本發(fā)明涉及包括吸附于惰性基質(zhì)上的歐米茄-3多不飽和脂肪酸(n-3PUFA)和白藜蘆醇或包含白藜蘆醇的天然提取物的固體組合物，其中組合物于室溫下保持穩(wěn)定6個(gè)月。具體地，本發(fā)明涉及上述固體和穩(wěn)定的組合物以用於預(yù)防或治療由脂代謝混亂和血小板凝集增加導(dǎo)致的心血管疾病，由自由基導(dǎo)致的損傷和/或病毒性疾病的用途。
背景技術(shù)：
：在工業(yè)化國家，經(jīng)常出現(xiàn)涉及脂代謝異常的心血管疾病。例如，根據(jù)世界衛(wèi)生組織2011年4月公布的數(shù)據(jù)，在意大利，心血管疾病的死亡人數(shù)達(dá)到總體死亡人數(shù)的18.65％。我們對于白藜蘆醇和冠心病之間關(guān)系的了解來自過去幾年進(jìn)行的流行病學(xué)研究。這些研究得到的結(jié)論表明重度冠狀動(dòng)脈粥樣硬化和冠心病的病情發(fā)展與血清膽固醇水平密切相關(guān)(Breuer，H.W.M.；《歐洲心臟病學(xué)》(EuropeanCardiology)，2005；1-6)。血小板在心血管疾病中發(fā)揮重要、但經(jīng)常未被足夠意識(shí)到的作用。例如，通過增加親凝集刺激或減少疏凝集作用物質(zhì)，可改變血小板的正常反應(yīng)，從而得到出現(xiàn)于基于慢性(例如穩(wěn)定型心絞痛)和急性(例如急性心肌梗塞)的心血管疾病狀態(tài)下血小板活化/凝集增加的條件。另外，血小板高聚性也和冠狀動(dòng)脈疾病的風(fēng)險(xiǎn)因素(例如吸煙、高血壓和血膽脂醇過多)相關(guān)。最后，利用疏血小板療法對上述疾病進(jìn)行管理的范圍有所增加，這種增加還強(qiáng)調(diào)血小板在心血管疾病發(fā)病機(jī)理中的關(guān)鍵作用。最近發(fā)表的文獻(xiàn)提供了對血小板在維持體內(nèi)平衡中正常生理作用、促進(jìn)心血管疾病中血小板功能異常的病理生理學(xué)過程和疏血小板治療相關(guān)作用和益處的全面概述(Kottke-MarchantK.：《克利夫蘭診所醫(yī)學(xué)雜志》(ClevelandClinicJournalofMedicine)，2009年4月；76(1)：1-7)。關(guān)于大多數(shù)折磨人類的退化性疾病源自有毒自由基反應(yīng)的證據(jù)在不斷積累。這些疾病包括動(dòng)脈粥樣硬化、癌癥、炎性關(guān)節(jié)疾病、哮喘、糖尿病、老年性癡呆和退化性眼疾。生物老化過程也可能基于自由基。大多數(shù)對細(xì)胞的自由基損傷包括氧自由基或更普遍的，包括諸如單線態(tài)氧和過氧化氫以及自由基的非自由基種類的活性氧種類(AOS)。AOS可損傷遺傳物質(zhì)、導(dǎo)致細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化以及使膜結(jié)合酶失活。我們的飲食需要抗補(bǔ)充氧化劑以保證老年人群更加健康(AustNZJ《眼科雜志》(Ophthalmol)。1995年2月；23(1)：3-7)。歐米茄-3多不包含脂肪酸(n-3PUFA)可能通過抗炎、抗血栓形成和抗心律失常機(jī)理的手段(SethiS.等人；《血液》(Blood)2002：100：-1340-6；BillmanGE等人.；《循環(huán)》(Circulation)31999：99：2452-7)表現(xiàn)出預(yù)防心血管情形的有益效果(AarsetoeyH.等人；《心臟病研究和實(shí)踐》(CardiologyResearchandPractice)卷2012：1-16)。由于首先觀察到是降脂效果，所以起初這些藥物是用于治療血脂異常的，而抗炎、抗血栓形成、抗動(dòng)脈粥樣硬化和抗致心律失常性的效果是后來發(fā)現(xiàn)的。GISSI-預(yù)防試驗(yàn)(《柳葉刀》(Lancet)1999年354：447-55)是第一個(gè)試驗(yàn)證實(shí)n-3PUFA在患有心肌梗塞后遺癥的患者中的療效性和耐受性。