一種治療關(guān)節(jié)炎引起的關(guān)節(jié)疼痛的藥物及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種治療關(guān)節(jié)疼痛的藥物，該藥物包括有效藥物成份和藥學(xué)上可接受的輔料，其中，所述有效藥物成份為天山雪蓮的乙醇浸出物。天山雪蓮用體積百分濃度為70-90%的乙醇浸漬；浸漬液濃縮，調(diào)節(jié)醇體積含量至75-85%，醇沉，過濾，濾液經(jīng)減壓回收乙醇后，得乙醇浸出物；乙醇浸出物加水，靜置沉淀后，再加入藥學(xué)上可接受的輔料得到所述的藥物。本發(fā)明的藥物可促進(jìn)細(xì)胞免疫和抑制體液免疫；對(duì)佐劑性關(guān)節(jié)炎原發(fā)性和繼發(fā)性損害均有保護(hù)作用。
【專利說明】一種治療關(guān)節(jié)炎引起的關(guān)節(jié)疼痛的藥物及其制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種治療關(guān)節(jié)疼痛的藥物，特別是由急、慢性風(fēng)濕 性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎及骨關(guān)節(jié)炎引起的關(guān)節(jié)疼痛，以及該藥物的制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是一種常見的急性或慢性結(jié)締組織炎癥。可反復(fù)發(fā)作并累及心臟。 臨床以關(guān)節(jié)和肌肉游走性酸楚、重著、疼痛為特征，屬變態(tài)反應(yīng)性疾病，是風(fēng)濕熱的主要表 現(xiàn)之一，多以急性發(fā)熱及關(guān)節(jié)疼痛起病。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（Rheumatoid arthritis，RA)是一種 以慢性侵蝕性關(guān)節(jié)炎為特征的全身性自身免疫病。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的病變特點(diǎn)為滑膜炎，以 及由此造成的關(guān)節(jié)軟骨和骨質(zhì)破壞，最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形。如果不經(jīng)過正規(guī)治療，約75%的患 者在3年內(nèi)出現(xiàn)殘廢。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎分布于世界各地，在不同人群中的患病率為0. 18%? 1. 07%。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎在各年齡中皆可發(fā)病，高峰年齡在30?50歲左右，一般女性發(fā)病多 于男性。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國風(fēng)濕性、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病患者多達(dá)1000多萬人，每年醫(yī)療費(fèi)用支出 以7%的速度遞增。
[0003] 天山雪蓮中的主要化學(xué)成分為黃酮類化合物，現(xiàn)在已經(jīng)鑒定出的有14種，天山雪 蓮含有生物堿、黃酮、內(nèi)脂、植物留醇、揮發(fā)油、萜類、木質(zhì)素和還原糖等成分，并富含氨基 酸，必需氨基酸種類齊全而且含量較高。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種治療關(guān)節(jié)炎引起的關(guān)節(jié)疼痛的藥物及其制備方法。
[0005] 一種治療關(guān)節(jié)炎引起的關(guān)節(jié)疼痛的藥物，包括有效藥物成份和藥學(xué)上可接受的輔 料，其中，所述有效藥物成份為天山雪蓮的乙醇浸出物。
[0006] 進(jìn)一步，所述乙醇浸出物通過包括如下步驟的方法得到：
[0007] (1)天山雪蓮用體積百分濃度為70-90%的乙醇浸漬；
