一種抗菌殼聚糖凝膠劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種抗菌殼聚糖凝膠劑及其制備方法，該制備方法包括制備含殼聚糖的復(fù)合液、制備蠶絲蛋白乙醇溶液、制備卡拉膠溶液、制備季鏻化合物溶液與制備凝膠劑等步驟。本發(fā)明的抗菌殼聚糖凝膠劑以高分子殼聚糖和低分子殼聚糖復(fù)合物為主要基質(zhì)，配合使用抗菌增效劑、膠凝劑、組織細胞修復(fù)輔料等組合復(fù)配，避免使用其它化學(xué)藥物、生物藥物等成分，提高了凝膠劑的安全性，同時也降低成本和減少對患者的刺激性，促進患者恢復(fù)健康。所制備的抗菌殼聚糖凝膠劑對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌、綠膿桿菌等的抗菌能力均達到99％以上，顯示出良好的抑菌能力。
【專利說明】一種抗菌殼聚糖凝膠劑及其制備方法
【【技術(shù)領(lǐng)域】】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)用藥品【技術(shù)領(lǐng)域】。更具體地，本發(fā)明涉及一種抗菌殼聚糖凝膠劑，還涉及所述抗菌殼聚糖凝膠劑的制備方法。
【【背景技術(shù)】】
[0002]高分子水凝膠材料本身所具有的優(yōu)越性能，如溶脹特性、粘彈性行為和適當(dāng)?shù)牧W(xué)強度等，使得它引起了眾多研究者極大興趣與關(guān)注，相應(yīng)的制備與開發(fā)研究日新月異、碩果累累，其應(yīng)用已滲入到醫(yī)療衛(wèi)生、生物醫(yī)藥、日用化工、食品、環(huán)保等各個領(lǐng)域，并還在向更廣闊的應(yīng)用領(lǐng)域拓展。特別是良好的生物相容性又使得它在生物醫(yī)學(xué)方面的應(yīng)用前景看好，如可作為組織填充劑、藥物緩釋劑、酶的包埋、蛋白質(zhì)電泳、接觸眼鏡、人工血漿、人造皮膚、組織工程支架材料等，而且隨著性能優(yōu)異的水凝膠不斷開發(fā)，生物醫(yī)學(xué)技術(shù)水平得到很大地提高。許多研究已經(jīng)證實，殼聚糖作為自然界中唯一的堿性多糖，具有明顯的殺菌作用，在酸性條件下，高脫乙酰度的殼聚糖分子中的氨基帶有正電荷，能夠吸附帶有負電荷的細菌，干擾細胞的生命狀態(tài)，使細胞膜變形破裂，內(nèi)含物滲出，造成細菌溶解而死亡。研究也發(fā)現(xiàn)，高分子量殼聚糖具有優(yōu)異的凝膠特性，通過殼聚糖分子鏈中基團的特殊靜電力、親疏水作用和氫鍵作用，能夠與一些膠凝劑產(chǎn)生復(fù)合，形成能夠保持大量水分的膠態(tài)物質(zhì)，具有很強的吸濕、保濕性能，同時還能提供足夠的粘性，可以貼于粘膜、皮膚等處而不脫落，不會對人體皮膚產(chǎn)生不良刺 激及過敏反應(yīng)等。因此，目前有許多研究集中于開發(fā)各種各樣的殼聚糖凝膠并應(yīng)用生物醫(yī)學(xué)工程。
[0003]目前，一些發(fā)明專利或發(fā)明專利申請涉及采用殼聚糖制備凝膠，例如CN101278896B公開了一種殼聚糖納米銀凝膠劑及其應(yīng)用，它是由納米銀、殼聚糖類聚合物、卡波姆、聚卡波菲、纖維素、聚乙烯醇、聚乙二醇、聚酰胺、粘土、膠原蛋白、果膠、硫酸、醋酸、甲酸等制備得到的。CN103316033A公開了一種凝膠劑及其用途，它是由殼聚糖類聚合物、透明質(zhì)酸類物質(zhì)、乳酸類物質(zhì)、凝膠基質(zhì)、保濕劑、稀釋劑等制備得到的。CN102397474A公開了一種治療應(yīng)激性胃潰瘍的龍血竭口服凝膠劑，它是由龍血竭提取物、卡波姆、殼聚糖、羧甲基纖維素鈉、二乙醇胺等制備得到的。CN103520232A公開了一種凝膠劑的制備方法，它是由蛇床子提取物包合物、鹽酸克林霉素包合物、羥丙基纖維素、水、甘油、殼聚糖、羥苯乙酯乙醇溶液、硫酸鈉水溶液等制備得到的。此外，CN102657602公開了 3，5-羥基-4-異丙基二苯乙烯殼聚糖凝膠劑及其制備方法；CN102626524A公開了殼聚糖婦科抗菌凝膠及其制備方法；CN101757071A公開了一種不可逆陰道抗菌凝膠制劑及其制備方法等。
[0004]這些現(xiàn)有技術(shù)存在如下技術(shù)缺陷:1、多數(shù)凝膠劑雖以殼聚糖為主體基質(zhì)，但都負載其它的藥物，其中包括化學(xué)藥物、生物藥物、中草藥或納米銀等，采用殼聚糖制成凝膠劑型的目的主要是使藥物起到緩釋作用；2、一般使用合成材料卡波姆等作為形成凝膠的主要材料；3、未使用其它可產(chǎn)生損傷組織與細胞修復(fù)作用的天然活性生物質(zhì)材料，產(chǎn)品的有效性與安全性受到限制。因此，研發(fā)一種制作簡單、安全、環(huán)保，并且具有組織修復(fù)功能的新型純殼聚糖凝膠劑用于臨床治療具有重要意義?！?br/>【發(fā)明內(nèi)容】
