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金蓮花總黃酮在制備治療瘙癢性皮膚病的藥物中的應(yīng)用的制作方法

文檔序號(hào):770708閱讀:329來(lái)源:國(guó)知局
金蓮花總黃酮在制備治療瘙癢性皮膚病的藥物中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了金蓮花總黃酮在制備治療瘙癢性皮膚病的藥物中的應(yīng)用,拓寬了金蓮花總黃酮的應(yīng)用范圍,并且為瘙癢性皮膚病的治療提供了新的藥物;經(jīng)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)可以看出金蓮花總黃酮對(duì)小鼠慢性濕疹模型有很好的防治作用,對(duì)2、4-二硝基氟苯所致小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)有明顯抑制作用,對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹有明顯的抗炎作用,對(duì)冰醋酸致小鼠毛細(xì)血管通透性增加有顯著抑制作用,并能對(duì)磷酸組胺所致豚鼠瘙癢較好的對(duì)抗作用,且毒性低,使用安全,具有較好的應(yīng)用前景。
【專利說(shuō)明】金蓮花總黃酮在制備治療瘙癢性皮膚病的藥物中的應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域,具體涉及金蓮花總黃酮在制備治療瘙癢性皮膚病的藥物中 的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002] 瘙癢性皮膚病是指以皮膚瘙癢為主要特征的一組皮膚病,包括濕疹、銀屑病、丘疹 性蕁麻疹、蟲(chóng)咬皮炎、毛發(fā)紅糠疹等。近年來(lái),瘙癢性皮膚病的發(fā)病率呈上升趨勢(shì),這與氣候 環(huán)境變化,大量化學(xué)制品在生活中的應(yīng)用,精神緊張,生活節(jié)奏加快,飲食結(jié)構(gòu)改變均有關(guān), 該病因其復(fù)發(fā)性、頑固性、瘙癢性及病程的纏綿而影響患者的生活質(zhì)量,給患者帶來(lái)極大的 困擾。目前用于治療瘙癢性皮膚病的外用藥物主要為糖皮質(zhì)內(nèi)固醇和少許中成藥制劑,糖 皮質(zhì)內(nèi)固醇初用效果良好,但會(huì)引起糖皮質(zhì)內(nèi)固醇依賴和撤藥復(fù)發(fā),繼續(xù)使用其療效明顯 下降,目前用于治療皮膚瘙癢的外用中成藥制劑較少,且療效欠佳。因此,積極尋找和開(kāi)發(fā) 一種治療瘙癢性皮膚病療效好、副作用少且價(jià)格合適的外用制劑具有極大地臨床價(jià)值和需 求潛力。
[0003] 中藥金蓮花為毛茛科植物金蓮花Trollius chinensis Bunge和短瓣金蓮花 T. Iedebouri Reichb.的干燥花,始載于《本草綱目拾遺》,其味苦、性涼,具有清熱解毒的功 效,用于急慢性扁桃體炎、急性中耳炎、急性鼓膜炎、急性結(jié)膜炎和急性淋巴管炎等疾病。現(xiàn) 代醫(yī)學(xué)研究表明,金蓮花含有藜蘆酸、葒草苷、牡荊苷、藜蘆酰胺、棕櫚酸等化學(xué)成分,具有 抑菌、抗病毒、抗氧化、抗癌、降壓、解痙等藥理作用。但有關(guān)金蓮花總黃酮的抗皮膚瘙癢生 物活性尚未見(jiàn)報(bào)道。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 有鑒于此,本發(fā)明的目的在于提供金蓮花總黃酮在制備治療瘙癢性皮膚病的藥物 中的應(yīng)用。為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的,本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:
[0005] 金蓮花總黃酮在制備治療瘙癢性皮膚病的藥物中的應(yīng)用。所述的瘙癢性皮膚病為 濕疹、銀屑病、丘疹性蕁麻疹、蟲(chóng)咬皮炎或毛發(fā)紅糠疹。
