N-乙酰天門(mén)冬氨酰谷氨酸二肽制劑在海洛因成癮治療中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種N-乙酰天門(mén)冬氨酰谷氨酸二肽制劑在海洛因成癮治療的應(yīng)用，本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)表明NAAG發(fā)現(xiàn)對(duì)于海洛因成癮有明顯的治療作用。NAAG在海洛因成癮階段能夠明顯的降低大鼠的海洛因給藥量和海洛因給藥的動(dòng)機(jī)，該效應(yīng)可能通過(guò)谷氨酸代謝型受體3亞型起作用；而在海洛因戒斷以后、NAAG也能明顯的降低大鼠的海洛因復(fù)吸率。本發(fā)明還提供了上述的治療海洛因成癮的NAAG二肽制劑的鼻腔給藥方式，該給藥方式克服了現(xiàn)有的NAAG口服給藥生物利用率低的問(wèn)題，同時(shí)具備使用簡(jiǎn)單，操作方便、便于隨身攜帶的特點(diǎn)。
【專利說(shuō)明】N-乙酰天門(mén)冬氨酰谷氨酸二肽制劑在海洛因成癮治療中的應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，尤其涉及一種用于治療海洛因成癮的二肽制劑及其鼻腔給藥方式。

【背景技術(shù)】
[0002]N-乙酸天門(mén)冬氨酸谷氨酸(N-acetylaspartylglutamate, NAAG)是 1965 年發(fā)現(xiàn)的在哺乳動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)含量很高且具有腦區(qū)特異分布的二肽分子(Curatolo etal., 1965 ；Miyamoto et al.，1966),80年代以后NAAG被鑒定為一種肽類的神經(jīng)遞質(zhì)(Westbrook et al., 1986 ；Trombley et al.，1990)。內(nèi)源性的NAAG從突觸囊泡釋放到突角蟲(chóng)間隙后，可被位于星形膠質(zhì)細(xì)胞上的谷氨酸羧肽酶II和III (Glutamate carboxypeptidase
IIand III, GCPII and III)水解生成N-乙酰天門(mén)冬氨酸和谷氨酸(Robinson etal.，1987)，并被認(rèn)為是腦內(nèi)補(bǔ)充谷氨酸的儲(chǔ)備池。作為神經(jīng)遞質(zhì)，NAAG又是代謝型谷氨酸受體3亞型(mGluR3)高效激動(dòng)劑(ffroblewska et al.，1997)。研究表明，抑制NAAG肽酶活性可降低其對(duì)NAAG的水解，一方面減少突觸間隙谷氨酸總水平，另一方面突觸間隙蓄積的NAAG有效激活突觸前膜上的mGluR3，減少突觸前膜谷氨酸的興奮性釋放。因此，NAAG肽酶的抑制劑或外源性的NAAG已經(jīng)用來(lái)研究治療多種谷氨酸過(guò)度興奮誘導(dǎo)的疾病，并發(fā)現(xiàn)其在精神分裂癥、肌萎縮側(cè)索硬化、外傷性腦損傷和前列腺癌等動(dòng)物模型中具有潛在的治療效果。
[0003]藥物成癮是一種以復(fù)吸為特征的慢性腦病，高居不下的復(fù)吸率成為臨床上治療成癮的重點(diǎn)和難點(diǎn)。神經(jīng)生物學(xué)的研究表明:吸食可卡因、海洛因等藥物導(dǎo)致人或動(dòng)物大腦腹側(cè)被蓋區(qū)到伏隔核的多巴胺能投射的增加，并可能與其他神經(jīng)遞質(zhì)如谷氨酸、乙酰膽堿等相互作用，隨后發(fā)展成對(duì)藥物的成癮(Wise, 2004 ；Calabresi et al.，2000)。而大腦內(nèi)側(cè)前額皮層到伏隔核的谷氨酸能投射是可卡因和海洛因等成癮性藥物復(fù)吸的共同作用基礎(chǔ)(McFarland et al., 2003 ；LaLumiere et al.