改善及/或推遲。或者，本文所述抗體之持續(xù)不斷釋放配方可能適用。用于達(dá)成持續(xù)釋放之各種配方及裝置系本領(lǐng)域習(xí)知。在一實(shí)例中，針對(duì)已投予一或多次抗體之個(gè)體，本文所述之抗體劑量可憑經(jīng)驗(yàn)決定。個(gè)體可給予增量之抗體。欲評(píng)估抗體功效，可根據(jù)常規(guī)實(shí)施追蹤疾病(如癌癥)指標(biāo)。一般而言，欲投予本文所述抗體之任一者，初始候選劑量可為約2mg/kg。就本發(fā)明之目的，典型之每日劑量范圍可為約0.1μg/kg至3μg/kg、至30μg/kg、至300μg/kg、至3mg/kg、至30mg/kg、至100mg/kg或以上之任一者，取決于前述因素。就重復(fù)投予數(shù)天或更久而言，取決于病況，治療系持續(xù)直到所需之癥狀抑制出現(xiàn)或直到達(dá)足夠之治療濃度以緩和癌癥或其癥狀。示例性投劑療法包含投予一初始劑量約2mg/kg，接著每周維持劑量約1mg/kg之抗體，或接著每隔一周維持劑量約1mg/kg。然而，可使用其他劑量療法，取決于臨床醫(yī)師期望達(dá)成之藥代動(dòng)力學(xué)衰減輪廓。舉例而言，考慮每周一至四次之投劑。在一些具體實(shí)施例中，可使用之劑量范圍約3μg/mg至約2mg/kg(如約3μg/mg、約10μg/mg、約30μg/mg、約100μg/mg、約300μg/mg、約1mg/kg、及約2mg/kg)。在一些具體實(shí)施例中，投劑頻率系每周、每2周、每4周、每5周、每6周、每7周、每8周、每9周、或每10周一次；或者每月、每2個(gè)月、或每3個(gè)月、或更久一次。此治療之進(jìn)程系易于由常規(guī)技術(shù)及試驗(yàn)監(jiān)測(cè)。劑量療法(包括使用之抗體)可隨時(shí)間改變。就本發(fā)明之目的，本文所述抗體之適用劑量將取決于采用之特定抗體(或其組合物)、癌癥之類型及嚴(yán)重度、抗體之投予是否用于預(yù)防或治療目的、先前之治療、病患之臨床病史及對(duì)抗體之反應(yīng)、及主治醫(yī)師之裁量。本文所述抗體之投予基本上可持續(xù)一段預(yù)選時(shí)間或可為一系列之間隔劑量，如罹患癌癥之前、期間、或之后。本文使用之“治療”乙詞是指施加或投予含有一或多個(gè)活性試劑之組合物至個(gè)體，其具癌癥、癌癥癥狀、或癌癥傾向，目的在于治療、治愈、緩解、解除、改變、矯正、緩解、改進(jìn)、或影響癌癥、癌癥相關(guān)癥狀、或癌癥傾向。緩解癌癥包括推遲癌癥之發(fā)展或進(jìn)程，或降低癌癥嚴(yán)重度。緩解癌癥并不一定需要治療結(jié)果。本文使用之“推遲”癌癥發(fā)展是指推遲、阻礙、減緩、推遲、穩(wěn)定、及/或推遲癌癥進(jìn)展。此推遲可為改變時(shí)間長(zhǎng)度，取決于癌癥病史及/或欲治療之個(gè)體。當(dāng)與其他方法相較時(shí)，“推遲”或緩解癌癥發(fā)展、或推遲癌癥發(fā)生之方法系于一給定時(shí)間內(nèi)降低一或多個(gè)癌癥癥狀發(fā)展機(jī)率(風(fēng)險(xiǎn))及/或于一給定時(shí)間內(nèi)減低癥狀程度之方法。此模擬較典型上基于臨床研究，其系使用多個(gè)足以取得統(tǒng)計(jì)上顯著結(jié)果之個(gè)體數(shù)目。癌癥之“發(fā)展”或“進(jìn)展”意指癌癥之最初表現(xiàn)及/或后續(xù)進(jìn)展。癌癥之發(fā)展可以本領(lǐng)域習(xí)知之標(biāo)準(zhǔn)臨床技術(shù)檢測(cè)及評(píng)估。然而，發(fā)展亦指無法檢測(cè)之進(jìn)展。就本發(fā)明之目的，發(fā)展或進(jìn)展意指癥狀之生物過程。“發(fā)展”包括發(fā)生、復(fù)發(fā)、及開始。本文使用之癌癥之“開始”或“出現(xiàn)”包括初發(fā)及/或復(fù)發(fā)。醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中普通技術(shù)人員習(xí)知之常規(guī)方法可用于投予醫(yī)藥組合物至個(gè)體，其系取決于欲治療之疾病種類或發(fā)病部位。此組合物亦可經(jīng)由其他常規(guī)途徑投予，如口服、非經(jīng)口、藉吸入噴霧、局部、直腸、經(jīng)鼻、口腔、陰道、或經(jīng)由植入儲(chǔ)器投予。本文使用之“非經(jīng)口”乙詞包括皮下、皮內(nèi)、靜脈、肌內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、滑膜內(nèi)、胸骨內(nèi)、鞘內(nèi)、病灶內(nèi)、及顱內(nèi)注射或輸注技術(shù)。此外，可經(jīng)由注射貯庫投予途徑如使用1-、3-、或6個(gè)月注射貯庫或生物可降解材料及方法投予至個(gè)體?？勺⑸浣M合物可包含各種載體，如植物油、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺、乳酸乙酯、碳酸乙酯、肉荳蔻酸異丙酯、乙醇、多元醇(甘油、丙二醇、液態(tài)聚乙二醇、及其類似物)。針對(duì)靜脈注射，可藉由滴注法投予水溶性抗體，其中系注入含抗體及生理上可接受賦形劑之醫(yī)藥配方。生理上可接受之賦形劑可包括例如，5％葡萄糖、0.9％鹽液、林格氏液、或其他適用之賦形劑。肌內(nèi)注射制備物，如抗體之適用可溶性鹽類形式之無菌配方，可溶解于醫(yī)藥賦形劑如注射用水、0.9％鹽液、或5％葡萄糖液，并投予。乳癌本發(fā)明證實(shí)，經(jīng)放大之IL-17RB及/或IL-17B(IL-17RB/IL-17B)自泌傳訊促進(jìn)乳癌細(xì)胞之腫瘤形成。IL-17RB/IL-17B轉(zhuǎn)導(dǎo)傳訊通過TRAF6以活化NF-κB，其反之向上調(diào)節(jié)抗細(xì)胞凋亡基因Bcl-2之表現(xiàn)，導(dǎo)致依托泊苷(etoposide)抗性。以IL-17RB或IL-17B抗體阻斷此路徑可降低乳癌致腫瘤性(圖3E)。該些結(jié)果顯示，IL-17RB/IL-17B傳訊于乳腺腫瘤形成具重要角色，且可作為表現(xiàn)IL-17RB之乳癌之潛在治療標(biāo)靶。介白素習(xí)知經(jīng)由引發(fā)發(fā)炎性微環(huán)境而促進(jìn)惡性細(xì)胞轉(zhuǎn)形及轉(zhuǎn)移。IL-17(IL-17A)習(xí)知經(jīng)由在腫瘤部位及髓源抑制細(xì)胞(myeloid-derivedsuppressorcells)誘發(fā)適當(dāng)微環(huán)境而促進(jìn)腫瘤發(fā)展。小鼠喪失IL-17A系始終與減少之Stat3調(diào)節(jié)之細(xì)胞激素表現(xiàn)及減少之腫瘤形成有關(guān)。有趣的是，于鼠科結(jié)腸癌細(xì)胞源腫瘤中，IL-17A亦顯示減少腫瘤生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移28，可能是經(jīng)由促進(jìn)腫瘤免疫之細(xì)胞毒性T細(xì)胞活化2，顯示配體-受體之交互作用可能以時(shí)間及空間方式發(fā)揮不同角色。另一方面，IL-17B似乎可促進(jìn)乳腺腫瘤形成。盡管IL-17B之表現(xiàn)，其系IL-17RB之同源配體，于正常及癌性乳腺上皮細(xì)胞系低，過度表現(xiàn)IL-17B受體之癌細(xì)胞可通過IL-17RB/IL-17B自泌傳訊途徑獲得其生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)。IL-17配體與受體間之交互作用系糾結(jié)。