[0006] 優(yōu)選的,所述金蓮花總黃酮采用以下方法制得:將金蓮花水煎提取,提取液上弱極 性大孔吸附樹(shù)脂柱,然后先用無(wú)機(jī)酸溶液洗至流出液無(wú)色,再用水洗至流出液呈中性,接著 用體積分?jǐn)?shù)為30%?70%的乙醇溶液洗脫,收集洗脫液,濃縮,干燥,即得金蓮花總黃酮。
[0007] 更優(yōu)選的,所述弱極性大孔吸附樹(shù)脂為大孔吸附樹(shù)脂D101。
[0008] 優(yōu)選的,所述水煎提取是取金蓮花藥材,加入相當(dāng)于藥材重量10倍的水煎煮2次, 每次煎煮1小時(shí),將煎煮液濾過(guò)后合并濾液,離心得收集上清,得提取液。
[0009] 優(yōu)選的,提取液的純化方法如下:取提取液上大孔吸附樹(shù)脂DlOl柱,然后先用質(zhì) 量分?jǐn)?shù)為0. 2%的鹽酸溶液洗至流出液無(wú)色,再用蒸餾水洗至流出液呈中性,接著用體積分 數(shù)為50%的乙醇溶液洗脫,收集乙醇洗脫液,減壓濃縮,干燥,得金蓮花總黃酮。
[0010] 本發(fā)明的有益效果在于:本發(fā)明公開(kāi)了金蓮花總黃酮在制備治療瘙癢性皮膚病的 藥物中的應(yīng)用,不僅拓寬了金蓮花總黃酮的應(yīng)用范圍,提高了其市場(chǎng)價(jià)值,而且進(jìn)一步明確 了中藥金蓮花的藥效物質(zhì)基礎(chǔ),利于控制中藥金蓮花及其制劑的質(zhì)量。

【具體實(shí)施方式】
[0011] 為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚,下面對(duì)金蓮花總黃酮的藥理作 用及其效果進(jìn)行詳細(xì)的闡述。
[0012] 實(shí)施例1、金蓮花總黃酮的制備及含量測(cè)定
[0013] 金蓮花總黃酮的制備方法,具體步驟如下:稱取金蓮花藥材2kg,加入相當(dāng)于藥材 重量10倍的水煎煮2次,每次煎煮1小時(shí),將煎煮液濾過(guò)后合并濾液,離心,取上清液上過(guò) 大孔吸附樹(shù)脂DlOl柱(弱極性,天津市海光化工有限公司),然后先用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0. 2%的 鹽酸溶液洗至流出液無(wú)色,再用蒸餾水洗至流出液呈中性,接著用體積分?jǐn)?shù)為50%的乙醇 溶液洗脫,收集乙醇洗脫液,減壓濃縮,干燥,得金蓮花總黃酮。利用該方法獲得金蓮花總黃 酮的量為l〇〇g。
[0014] 金蓮花總黃酮的含量測(cè)定
[0015] 對(duì)照品溶液的制備:取蘆丁對(duì)照品適量,精密稱定,加甲醇制成每ImL含0. 25mg的 溶液即得。
[0016] 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備:精密吸取制備的對(duì)照品溶液I. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0、6. OmL分別 置25ml量瓶中,各加體積分?jǐn)?shù)為30%的乙醇至6mL,搖勻,然后加入ImL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為6%的 亞硝酸鈉溶液,搖勻,放置6min,再加 ImL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的硝酸鋁溶液,搖勻,放置6min, 接著加入IOmL氫氧化鈉溶液,再加體積分?jǐn)?shù)為30%的乙醇至刻度,搖勻,放置15min ;不含 對(duì)照品的溶液并加入相應(yīng)試劑的溶液做空白,照紫外-可見(jiàn)分光光度法(中國(guó)藥典2010年 版一部附錄V A),在500nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度,以吸光度為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn) 曲線,計(jì)算得回歸方程為y = 〇· 10789X-0. 0028(r = 0· 9999)。