】
[0005][要解決的技術(shù)問題]
[0006]本發(fā)明的目的是提供一種抗菌殼聚糖凝膠劑。
[0007]本發(fā)明的另一個目的是提供所述抗菌殼聚糖凝膠劑的制備方法。
[0008][技術(shù)方案]
[0009]本發(fā)明是通過下述技術(shù)方案實現(xiàn)的。
[0010]本發(fā)明涉及一種抗菌殼聚糖凝膠劑的制備方法。
[0011]該抗菌殼聚糖凝膠劑制備方法的步驟如下:
[0012]A、制備含殼聚糖的復(fù)合液
[0013]將冰醋酸與蒸餾水混合均勻，往其中加入分子量60X 104Da、脫乙酰度85_95%的高分子量殼聚糖與分子量低于I X 103Da、脫乙酰度98-100%的低分子量殼聚糖，攪拌溶解，均化后再加入聚氧乙烯羊毛醇醚，攪拌均勻，得到一種含殼聚糖的復(fù)合液；
[0014]B、制備蠶絲蛋白乙醇溶液
[0015]將蠶絲蛋白加到乙醇水溶液中，攪拌溶解，得到一種蠶絲蛋白乙醇溶液； [0016]C、制備卡拉膠溶液
[0017]將蒸餾水加熱到溫度90~100°C，然后加入卡拉膠，攪拌溶解，得到一種卡拉膠溶液；
[0018]D、制備季鱗化合物溶液
[0019]烯丙基三苯基溴化膦與烯丙基三戊基氯化膦按照重量比1: 1.8~2.2進行混合，得到一種混合物；然后將所述混合物加到蒸餾水中，溶解后再加入蔗糖脂肪酸酯，攪拌均勻，得到一種含有蔗糖脂肪酸酯的季鱗化合物溶液；
[0020]E、制備凝膠劑
[0021]將步驟A得到的含殼聚糖的復(fù)合液與步驟B得到的蠶絲蛋白乙醇溶液混合均勻，再把混合溶液加到步驟C得到的卡拉膠溶液中，攪拌均勻，接著加入步驟D得到的含有蔗糖脂肪酸酯的季鱗化合物溶液，加入蒸餾水，混合均勻，得到所述的抗菌殼聚糖凝膠劑。
[0022]根據(jù)本發(fā)明的一種優(yōu)選實施方式，在步驟A中，冰醋酸與蒸餾水的重量比是0.8~
1.2:16 ~22。
[0023]根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在步驟A中，所述高分子量殼聚糖與所述低分子量殼聚糖的重量比是1.8~2.2:2.6~3.4。
[0024]根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在步驟D中，聚氧乙烯羊毛醇醚與殼聚糖總量的重量比是1:4.8~5.2。
[0025]根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在步驟B中，蠶絲蛋白與乙醇水溶液的重量比是 0.3 ~0.8:1.6 ~2.4。
[0026]根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在步驟B中，所述的乙醇水溶液的濃度是以體積計80~95 %。
[0027]根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在步驟C中，蒸餾水與卡拉膠的重量比是25 ~35:0.5 ~1.8。
[0028]根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在步驟D中，烯丙基三苯基溴化膦與烯丙基三戊基氯化膦混合物與蒸餾水的重量比是0.1~0.5:8~12。
[0029]根據(jù)本發(fā)明的另一種優(yōu)選實施方式，在步驟D中，烯丙基三苯基溴化膦與烯丙基三戊基氯化膦混合物與蔗糖脂肪酸酯的重量比是0.1~0.5:0.8~1.2。
[0030]本發(fā)明還涉及采用所述制備方法得到的抗菌殼聚糖凝膠劑。所述的抗菌殼聚糖凝膠劑對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌、白色念珠菌或綠膿桿菌的抗菌能力達到99%以上。
[0031 ] 下面將更詳細地描述本發(fā)明。
[0032]本發(fā)明涉及一種抗菌殼聚糖凝膠劑的制備方法。
[0033]該抗菌殼聚糖凝膠劑制備方法的步驟如下:
[0034]A、制備含殼聚糖的復(fù)合液
[0035]將冰醋酸與蒸餾水混合均勻，往其中加入分子量60X 104Da、脫乙酰度85_95%的高分子量殼聚糖與分子量低于I X 103Da、脫乙酰度98-100%的低分子量殼聚糖，攪拌溶解，均化后再加入聚氧乙烯羊毛醇醚，攪拌均勻，得到一種含殼聚糖的復(fù)合液；
[0036]在這個步驟中，冰醋酸與蒸餾水的重量比是0.8~1.2:16~22，優(yōu)選地，冰醋酸與蒸餾水的重量比是1.0: 18~20。