，2008)。已有證據(jù)顯不，抑制伏隔核內(nèi)谷氨酸的興奮能夠降低可卡因和海洛因的復(fù)吸(Tzschentke et al., 2003 ；Kalivas etal.，2009)，但是目前仍然缺乏一種針對(duì)藥物復(fù)吸的高效、特異又副作用小的藥物。前面已經(jīng)闡述，外源性補(bǔ)充NAAG通過(guò)作用于突觸前膜上的mGluR3，從而減少谷氨酸過(guò)多的釋放。研究發(fā)現(xiàn)，外源性補(bǔ)充NAAG或NAAG的肽酶抑制劑能夠降低可卡因引燃誘導(dǎo)的大鼠復(fù)吸行為(Xi et al., 2010b ；Peng et al.，2010)，對(duì)于大鼠可卡因自身給藥行為則沒(méi)有影響(Xiet al.，2010a)，提示了 NAAG在可卡因復(fù)吸中可能的治療作用。相比較同類的mGluR2/3的激動(dòng)劑LY379268，NAAG對(duì)于自然獎(jiǎng)賞物的覓食行為和蔗糖的渴求均沒(méi)有影響，顯示其對(duì)藥物成癮治療的特異性和相對(duì)少的副作用(Xi et al.，2010b)。
[0004]海洛因和可卡因在成癮和復(fù)吸的神經(jīng)環(huán)路上有一些共同的作用機(jī)制，但是兩者在成癮和復(fù)吸的表觀遺傳學(xué)、mRNA水平、神經(jīng)肽水平和蛋白水平等方面存在著諸多差異(Kreek MJ.，2011)。例如:可卡因通過(guò)抑制伏隔核多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體的重?cái)z取，從而導(dǎo)致伏隔核多巴胺的釋放增多(Budygin EA., 2002);而海洛因則是作用于伏隔核多巴胺神經(jīng)元上的μ -阿片受體，間接的促進(jìn)伏隔核多巴胺的釋放。臨床治療中，治療可卡因成癮的藥物雙硫侖未用于治療海洛因成癮；而能夠治療海洛因復(fù)吸的替代藥物美沙酮，并不能治療可卡因復(fù)吸(Kreek MJ.，2011)。目前，我們國(guó)家的吸毒人群仍以海洛因患者為主，NAAG能否用于海洛因成癮和復(fù)吸治療的研究還未有報(bào)道，并且存在NAAG 口服利用率低下等實(shí)際應(yīng)用問(wèn)題。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明所要解決的一個(gè)技術(shù)問(wèn)題是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)現(xiàn)狀提供一種副作用小的用于治療海洛因成癮的二肽制劑。
[0006]上述新應(yīng)用是N-乙酰天門(mén)冬氨酰谷氨酸二肽制劑的戒毒用途，具體是N-乙酰天門(mén)冬氨酰谷氨酸二肽制劑在治療海洛因成癮中的應(yīng)用。
[0007]本發(fā)明所要解決的另一個(gè)技術(shù)問(wèn)題是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)現(xiàn)狀提供一種利用率高的治療海洛因成癮的二肽制劑的鼻腔給藥方式。
[0008]本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案為:該N-乙酰天門(mén)冬氨酰谷氨酸二肽制劑在海洛因成癮治療中的應(yīng)用。
[0009]進(jìn)一步地，所述N-乙酰天門(mén)冬氨酰谷氨酸二肽制劑在海洛因成癮階段治療中的應(yīng)用。
[0010]進(jìn)一步地，所述N-乙酰天門(mén)冬氨酰谷氨酸二肽制劑在海洛因復(fù)吸階段治療中的應(yīng)用。該復(fù)吸階段具體指海洛因患者進(jìn)行脫毒戒斷以后，再次接觸以往吸毒相關(guān)環(huán)境、毒品本身或者毒友唆使誘導(dǎo)下，往往會(huì)產(chǎn)生吸食海洛因的沖動(dòng)，并最終導(dǎo)致再一次的海洛因成癮。