原因在于，IL-17RB之下游傳訊極大地取決于配體及其作用蛋白。IL-17RB可藉與IL-17RA異二聚體化(heterodimerization)傳遞IL-17E傳訊。IL-17E與IL-17RB/IL-17RA之結(jié)合可誘發(fā)乳癌細(xì)胞之細(xì)胞凋亡。反之，IL-17RB/IL-17B經(jīng)由招募TRAF6而轉(zhuǎn)導(dǎo)原存活(pro-survival)傳訊以活化NF-κB及經(jīng)由向上調(diào)節(jié)Bcl-2而誘發(fā)抗細(xì)胞凋亡過程。然而，IL-17B以同型二聚體形式結(jié)合至IL-17RB以傳遞細(xì)胞內(nèi)部傳訊之詳盡分子機(jī)制仍待厘清。正常乳腺上皮細(xì)胞之IL-17RB表現(xiàn)幾乎無法檢測(cè)。此膜受體之向上調(diào)節(jié)發(fā)生于約20％之乳癌(圖4)。利用特別檢測(cè)IL-17RB1之Q-PCR分析及膜結(jié)合型IL-17RB之IHC染色，發(fā)明人之?dāng)?shù)據(jù)顯示，乳癌之IL-17RB1表現(xiàn)與預(yù)后差之間具顯著相關(guān)。該些觀察系與先前之發(fā)現(xiàn)一致，亦即IL-17RB于鼠科白血病細(xì)胞過度表現(xiàn)且可能為致癌性。然而，Ma等人報(bào)導(dǎo)，HOXB13/IL-17RB之表現(xiàn)比例于早期階段ER+/淋巴結(jié)乳癌接受輔助性他莫昔芬(tamoxifen)單一治療后具較佳之臨床結(jié)果，代表IL-17RB之過度表現(xiàn)本文類乳癌可為良好預(yù)后標(biāo)記。盡管此差異之確切原因仍待厘清，應(yīng)注意到，Ma等人檢測(cè)之IL-17RB異型體系總IL-17RB異型體，包括膜結(jié)合型及分泌型，而發(fā)明人之?dāng)?shù)據(jù)指出，僅膜結(jié)合型IL-17RB異型體1促進(jìn)乳腺腫瘤形成。重要的是，IL-17RB之表現(xiàn)系與HER2放大高度相關(guān)，且具IL-17RB與HER2過度表現(xiàn)之病患具有最短存活率(圖5)。HER2系過度表現(xiàn)于20～25％之乳癌，且與預(yù)后差及抗藥性相關(guān)。HER2系EGFR之酪胺酸激酶(tyrosinekinase)，其系協(xié)同其他受體，及傳遞外來傳訊，以啟動(dòng)許多涉及增生及存活之基因。以單株抗體(如曲妥珠單抗)靶向HER2可成功改進(jìn)預(yù)后；然而，常發(fā)生該治療之抗性。于發(fā)明人之發(fā)現(xiàn)中，曲妥珠單抗抗性細(xì)胞之IL-17RB消耗明顯降低腫瘤形成活性，使得IL-17RB成為HER2陽性乳癌，具體而言該些曲妥珠單抗抗性者，之潛在治療標(biāo)靶。胰腺癌本發(fā)明證實(shí)，IL-17B/RB之自泌/旁泌傳訊于胰腺癌轉(zhuǎn)移具基本角色。重要的是，以特定辨識(shí)原始型IL-17RB之單株抗體處理，可成功抑制表現(xiàn)IL-17RB之胰腺癌轉(zhuǎn)移，且明顯延長(zhǎng)動(dòng)物存活率。于許多癌癥，包括胰腺癌，癌細(xì)胞趨化介素之向上調(diào)節(jié)歸因于持續(xù)活化之NF-κB(FarrowandEvers,2002；RayetandGelinas,1999)。除了趨化介素以外，發(fā)現(xiàn)NF-κB之許多標(biāo)靶基因涉及促進(jìn)細(xì)胞周期活性、血管生成(angiogenesis)、抗細(xì)胞凋亡、轉(zhuǎn)移、及腫瘤進(jìn)展(Baldwin,2001；Karin,2006；TakandFirestein,2001；YamamotoandGaynor,2001)。于發(fā)明人之發(fā)現(xiàn)中，IL-17B/RB傳訊驅(qū)使NF-κB之轉(zhuǎn)錄活性及三個(gè)致癌性轉(zhuǎn)錄因子ATF-2、AML-1、及AP-1，以經(jīng)由ERK1/2路徑協(xié)同誘發(fā)多個(gè)趨化介素表現(xiàn)，將傳訊置于胰腺癌轉(zhuǎn)移之多方面調(diào)控網(wǎng)絡(luò)之關(guān)鍵位置。IL-17RB之表現(xiàn)系獨(dú)立于本文所述之整個(gè)自泌環(huán)路回饋調(diào)節(jié)(loopfeedbackregulation)。IL-17RB之向上調(diào)節(jié)有助于主要轉(zhuǎn)移表型。因此，IL-17RB之量似乎為此整個(gè)自泌回路之關(guān)鍵轉(zhuǎn)換子(switcher)。IL-17RB之向上調(diào)節(jié)可能肇因于基因及/或表基因事件。由于IL-17RB之基因放大未于該些過度表現(xiàn)之癌細(xì)胞檢測(cè)出(http://www.oncomine.org)，表基因因子及其他轉(zhuǎn)譯后機(jī)制可能為促使其向上調(diào)節(jié)之主因。此可能性已在嚴(yán)謹(jǐn)調(diào)查中。有趣的是，數(shù)個(gè)第I型受體酪胺酸激酶家族蛋白(HER1、2、及3)之過度表現(xiàn)顯示明顯與乳癌惡性程度相關(guān)(Wittonetal.,2003)。其他IL-17受體蛋白之向上調(diào)節(jié)是否亦可能與胰腺癌惡性程度相關(guān)仍待厘清。胰腺癌于轉(zhuǎn)移前僅可于早期階段治愈，且僅手術(shù)能完全移除腫瘤。不幸的是，由于缺乏早期癥狀及胰臟腫瘤之侵襲性本質(zhì)，胰腺癌病患常于晚期才診斷出，而轉(zhuǎn)移已發(fā)生。該些病患無法手術(shù)治療，因此常進(jìn)行化療以盡可能延長(zhǎng)壽命。最常用之化療及輔助試劑包括吉西他濱(gemcitabine)、厄洛替尼(erlotinib)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、菊白葉酸(leucovorin)、伊立替康(irinotecan)、及奧沙利鉑(oxaliplatin)(FOLFIRINOX)(NationalCancerInstituteU.S.A.，http://www.cancer.gov/cancertopics/pdq/treatment/pancreatic/HealthProfessional，12032013)。其中，吉西他濱已經(jīng)核準(zhǔn)為胰腺癌之第一線化療試劑；但其反應(yīng)率低(10-11％)且治療對(duì)存活率僅具邊際效果(Casperetal.,1994；Rothenbergetal.,1996)。許多臨床試驗(yàn)亦探討結(jié)合療法，以達(dá)到最佳臨床結(jié)果。然而，相較于單獨(dú)之吉西他濱，無單一試劑或結(jié)合試劑證實(shí)有較大之臨床效益或顯著延長(zhǎng)之中位數(shù)存活率(Berlinetal.,2002；Burrisetal.,1997；Coluccietal.,2002；Louvetetal.,2002；McKennaandEatock,2003；Oettleetal.,2000；Philipetal.,2001；Renietal.,2001；Ryanetal.,2002)。系因該些化療試劑主要靶向快速增生之細(xì)胞，而非阻斷轉(zhuǎn)移，特定地靶向轉(zhuǎn)移之新穎佐劑可能為有效之胰腺癌治療之根本。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，IL-17RB于胰腺癌惡性程度(尤其是轉(zhuǎn)移)扮演關(guān)鍵角色，且以D9單株抗體治療可有效延長(zhǎng)患病動(dòng)物壽命，證實(shí)靶向IL-17RB可能適合作為有效之佐劑治療?？