根據(jù)文獻(xiàn)中的證據(jù)，現(xiàn)在n-3PUFA表明其可初級和次級預(yù)防缺血性心臟病和心臟性猝死(SCD)(MoriTA，BeilinLJ.“長鏈-歐米茄-3脂肪酸，血脂和降低心血管風(fēng)險(xiǎn)”，《血脂學(xué)時(shí)論轉(zhuǎn)錄》(Curr.Opin.Lipidol)2001年；12：11-7)。2011年9月14日公開的《營養(yǎng)和膳食補(bǔ)充劑》(NutritionandDietarySupplements)93-100頁中描述了n-3系列多不飽和脂肪酸預(yù)防心血管疾病的作用。白藜蘆醇(反-3,4',5-三羥基芪)是位于黑葡皮上的多元酚分子。已知它作為血小板凝集抑制劑具有保護(hù)心臟的作用。(SzmitkoPE等人.《循環(huán)》(Circulation)2005年1月，111(2)p10-11；DasDK等人."保護(hù)心臟的白藜蘆醇:非傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的治療希望"；《分子介入》(Mol.Interv.)，2006,6(1)：36–47)。它也作為抗氧化劑和皮膚保護(hù)劑(Afaq，F(xiàn)arrukh等人"可防止光致癌和光老化的植物性抗氧化劑"；《試驗(yàn)皮膚病學(xué)》(ExperimentalDermatology)2006年，15(9)：67884)。近年來關(guān)于紅葡萄酒和紅葡萄酒作為基本成分之一物質(zhì)的已知有益性能，對白藜蘆醇進(jìn)行了大量研究(生命科學(xué)(LifeSci.)71，2145-52，2002)。許多研究表明白藜蘆醇具有抗致癌物活性，其作用機(jī)理可做如下分類：抑制轉(zhuǎn)錄因子NF-kB的活性，它可調(diào)節(jié)涉及炎性和致癌性過程的不同基因表達(dá)(《柳葉刀》(Lancet)341，1103-1104，1993；《科學(xué)》(Science)，275，218.220，1997；《美國科學(xué)院院報(bào)》(Proc.Natl.Acad.Sc.)94，14138-14143，1997；《生命科學(xué)》(LifeScience)61，2103-2110，1997；《英國藥物學(xué)雜志》(Brit.J.Pharm.)126，673-680，1999；《免疫學(xué)雜志》(J.Imm.)164，6509-6519，2000)；抑制不同蛋白質(zhì)，包括蛋白酶C(Stewart，J.R.，Ward，N.E.，Ioannides，C.G.和O'Brian，C.A.，“白藜蘆醇通過新的機(jī)理優(yōu)選地阻止輔因子依耐性、富精氨酸蛋白基質(zhì)的蛋白酶C-催化的磷酸化作用”《生物化學(xué)》1999，38，13244-13251)，核苷酸還原酶(《歐洲生物化學(xué)聯(lián)合會(huì)雜志》(FEBSLett.)，421，277-279，1998)和哺乳動(dòng)物上皮細(xì)胞的環(huán)加氧酶-2(COX-2)(SteinmetzKL，TysonCK，MeierhenryEF，SpaldingJW，MirsalisJC.“體內(nèi)或體外暴露于美沙吡林后檢查干細(xì)胞基因毒性、毒力和形態(tài)變性”《致癌作用》(Carcinogenesis)1988年1月；9(6)：959–963))；活化半胱氨酸蛋白酶2，3，6和9(《美國試驗(yàn)生物學(xué)會(huì)雜志》(FASEBJ.)1613-1615,2000)和調(diào)節(jié)基因p53(是已知的腫瘤抑制基因)(SoleasGJ，GoldbergDM，GrassL，LevesqueM，DiamandisEP.“葡萄酒多酚可調(diào)節(jié)p53基因在人類癌癥細(xì)胞系中的表達(dá)？”《臨床生物化學(xué)》(ClinBiochem)2001；34：415-420)。