[0011]本發(fā)明還提供一種治療海洛因成癮的N-乙酰天門(mén)冬氨酰谷氨酸二肽制劑的鼻腔給藥方式。
[0012]作為優(yōu)選，所述N-乙酰天門(mén)冬氨酰谷氨酸制備成各種鼻腔給藥劑型進(jìn)行給藥，所述劑型包括滴鼻劑、噴霧劑、粉霧劑、凝膠劑、微球劑、乳劑以及脂質(zhì)體鼻腔給藥劑型。
[0013]下面將通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步說(shuō)明N-乙酰天門(mén)冬氨酰谷氨酸(NAAG)在海洛因成癮治療應(yīng)用中的有益效果。
[0014]1、NAAG對(duì)海洛因成癮大鼠自身給藥的抑制作用
[0015](I)建立穩(wěn)定的大鼠海洛因自身給藥模型
[0016]經(jīng)典的大鼠海洛因自身給藥模型可以很好的模擬臨床上吸毒患者的海洛因吸食行為，大鼠經(jīng)過(guò)訓(xùn)練可以產(chǎn)生對(duì)海洛因的自我給藥，同時(shí)訓(xùn)練過(guò)程中不斷上升的對(duì)海洛因的行為反應(yīng)率和給藥量可以反映吸毒患者從一開(kāi)始接觸海洛因到大量吸食海洛因成癮的這樣一個(gè)過(guò)程。
[0017]我們采用如下方法來(lái)建立大鼠的自身給藥模型:首先，32只SD大鼠進(jìn)行頸靜脈插管手術(shù)，在右頸靜脈插入一段PE管，并經(jīng)背部穿出體外，手術(shù)后抗菌和恢復(fù)一周以上。隨后，大鼠分別在32個(gè)自身給藥操作籠內(nèi)進(jìn)行訓(xùn)練，每次訓(xùn)練前連通大鼠背部的PE管與操作籠內(nèi)的海洛因注射系統(tǒng)；操作籠內(nèi)設(shè)左右兩個(gè)鼻觸器，其中一個(gè)為有效鼻觸器，大鼠觸鼻一下有效鼻觸器將獲得一針海洛因注射，同時(shí)操作籠內(nèi)的籠燈亮起(作為一種伴藥的線索)，計(jì)算機(jī)記錄；另外一個(gè)為無(wú)效鼻觸器，大鼠觸鼻一下無(wú)效鼻觸器沒(méi)有任何海洛因注射和燈光，僅計(jì)算機(jī)記錄。兩次海洛因注射之間有20秒的不應(yīng)期，期間觸鼻有效鼻觸器將不會(huì)有海洛因注射和燈光，僅計(jì)算機(jī)記錄，每天的海洛因注射針數(shù)限制為50針(防止過(guò)量注射死亡)。32個(gè)操作籠采用大型服務(wù)器的計(jì)算機(jī)同時(shí)控制，自身給藥訓(xùn)練軟件為自主編寫(xiě)的OBSM v5.0，訓(xùn)練程序?yàn)楣潭ū嚷实腇R1，即大鼠觸鼻一次有效鼻觸器獲得一針海洛因注射。32只大鼠經(jīng)過(guò)10天，每天4小時(shí)的訓(xùn)練后，有效觸鼻反應(yīng)率和注射量均明顯上升，在最后幾天趨于穩(wěn)定，從而形成了穩(wěn)定的海洛因成癮狀態(tài)(見(jiàn)圖1)。
[0018]⑵NAAG對(duì)大鼠海洛因自身給藥行為的抑制作用
[0019]大鼠經(jīng)過(guò)10天訓(xùn)練達(dá)到穩(wěn)定的海洛因成癮狀態(tài)以后，第11天所有大鼠隨機(jī)分為4組，每組8只，分別為對(duì)照組、NAAG 50 μ g組、NAAG 100 μ g組和NAAG 100 μ g+LY341495組(LY341495為mGluR2/3受體的拮抗劑)。①對(duì)照組:測(cè)試前2h鼻腔給予10 μ I生理鹽水，每單側(cè)鼻腔各給予5 μ I ;@NAAG 50 μ g組:測(cè)試前2h鼻腔給予50 μ g/10 μ I的NAAG ;@NAAG100 μ g 組:測(cè)試前 2h 鼻腔給予 100 μ g/10ul 的 NAAG ；? NAAG 100 μ g+LY341495 組:測(cè)試前2h鼻腔給予100 μ g/10ul的NAAG聯(lián)合測(cè)試前30min腹腔給予LY341495，LY341495劑量為lmg/kg,濃度為lmg/ml。隨后所有大鼠進(jìn)行4小時(shí)的海洛因自身給藥測(cè)試,方法跟之前的訓(xùn)練一樣，程序也是固定比率的FR1。在第12天、第13天繼續(xù)進(jìn)行海洛因自身給藥測(cè)定(即給藥后的24h、48h以后，而測(cè)試前不再給藥)。評(píng)價(jià)NAAG對(duì)于海洛因成癮的治療作用(見(jiàn)圖 2a,2b) ο