[0017] 金蓮花總黃酮測(cè)定:精密稱取制備的金蓮花總黃酮20mg,置25mL容量瓶中,加體 積分?jǐn)?shù)為60 %的乙醇使溶解并稀釋至刻度,搖勻,精密量取4mL至25mL量瓶中,加體積分?jǐn)?shù) 為30 %的乙醇2mL,搖勻,然后加入ImL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為6 %的亞硝酸鈉溶液,搖勻,放置6min, 再加 ImL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10 %的硝酸鋁溶液,搖勻,放置6min,接著加入IOmL氫氧化鈉溶液,再 加體積分?jǐn)?shù)為30%的乙醇至刻度,搖勻,放置15min ;最后按照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備測(cè)定樣品吸 光度。測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算金蓮花總黃酮純度,結(jié)果顯示以蘆丁計(jì)純度為85. 64%。
[0018] 按標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方法,自"加6%的亞硝酸鈉溶液1ml"起依法操作,測(cè)定吸 光度。
[0019] 然后將制得的金蓮花總黃酮加入藥學(xué)上可接受的輔料制成乳膏劑、軟膏劑、噴霧 劑等外用制劑。
[0020] 實(shí)施例2、金蓮花總黃酮的藥理作用
[0021] 1、以實(shí)施例1中金蓮花總黃酮制成的乳膏檢測(cè)金蓮花總黃酮對(duì)慢性濕疹模型的 影響
[0022] 取體重為20g左右的昆明雄性小鼠50只,隨機(jī)分成5組,每組10只,分別為對(duì)照 組、模型組、艾洛松組、金蓮花總黃酮高(含藥量2%,w/w)、中(含藥量1 %,w/w)、低劑量組 (含藥量0.5%,w/w)。于實(shí)驗(yàn)前一天在腹部脫毛,面積約為3X3cm2。除對(duì)照組外,其余各 組在其腹部脫毛區(qū)均勻涂布質(zhì)量分?jǐn)?shù)為I %的2,4二硝基氟苯(DNFB),100 μ L/只致敏,次 日加強(qiáng)一次,并于首次致敏后第7天、第12天及第16天用體積分?jǐn)?shù)為0. 1 %的DNFB背部 涂著小鼠背部,50 μ L/只。然后各給藥組每日小鼠背部給藥,按0. 01g/10g給藥,艾洛松組 給艾洛松,對(duì)照組給基質(zhì),金蓮花總黃酮高、中、低劑量組分別給,每日1次,連續(xù)給藥17天。 于末次給藥后24小時(shí)處死,取小鼠背部皮膚用體積分?jǐn)?shù)為10%的福爾馬林緩沖溶液固定 作病理學(xué)組織檢查,HE染色進(jìn)行顯微觀察。
[0023] 顯微檢測(cè)結(jié)果顯示,對(duì)照組表皮正常無(wú)角化過(guò)度和角化不全,表皮突未延長(zhǎng),未見(jiàn) 海綿細(xì)胞,無(wú)細(xì)胞間水腫,真皮內(nèi)無(wú)炎性細(xì)胞浸潤(rùn);模型組表皮角化過(guò)度和局灶性角化不 全,棘層肥厚,表皮突延長(zhǎng),可見(jiàn)海綿細(xì)胞和細(xì)胞間水腫,真皮周圍淺層血管炎性細(xì)胞浸潤(rùn) 明顯,毛細(xì)血管數(shù)目增多,管壁增厚;艾洛松組表皮接近正常角質(zhì),棘層微增厚,表皮突未見(jiàn) 延長(zhǎng),無(wú)海綿細(xì)胞,真皮周圍淺層血管炎性細(xì)胞浸潤(rùn)不明顯;金蓮花總黃酮低劑量組表皮角 化過(guò)度較模型組減輕,棘層增厚,可見(jiàn)海綿細(xì)胞和細(xì)胞間水腫,真皮周圍淺層血管炎性細(xì)胞 浸潤(rùn)較模型組減輕;金蓮花總黃酮中劑量組表皮接近正常角質(zhì),棘層微增厚,表皮突未見(jiàn)延 長(zhǎng),無(wú)海綿細(xì)胞,真皮周圍淺層血管炎性細(xì)胞浸潤(rùn)減輕,毛細(xì)血管數(shù)量明顯減少;金蓮花總 黃酮高劑量組:表皮接近正常角質(zhì),棘層微增厚,表皮突未見(jiàn)延長(zhǎng),無(wú)海綿細(xì)胞,真皮周圍淺 層血管炎性細(xì)胞浸潤(rùn)不明顯。
[0024] 上述結(jié)果表明,金蓮花總黃酮對(duì)小鼠濕疹模型有很好的防治作用。