2000年公布的《自由基研究》(FreeRadic.Res.)卷33，105到114頁描述了白藜蘆醇的抗氧化活性及其消除不同物質(zhì)產(chǎn)生的損害效果和/或?qū)е录?xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激條件的能力。EP1567137B1描述了白藜蘆醇治療流感病毒疾病的用途。WO2011161501描述了粉末或顆粒固體組合物，其中活性試劑在水中不溶或難溶于水和/或熱不穩(wěn)定和/或具有令人不快的感官特性。描述的方法是在包含甘油三酸酯、聚氧乙烯山梨醇酐和抗壞血酸棕櫚酸酯的脂基質(zhì)中的分散體。專利申請WO2011120530公開了包含多孔氧化硅(二氧化硅)和可裝載藥用油(魚油是其中之一)的釋放促進(jìn)劑的固體多孔惰性載體組合物。EP2517697描述了包含n-3PUFA并且結(jié)合一個(gè)或更多活性成分的組合物的制備示例。具體地，描述了包括一個(gè)或更多n-3PUFA烷基酯他丁類的微囊懸浮劑，其中他丁類利用可輕易在胃腸介質(zhì)中分解的高分子膜分離而不和n-3PUFA烷基酯接觸。所屬領(lǐng)域已知的大多數(shù)方法可用于制備包括白藜蘆醇和n-3PUFA的組合物，包括耗時(shí)和昂貴的微型膠囊化技術(shù)或涂覆工藝。這些研究集中于發(fā)現(xiàn)釋放油相內(nèi)單劑量白藜蘆醇的合適方法。所屬領(lǐng)域還沒有一種包括歐米茄-3多不飽和脂肪酸和白藜蘆醇固體組合物，并且其中n-3PUFA在室溫下、在高達(dá)6個(gè)月的情況下仍穩(wěn)定的固體組合物。實(shí)際上，雖然白藜蘆醇作為防止或減少n-3PUFA降解的穩(wěn)定劑保持了非常好的品質(zhì)，但是它在大多數(shù)油相(用于制備藥物和營養(yǎng)物質(zhì)的方案)中不溶解。即使加入特定乳化劑和/或助表面活性劑也不能有效獲得所希望的目的?？紤]到包括有固體n-3PUFA的制劑的優(yōu)勢，以制備可與多種保健品(尤其是干的提取物或不溶于n-3PUFA的情況下)組合的制劑，愈來愈需要找到一種方法以通過簡單、快捷以及具有經(jīng)濟(jì)效益的工序來制備當(dāng)中n-3PUFA不被降解的組合物。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：現(xiàn)在驚奇地發(fā)現(xiàn)當(dāng)n-3PUFA吸附于惰性基質(zhì)，加入合適劑量的白藜蘆醇或包含白藜蘆醇的天然提取物使制劑在室溫下、至少6個(gè)月內(nèi)保持了穩(wěn)定性。因此，本發(fā)明的目的是固體組合物包括吸附于惰性基質(zhì)上的歐米茄-3多不飽和脂肪酸(n-3PUFA)和白藜蘆醇，所述惰性基質(zhì)從由硅酸鋁鎂細(xì)小超輕顆?；蚨趸栎d體構(gòu)成的組中選出。其中，于25℃、60％RH下、6個(gè)月后n-3PUFA的回收率至少是96％，于30℃、60％RH下、3個(gè)月后n-3PUFA的回收率至少是95％，于40℃、70％RH下、3個(gè)月后n-3PUFA的回收率至少是90％。本發(fā)明一個(gè)實(shí)施例中，歐米茄-3多不飽和脂肪酸(n-3PUFA)從由二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)或它們的烷基酯以及其混合物構(gòu)成的組中選出，其中烷基酯從由酯、甲基酯和丙基酯構(gòu)成的組中選出。進(jìn)一步地，本發(fā)明的實(shí)施例中歐米茄-3多不飽和脂肪酸(n-3PUFA)為脂肪酸的混合物，所述EPA和DHA的含量以重量計(jì)算，占總體脂肪酸重量的75％到95％之間，優(yōu)選至少占總體脂肪酸重量的85％，其中n-3PUFA的總量以重量計(jì)算，至少占總體脂肪酸重量的90％，二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸之間的比例為0.5到2之間；本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施例中，歐米茄-3多不飽和脂肪酸(n-3PUFA)為EPA和DHA的乙基酯的混合物，EPA和DHA的乙基酯的比例為0.9到1.5之間。