傊?，本文所呈數(shù)據(jù)定義一新穎之自泌調(diào)節(jié)途徑，其圍繞在胰腺癌細(xì)胞之IL-17B/RB。IL-17B/RB傳訊向上調(diào)節(jié)至少二組趨化介素，以促進(jìn)轉(zhuǎn)移表型。決定IL-17RB于胰腺癌細(xì)胞之向上調(diào)節(jié)、確定涉及轉(zhuǎn)移之額外下光標(biāo)靶、及厘清IL-17B/RB參與胰腺癌微環(huán)境之重塑，使能建立以此IL-17B/RB為中心之調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)之更完整了解。此信息系用于進(jìn)一步發(fā)展治療胰腺癌之治療策略。下列實(shí)施例之涵蓋系旨在證實(shí)本發(fā)明之較佳具體實(shí)施例。本領(lǐng)域之技術(shù)人員應(yīng)理解到，實(shí)施例揭示之技術(shù)系遵循發(fā)明人發(fā)現(xiàn)之代表技術(shù)，以良好運(yùn)行而實(shí)施本發(fā)明，從而可視為構(gòu)成該實(shí)施之較佳模式。然而，鑒于本發(fā)明，本領(lǐng)域之技術(shù)人員應(yīng)理解到，特定具體實(shí)施例可能有許多更動(dòng)，其系經(jīng)揭示且仍取得類似或相似之結(jié)果而不背離本發(fā)明之精神及范疇。實(shí)施例1：IL-17RB之高度表現(xiàn)促進(jìn)乳腺腫瘤形成于高度表現(xiàn)IL-17RB之細(xì)胞株MDA-MB-361中，藉由IL-17RB相應(yīng)之shRNA使其消耗，造成軟瓊脂集落形成(soft-agarcolonyformation)明顯減少(圖1A)。IL-17RB消耗于使用NOD/SCID/γnull小鼠之異體移植模式亦明顯推遲腫瘤生長(zhǎng)(圖1B)。于第一周，對(duì)照組(shLacZ)及IL-17RB消耗細(xì)胞(sh17RB)兩者觀察到可觸知之腫瘤。然而，第20至36天，對(duì)照組細(xì)胞之腫瘤生長(zhǎng)比IL-17RB消耗細(xì)胞的更快且更大。IL-17RB消耗細(xì)胞之腫瘤凈重系僅對(duì)照組細(xì)胞的40％，顯示IL-17RB之高度表現(xiàn)促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)。實(shí)施例2：IL-17B經(jīng)由IL-17RB增進(jìn)腫瘤形成活性藉由RT-PCR發(fā)現(xiàn)，正常及腫瘤細(xì)胞兩者皆表現(xiàn)IL-17B，其系IL-17RB之配體；然而，ELISA幾乎無法檢測(cè)分泌性配體之量。欲測(cè)試IL-17B之異位添加是否增進(jìn)乳癌細(xì)胞之腫瘤形成活性，發(fā)明人以哺乳動(dòng)物細(xì)胞表現(xiàn)系統(tǒng)產(chǎn)生重組型IL-17B(rIL-17B)蛋白。補(bǔ)充rIL-17B可增加MDA-MB-361細(xì)胞之集落形成，其系以劑量依賴方式表現(xiàn)高之內(nèi)源性IL-17RB。另一方面，處理rIL-17B無法增進(jìn)MDA-MB-231細(xì)胞之集落形成，其系表現(xiàn)低量之IL-17RB。于M10細(xì)胞，其系表現(xiàn)IL-17RB-FL，亦觀察到類似結(jié)果，但對(duì)照組則否。反之，于MDA-MB-361細(xì)胞，內(nèi)源性IL-17B之消耗不僅抑制集落形成(圖3A)，亦減少NF-κB受體活性(圖3B)及Bcl2表現(xiàn)。于異體移植模式，相較于shLacZ對(duì)照組，IL-17B敲落細(xì)胞之腫瘤尺寸與重量?jī)烧呓砸恢碌販p少(圖3C及3D)。這些發(fā)現(xiàn)顯示，IL-17B有助于乳腺腫瘤形成，特定地經(jīng)由IL-17RB。實(shí)施例3：靶向IL-17RB/IL-17B之抗體抑制表現(xiàn)IL-17RB之乳癌細(xì)胞之致腫瘤性欲進(jìn)一步評(píng)估IL-17RB/IL-17B傳訊之重要性，發(fā)明人使用IL-17RB及IL-17B之特異性抗體，以檢驗(yàn)其生物性結(jié)果。將IL-17B抗體加入表現(xiàn)IL-17RB之M10細(xì)胞或MDA-MB-361細(xì)胞可抑制其集落形成活性(圖3A及3B)。同樣地，加入IL-17RB抗體可抑制MDA-MB-361細(xì)胞之集落形成(圖3C)。重要的是，MDA-MB-231細(xì)胞之集落形成能力，其表現(xiàn)少量或不表現(xiàn)IL-17RB，系不受處理IL-17B或IL-17RB抗體之影響。此外，于異體移植模式，處理IL-17RB抗體可推遲MDA-MB-361細(xì)胞之腫瘤生長(zhǎng)(圖3D)。這些結(jié)果顯示，破壞IL-17RB/IL-17B傳訊可抑制乳腺致腫瘤性，且使用特異性抗體可提供治療IL-17RB陽性乳癌之潛在治療策略(圖3E)。實(shí)施例4：IL-17RB陽性乳癌標(biāo)本之鑒定經(jīng)由免疫性蛋白重組型IL-17RB細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域產(chǎn)生小鼠單株抗體A81系用于鑒定IL-17RB陽性乳癌標(biāo)本(圖4A)。實(shí)施例5：升高之IL-17RB表現(xiàn)與預(yù)后差之相關(guān)性比HER2陽性乳癌的強(qiáng)于一有限之病患數(shù)目(69位病患)之世代研究中，顯示升高之IL17RB表現(xiàn)與預(yù)后差相關(guān)。欲確認(rèn)此先前之觀察，以免疫組織化學(xué)法(IHC)進(jìn)一步檢驗(yàn)一獨(dú)立之179位乳癌病患之大型世代研究。一致地，升高之IL-17RB表現(xiàn)與預(yù)后差相關(guān)(圖4A及4B，p＝0.02)。IL-17RB表現(xiàn)與預(yù)后差間之相關(guān)性具統(tǒng)計(jì)上顯著性，即使以數(shù)個(gè)臨床參數(shù)包括年齡、腫瘤尺寸、淋巴結(jié)狀態(tài)、及ER表現(xiàn)調(diào)整亦然(圖4C)。此外，發(fā)明人亦進(jìn)行Q-PCR，測(cè)定另一獨(dú)立之104個(gè)臨床乳癌標(biāo)本之世代研究之IL-17RB異型體1轉(zhuǎn)錄子量，并以(-ΔCt＝-7.55)作為以接收器操作特征(Receiveroperatingcharacteristic；ROC)曲線分析為主之截止值(cut-offvalue)，以定義“高或低”之IL-17RB1表現(xiàn)?？ū?麥爾(Kaplan-Meier；KM)分析顯示，相較于低IL-17RB1表現(xiàn)之病患，高IL-17RB1表現(xiàn)之病患具有較短之存活率。于調(diào)整年齡、腫瘤尺寸、淋巴結(jié)狀態(tài)、等級(jí)、及ER表現(xiàn)之后，IL-17RB1表現(xiàn)與預(yù)后差之關(guān)聯(lián)據(jù)統(tǒng)計(jì)上顯著性。這些結(jié)果顯示，IL-17RB1之高度表現(xiàn)可作為乳癌病患之預(yù)后差之指標(biāo)。有趣的是，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，乳癌標(biāo)本之IL-17RB表現(xiàn)系與HER2放大相關(guān)聯(lián)。于依序石蠟包埋之乳癌組織切片中，進(jìn)一步以IHC確認(rèn)IL-17RB與HER2過度表現(xiàn)之共存(圖5A)。同時(shí)有高度IL-17RB表現(xiàn)及HER2放大之病患具有最短之存活率。