[0020]從圖2a觀察到:NAAG 50 μ g組、NAAG 100 μ g組與對(duì)照組比較，有效觸鼻反應(yīng)在第11天略有下降，但是沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值>0.05);而在第12天NAAG 50 μ g組和NAAG100 μ g組的有效觸鼻反應(yīng)均明顯下降，與對(duì)照組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(圖中*與對(duì)照組比較，P值〈0.05，有效率達(dá)到95%以上)，結(jié)果顯示了 NAAG對(duì)于海洛因自身給藥的抑制作用在給予NAAG后的24h最為顯著，表明NAAG進(jìn)入鼻腔后可能需要較長(zhǎng)時(shí)間才能達(dá)到藥物的最強(qiáng)效應(yīng)。
[0021]從圖2b觀察到:與對(duì)照組比較，NAAG 50 μ g組和NAAG 100 μ g組的海洛因注射量也是在第12天有明顯的抑制作用(圖中*與對(duì)照組比較，P值〈0.05，有效率達(dá)到95%以上)，與圖2a的觸鼻反應(yīng)相對(duì)應(yīng)。
[0022](3) NAAG對(duì)大鼠海洛因自身給藥行為抑制作用與mGluR2/3受體之間的關(guān)系
[0023]由于LY341495的藥物代謝半衰期較短，24小時(shí)后對(duì)NAAG的抑制作用沒(méi)有影響。從圖2a和2b觀察不到NAAG對(duì)于海洛因自身給藥的抑制與LY341495注射之間的關(guān)系。為了進(jìn)一步明確，這種NAAG對(duì)海洛因成癮的抑制效應(yīng)是否通過(guò)mGluR2/3受體起作用，我們重新訓(xùn)練32只大鼠建立穩(wěn)定的海洛因自身給藥成癮模型，并于第11天在分組上做了如下改動(dòng):①對(duì)照組:測(cè)試前2h鼻腔給予10 μ I生理鹽水，同前?’②NAAG 50 μ g組:測(cè)試前2h鼻腔給予50 μ g/10 μ I 的 NAAG，同前；③ NAAG 100 μ g 組；測(cè)試前 2h 鼻腔給予 100 μ g/10ul 的 NAAG，同前?、躈AAG 100 μ g+LY341495組:與前一次不同，訓(xùn)練前2h鼻腔給予一次100 μ g/10ul的NAAG以及分別在測(cè)試前30min和第2天測(cè)試前30min腹腔給予LY341495，劑量均為Img/kg，濃度均為lmg/ml。給藥后所有大鼠進(jìn)行4小時(shí)的海洛因自身給藥測(cè)試，并在第12天、第13天繼續(xù)進(jìn)行海洛因自身給藥測(cè)試(圖3a和圖3b)。
[0024]從圖3a和圖3b觀察到:與對(duì)照組相比，NAAG 50 μ g組和NAAG 100 μ g組的有效觸鼻反應(yīng)和海洛因給藥量在第12天明顯降低(圖中*與對(duì)照組比較，P值〈0.05，有效率達(dá)到95%以上)；而NAAG 100 μ g+LY341495組與NAAG 100 μ g組相比，有效觸鼻反應(yīng)和海洛因給藥量均明顯升高(圖中#與NAAG 100 μ g組比較，P值〈0.05，有效率達(dá)到95%以上)。表明在第12天訓(xùn)練之前再次注射LY341495能夠明顯翻轉(zhuǎn)NAAG對(duì)于海洛因自身給藥的抑制作用，結(jié)果提示NAAG對(duì)大鼠海洛因成癮的治療作用可能通過(guò)mGluR2/3受體來(lái)介導(dǎo)。