以重量計(jì)算，EPA乙基酯的含量占總體脂肪酸重量的40到51％之間，并且DHA乙基酯的含量占總體脂肪酸重量的34到45％之間；本發(fā)明另一個(gè)實(shí)施例中的惰性基質(zhì)選自US2和XDP。進(jìn)一步地，本發(fā)明的目的是包括吸附于惰性基質(zhì)上的歐米茄-3多不飽和脂肪酸(n-3PUFA)和白藜蘆醇的固體組合物，所述惰性基質(zhì)從由硅酸鋁鎂細(xì)小超輕顆?；蚨趸栎d體構(gòu)成的組中選出，其中于25℃、6個(gè)月后歐米茄-3的回收率至少是96％；于30℃、3個(gè)月后歐米茄-3的回收率至少是95％；或于40℃、3個(gè)月后歐米茄-3的回收率至少是90％，其形式為膳食或營養(yǎng)補(bǔ)充劑或口服給藥的藥物。進(jìn)一步地，本發(fā)明上述組合物的實(shí)施例中，歐米茄-3多不飽和脂肪酸(n-3PUFA)含量在0.5到1.0g之間，優(yōu)選0.8到0.9g之間，更優(yōu)選是0.9g；進(jìn)一步地，本發(fā)明上述組合物的實(shí)施例中，其中歐米茄-3多不飽和脂肪酸(n-3PUFA)和白藜蘆醇的比例在0.01到0.1之間，優(yōu)選為0.02。根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的實(shí)施例，所述組合物還包括一種或更多維生素、礦物、輔酶、抗氧化劑和/或植物提取物。根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的實(shí)施例，所述組合物還包括至少一種藥學(xué)可接受的載體或賦形劑。本發(fā)明的另一目的在於，上述組合物的特征在于其通過軟明膠膠囊密封，可選地具有腸溶衣以供口服給藥。本發(fā)明的另一目的在於，上述組合物在用于預(yù)防或治療由脂代謝混亂和/或血小板凝集增加導(dǎo)致的心血管疾病，由自由基導(dǎo)致?lián)p傷和/或病毒性疾病的用途，所述損傷從動(dòng)脈粥樣硬化、癌癥、炎性關(guān)節(jié)病、哮喘、糖尿病、老年癡呆癥和退化性能眼疾構(gòu)成的組中選出。根據(jù)本發(fā)明的適合使用的藥物組合物通常包括至少一種藥學(xué)可接受載體和/或一種稀釋劑和/或一種表面活性劑和/或一種增稠劑和/或一種粘合劑和/或一種潤滑劑和/或一種芳香劑和/或一種染色劑和/或一種穩(wěn)定劑，它們可被所屬領(lǐng)域?qū)＜逸p易選擇。本發(fā)明的組合物，和通常使用的助劑、載體、稀釋劑或賦形劑一起制備為藥物固定組合物和其單位劑量。這樣的藥學(xué)組合物可用作固體，例如藥片或填注膠囊，都口服使用?？诜M合物也可采用本體懸浮液或粉末的形式。然而，更普遍地，組合物呈現(xiàn)為單位劑量形式以有利于準(zhǔn)確給藥。術(shù)語“單位劑量形式”意指適合用作人類對象和其他哺乳動(dòng)物的單一劑量的有形獨(dú)立的單元，結(jié)合合適藥學(xué)賦形劑，計(jì)算每個(gè)單位(包含預(yù)先設(shè)定劑量的活性物料)以產(chǎn)生需要的治療效果。進(jìn)一步的物料和加工技術(shù)及其類似物在《雷明頓藥物科學(xué)》(第20版，2000，默克出版社，伊斯頓，賓夕法尼亞)的第5部分陳述，它通過引用并入本文。根據(jù)本發(fā)明的組合物也可配制為食品補(bǔ)充劑或膳食補(bǔ)充劑，它構(gòu)成本發(fā)明另一個(gè)目的。根據(jù)本發(fā)明的組合物包括所屬領(lǐng)域已知并且已在臨床實(shí)踐中使用的活性成分。因此，它們很容易獲得，因?yàn)樗鼈兪且呀?jīng)市售一段時(shí)間的產(chǎn)品并且具有適合人類或動(dòng)物服用的等級。白藜蘆醇(3,5,4'-三羥基-反-二苯基乙烯)是芪類，一種天然多酚和由幾種植物自然地產(chǎn)生(受到諸如細(xì)菌或真菌的病原體襲擊時(shí))的植物抗毒素。