有趣的是，當(dāng)發(fā)明人比較IL-17RB或HER2陽性組與雙陰性組病患時(shí)，升高之IL-17RB表現(xiàn)顯示，與預(yù)后差之相關(guān)性比HER2放大的強(qiáng)。當(dāng)將三重陰性病患(其具最差之預(yù)后)排除于世代研究之外時(shí)，該二相關(guān)性增強(qiáng)。這些發(fā)現(xiàn)顯示，IL-17RB可作為同時(shí)具HER2放大及IL-17RB表現(xiàn)之病患之替代標(biāo)靶。欲解決此問題，發(fā)明人采用曲妥珠單抗(trastuzumab)(a.k.a.Herceptin)抗性乳癌細(xì)胞。有趣的是，相較于親代細(xì)胞，該些細(xì)胞保有IL-17RB表現(xiàn)。欲測(cè)試是否剩余之IL-17RB可供進(jìn)一步治療之替代標(biāo)靶，發(fā)明人消耗IL-17RB親代SKBR3與SKBR3-hr細(xì)胞。如圖5B所示，親代細(xì)胞之IL-17RB消耗減少其集落形成效率至約對(duì)照組之50％，而SKBR3-hr細(xì)胞之IL-17RB消耗徹底廢除其集落形成能力。這些結(jié)果顯示，IL-17RB于乳癌之角色獨(dú)立于HER2之外，且靶向IL-17RB可提供治療曲妥珠單抗抗性細(xì)胞之可行方法。實(shí)施例6：IL-17RB于胰臟腫瘤形成及轉(zhuǎn)移上具重要角色欲探討IL-17RB于胰腺癌之潛在角色，發(fā)明人首先檢驗(yàn)一類人類胰腺癌細(xì)胞株之IL-17RB蛋白質(zhì)表現(xiàn)。于HPAFII、BxPC3、Capan2、及CFPAC-1細(xì)胞檢測(cè)到高度IL-17RB表現(xiàn)。反之，于HPAC、SU.86.86、及MIA-PaCa2細(xì)胞觀察到低度表現(xiàn)。欲評(píng)估該些胰腺癌細(xì)胞之IL-17RB之功能，進(jìn)行一系列體外及異體移植實(shí)驗(yàn)，其系使用具擾動(dòng)之IL-17RB表現(xiàn)之細(xì)胞。CFPAC-1及BxPC3細(xì)胞之IL-17RB消耗可減少軟瓊脂集落形成及侵襲能力。反之，當(dāng)異位表現(xiàn)全長(zhǎng)之IL-17RB時(shí)，增進(jìn)SU.86.86及HPAC細(xì)胞之集落形成及侵襲。然而，表現(xiàn)缺乏配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域(ΔLBD)之IL-17RB則不具效用。利用IL-17RB消耗之CFPAC-1細(xì)胞之皮下異體移植試驗(yàn)證實(shí)，相較于對(duì)照組(shLacZ)，IL-17RB消耗造成腫瘤生長(zhǎng)抑制(圖6A)。與此一致的是，IL-17RB消耗之CFPAC-1細(xì)胞之正位異體移植亦形成較小之腫瘤(圖6B)。正位腫瘤之IL-17RB表現(xiàn)系以免疫組織化學(xué)法(IHC)確認(rèn)(圖6C)。值得注意的是，以對(duì)照組CFPAC-1細(xì)胞移植之六只小鼠中有四只發(fā)展為肺臟轉(zhuǎn)移，且其中二只亦發(fā)展為肝臟轉(zhuǎn)移。反之，IL-17RB消耗之異體移植小鼠未有發(fā)展為轉(zhuǎn)移者。與異體移植實(shí)驗(yàn)一致的是，以IL-17RB消耗細(xì)胞之尾靜脈注射導(dǎo)致極低之肺臟轉(zhuǎn)移，而以對(duì)照組細(xì)胞之注射導(dǎo)致嚴(yán)重肺腫瘤負(fù)荷(圖6D)。利用BxPC3細(xì)胞亦觀察到類似結(jié)果。總之，該些數(shù)據(jù)顯示，IL-17RB表現(xiàn)系胰臟腫瘤惡性程度及轉(zhuǎn)移不可或缺。實(shí)施例7：自泌IL-17B/RB傳訊促進(jìn)胰腺癌轉(zhuǎn)移IL-17RB與其配體間之交互作用于促進(jìn)胰臟腫瘤細(xì)胞惡性程度至關(guān)重要，系因ΔLBD之過度表現(xiàn)無法促進(jìn)體外集落形成及侵襲。發(fā)現(xiàn)到，具高度IL-17RB表現(xiàn)之腫瘤細(xì)胞亦表現(xiàn)IL-17B，其系IL-17RB之配體。腫瘤細(xì)胞之IL-17B消耗廢除體外集落形成及侵襲，且抑制異體移植小鼠模式之腫瘤生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移(圖6E-F)。肺臟轉(zhuǎn)移之抑制系進(jìn)一步以尾靜脈注射實(shí)驗(yàn)確認(rèn)(圖6G)。利用BxPC3細(xì)胞亦觀察到類似結(jié)果。因此，IL-17B過度表現(xiàn)亦促進(jìn)腫瘤惡性程度及轉(zhuǎn)移。欲進(jìn)一步評(píng)估IL-17B/RB傳訊之角色，發(fā)明人以重組型IL-17B(rIL17B)處理表現(xiàn)IL-17RB之CFPAC-1及BxPC3細(xì)胞。當(dāng)加入rIL17B時(shí)，集落形成及侵襲能力系進(jìn)一步增進(jìn)。與此一致的是，處理rIL17B之過度表現(xiàn)IL-17RB之SU.86.86及HPAC細(xì)胞亦增加集落形成及侵襲能力。然而，于過度表現(xiàn)ΔLBD之細(xì)胞，處理rIL17B無法促進(jìn)集落形成或侵襲。這些數(shù)據(jù)證實(shí)自泌IL-17B/RB傳訊于胰臟腫瘤惡性程度之重要角色。實(shí)施例8：IL-17RB陽性胰腺癌標(biāo)本之鑒定經(jīng)由免疫性蛋白重組型IL-17RB細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域產(chǎn)生小鼠單株抗體A81系用于鑒定IL-17RB陽性胰腺癌標(biāo)本(圖7A)。實(shí)施例9：IL-17RB之過度表現(xiàn)與胰腺癌病患轉(zhuǎn)移及差之臨床結(jié)果相關(guān)聯(lián)欲進(jìn)一步探討是否該些體外發(fā)現(xiàn)反映于臨床結(jié)果，發(fā)明人進(jìn)行IHC以分析IL-17RB于111個(gè)胰腺癌標(biāo)本之表現(xiàn)(圖7A)。標(biāo)本可根據(jù)細(xì)胞表現(xiàn)IL-17RB之百分比分成三類：陰性(0％)、低陽性(<10％)、及高陽性(≥10％)。IL-17RB之高度表現(xiàn)系正相關(guān)于差之分化(p＝0.049)、轉(zhuǎn)移(p＝0.009)、及腫瘤階段，其系使用TNM(腫瘤、結(jié)、轉(zhuǎn)移)階段系統(tǒng)(p＝<0.001)。此外，高度IL-17RB表現(xiàn)系與操作后轉(zhuǎn)移相關(guān)(p＝0.029，圖7B)、與復(fù)發(fā)輕度相關(guān)(p＝0.057，圖7B)、及與預(yù)后差相關(guān)(IL-17RB陽性與陰性：p＝0.035，圖7C；IL-17RB高陽性與陰性：p＝0.007)。于調(diào)整年齡、性別、腫瘤位置、分化狀態(tài)、病理型態(tài)、階段、及輔助療法之后，具高度IL-17RB表現(xiàn)之病患之危險(xiǎn)比(hazardratio)系該些未測(cè)出IL-17RB表現(xiàn)者之1.5倍(95％C.I.：1.03-2.27，p＝0.034)(圖7D)。此外，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)IL-17RB與TFF1表現(xiàn)之間存在顯著正相關(guān)，其系作為IL-17RB下游趨化介素之實(shí)例?？傊?，該些結(jié)果皆支持一模式，其中升高之自泌IL-17B/RB傳訊增進(jìn)胰腺癌之腫瘤惡性程度。該些結(jié)果顯示，IL-17RB系治療之有利標(biāo)靶。