[0025] 2.以實(shí)施例1中金蓮花總黃酮制成的乳膏檢測(cè)金蓮花總黃酮對(duì)2、4_二硝基氟苯 致小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的影響
[0026] 取體重為20g左右的昆明雄性小鼠60只,隨機(jī)分成6組,每組10只,分別為對(duì)照 組、模型組、艾洛松組、金蓮花總黃酮高、中、低劑量組。于實(shí)驗(yàn)前一天在腹部脫毛,面積約 為3X3cm 2。除對(duì)照組外,其余各組在其腹部脫毛區(qū)均勻涂布質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的2、4_二硝 基氟苯,100 μ L/只致敏,次日加強(qiáng)一次,并于首次致敏后第6天在各小鼠右耳均勻涂布質(zhì) 量分?jǐn)?shù)為0. 1 %的DNFB激發(fā),20 μ L/只。期間各組動(dòng)物分別在其右耳廓按10mg/10g均勻 涂布相應(yīng)霜?jiǎng)┗蜍浉啵瑢?duì)照組、模型組給予等量基質(zhì),每日一次,連續(xù)給藥7天。于末次給藥 后1小時(shí)處死,搽去雙耳上的藥物,用8_打孔器沿左右耳廓相同部位打孔取下左右耳片, 稱重,以左右耳片重量之差表示腫脹程度,同時(shí)取脾臟和胸腺稱重,計(jì)算脾臟指數(shù)和胸腺指 數(shù),結(jié)果如表1和表2所示。
[0027] 表1、金蓮花總黃酮對(duì)DNFB所致小鼠 DTH的影響(η = 10)
[0028]

【權(quán)利要求】
1. 金蓮花總黃酮在制備治療瘙癢性皮膚病的藥物中的應(yīng)用。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用,其特征在于,所述的瘙癢性皮膚病為濕疹、銀屑病、丘 疹性蕁麻疹、蟲(chóng)咬皮炎或毛發(fā)紅糠疹。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用,其特征在于:所述金蓮花總黃酮采用以下方法制 得:將金蓮花水煎提取,提取液上弱極性大孔吸附樹(shù)脂柱,然后先用無(wú)機(jī)酸溶液洗至流出液 無(wú)色,再用水洗至流出液呈中性,接著用體積分?jǐn)?shù)為30%?70%的乙醇溶液洗脫,收集洗 脫液,濃縮,干燥,即得金蓮花總黃酮。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用,其特征在于:所述弱極性大孔吸附樹(shù)脂為大孔吸附樹(shù) 脂D101。
5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用,其特征在于:所述水煎提取是取金蓮花藥材,加入相當(dāng) 于藥材重量10倍的水煎煮2次,每次煎煮1小時(shí),將煎煮液濾過(guò)后合并濾液,離心得收集上 清,得提取液。
6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用,其特征在于:提取液的純化方法如下:取提取液上大孔 吸附樹(shù)脂DlOl柱,然后先用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0. 2%的鹽酸溶液洗至流出液無(wú)色,再用蒸餾水洗 至流出液呈中性,接著用體積分?jǐn)?shù)為50%的乙醇溶液洗脫,收集乙醇洗脫液,減壓濃縮,干 燥,得金蓮花總黃酮。
【文檔編號(hào)】A61P17/04GK104324094SQ201410690595
【公開(kāi)日】2015年2月4日 申請(qǐng)日期:2014年11月25日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月25日
【發(fā)明者】陳盛, 孫鳳軍, 王顯鳳, 廖偉, 馮偉, 邱學(xué)文 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍第三軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院
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