術(shù)語“歐米茄-3多不飽和脂肪酸”(此處縮寫為“n-3PUFA”)涉及長鏈多不飽和脂肪酸族，通常是C16-C24，具體為具有C20-C22鏈并且它們通常在n-3位置具有碳-碳雙鍵(即脂肪酸甲基末端開始的第三個(gè)鍵)。下表報(bào)道了自然界發(fā)現(xiàn)歐米茄-3多不飽和脂肪酸最常見的示例和它們的指定名稱。最優(yōu)選的是全部-順式-5,8,11,14,17-二十碳五烯酸(EPA)和全部-順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸(DHA)。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的n-3PUFA是脂肪酸的混合物，該脂肪酸的混合物具有高含量的EPA和DHA，例如，以重量計(jì)算，EPA和DHA占總脂肪酸重量的含量高于25％，優(yōu)選占總脂肪酸重量的大約30％到大約100％，具體占總脂肪酸重量的75％到95％之間，更優(yōu)選占總脂肪酸重量的85％。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的總含量n-3PUFA是脂肪酸的混合物，以重量計(jì)算并且基于總脂肪酸重量，它至少具有90％的n-3PUFA。如本文使用的，術(shù)語“PUFA”和“n-3PUFA”意指包括其對應(yīng)的C1-C3烷基酯，優(yōu)選為乙基酯和/或他們的鹽(具有藥學(xué)可接受的堿，例如氫氧化鈉、賴氨酸、精氨酸或諸如膽堿的氨基醇)。本發(fā)明的組合物是口服的，具體為軟明膠膠囊的形式。單位劑量通常包括100-1000mg歐米茄-3系列的多不飽和脂肪酸，優(yōu)選500-1000mg或300-500mg，總體劑量通常是每天大約0.1-3.0g，優(yōu)選是每天0.3-2.0g，最優(yōu)選是每天1.0g。作為活性成分并且能根據(jù)本發(fā)明而使用以及包含能滿足上述技術(shù)參數(shù)的n-3PUFA的特定藥物已經(jīng)能在市場上買到。為了達(dá)到需要的血液水平，這種數(shù)量的產(chǎn)品可采取幾種日常分開的劑量或優(yōu)選單一劑量的形式服用。當(dāng)然，臨床醫(yī)生可根據(jù)患者病情、年齡和體重改變施用產(chǎn)品(或具有另一種治療劑的混合物)的數(shù)量?？诜苿┑钠渌愋鸵策m合于本發(fā)明的目的，例如硬膠囊或藥片，其中多不飽和脂肪酸吸附在固相支持物上。《歐洲藥典2000》(EuropeanPharmacopoiea2000(EuPh.2000))圖解的組合物含量大于或等于90wt％的歐米茄-3多不飽和脂肪酸(n-3PUFA)和不飽和脂肪酸乙基酯，EPA和DHA乙基酯代表了其大于或等于80wt％的含量，因而也適合于本發(fā)明的目的。EPA和DHA最優(yōu)選的比例是大約0.6-1.1/1.3-1.8，具體為0.9到1.5之間。優(yōu)選EPA(作為乙基酯)的含量以重量計(jì)算，占總脂肪酸重量的40％到51％之間，并且DHA(作為乙基酯)的含量以重量計(jì)算，占總脂肪酸重量的34％到45％之間。U.S.-2(化學(xué)式Al2O3.MgO.1.7SiO2.xH2O，CAS號12511-31-08)是硅酸鎂鋁細(xì)小超輕顆粒并且認(rèn)為是可提高藥物治療的多功能賦形劑。由于其具有大面積和多孔性質(zhì)，它可吸收高負(fù)載的油或水并且可物理性地壓縮為高品質(zhì)藥片。XDP二氧化硅載體是將液體轉(zhuǎn)化為自由流動(dòng)固體而設(shè)計(jì)的最佳孔介材料，特別是油性活性物和脂基系統(tǒng)。保持吸收能力、密度和釋放之間的平衡可增強(qiáng)API裝載和在液體-固體制劑中的解吸并且簡化脂基藥物釋放系統(tǒng)和API的轉(zhuǎn)化而成為自由流動(dòng)粉末以制備為固體劑量形式。