實(shí)施例10：于異體移植模式以新開發(fā)之抗IL-17RB單株抗體治療可阻斷腫瘤生長(zhǎng)、抑制轉(zhuǎn)移、及促進(jìn)存活率欲開發(fā)適用及特異性之抗IL-17RB抗體供治療之目的，發(fā)明人使用重組型IL-17RB細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域(胺基酸18-289)。處理單株抗體(D9)，其辨識(shí)原始IL-17RB，可體外抑制表現(xiàn)IL-17RB之胰腺癌細(xì)胞之集落形成及侵襲能力(圖8A、8B)。欲測(cè)試其體內(nèi)功效，發(fā)明人正位移植熒光素酶標(biāo)記之CFPAC-1細(xì)胞至NOD/SCID/γnull小鼠，其系以靜脈注射進(jìn)行8劑之D9及對(duì)照組IgG處理(每劑20μg)(圖8C)。處理D9明顯減少腫瘤尺寸(圖8D、8E)且抑制肺臟轉(zhuǎn)移(圖8F)。重要的是，以抗IL17RB、D9連續(xù)處理該些疾病動(dòng)物，明顯延長(zhǎng)其壽命(p<0.001)約1.5個(gè)月(圖8G)。該些結(jié)果顯示，以特異性抗體靶向IL-17RB系消除表現(xiàn)IL-17RB之胰腺癌之腫瘤形成及轉(zhuǎn)移之有效策略。實(shí)施例11：抗IL17RB嵌合性D9抗體之特異性及結(jié)合效率(cD9)利用FACS分析，抗IL17RB嵌合性D9抗體(cD9)之特異性(圖9A)及結(jié)合效率(圖9B)類似小鼠單株D9抗體(D9)。該些結(jié)果顯示，cD9可具如同mD9之類似生物作用。實(shí)施例12：靶向IL-17RB之嵌合性D9抗體(cD9)抑制胰腺癌細(xì)胞株之腫瘤形成活性欲進(jìn)一步評(píng)估源自D9之嵌合性D9抗體(cD9)對(duì)腫瘤形成活性之抑制效用，進(jìn)行集落形成能力試驗(yàn)。表現(xiàn)IL-17RB之胰腺癌細(xì)胞、CFPAC-1(圖10A)、及HPAF-II(圖10B)系進(jìn)行軟瓊脂集落形成試驗(yàn)。相較于IgG對(duì)照組，加入cD9可明顯抑制兩癌細(xì)胞之集落數(shù)目。抑制效率類似D9。該些結(jié)果強(qiáng)烈顯示，嵌合性D9抗體(cD9)提供潛在治療策略以治療IL-17RB陽性癌癥。材料及方法(乳癌)細(xì)胞株人類乳癌細(xì)胞株MDA-MB-231、MDA-MB-361、SKBR3、及SKBR3-hr系培養(yǎng)于補(bǔ)充10％胎牛血清及抗生素/抗霉菌劑之DMEM培養(yǎng)基(Dulbecco’smodifiedEagle’smedium)。非惡性乳腺上皮細(xì)胞株H184B5F5/M10(M10)及MCF10A細(xì)胞系培養(yǎng)于補(bǔ)充10％胎牛血清之最小基礎(chǔ)培養(yǎng)基(MinimalEssentialMedium)及補(bǔ)充5％馬血清、20ng/ml表皮生長(zhǎng)因子、0.5μg/ml氫皮質(zhì)酮、100ng/ml霍亂毒素、10μg/ml胰島素、及抗生素/抗霉菌劑之DMEM培養(yǎng)基/F12，系置于補(bǔ)充5％CO2且加濕之37℃培養(yǎng)箱。H184B5F5/M10細(xì)胞株系購自臺(tái)灣之BioresourceCollectionandResearchCenter(BCRC)，且其余者系購自ATCC。臨床標(biāo)本所有人類樣本系取自NationalTaiwanUniversityHospital(NTUH)。樣本系經(jīng)編碼，以保護(hù)病患隱私，并于InstitutionalReviewBoardofHumanSubjectsResearchEthicsCommitteeofAcademiaSinica(AS-IRB02-98042)及臺(tái)灣臺(tái)北NTUH(#200902001R)之核可協(xié)議下使用。臨床信息系取自病理報(bào)告。具至少5年之追蹤研究之病患亦納入本研究。軟瓊脂集落形成試驗(yàn)于12孔培養(yǎng)盤之1孔中，將2500個(gè)細(xì)胞種植于培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基含有0.35％瓊脂，其系位于含有0.5％瓊脂層之培養(yǎng)基上方(M10細(xì)胞于軟集落形成試驗(yàn)中亦使用MCF10A培養(yǎng)基)。細(xì)胞系于加濕之37℃培養(yǎng)箱中維持16天，且集落系以含0.05％結(jié)晶紫之乙醇固定以進(jìn)行定量。針對(duì)添加rIL-17B蛋白或IL-17B/IL-17RB中和試驗(yàn)，抗人類IL-17B(R&DSystems)、抗人類IL-17RB抗體、或rIL-17B系每隔2天加入軟瓊脂培養(yǎng)基。NOD/SCID/γnull小鼠之異體移植試驗(yàn)動(dòng)物照護(hù)及實(shí)驗(yàn)系由InstitutionalAnimalCareandUtilizationCommitteeofAcademiaSinica(IACUC#080085)核可。將等量混合之2X106MDA-MB-361乳癌細(xì)胞與Matrigel(BDbioscience)注射至NOD/SCID/γnull脂肪墊(fatpads)。于初步檢測(cè)后，每隔4天評(píng)估腫瘤體積。以Student氏t檢定測(cè)試shLacZ、shIL-17RB、及shIL-17B細(xì)胞衍生之腫瘤生長(zhǎng)間之顯著差異。當(dāng)?shù)竭_(dá)50-100mm3時(shí)，開始體內(nèi)投予IL-17RB抗體，并以可比之腫瘤尺寸將小鼠分至相同組別。針對(duì)各腫瘤，以瘤內(nèi)注射(intratumoralinjection)投予溶于20μl無菌PBS之10μgIL-17RB抗體。以非線性回歸(曲線適化法)評(píng)估對(duì)照組與各組經(jīng)處理小鼠間之腫瘤生長(zhǎng)統(tǒng)計(jì)顯著性。IL-17RB多株抗體重組型IL-17RB細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域系藉由HEK293細(xì)胞之異位過度表現(xiàn)而產(chǎn)生。經(jīng)由此免疫原(immunogen)產(chǎn)生之多株抗體系于整個(gè)工作中使用。免疫組織化學(xué)使用福爾馬林固定之石蠟包埋之原發(fā)性腫瘤組織切片。以微波加熱10分鐘之EDTA緩沖液(Trilogy)進(jìn)行抗原提取(antigenretrieval)。以3％H2O2消除內(nèi)源性過氧化酶活性。玻片系以含10％FBS之PBS阻斷，隨即于4℃下以純化之小鼠抗IL17RB多株抗體(1:100)或抗HER2兔抗體(1:100)培養(yǎng)隔夜。以HRP共軛結(jié)合之兔/小鼠聚合物(DakoREALEnVision)及液態(tài)二胺基聯(lián)苯胺四鹽酸鹽加上受質(zhì)(DAB色素原(chromogen))，其系用于顯色。所有玻片皆以蘇木精(hematoxylin)復(fù)染，并以AperioDigitalPathologySystem擷取影像。若5％以上之腫瘤細(xì)胞于膜染色時(shí)呈陽性，則樣本鑒定為IL-17RB陽性。NF-κB報(bào)導(dǎo)試驗(yàn)以Lipofectamine2000(Invitrogen)轉(zhuǎn)染80％滿之細(xì)胞。針對(duì)NF-κB報(bào)導(dǎo)試驗(yàn)，將0.5μg之NF-κB熒光素酶報(bào)導(dǎo)質(zhì)體及50ng之pGL4-74Renilla熒光素酶質(zhì)體(最為轉(zhuǎn)染效率之對(duì)照組)共轉(zhuǎn)染至各孔(24孔培養(yǎng)盤)之細(xì)胞。