小花棘豆的黃酮提取物作為抑菌劑的應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了小花棘豆的黃酮提取物作為抑菌劑的應用。 申請人:進行的實驗顯示，小花棘豆中的黃酮類化學成分提取物及其藥物制劑可以有效抑制常見的病菌微生物，例如金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、變形桿菌等。
【專利說明】小花棘豆的黃酮提取物作為抑菌劑的應用

【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及小花棘豆的黃酮提取物的藥學用途，屬于醫(yī)藥領域。

【背景技術】
[0002]目前食品加工及貯藏過程極易受到大腸埃希桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、變形桿菌及霉菌等多種細菌的危害，對食品質量和消費者健康不利。為了殺滅和抑制病菌滋生，現(xiàn)多采用添加苯甲酸鈉、山梨酸鉀等化學防腐劑等成分抑制有害微生物生長，但這些化學防腐劑對人體有潛在的危害。
[0003]同時，在醫(yī)藥領域由于抗生素的濫用導致了耐藥菌株的劇增，細菌的耐藥性和耐藥感染已成為目前亟待解決的問題，其解決方法除了合理用藥以外，新抗菌藥物的篩選也十分重要。
[0004]小花棘豆(OxytropisglabraDC)是豆科(Leguminosae)棘豆屬(Oxytropis)植物，在新疆分布廣泛，是一種重要的蒙藥及哈藥原料。黃酮類化合物是小花棘豆的有效成分之一，國內外研究認為黃酮類化合物具有抗炎、抗突變、降壓、清熱解毒、鎮(zhèn)靜、利尿等作用，但到目前為止，并未有小花棘豆黃酮制劑抑菌作用的研究報道和專利申請。


【發(fā)明內容】

[0005] 申請人:進行的長期研究發(fā)現(xiàn)，小花棘豆的黃酮提取物具有廣泛抑制各種常見細菌的效果，并且其耐藥菌少、藥源豐富，不良反應少，應用簡便。
[0006]基于上述發(fā)現(xiàn)， 申請人:完成了本發(fā)明的技術方案。
[0007]首先，本發(fā)明公開了小花棘豆的黃酮提取物作為抑菌劑的應用。
[0008]其中，上述應用所針對的細菌涵蓋了目前常見的病菌微生物，包括但不限于金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、變形桿菌等， 申請人:通過實驗證實針對多種微生物細菌，小花棘豆的黃酮提取物效果均優(yōu)于傳統(tǒng)的苯甲酸鈉、山梨酸鉀等，并具有良好的安全性。
[0009]其中，小花棘豆的黃酮提取物可以從市場上購買，也可根據(jù)文獻的記載自行提取，例如小花棘豆總黃酮提取工藝及不同生長期總黃酮含量(羅楊等，江蘇農(nóng)業(yè)科學，2011.03)、鄂爾多斯草原小花棘豆黃酮含量及化感作用的研究(羅楊，北京林業(yè)科學，2011)等均研究了小花棘豆的黃酮提取物的提取工藝。
[0010]優(yōu)選的，小花棘豆的黃酮提取物的制備方法包括下述步驟:
[0011]I)將小花棘豆原料在有機溶劑中通過微波提取、過濾、濃縮后得到小花棘豆總提取物；
[0012]2)小花棘豆總提取物過聚酰胺樹脂層析柱進行用10%~100%的乙醇洗脫梯度洗脫，收集80 %~100 %的乙醇洗脫液濃縮干燥后得到小花棘豆的黃酮提取物。
[0013]在上述方法中，所用的有機溶劑優(yōu)選為乙醇，微波提取參數(shù)可根據(jù)需要進行調整。
[0014]本發(fā)明優(yōu)選的微波提取參數(shù)為微波功率300W，甲醇濃度100%，提取時間120s，物料比1: 20。聚酰胺樹脂分離純化的參數(shù)為:上樣濃度2.0mg/mL，上柱流速為3BV/h，解吸附乙醇濃度為80%~100%，流速為3BV/h。
[0015]本發(fā)明的提取方法并不僅限于上述參數(shù)，適當調整微波功率、提取時間、物料比、上樣濃度、流速等都是本領域技術人員可以理解的，這種調整只影響產(chǎn)率。
[0016]由于小花棘豆的黃酮提取物具有理想的殺滅和抑制細菌的能力，本發(fā)明還公開了一種具有抑菌效果的藥物組合物，包括小花棘豆的黃酮提取物作為抑菌活性成分，和藥學上任意可用的輔料。
[0017]上述的輔料，與藥物組合物的劑型顯著相關，本領域技術人員可根據(jù)具體的制劑需要，調整輔料的類型和用量。具體的制劑類型可以是片劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、液劑等可口服給藥的劑型，在這些劑型中，將小花棘豆的黃酮提取物與一種或多種潤滑劑、崩解劑、穩(wěn)定劑、溶解助劑、糖衣或胃溶或腸溶包衣等藥用輔料組合，這些輔料都是本領域標準的藥用輔料，此處不予贅述。
[0018]例如，當上述制劑是口服給藥的液體組合物時，例如乳劑、溶液劑、混懸劑、糖漿劑等，是將組合物與增溶劑、濕潤劑、懸浮劑、甜味劑、風味劑、芳香劑、防腐劑等藥用輔料組合使用。
[0019]優(yōu)選的，在所述藥物組合物中，所述輔料為環(huán)糊精(賦形劑)，其用量(質量百分比)為小花棘豆的黃酮提取物3~5%，β-環(huán)糊精95~97%。
[0020]為了便于使用，可以將藥物組合物加入到水中配制成溶液，在此情形下，藥物組合物的濃度為 0.005 g/mL ~0.020g/mL, pH 為 5.0 ~6.0。
[0021]通過上述改進，本發(fā)明的技術方案具有如下優(yōu)點:
[0022]I)抗菌譜廣，耐藥菌少；
[0023]2)藥源豐富，可就地取材；
[0024]3)作用廣泛，除抗病原微生物作用外，還具有免疫調節(jié)等藥理作用；
[0025]4)不良反應少，應用簡便。