[0025]2、NAAG對(duì)大鼠海洛因獎(jiǎng)賞動(dòng)機(jī)的抑制作用:
[0026]采用累進(jìn)比率PR3_4程序來(lái)測(cè)定大鼠的Break-Point (斷點(diǎn))，不同于之前訓(xùn)練所用的固定比率程序，pr3-4程序測(cè)定下大鼠獲得每次海洛因注射所要求的有效觸鼻次數(shù)呈累進(jìn)上升趨勢(shì)，Break-Point的意義在于能夠評(píng)價(jià)大鼠吸食海洛因的主觀能動(dòng)性，相當(dāng)于臨床患者吸食海洛因的動(dòng)機(jī)。在累進(jìn)比率PR3_4程序下，大鼠需要更多的有效觸鼻反應(yīng)才能獲得下一次的海洛因注射，具體數(shù)值參見(jiàn)以下公式(Roberts et al.，1993):觸鼻反應(yīng)數(shù)=(5x e(°_2xinfusi°nn?bOT))-5，舉例來(lái)說(shuō)，一共28次的海洛因注射，有效觸鼻數(shù)需要1，2，4,6,9,12，15，20，25，32，40，50，62，77，95，118，145，178，219，268，328，402，603，737，901，1102和1347次，最后一次成功獲得海洛因注射所付出的有效觸鼻數(shù)被認(rèn)為是這個(gè)訓(xùn)練期的 Break-Point(Duvauchelle et al., 1998 ；ffang et al., 2009)。
[0027]我們通過(guò)以下實(shí)驗(yàn)來(lái)證明NAAG對(duì)于大鼠海洛因獎(jiǎng)賞動(dòng)機(jī)的影響。首先，訓(xùn)練32只大鼠進(jìn)行10天的海洛因自身給藥訓(xùn)練，并達(dá)到穩(wěn)定的海洛因成癮狀態(tài)(訓(xùn)練時(shí)任然采用的是固定比率程序FRl)，并在第11天分成4個(gè)組，每組8只。①對(duì)照組:測(cè)試前2h鼻腔給予1ul生理鹽水?’②NAAG 50 μ g組:測(cè)試前2h鼻腔給予50 μ g/10 μ I的NAAG ?’③NAAG100 μ g 組:測(cè)試前 2h 鼻腔給予 100 μ g/10 μ I 的 NAAG ；? NAAG 100 μ g+LY341495 組:訓(xùn)練前2h鼻腔給予100 μ g/10 μ I的NAAG及在測(cè)試前30min腹腔給予LY341495 (劑量為Img/kg，濃度lmg/ml)。隨后采用累進(jìn)比率PR3_4程序來(lái)測(cè)定大鼠的Break-Point,從而評(píng)價(jià)NAAG對(duì)于海洛因自身給藥動(dòng)機(jī)的影響(見(jiàn)圖4)。
[0028]從圖4觀察到:與對(duì)照組相比，NAAG 50 μ g組和NAAG 100 μ g組的Break-Point值明顯降低(圖中*與對(duì)照組比較，P值〈0.05，有效率達(dá)到95%以上)；與NAAG 10yg組比較，NAAG 100μ g+LY341495組的fceak-Point值明顯升高(圖中#與應(yīng)么6 10yg組比較，P值〈0.05，有效率達(dá)到95%以上)。表明注射LY341495能夠明顯翻轉(zhuǎn)NAAG對(duì)海洛因自身給藥動(dòng)機(jī)的抑制作用，因次NAAG對(duì)大鼠海洛因給藥動(dòng)機(jī)的抑制作用可能通過(guò)mGluR2/3受體來(lái)介導(dǎo)。
[0029]3、NAAG對(duì)于海洛因戒斷大鼠復(fù)吸的抑制作用:
[0030]復(fù)吸是臨床上治療海洛因成癮的難點(diǎn)，海洛因患者進(jìn)行脫毒戒斷以后，再次接觸以往吸毒相關(guān)環(huán)境、毒品本身或者毒友唆使誘導(dǎo)下，往往會(huì)產(chǎn)生吸食海洛因的沖動(dòng)，并最終導(dǎo)致再一次的海洛因成癮。大鼠的復(fù)吸模型能夠反映處于海洛因戒斷期的患者再次接觸以往吸食海洛因相關(guān)的環(huán)境或者海洛因本身后，導(dǎo)致海洛因復(fù)吸(再次成癮)的行為。為了評(píng)價(jià)NAAG是否對(duì)于海洛因成癮大鼠的復(fù)吸行為有影響，我們分別建立了條件性線索或海洛因引燃誘導(dǎo)的大鼠復(fù)吸模型。首先，訓(xùn)練48只大鼠在自身給藥操作籠內(nèi)經(jīng)過(guò)14天的海洛因自身給藥訓(xùn)練，隨后所有大鼠在飼養(yǎng)籠內(nèi)自然戒斷14天，最后在操作籠內(nèi)分別測(cè)定條件性線索或海洛因引燃誘導(dǎo)的大鼠海洛因復(fù)吸行為。
[0031](I)條件性線索誘導(dǎo)的大鼠海洛因復(fù)吸行為測(cè)定:
[0032]從所有大鼠中選取24只大鼠在海洛因戒斷的第14天進(jìn)行海洛因復(fù)吸測(cè)定，分成3組，每組8只。①對(duì)照組:測(cè)試前2h鼻腔給予10 μ I生理鹽水，每單側(cè)鼻腔各給予5 μ I ;②NAAG50 μ g組:測(cè)試前2h鼻腔給予50 μ g/10 μ I的NAAG ?’③NAAG 100 μ g組；測(cè)試前2h鼻腔給予?οομ g/10ul的NAAG。隨后所有大鼠分別對(duì)應(yīng)放置于之前自身給藥訓(xùn)練時(shí)所待的操作籠，利用條件性線索(大鼠之前訓(xùn)練給予海洛因注射時(shí)亮起的籠燈、注射泵的響聲)來(lái)誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生復(fù)吸的行為，程序也是固定比率的FR1。程序開(kāi)始時(shí)，操作籠內(nèi)的籠燈亮起，此時(shí)大鼠觸鼻有效鼻觸器，注射泵會(huì)發(fā)出響聲，但是沒(méi)有海洛因注射，測(cè)試時(shí)間為2h。從而來(lái)評(píng)價(jià)NAAG對(duì)條件性線索誘導(dǎo)的大鼠海洛因復(fù)吸行為是否有影響(見(jiàn)圖5)。
[0033]從圖5觀察到:與對(duì)照組相比，NAAG 50 μ g組和NAAG 100 μ g組的有效觸鼻反應(yīng)明顯降低(圖中*與對(duì)照組比較，P值〈0.05，有效率達(dá)到95%以上)，表明NAAG鼻腔給藥對(duì)于環(huán)境誘導(dǎo)的大鼠復(fù)吸行為有明顯的抑制作用。
[0034](2)海洛因引燃誘導(dǎo)的大鼠海洛因復(fù)吸行為測(cè)定
[0035]從所有大鼠中選取另外24只大鼠在海洛因戒斷的第14天進(jìn)行海洛因復(fù)吸測(cè)定，分成3組，每組8只。①對(duì)照組:測(cè)試前2h鼻腔給予10 μ I生理鹽水，每單側(cè)鼻腔各給予5 μ I ;② NAAG 50 μ g 組:測(cè)試前 2h 鼻腔給予 50 μ g/10 μ I 的 NAAG NAAG 100 μ g 組；測(cè)試前2h鼻腔給予100 μ g/10ul的NAAG。所有大鼠在測(cè)試前15min皮下均注射一針海洛因(0.25mg/kg)，隨后分別對(duì)應(yīng)放置之前自身給藥訓(xùn)練時(shí)所待的操作籠，在海洛因引燃誘導(dǎo)大鼠復(fù)吸測(cè)定時(shí)，籠燈以及注射泵聲音不再出現(xiàn)，大鼠觸鼻有效鼻觸器僅計(jì)算機(jī)記錄，也一樣沒(méi)有海洛因注射，測(cè)試時(shí)間為2h。從而來(lái)評(píng)價(jià)NAAG對(duì)海洛因自身引燃誘導(dǎo)的大鼠海洛因復(fù)吸行為是否有影響(見(jiàn)圖6)。