于轉(zhuǎn)染后24小時(shí)制備細(xì)胞萃取物，并以Dual-GloLuciferase試驗(yàn)System(Promega)測(cè)定熒光素酶活性，其系遵照制造商之說明。材料及方法(胰腺癌)細(xì)胞培養(yǎng)人類胰腺癌細(xì)胞株BxPC-3及CFPAC-1細(xì)胞系取自ATCC，且培養(yǎng)于ATCC建議之完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基，其系置于補(bǔ)充5％CO2且加濕之37℃培養(yǎng)箱。軟瓊脂集落形成試驗(yàn)軟瓊脂集落形成試驗(yàn)之進(jìn)行如前述(Hwang-Versluesetal.,2009)。簡(jiǎn)言之，于12孔培養(yǎng)盤之孔中，將2500個(gè)細(xì)胞種植于含有0.35％瓊脂層/完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基，其系位于含有0.5％瓊脂層/完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基之上方。每周加入額外之50μl之含50ngrIL17B或1μg抗IL-17RB抗體之無血清培養(yǎng)基。于第14或28天，于種植后，計(jì)數(shù)經(jīng)結(jié)晶紫染色之集落。IL-17RB單株抗體HEK293細(xì)胞以異位過度表現(xiàn)產(chǎn)生重組型IL-17RB細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域。經(jīng)由此免疫原產(chǎn)生之單株抗體A81及D9對(duì)內(nèi)源性IL-17RB展現(xiàn)高度特異性。嵌合性單株抗體D9(cD9)之產(chǎn)生將D9可變區(qū)之cDNA選殖至人類Fc之IG載體(cD9質(zhì)體)。嵌合性抗體系制自cD9質(zhì)體DNA轉(zhuǎn)染之Expi293F細(xì)胞。FACS分析細(xì)胞系于4℃下以抗IL-17RB小鼠單株抗體及Alexa488共軛結(jié)合之抗小鼠抗體培養(yǎng)30分鐘。Alexa488陽性細(xì)胞系以FACSCanto細(xì)胞分選儀(BDBioscience，SanJose，CA，USA)分析。免疫組織化學(xué)法(IHC)以福爾馬林固定之石蠟包埋之原發(fā)性腫瘤組織切片用于IHC。以0.1M檸檬酸鹽緩沖液(pH6.0)進(jìn)行熱誘發(fā)抗原提取，并高壓蒸汽滅菌20分鐘。以3％H2O2消除內(nèi)源性過氧化酶。玻片系于4℃下以自制之溶于PBS/10％FBS之抗IL-17RB抗體及溶于PBS/5％FBS之抗TFF1抗體(1:100，EPR3972，Genetex)或抗CD31兔多株抗體(1:50，GTX81432)阻斷隔夜。于清洗后，玻片于液態(tài)二胺基聯(lián)苯胺四鹽酸鹽加上受質(zhì)DAB色素原(購自DakoREALEnVision(Carpinteria，CA))顯色前以HRP兔/小鼠聚合物培養(yǎng)。所有玻片皆以蘇木精復(fù)染。以AperioDigitalPathologySystem擷取影像。針對(duì)CD31+內(nèi)皮細(xì)胞計(jì)數(shù)，使用四切片之各切片之四個(gè)視場(chǎng)(fields)。小鼠致腫瘤性及轉(zhuǎn)移試驗(yàn)動(dòng)物照護(hù)及實(shí)驗(yàn)系由InstitutionalAnimalCareandUtilizationCommitteeofAcademiaSinica(IACUC#10-04-065)核可。以IVIS動(dòng)力學(xué)造影系統(tǒng)(CaliperLifeSciences)監(jiān)控腫瘤生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移。針對(duì)致腫瘤性試驗(yàn)，非糖尿病/嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺乏(NOD/SCID/γnull)小鼠系正位注射2.5×105個(gè)GFP-LUC標(biāo)記之CFPAC-1。針對(duì)皮下移植，注射1×106個(gè)GFP-LUC標(biāo)記之CFPAC-1細(xì)胞。每7天評(píng)估腫瘤體積。于正位移植后56天或皮下注射后42天犧牲小鼠。將腫瘤秤重以評(píng)估腫瘤形成，并檢驗(yàn)肝臟與肺臟之轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞。針對(duì)體內(nèi)轉(zhuǎn)移試驗(yàn)，靜脈注射5×105個(gè)GFP-LUC標(biāo)記之CFPAC-1細(xì)胞。于注射后70天，檢查肺臟之腫瘤負(fù)荷。統(tǒng)計(jì)分析除了臨床相關(guān)性及特定免疫印漬量化以外，所有數(shù)據(jù)皆以平均值±SD呈現(xiàn)，并以Student氏t檢定比較對(duì)照組及處理組。星號(hào)(*)及(**)代表統(tǒng)計(jì)顯著性，其中p值分別為<0.05及<0.01。下列分析系以SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行：卡方檢定(Chi-square(χ2)test)系用于檢驗(yàn)111個(gè)胰腺癌案例之IL-17RB表現(xiàn)與臨床參數(shù)間之相關(guān)性?？ū?麥爾評(píng)估法系用于整體進(jìn)展之自由存活分析，且對(duì)數(shù)秩檢定(log-ranktest)系用于比較差異。進(jìn)行單變量及多變量Cox回歸分析，評(píng)估IL-17RB表現(xiàn)對(duì)術(shù)后胰腺癌病患臨床結(jié)果之影響。參考資料ZhuX,MulcahyLA,MohammedRA,LeeAH,FranksHA,KilpatrickL,etal.IL-17expressionbybreast-cancer-associatedmacrophages:IL-17promotesinvasivenessofbreastcancercelllines.BreastCancerRes2008；10:R95.WangL,YiT,KortylewskiM,PardollDM,ZengD,YuH.IL-17canpromotetumorgrowththroughanIL-6-Stat3signalingpathway.JExpMed2009；206:1457-1464.FurutaS,JengYM,ZhouL,HuangL,KuhnI,BissellMJ,etal.IL-25CausesApoptosisofIL-25R-ExpressingBreastCancerCellsWithoutToxicitytoNonmalignantCells.SciTranslMed2011；3:78ra31.RickelEA,SiegelLA,YoonBR,RottmanJB,KuglerDG,SwartDA,etal.IdentificationoffunctionalrolesforbothIL-17RBandIL-17RAinmediatingIL-25-inducedactivities.JImmunol2008；181:4299-4310.Acharyya,S.,Oskarsson,T.,Vanharanta,S.,Malladi,S.,Kim,J.,Morris,P.G.,Manova-Todorova,K.,Leversha,M.,Hogg,N.,Seshan,V.E.,etal.