[0037]殼聚糖(β-(I — 4)- 2-氨基-2-脫氧-D-葡萄糖)的化學(xué)結(jié)構(gòu)為帶陽離子的高分子堿性多糖聚合物，是自然界唯一帶正電荷、陽離子食用纖維；它具有物理性能穩(wěn)定、良好的溶解性、親水吸濕性、生物降解性、生物相容性和成膜性、粘結(jié)性、透氣性等理化性能。
[0038]在本發(fā)明中，將高分子量殼聚糖與低分子量殼聚糖配合使用的目的在于利用高分子量殼聚糖的良好膠凝性質(zhì)與低分子量殼聚糖的良好抗菌性質(zhì)。
[0039]在這個步驟中，所述高分子量殼聚糖與所述低分子量殼聚糖的重量比是1.8~
2.2:2.6~3.4。如果高分子量殼聚糖的量過低或過高時，則會使該凝膠劑的凝膠性質(zhì)受到影響。同樣地，如果低分子量殼聚糖的量過低或過高時，則會使凝膠劑的抗菌性能受到影響。因此，所述聞分子量殼聚糖與所述低分子量殼聚糖的重量比為1.8~2.2:2.6~3.4是合理的，優(yōu)選地是2.0:2.8~3.2。
[0040]本發(fā)明使用的高分子量殼聚糖與低分子量殼聚糖是目前市場上銷售的產(chǎn)品，例如由濟南海得貝海洋生物工程有限公司以商品名食品醫(yī)藥級殼聚糖銷售的高分子量殼聚糖，由河北百味生物科技有限公司以商品名殼聚糖銷售的低分子量殼聚糖。
[0041]所述的聚氧乙烯羊毛醇醚(ethoxylated lanolin alcohol)是由羊毛脂醇與環(huán)氧乙烷通過加成反應(yīng)制成的。在本發(fā)明中，聚氧乙烯羊毛醇醚的作用在于提高增溶與改善對皮膚的滲透相容作用。
[0042]在這個步驟中，所述聚氧乙烯羊毛醇醚與殼聚糖總量(所述高分子量殼聚糖的量與所述低分子量殼聚糖的量之和)的重量比是1:4.8~5.2。根據(jù)本發(fā)明，如果殼聚糖總量小于4，8，則會使凝膠的形成效果及抗菌作用下降；如果殼聚糖總量大于5.2，則會使凝膠對皮膚的潤濕與滲透作用效果下降；因此，殼聚糖總量為4.8~5.2是恰當(dāng)?shù)?，?yōu)選地是1:5.0。
[0043]本發(fā)明使用的聚氧乙烯羊毛醇醚是目前市場上銷售的產(chǎn)品，例如由英國禾大公司以商品名聚氧乙烯羊毛醇醚銷售的產(chǎn)品。
[0044]B、制備蠶絲蛋白乙醇溶液[0045]將蠶絲蛋白加到乙醇水溶液中，攪拌溶解，得到一種蠶絲蛋白乙醇溶液。
[0046]蠶絲蛋白是從蠶絲中提取的天然高分子纖維蛋白，它的含量是蠶絲量的70%~80%，它含有18種氨基酸，其中甘氨酸(gly)、丙氨酸(ala)和絲氨酸(ser)的量為所述氨基酸總量的80%以上。
[0047]在這個步驟中，蠶絲蛋白與乙醇水溶液的重量比是0.3~0.8:1.6~2.4。所述的乙醇水溶液的濃度是以體積計80~95%。
[0048]根據(jù)本發(fā)明，蠶絲蛋白與乙醇水溶液的量小于或高于這個范圍都是不可取的，因為蠶絲蛋白量高則使溶解不完全且溶液粘度偏高，量低則達不到蠶絲蛋白起到的對皮膚的護理和修復(fù)效果。優(yōu)選地,蠶絲蛋白與乙醇水溶液的重量比是0.4~0.6:1.8~2.2。
[0049]本發(fā)明使用的蠶絲蛋白是目前市場上銷售的產(chǎn)品，例如由蘇州寶絲立蠶絲蛋白纖維科技有限公司以商品名蠶絲蛋白纖維銷售的產(chǎn)品。
[0050]C、制備卡拉膠溶液
[0051]將蒸餾水加熱到溫度90~100°C，然后加入卡拉膠，攪拌溶解，得到一種卡拉膠溶液。
[0052]卡拉膠(kappa-Carrageenan)是從麒麟菜等紅藻類海草中提煉出來的親水性膠體，它是由半乳糖及脫水半乳糖所組成的多糖類硫酸酯鈣、鉀、鈉、銨鹽。本發(fā)明使用的卡拉膠是目前市場上銷售的產(chǎn)品，例如由寧波北侖雅旭化工有限公司以商品名卡拉膠銷售的產(chǎn)品O
[0053]在這個步驟中，蒸餾水與卡拉膠的重量比是25~35:0.5~1.8。
[0054]D、制備季鱗化合物溶液
[0055]烯丙基三苯基溴化膦與烯丙基三戊基氯化膦按照重量比1: 1.8~2.2進行混合，得到一種混合物；然后將所述混合物加到蒸餾水中，溶解后再加入蔗糖脂肪酸酯，攪拌均勻，得到一種含有蔗糖脂肪酸酯的季鱗化合物溶液；
[0056]在這個步驟中，烯丙基三苯基溴化膦(Allyltriphenylphosphoniumbromide)的作用是通過帶三個苯基的作用，改善凝膠的凝膠性質(zhì)，提高殼聚糖的抗菌性能。
[0057]烯丙基三戍基氯化膦(Allyltriamylphosphoniumchloride)的作用是通過帶直鏈烷基(戊基)季鱗化合物的作用，與帶苯基季鱗化合物產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)，大大提升凝膠的膠凝性質(zhì)與殼聚糖的抗菌性能。
