1.一種膠原基硬腦膜的制備方法,所述的硬腦膜包括以脫細胞豬真皮為基質的雙層結構,其中面向大腦皮層一面為具有優(yōu)良生物相容性的聚乙二醇-丙三醇交聯(lián)共聚復合膠原液形成膠原復合膠封閉膜,同時背向大腦皮層一面為脫細胞豬真皮支架或高孔隙度的膠原膜,該方法包括以下步驟:
(1)脫細胞豬真皮支架的制備:將生態(tài)豬皮剖層,采用消毒、表面清洗等技術去除原材料熱源;使用平平加、乙醇等試劑進行脫脂處理;采用復合酶脫細胞工藝和Triton-100清洗工藝相結合的方法,去除細胞成分;使用酸堿結合法進一步對所得脫細胞豬真皮基質進行去除熱源處理;凍干備用;
(2)聚乙二醇和丙三醇進行共聚交聯(lián)反應復合0.5%-1%(w/w)膠原液得到一種復合膠原膜;采用水平流涎和水平噴涂等方法將其涂敷在脫細胞真皮基質上,控制壓力、噴涂距離、噴涂速率等工藝參數(shù),使涂層均勻分布,通過室溫晾干,恒溫干燥固化,即可在脫細胞豬真皮表面形成一層均勻的封閉膜,得到可有效防止腦脊液滲漏的膠原基復合硬腦膜;
(3)配制洗脫液,將上述所得膠原基復合膜層,通過去離子水,去離子水與乙醇的互配物浸泡洗滌,以去除殘留物質,再經(jīng)冷凍干燥成型,即得可有效防止腦脊液滲漏的雙層復合結構之膠原基硬腦膜;
通過上述方法制備的膠原基硬腦膜經(jīng)過滅菌、包裝后儲存。
2.如權利要求1 所述的膠原基硬腦膜的制備方法,其特征在于所述的采用過氧化氫滅活病毒,該步驟在恒溫超聲波清洗器或其他可震蕩的設備中進行,其中過氧化氫的質量濃度為0.05-3.0%,滅活時間為1h-3h,溫度范圍為10-40℃。
3.如權利要求1 所述的膠原基硬腦膜的制備方法,其特征在于所述的使用表面活性劑(平平加或SDS)、乙醇一種或一種以上試劑進行脫脂處理,其中表面活性劑的質量體積比為2%-10%,乙醇的液比為1%-15%。
4.如權利要求1 所述的膠原基硬腦膜的制備方法,其特征在于采用生物胰酶脫細胞工藝和Triton-100清洗工藝相結合的方法,去除細胞成分,其中生物胰酶的質量濃度為0.01%-5%,Triton-100的質量濃度為0.25-5%。
5.如權利要求1 所述的膠原基硬腦膜的制備方法,其特征在于使用酸堿結合法對所得脫細胞豬真皮基質進行去除熱源處理,其中使用的酸為鹽酸,堿為氫氧化鈉。