(2012).ACXCL1paracrinenetworklinkscancerchemoresistanceandmetastasis.Cell150,165-178.Arumugam,T.,Brandt,W.,Ramachandran,V.,Moore,T.T.,Wang,H.,May,F.E.,Westley,B.R.,Hwang,R.F.,andLogsdon,C.D.(2011).Trefoilfactor1stimulatesbothpancreaticcancerandstellatecellsandincreasesmetastasis.Pancreas40,815-822.Baldwin,A.S.,Jr.(2001).Seriesintroduction:thetranscriptionfactorNF-kappaBandhumandisease.TheJournalofclinicalinvestigation107,3-6.Berlin,J.D.,Catalano,P.,Thomas,J.P.,Kugler,J.W.,Haller,D.G.,andBenson,A.B.,3rd(2002).PhaseIIIstudyofgemcitabineincombinationwithfluorouracilversusgemcitabinealoneinpatientswithadvancedpancreaticcarcinoma:EasternCooperativeOncologyGroupTrialE2297.Journalofclinicaloncology:officialjournaloftheAmericanSocietyofClinicalOncology20,3270-3275.Burris,H.A.,3rd,Moore,M.J.,Andersen,J.,Green,M.R.,Rothenberg,M.L.,Modiano,M.R.,Cripps,M.C.,Portenoy,R.K.,Storniolo,A.M.,Tarassoff,P.,etal.(1997).Improvementsinsurvivalandclinicalbenefitwithgemcitabineasfirst-linetherapyforpatientswithadvancedpancreascancer:arandomizedtrial.Journalofclinicaloncology:officialjournaloftheAmericanSocietyofClinicalOncology15,2403-2413.Campbell,A.S.,Albo,D.,Kimsey,T.F.,White,S.L.,andWang,T.N.(2005).Macrophageinflammatoryprotein-3alphapromotespancreaticcancercellinvasion.TheJournalofsurgicalresearch123,96-101.Casper,E.S.,Green,M.R.,Kelsen,D.P.,Heelan,R.T.,Brown,T.D.,Flombaum,C.D.,Trochanowski,B.,andTarassoff,P.G.(1994).PhaseIItrialofgemcitabine(2,2'-difluorodeoxycytidine)inpatientswithadenocarcinomaofthepancreas.Investigationalnewdrugs12,29-34.Clark,C.E.,Hingorani,S.R.,Mick,R.,Combs,C.,Tuveson,D.A.,andVonderheide,R.H.(2007).Dynamicsoftheimmunereactiontopancreaticcancerfrominceptiontoinvasion.Cancerresearch67,9518-9527.Colucci,G.,Giulian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LeuGlyAsnArgTyrMet195200205AlaLeuIleGlnHisSerThrIleIleGlyPheSerGlnValPheGlu210215220ProHisGlnLysLysGlnThrArgAlaSerValValIleProValThr225230235240GlyAspSerGluGlyAlaThrValGlnLeuThrProTyrPheProThr245250255CysGlySerAspCysIleArgHisLysGlyThrValValLeuCysPro260265270GlnThrGlyValProPheProLeuAspAsnAsnLysSerLysProGly275280285GlyTrpLeuProLeuLeuLeuLeuSerLeuLeuValAlaThrTrpVal290295300LeuValAlaGlyIleTyrLeuMetTrpArgHisGluArgIleLysLys305310315320ThrSerPheSerThrThrThrLeuLeuProProIleLysValLeuVal325330335ValTyrProSerGluIleCysPheHisHisThrIleCysTyrPheThr340345350GluPheLeuGlnAsnHisCysArgSerGluValIleLeuGluLysTrp355360365GlnLysLysLysIleAlaGluMetGlyProValGlnTrpLeuAlaThr370375380GlnLysLysAlaAlaAspLysValValPheLeuLeuSerAsnAspVal385390395400AsnSerValCysAspGlyThrCysGlyLysSerGluGlySerProSer405410415GluAsnSerGlnAspLeuPheProLeuAlaPheAsnLeuPheCysSer420425430AspLeuArgSerGlnIleHisLeuHisLysTyrValValValTyrPhe435440445ArgGluIleAspThrLysAspAspTyrAsnAlaLeuSerValCysPro450455460LysTyrHisLeuMetLysAspAlaThrAlaPheCysAlaGluLeuLeu465470475480HisValLysGlnGlnValSerAlaGlyLysArgSerGlnAlaCysHis485490495AspGlyCysCysSerLeu500<210>2<211>1509<212>DNA<213>智人<400>2atgtcgctcgtgctgctaagcctggccgcgctgtgcaggagcgccgtaccccgagagccg60accgttcaatgtggctctgaaactgggccatctccagagtggatgctacaacatgatcta120atccccggagacttgagggacctccgagtagaacctgttacaactagtgttgcaacaggg180gactattcaattttgatgaatgtaagctgggtactccgggcagatgccagcatccgcttg240ttgaaggccaccaagatttgtgtgacgggcaaaagcaacttccagtcctacagctgtgtg300aggtgcaattacacagaggccttccagactcagaccagaccctctggtggtaaatggaca360ttttcctacatcggcttccctgtagagctgaacacagtctatttcattggggcccataat420attcctaatgcaaatatgaatgaagatggcccttccatgtctgtgaatttcacctcacca480ggctgcctagaccacataatgaaatataaaaaaaagtgtgtcaaggccggaagcctgtgg540gatccgaacatcactgcttgtaagaagaatgaggagacagtagaagtgaacttcacaacc600actcccctgggaaacagatacatggctcttatccaacacagcactatcatcgggttttct660caggtgtttgagccacaccagaagaaacaaacgcgagcttcagtggtgattccagtgact720ggggatagtgaaggtgctacggtgcagctgactccatattttcctacttgtggcagcgac780tgcatccgacataaaggaacagttgtgctctgcccacaaacaggcgtccctttccctctg840gataacaacaaaagcaagccgggaggctggctgcctctcctcctgctgtctctgctggtg900gccacatgggtgctggtggcagggatctatctaatgtggaggcacgaaaggatcaagaag960acttccttttctaccaccacactactgccccccattaaggttcttgtggtttacccatct1020gaaatatgtttccatcacacaatttgttacttcactgaatttcttcaaaaccattgcaga1080agtgaggtcatccttgaaaagtggcagaaaaagaaaatagcagagatgggtccagtgcag1140tggcttgccactcaaaagaaggcagcagacaaagtcgtcttccttctttccaatgacgtc1200aacagtgtgtgcgatggtacctgtggcaagagcgagggcagtcccagtgagaactctcaa1260gacctcttcccccttgcctttaaccttttctgcagtgatctaagaagccagattcatctg1320cacaaatacgtggtggtctactttagagagattgatacaaaagacgattacaatgctctc1380agtgtctgccccaagtaccacctcatgaaggatgccactgctttctgtgcagaacttctc1440catgtcaagcagcaggtgtcagcaggaaaaagatcacaagcctgccacgatggctgctgc1500tccttgtag1509<210>3<211>180<212>PRT<213>智人<400>3MetAspTrpProHisAsnLeuLeuPheLeuLeuThrIleSerIlePhe151015LeuGlyLeuGlyGlnProArgSerProLysSerLysArgLysGlyGln202530GlyArgProGlyProLeuAlaProGlyProHisGlnValProLeuAsp354045LeuValSerArgMetLysProTyrAlaArgMetGluGluTyrGluArg505560AsnIleGluGluMetValAlaGlnLeuArgAsnSerSerGluLeuAla65707580GlnArgLysCysGluValAsnLeuGlnLeuTrpMetSerAsnLysArg859095SerLeuSerProTrpGlyTyrSerIleAsnHisAspProSerArgIle100105110ProValAspLeuProGluAlaArgCysLeuCysLeuGlyCysValAsn115120125ProPheThrMetGlnGluAspArgSerMetValSerValProValPhe130135140SerGlnValProValArgArgArgLeuCysProProProProArgThr145150155160GlyProCysArgGlnArgAlaValMetGluThrIleAlaValGlyCys165170175ThrCysIlePhe180<210>4<211>543<212>DNA<213>智人<400>4atggactggcctcacaacctgctgtttcttcttaccatttccatcttcctggggctgggc60cagcccaggagccccaaaagcaagaggaaggggcaagggcggcctgggcccctggcccct120ggccctcaccaggtgccactggacctggtgtcacggatgaaaccgtatgcccgcatggag180gagtatgagaggaacatcgaggagatggtggcccagctgaggaacagctcagagctggcc240cagagaaagtgtgaggtcaacttgcagctgtggatgtccaacaagaggagcctgtctccc300tggggctacagcatcaaccacgaccccagccgtatccccgtggacctgccggaggcacgg360tgcctgtgtctgggctgtgtgaaccccttcaccatgcaggaggaccgcagcatggtgagc420gtgccggtgttcagccaggttcctgtgcgccgccgcctctgcccgccaccgccccgcaca480gggccttgccgccagcgcgcagtcatggagaccatcgctgtgggctgcacctgcatcttc540tga543<210>5<211>21<212>DNA<213>人工序列<220><223>shRNA<400>5ccattaaggttcttgtggttt21<210>6<211>21<212>DNA<213>人工序列<220><223>shRNA<400>6ccatcacacaatttgttactt21<210>7<211>21<212>DNA<213>人工序列<220><223>shRNA<400>7cccataatattcctaatgcaa21<210>8<211>21<212>DNA<213>人工序列<220><223>shRNA<400>8gcagctgtggatgtccaacaa21<210>9<211>21<212>DNA<213>人工序列<220><223>shRNA<400>9tcttaccatttccatcttcct21<210>10<211>348<212>DNA<213>人工序列<220><223>VH核苷酸序列<400>10gaggttcagctgcagcagtctggacctgagctggtgaagcctggggcttcagtgaagata60tcctgcaagacttctggatacaccttcactgaatacaccatccactgggtgaagcagaac120catggaaagagccttgactggattggaggtattaatcctaacaatggtggtactacttac180aaccaggagttcaagggcaaggccacattgactgtagataagtcctccagtacagcctac240atggaattccgcagcctgacatctgaggattctgcagtctattactgtgcaagaagttac300tacggctacgtagactactggggccaaggcaccactctcaccgcggcc348<210>11<211>318<212>DNA<213>人工序列<220><223>VL核苷酸序列<400>11caaattgttctcacccagtctccagcaatcatgtctgcatctccaggggagaaggtcacc60atgacctgcagtgccagctcaagtatatattacatacactggtaccagcagaagtcaggc120acctcccccaaaagatggatttatgacacatccaagctg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