[0058]鹿糖脂肪酸酯(Sucrose Fatty Acid Esters)的作用是作為一種非離子表面活性劑起到乳化及穩(wěn)定作用，同時，也能夠進一步提升抗菌效果。
[0059]本發(fā)明使用的烯丙基三苯基溴化膦是目前市場上銷售的產(chǎn)品，例如根據(jù)暨南大學(xué)CN102020675B專利技術(shù)制備的烯丙基三苯基溴化膦產(chǎn)品。
[0060]本發(fā)明使用的烯丙基三戊基氯化膦是目前市場上銷售的產(chǎn)品，例如由上海笛柏化學(xué)品技術(shù)有限公司以商品名烯丙基三戊基氯化膦離子液體銷售的產(chǎn)品。
[0061]本發(fā)明使用的蔗糖脂肪酸酯是目前市場上銷售的產(chǎn)品，例如由杭州金鶴來食品添加劑有限公司以商品名蔗糖酯銷售的產(chǎn)品。
[0062]在本發(fā)明中，烯丙基三苯基溴化膦與烯丙基三戊基氯化膦混合物與蒸餾水的重量比是0.1~0.5:8~12。
[0063]當(dāng)蒸餾水的量為8~12時，如果所述混合物的量小于0.1，則使其與殼聚糖的協(xié)同抗菌效果受影響；如果所述混合物的量大于0.5，則凝膠的膠凝硬度不理想；因此，所述混合物的量為0.1~0.5是合適的，優(yōu)選地，烯丙基三苯基溴化膦與烯丙基三戊基氯化膦混合物與蒸餾水的重量比是0.2~0.4:9~11。
[0064]在這個步驟中，烯丙基三苯基溴化膦與烯丙基三戊基氯化膦混合物與蔗糖脂肪酸酯(Sucrose Fatty Acid Esters)的重量比是 0.1 ~0.5:0.8 ~1.2。
[0065]當(dāng)所述混合物的量為0.1~0.5時，如果蔗糖脂肪酸酯的量小于0.8，則乳化及穩(wěn)定作用不好；如果蔗糖脂肪酸酯的量大于1.2，則對凝膠性質(zhì)不利；因此，蔗糖脂肪酸酯的量為0.8~1.2是合適的，優(yōu)選地，烯丙基三苯基溴化膦與烯丙基三戊基氯化膦混合物與蔗糖脂肪酸酯的重量比是0.2~0.4:0.9~1.1。
[0066]E、制備凝膠劑
[0067]將步驟A得到的含殼聚糖的復(fù)合液與步驟B得到的蠶絲蛋白乙醇溶液混合均勻，再把這種混合溶液加到步驟C得到的卡拉膠溶液中，攪拌均勻，接著加入步驟D得到的含有蔗糖脂肪酸酯的季鱗化合物溶液，加入蒸餾水，混合均勻，得到所述的抗菌殼聚糖凝膠劑。
[0068]本發(fā)明的抗菌殼聚糖凝膠劑經(jīng)過國家標準抑菌檢測法(GB/T16886)檢測分析，所制備的抗菌殼聚糖凝膠劑對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌、綠膿桿菌等的抗菌能力均達到99%以上,顯示出 良好的抑菌能力。
[0069]本發(fā)明是以高分子殼聚糖和低分子殼聚糖復(fù)合物為主要基質(zhì)，配合使用抗菌增效齊?、膠凝劑、組織細胞修復(fù)輔料等組合復(fù)配，避免使用其它化學(xué)藥物、生物藥物及中草藥和納米銀、卡波姆等成分，提高了凝膠劑的安全性，同時也降低成本和減少對患者的刺激性，促進患者恢復(fù)健康。
[0070]采用本發(fā)明制備的殼聚糖抗菌凝膠劑可以應(yīng)用于治療皮膚細菌感染、男女外陰瘙癢、陰道炎、腳氣病、褥瘡、皮膚長期性潰瘍等。
[0071]本發(fā)明的殼聚糖抗菌凝膠劑可以采用本【技術(shù)領(lǐng)域】里的技術(shù)人員熟知的常規(guī)方法進行應(yīng)用。
[0072][有益效果]
[0073]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下有益效果:
[0074]1、本發(fā)明的殼聚糖抗菌凝膠劑主體是天然產(chǎn)物殼聚糖，沒有使用其它合成的化學(xué)或生物藥物、中草藥等，不易產(chǎn)生耐藥性，生物安全性高；
[0075]2、以分子量60 X 14Da的高分子量殼聚糖作為膠凝基質(zhì)，配合使用卡拉膠等天然海藻提取物，取得很好的膠凝效果，避免使用卡波姆等合成化學(xué)材料，進一步提高了產(chǎn)品的安全性與環(huán)保效益；
[0076]3、米用分子量低于100Da低分子量高脫乙酰度的殼聚糖作為抗菌主體,配合使用季鱗化合物作為增效劑，取得很好的抗菌效果，避免使用其它藥物；
[0077]4、使用了蠶絲蛋白與蔗糖脂肪酸酯復(fù)合物等具有損傷組織與細胞修復(fù)作用的天然活性生物質(zhì)材料，能夠促進患者早日恢復(fù)健康機能；
[0078]5、本發(fā)明的殼聚糖抗菌凝膠劑具有高效協(xié)同抗有害微生物作用，對細菌、病毒、真菌均具有明顯殺滅效果，對金黃色葡萄球菌、溶血性鏈性菌、綠膿桿菌、白色念珠菌以及大腸桿菌和其它有害真菌等臨床致病菌均有99%以上的殺滅效率?！尽揪唧w實施方式】】
[0079]通過下述實施例將能夠更好地理解本發(fā)明。
[0080]實施例1:殼聚糖抗菌凝膠劑的制備