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施例中，組合物具有單一形式，其中活性成分呈現(xiàn)為單一藥學(xué)形式，具體為吸附在惰性支持物上。根據(jù)本發(fā)明的組合物，和活性成分一起，可選地包括至少一種藥學(xué)可接受載體或賦形劑。本發(fā)明根據(jù)下述示例，但不限制于這些示例而進(jìn)行，從而顯示其實(shí)質(zhì)優(yōu)勢和意料不到的效果。具體實(shí)施方式示例物料和方法：為了本發(fā)明的目的，使用了下述物料：·歐米茄-3多不飽和脂肪酸(n-3PUFA)是多不飽和脂肪酸的乙基酯的混合物，它是Pronova，挪威生產(chǎn)的產(chǎn)品，EPA和DHA含量大于85％，EPA/DHA比例在0.9到1.5之間；·白藜蘆醇由Royalmount制藥公司(加拿大，蒙特利爾)提供；·所使用的硅酸鋁鎂也是已知的它由Fuji化學(xué)工業(yè)公司(FujiChemicalIndustryCo.，Ltd，日本)提供；·生育酚由西格瑪-奧德里奇S.r.l(米蘭，意大利)提供；·SyloidXDP由Grace化學(xué)品公司(GracePerformanceChemicals)(德國，沃姆斯)提供；·輔酶Q10由西格瑪-奧德里奇S.r.l(米蘭，意大利)提供；·抗壞血酸棕櫚酸酯由西格瑪-奧德里奇S.r.l(米蘭，意大利)提供；·硫辛酸由西格瑪-奧德里奇S.r.l(米蘭，意大利)提供；·抗壞血酸由西格瑪-奧德里奇S.r.l(米蘭，意大利)提供；·羥基酪醇由Probeltebio(西班牙，穆爾西亞)提供；·表焙兒茶素由西格瑪-奧德里奇S.r.l(米蘭，意大利)提供；穩(wěn)定性分析：制劑分為3組并且分別于25℃和60％RH(相對濕度)下放置3到6個(gè)月，于30℃和60％RH下放置3到6個(gè)月，于40℃和70％RH下放置3到6個(gè)月。為了評估制劑的穩(wěn)定性，進(jìn)行HPLC分析。它利用ColumnSymmetryC-184.6x150mm，采用CH3CN/CH3OH/H2O45/45/10溶液作為洗脫劑，流速為1ml/min并且采用質(zhì)譜分析儀進(jìn)行。EPA和DHA的百分?jǐn)?shù)含量以重量％表示。也進(jìn)行了其他穩(wěn)定性測試：根據(jù)下述步驟進(jìn)行對輻射和高溫誘導(dǎo)的自氧化的穩(wěn)定性分析：-輻射誘導(dǎo)自氧化：100mg制劑分散在5cm直徑培養(yǎng)皿，它放置在離光源12cm遠(yuǎn)的位置并且曝光24小時(shí)。光源由13W(發(fā)射光譜是300到640nm，峰為440，490，540，590和610nm)的燈泡構(gòu)成。測試于22℃和60％RH下進(jìn)行。-高溫誘導(dǎo)的自氧化：100mg制劑放置在琥珀容器中并且于60℃在烘箱中放置1個(gè)月。制劑1-n-3PUFA：5.0g-NeusilinU.S.-2：5.0gn-3PUFA以小分量形式加入到NeusilinU.S.-2，人工混合以獲得均相固體。如上描述的，穩(wěn)定性測試于25℃和60％RH下、30℃和60％RH下和40℃和70％RH下以1、3和6個(gè)月為期進(jìn)行。表1概括獲得的結(jié)果表1為了評價(jià)對歐米茄-3降解的抑制，制備了其他制劑，加入針對制劑1的天然抗氧化劑。表2繼續(xù)概括了輻射誘導(dǎo)的自氧化后穩(wěn)定性測試結(jié)果。表2表3繼續(xù)概括了高溫誘導(dǎo)的自氧化1個(gè)月后穩(wěn)定性測試結(jié)果。表3抗氧化劑溫度(℃)％w/w抗氧化劑EPA回收率(％)DHA回收率(％)未使用60-5245白藜蘆醇601.146864輔酶Q10604.326465抗壞血酸棕櫚酸酯602.075856α-生育酚602.155755抗壞血酸600.885654硫辛酸601.005250羥基酪醇600.774036橄欖苦貳602.703835表焙兒茶素602.303530進(jìn)行這些初步穩(wěn)定性測試后，利用輔酶Q10、α-生育酚和白藜蘆醇作為抗氧化劑制備了其他制劑。