【具體實施方式】
[0026]實施例1:小花棘豆黃酮的提取制備
[0027]稱取小花棘豆樣品，按照物料比l:20g/mL的比例加入體積分數(shù)100%的甲醇微波提取120s，微波功率300W，溫度45°C，提取完成后過濾，濾液采用旋轉蒸發(fā)儀濃縮，恒溫干燥箱干燥，得到小花棘豆總提取物；將小花棘豆總提取物用水充分溶解；向層析柱中加入1/3體積的95%乙醇，然后將聚酰胺樹脂用乙醇轉移至層析柱中，加入100%的乙醇溶液(V/V)，體積為樹脂體積的3倍，流速為I倍樹脂體積/min，然后用去離子水洗至無醇味后進行小花棘豆總提取物水溶液的梯度洗脫，其中上樣濃度2.0mg/mL，上柱流速為3BV/h，用10%~100%的乙醇洗脫，收集80%~100%的乙醇洗脫液，經(jīng)旋轉蒸發(fā)儀濃縮，冷凍干燥儀干燥，
[0028]得到棕黃色粉末即為小花棘豆黃酮提取物。
[0029]實施例2:含有小花棘豆黃酮提取物的藥物制劑，可按照下列比例配置
[0030]I)按照以下比例配制:小花棘豆黃酮提取物含量3%，賦形劑環(huán)糊精含量97% ；
[0031]2)按照以下比例配制:小花棘豆黃酮提取物含量4%，賦形劑環(huán)糊精含量96% ；
[0032]3)按照以下比例配制:小花棘豆黃酮提取物含量5%，賦形劑環(huán)糊精含量95%。實施例3:含有小花棘豆黃酮提取物的藥物制劑的溶液，可按照下列比例配置
[0033]I)取實施例3配置I的藥物制劑，加入到水中，稀釋到濃度為0.005g/mL的小花棘豆黃酮抑菌劑溶液，使用食品級醋酸調節(jié)抑菌液的pH至5.0 ;
[0034]2)取實施例3配置2的藥物制劑，加入到水中，稀釋到濃度為0.010g/mL的小花棘豆黃酮抑菌劑溶液，使用食品級醋酸調節(jié)抑菌液的pH至5.4 ;
[0035]3)取實施例3配置I的藥物制劑，加入到水中，稀釋到濃度為0.020g/mL的小花棘豆黃酮抑菌劑溶液，使用食品級醋酸調節(jié)抑菌液的pH至6.0 ;
[0036]實施例4:小花棘豆黃酮提取物的抑菌實驗
[0037]分別取實施例4配置1、2、3的小花棘豆黃酮抑菌劑溶液，浸潤直徑為6mm的濾紙片，在涂布有有害微生物菌液的平板上進行抑菌試驗，37°C下培養(yǎng)24h，測定對各種有害菌的抑菌圈直徑，統(tǒng)計最大與最小值；以含有同樣活性成分用量的苯甲酸鈉、山梨酸鉀為陽性對照，同樣統(tǒng)計最大與最小值。
[0038]表1:配置I供試物對有害微生物的抑制效果
[0039]

【權利要求】
1.小花棘豆的黃酮提取物作為抑菌劑的應用。
2.根據(jù)權利要求1的應用，其特征在于小花棘豆的黃酮提取物的制備方法包括下述步驟:1)小花棘豆原料在有機溶劑中通過微波提取、過濾、濃縮后得到小花棘豆總提取物；.2)小花棘豆總提取物過聚酰胺樹脂層析柱進行用10%~100%的乙醇洗脫梯度洗脫，收集.80 %~100 %的乙醇洗脫液濃縮干燥后得到小花棘豆的黃酮提取物。
3.根據(jù)權利要求1的應用，其特征在于抑制的病菌微生物包括金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、變形桿菌。
4.一種具有抑菌效果的藥物組合物，其特征在于包括小花棘豆的黃酮提取物作為抑菌活性成分，和藥學上任意可用的輔料。
5.根據(jù)權利要求4的藥物組合物，其特征在于所述輔料為β-環(huán)糊精，其用量為小花棘豆的黃酮提取物3~5%，β-環(huán)糊精95~97%。
6.根據(jù)權利要求4的藥物組合物，其特征在于劑型為溶液，濃度為0.005g/mL~.0.020g/mL, pH 為 5.0 ~6.0。
【文檔編號】A61P31/04GK104069155SQ201410302341
【公開日】2014年10月1日 申請日期:2014年6月27日 優(yōu)先權日:2014年6月27日
【發(fā)明者】王帥, 馬春暉, 賈琦珍, 張玲, 陳根元 申請人:塔里木大學