[0081]A、制備含殼聚糖的復(fù)合液
[0082]將冰醋酸與蒸餾水按照重量比0.9:22混合均勻，按照高分子量殼聚糖與低分子量殼聚糖的重量比1.8:2.6，往其冰醋酸水溶液中加入由濟南海得貝海洋生物工程有限公司以商品名食品醫(yī)藥級殼聚糖銷售的分子量60X 104Da、脫乙酰度88%的高分子量殼聚糖、由河北百味生物科技有限公司以商品名殼聚糖銷售的分子量800Da、脫乙酰度100%的低分子量殼聚糖，攪拌溶解，均化后再按照聚氧乙烯羊毛醇醚與殼聚糖總量的重量比1:4.8加入由英國禾大公司以商品名聚氧乙烯羊毛醇醚銷售的聚氧乙烯羊毛醇醚，攪拌均勻，得到一種含殼聚糖的復(fù)合液；
[0083]B、制備蠶絲蛋白乙醇溶液
[0084]按照蠶絲蛋白與濃度以體積計80%的乙醇水溶液的重量比0.3:1.8，將由蘇州寶絲立蠶絲蛋白纖維科技有限公司以商品名蠶絲蛋白纖維銷售的蠶絲蛋白加到所述乙醇水溶液中，攪拌溶解，得到一種蠶絲蛋白乙醇溶液；
[0085]C、制備卡拉膠溶液
[0086]將蒸餾水加熱到溫度90°C，然后按照蒸餾水與卡拉膠的重量比25:1.0往其蒸餾水中加入由寧波北侖雅 旭化工有限公司以商品名卡拉膠銷售的卡拉膠，攪拌溶解，得到一種卡拉膠溶液；
[0087]D、制備季鱗化合物溶液
[0088]由根據(jù)暨南大學(xué)CN102020675B專利技術(shù)制備的烯丙基三苯基溴化膦產(chǎn)品與由上海笛柏化學(xué)品技術(shù)有限公司以商品名烯丙基三戊基氯化膦離子液體銷售的烯丙基三戊基氯化膦按照重量比1:1.8進行混合，得到一種混合物；然后按照所述混合物與蒸餾水的重量比0.1:11，將所述的混合物加到蒸餾水中，溶解后再加入由杭州金鶴來食品添加劑有限公司以商品名蔗糖酯銷售的蔗糖脂肪酸酯，其中所述的混合物與蔗糖脂肪酸酯的重量比是0.1:1.1，攪拌均勻，得到一種含有蔗糖脂肪酸酯的季鱗化合物溶液；
[0089]E、制備凝膠劑
[0090]將步驟A得到的含殼聚糖的復(fù)合液與步驟B得到的蠶絲蛋白乙醇溶液混合均勻，再把這種混合溶液加到步驟C得到的卡拉膠溶液中，攪拌均勻，接著加入步驟D得到的含有蔗糖脂肪酸酯的季鱗化合物溶液，加入蒸餾水，混合均勻，得到所述的抗菌殼聚糖凝膠劑。
[0091]根據(jù)本說明書描述的國家標準抑菌檢測法檢測分析確定，本實施例制備的抗菌殼聚糖凝膠劑對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌、綠膿桿菌的抗菌能力均達到99.3%。
[0092]實施例2:殼聚糖抗菌凝膠劑的制備
[0093]A、制備含殼聚糖的復(fù)合液
[0094]將冰醋酸與蒸餾水按照重量比0.8:16混合均勻，按照高分子量殼聚糖與低分子量殼聚糖的重量比2.0:3.4，往其冰醋酸水溶液中加入由濟南海得貝海洋生物工程有限公司以商品名食品醫(yī)藥級殼聚糖銷售的分子量60X 104Da、脫乙酰度85%的高分子量殼聚糖、由河北百味生物科技有限公司以商品名殼聚糖銷售的分子量900Da、脫乙酰度98%的低分子量殼聚糖，攪拌溶解，均化后再按照聚氧乙烯羊毛醇醚與殼聚糖總量的重量比1:5.2加入由英國禾大公司以商品名聚氧乙烯羊毛醇醚銷售的聚氧乙烯羊毛醇醚，攪拌均勻，得到一種含殼聚糖的復(fù)合液；
[0095]B、制備蠶絲蛋白乙醇溶液
[0096]按照蠶絲蛋白與濃度以體積計85%的乙醇水溶液的重量比0.4:2.3，將由蘇州寶絲立蠶絲蛋白纖維科技有限公司以商品名蠶絲蛋白纖維銷售的蠶絲蛋白加到所述乙醇水溶液中，攪拌溶解，得到一種蠶絲蛋白乙醇溶液；
[0097]C、制備卡拉膠溶液
[0098]將蒸餾水加熱到溫度92°C，然后按照蒸餾水與卡拉膠的重量比30:0.5往其蒸餾水中加入由寧波北侖雅旭化工有限公司以商品名卡拉膠銷售的卡拉膠，攪拌溶解，得到一種卡拉膠溶液；
[0099]D、制備季鱗化合物溶液
[0100]由根據(jù)暨南大學(xué)CN102020675B專利技術(shù)制備的烯丙基三苯基溴化膦產(chǎn)品與由上海笛柏化學(xué)品技術(shù)有限公司以商品名烯丙基三戊基氯化膦離子液體銷售的烯丙基三戊基氯化膦按照重量比1:2.0進行混合，得到一種混合物；然后按照所述混合物與蒸餾水的重量比0.5:8，將所述的混合物加到蒸餾水中，溶解后再加入由杭州金鶴來食品添加劑有限公司以商品名蔗糖酯銷售的蔗糖脂肪酸酯，其中所述的混合物與蔗糖脂肪酸酯的重量比是0.2:0.8，攪拌均勻，得到一種含有蔗糖脂肪酸酯的季鱗化合物溶液；
[0101]E、制備凝膠劑
[0102]將步驟A得到的含殼聚糖的復(fù)合液與步驟B得到的蠶絲蛋白乙醇溶液混合均勻，再把這種混合溶液加到步驟C得到的卡拉膠溶液中，攪拌均勻，接著加入步驟D得到的含有蔗糖脂肪酸酯的季鱗化合物溶液，加入蒸餾水，混合均勻，得到所述的抗菌殼聚糖凝膠劑。