[0036]從圖6觀察到:與對(duì)照組相比，NAAG 50 μ g組和NAAG 100 μ g組的有效觸鼻反應(yīng)明顯降低(圖中*與對(duì)照組比較，P值〈0.05，有效率達(dá)到95%以上)，表明NAAG鼻腔給藥對(duì)于海洛因引燃誘導(dǎo)的大鼠復(fù)吸行為有明顯的抑制作用。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0037]圖1大鼠海洛因自身給藥模型圖:圖中，Active poke為有效觸鼻數(shù)，Inactivepoke為無(wú)效觸鼻數(shù)，Infus1n為海洛因注射針數(shù)；
[0038]圖2a NAAG鼻腔給藥對(duì)海洛因成癮大鼠海洛因觸鼻反應(yīng)的影響:圖中，Active為有效觸鼻數(shù)，Inactive為無(wú)效觸鼻數(shù)；
[0039]圖2b NAAG鼻腔給藥對(duì)海洛因成癮大鼠海洛因注射量的影響:圖中，Infus1n為海洛因注射針數(shù)；
[0040]圖3a NAAG鼻腔給藥對(duì)海洛因成癮大鼠海洛因觸鼻反應(yīng)的影響II ；
[0041]圖3b NAAG鼻腔給藥對(duì)海洛因成癮大鼠海洛因注射量的影響II ；
[0042]圖4NAAG鼻腔給藥對(duì)海洛因成癮大鼠自身給藥動(dòng)機(jī)的影響:圖中，Break-Point為大鼠海洛因自身給藥動(dòng)機(jī)值；
[0043]圖5NAAG鼻腔給藥對(duì)條件性線索誘導(dǎo)的大鼠海洛因復(fù)吸行為的影響:圖中，Active poke為有效觸鼻數(shù)，Inactive poke為無(wú)效觸鼻數(shù)；
[0044]圖6NAAG鼻腔給藥對(duì)海洛因引燃誘導(dǎo)的大鼠海洛因復(fù)吸行為的影響:圖中，Active poke為有效觸鼻數(shù)，Inactive poke為無(wú)效觸鼻數(shù)；
[0045]圖7為本實(shí)施例1中鼻噴霧器示意圖。

【具體實(shí)施方式】
[0046]以下通過(guò)結(jié)合附圖及實(shí)施例對(duì)本發(fā)明中NAAG鼻腔給藥方式作進(jìn)一步說(shuō)明。
[0047]實(shí)施例1:
[0048]鼻腔給藥是目前一種較新且極具發(fā)展?jié)摿Φ慕o藥方式，藥物經(jīng)鼻腔進(jìn)入后，由其粘膜吸收而發(fā)揮全身性治療作用。此法給藥方便，吸收迅速，生物利用度高。近年來(lái)，隨著對(duì)藥物載體系統(tǒng)如脂微量、毫微粒及生物粘附材料等的研制開(kāi)發(fā)，鼻腔給藥技術(shù)也不斷的獲得發(fā)展。人的鼻粘膜上有非常豐富的微絨毛，總表面積因此而大大增加，同時(shí)富含微小孔徑的水通道，這些通道的孔徑一般約為0.4-0.8nm,因此鼻腔給藥利于小分子物質(zhì)的吸收通過(guò)。許多藥物其中包括蛋白質(zhì)/多肽類、激素類和疫苗類等生物藥品尤其適用于鼻腔給藥。鼻腔給藥還有另一個(gè)優(yōu)勢(shì)在于它能形成中樞給藥，鼻腔的鼻嗅覺(jué)區(qū)上面分布著嗅神經(jīng)，并經(jīng)嗅神經(jīng)連接大腦嗅球。已經(jīng)有實(shí)驗(yàn)證明，頭孢氨芐、氟哌嘧啶等藥經(jīng)鼻給后，腦脊液中的藥物濃度能夠高于注射給藥的濃度，因此可將鼻腔給藥作為一種向腦輸送藥物的簡(jiǎn)潔途徑。
[0049]NAAG鼻腔給藥時(shí)，首先溶于各種藥物載體系統(tǒng)，隨后儲(chǔ)藏于鼻噴霧器內(nèi)，此類鼻噴霧器可以定量給藥，海洛因成癮患者在給藥時(shí)，對(duì)準(zhǔn)鼻腔，按壓鼻噴霧器向鼻腔給予一定劑量的NAAG，從而達(dá)到治療海洛因成癮和復(fù)吸的目的。該給藥方式的優(yōu)點(diǎn)在于:鼻腔給予NAAG可以避開(kāi)胃腸對(duì)肽類的消化作用和避免肝臟的首過(guò)效應(yīng)，提高生物利用率，并通過(guò)鼻粘膜透過(guò)大腦屏障，形同腦內(nèi)直接給藥，發(fā)揮治療海洛因成癮的作用。同時(shí)該給藥方式操作方便，藥物利于隨身攜帶，便于病人直接使用。