制劑2-n-3PUFA：4.9g-α-生育酚：0.1g-NeusilinU.S.-2：5.0gα-生育酚加入到n-3PUFA，然后溶液于22℃、60％RH下、600rpm的速度機(jī)械攪拌3小時(shí)；觀察到澄清溶液。溶液隨后小部分地加入到NeusilinU.S.-2，人工混合以獲得均相固體。如上描述的，于25℃、30℃和40℃進(jìn)行了3個(gè)月的穩(wěn)定性測試。表4概括了獲得的結(jié)果。制劑3-n-3PUFA：4.9g-輔酶Q10：0.1g-NeusilinU.S.-2：5.0g輔酶Q10加入到n-3PUFA，然后溶液于22℃、60％RH下、600rpm的速度機(jī)械攪拌1小時(shí)；觀察到澄清溶液。溶液隨后小部分地加入到NeusilinU.S.-2，人工混合以獲得均相固體。如上描述的，于25℃、30℃和40℃進(jìn)行了3個(gè)月的穩(wěn)定性測試。表4概括了獲得的結(jié)果。制劑4-PUFA4.9g-白藜蘆醇0.1g-NeusilinU.S.-25.0gn-3PUFA以小部分形式加入到NeusilinU.S.-2，人工混合以獲得均相固體。隨后加入白藜蘆醇并且制劑再次混合以獲得均相固體。如上描述的，于25℃、30℃和40℃進(jìn)行了3個(gè)月的穩(wěn)定性測試。表4概括了獲得的結(jié)果。表4為了評估白藜蘆醇用量和抗氧化劑功效之間的關(guān)系，制備了另一種制劑。制劑5-PUFA：4.9gr-白藜蘆醇：0.12gr-NeusilinU.S.-2：5grn-3PUFA以小部分形式加入到NeusilinU.S.-2，人工混合以獲得均相固體。隨后加入白藜蘆醇并且制劑再次混合以獲得均相固體。如上描述的，于25℃進(jìn)行3到6個(gè)月的穩(wěn)定性測試。表5概括了獲得的結(jié)果。表5時(shí)間(月)溫度(℃)EPA回收率(％)DHA回收率(％)32599956259894也測試了另一個(gè)惰性固體支持物。制劑6-PUFA：1.0g-SyloidXDP：1.0gn-3PUFA以小部分形式加入到SyloidXDP，人工混合以獲得均相固體。表6報(bào)道了輻射和高溫誘導(dǎo)的自氧化后進(jìn)行穩(wěn)定性測試結(jié)果。為了評價(jià)其穩(wěn)定性效果，即使在這種情況下，也制備了包含白藜蘆醇的制劑。制劑7-PUFA：0.5g-白藜蘆醇：0.01g-SyloidXDP：0.5gn-3PUFA以小部分形式加入到SyloidXDP，人工混合以獲得均相固體。隨后加入白藜蘆醇并且制劑再次混合以獲得均相固體。表6報(bào)道了輻射和高溫誘導(dǎo)的自氧化后進(jìn)行穩(wěn)定性測試結(jié)果。表6結(jié)果討論：本發(fā)明記錄的數(shù)據(jù)表明白藜蘆醇是天然的抗氧化劑，它顯示其對固體制劑中歐米茄-3降解具有最好的穩(wěn)定效果。實(shí)際上，雖然根據(jù)表1的結(jié)果可以觀察到3個(gè)月后EPA和DHA大量降解，但是根據(jù)初次測試，顯而易見的是白藜蘆醇、輔酶Q10、α-生育酚和抗壞血酸棕櫚酸酯可提高穩(wěn)定性。但是，如表4數(shù)據(jù)所顯示的，令人驚奇的是，白藜蘆醇是唯一可更長時(shí)間內(nèi)保持穩(wěn)定固體制劑(包含歐米茄-3)的天然抗氧化劑；實(shí)際上，制劑(包含1％白藜蘆醇)中歐米茄-3的平均回收率于40℃、3個(gè)月后是90％而制劑(包含1％α-生育酚)的回收率僅為45％；白藜蘆醇的抗氧化能力認(rèn)為是α-生育酚的兩倍，并且這種差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著。抗氧化劑功效和所用白藜蘆醇含量之間的正比例表明了另外一個(gè)優(yōu)勢：從表5的數(shù)據(jù)可看出，可注意到的是當(dāng)白藜蘆醇用量從1％增加到1.2％，6個(gè)月后n-3PUFA的回收率保持在96％。制備本組合物的工藝簡單并且特別適合于工業(yè)應(yīng)用。當(dāng)前第1頁1 2 3