[0103]根據(jù)本說明書描述的國家標準抑菌檢測法檢測分析確定，本實施例制備的抗菌殼聚糖凝膠劑對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌、綠膿桿菌的抗菌能力均達到99.6%。
[0104]實施例3:殼聚糖抗菌凝膠劑的制備
[0105]A、制備含殼聚糖的復(fù)合液
[0106]將冰醋酸與蒸餾水按照重量比1.2:18混合均勻，按照高分子量殼聚糖與低分子量殼聚糖的重量比2.2:3.2，往其冰醋酸水溶液中加入由濟南海得貝海洋生物工程有限公司以商品名食品醫(yī)藥級殼聚糖銷售的分子量60X 104Da、脫乙酰度92%的高分子量殼聚糖、由河北百味生物科技有限公司以商品名殼聚糖銷售的分子量960Da、脫乙酰度100%的低分子量殼聚糖，攪拌溶解，均化后再按照聚氧乙烯羊毛醇醚與殼聚糖總量的重量比1:5.0加入由英國禾大公司以商品名聚氧乙烯羊毛醇醚銷售的聚氧乙烯羊毛醇醚，攪拌均勻，得到一種含殼聚糖的復(fù)合液；
[0107]B、制備蠶絲蛋白乙醇溶液
[0108]按照蠶絲蛋白與濃度以體積計90%的乙醇水溶液的重量比0.6:1.6，將由蘇州寶絲立蠶絲蛋白纖維科技有限公司以商品名蠶絲蛋白纖維銷售的蠶絲蛋白加到所述乙醇水溶液中，攪拌溶解，得到一種蠶絲蛋白乙醇溶液；
[0109]C、制備卡拉膠溶液
[0110]將蒸餾水加熱到溫度100°C，然后按照蒸餾水與卡拉膠的重量比35:1.8往其蒸餾水中加入由寧波北侖雅旭化工有限公司以商品名卡拉膠銷售的卡拉膠，攪拌溶解，得到一種卡拉膠溶液；
[0111]D、制備季鱗化合物溶液
[0112]由根據(jù)暨南大學(xué)CN102020675B專利技術(shù)制備的烯丙基三苯基溴化膦產(chǎn)品與由上海笛柏化學(xué)品技術(shù)有限公司以商品名烯丙基三戊基氯化膦離子液體銷售的烯丙基三戊基氯化膦按照重量比1:2.2進行混合，得到一種混合物；然后按照所述混合物與蒸餾水的重量比0.4:10，將所述的混合物加到蒸餾水中，溶解后再加入由杭州金鶴來食品添加劑有限公司以商品名蔗糖酯銷售的蔗糖脂肪酸酯，其中所述的混合物與蔗糖脂肪酸酯的重量比是0.5:1.0，攪拌均勻，得到一種含有蔗糖脂肪酸酯的季鱗化合物溶液；
[0113]E、制備凝膠劑
[0114]將步驟A得到的含殼聚糖的復(fù)合液與步驟B得到的蠶絲蛋白乙醇溶液混合均勻，再把這種混合溶液加到步驟C得到的卡拉膠溶液中，攪拌均勻，接著加入步驟D得到的含有蔗糖脂肪酸酯的季鱗化合物溶液，加入蒸餾水，混合均勻，得到所述的抗菌殼聚糖凝膠劑。
[0115]根據(jù)本說明書描述的國家標準抑菌檢測法檢測分析確定，本實施例制備的抗菌殼聚糖凝膠劑對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌、綠膿桿菌的抗菌能力均達到99.2%。
[0116]實施例4:殼聚糖抗菌凝膠劑的制備 [0117]A、制備含殼聚糖的復(fù)合液
[0118]將冰醋酸與蒸餾水按照重量比1.0:20混合均勻，按照高分子量殼聚糖與低分子量殼聚糖的重量比1.9:3.0，往其冰醋酸水溶液中加入由濟南海得貝海洋生物工程有限公司以商品名食品醫(yī)藥級殼聚糖銷售的分子量60X 104Da、脫乙酰度95%的高分子量殼聚糖、由河北百味生物科技有限公司以商品名殼聚糖銷售的分子量84?a、脫乙酰度98%的低分子量殼聚糖，攪拌溶解，均化后再按照聚氧乙烯羊毛醇醚與殼聚糖總量的重量比1:4.9加入由英國禾大公司以商品名聚氧乙烯羊毛醇醚銷售的聚氧乙烯羊毛醇醚，攪拌均勻，得到一種含殼聚糖的復(fù)合液；
[0119]B、制備蠶絲蛋白乙醇溶液
[0120]按照蠶絲蛋白與濃度以體積計95%的乙醇水溶液的重量比0.8:2.4，將由蘇州寶絲立蠶絲蛋白纖維科技有限公司以商品名蠶絲蛋白纖維銷售的蠶絲蛋白加到所述乙醇水溶液中，攪拌溶解，得到一種蠶絲蛋白乙醇溶液；
[0121]C、制備卡拉膠溶液
[0122]將蒸餾水加熱到溫度96°C，然后按照蒸餾水與卡拉膠的重量比30:1.4往其蒸餾水中加入由寧波北侖雅旭化工有限公司以商品名卡拉膠銷售的卡拉膠，攪拌溶解，得到一種卡拉膠溶液；
[0123]D、制備季鱗化合物溶液
[0124]由根據(jù)暨南大學(xué)CN102020675B專利技術(shù)制備的烯丙基三苯基溴化膦產(chǎn)品與由上海笛柏化學(xué)品技術(shù)有限公司以商品名烯丙基三戊基氯化膦離子液體銷售的烯丙基三戊基氯化膦按照重量比1:2.0進行混合，得到一種混合物；然后按照所述混合物與蒸餾水的重量比0.2:12，將所述的混合物加到蒸餾水中，溶解后再加入由杭州金鶴來食品添加劑有限公司以商品名蔗糖酯銷售的蔗糖脂肪酸酯，其中所述的混合物與蔗糖脂肪酸酯的重量比是0.4:1.2，攪拌均勻，得到一種含有蔗糖脂肪酸酯的季鱗化合物溶液；