[0008] (2)浸漬液濃縮，調(diào)節(jié)醇體積含量至75-85%，醇沉，過濾，濾液經(jīng)減壓回收乙醇 后，得乙醇浸出物。
[0009] 進(jìn)一步，浸漬時(shí)料液比為1 : (6-12)。
[0010] 制備上述治療關(guān)節(jié)炎引起的關(guān)節(jié)疼痛的藥物的方法，包括如下步驟：
[0011] (1)天山雪蓮用體積百分濃度為70-90%的乙醇浸漬；
[0012] (2)浸漬液濃縮，調(diào)節(jié)醇體積含量至75-85 %，醇沉，過濾，濾液經(jīng)減壓回收乙醇 后，得乙醇浸出物；
[0013] (3)乙醇浸出物加水，靜置沉淀后，再加入藥學(xué)上可接受的輔料。
[0014] 進(jìn)一步，步驟（2)浸漬液濃縮至相對(duì)密度為1. 06-1. 15。
[0015] 進(jìn)一步，步驟（3)中，先將乙醇浸出物加熱至60_85°C，然后加水，滅菌，再進(jìn)行靜 置沉淀。
[0016] 進(jìn)一步，步驟（3)加入藥學(xué)上可接受的輔料，制成口服液或注射液。

【具體實(shí)施方式】
[0017] 以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說明。
[0018] 取天山雪蓮0. 5-2重量份置于提取容器中，加6-12倍量體積百分濃度為70-90% 的乙醇，浸漬2?3次，每次浸漬3-16天，合并浸漬液，浸漬液濃縮成相對(duì)密度為1. 06-1. 15 的藥液；用95%乙醇調(diào)節(jié)藥液中的醇含量，使藥液的乙醇體積含量量控制在75-85%，攪 勻，藥液溫度保持在15_25°C，醇沉7天；過濾，濃縮至相對(duì)密度為1. 06-1. 15,再減壓回收乙 醇，即得乙醇浸出物。然后所得乙醇浸出物加熱至60-85°C，加入注射用水至天山雪蓮藥材 與藥液比為1:1-1:3,冷卻至40-50°C，灌裝，置于IKTC下滅菌45分鐘，靜置沉淀3個(gè)月以 上，濾過，濾液按常規(guī)制藥方法制成口服液；或向?yàn)V液加入聚山梨酯-80、氯化鈉（0. 9%等 滲），攪拌均勻，用40%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7. 5?8. 5,用微孔濾膜（0. 45-0. 2 μ m) 濾過，灌封，滅菌，制成小容量雪蓮注射液。
[0019] 藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)
[0020] 1.材料
[0021] I. 1藥品與試劑受試藥：雪蓮注射液，紅棕色針劑，規(guī)格2. Oml/支（相當(dāng)于0.6-2g 天山雪蓮藥材），肌內(nèi)注射；陽性對(duì)照藥：正清風(fēng)痛寧注射液，無色針劑，2. Oml/支，肌肉注 射。脂多糖（LPS)，SIGMA公司；刀豆球蛋白A(ConA)，北京醫(yī)藥站進(jìn)口分裝；RPMI-1640,美 國LIFE CHN0L0GIES公司；MTT，德國MERCK KGaA公司；二甲基亞砜（DMSO)，北京化工廠出 品；Freund's完全佐劑，SIGMA公司。
[0022] 1. 2動(dòng)物NIH小白鼠，Wistar大鼠，豚鼠，均由新疆醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，新 醫(yī)動(dòng)字 syxk (新）2003-0001。
[0023] 1. 3儀器722型分光光度計(jì)，上海第三分析儀器廠出品。SW-CT-IF凈化工作臺(tái)， 蘇凈集團(tuán)安秦空氣技術(shù)有限公司；2123TC-C02培養(yǎng)箱，美國SHELDONMANUFACTURING INC ; OLYMPUS生物顯微鏡，日本光電工業(yè)株氏會(huì)社；550型酶標(biāo)儀，BIORAD公司；電子天平， Sartorius 公司。
[0024] 1. 4試液配制
[0025] Hank's 儲(chǔ)備液：KC1 20. 0g，KH2PO4 0· 30g，NaCl 40. 0g，Na2HPO4 0· 24g，葡萄糖 5. 0g，MgSO4 · 7H20 I. 0g，CaCl2 7. 0g，酚紅 0· 5g。