[0050]NAAG鼻腔給藥的劑型:
[0051]NAAG以二甲基亞砜助溶后，可以與藥物載體相結(jié)合，制成各種給藥劑型。具體劑型如下:
[0052](I)滴鼻劑:NAAG溶液直接儲(chǔ)存于鼻噴霧器內(nèi)，直接滴入鼻腔給藥。
[0053](2)噴霧劑:NAAG溶液存儲(chǔ)于鼻噴霧器后，通過(guò)霧化裝置借助壓縮空氣產(chǎn)生的動(dòng)力使藥液霧化并噴出的一種劑型。
[0054](3)粉霧劑:NAAG與輔料混合成均勻的，制備粉徑符合要求的粉粒后，存儲(chǔ)于鼻噴霧器后鼻腔給藥的一種劑型。
[0055](4)凝膠劑:NAAG溶液中加入水溶性高分子聚合物(如聚丙乙烯、聚乙烯醇、卡波姆等)增加藥物粘度，從而達(dá)到增加藥物在鼻腔的保留時(shí)間、提高生物利用度的一種劑型。
[0056](5)微球劑:NAAG包埋在微球中或吸附、偶聯(lián)在微球表面，從而延緩藥物釋放的一種劑型。
[0057](6)乳劑:為乳狀液體藥劑，NAAG制成0/W和W/0型乳劑，從而改善藥物的水溶性及使藥劑在鼻粘膜表面的滯留時(shí)間延長(zhǎng)的一種劑型。
[0058](7)脂質(zhì)體鼻腔給藥劑型:NAAG與脂質(zhì)體載體相結(jié)合，然后再形成鼻腔給藥的一種劑型。該劑型有很好的生物粘附性和相容性，不容易被鼻纖毛清除，可直接進(jìn)入血液，月旨質(zhì)體受各種酶的作用逐漸分解而釋放藥物，對(duì)鼻腔粘膜損傷輕甚至無(wú)損傷。該藥物制劑適合長(zhǎng)期給藥。
[0059]NAAG的鼻噴霧器樣式及具體給藥操作:
[0060]圖7為NAAG給藥的一種鼻噴霧器正面分解示意圖，其中I為該噴霧器頭部，3為噴霧器本體，2為噴霧器頭部和本體之間可以伸縮的部分。NAAG制成上述任意一種鼻腔給藥劑型后儲(chǔ)藏于鼻噴霧器本體3中，通過(guò)向鼻噴霧器本體3方向按壓頭部I，NAAG可以從頭部I頂端定量噴出，從而達(dá)到患者的鼻粘膜，進(jìn)一步吸收入腦。
【權(quán)利要求】
1.一種N-乙酰天門(mén)冬氨酰谷氨酸二肽制劑在海洛因成癮治療中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的N-乙酰天門(mén)冬氨酰谷氨酸二肽制劑在海洛因成癮治療中的應(yīng)用，其特征在于:所述N-乙酰天門(mén)冬氨酰谷氨酸二肽制劑在海洛因成癮階段治療中的應(yīng)用。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的N-乙酰天門(mén)冬氨酰谷氨酸二肽制劑在海洛因成癮治療中的應(yīng)用，其特征在于:所述N-乙酰天門(mén)冬氨酰谷氨酸二肽制劑在海洛因復(fù)吸階段治療中的應(yīng)用。
4.一種治療海洛因成癮的N-乙酰天門(mén)冬氨酰谷氨酸二肽制劑的鼻腔給藥方式。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的治療海洛因成癮的N-乙酰天門(mén)冬氨酰谷氨酸二肽制劑鼻腔給藥方式，其特征在于:所述N-乙酰天門(mén)冬氨酰谷氨酸制備成各種鼻腔給藥劑型進(jìn)行給藥，所述劑型包括滴鼻劑、噴霧劑、粉霧劑、凝膠劑、微球劑、乳劑以及脂質(zhì)體鼻腔給藥劑型。
【文檔編號(hào)】A61P25/36GK104162142SQ201410437809
【公開(kāi)日】2014年11月26日 申請(qǐng)日期:2014年8月29日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月29日
【發(fā)明者】周文華, 朱華強(qiáng), 樓忠澤, 劉惠芬, 符丹 申請(qǐng)人:寧波市微循環(huán)與莨菪類藥研究所