[0125]E、制備凝膠劑[0126]將步驟A得到的含殼聚糖的復(fù)合液與步驟B得到的蠶絲蛋白乙醇溶液混合均勻，再把這種混合溶液加到步驟C得到的卡拉膠溶液中，攪拌均勻，接著加入步驟D得到的含有蔗糖脂肪酸酯的季鱗化合物溶液，加入蒸餾水，混合均勻，得到所述的抗菌殼聚糖凝膠劑。
[0127]根據(jù)本說明書描述的國家標準抑菌檢測法檢測分析確定，本實施例制備的抗菌殼聚糖凝膠劑對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌、綠膿桿菌的抗菌能力均達到99.6%。
[0128]實施例5:殼聚糖抗菌凝膠劑的制備
[0129]A、制備含殼聚糖的復(fù)合液
[0130]將冰醋酸與蒸餾水按照重量比0.9:16混合均勻，按照高分子量殼聚糖與低分子量殼聚糖的重量比2.2:3.0，往其冰醋酸水溶液中加入由濟南海得貝海洋生物工程有限公司以商品名食品醫(yī)藥級殼聚糖銷售的分子量60X 104Da、脫乙酰度88%的高分子量殼聚糖、由河北百味生物科技有限公司以商品名殼聚糖銷售的分子量900Da、脫乙酰度100%的低分子量殼聚糖，攪拌溶解，均化后再按照聚氧乙烯羊毛醇醚與殼聚糖總量的重量比1:4.9加入由英國禾大公司以商品名聚氧乙烯羊毛醇醚銷售的聚氧乙烯羊毛醇醚，攪拌均勻，得到一種含殼聚糖的復(fù)合液；
[0131]B、制備蠶絲蛋白乙醇溶液
[0132]按照蠶絲蛋白與濃度以體積計80%的乙醇水溶液的重量比0.4:2.4，將由蘇州寶絲立蠶絲蛋白纖維科技有限公司以商品名蠶絲蛋白纖維銷售的蠶絲蛋白加到所述乙醇水溶液中，攪拌溶解，得到一種蠶絲蛋白乙醇溶液； [0133]C、制備卡拉膠溶液
[0134]將蒸餾水加熱到溫度92°C，然后按照蒸餾水與卡拉膠的重量比35:1.4往其蒸餾水中加入由寧波北侖雅旭化工有限公司以商品名卡拉膠銷售的卡拉膠，攪拌溶解，得到一種卡拉膠溶液；
[0135]D、制備季鱗化合物溶液
[0136]由根據(jù)暨南大學(xué)CN102020675B專利技術(shù)制備的烯丙基三苯基溴化膦產(chǎn)品與由上海笛柏化學(xué)品技術(shù)有限公司以商品名烯丙基三戊基氯化膦離子液體銷售的烯丙基三戊基氯化膦按照重量比1:1.8進行混合，得到一種混合物；然后按照所述混合物與蒸餾水的重量比0.5:10，將所述的混合物加到蒸餾水中，溶解后再加入由杭州金鶴來食品添加劑有限公司以商品名蔗糖酯銷售的蔗糖脂肪酸酯，其中所述的混合物與蔗糖脂肪酸酯的重量比是
0.2:1.2，攪拌均勻，得到一種含有蔗糖脂肪酸酯的季鱗化合物溶液；
[0137]E、制備凝膠劑
[0138]將步驟A得到的含殼聚糖的復(fù)合液與步驟B得到的蠶絲蛋白乙醇溶液混合均勻，再把這種混合溶液加到步驟C得到的卡拉膠溶液中，攪拌均勻，接著加入步驟D得到的含有蔗糖脂肪酸酯的季鱗化合物溶液，加入蒸餾水，混合均勻，得到所述的抗菌殼聚糖凝膠劑。
[0139]根據(jù)本說明書描述的國家標準抑菌檢測法檢測分析確定，本實施例制備的抗菌殼聚糖凝膠劑對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌、綠膿桿菌的抗菌能力均達到99.8%。
[0140]實施例6:殼聚糖抗菌凝膠劑的制備
[0141]A、制備含殼聚糖的復(fù)合液
[0142]將冰醋酸與蒸餾水按照重量比1.2:20混合均勻，按照高分子量殼聚糖與低分子量殼聚糖的重量比1.8:3.4，往其冰醋酸水溶液中加入由濟南海得貝海洋生物工程有限公司以商品名食品醫(yī)藥級殼聚糖銷售的分子量60X 104Da、脫乙酰度92%的高分子量殼聚糖、由河北百味生物科技有限公司以商品名殼聚糖銷售的分子量84?a、脫乙酰度100%的低分子量殼聚糖，攪拌溶解，均化后再按照聚氧乙烯羊毛醇醚與殼聚糖總量的重量比1:4.8加入由英國禾大公司以商品名聚氧乙烯羊毛醇醚銷售的聚氧乙烯羊毛醇醚，攪拌均勻，得到一種含殼聚糖的復(fù)合液；
[0143]B、制備蠶絲蛋白乙醇溶液
[0144]按照蠶絲蛋白與濃度以體積計85%的乙醇水溶液的重量比0.6:1.6，將由蘇州寶絲立蠶絲蛋白纖維科技有限公司以商品名蠶絲蛋白纖維銷售的蠶絲蛋白加到所述乙醇水溶液中，攪拌溶解，得到一種蠶絲蛋白乙醇溶液；
[0145]C、制備卡拉膠溶液
[0146]將蒸餾水加熱到溫度90°C，然后按照蒸餾水與卡拉膠的重量比30:1.0往其蒸餾水中加入由寧波北侖雅旭化工有限公司以商品名卡拉膠銷售的卡拉膠，攪拌溶解，得到一種卡拉膠溶液；
[0147]D、制備季鱗化合物溶液