[0026] 依次將上述試劑溶于重蒸水并補(bǔ)足到1L，以NaOH(重蒸水配制）調(diào)pH至6. 7左 右，過濾除菌，即為5倍濃縮的儲(chǔ)備液。應(yīng)用時(shí)，取1份儲(chǔ)備液加4份重蒸水混合成pH7. 2 的HBSS液。
[0027] RPMI-1640 營養(yǎng)液取 RPMI1640 培養(yǎng)基 10. 4g，HEPES 5. 9g，谷氨酰胺 300mg，丙酮 酸鈉0. llg，環(huán)丙沙星注射液20ml，NaHCO3 2. Og溶于重蒸水并補(bǔ)加至1000ml，以似!10)3調(diào) pH值至7. 1左右，再加滅活的NBS (約相當(dāng)于總體積的15% )，以蔡氏濾器濾過除菌，無菌分 裝，置0-4°C保存。
[0028] MTT顯色液：MTT以PBS配成5mg/ml的溶液，濾過除菌，置0-4°C保存。
[0029] 2.實(shí)驗(yàn)方法
[0030] 2. 1對(duì)小鼠 B淋巴細(xì)胞增殖的影響：
[0031] 方法：（1)常規(guī)制備脾細(xì)胞懸液
[0032] 取NIH小鼠摘眼球放血處死，無菌取脾，剔除脂肪及結(jié)締組織，置于100目尼龍布 上剪碎，尼龍布置內(nèi)盛IOml冷Hank's液的培養(yǎng)皿上，以玻棒輕研脾碎塊，收集細(xì)胞液，離心 (lOOOrpm，5min)，棄上清，經(jīng)低滲（0· 8 %的NH4Cl處理）除去紅細(xì)胞，作細(xì)胞計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞 濃度為IX l〇6/ml，以上過程均在0-4°C進(jìn)行。
[0033] (2)樣品及LPS均以RPMI-1640液配成所需濃度，于96孔板按表1加樣：
[0034] 表 1
[0035]

【權(quán)利要求】
1. 一種治療關(guān)節(jié)炎引起的關(guān)節(jié)疼痛的藥物，包括有效藥物成份和藥學(xué)上可接受的輔 料，其中，所述有效藥物成份為天山雪蓮的乙醇浸出物。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述治療關(guān)節(jié)炎引起的關(guān)節(jié)疼痛的藥物，其特征在于，所述乙醇浸 出物通過包括如下步驟的方法得到： (1) 天山雪蓮用體積百分濃度為70-90%的乙醇浸漬； (2) 浸漬液濃縮，調(diào)節(jié)醇體積含量至75-85%，醇沉，過濾，濾液經(jīng)減壓回收乙醇后，得乙 醇浸出物。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述治療關(guān)節(jié)炎引起的關(guān)節(jié)疼痛的藥物，其特征在于，浸漬時(shí)料液 比為 1 : (6-12)。
4. 權(quán)利要求1所述治療關(guān)節(jié)炎引起的關(guān)節(jié)疼痛的藥物的制備方法，包括如下步驟： (1) 天山雪蓮用體積百分濃度為70-90%的乙醇浸漬； (2) 浸漬液濃縮，調(diào)節(jié)醇體積含量至75-85%，醇沉，過濾，濾液經(jīng)減壓回收乙醇后，得乙 醇浸出物； (3) 乙醇浸出物加水，靜置沉淀后，再加入藥學(xué)上可接受的輔料。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟（2)浸漬液濃縮至相對(duì)密度為 1. 06-1. 15〇
6. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟（3)中，先將乙醇浸出物加熱至 60-85 °C，然后加水，滅菌，再進(jìn)行靜置沉淀。
7. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟（3)加入藥學(xué)上可接受的輔料， 制成口服液或注射液。
【文檔編號(hào)】A61P19/02GK104435043SQ201410738662
【公開日】2015年3月25日 申請(qǐng)日期:2014年12月5日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月5日
【發(fā)明者】黃磊, 何隨梅, 冷英莉, 趙燕雙, 王歡 申請(qǐng)人:新疆銀朵蘭維藥股份有限公司