[0148]由根據(jù)暨南大學(xué)CN102020675B專利技術(shù)制備的烯丙基三苯基溴化膦產(chǎn)品與由上海笛柏化學(xué)品技術(shù)有限公司以商品名烯丙基三戊基氯化膦離子液體銷售的烯丙基三戊基氯化膦按照重量比1:2.2進行混合，得到一種混合物；然后按照所述混合物與蒸餾水的重量比0.2:11，將所述的混合物加到蒸餾水中，溶解后再加入由杭州金鶴來食品添加劑有限公司以商品名蔗糖酯銷售的蔗糖脂肪酸酯，其中所述的混合物與蔗糖脂肪酸酯的重量比是
0.2:1.0，攪拌均勻，得到一種含有蔗糖脂肪酸酯的季鱗化合物溶液；
[0149]E、制備凝膠劑
[0150]將步驟A得到的含殼聚糖的復(fù)合液與步驟B得到的蠶絲蛋白乙醇溶液混合均勻，再把這種混合 溶液加到步驟C得到的卡拉膠溶液中，攪拌均勻，接著加入步驟D得到的含有蔗糖脂肪酸酯的季鱗化合物溶液，加入蒸餾水，混合均勻，得到所述的抗菌殼聚糖凝膠劑。
[0151]根據(jù)本說明書描述的國家標準抑菌檢測法檢測分析確定，本實施例制備的抗菌殼聚糖凝膠劑對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌、綠膿桿菌的抗菌能力均達到99.5%。
【權(quán)利要求】
1.一種抗菌殼聚糖凝膠劑的制備方法，其特征在于該制備方法的步驟如下: A、制備含殼聚糖的復(fù)合液 將冰醋酸與蒸餾水混合均勻，往其中加入分子量60X 104Da、脫乙酰度85-95%的高分子量殼聚糖與分子量低于I X 103Da、脫乙酰度98-100%的低分子量殼聚糖，攪拌溶解，均化后再加入聚氧乙烯羊毛醇醚，攪拌均勻，得到一種含殼聚糖的復(fù)合液； B、制備蠶絲蛋白乙醇溶液 將蠶絲蛋白加到乙醇水溶液中，攪拌溶解，得到一種蠶絲蛋白乙醇溶液； C、制備 卡拉膠溶液 將蒸餾水加熱到溫度90~100°C，然后加入卡拉膠，攪拌溶解，得到一種卡拉膠溶液； D、制備季鱗化合物溶液 烯丙基三苯基溴化膦與烯丙基三戊基氯化膦按照重量比1: 1.8~2.2進行混合，得到一種混合物；然后將所述混合物加到蒸餾水中，溶解后再加入蔗糖脂肪酸酯，攪拌均勻，得到一種含有蔗糖脂肪酸酯的季鱗化合物溶液； E、制備凝膠劑 將步驟A得到的含殼聚糖的復(fù)合液與步驟B得到的蠶絲蛋白乙醇溶液混合均勻，再把混合溶液加到步驟C得到的卡拉膠溶液中，攪拌均勻，接著加入步驟D得到的含有蔗糖脂肪酸酯的季鱗化合物溶液，加入蒸餾水，混合均勻，得到所述的抗菌殼聚糖凝膠劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于在步驟A中，冰醋酸與蒸餾水的重量比是 0.8 ~1.2:16 ~22。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于在步驟A中，所述高分子量殼聚糖與所述低分子量殼聚糖的重量比是1.8~2.2:2.6~3.4。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于在步驟A中，聚氧乙烯羊毛醇醚與殼聚糖總量的重量比是1:4.8~5.2。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于在步驟B中，蠶絲蛋白與乙醇水溶液的重量比是0.3~0.8:1.6~2.4。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或5所述的制備方法，其特征在于在步驟C中，所述的乙醇水溶液的濃度是以體積計80~95%。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于在步驟C中，蒸餾水與卡拉膠的重量比是 25 ~35:0.5 ~1.8。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于在步驟D中，烯丙基三苯基溴化膦與烯丙基三戊基氯化膦混合物與蒸餾水的重量比是0.1~0.5:8~12。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于在步驟D中，烯丙基三苯基溴化膦與烯丙基三戊基氯化膦混合物與蔗糖脂肪酸酯的重量比是0.1~0.5:0.8~1.2。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述制備方法得到的抗菌殼聚糖凝膠劑，其特征在于它對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌、白色念珠菌或綠膿桿菌的抗菌能力達到99%以上。
【文檔編號】A61K31/722GK104027300SQ201410321539
【公開日】2014年9月10日 申請日期:2014年7月7日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月7日
【發(fā)明者】湯瑞明, 耿在云 申請人:江蘇瑞京科技發(fā)展有限公司